專利名稱：大花紅景天提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種大花紅景天提取物及其制備方法。
背景技術(shù)：
紅景天(RhodioLarosea)系景天科(CrassuLaceae)景天屬(RhodioLa)植物的根 及根莖。我國是紅景天的分布中心，全世界90余種紅景天屬植物中有70多種在我國有分 布。而四川、西藏、云南等西南地區(qū)是大花紅景天RhodioLacrenuata(Hook. f. et Thomx.) H. OtAa的主產(chǎn)區(qū)，西藏地區(qū)的產(chǎn)量最大。大花紅景天又名寬瓣紅景天、圓齒紅景天，生于海 拔觀00 5600米的山坡草地、灌叢、石縫中。大花紅景天植物資源豐富，分布于四川、云 南、西藏、青海等廣大西部地區(qū)，而且蘊藏量很大，熊先榮、賀俊生等僅對西藏紅景天資源做 了研究統(tǒng)計，結(jié)果都顯示大花紅景天的蘊藏量最大。關(guān)于大花紅景天中化學(xué)成分的報道較多，如包文芳，吳維春，李葆華.抗疲勞藥 用植物紅景天[M].人民軍醫(yī)出版社，2003 :1 2，報道了大花紅景天主要含有醇及其苷類、 黃酮類、酚及其苷類、生氰苷類、內(nèi)酯類以及揮發(fā)油。專利申請?zhí)?31^415. 9，發(fā)明名稱 大花紅景天有效成份制劑及制備方法，該發(fā)明涉及大花紅景天有效成份的提取分離及制 劑。該發(fā)明公開的大花紅景天有效成份制劑由含小分子化合物的活性成分總黃酮、紅景天 甙或大分子化合物的活性成分多糖30 70%和70 30%藥用輔料組成的醫(yī)學(xué)上可接受 的各類制劑。申請?zhí)?00610021639. 3，發(fā)明名稱藏藥大花紅景天多糖降糖腸溶微丸及制 備方法，藏藥大花紅景天多糖降糖腸溶微丸是由以西藏產(chǎn)大花紅景天為原料，采用水提醇 沉法從中提取多糖部位。經(jīng)酶法脫蛋白、透析、醇沉、洗滌、真空干燥等操作后制得紅景天粗 多糖，再經(jīng)kphadex G-100凝膠樹脂柱層析得到紅景天精制多糖。經(jīng)動物試驗證實這種產(chǎn) 品具有較為明顯的降糖活性。申請?zhí)?3116051. 4，發(fā)明名稱一種紅景天有效成分提取物 的制備方法，該發(fā)明中，對紅景天醇提物采用正丁醇萃取，正丁醇部位再用D-IOl型大孔樹 脂分離純化，最終得到含有紅景天苷5-95 %，洛塞維95-5 %的紅景天提取物，該發(fā)明的說 明書還指出，洛塞維rosavin (β-(E)-肉桂醇基_0_ (6 ‘ -O- α -L-吡喃阿拉伯糖基)-D-吡 喃葡萄糖苷)的藥理活性遠(yuǎn)強于紅景天苷和酪醇。這一觀點也可以從目前市售的紅景天提 取物中看出市售紅景天提取物均要求其中含有的紅景天苷和rosavin均大于1 %，而且目 前歐盟也要求紅景天提取物中必須含有有效劑量的rosavin。本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，并非所 有的紅景天藥材都含有Rosavin，將rosavin進行含量限定，限制了紅景天藥材基源物質(zhì)的 開發(fā)；目前也沒有文獻(xiàn)報道rosavin的含量的高低決定了紅景天藥材或提取物的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了 一種大花紅景天提取物，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提 供了大花紅景天的制備方法。本發(fā)明提供了一種大花紅景天提取物，該提取物中含有紅景天苷的重量百分含量 不得少于10%，含有紅景天多糖的重量百分含量不得低于30%，含有紅景天多酚的重量百
3分含量不低于；34%，rosavin含量為0%。進一步地，含有紅景天苷的重量百分含量為11% 13% ；含有紅景天多糖的重量 百分含量為30 35% ；含有紅景天多酚的重量百分含量35 40%，rosavin含量為0%。更近一步地，含有紅景天苷的重量百分含量為11. 9% 12.2% ；含有紅景天多 糖的重量百分含量為33. 5 33. 9% ；含有紅景天多酚的重量百分含量37. 1 37. 6%， rosavin 含量為 0 %。本發(fā)明還提供了一種制備上述的大花紅景天提取物的方法，它包括如下步驟a、取大花紅景天，加30-95%乙醇回流提取，得大花紅景天醇提取物；b、選用HPD_、D101, HPD722 , D160, DM130或IHPD826大孔吸附樹脂，取a步驟制得的 大花紅景天醇提取物上樣至樹脂達(dá)飽和吸附，停止上樣，以蒸餾水0. 5-5BV、10-95%乙醇 1-10BV依次洗脫，洗脫速率為2ml/min，收集乙醇洗脫部位，回收乙醇，干燥，即得本發(fā)明大 花紅景天提取物。其中，a步驟的具體操作為取大花紅景天，加入10倍量70%乙醇，回流提取2次， 每次回流提取1小時。其中，b步驟中，所述的大孔吸附樹脂為HPD826，蒸餾水用量為0. 5BV,乙醇濃度為 30-90%、用量為 5-10BV。進一步地，b步驟中，所述的乙醇濃度為30%，用量為6BV。其中，b步驟中，上樣具體操作如下上樣液生藥濃度為0. 05 0. 25g/ml，吸附柱 的徑高比為1.5 7. 1 13，上樣量以紅景天苷不泄漏為準(zhǔn)，吸附速率為1 6ml/min。進一步地，所述的上樣液生藥濃度為0. 10 0. 15g/ml,吸附柱的徑高比為 1.5 7. 1 13，上樣量為每g樹脂0. 25 1. Og生藥，吸附速率為1 3ml/min。進一步優(yōu)選地，所述的上樣液生藥濃度為0.10g/ml，吸附柱的徑高比為1.5 10， 上樣量為每g樹脂1. Og生藥，吸附速率為2ml/min。本發(fā)明提取物的制備方法，與03116051. 4公開的一種紅景天有效成分提取物的 制備方法相比，省去了有機試劑進行萃取的過程，更適合工業(yè)化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染；本發(fā) 明大花紅景天提取物雖然不含有指標(biāo)成分rosavin，但仍然能夠起到良好藥效作用，并且顯 著優(yōu)于含有rosavin的市售紅景天提取物，為臨床提供了一種新的用藥選擇。本發(fā)明說明書中實施例的內(nèi)容，不應(yīng)理解為是對本發(fā)明保護范圍的限制，凡基于 上述技術(shù)思想，利用本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段所做的修改、替換、變更均屬于本發(fā)明 的范圍。


圖1各型樹脂吸附后藥液濃度曲線圖2泄漏曲線圖3損失曲線圖4洗脫率與收集份數(shù)曲線5不同提取物對菜籽油抗氧化作用圖6不同提取物對豬油抗氧化作用
具體實施例方式實施例1本發(fā)明大花紅景天提取物的制備方法取大花紅景天粗粉適量，以70%乙醇為提取溶媒，10倍量，回流提取2次，每次 回流提取1小時。提取液以HPD8ai大孔吸附樹脂純化紅景天苷，上樣液生藥濃度為0. Ig/ ml (紅景天苷濃度約1. 28mg/ml)，徑高比為1. 5/10，上樣量為每g樹脂1. Og生藥，吸附速率 為2ml/min，吸附平衡后，以蒸餾水0. 5BV、30%乙醇6BV依次洗脫，洗脫速率為2ml/min，回 收乙醇，干燥，即得本發(fā)明大花紅景天提取物。實施例2本發(fā)明大花紅景天提取物有效成分含量測定大花紅景天提取物中紅景天苷是其主要功效成分，此外，紅景天多糖、多酚含量較 高，而且有確切的藥理作用，故選擇紅景天苷、紅景天多糖、多酚作為含量測定的指標(biāo)成分， 以便更好的控制大花紅景天提取物的質(zhì)量。以下測定供試品均為實施例1制備得到。紅景天苷含量測定①色譜條件色譜柱HypersiL ODS (4. 6mmX 200mm, 5 μ m)；流動相乙腈-水 (8 92)；流速1.0ml/min;檢測波長275nm;柱溫30°C。②供試品溶液的制備取本品粉末約50mg，精密稱定，置IOml容量瓶中，加70% 乙醇溶解并定容，搖勻，即得。③標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取對照品貯備液溶液(0. 560mg/ml)2. 5μ 1、5μ 1、7. 5μ 1、10μ 1、 12. 5μ1注入液相色譜儀，按前述色譜條件分別測定其峰面積。以對照品含量⑴為 橫坐標(biāo)，峰面積積分值(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算，得直線回歸方程Y = 352528Χ-7079. 6，相關(guān)系數(shù)r = 0. 9999。以上結(jié)果表明紅景天苷含量在1. 40 μ g 7. 00 μ g 范圍內(nèi)與峰面積積分值有良好的線性關(guān)系。測定數(shù)據(jù)見表1。表1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
權(quán)利要求
1.一種大花紅景天提取物，其特征在于該提取物中含有紅景天苷的重量百分含量不 得少于10%，含有紅景天多糖的重量百分含量不得低于30%，含有紅景天多酚的重量百分 含量不低于，rosavin含量為0%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大花紅景天提取物，其特征在于含有紅景天苷的重量百分 含量為11% 13% ；含有紅景天多糖的重量百分含量為30 35% ；含有紅景天多酚的重 量百分含量35 40%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大花紅景天提取物，其特征在于含有紅景天苷的重量百分 含量為11. 9% 12. 2% ；含有紅景天多糖的重量百分含量為33. 5 33. 9% ；含有紅景天 多酚的重量百分含量37. 1 37.6%。
4.一種制備權(quán)利要求1 3任意一項所述的大花紅景天提取物的方法，其特征在于 它包括如下步驟a、取大花紅景天，加30-95%乙醇回流提取，得大花紅景天醇提取物；b、選用HPD_、D101,HPD722, D160, DM130或HPD826大孔吸附樹脂，取a步驟制得的大花紅景 天醇提取物上樣至樹脂達(dá)飽和吸附，停止上樣，以蒸餾水0. 5-5BV、10-95%乙醇1-10BV依 次洗脫，洗脫速率為2ml/min，收集乙醇洗脫部位，回收乙醇，干燥，即得本發(fā)明大花紅景天 提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于a步驟的具體操作為取大花紅景天，加 入10倍量70%乙醇，回流提取2次，每次回流提取1小時。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于b步驟中，所述的大孔吸附樹脂為HPD826， 蒸餾水用量為0. 5BV,乙醇濃度為30-90%、用量為5-10BV。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于b步驟中，所述的乙醇濃度為30%，用量 為 6BV。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于b步驟中，上樣具體操作如下上樣液生 藥濃度為0.05 0. 25g/ml，吸附柱的徑高比為1.5 7. 1 13，上樣量以紅景天苷不泄漏 為準(zhǔn)，吸附速率為1 6ml/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述的上樣液生藥濃度為0.10 0. 15g/ ml，吸附柱的徑高比為1.5 7. 1 13，上樣量為每g樹脂0.25 l.Og生藥，吸附速率為 1 3ml/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于所述的上樣液生藥濃度為0.10g/ml，吸 附柱的徑高比為1.5 10，上樣量為每g樹脂l.Og生藥，吸附速率為aiil/min。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種大花紅景天提取物，其特征在于該提取物中含有紅景天苷的重量百分含量不得少于10％，含有紅景天多糖的重量百分含量不得低于30％，含有紅景天多酚的重量百分含量不低于34.0％；rosavin含量為0％。本發(fā)明還提供了制備該提取物的方法。本發(fā)明大花紅景天的藥效明確，質(zhì)量穩(wěn)定，可控性強。
文檔編號A61K36/41GK102133256SQ20111006402
公開日2011年7月27日 申請日期2011年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月9日
發(fā)明者劉友平, 向楚兵, 施學(xué)驕, 陳鴻平, 黎代余 申請人:成都中醫(yī)藥大學(xué)