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新疆一枝蒿制劑及用于治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法

文檔序號:1206713閱讀:409來源:國知局
專利名稱:新疆一枝蒿制劑及用于治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及中草藥制劑技術(shù)領(lǐng)域。具體的說,本發(fā)明涉及一種用于治療糖尿病藥物中應(yīng)用的新疆一枝蒿制劑及制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
近年來,由于生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變、日趨緊張的生活節(jié)奏以及少動多坐的生活方式等諸多因素,全球糖尿病發(fā)病率增長迅速,糖尿病已經(jīng)成為繼腫瘤、心血管病變之后第三大嚴重威脅人類健康的慢性疾病。對于糖尿病的治療,西醫(yī)多采用飲食、口服降糖藥物及胰島素替代等方法,它們的優(yōu)點是降糖作用肯定,起效快,但不足之處是副作用多。天然藥物具有來源豐富,毒副作用小、易于接受和長期服用的優(yōu)點,因此,近年來國內(nèi)外有關(guān)植物中天然降糖物質(zhì)的研究和開發(fā)十分活躍。糖尿病(DM,Diabetes Mellitus)是一種于遺傳因素和多種環(huán)境因素相關(guān)聯(lián)的以慢性高血糖為特征的代謝紊亂綜合癥,目前雖然有一些不同作用靶點的藥物用于治療糖尿病,但有時并不能達到預(yù)期治療效果。因此,能夠開發(fā)高效的治療糖尿病的藥物是治療糖尿病的核心問題。近年來研究發(fā)現(xiàn),中藥的降血糖作用溫和持久,副作用小,且作用機制具有多效應(yīng)、多位點及多功能等特點。所以,開發(fā)高效低毒的抗糖尿病中藥將是一個具有發(fā)展前景的研究領(lǐng)域,而新疆一枝蒿的藥效作用近年來成為研究的熱點,研究開發(fā)新疆一枝蒿在治療糖尿病藥物的相關(guān)產(chǎn)品具有重要的現(xiàn)實意義。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中未見報道有關(guān)新疆一枝蒿在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的技術(shù)現(xiàn)狀,本發(fā)明旨在提供新疆一枝蒿制劑及用于治療糖尿病藥物中應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案通過以新疆一枝蒿為原料,將新疆一枝蒿全草粉碎、置于乙醚溶液中浸泡,過濾旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醚溶液后用乙醇超聲提取、提取液用乙醇沉淀、離心,經(jīng)乙酸乙酯萃取、聚酰胺柱層析、最后濃縮制成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比配伍溶于水中制成液體制劑。該制劑用于治療糖尿病藥物中應(yīng)用,使用劑量小,療效高,經(jīng)檢測具有良好的降血糖活性作用。具體的,本發(fā)明提供了一種在治療糖尿病藥物中應(yīng)用的新疆一枝蒿制劑,通過將新疆一枝蒿全草粉碎,稱重加3倍體積的乙醚放置他后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取,每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95 %乙醇沉淀過夜,離心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,過濾得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20 %、40 %、60 %、80 %不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60 %和80 %的乙醇洗脫物,減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。進一步,本發(fā)明提供了一種在治療糖尿病藥物中應(yīng)用的一枝蒿制劑的制備方法,具體包括如下步驟(1)、首先將新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,稱重加3倍體積的乙醚放置8小時后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取,每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、將新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀過夜,過濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,得乙酸乙酯部位,將乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20%、 40%,60%,80%不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60%和80%的乙醇洗脫物減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。新疆一枝蒿(Artemisia rupestris L.),別名巖蒿,菊科蒿屬,是新疆哈薩克族和維吾爾族民間傳統(tǒng)用藥,該藥材記載于我國清代趙學(xué)敏的《本草綱目拾遺》,已收《藥品標準》維吾爾藥分冊和《維吾爾藥志(上冊)》。新疆一枝蒿為多年生草本,高20-50cm,全株具特異芳香。莖呈圓柱形,直徑Imm 4mm,有紫莖和淡黃綠莖.表面略有縱棱,質(zhì)脆, 斷面淡黃、中空,氣香特異,味淡。葉綠色,枯時淡黃色,裂片呈狹披針形,長2mm 8mm,寬 0. 5mm 1mm,兩面具有疏短柔毛,無柄或具短柄,基部有假托葉。頭狀花序半球形,黃紫色, 徑為5mm 8mm,梗長3mm 5mm,總苞3 4列,外層草質(zhì)條形。多于5月下旬至6月上旬萌發(fā),生長較緩慢,7月上,中旬現(xiàn)蕾,8月開始開花,一直可開放到9月上,中旬,首批開放的花則在此時進入果期,果期可延至10月上旬,很快枯萎,進入休眠期。國內(nèi)臨床資料表明, 作為民族藥,它具有清熱解毒、健胃消食、鎮(zhèn)靜止吐、抗過敏等功效,用于治療毒蛇咬傷、蕁麻疹、消化不良、感冒、肝炎、過敏性疾病等。本發(fā)明選用的黃芪浸膏可通過本領(lǐng)域熟知常見的技術(shù)手段所獲得。本發(fā)明通過用四氧嘧啶誘導(dǎo)建立小鼠糖尿病模型,研究了制備獲得的新疆一枝蒿制劑的降血糖作用,最佳的使用劑量為67. 5mg/kg。通過實施本發(fā)明具體的發(fā)明內(nèi)容,可以達到以下效果1.本發(fā)明通過對制備獲得的新疆一枝蒿制劑進行提取,分析給藥后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠體重、血糖、SOD以及MDA變化,并對其組織形態(tài)進行觀察,來探究新疆一枝蒿提取液對糖尿病KM小鼠的影響。結(jié)果表明本發(fā)明提供的新疆一枝蒿制劑具有良好的降血糖活性,在制備治療糖尿病藥物中具有廣闊的應(yīng)用前景。2.本發(fā)明所需試劑均為分析純,制備方法為超聲波提取技術(shù),操作簡便快捷、無需加熱、提出率高、速度快、提取物的結(jié)構(gòu)未被破壞、效果好,顯示出明顯的優(yōu)勢,可直接進行放大生產(chǎn)。


圖1所示為新疆一枝蒿制劑的制備工藝流程圖。圖2所示為新疆一枝蒿制劑對實驗性高血糖小鼠肝臟的影響圖,圖中a代表糖尿病小鼠肝臟(HE染色,X 10)、b代表新疆一枝蒿制劑治療肝臟(HE染色,X 10)、c代表藥物治療小鼠肝臟(HE染色,X 10)、d代表正常小鼠肝臟(HE染色,X 10)。圖3所示為新疆一枝蒿制劑對實驗性高血糖小鼠腎臟的影響圖,圖中a代表糖尿病小鼠腎臟(HE染色,X 10)、b代表新疆一枝蒿制劑治療腎臟(HE染色,X 10)、c代表藥物治療小鼠腎臟(HE染色,X 10)、d代表正常小鼠腎臟(HE染色,X 10)。
具體實施例方式下面,舉實施例說明本發(fā)明,但是,本發(fā)明并不限于下述的實施例。本發(fā)明中涉及到的主要原輔材料和設(shè)備有主要原料及選用試劑新疆一枝蒿,采自天山支脈一天格爾山北路,采回后置陰涼處自然干燥、粉碎裝袋后備用。黃芪浸膏可通過本領(lǐng)域熟知常見的技術(shù)手段所獲得。昆明種小白鼠,雄性,購自新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心(動物許可證號 SYXK (新)2003-0001)。四氧嘧啶,購自美國Sigma公司;S0D,南京建成生物工程研究所產(chǎn)品;MDA,南京建成生物工程研究所產(chǎn)品石油醚,分析純試劑,天津市富宇精細化工有限公司;無水乙醇, 分析純試劑,天津市富宇精細化工有限公司;乙酸乙酯,分析純試劑,天津市富宇精細化工有限公司。鹽酸二甲基胍,北京中慧藥業(yè)有限公司。主要儀器超聲波細胞粉碎機隔音箱,寧波新芝生物科技股份有限公司JFSD-70型實驗室萬能粉碎機,上海嘉定糧油檢測儀器有限公司;RE-5299型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;循環(huán)水式真空泵,鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;AL104-IC型電子天平,梅特勒-托利多儀器有限公司;KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司;樂康全血糖測定儀,羅氏診斷公司產(chǎn)品(批號2005-06 22381501)。本發(fā)明中選用的所有試劑和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的,但不限制本發(fā)明的實施,其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實施方式的實施。實施例一新疆一枝蒿制劑的制備參見附圖1,具體描述新疆一枝蒿制劑的制備如下(1)、首先將新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,稱重加3倍體積的乙醚放置8小時后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取,每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、將新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀過夜,過濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,得乙酸乙酯部位,將乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20%、 40%,60%,80%不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60%和80%的乙醇洗脫物減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。通過將上述技術(shù)手段獲得新疆一枝蒿制劑,分析給藥后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠體重、血糖、SOD以及MDA變化,并對其組織形態(tài)進行觀察,來探究新疆一枝蒿提取液對糖尿病KM小鼠的影響。結(jié)果表明通過用四氧嘧啶誘導(dǎo)建立小鼠糖尿病模型,本發(fā)明提供的新疆一枝蒿制劑具有良好的降血糖活性功效,在制備治療糖尿病藥物中具有廣闊的應(yīng)用前景。實施例二 新疆一枝蒿制劑的制備參見附圖1,按照實施例一所述的技術(shù)方案,通過將新疆一枝蒿全草粉碎,稱重加 3倍體積的乙醚放置他后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取,每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95%乙醇沉淀過夜,離心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,過濾得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20^^40^^60%, 80%不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60%和80%的乙醇洗脫物,減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比5 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。通過分析給藥后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠體重、血糖、SOD以及MDA變化,并對其組織形態(tài)進行觀察,來探究新疆一枝蒿提取液對糖尿病KM小鼠的影響。結(jié)果表明本發(fā)明提供的新疆一枝蒿制劑制備中,采用上述技術(shù)工藝獲得的新疆一枝蒿制劑,具有顯著的降血糖活性,使用劑量為67. 5mg/kg。實施例三實驗性四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立取體重18_22g的昆明種雄性小鼠120只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,隨機選取10只為正常對照組(Nomal control group,NC),其余腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg(四氧嘧啶用生理鹽水配置),注射前禁食不禁水12h,造成實驗性高血糖模型,造模型后48h內(nèi)給與10% 葡萄糖水,防止動物發(fā)生低血糖性死亡,72h后,小鼠尾端取血測血糖(取血前小鼠禁食 12h)。觀察動物的飲水、飼料攝入情況,是否出現(xiàn)糖尿病典型“三多”癥狀。最后選取血糖值> 11. lmmol/L的小鼠為實驗性糖尿病動物模型。四氧嘧啶可對胰島β細胞造成損傷,從而影響了胰島素的分泌,使動物血糖升高。昆明種小鼠注射四氧嘧啶造模,3d后各組出現(xiàn)多飲、多食、多尿、體重減輕的“三多一少” 癥狀,并逐漸加重。給藥后,采用新疆一枝蒿制劑高、中、低劑量組昆明種小鼠的癥狀減輕, 且隨實驗進程癥狀得到緩解;而模型對照組的癥狀隨實驗進程加重。實施例四新疆一枝蒿制劑對實驗性高血糖小鼠的降血糖作用將造模成功的糖尿病模型小鼠50只,正常小鼠10只進行分組,共分為6組,包括正常對照組、糖尿病模型對照組、藥物治療組和3個實驗組糖尿病模型對照組(Diabetic control group, DC),每天灌胃0. 9%生理鹽水;新疆一枝蒿制劑低劑量組(Low dose,L),每天灌胃33. 75mg/kg ;新疆一枝蒿制劑中劑量組(Middle dose, Μ),每天灌胃67. 5mg/kg ;新疆一枝蒿制劑高劑量組(High dose, H),每天灌胃135mg/kg ;正常對照組(Nomal control group, NC),每天灌胃0. 9%生理鹽水;藥物治療組(Curegroup, CG),每天灌胃 1. 0g/kgo連續(xù)給藥14d,每周測一次體重、尾靜脈取血測一次空腹血糖濃度,見表1、表2。表1 實驗期間小鼠體重(g)變化情況(元士 S)
權(quán)利要求
1.一種在治療糖尿病藥物中應(yīng)用的新疆一枝蒿制劑,其特征在于,通過將新疆一枝蒿全草粉碎,稱重加3倍體積的乙醚放置他后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取, 每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95%乙醇沉淀過夜,離心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,過濾得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用 20 %、40 %、60 %、80 %不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60 %和80 %的乙醇洗脫物,減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。
2.一種如權(quán)利要求1所述的新疆一枝蒿制劑的制備方法,其特征在于,具體包括如下步驟(1)、首先將新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,稱重加3倍體積的乙醚放置8小時后過濾,沉淀物用80%乙醇在35°C下超聲提取,每次30-40min,過濾得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、將新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀過夜,過濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取溫度為常溫,得乙酸乙酯部位,將乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20%、40%、 60 %、80 %不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60 %和80 %的乙醇洗脫物減壓濃縮成浸膏,濃縮后的浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草藥液體藥劑通常做法,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。
3.如權(quán)利要求1所述的新疆一枝蒿制劑在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用,其特征在于,所述的使用劑量為67. 5mg/kg。
全文摘要
本發(fā)明公開一種用于治療糖尿病藥物中應(yīng)用的新疆一枝蒿制劑及制備。通過將新疆一枝蒿全草粉碎,稱重加3倍體積的乙醚放置8h后過濾,沉淀物用80%乙醇在35℃下超聲提取,每次30-40min,過濾得到乙醇提取液,用95%乙醇沉淀、離心取上清液,乙酸乙酯萃取,過濾得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱層析依次采用20%、40%、60%、80%不同濃度的乙醇溶液洗脫,收集60%和80%的乙醇洗脫物,減壓濃縮成浸膏與黃芪浸膏按重量比(5-10)∶1比例配伍,配置一定量的純水制備獲得成品制劑。制備獲得新疆一枝蒿制劑具有降血糖活性,使用劑量為67.5mg/kg,在治療糖尿病藥物中具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。
文檔編號A61K36/28GK102166243SQ20111007313
公開日2011年8月31日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者劉小寧, 徐鑫, 方美珠, 晁群芳, 樊永紅, 王詠星 申請人:新疆大學(xué)
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