專利名稱：Hm-3多肽凍干粉制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種HM-3多肽凍干粉制劑及其制備方法，特別涉及HM-3多肽類。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)腫瘤治療化學(xué)藥物由于其無選擇的細(xì)胞毒性，對(duì)患者有較大的毒副作用，容易產(chǎn)生耐藥性。目前抑制腫瘤血管生成來抑制腫瘤營(yíng)養(yǎng)和轉(zhuǎn)移的方法成為新的腫瘤治療途徑， 其最大的潛力在于克服了耐藥性，毒副作用低。HM-3是一種整合素阻斷劑，該整合素阻斷劑是具有整合素、肝素親和性和結(jié)合能力的多肽，能夠有效抑制內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、抑制腫瘤新生血管生成，對(duì)治療實(shí)體腫瘤包括胃癌、肝癌和肺癌等具有良好的效果。HM-3多肽的分子量為150(Γ2500道爾頓，與雙縮脲反應(yīng)溶液顯紫紅色，性狀為白色或類白色的塊狀物或無定形粉末，易溶于水。但ΗΜ-3原料藥在4°C存放一年，其含量明顯下降，有關(guān)物質(zhì)增多，抑制 HUVC細(xì)胞遷移的活性顯著下降。根據(jù)文獻(xiàn)表明在真空冷凍干燥方法中，為了提高干燥的效率，通常都希望提高一次干燥期間制品的溫度。然而，如果一次干燥期間制品溫度過高，制品會(huì)出現(xiàn)水分過高、雜質(zhì)增加、穩(wěn)定性差等不期望的問題，所以凍干曲線的確定極其重要。 另外，加入合適的輔料有助于凍干成型，起到凍干保護(hù)劑的作用，提高藥物的穩(wěn)定性。因此， 選擇合適的輔料，改進(jìn)凍干工藝，開發(fā)HM-3的制劑具有必須性和良好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種HM-3多肽凍干粉制劑的生產(chǎn)工藝，所生成的多肽HM-3凍干粉制劑純度高，本工藝使多肽HM-3具有穩(wěn)定性好、藥理作用強(qiáng)且易保存等優(yōu)點(diǎn)。HM-3多肽凍干粉制劑，其組成包括HM-3多肽，輔料和pH調(diào)節(jié)劑，按重量份計(jì)所述的HM-3多肽其制劑配方為HM-3多肽5 100份，輔料20 90份，pH調(diào)節(jié)劑廣10份，其中 HM-3多肽凍干粉制劑的pH為5 7 ；
HM-3 多肽其結(jié)構(gòu)式為 H-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-OH (IVRRADRAAVPGGGGRGD)；其分子量為 1500 2500 道爾頓，
上述的多肽HM-3凍干粉制劑，所述的輔料可為右旋糖酐、甘露醇等，pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、磷酸氫二鈉和醋酸鈉等。上述的多肽HM-3凍干粉制劑的生產(chǎn)工藝包括如下步驟以1000瓶為例， ①配液稱取上述配方的HM-3原料，加入10(Γ4000份注射用水配成溶液，用0. 22Mm膜無菌過濾待用。稱取上述配方的輔料和PH調(diào)節(jié)劑加入10(Γ4000份注射用水配成溶液，加入 0. 01°/Γ5%的針用活性炭，加熱過濾，脫炭，0. 22ΜΠ1膜過濾制成無熱原無菌輔料水溶液。冷卻后混合多肽溶液和輔料溶液，此為ΗΜ-3多肽液體，其為多肽類5 100重量份數(shù)，輔料2(Γ90 重量份數(shù)，PH調(diào)節(jié)劑廣10重量份數(shù)；②灌裝按0. 5-5ml/支將HM-3多肽液體裝入清潔無菌的西林瓶中，用膠塞半扣塞，待凍干；③凍干預(yù)凍設(shè)定板層溫度為-60°C _20°C，樣品在一個(gè)小時(shí)內(nèi)溫度下降至_30°C -10°C，保溫2 5個(gè)小時(shí)。一次干燥在真空度0 30Pa下設(shè)定板層溫度為-20°C _5°C，保溫10 20個(gè)小時(shí)。二次干燥設(shè)定板層溫度10 30°C，保溫5個(gè)小時(shí)以上，凍干至符合凍干的終點(diǎn)判斷。(關(guān)掉蝶閥后凍干箱內(nèi)真空度沒有明顯的升高)④壓塞、壓蓋；⑤檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后即包裝出廠。其包裝規(guī)格為9-90mg/支。將本品按照^rig/kg體重用l-5ml注射用水溶解中，肌肉注射，一日兩次；或?qū)⒈酒钒凑?3mg/ kg體重溶于250-500ml、0. 9%氯化鈉注射液中，靜脈緩慢滴注，一日一次。14天-21天為一個(gè)療程。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
1. 本發(fā)明中，凍干曲線的選擇主要是根據(jù)多肽的常規(guī)共熔點(diǎn)而設(shè)定，一次干燥溫度為-20°C 0°C。由于考慮到HM-3對(duì)高溫不穩(wěn)定，二次干燥的溫度設(shè)定的稍微偏低，為10 30°C。此凍干曲線的凍干效果好，水分低，制劑成型度好。加入輔料后，對(duì)HM-3有很好的保護(hù)作用，提高了穩(wěn)定性和活性，保證了藥效。HM-3的PH偏酸性，對(duì)人體刺激性大，加入pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)為5 7，使人體能夠耐受。2、發(fā)明人對(duì)本發(fā)明中采用的輔料做了大量篩選，發(fā)現(xiàn)右旋糖酐，甘露醇作為輔料較好。右旋糖酐和甘露醇不會(huì)破壞多肽的結(jié)構(gòu)，不會(huì)與多肽發(fā)生藥物相互作用，其結(jié)果是不會(huì)降低多肽的含量、長(zhǎng)期保存不會(huì)影響多肽的活性。右旋糖酐和甘露醇的凍干制劑成形好， 不塌陷，不皺縮，復(fù)溶迅速，澄明度好。選用其他輔料，例如白蛋白、乳糖、甘氨酸等，制劑凍干后成形差，有皺縮塌陷的現(xiàn)象，較難溶解；并且容易染菌。在穩(wěn)定性檢測(cè)方面，我們用原料以及制劑在4°C下不同放置時(shí)間(3個(gè)月和12個(gè)月)的樣品進(jìn)行了高校液相分析，發(fā)現(xiàn)制劑狀態(tài)的多肽在3個(gè)月及12個(gè)月以后仍然保持較高含量，而原料藥含量下降了 9-15%，說明本發(fā)明的制劑配方合理。在活性檢測(cè)方面，我們用原料以及制劑在4°C下不同放置時(shí)間(3個(gè)月和12個(gè)月)的樣品進(jìn)行了內(nèi)皮細(xì)胞遷移試驗(yàn)和體內(nèi)抑制裸鼠移植人肝癌模型試驗(yàn)，來檢測(cè)多肽抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移的能力和抗腫瘤效果，發(fā)現(xiàn)以制劑形式存放的多肽HM-3抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力在12月時(shí)活性幾乎不變，而原料藥活性下降較多；3個(gè)月放置的樣品體內(nèi)抑制肝癌的效果原料藥從78%下降到50. 9%，而制劑右旋糖酐組仍然保持70%以上，甘露醇的雖然有所下降，但仍然保持68. 62%。以上結(jié)果見表1和表2。3、本發(fā)明采用凍干的工藝預(yù)凍設(shè)定板層溫度為-60°C -20°C，樣品在一個(gè)小時(shí)內(nèi)溫度下降至_30°C -10°C，保溫2 5個(gè)小時(shí)；一次干燥在真空度0 301 下設(shè)定板層溫度為_20°C _5°C，保溫10 20個(gè)小時(shí)；二次干燥設(shè)定板層溫度10 30°C，保溫 5個(gè)小時(shí)以上，凍干至符合凍干的終點(diǎn)判斷；該工藝經(jīng)歷大量實(shí)驗(yàn)摸索而制定，特別是一次干燥中，板層溫度不得高于_5°C，否則不易凍干，而在二次干燥中低于10°C，耗時(shí)且產(chǎn)品表面不平整或出現(xiàn)皺縮。4、本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了將HM-3多肽制成凍干粉制劑，相比于HM-3原料藥而言，其藥理作用保持不變，療效確切，能夠與整合素結(jié)合，抑制血管生成，對(duì)治療實(shí)體腫瘤包括肝癌、胃癌和肺癌等具有良好的效果。5、HM-3多肽凍干粉制劑純度高，副作用小。HM-3多肽凍干粉制劑是無菌凍干粉針劑，小分子多肽物質(zhì)不易發(fā)生聚合，可以長(zhǎng)期保存，無明顯不良反應(yīng)，而療效不變。6、本產(chǎn)品生產(chǎn)工藝比較簡(jiǎn)單，容易操作。 表1為長(zhǎng)期試驗(yàn)3個(gè)月穩(wěn)定性(4°C)
權(quán)利要求
1.一種HM-3多肽凍干粉制劑，其特征在于其配方為，按重量份數(shù)為HM-3多肽5 100 份，輔料20 90份，pH調(diào)節(jié)劑廣10份，其中所述的HM-3多肽凍干粉制劑的pH為5 7。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HM-3多肽凍干粉制劑，其特征是所述的輔料為右旋糖酐、 甘露醇；PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、磷酸氫二鈉或醋酸鈉。
3.—種HM-3多肽凍干粉制劑的制備方法，其特征是按如下步驟實(shí)現(xiàn)以1000瓶為例，HM-3多肽凍干粉制劑配方為，按重量份數(shù)為HM-3多肽5 100份，輔料 20^90份，pH調(diào)節(jié)劑廣10份，其中HM-3多肽凍干粉制劑的pH為5 7 ；首先配液，稱取上述配方HM-3多肽原料，加入10(Γ4000份注射用水配成溶液，用 0. 22ΜΠ1膜無菌過濾待用；稱取上述配方的輔料和PH調(diào)節(jié)劑加入100 4000份注射用水配成溶液，加入0. 01% 5% 的針用活性炭，加熱過濾，脫炭，0. 22ΜΠ1膜過濾制成無熱原無菌輔料水溶液；冷卻后混合多肽溶液和輔料溶液，按0. 5-5ml/支將HM-3多肽液體裝入清潔無菌的西林瓶中，用膠塞半扣塞，凍干；其凍干過程是預(yù)凍設(shè)定板層溫度為-60°C -20°C，樣品在一個(gè)小時(shí)內(nèi)溫度下降至_30°C -10°C，保溫2 5個(gè)小時(shí)；一次干燥在真空度0 301 下設(shè)定板層溫度為_20°C _5°C，保溫10 20個(gè)小時(shí)；二次干燥設(shè)定板層溫度10 30°C， 保溫5個(gè)小時(shí)以上，凍干至符合凍干的終點(diǎn)判斷；此即為HM-3多肽凍干粉制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種HM-3多肽凍干粉制劑及其制備方法，特別涉及HM-3多肽類。其生產(chǎn)工藝包括，定量HM-3多肽及輔料配液，經(jīng)濾紙除炭和無菌過濾后按0.5-5ml/支。裝入清潔無菌的西林瓶中，送入凍干機(jī)凍干20-30小時(shí)取出，經(jīng)壓蓋并進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)合格后即成HM-3多肽凍干粉制劑。本方法生產(chǎn)的產(chǎn)品有很高的活性和純度及良好的醫(yī)用效果，又便于運(yùn)輸和儲(chǔ)藏。
文檔編號(hào)A61K9/19GK102178656SQ201110122070
公開日2011年9月14日 申請(qǐng)日期2011年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月12日
發(fā)明者張弛, 徐寒梅 申請(qǐng)人:內(nèi)蒙古奇特生物高科技(集團(tuán))有限公司, 徐寒梅