專利名稱：一種判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法。
背景技術(shù)：
各種關(guān)于大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的圖譜，如George paxinos的《大鼠腦立體定位圖譜》對(duì)于脊髓部分的描述比較粗略，也沒(méi)有對(duì)于前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元詳細(xì)的劃分。判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有較好的相關(guān)方法
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了一種判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的研究較粗略的問(wèn)題。本發(fā)明的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，其特征在于，具體步驟為步驟I)備材準(zhǔn)備若干只SD大鼠；步驟2)灌注、固定和取材將SD大鼠，腹腔注射麻醉后左心室穿刺、灌注、固定；取出保留有脊神經(jīng)根的脊髓，固定12小時(shí)后，取出脊髓分段切開(kāi)，放入20%的蔗糖中過(guò)夜；步驟3)切片、染色、圖象分析用濾紙吸掉脊髓上的蔗糖，包埋后用冰凍切片機(jī)進(jìn)行冠狀位切片，厚度為40 μ m，取其中幾只SD大鼠的頸段脊髓連續(xù)切片，余下的SD大鼠的頸段脊髓每隔10張切片取2張，分兩組貼片；晾干后兩組切片分別用焦油紫染色法和Pal-Weigert染色法染色；神經(jīng)元的Nissl體呈紫紅色或紫色著色，在顯微鏡下觀察頸段脊髓前角的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的分布，用形態(tài)學(xué)圖形分析系統(tǒng)進(jìn)行攝像，然后根據(jù)細(xì)胞的大小、形態(tài)和分布特征來(lái)劃分前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的核團(tuán)分布來(lái)進(jìn)行讀片。優(yōu)選的，所述SD大鼠體重為230_250g。有益效果經(jīng)本發(fā)明的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，細(xì)化了 SD大鼠脊髓中各神經(jīng)核團(tuán)出現(xiàn)和終止的節(jié)段到1/4節(jié)段，顯示在相同的節(jié)段出現(xiàn)不同的神經(jīng)核團(tuán)是可能的，對(duì)研究不同的神經(jīng)和脊髓灰質(zhì)中神經(jīng)核團(tuán)的聯(lián)系的定位也提供比較明確的參考。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I本發(fā)明的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，具體步驟如下步驟I)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年SD大鼠12只，體重230_250g，清潔級(jí)，由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心供應(yīng)。步驟2)灌注、固定和取材取230 土 20g成年SD大鼠12只(雄性8只，雌性4只)，腹腔注射麻醉后左心室穿刺、灌注、固定。取出保留有脊神經(jīng)根的脊髓，后固定12小時(shí)后，取出脊髓分段切開(kāi)，放入20%的蔗糖中過(guò)夜。步驟3)切片、染色、圖象分析用濾紙吸掉脊髓上的蔗糖，包埋，LEICA冰凍切片機(jī)冠狀位切片，切片厚度40 μ m，取其中2只SD大鼠的頸段脊髓連續(xù)切片，余10只SD大鼠的頸段脊髓每隔10張切片取2張，分兩組貼片，晾干后兩組切片分別用焦油紫染色法和Pal-Weigert染色法染色。神經(jīng)元的Nissl體呈紫紅色或紫色著色。在01ympusCX31顯微鏡下觀察頸段脊髓前角的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的分布，用由江蘇省捷達(dá)科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)的捷達(dá)801形態(tài)學(xué)圖形分析系統(tǒng)進(jìn)行攝像、觀察后根據(jù)細(xì)胞的大小、形態(tài)和分布特征來(lái)劃分前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的核團(tuán)分布來(lái)進(jìn)行讀片。結(jié)果顯示在脊髓的頸段C1-C4起始處前角的神經(jīng)元可以分為兩群，內(nèi)側(cè)群和外側(cè)群，分別為后內(nèi)側(cè)核和前外側(cè)核，在前角的內(nèi)側(cè)，靠近基地部區(qū)域有一神經(jīng)元組成的核團(tuán)稱之為連合核。在連合核的中間和背側(cè)的區(qū)域有一較大的核團(tuán)，稱之為中間背側(cè)核。連合核起于Cl在3/4C2處達(dá)到最大，又慢慢變小終于1/2C6起始處。中間背側(cè)核起始于Cl在3/4C2處達(dá)到最大，又慢慢變小終于C5起始處。大鼠脊髓頸段前角在C4起始處漸漸變膨 大。前角神經(jīng)元分為三組前核、后內(nèi)側(cè)核、前外側(cè)核。在C5節(jié)段大鼠前角的膨大更加突出并且向腹外側(cè)伸出，神經(jīng)元數(shù)量增多，出現(xiàn)了前內(nèi)側(cè)核。在1/2C5 (前角處可見(jiàn)后外側(cè)核，前角膨大明顯神經(jīng)元數(shù)量進(jìn)一步增加。在1/2C6出現(xiàn)了后外側(cè)后核。大鼠頸段脊髓前角在C7處膨大最明顯，達(dá)到最大。從Tl開(kāi)始前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的數(shù)量開(kāi)始減少，核團(tuán)逐漸的消失。在3/4T1后外側(cè)后核漸漸消失；1/4T1前核和前角后外側(cè)后核消失；1/2Τ1后外側(cè)核，前內(nèi)側(cè)核消失。結(jié)果顯示前內(nèi)側(cè)核和后外側(cè)核和Rexed劃分的腹內(nèi)側(cè)核和腹外側(cè)核相對(duì)應(yīng)，見(jiàn)于頸段脊髓的全長(zhǎng)。腹外側(cè)核在大鼠脊髓并沒(méi)有消失只是在頸膨大處位置變化了，前外側(cè)核就是腹外側(cè)核。此外，本發(fā)明的顯微觀察細(xì)化了 SD大鼠脊髓中各神經(jīng)核團(tuán)出現(xiàn)和終止的節(jié)段到1/4節(jié)段。提示在相同的節(jié)段出現(xiàn)不同的神經(jīng)核團(tuán)是可能的。對(duì)研究不同的神經(jīng)和脊髓灰質(zhì)中神經(jīng)核團(tuán)的聯(lián)系的定位也提供比較明確的參考。上述實(shí)施例只是為了說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的是在于讓本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。凡是根據(jù)本發(fā)明內(nèi)容的實(shí)質(zhì)所作出的等效的變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，其特征在于，具體步驟為 步驟I)備材準(zhǔn)備若干只SD大鼠； 步驟2)灌注、固定和取材將SD大鼠，腹腔注射麻酔后左心室穿刺、灌注、固定；取出保留有脊神經(jīng)根的脊髄，固定12小時(shí)后，取出脊髄分段切開(kāi)，放入20%的蔗糖中過(guò)夜； 步驟3)切片、染色、圖象分析用濾紙吸掉脊髓上的蔗糖，包埋后用冰凍切片機(jī)進(jìn)行冠狀位切片，取其中幾只SD大鼠的頸段脊髓連續(xù)切片，余下的SD大鼠的頸段脊髓每隔10張切片取2張，分兩組貼片；晾干后兩組切片分別用焦油紫染色法和Pal-Weigert染色法染色；神經(jīng)元的Nissl體呈紫紅色或紫色著色，在顯微鏡下觀察頸段脊髄前角的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的分布，用形態(tài)學(xué)圖形分析系統(tǒng)進(jìn)行攝像，然后根據(jù)細(xì)胞的大小、形態(tài)和分布特征來(lái)劃分前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的核團(tuán)分布來(lái)進(jìn)行讀片。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，其特征在于，所述步驟I)中，所述SD大鼠體重為230-250g。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，其特征在于，所述步驟3)中，所述冠狀位切片的厚度為40 ym。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，取若干只SD大鼠頸段和脊髓橫斷面冰凍切片，用焦油紫和Pal-Weigert染色法染色，應(yīng)用光鏡技術(shù)觀察SD大鼠頸段脊髓的前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的分布，從而對(duì)SD大鼠頸段的前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的分布特征進(jìn)行研究。本發(fā)明的判斷關(guān)于大鼠脊髓頸段前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分布的方法，細(xì)化了SD大鼠脊髓中各神經(jīng)核團(tuán)出現(xiàn)和終止的節(jié)段到1/4節(jié)段，顯示在相同的節(jié)段出現(xiàn)不同的神經(jīng)核團(tuán)是可能的，對(duì)研究不同的神經(jīng)和脊髓灰質(zhì)中神經(jīng)核團(tuán)的聯(lián)系的定位也提供比較明確的參考。
文檔編號(hào)A61B19/00GK102772197SQ20111012296
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2011年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月13日
發(fā)明者李東印 申請(qǐng)人:蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院