專利名稱：一種絲素蛋白管狀支架及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物材料領(lǐng)域，特別涉及一種絲素蛋白管狀支架及其制備方法。
背景技術(shù)：
人工神經(jīng)導(dǎo)管、人工膽管、人工血管、人工腎管等移植物已成為臨床迫切需求的材料。以人工血管為例，心血管疾病已經(jīng)成為人類的頭號(hào)殺手，嚴(yán)重威脅著人類身體健康。近年來(lái)，隨著血管外科技術(shù)及生物支架材料的快速發(fā)展，人工血管等管狀支架材料在血管外科治療中有著不可替代的作用，是目前生物醫(yī)用材料及臨床最迫切需求的材料。目前醫(yī)學(xué)上應(yīng)用的人工血管產(chǎn)品主要由滌綸、聚氨酯纖維和膨體聚四氟乙烯材料制成，上述三種支架材料在研發(fā)大中口徑人工血管方面具有極廣的應(yīng)用。但是，聚氨酯材料容易形成血栓，遠(yuǎn)期通暢效率較差。膨體聚四氟乙烯材料柔軟性差，疏水性強(qiáng)，影響組織愈合。上述三類支架材料的組織相容性及與組織修復(fù)匹配性有待提高。為了提高人工血管的組織相容性和組織修復(fù)匹配性，現(xiàn)有技術(shù)有采用家蠶絲素蛋白制作管狀支架。家蠶絲素是由家蠶合成與分泌的天然動(dòng)物蛋白，絲素蛋白即絲芯蛋白，是蠶絲的主要組成部分，約占蠶絲質(zhì)量的70% 80%，其余為絲膠蛋白和少量的繭絲蠟、灰分、碳水化合物等。將蠶絲進(jìn)行脫膠處理后可得到絲素蛋白。家蠶絲素蛋白由重鏈(H鏈，分子量350kDa)、輕鏈(L鏈、分子量^kDa)和糖蛋白組P25組成(分子量30kDa)組成的復(fù)合體。其中，H鏈由12段富含-(Gly-X)η-的重復(fù)序列和11個(gè)氨基酸基本相同的42 43氨基酸殘基的非重復(fù)序列間隔排列而成。絲素蛋白以反平行折疊鏈構(gòu)象(β-sheet)為基礎(chǔ)，形成直徑大約為IOnm的微纖維，無(wú)數(shù)微纖維密切結(jié)合組成細(xì)纖維，大約100根細(xì)纖維沿長(zhǎng)軸排列構(gòu)成直徑大約為ΙΟμπι 18μπι的單纖維， 2根單纖維組合形成1根繭絲絲素纖維。絲素蛋白獨(dú)特的微結(jié)構(gòu)賦予絲素纖維優(yōu)越的力學(xué)性能。絲素蛋白除了具有上述獨(dú)特的一級(jí)結(jié)構(gòu)和微纖維結(jié)構(gòu)外，重要的是其還具有良好的生物相容性。絲素蛋白由20種人體可吸收的氨基酸組成，最終降解產(chǎn)物為氨基酸或小肽，易被細(xì)胞吸收或吞噬，不會(huì)引起明顯的免疫反應(yīng)。已有大量的文獻(xiàn)研究表明絲素蛋白材料能夠支持多種細(xì)胞的生長(zhǎng)，在抗凝血性方面也有較多的研究，在藥物釋放載體、生物傳感器、人工韌帶、人工肌腱、隱形眼睛、人工皮膚等方面的研究取得了突破性的進(jìn)展，用于組織工程材料研究已越來(lái)越深入。國(guó)內(nèi)外許多文獻(xiàn)曾報(bào)道了家蠶絲素蛋白管狀支架的制備方法，例如美國(guó)Kaplan 研究組將絲素溶液直接成型為管狀、靜電紡或靜電噴射形成管狀材料再冷凍干燥制作小 口徑血管修復(fù)材料(Biomaterials2007(28) :5271-5279 ；Biomaterials2008 (29) 4650-4657 ；Biomaterials2008(29) :2217-2227 ；Biomaterials 2009(30) :3213-3223)。 又如采用靜電紡方法制備了絲素蛋白單層管狀材料(International Journal of Biological Macromolecules 2009(45) :504-510)，但按照上述方法制備的絲素蛋白支架材料力學(xué)性能均較低，由此也限制其應(yīng)用空間。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種力學(xué)性能較好的絲素蛋白管狀支架及其制備方法。有鑒于此，本發(fā)明首先提供一種絲素蛋白管狀支架的制備方法，包括將家蠶熟絲線編織成管狀編織物；將家蠶生絲依次進(jìn)行脫膠、透析，得到絲素蛋白溶液；將所述管狀編織物、絲素蛋白溶液和膠黏劑置于管狀模具中，將管狀模具在-80°C -20°C冷凍后取出，得到依次包括外層絲素蛋白膜、芯層編織物和內(nèi)層絲素蛋白膜的絲素蛋白管狀支架。優(yōu)選的，所述脫膠處理具體為使用碳酸鈉溶液處理家蠶生絲1 3次，處理溫度為95°C 100°C ；將碳酸鈉溶液處理過(guò)的生絲依次進(jìn)行水洗，拉松，干燥，得到家蠶絲素纖維。優(yōu)選的，所述透析具體為將脫膠后的蠶絲用氯化鈣-乙醇溶液進(jìn)行溶解后使用截留分子量為3kDa 20kDa 的半透膜在水中進(jìn)行透析。優(yōu)選的，所述膠黏劑與絲素蛋白溶液的質(zhì)量比為0.2 2 1。優(yōu)選的，所述膠黏劑為多元醇或多元醇縮水醚。相應(yīng)的，本發(fā)明還提供一種絲素蛋白管狀支架，包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，所述外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，所述絲素蛋白膜包括交聯(lián)絲素蛋白和膠黏劑；芯層為家蠶熟絲線管狀編織物。優(yōu)選的，所述膠黏劑為多元醇或多元醇縮水醚。優(yōu)選的，其口徑為 10_。優(yōu)選的，其管壁厚度為0. 4mm 1mm。優(yōu)選的，其折內(nèi)徑為5mm 7mm。本發(fā)明提供一種絲素蛋白管狀支架的制備方法，該方法是將家蠶絲熟絲線編織成管狀編織物，然后制備絲素蛋白溶液，最后將上述管狀編織物、絲素蛋白溶液和膠黏劑置于管狀模具內(nèi)冷凍，得到依次包括外層、芯層和內(nèi)層的管狀支架。該管狀支架芯層為家蠶熟絲線的編織物，具有較好的力學(xué)性能和組織相容性；外層和內(nèi)層為交聯(lián)絲素蛋白，具有較好的細(xì)胞相容性和降解性能，其多孔結(jié)構(gòu)還更加適合細(xì)胞的粘附、生長(zhǎng)及營(yíng)養(yǎng)等的傳遞。因此， 按照本方法制得的管狀支架具有優(yōu)異的生物相容性和力學(xué)性能，適合用作人工血管、神經(jīng)導(dǎo)管等。


圖1為實(shí)施例1制得的管狀支架的剖面掃描電鏡圖；圖2為實(shí)施例1制得的管狀支架內(nèi)表面的掃描電鏡圖。
具體實(shí)施例方式為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的限制。本發(fā)明實(shí)施例公開(kāi)了一種絲素蛋白管狀支架的制備方法，包括將家蠶熟絲線編織成管狀編織物；將家蠶生絲依次進(jìn)行脫膠、透析和純化后得到絲素蛋白溶液；將管狀編織物、絲素蛋白溶液和膠黏劑置于模具中，將管狀模具在-80°C -20°C 冷凍后取出，得到依次包括外層絲素蛋白膜、芯層編織物和內(nèi)層絲素蛋白膜的絲素蛋白管狀支架。按照上述制得的絲素蛋白管狀支架包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，芯層為家蠶熟絲線的編織物。其中，芯層是整個(gè)管狀支架的骨架，蠶絲熟絲線是若干根絲素纖維加捻后形成的絲線，再將蠶絲熟絲線編織后形成支架的芯層結(jié)構(gòu)，其力學(xué)性能優(yōu)異，具有較高的斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長(zhǎng)率，由此賦予管狀支架較為優(yōu)異的力學(xué)性能。蠶絲熟絲線可以采用O 20) X 20/22、O 20) X 27/ 等組合，具體可以為將 2根20/22加捻成線A，3根20/22加捻成線B，再將A和B加捻成復(fù)合線，然后采用編織的方法獲得管狀編織。由上述方法制得的管狀支架的外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，其是先將家蠶生絲依次進(jìn)行脫膠、透析和純化先制成絲素蛋白溶液，再向其中加入膠黏劑后于-80°C -20°C冷凍交聯(lián)成型。絲素蛋白發(fā)生交聯(lián)形成多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，并由膠粘劑緊密粘合后附著于芯層表面形成絲素蛋白膜。絲素蛋白具有較好的生物相容性和降解性能，交聯(lián)后形成的多孔結(jié)構(gòu)給細(xì)胞粘附提供了適宜條件，因此以絲素蛋白膜作為管狀支架的內(nèi)外層符合血管內(nèi)外膜組織結(jié)構(gòu)的要求。絲素蛋白溶液的制備工序中，脫膠優(yōu)選按照如下方式進(jìn)行使用碳酸鈉溶液處理家蠶生絲1 3次，處理溫度為95°C 100°C ；將碳酸鈉溶液處理過(guò)的生絲依次進(jìn)行水洗， 拉松，干燥，得到家蠶絲素纖維。脫膠后絲素纖維進(jìn)行溶解制得家蠶絲素蛋白溶液，然后將制得的蛋白溶液進(jìn)行透析。透析是將家蠶絲素纖維溶解后使用半透膜對(duì)絲素蛋白溶液進(jìn)行脫鹽。優(yōu)選將脫膠后蠶絲用氯化鈣-乙醇溶液進(jìn)行溶解后使用截留分子量為3kDa 20kDa的半透膜在水中進(jìn)行透析，優(yōu)選每隔2 4小時(shí)更換一次水，透析時(shí)間優(yōu)選為3 5天。透析后便得到絲素蛋白水溶液。本發(fā)明還優(yōu)選將絲素蛋白溶液的濃度調(diào)整為2. 5wt% 6. 0wt%，此種濃度范圍制得的絲素蛋白支架成型好，且絲素蛋白易于均勻分散于芯層表面，進(jìn)而形成厚度均勻的管狀支架材料。由于絲素蛋白溶液后續(xù)需要經(jīng)過(guò)冷凍處理，絲素蛋白溶液中若殘留氣泡，這些氣泡則會(huì)在冷凍過(guò)程中會(huì)滯留在絲素蛋白膜中，影響絲素蛋白膜的性能。因此，本發(fā)明還優(yōu)選將絲素蛋白溶液進(jìn)行脫泡處理。脫泡可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法進(jìn)行，本發(fā)明對(duì)此并無(wú)特別限制。按照上述方法制備好管狀編織物和絲素蛋白溶液后，將管狀編織物放入管狀模具中，再向管狀模具中注入上述絲素蛋白溶液和膠黏劑，使編織物浸于絲素蛋白溶液和膠黏劑中，然后將上述管狀模具置于-80°C -20°C的環(huán)境中冷凍，絲素蛋白發(fā)生交聯(lián)，形成多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，膠黏劑將交聯(lián)后的絲素蛋白緊密粘合，在芯層雙面均形成多孔絲素蛋白膜。本發(fā)明優(yōu)選選用多元醇或多元醇縮水醚等生物相容性較好的親水性膠黏劑，更優(yōu)選為甘油、聚乙二醇、二縮水甘油基乙醚等，最優(yōu)選采用聚乙二醇二縮水甘油醚。對(duì)于濃度為 2. 5wt% 6. 的絲素蛋白溶液，膠黏劑與絲素蛋白溶液的重量比優(yōu)選為0.2 2 1。冷凍交聯(lián)處理后，為了去除未發(fā)生交聯(lián)的絲素蛋白，還可使用去離子水對(duì)其進(jìn)行洗滌，具體為，將管狀支架從管狀模具中取出后放入盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔3 4小時(shí)更換容器內(nèi)的去離子水，持續(xù)4天。按照上述方法便可制得依次包括外層絲素蛋白膜、芯層編織物層和內(nèi)層絲素蛋白膜的管狀支架。該管狀支架芯層為家蠶熟絲線的編織物，具有較好的力學(xué)性能和組織相容性；外層和內(nèi)層為交聯(lián)絲素蛋白，具有較好的細(xì)胞相容性和降解性能，其多孔結(jié)構(gòu)還更加適合細(xì)胞的粘附、生長(zhǎng)及營(yíng)養(yǎng)等的傳遞。因此，按照本方法制得的管狀支架具有優(yōu)異的生物相容性和力學(xué)性能，適合用作人工血管、神經(jīng)導(dǎo)管等。本發(fā)明還提供一種絲素蛋白管狀支架，其包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，其中外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，芯層為家蠶熟絲線管狀編織物。其中，絲素蛋白膜包括交聯(lián)絲素蛋白和膠黏劑，膠黏劑優(yōu)選多元醇及其縮水醚等生物相容性較好的親水性膠黏劑，具體如甘油、聚乙二醇、二縮水甘油基乙醚等，更優(yōu)選采用聚乙二醇二縮水甘油醚。上述絲素蛋白管狀支架的口徑優(yōu)選為Imm 10mm，口徑為Imm 6mm的管狀支架適合用作如小口徑的人工血管，口徑為6mm IOmm的管狀支架適合用作如中口徑的人工血管。上述絲素蛋白管狀支架管壁厚度優(yōu)選為0. 4mm 1mm，以保證管內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)耐〞承?。綜合上述論述，該管狀支架的芯層結(jié)構(gòu)賦予該管狀支架較好的力學(xué)性能、優(yōu)異的組織相容性和可降解性；外層和內(nèi)層的交聯(lián)絲素蛋白賦予該管狀支架較好的細(xì)胞相容性、 降解性能及細(xì)胞粘附性。因此，該管狀支架具有優(yōu)異的生物相容性和力學(xué)性能，適合用作人工血管、神經(jīng)導(dǎo)管等。芯層管狀編織物的口徑可以為6mm 10mm，此種管狀支架適合用作如中口徑的人工血管等；芯層管狀編織物的口徑也可以小于6mm，此種管狀骨架適合用作如小口徑的人工血管或神經(jīng)導(dǎo)管等。本發(fā)明還提供一種管狀支架，包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，所述外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，所述絲素蛋白膜包括交聯(lián)絲素蛋白和膠黏劑；芯層為家蠶熟絲線管狀編織物，所述管狀支架的彎折內(nèi)徑優(yōu)選為5mm 7mm。由上述論述可知，本發(fā)明提供的管狀支架具有較好的生物相容性和力學(xué)性能。為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的管狀支架及其制備方法進(jìn)行描述。本發(fā)明的保護(hù)范圍不受以下實(shí)施例的限制。以下實(shí)施例中的膠黏劑均是由美國(guó) Sigma公司提供的聚乙二醇二縮水甘油醚。實(shí)施例11.將8X (20/22)熟絲線通過(guò)組合編織成內(nèi)徑為3mm的小口徑管狀編織物。2.將0. 2千克家蠶生絲放入10升濃度為0. 25g/L的碳酸鈉水溶液中，于98 100°C處理三次，前兩次用自來(lái)水，每次處理30分鐘。第三次用去離子水，處理45分鐘。然后用水將絲充分清洗干凈，拉松，置于60°C烘箱內(nèi)干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維。3.稱取脫膠后的家蠶絲素10克溶解于IOOml的摩爾比1 2的氯化鈣-乙醇的水溶液中，70°C溶解2小時(shí)得家蠶絲素溶解液。4.將家蠶絲素溶解液灌注于透析袋內(nèi)，透析袋壁是半透膜，截留分子量為3. 0 20. OkDa范圍，將灌注了家蠶絲素溶解液的透析袋置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔2小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)透析4天，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液。調(diào)整透析后的絲素蛋白溶液濃度為3wt%。5.將織成的管狀織物裝在管狀模具上，向上述絲素蛋白溶液中加入等質(zhì)量的膠黏劑混勻，再脫氣泡后注入管狀模具中，管狀編織物浸于絲素蛋白溶液和膠黏劑中，將管狀模具置于-20°C冷凍4小時(shí)。6.從冰箱取出管狀模具摘下管狀樣品，置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔3小時(shí)更換新的去離子，持續(xù)4天后取出并風(fēng)干，得到具有孔狀結(jié)構(gòu)的管狀支架。如圖1所示為本實(shí)施例制得的管狀支架的剖面掃描電鏡圖，由圖可知，該管狀支架依次包括具有多孔結(jié)構(gòu)的外層、芯層和具有多孔結(jié)構(gòu)的內(nèi)層；圖2所示為本實(shí)施例制得的管狀支架內(nèi)表面的掃描電鏡圖。將本實(shí)施例制備的管狀支架于去離子水中浸漬，充分吸濕取出，用濾紙吸去多余的水分，采用TG065C生物管狀拉伸儀測(cè)得濕態(tài)時(shí)軸向斷裂強(qiáng)度為95MPa，斷裂伸長(zhǎng)率為 80%。實(shí)施例21.將8X (20/22)熟絲線通過(guò)組合編織成內(nèi)徑為3mm的小口徑管狀編織物。2.將0. 2千克家蠶生絲放入10升濃度為0. 25g/L的碳酸鈉水溶液中，于98 100°C處理三次。前兩次使用的碳酸鈉水溶液中的水為自來(lái)水，每次處理30分鐘，第三次使用的碳酸鈉水溶液中的水為去離子水，處理時(shí)間為45分鐘。然后用去離子水將蠶絲充分清洗干凈，拉松，置于60°C烘箱內(nèi)干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維。3.稱取脫膠后的家蠶絲素10克溶解于IOOml的摩爾比1 2的氯化鈣-乙醇的水溶液中，70°C溶解2小時(shí)得家蠶絲素溶解液。4.將家蠶絲素溶解液灌注于透析袋內(nèi)，透析袋壁是半透膜，截留分子量為3. 0 20. OkDa范圍，將灌注了家蠶絲素溶解液的透析袋置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔2小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)透析4天，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液。調(diào)整透析后的絲素蛋白溶液濃度為#t%。5.將織成的管狀織物裝在管狀模具上，向上述絲素蛋白溶液中加入等質(zhì)量的膠黏劑混勻，再脫氣泡后注入管狀模具中，管狀編織物浸于絲素蛋白溶液和膠黏劑中，將管狀模具置于-40°C冷凍4小時(shí)。6.將管狀模具從冰箱取出后摘下管狀樣品，置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔3 小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)4天后取出并風(fēng)干，得到具有孔狀結(jié)構(gòu)的管狀支架。采用TG065C生物管狀拉伸儀測(cè)試本實(shí)施例制備的管狀材料干態(tài)時(shí)力學(xué)性能，測(cè)得軸向斷裂強(qiáng)度為llOMPa，斷裂伸長(zhǎng)率為100%。實(shí)施例31.將8X (20/22)熟絲線通過(guò)組合編織成內(nèi)徑為3mm的小口徑管狀編織物。2.將0. 2千克家蠶生絲放入10升濃度為0. 25g/L的碳酸鈉水溶液中，于98 100°C處理三次。前兩次使用的碳酸鈉水溶液中的水為自來(lái)水，每次處理30分鐘，第三次使用的碳酸鈉水溶液中的水為去離子水，處理時(shí)間為45分鐘。然后用去離子水將蠶絲充分清洗干凈，拉松，置于60°C烘箱內(nèi)干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維。3.稱取脫膠后的家蠶絲素10克溶解于IOOml的摩爾比1 2的氯化鈣-乙醇的水溶液中，70°C溶解2小時(shí)得家蠶絲素溶解液。4.將家蠶絲素溶解液灌注于透析袋內(nèi)，透析袋壁是半透膜，截留分子量為3. 0 20. OkDa范圍，將灌注了家蠶絲素溶解液的透析袋置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔2小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)透析4天，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液。調(diào)整透析后的絲素蛋白溶液濃度為5wt%。5.將織成的管狀織物裝在管狀模具上，向上述絲素蛋白溶液中加入等質(zhì)量的膠黏劑混勻，再脫氣泡后注入管狀模具中，管狀編織物浸于絲素蛋白溶液和膠黏劑中，將管狀模具置于-20°C冷凍4小時(shí)。6.將管狀模具從冰箱取出后摘下管狀樣品，置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔 3 4小時(shí)用新的去離子水或純水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)4天后取出并風(fēng)干，得到具有孔狀結(jié)構(gòu)的管狀支架。采用LLY-06D生物管狀壓縮彈性儀測(cè)試本實(shí)施例制備的管狀材料干態(tài)時(shí)力學(xué)性能，定距離壓縮2mm，測(cè)得壓縮彈性回復(fù)率75%。實(shí)施例41.將8X (20/22)熟絲線通過(guò)組合編織成內(nèi)徑為3mm的小口徑管狀編織物。2.將0. 2千克家蠶生絲放入10升濃度為0. 25g/L的碳酸鈉水溶液中，于98 100°C處理三次。前兩次用自來(lái)水，每次處理30分鐘。第三次用去離子水，處理45分鐘。然后用水將絲充分清洗干凈，拉松，置于60°C烘箱內(nèi)干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維。3.稱取脫膠后的家蠶絲素10克溶解于IOOml的摩爾比1 2的氯化鈣-乙醇的水溶液中，70°C溶解2小時(shí)得家蠶絲素溶解液。4.將家蠶絲素溶解液灌注于透析袋內(nèi)，透析袋壁是半透膜，截留分子量為3. 0 20. OkDa范圍，將灌注了家蠶絲素溶解液的透析袋置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔2小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)透析4天，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液。調(diào)整透析后的絲素蛋白溶液濃度為#t%。5.將織成的管狀織物裝在管狀模具上，向上述絲素蛋白溶液中加入等質(zhì)量的膠黏劑混勻，再脫氣泡后注入管狀模具中，管狀編織物浸于絲素蛋白溶液和膠黏劑中，見(jiàn)管狀模具置于-80°C冷凍4小時(shí)。6.從冰箱取出管狀模具后摘下管狀樣品，置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔3 4小時(shí)用新的去離子水更換容器內(nèi)的水，持續(xù)4天后取出用濾紙吸去多余的水分，得到具有孔狀結(jié)構(gòu)的管狀支架。采用LLY-06D生物管狀壓縮彈性儀測(cè)試本實(shí)施制備的管狀支架濕態(tài)時(shí)的力學(xué)性能，定負(fù)荷90cN，測(cè)得壓縮彈性回復(fù)率92%。按照中華人民共和國(guó)國(guó)家GB/T16886. 5-2003/IS0 10993-5 :1999，醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第5部分體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中的浸提液試驗(yàn)方法對(duì)實(shí)施例1 4制備的管狀支架進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試結(jié)果表面實(shí)施例1 4制備的管狀支架細(xì)胞毒性均為0級(jí)，無(wú)滲漏。實(shí)施例1 4制備的管狀支架的彎折內(nèi)徑均為5. 5mm 6. 5mm。由上述結(jié)果可知，本發(fā)明制備的管狀支架無(wú)毒性，力學(xué)性能優(yōu)異，適合作為人工血管、神經(jīng)導(dǎo)管等人工管狀移植物。以上實(shí)施例的說(shuō)明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。對(duì)所公開(kāi)的實(shí)施例的上述說(shuō)明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。 對(duì)這些實(shí)施例的多種修改對(duì)本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會(huì)被限制于本文所示的這些實(shí)施例，而是要符合與本文所公開(kāi)的原理和新穎特點(diǎn)相一致的最寬的范圍。
權(quán)利要求
1.一種絲素蛋白管狀支架的制備方法，包括 將家蠶熟絲線編織成管狀編織物；將家蠶生絲依次進(jìn)行脫膠、透析，得到絲素蛋白溶液；將所述管狀編織物、絲素蛋白溶液和膠黏劑置于管狀模具中，將管狀模具在-80°c -20°c冷凍后取出，得到依次包括外層絲素蛋白膜、芯層編織物和內(nèi)層絲素蛋白膜的絲素蛋白管狀支架。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脫膠處理具體為 使用碳酸鈉溶液處理家蠶生絲1 3次，處理溫度為95°C 100°C ；將碳酸鈉溶液處理過(guò)的生絲依次進(jìn)行水洗，拉松，干燥，得到家蠶絲素纖維。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述透析具體為將脫膠后的蠶絲用氯化鈣-乙醇溶液進(jìn)行溶解后使用截留分子量為3kDa 20kDa的半透膜在水中進(jìn)行透析。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述膠黏劑與絲素蛋白溶液的質(zhì)量比為0. 2 2 1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述膠黏劑為多元醇或多元醇縮水醚。
6.一種絲素蛋白管狀支架，其特征在于，包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，所述外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，所述絲素蛋白膜包括交聯(lián)絲素蛋白和膠黏劑；芯層為家蠶熟絲線管狀編織物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的管狀支架，其特征在于，所述膠黏劑為多元醇或多元醇縮水醚。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的絲素蛋白管狀支架，其特征在于，其口徑為Imm 10mm。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的絲素蛋白管狀支架，其特征在于，其管壁厚度為0.4mm Imm0
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的絲素蛋白管狀支架，其特征在于，其折內(nèi)徑為5mm 7mm。
全文摘要
本發(fā)明提供一種絲素蛋白管狀支架及其制備方法。該管狀支架包括依次設(shè)置的外層、芯層和內(nèi)層，所述外層和內(nèi)層均為絲素蛋白膜，所述絲素蛋白膜包括交聯(lián)絲素蛋白和膠黏劑；芯層為家蠶熟絲線管狀編織物。本發(fā)明提供的上述管狀支架彎折內(nèi)徑為5mm～7mm。本發(fā)明提供的管狀支架無(wú)細(xì)胞毒性，具有優(yōu)異生物力學(xué)性能。
文檔編號(hào)A61F2/06GK102274089SQ20111013535
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月24日
發(fā)明者劉志武, 王建南 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)