專利名稱：菝葜屬兩種植物治療痛風性關節(jié)炎有效部位及提取方法
技術領域：
本發(fā)明涉及菝葜屬植物治療急性痛風性關節(jié)炎的有效部位,尤其涉及小葉菝葜和三脈菝葜兩種中草藥治療急性痛風性關節(jié)炎的有效部位。本發(fā)明和涉及所述有效部位的提取方法，屬于中藥治療痛風性關節(jié)炎領域。
背景技術：
痛風性關節(jié)炎(gouty arthritis)是由于尿酸鈉微結晶在關節(jié)周圍組織沉積引發(fā)的急性炎癥反應。臨床以關節(jié)紅腫熱痛反復發(fā)作及尿尿酸、血尿酸增高為主要表現(xiàn)，日久痛風石在關節(jié)軟骨沉積，關節(jié)畸形，甚至可并發(fā)腎結石。本病屬祖國傳統(tǒng)醫(yī)學的痹證范疇，俗稱頑痹、血痹等。目前對痛風性關節(jié)炎的治療還沒有什么特效藥，臨床主要用秋水仙堿、別嘌呤醇和非甾體類抗炎藥等藥冶療，療效尚可，但毒副作用較大(致白細胞減少、再生障礙性貧血、肝腎損傷、糖尿病、高血壓等癥)，給患者帶來極大的痛苦。因此，尋找更有 效，毒性更低的治療藥物是迫切需要解決的重要問題。小葉菝葜macrophyIlasers.)和三脈菝葜(Smalix trinervula Miq.)，主產于華東及華南各省，在江西省境內野生資源非常豐富。其味甘、苦，性平，《全國中草藥匯編》、《江西草藥》、《湖南藥物志》、《貴州草藥》、《陜西中草藥》均記載有祛風活絡，祛痰止咳的功效，臨床主要用于治療痛風性關節(jié)炎、筋骨疼痛、跌打損傷、腰肌勞損、支氣管炎、肺結核咳嗽咯血等疾患?，F(xiàn)有的治療痛風藥僅對關節(jié)炎具有抗炎鎮(zhèn)痛的療效，如果既能降低尿酸，又能減緩局部的炎癥反應，那么才是治療痛風性關節(jié)炎的真正意義所在。本發(fā)明提供兩種菝葜屬中草藥有效部位提取物，既能降低患者血中的尿酸，又能減緩患者局部關節(jié)周圍的炎癥反應，將具有重要的臨床意義。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供兩種既能降低患者血中的尿酸，又能減緩患者局部關節(jié)周圍的炎癥反應菝葜屬中草藥(小葉菝葜和三脈菝葜)有效部位提取物。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的
兩種治療急性痛風性關節(jié)炎的菝葜屬有效部位提取物，包括以下步驟制備得到
將小葉菝葜或者三脈菝葜粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將小葉菝葜或三脈菝葜粉碎后用10-90%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。其中，將小葉菝葜或者三脈菝葜水煎煮時，優(yōu)選用藥材4-10倍重量的水煎煮2-5小時，為了達到更好的提取效果，可以將水煎液濃縮后用大孔吸附樹脂柱吸附，用蒸餾水和10-90%的乙醇梯度洗脫。更優(yōu)選的，用50%的乙醇進行洗脫，收集洗脫液，即得。所述的大孔吸附樹脂柱選自DlOl型大孔吸附樹脂。優(yōu)選的，將小葉菝葜或三脈菝葜粉碎后用10-90%乙醇提取時，用70%乙醇提取所得到的有效部位具有更好的治療急性痛風性關節(jié)炎的藥理活性。
本發(fā)明治療痛風性關節(jié)炎的兩種中草藥有效部位富含活性成分，具有降低尿酸、抗炎、鎮(zhèn)痛的藥理作用。本發(fā)明有效部位不但能緩解急性期關節(jié)紅腫熱痛的炎癥反應，而且能夠針對病機降低血中的尿酸水平，對于痛風標本兼治。因此可以用來制備療效好，安全可靠的治療急性痛風性關節(jié)炎的藥物。本發(fā)明有效部位的提取工藝簡單，不需要高溫高壓和特殊設備，安全，易于操作且成本低。
具體實施例方式下面結合具體實施范例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而更為清楚。但是這些實施例子僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術方案的細節(jié)和形式進行修改或者替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內。
實施例I
將小葉菝葜干燥根及根莖lOOOg，粉碎，加70%乙醇5倍重量，回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，得到小葉菝葜醇浸膏。實施例2
將小葉菝葜干燥根及根莖lOOOg，粉碎，加水6倍重量，浸泡lh，煎煮2h，得到水煎液；水煎液濃縮至lg/mL，上DlOl型大孔吸附樹脂柱，用蒸餾水洗脫至無色，收集洗脫液，濃縮得組分I ;再用30%乙醇洗脫至無
色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分H ;再用50%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分IlI ;再用70%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分IV ；實施例3
將三脈菝葜干燥根及根莖lOOOg，粉碎，加70%乙醇5倍重量，回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，得到三脈菝葜醇浸膏。實施例4
將三脈菝葜干燥根及根莖lOOOg，粉碎，加水6倍重量，浸泡lh，煎煮2h，得到水煎液；水煎液濃縮至lg/mL，上DlOl型大孔吸附樹脂柱，用蒸餾水洗脫至無色，收集洗脫液，濃縮得組分Y ;再用30%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分\ ;再用50%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分VH ;再用70%乙醇洗脫至無色，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮得組分ΥΠ!；
實驗例I小葉菝葜和三脈菝葜提取物的藥效學實驗 供試藥物:小葉菝葜和三脈菝葜的醇浸膏(實施例I和3所制備)
實驗方法
將120只小鼠，雌雄各半，隨機分為8組(η=15)，空白對照組灌胃等量的1%吐溫-80溶液，陽性藥物組(阿司匹林0. 2 g/kg)，小葉菝葜和三脈菝葜組(高6 g · kg—1生藥，中3g · kg—1生藥，低1. 5 g · kg—1生藥)。各組動物每天分別灌胃給藥一次，連續(xù)7 d，末次給藥0.5 h后將O. I mL 二甲苯均勻涂抹于小鼠左耳廓兩面致炎，以右耳作對照，I h后頸椎脫臼處死小鼠，沿耳廓剪下兩耳，用打孔器(直徑9 mm)分別在左右相同部位取下圓耳片，稱重，記錄耳殼質量，計算耳腫脹度和抑制率。計算公式腫脹抑制率(％)=(對照組平均腫脹度一給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度X 100%
實驗結果
小葉菝葜和三脈菝葜醇浸膏抗二甲苯所致小鼠耳腫脹結果見表I。_
表I小葉菝葜和三脈菝葜醇浸膏對二甲苯所致 小鼠耳腫脹的影響('X±s，n=15)
腫Μ制·組別劑量/ 耳殼質重Zmg 腫腦 ^
_______
g-kg1 左右mg%
空白對麗組一 11.6fcl9 5_3±11 6L3tl.6 —
阿哥匹林組 02 7_ =1_7^5±13** 60
—6 8.1±1336L13** 43
_遍______
三脈麵
3 7 642 0 4_9±Oj9 2/7土 JL5** 57 中锎an______
,、… 1.5 9.511jS 4&tflL6 4.5il.4** 29 低劑遍______
Φ葉後歲
' 6 8.6H).7 4ML6 3_6H)jS** 43 赫J遍______
小葉孩莫
■ 。， 3 SOtlO 4_8±丄I 33dti).7** 48 中剤遍______
小葉纏
1_5 7.Stl.0 42Ηλ9 3.6H).6** 43
低剤碰 Il丨___
與空白對照組比較*/X0. 05，**/Χ0·01
從表I中可見，小葉菝葜和三脈菝葜總浸膏均具有一定的抗炎效果，且抗炎效果與給藥劑量有關；與阿司匹林組的腫脹抑制率(60%)相比從高到低依次為三脈菝葜中劑量組(57%)、小葉菝葜中劑量組(48%)、三脈菝葜高劑量組(43%)、小葉菝葜高劑量組(43%)、小葉菝葜低劑量組(43%)、三脈菝葜低劑量組(29%)。由此實驗結果可以看出，三脈菝葜高劑量組、中劑量組以及小葉菝葜中劑量組具有較好的抗炎效果。
實驗例2 小葉菝葜和三脈菝葜提取物的藥效學實驗供試藥物:小葉菝葜水煎液上大孔樹脂后乙醇洗脫液，組分I IV (實施例2所制備)，
以及三脈菝葜水煎液上大孔樹脂后乙醇洗脫液，組分V ^VHI (實施例4所制備)。實驗方法:
將150只小鼠，雌雄各半，隨機分為10組(n=15)，空白對照組灌胃等量的1%吐溫-80溶液，陽性藥物組(阿司匹林O. 2 g/kg)，小葉菝葜和三脈菝葜組(3 g .kg—1生藥)。各組動物每天分別灌胃給藥一次，連續(xù)7 d，末次給藥0.5 h后將O. I mL 二甲苯均勻涂抹于小鼠左耳廓兩面致炎，以右耳作對照，I h后頸椎脫白處死小鼠，沿耳廓剪下兩耳，用打孔器(直徑9 mm)分別在左右相同部位取下圓耳片，稱重，記錄耳殼質量，計算耳腫脹度和抑制率。計算公式腫脹抑制率(％)=(對照組平均腫脹度一給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度 X 100%
實驗結果 從表2所示實驗結果可以看出，不同組分均有抑制耳腫脹作用，其中組分III和組分YD的作用最為顯著。
表2.不同洗脫部位對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響('x±s，n=15)
權利要求
1.在此處鍵入權利要求項1，兩種菝葜屬中草藥治療急性痛風性關節(jié)炎的小葉菝葜和三脈菝葜有效部位提取物，由以下步驟制備得到將小葉菝葜或者三脈菝葜粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將小葉菝葜或三脈菝葜粉碎后用10-90%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。
2.在此處鍵入權利要求項2，按照權利要求I所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物，其特征在于將小葉菝葜或三脈菝葜干燥藥材用4-10倍重量的水煎煮2-5小時。
3.按照權利要求I所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物，其特征在于將小葉菝葜或三脈菝葜的水煎液濃縮后上大孔樹脂柱吸附，用蒸餾水和10-90%的乙醇進行梯度洗脫，收集洗脫液。
4.按照權利要求3所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物，其特征在于將小葉菝葜或三脈菝葜的水煎液濃縮后上大孔樹脂柱吸附，用50%的乙醇進行洗脫，收集洗脫液，即得。
5.按照權利要求3或4所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物，其特征在于所述的大孔吸附樹脂柱選自DlOl型大孔吸附樹脂。
6.按照權利要求I所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物，其特征在于將小葉菝葜或三脈菝葜粉碎后用70%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。
7.權利要求1-6任何一項所述的小葉菝葜或三脈菝葜有效部位提取物在制備治療急性痛風性關節(jié)炎藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了菝葜屬兩種治療急性痛風性關節(jié)炎的中草藥(小葉菝葜和三脈菝葜)有效部位提取物及其制備方法。本發(fā)明有效部位提取物包括以下步驟制備得到將小葉菝葜或者三脈菝葜粉碎后用水煎煮提取，收集水煎液，過濾，即得；或者將小葉菝葜或三脈菝葜粉碎后用10-90%乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇，即得。本發(fā)明有效部位不但能緩解急性期關節(jié)紅腫熱痛的炎癥反應，而且能夠針對病機降低血中尿酸水平，對于痛風標本兼治，可以用來制備療效好，安全可靠的治療急性痛風性關節(jié)炎的藥物。本發(fā)明有效部位的提取工藝簡單，不需要高溫高壓和特殊設備，安全，易于操作且成本低。
文檔編號A61P19/06GK102836361SQ20111016526
公開日2012年12月26日 申請日期2011年6月20日 優(yōu)先權日2011年6月20日
發(fā)明者黃慧蓮 申請人:江西中醫(yī)學院