專利名稱：甲型肝炎減毒活疫苗用于防治哮喘的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甲型肝炎減毒活疫苗的新用途，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在1995年WHO和美國國立心肺血液研究所發(fā)表的“全球哮喘防治創(chuàng)議(GINA) ”中將哮喘定義為哮喘是一種以嗜酸性粒細胞(EOS)、肥大細胞和T淋巴細胞參與為主的具有復(fù)雜免疫機制的氣道變應(yīng)性慢性炎癥。以氣道高反應(yīng)性和氣道重建為本病特征，且在慢性緩解期仍然存在。有多種炎性細胞、炎性介質(zhì)、受體、細胞因子參與其炎癥過程。哮喘是世界公認的醫(yī)學(xué)難題，GINA綜合防控方案的實際臨床效果及患者的依從性并不太理性，目前國際上還沒有有效的根治支氣管哮喘的方法。因此探求一種安全有效的控制和預(yù)防哮喘發(fā)作的方法具有極其重要的意義。臨床上采用甲型肝炎減毒活疫苗制得的注射劑用于預(yù)防甲型肝炎(中國專利申請?zhí)?89106580.6、92115224· 8、98120633· 6、98117802· 2、99115036· 8、98123772· X、 98123771. 1,200610010686. 8,200810058730. 1,200810058812. 6,200810051441. 9 的專利
申請背景技術(shù)部分)。但甲型肝炎減毒活疫苗在防治哮喘方面的應(yīng)用未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是提供甲型肝炎減毒活疫苗的新用途，即甲型肝炎減毒活疫苗在制備防治哮喘的藥物中的應(yīng)用，用甲型肝炎減毒活疫苗防治哮喘具有較好的療效。本發(fā)明提供的技術(shù)方案是甲型肝炎減毒活疫苗在制備防治哮喘的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明以用甲型肝炎減毒活疫苗防治哮喘具有較好的療效。本發(fā)明所述的甲型肝炎減毒活疫苗，制成注射液通過肌肉注射給予。其用量一般可按照現(xiàn)有技術(shù)中注射用甲型肝炎減毒活疫苗的常規(guī)劑量給予。如肌肉注射一次lmL，ImL中所含活病毒量應(yīng)不低于 6. 501gCCID50O


圖1為生理鹽水(NS)陰性對照組的小鼠肺組織切片圖2為哮喘對照組的小鼠肺組織切片圖3為甲型肝炎減毒活疫苗干預(yù)組的小鼠肺組織切片
具體實施例方式本發(fā)明甲型肝炎減毒活疫苗的新用途通過以下實驗例加以說明。本發(fā)明通過采用C57BL/6小鼠哮喘模型，以甲型肝炎減毒活疫苗干預(yù)，取得較好的效果。1.材料和方法
1.1實驗動物C57BL/6小鼠，6_8周齡雄性，購自浙江大學(xué)實驗動物中心，飼養(yǎng)于室溫環(huán)境下，明暗周期12小時，自由進食，飲水不限。實驗前適應(yīng)環(huán)境3天。1.2小鼠哮喘誘發(fā)和干預(yù)1.2. 1建立哮喘模型分別于第0天和第14天每只小鼠分別腹腔注射致敏液0. 2ml
致敏；于第對、25、洸天將小鼠置于密閉容器QO cmX40 cmX50 cm)中，以1 %的OVA溶液10 ml 霧化吸入，每天1次。1. 2. 2甲型肝炎減毒活疫苗干預(yù)將C57BL/6小鼠分為3組，每組12只。哮喘對照組以O(shè)VA致敏激發(fā)；生理鹽水 (NS)陰性對照組以NS代替OVA致敏激發(fā)；甲型肝炎減毒活疫苗干預(yù)組以甲型肝炎減毒活疫苗(購自浙江普康生物技術(shù)股份有限公司)肌肉注射(劑量中含活病毒量約為l.Olg CCID50)，第一次抗原致敏前5天與后10天兩次給藥，以O(shè)VA致敏激發(fā)。1. 3小鼠肺泡灌洗液(BALF)收集及EOS計數(shù)以2%戊巴比妥0. 25ml腹腔注射麻醉后，切開頸部皮膚，暴露氣管，在將左肺和主支氣管分離開，行右肺氣管插管，以0. 5ml生理鹽水灌洗右肺2次，回收率在80%以上。計數(shù)BALF細胞總數(shù)，于4°C 2 000 r/min，離心lOmin，沉淀作涂片。涂片行瑞氏染色，連續(xù)數(shù) 400個BALF細胞并計其中EOS數(shù)，得EOS百分比。1. 4肺組織學(xué)檢查分離左肺臟，通過氣管插管灌注10 %中性甲醛使肺膨脹，灌注壓力為 30cmH20(IcmH2O = 0. 098 kPa)。將肺浸入10%中性甲醛中固定。切取左肺葉約2mm，經(jīng)不同濃度乙醇、二甲苯處理后，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察。2實驗結(jié)果2. 1肺組織病理變化哮喘對照組(圖1)支氣管管腔變小，上皮增生，杯狀細胞增多，有大量粘液分泌； NS陰性對照組(圖2)小鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常，未見氣道上皮細胞粘液分泌；甲型肝炎減毒活疫苗干預(yù)組(圖幻肺泡壁、氣道壁病變程度較哮喘組明顯減輕，肺泡腔清晰，支氣管腔內(nèi)無明顯滲出物。2. 2小鼠BALF中細胞總數(shù)和EOS變化表一各組小鼠BALF中細胞總數(shù)和EOS百分比(無士 S)
權(quán)利要求
1.甲型肝炎減毒活疫苗在制備防治哮喘的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及甲型肝炎減毒活疫苗的新用途。本發(fā)明用甲型肝炎減毒疫苗防治哮喘具有較好的療效。本發(fā)明所述的甲型肝炎減毒活疫苗，制成注射液通過肌肉注射給予，其用量一般可按照現(xiàn)有技術(shù)中注射用甲型肝炎減毒活疫苗的常規(guī)劑量給予。如肌肉注射1mL/次，1mL中所含活病毒量應(yīng)不低于6.50lgCCID50。
文檔編號A61P11/06GK102240401SQ201110169720
公開日2011年11月16日 申請日期2011年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月22日
發(fā)明者胡華軍, 鄭淑娟 申請人:中國計量學(xué)院