專利名稱：復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑及其制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于抗菌類獸藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
抗菌藥在治療動物感染性疾病上具有起效快、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點，使其在獸醫(yī)臨床上有著廣泛的的應(yīng)用巨大的作用。但傳統(tǒng)劑型的局限性以及耐藥性的逐漸增加使其治療成本上升和治療效果下降。為此，臨床實踐中常采用聯(lián)合使用兩種或多種抗菌藥物，以達到擴大抗菌譜，增強療效，減少用藥量，降低或避免毒副作用，減少或延緩耐藥菌株的產(chǎn)生的目的。甲氧芐啶(TMP)屬于合成的廣譜抗菌劑，為親脂性弱堿，對多種革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌均有抗菌作用。單用易產(chǎn)生耐藥性，其耐藥機理可能是細(xì)菌改變代謝途徑，例如產(chǎn)生較多的二氫葉酸合成酶，或是直接利用外源性葉酸。細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性后，不但使療效降低，而且會造成耐藥菌株的傳播，給治療帶來困難。琥珀酸鈉氟苯尼考系為氟苯尼考的衍生物，根據(jù)前藥的原理設(shè)計而成，它對多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌及支原體等均有作用，為廣譜抑菌藥，高濃度具有殺菌作用。本藥臨床耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，常見耐藥菌為葡萄球菌等革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌。細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性后，不但使療效降低，而且會造成耐藥菌株的傳播，給治療帶來困難。因此，如何通過聯(lián)合用藥和開發(fā)新劑型來解決甲氧芐啶和琥珀酸鈉氟苯尼考以上存在的缺點，提高兩藥臨床用藥療效已經(jīng)成為當(dāng)前急需解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑及其制備方法。本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，該納米乳制劑為水包油型，粒徑在1 100 nm之間，由下述重量百分比的原料制成 甲氧節(jié)啶0. 01 1. 75%
琥珀酸鈉氟苯尼考0. 04 6. 99%
表面活性劑21. 82 ；35. 69%
助表面活性劑7. 94 11. 90%
油3. 49 4. 76%
蒸溜水47. 59 63. 54%
上述原料的總重量百分比為100%。所述的表面活性劑是吐溫-80或蓖麻油聚氧乙烯；所述助表面活性劑是乙醇或1，2-丙二醇；所述油是肉豆蔻酸異丙酯或乙酸乙酯。所述的表面活性劑和助表面活性劑質(zhì)量比為2-3 1 ；所述表面活性劑和助表面活性劑質(zhì)量之和與油的質(zhì)量比為9:1 7:3。一種制備復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑的方法，具體包括以下步驟
1)按比例取各原料；
2)將甲氧芐啶原料藥溶于助表面活性劑中，加入表面活性劑和油相混勻；
3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；
4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。本發(fā)明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑使用時，每IOOkg水加本發(fā)明復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑100ml，自由飲水，三天為一療程。本發(fā)明復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑的組成原理及其科學(xué)依據(jù) 由于甲氧芐啶原料藥難溶于水，琥珀酸鈉氟苯尼考易溶于水，因此將琥珀酸鈉氟苯尼考原料藥的水溶液作為水相部分，將甲氧芐啶作為油相部分。本發(fā)明復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑的原料中選用吐溫-80或蓖麻油聚氧乙烯作為表面活性劑，是因為吐溫-80和蓖麻油聚氧乙烯毒性相對較小，不易受電解質(zhì)、無機鹽類及酸堿的影響；選用乙醇或1，2-丙二醇作為助表面活性劑時，形成的納米乳制劑不但穩(wěn)定，而且作為甲氧芐啶的溶劑，提高了甲氧芐啶在該復(fù)方納米乳中的含量；肉豆蔻酸異丙酯或乙酸乙酯作為油，是因為肉豆蔻酸異丙酯、乙酸乙酯與吐溫-80的 HLB值接近，易形成穩(wěn)定的納米乳。當(dāng)表面活性劑和助表面活性劑質(zhì)量比為2-3 1時，表面活性劑和助表面活性劑之和與油的質(zhì)量比例為9:1 7:3時形成的納米乳區(qū)最大，最穩(wěn)定，載藥量最高。本發(fā)明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑外觀透明，粒徑介于1 100 nm，其粘稠度可根據(jù)需要加入任意比例的蒸餾水調(diào)整，方便臨床給藥，兩種原料藥甲氧芐啶和琥珀酸鈉氟苯尼考的結(jié)構(gòu)均未發(fā)生變化。本發(fā)明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑可用于治療畜禽由敏感菌引起的各類感染。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑具有以下優(yōu)點
1)安全、高效、耐藥性低；
2)吸收迅速，生物利用度高；靶向釋藥，副作用低；粒徑小且均勻，透膜吸收好；
3)黏度低，注射時疼痛?。?br> 4)穩(wěn)定性良好，可過濾除菌，易于保存。
具體實施方式

實施例1
蓖麻油聚氧乙烯9. Og
1，2_ 丙二醇3. Og
甲氧芐啶0. 003g
琥珀酸鈉氟苯尼考0. 012g
肉豆蔻酸異丙酯1. 2g蒸餾水12g
具體操作步驟是
1)按比例取各原料；
2)將甲氧芐啶原料藥溶于1，2_丙二醇中，加入蓖麻油聚氧乙烯和肉豆蔻酸異丙酯混
勻；
3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；
4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即粒徑為1 100 nm、外觀透明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。 實施例2
原料配方如下
吐溫-803. Og
乙醇1. Og
甲氧芐啶0. 03 g
琥珀酸鈉氟苯尼考0. 12 g
乙酸乙酯0. . 44g
蒸餾水8. Og 具體操作步驟是
1)按比例取各原料；
2)將甲氧芐啶原料藥溶于乙醇中，加入吐溫-80和乙酸乙酯混勻；
3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；
4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即粒徑為1 100 nm、外觀透明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。 實施例3
原料配方如下
吐溫-806. 0 g
1,2-丙二醇2. Og
甲氧芐啶0. 4g
琥珀酸鈉氟苯尼考1. 6 g
肉豆蔻酸異丙酯0. 88g
蒸餾水12 g 具體操作步驟是
1)按比例取各原料；
2)將甲氧芐啶原料藥溶于1，2_丙二醇中，加入吐溫-80和肉豆蔻酸異丙酯混勻；
3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；
4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即粒徑為1 100 nm、外觀透明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。 實施例4 原料配方如下
吐溫-806. 0 g乙醇3. Og
甲氧芐啶0. 5g
琥珀酸鈉氟苯尼考2. Og
乙酸乙酯l.Og
蒸餾水15.0 g 具體操作步驟是
1)按比例取各原料；
2)將甲氧芐啶原料藥溶于乙醇中，加入吐溫-80和乙酸乙酯混勻；
3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；
4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即粒徑為1 100 nm、外觀透明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。采用實施例1的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑進行以下試驗。試驗1
利用油溶性染料蘇丹紅和水溶性染料亞甲基藍(lán)在實施例1制得的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑中擴散的快慢來判斷納米乳的類型，發(fā)現(xiàn)亞甲基藍(lán)溶液在實施例1制得的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑中有擴散，蘇丹紅溶液在實施例 1制得的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑中則沒有擴散，表明所制備的復(fù)方納米乳是水包油型(0/W)。試驗2穩(wěn)定性試驗 1)離心加速試驗
取實施例1制備的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，以20 000 r/min離心，10 min后觀察納米乳液外觀仍保持澄清透明，未出現(xiàn)油水分層現(xiàn)象。2)光穩(wěn)定性試驗
將實施例1制備的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑適量裝入玻璃瓶內(nèi)， 密封后(4500士500) Ix光照條件下室溫放置，分別于0 d、5 d、10 d取樣觀察。結(jié)果表明， 乳液保持澄清透明外觀，未見分層和破乳等現(xiàn)象。3)溫度穩(wěn)定性試驗
將實施例1制備的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑分裝于玻璃瓶內(nèi)，密封后分別置于4 °C、25 °C、37 °C、60 ！條件下留樣考察3個月，每隔10 d取樣觀察。結(jié)果表明，乳液在此四種溫度條件下均保持澄清透明外觀，未見分層和破乳等現(xiàn)象。試驗3復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳的聯(lián)合藥敏試驗 1)單藥紙片搭橋試驗
制備的甲氧芐啶藥敏紙片含甲氧芐啶5 μ g/片，琥珀酸鈉氟苯尼考藥敏紙片含甲氧芐啶30 μ g/片。試驗菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923和大腸桿菌ATCC25922。將濃度為1/2麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)比濁管的菌液接種到MHA培養(yǎng)基上，然后將上述兩種藥敏紙片各一張分別貼在MHA培養(yǎng)基表面，間距2 3 mm，35°C培養(yǎng)18 h后觀察兩紙片間的抑菌圈直徑和形態(tài)。結(jié)果表明，兩種抗菌藥物對金黃色葡萄球菌ATCC25is3和大腸桿菌ATCC25922 的抑菌圈交界角平直，表示甲氧芐啶和琥珀酸鈉氟苯尼考呈協(xié)同抗菌作用。2)肉湯稀釋棋盤試驗根據(jù)所測得的單藥甲氧芐啶和琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳對金黃色葡萄球菌ATCC25is3* 大腸桿菌ATCC25922的最低抑菌濃度MIC值，采用微量肉湯稀釋棋盤法進行藥物的聯(lián)合抗菌試驗。采用實施例1制備的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，分別用MHB 倍比稀釋成一系列濃度，然后將不同濃度的兩種抗菌藥物按棋盤法設(shè)計，兩兩組合加入96 孔平板中，每種抗菌藥物取50 μ L，再將1. 5 X IO5 CFU/mL的菌液100 μ L加入孔中，37 V 孵育M h。記錄兩藥單獨應(yīng)用時的MIC，和兩藥聯(lián)合用藥時各自的MIC，并計算FIC指數(shù)。 試驗過程重復(fù)5次，取眾數(shù)為MIC值，結(jié)果見表1。表1為甲氧芐啶和琥珀酸鈉氟苯尼考單用和聯(lián)用的MIC (mg/L)和FIC指數(shù) 表權(quán)利要求
1. 一種復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，其特征在干，該納米乳制劑為 水包油型，粒徑在1 100 nm之間，由下述重量百分比的原料制成甲氧芐啶0. 01 1. 75%琥珀酸鈉氟苯尼考 0. 04 6. 99%表面活性劑 21. 82 35. 69%助表面活性劑 7. 94 11. 90% 油3. 49 4. 76%蒸餾水47. 59 63. 54%上述原料的總重量百分比為100%。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，其特征在干， 所述的表面活性劑是吐溫-80或蓖麻油聚氧乙烯；所述助表面活性劑是乙醇或1，2-丙ニ 醇；所述油是肉豆蔻酸異丙酯或乙酸乙酷。
3.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，其特征在 于所述的表面活性劑和助表面活性劑質(zhì)量比為2-3 1 ；所述表面活性劑和助表面活性劑 質(zhì)量之和與油的質(zhì)量比為9:1 7:3。
4.ー種制備權(quán)利要求1所述的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑的方法， 其特征在干，具體包括以下步驟1)按比例取各原料；2)將甲氧芐啶原料藥溶于助表面活性劑中，加入表面活性劑和油相混勻；3)將琥珀酸鈉氟苯尼考溶于蒸餾水中；4)常溫下滴加步驟3)的溶液至步驟2)制備的溶液中，攪拌直至形成均勻透明的體系， 即復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于抗菌類獸藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑，該該納米乳制劑為水包油型，粒徑在1～100nm之間，由甲氧芐啶、琥珀酸鈉氟苯尼考、表面活性劑、助表面活性劑、油和蒸餾水制成。本發(fā)明的復(fù)方甲氧芐啶與琥珀酸鈉氟苯尼考納米乳制劑外觀透明，可用于治療畜禽由敏感菌引起的各類感染。
文檔編號A61K9/113GK102274228SQ201110179278
公開日2011年12月14日 申請日期2011年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月29日
發(fā)明者劉升, 柴保國, 胡帥, 陳圓圓 申請人:河南牧翔動物藥業(yè)有限公司