專利名稱：從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是從陜西省特有的銀蓮花屬植物(太白銀蓮花)中分離有抗癌活性的化合物，具體地說是從太白銀蓮花中提取分離到的一種三萜皂苷類化合物及其在制備抗膠質(zhì)瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)腫瘤中最常見的一種，致殘率和死亡率高，5年生存率為20% 30%，在所有膠質(zhì)瘤中占半數(shù)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者5年生存率不足5%。目前用以治療膠質(zhì)瘤的化療藥物主要有亞硝脲類烷化劑尼莫司汀(ACNU)、卡莫司汀、洛莫司汀以及甲基芐胼、 甲氨喋呤、環(huán)磷酰胺、替尼泊苷等，但這些藥物對惡性膠質(zhì)瘤的有效率較低，一般小于50%， 對生存時(shí)間延長不明顯，而且很易造成嚴(yán)重的肝臟損害及骨髓抑制，往往因?yàn)樗幬锏亩靖狈磻?yīng)重而不得不放棄化療；此外，至少半數(shù)以上膠質(zhì)瘤對常用的化療藥物耐藥。因此，與對其他腫瘤的治療相比，目前臨床上更缺乏對膠質(zhì)瘤有效的治療藥物，新型安全高效的化療藥物的開發(fā)是治療該病的迫切需求。毛茛科銀蓮花屬植物在我國分部廣泛，約有50余種，其中已有許多作為藥用，藥用部位主要為其發(fā)達(dá)的根狀莖，其中多被銀蓮花的根莖為《中華人民共和國藥典》收載的傳統(tǒng)中藥兩頭尖，有祛風(fēng)濕和消癰腫的功效，用于風(fēng)寒濕痹、四肢拘攣、骨節(jié)疼痛和癰腫潰爛， 本屬的常用藥材還有地烏(林蔭銀蓮花根莖)和九節(jié)菖蒲(阿爾泰銀蓮花根莖)。迄今已有10余種該屬植物化學(xué)成分和藥理活性的研究報(bào)道，共分離鑒定了包括抗癌活性成分竹節(jié)香附素A等以三萜皂苷為主的100多個(gè)化學(xué)成分，其中約有70個(gè)為從該屬植物中首先發(fā)現(xiàn)的新化合物。大量研究表明，從銀蓮花屬植物中分離得到的三萜皂苷類化合物具有抗腫瘤、抗炎、抗驚厥、鎮(zhèn)痛和抑菌等作用。太白銀蓮花(Anemone taipaiensis)為陜西省特有的銀蓮花屬植物，有關(guān)該植物化學(xué)成分及藥理活性的研究尚未見報(bào)道。本課題為首次對其化學(xué)成分進(jìn)行研究，并對分離得到的化合物進(jìn)行抗腫瘤藥理活性的篩選，為進(jìn)一步開發(fā)利用該植物提供參考，也為開發(fā)這一陜西省特有藥用植物資源提供科學(xué)依據(jù)。我們從采自太白銀蓮花中分離鑒定了 30種三萜皂苷，深入的藥理研究表明，這些三萜皂苷類化合物多數(shù)具有顯著的腫瘤細(xì)胞毒性。其中一種新化合物3 β-ο-{ β-D-xylopy ranosyl-(l — 3)- α -L-rhamnopyranosyl- (1 — 2) - [ β -D-glucopyranosyl- (1 — 4) ] - α -L~ara binopyranosyl} hederagenin對人膠質(zhì)瘤U-251MG細(xì)胞有顯著的細(xì)胞毒性，IC5tl值與臨床常用于惡性腦腫瘤治療的鹽酸尼莫司汀接近，但不影響原代培養(yǎng)的人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生長。該化合物即下述式I所示化合物。其化學(xué)結(jié)構(gòu)以及對K-562人白血病細(xì)胞和BEL-7402人肝癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性已由我們報(bào)道(Xiao-YangWang1，Xiao-Li Chen1*，Hai-Feng Tang1, Hui Gao2, Xiang-Rong Tian3, Ping-Hu Zhang4Cytotoxic Triterpenoid Saponins from the Rhizomes of Anemone taipaiensis. J Planta Med. 2011，23)，但其抗膠質(zhì)瘤活性尚未見有過文獻(xiàn)報(bào)道和專利申請。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在提供提取自太白銀蓮花的三萜類化合物在制備抗膠質(zhì)瘤藥物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物，其特征在于，它的分子式為C52H84O21，式I所示化合物
權(quán)利要求
1.從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物，其特征在于該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物，其特征是該化合物XRGA的制備方法是取太白銀蓮花干燥根莖^g，粉碎后以70 %乙醇加熱回流提取，提取液過濾并合并為總提取物?？偺崛∥餄饪s干燥得650g，將其分散于8L水中，再依次用石油醚脫脂、水飽和正丁醇萃取，分別得到15g石油醚和IlOg正丁醇兩個(gè)萃取部位；IlOg正丁醇層進(jìn)行硅膠柱層析，洗脫劑CHCl3 MeOH H2O的體積比為30 1 0-6 4 0. 8， 取Ilg層析后物質(zhì)再次硅膠柱層析，洗脫劑CHCl3 n-BuOH的體積比為6 1-1 3，此后的1.5g層析后物質(zhì)，用kphadexLH-20進(jìn)行純化，MeOH洗脫，最后經(jīng)高效液相色譜儀分離純化，體積比為87 13的甲醇-水混合溶劑為流動(dòng)相洗脫，得式I化合物XRGA的純品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物，其特征是所述的從太白銀蓮花中提取分離式I化合物XRGA的方法，除應(yīng)用常規(guī)的溶劑提取、溶劑萃取和各種色譜分離技術(shù)外，在應(yīng)用硅膠柱層析方法從總苷提取物制備總?cè)圃碥諘r(shí)，對于包含有 XRGA的總?cè)祁愒碥盏拇_定是采用如下手段來檢查的以硅膠薄層層析檢測，采用體積比為12 3 5的正丁醇-乙酸-水混合溶劑或體積比為15 4 1的氯仿-甲醇-水混合溶劑展開，收集&值在0. 15 0. 2處顯示紫紅色斑點(diǎn)的流份，即為太白銀蓮花總皂苷。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從太白銀蓮花提取的三萜皂苷類化合物，其特征是所述的式I化合物XRGA可以單獨(dú)使用或與其他輔料混合，配制成在臨床上使用不同劑型，如注射劑、或散劑、或丸劑、或膠囊劑、或片劑、或微囊劑、或軟膠囊劑、或膜劑、或膏劑、或酊劑、或顆粒劑、或氣霧劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種三萜皂苷類化合物，分子式為C52H84O21，化學(xué)名稱為3β-O-{β-D-吡喃木糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖}常春藤皂苷元(3β-O-{β-D-xylopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl}hederagenin)。體外抗腫瘤試驗(yàn)表明，該化合物對C6大鼠惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞以及U87MG、U251MG、BT325和SHG44四種人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用，而不影響原代培養(yǎng)的人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生長。該化合物可望用于制備治療膠質(zhì)瘤的藥物。
文檔編號A61P35/02GK102295678SQ20111018208
公開日2011年12月28日 申請日期2011年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月30日
發(fā)明者曹軍, 李華, 楊志福, 湯海峰, 王嘯洋, 程光 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)