專利名稱：芭蕉根提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及芭蕉根提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應用，屬于中藥提取物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種由于胰島素分泌缺陷及(或)其生物學作用障礙引起的以高血糖為特征的代謝性疾病。該病僅次于腫瘤和心腦血管病，被列為世界第三大疾病。目前，全球約有3億6千萬人罹患11型糖尿病，占全球60億人口的6 %，約每5秒就有一人罹患糖尿病，每10秒就有一人因糖尿病死亡。我國已成為全球糖尿病患病率增長最快的國家之一。2002年全國營養(yǎng)與健康狀況調(diào)查顯示，我國約有糖尿病患者2000多萬， 另有近2000萬糖耐量低減者。2010年發(fā)布的由中華醫(yī)學會糖尿病學分會開展的中國14省市糖尿病和代謝綜合征調(diào)查結(jié)果顯示，在部分大城市，糖尿病患病率水平已經(jīng)達到10 %。糖尿病需要終身監(jiān)測及治療，如果不能得到良好的控制，高血糖帶來的微血管和大血管并發(fā)癥，將導致患者繼發(fā)心血管疾病、血脂異常、失明、卒中、腎功能衰竭和截肢等嚴重并發(fā)癥， 嚴重危害人的健康和生命。目前臨床上用于治療糖尿病的藥物主要有胰島素、胰島素類似物、磺酰脲類、雙胍類、噻唑烷二酮類等，但多存在一定的局限性和不良反應，如體重增加、致低血糖、心衰、乳酸性酸中毒，長期使用引起并發(fā)癥等。而傳統(tǒng)的胰島素控制血糖并不能達到理想效果。胰島素是機械降糖，甚至可以把血糖降為零。即使現(xiàn)在有流行的胰島素泵，也不能從根本上解決問題。因此，從具有治療慢性病、常見病和疑難雜癥的獨特作用不斷凸顯的中藥及民族藥中研制出安全、有效的原創(chuàng)性抗糖尿病新藥是國內(nèi)外醫(yī)藥市場和社會的迫切需求。2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》收載的苗藥芭蕉根為芭蕉科植物芭蕉Musa bas joo Sieb. et Zucc.的根莖，具有清熱解毒，止渴利尿之功效，主治天行熱病、 煩悶、消渴、黃疸、水腫等。在貴州黔東南苗族地區(qū)稱為嘎腦修，各苗鄉(xiāng)侗寨均有栽培，為苗族地區(qū)用于清熱解毒、止渴的習用藥材。發(fā)明人對苗藥芭蕉根功能與主治的本草學研究發(fā)現(xiàn)，其治療消渴癥歷史悠久，在《日華子本草》、《本草綱目》、《本草從新》、《太平圣惠方》、《浙江藥用植物志》及《中國植物志》等歷代本草中就有記載其鮮品治消渴癥(糖尿病)。目前僅見貴州制藥企業(yè)將苗藥芭蕉根與其他藥材配伍開發(fā)了“骨康膠囊”、“腫痛舒噴霧劑”等制劑，主要用于治療骨折、骨質(zhì)疏松、骨性關(guān)節(jié)炎等。芭蕉根含皂苷、多糖、揮發(fā)油及少量的香豆素、黃酮類化合物，張倩等從芭蕉根醋酸乙酯部位分離得到化合物2' ,3,4'-三羥基黃麗，3,3' -bis-hydroxyanigorufone, irenolone, 2,4-dihydroxy-9- (4' -hydroxypheny 1)- 1^皿1611-01^和3，4-二羥基苯甲醛。其中化合物2' ,3,4'-三羥基黃酮，irenolone 和3，4- 二羥基苯甲醛具有體外抗氧化活性。3，3' -bis-hydroxyanigorufone和2，4_dih ydroxy-9-(4' -hydroxyphenyl) -phenalen-one 具有體夕卜 α -葡萄糖苷酶抑制活性。錢海兵等報道芭蕉根石油醚和正丁醇提取物可以明顯減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和棉球肉芽腫的重量，對角叉菜膠所致的小鼠足腫脹也有明顯的抑制作用；芭蕉根乙醇提取物和水提取物對醋酸所致小鼠扭體反應有較好的抑制作用。魏金鳳等采用紙片擴散法測定不同提取部位的最低抑菌濃度(MIC)來研究芭蕉根和芭蕉花不同提取部位對金黃色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)和β -內(nèi)酰胺酶陽性的金黃色葡萄球菌(ESBLs)的抑菌活性，抑菌活性大小順序為芭蕉根石油醚部位>芭蕉花石油醚部位 >芭蕉根正丁醇部位。但芭蕉根鮮品治療糖尿病作用具體與哪些成分或哪些部位有關(guān)，目前尚不是很清楚，因此有必要深入研究芭蕉根鮮品抗糖尿病有效部位，從而指導開發(fā)療效更為顯著的新藥制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供芭蕉根提取物的制備方法及其產(chǎn)品和在制藥中的應用。 采用本發(fā)明方法獲得的提取物成分明確，藥理活性明顯，性能穩(wěn)定、安全可靠，可用于制備治療糖尿病的藥物，其療效顯著。本發(fā)明的技術(shù)方案芭蕉根提取物的制備方法包括以下步驟Α、將鮮品芭蕉根切片、搗碎，用榨汁機榨汁，汁液用正丁醇萃取，減壓濃縮，干燥， 得提取物X ； B、將步驟A所得正丁醇萃取浸膏用水溶解，上大孔吸附樹脂柱，分別用2 7倍柱體積的水、30 % 70 %乙醇洗脫，棄掉水洗脫液，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得提取物Y。優(yōu)選的芭蕉根提取物的制備方法包括以下步驟Α、將鮮品芭蕉根切片、搗碎，先用0 95%乙醇浸泡提取4 6次，再將殘渣榨汁， 合并醇提液與榨汁液，減壓濃縮至無醇味，直接用水分散或干燥后用水分散，再用正丁醇萃取，減壓濃縮，干燥，得提取物X ；B、將步驟A所得正丁醇萃取浸膏用水溶解，上大孔吸附樹脂柱，分別用2 7倍柱體積的水、50%乙醇洗脫，棄掉水洗脫液，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得提取物Y。前述步驟A及步驟B中所述減壓濃縮在25°C 75°C條件下進行，所述干燥在 25°C 75°C或-25°C -55 °C條件下進行。前述步驟A及步驟B中所述干燥采用真空減壓干燥、常壓干燥、冷凍干燥或噴霧干
O前述步驟A中乙醇浸泡提取溫度為10°C 75°C。前述芭蕉根提取物的制備方法制備得到的提取物X或提取物Y。如上所述的芭蕉根提取物X或提取物Y在制備治療糖尿病的藥物中的應用。為了驗證本發(fā)明所述芭蕉根提取物的活性效果，發(fā)明人對其進行了相關(guān)的試驗研究，具體如下一、提取物定性鑒別及含量測定經(jīng)特征顯色反應、薄層層析及紫外檢測，鮮品芭蕉根的30%乙醇(提取物Y-1)、 50%乙醇(提取物YD、70%乙醇洗脫物(提取物YD主要含皂苷和酚類成分。建立紫外-分光光度法測定芭蕉根30% 70%乙醇洗脫物(提取物Y)中總皂苷和總酚類成分含量
用香草醛-冰乙酸-高氯酸顯色法，在M3nm下測定紫外吸收值，用齊墩果酸作為對照品，樣品不加顯色劑為空白。十二烷基磺酸鈉-鐵氰化鉀-三氯化鐵顯色法，在745nm下測定紫外吸收值，用沒食子酸作為對照品，樣品不加顯色劑為空白。結(jié)果用紫外-分光光度法可以檢測、監(jiān)控芭蕉根30% 70%乙醇洗脫物的質(zhì)量 (總皂苷和總酚類成分含量總和50% 70% )。二、芭蕉根榨汁液不同部位提取物對糖尿病小鼠血糖的影響1、供試藥液的制備取芭蕉根(不用乙醇提取直接榨汁的)榨汁液，依次用石油醚(60 90°C)、乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓濃縮各萃取液分別得到石油醚浸膏(A)，乙酸乙酯浸膏(B)，正丁醇浸膏(C、相當于提取物X)。1. 1榨汁液石油醚部位高、低劑量組藥液的制備取石油醚浸膏(A)適量，加少量吐溫-80研磨助溶于純凈水中，配置成10mg/ml的石油醚提取物溶液。高劑量組按0. 2ml/10g體積給藥；低劑量組將高劑量溶液稀釋一倍后按同等體積給藥。1. 2榨汁液乙酸乙酯部位高、低劑量組藥液的制備取乙酸乙酯浸膏⑶適量，加少量吐溫-80研磨助溶于純凈水中，配置成10mg/ml 的乙酸乙酯提取物溶液。高劑量組按0. 2ml/10g給藥；低劑量組將高劑量溶液稀釋一倍后按同等體積給藥。1. 3榨汁液正丁醇部位高、低劑量組藥液的制備取正丁醇浸膏(C)適量，加少量吐溫-80研磨助溶于純凈水中，配置成10mg/ml的正丁醇提取物溶液。高劑量組按0. 2ml/10g給藥；低劑量組將高劑量溶液稀釋一倍后按同等體積給藥。2、不同部位提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響2. 1模型復制昆明種小白鼠，6-8周齡，體重18_22g，雄性，小鼠禁食不禁水12h 后，斷尾取尾靜脈血，用強生穩(wěn)豪血糖儀測定空腹血糖值，作為造模前血糖。血糖值均在正常范圍之內(nèi)。表明小鼠基礎血糖合格，隨機取10只小鼠定為空白對照組。將剩余的小鼠禁食不禁水Ia1后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理鹽水溶液，正常喂食給水。當晚再次禁食不禁水1 后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理鹽水溶液，正常喂食給水。正常喂養(yǎng)7 后，尾靜脈取血，用強生穩(wěn)豪血糖儀測定空腹血糖(測定前禁食不禁水12h)，以血糖值超過 10. Ommol者為造模成功。2. 2分組及給藥造模成功的小鼠80只，隨機分為8組，每組10只；分別為模型組、 芭蕉根榨汁液石油醚部位(A)高劑量組、芭蕉根榨汁液石油醚部位(A)低劑量組、芭蕉根榨汁液乙酸乙酯部位(B)高劑量組、芭蕉根榨汁液乙酸乙酯部位(B)低劑量組、芭蕉根榨汁液正丁醇部位(C)高劑量組、芭蕉根榨汁液正丁醇部位(C)低劑量組、二甲雙胍陽性對照組。 加上空白對照組10只，共9組。分別給藥2周(空白對照組和模型組給予相同體積的純凈水)，經(jīng)禁食不禁水1 后，尾靜脈取血用強生穩(wěn)豪血糖儀測小鼠空腹血糖。結(jié)果見表1。表1榨汁液不同部位提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響
權(quán)利要求
1.芭蕉根提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟A、將鮮品芭蕉根切片、搗碎，用榨汁機榨汁，汁液用正丁醇萃取，減壓濃縮，干燥，得提取物X;B、將步驟A所得正丁醇萃取浸膏用水溶解，上大孔吸附樹脂柱，分別用2 7倍柱體積的水、30% 70%乙醇洗脫，棄掉水洗脫液，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得提取物Y。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述芭蕉根提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟A、將鮮品芭蕉根切片、搗碎，先用0 95%乙醇浸泡提取4 6次，再將殘渣榨汁，合并醇提液與榨汁液，減壓濃縮至無醇味，直接用水分散或干燥后用水分散，再用正丁醇萃取， 減壓濃縮，干燥，得提取物X ；B、將步驟A所得正丁醇萃取浸膏用水溶解，上大孔吸附樹脂柱，分別用2 7倍柱體積的水、50%乙醇洗脫，棄掉水洗脫液，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得提取物Y。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述芭蕉根提取物的制備方法，其特征在于步驟A及步驟B中所述減壓濃縮在25°C 75 °C條件下進行，所述干燥在25°C 75°C或_25°C _55°C條件下進行。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述芭蕉根提取物的制備方法，其特征在于步驟A及步驟B中所述干燥采用真空減壓干燥、常壓干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述芭蕉根提取物的制備方法，其特征在于步驟A中乙醇浸泡提取溫度為10°c 75°C。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述芭蕉根提取物的制備方法制備得到的提取物X或提取物Y。
7.如權(quán)利要求6所述的芭蕉根提取物X或提取物Y在制備治療糖尿病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了芭蕉根提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應用，其制備方法為將鮮品芭蕉根切片、搗碎，用榨汁機榨汁，汁液用正丁醇萃取，減壓濃縮，干燥，得提取物X；或?qū)⒄〈驾腿〗嘤盟芙猓洗罂孜綐渲?，分別用2～7倍柱體積的水、30％～70％乙醇洗脫，棄掉水洗脫液，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得提取物Y。本發(fā)明從芭蕉根中提取出具有降血糖作用(活性)的提取物，其成分明確，藥理活性明顯，性能穩(wěn)定、安全可靠，以該提取物為主要成分可加工制成適宜的藥物制劑用于治療糖尿病，經(jīng)藥效學驗證其療效顯著；本發(fā)明提取物原料來源易得，制備工藝易于產(chǎn)業(yè)化，帶動了少數(shù)民族地區(qū)藥材資源的充分開發(fā)與利用。
文檔編號A61P3/10GK102228574SQ20111018313
公開日2011年11月2日 申請日期2011年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月30日
發(fā)明者吳紅梅, 李雨生, 王祥培, 許士娜, 郝俊杰, 錢海兵, 靳鳳云 申請人:貴陽中醫(yī)學院