專利名稱：一種抗癲癇的藥物、其制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三七葉總皂苷的新用途，具體地，本發(fā)明涉及三七葉總皂苷的抗癲癇用途及其在制備抗癲癇藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
三七(Panax notoginseng (Burk) F. H. Chen)為五加科植物，是我國(guó)的傳統(tǒng)珍貴藥材，以干燥的根入藥。近年來(lái)的研究認(rèn)為三七葉亦可作藥用，其活性成份為葉總皂苷提取物 (PnGL)。七葉神安片(三七葉皂苷片)系以三七葉皂苷為原料制成的中藥制劑，其主要藥理作用為安神、鎮(zhèn)痛、降脂、消炎和抗腫瘤等。目前臨床上主要是精神科應(yīng)用以益氣安神最多，其它科應(yīng)用較少。近年從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中獲得的結(jié)果顯示，三七葉制劑具有顯著的中樞抑制性，能增強(qiáng)硫噴妥鈉、戊巴比妥鈉等的鎮(zhèn)靜催眠作用，并對(duì)抗咖啡因引起的興奮作用。三七葉總皂苷能顯著增強(qiáng)小鼠學(xué)習(xí)和記憶能力，改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，提高海馬內(nèi) ACh的含量以及大腦皮質(zhì)內(nèi)NE、DA和5-HT的含量。此外，三七皂甙還能使大鼠腦缺血后再灌注水腫明顯減輕，改善血腦屏障通透性，增加局部血流量，起保護(hù)腦的作用。
目前以三七葉提取物為主要成份上市的藥物有七葉神安片(藥品標(biāo)準(zhǔn)收載于中國(guó)藥典2010年版一部)、七葉神安分散片、七葉神安滴丸等，其臨床應(yīng)用功能為益氣安神、 活血止痛，用于心氣不足、心血瘀陰所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶。而有關(guān)三七葉總皂苷的抗癲癇作用的研究報(bào)道尚少。
癲癇又俗稱羊羔風(fēng)，是由于腦細(xì)胞過(guò)度放電所引起的反復(fù)發(fā)作的突然而短暫的腦功能失調(diào)，表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)、意識(shí)、植物神經(jīng)、精神等不同障礙，或可兼而有之。臨床上以突然意識(shí)喪失，發(fā)則仆倒、四肢抽搐、口吐涎沫或口中怪叫，蘇醒時(shí)一如常人為主要表現(xiàn)。
癲癇系多發(fā)病之一，在我國(guó)發(fā)病率約為37/10萬(wàn)，患病率為3%。 7%0。我國(guó)現(xiàn)有癲癇患者近600萬(wàn)，且以27萬(wàn)/ 年的速率增長(zhǎng)。本病常在兒童期和青春期發(fā)病，因病程長(zhǎng)， 給患者帶來(lái)的痛苦很大。
一般認(rèn)為，癲癇的發(fā)病率和年齡有關(guān)。主要是少年時(shí)代發(fā)病，隨年齡增長(zhǎng)發(fā)病人數(shù)逐年減少，30歲以前發(fā)病者占66%，50歲以上發(fā)病者不及15%。癲癇不同發(fā)作類型的發(fā)病率有年齡依賴性。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，幼年期的高發(fā)病率主要是由于產(chǎn)傷、新生兒窒息、先天畸形等多種原因所致。成年及中年人大約穩(wěn)定在20 40/10萬(wàn)人的水平。不同年齡階段其發(fā)作類型也不一樣，如嬰兒痙攣僅見于嬰兒期癲癇。典型失神發(fā)作雖然反映了可能是持續(xù)終身的原發(fā)性全身性癲癇，但超出兒童期和青春期是很少見的。
目前，市場(chǎng)上主要的抗癲癇藥物副作用比較多，常見的主要是對(duì)血液細(xì)胞的抑制， 包括白細(xì)胞下降，血小板下降或者是貧血；對(duì)內(nèi)臟的影響，常常是肝、腎功能的改變，還有中樞神經(jīng)系統(tǒng)的改變、消化道的刺激，以及新生兒無(wú)論在死亡率和發(fā)病率都有增加，也包括先天性畸形的發(fā)病率等。會(huì)出現(xiàn)嗜睡乏力、視力模糊以及記憶力受損等副作用，而且還存在停藥反跳、耐藥、依賴等現(xiàn)象，給疾病的治療帶來(lái)不利的影響。發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是，提供一種預(yù)防和/或治療癲癇的藥物及其制備方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是，提供三七葉總皂苷在抗癲癇中的新用途。
本發(fā)明的目的是采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
一種預(yù)防和/或治療癲癇的藥物，其為包含活性成分三七葉總皂苷的單位劑型形式，所述單位劑型為每單位包含O. 50 3g的三七葉總皂苷，優(yōu)選為I. O 2. 9g的三七葉總皂苷，更優(yōu)選為2. O 2. 9g的三七葉總皂苷。
優(yōu)選地，所述藥物的劑型選自口服制劑、腸胃外給藥制劑、局部和吸入式給藥制劑和透皮制劑。
優(yōu)選地，所述劑型為選自如下的口服制劑片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴劑，果汁劑或糖漿劑。
優(yōu)選地，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體或添加劑。
優(yōu)選地，所述藥學(xué)上可接受的載體或添加劑選自崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、填充劑、溶劑、香料、甜味劑、抗氧化劑、表面活性劑、防腐劑、矯味劑和色素。
本發(fā)明還提供了制備上述藥物的方法，所述方法包括取活性成分三七葉總皂苷O.50 3g，優(yōu)選為I. O 2. 9g，更優(yōu)選為2. O 2. 9g，與適量藥學(xué)上可接受的載體或添加劑混合，制成單位劑型，即得。
另一方面，本發(fā)明還提供了三七葉總皂苷在制備預(yù)防和/或治療癲癇的藥物中的用途。
優(yōu)選地，所述癲癇包括部分性發(fā)作癲癇和全身性發(fā)作癲癇。
優(yōu)選地，所述三七葉總皂苷的應(yīng)用有效劑量范圍為8. Omg/kg體重/日 51. 2mg/ kg體重/日；更優(yōu)選為16mg/kg體重/日 48mg/kg體重/日；更優(yōu)選為32mg/kg體重/ 日 48mg/kg體重/日。
又一方面，本發(fā)明還提供了一種在有需要的受試者中治療癲癇的方法，所述方法包括向受試者給予治療有效量的三七葉總皂苷或者包含三七葉總皂苷的藥物。
優(yōu)選地，所述癲癇包括部分性發(fā)作癲癇和全身性發(fā)作癲癇。
優(yōu)選地，所述三七葉總皂苷或者包含三七葉總皂苷的藥物的治療有效量范圍以三七葉總阜苷計(jì)，為8. Omg/kg體重/日 51. 2mg/kg體重/日；更優(yōu)選為16mg/kg體重/ 日 48mg/kg體重/日；更優(yōu)選為32mg/kg體重/日 48mg/kg體重/日。
綜上所述，鑒于目前已有抗癲癇藥物的缺陷，本發(fā)明人經(jīng)過(guò)深入研究發(fā)現(xiàn)，三七葉總皂苷具備抗癲癇的作用。本發(fā)明通過(guò)建立三種癲癇模型動(dòng)物，測(cè)試了三七葉總皂苷對(duì)動(dòng)物的行為表現(xiàn)和腦電圖的影響。動(dòng)物行為表現(xiàn)的結(jié)果表明三七葉總皂苷具有顯著的抗癲癇療效，能夠明顯地抗驚厥，降低死亡率，延長(zhǎng)驚厥潛伏期，且降低發(fā)作等級(jí)。腦電圖分析結(jié)果顯示，不同劑量組的三七葉總皂苷均可使癇樣波頻率及幅度下降，并隨著給藥濃度的增加呈一定的劑量依賴性。據(jù)此，本發(fā)明提供了一種高效無(wú)毒的抗癲癇藥物，在預(yù)防和/或治療癲癇中具有良好的應(yīng)用前景。


以下，結(jié)合附圖來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方案，其中
圖I為實(shí)施例I中三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠驚厥潛伏期的影響。和 “**”分別表示與模型組相比，P < O. 05和P < O. 01。
圖2為實(shí)施例I中三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠Θ波所占比率的影響。表示與模型組相比，P < O. 05。
圖3為實(shí)施例I中三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠100 μ V以上波的頻率的影響。 表示與模型組相比，P < O. 05。
圖4為實(shí)施例2中三七葉總皂苷對(duì)電刺激模型小鼠死亡率的影響。和分別表示與模型組相比，P < O. 05和P < O. 01。
圖5為實(shí)施例3中三七總皂苷對(duì)鋰-匹羅卡品模型大鼠第一次發(fā)作持續(xù)時(shí)間的影響。表示與模型組相比，P < O. 01。
圖6為實(shí)施例3中三七總皂苷對(duì)鋰-匹羅卡品模型大鼠驚厥潛伏期的影響。 表示與模型組相比，P < 0.01。
圖7為實(shí)施例3中三七總皂苷對(duì)鋰-匹羅卡品模型大鼠發(fā)作次數(shù)(彡III級(jí))的影響。表示與模型組相比，P < O. 01。
圖8為實(shí)施例3中三七總皂苷對(duì)鋰-匹羅卡品模型大鼠Θ波所占比率的影響。 表示與模型組相比，P < O. 05。
圖9為實(shí)施例3中三七總皂苷對(duì)鋰-匹羅卡品模型大鼠100 μ V以上波的頻率的影響。表示與模型組相比，P < 0.01。
具體實(shí)施方式
以下參照具體的實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，其不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
以下各實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，Sprague Dawley(SD), SPF級(jí),購(gòu)自中山醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK(粵)2004-0011 ;昆明種小鼠，SPF級(jí)，購(gòu)自中山醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK(粵)2004-0011。
以下各實(shí)施例中所使用的測(cè)試藥物三七葉總皂苷，由廣東省環(huán)球制藥集團(tuán)提供， 實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水分別配制成不同濃度的透明溶液。陽(yáng)性藥物卡馬西平以及青霉素粉劑均購(gòu)自中山醫(yī)學(xué)院，實(shí)驗(yàn)前將陽(yáng)性藥物片劑研磨成粉，加入蒸餾水配制成懸濁液，灌胃前搖勻。 氯化鋰、匹羅卡品購(gòu)自廣州威佳科技有限公司。
實(shí)施例I三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠的影響
本實(shí)施例為測(cè)試三七葉總皂苷(PNS)對(duì)癲癇模型動(dòng)物——青霉素模型大鼠的影響，具體詳述如下。
I.動(dòng)物行為表現(xiàn)
取SD大鼠90只，體重100_150g，雌雄各半。按體重隨機(jī)分6組，分別是模型組、PNS 低濃度組(54mg/kg體重/日)、PNS中濃度組(108mg/kg體重/日)、PNS高濃度組(216mg/ kg體重/日)、卡馬西平組(36mg/kg體重/日)及卡馬西平和PNS低濃度聯(lián)合組(36mg/kg 體重/日+54mg/kg體重/日)連續(xù)給藥三天后，開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)當(dāng)天給藥一小時(shí)后按800萬(wàn)U/kg腹腔注射青霉素，觀察其行為并攝像記錄， 觀察時(shí)間為I小時(shí)，之后使用BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(購(gòu)自成都泰盟電子有限公司)進(jìn)行腦電記錄I小時(shí)。
腹腔注射青霉素后，大鼠逐漸表現(xiàn)為兩前肢前伸，身體靜止不動(dòng)，大約經(jīng)歷5 30 分鐘的潛伏期后開始出現(xiàn)顏面肌抽搐，隨后很快表現(xiàn)為反復(fù)點(diǎn)頭或洗臉，并逐漸加重以至擴(kuò)展到前肢和后肢，出現(xiàn)發(fā)作性四肢及全身強(qiáng)直，背部弓起，尾巴強(qiáng)直上翹，并有尖叫，最后跌倒，常有尿失禁。發(fā)作程度和頻率在注射青霉素后30分鐘左右達(dá)到高峰，I小時(shí)以后發(fā)作次數(shù)逐漸減少，2小時(shí)后發(fā)作基本停止。整個(gè)發(fā)作以強(qiáng)直、陣攣表現(xiàn)為主。
根據(jù)Racine 的標(biāo)準(zhǔn)(Racine RJ. Modification of seizure activity by electrical stimulation :II motor seizure. Electroenceph Clin Neurophysiol,1972, 32 :281-294) :0級(jí)，無(wú)明顯反應(yīng)；I級(jí)，節(jié)律性面部抽動(dòng)；11級(jí)，點(diǎn)頭或濕狗樣抖動(dòng)、搔抓； III級(jí)，單肢抽動(dòng)；IV級(jí)，多肢抽動(dòng)或強(qiáng)直^級(jí)，全面性強(qiáng)直-陣攣發(fā)作。)對(duì)大鼠發(fā)作的情況比較如下
I)模型組大鼠腹腔注射青霉素后，發(fā)作均能達(dá)到III級(jí)以上，成功致癇，其癇性發(fā)作程度基本為IV-V級(jí)，潛伏期為5. 7±4. 5分鐘，死亡數(shù)7只，死亡率為58. 3%。
2)PNS中濃度組和高濃度組均有明顯的抗青霉素驚厥的作用，能顯著降低死亡率 (結(jié)果見表I)、延長(zhǎng)驚厥潛伏期(結(jié)果見圖I)、降低發(fā)作等級(jí)(結(jié)果見表2)，作用效果與卡馬西平相近。
表I三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠驚厥潛伏期及死亡率的影響
劑量(mg / k g) η 死亡數(shù)(只) 死亡率(%) 潛伏期(分鐘) 模型組-12 758. 35. 7 ±4. 5PNS 低濃度組5412 325. O14. 8 ±13. 4* PNS 中濃度組10813 215. 4*19. 4 ±14. 4#PNS 高濃度組21613 I7. I** 22. 4 ±17. 2#卡馬西平組3612 425. O27. 4 ±18. 8#卡馬西平+PNS 低濃度組 36+5413 215.4*26. 6 ±15. 7**
注與模型組相比，表示P < 0.05，“**”表示？< 0.01
表2三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠癲癇發(fā)作程度的影響
ηO級(jí)I級(jí)II級(jí)III級(jí) IV級(jí)V級(jí)模型組12156PNS 低濃度組12I15311**PNS 中濃度組13225II2**PNS 高濃度組13225202**卡馬西平組12325101**卡馬西平+PNS低濃度組 13423103**
注:與模型組相比，表示P < O. 05，“**”表示P < 0.01
2.腦電圖分析
在腹腔注射青霉素觀察行為I小時(shí)后，記錄腦電I小時(shí)，分析三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大鼠腦電圖(EEG)頻率的影響。
對(duì)每組以上記錄的I小時(shí)腦電中的20分鐘的頻率進(jìn)行分析，結(jié)果見表3。Θ波作為表征癇樣放電的典型波，在陽(yáng)性藥卡馬西平組中的比率明顯低于模型組，治療效果明顯。 三七葉總皂苷低、中、高劑量組均可使Θ波比率下降，尤其是中劑量組效果甚至超過(guò)卡馬西平組，說(shuō)明三七葉總皂苷有一定的抗癲癇作用，具體結(jié)果如圖2所示。
表3三七葉總皂苷對(duì)青霉素模型大 鼠各種波所占比率的影響
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防和/或治療癲癇的藥物，其為包含活性成分三七葉總皂苷的單位劑型形式。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物，其特征在于，所述單位劑型為每單位包含O.50 3g的三七葉總皂苷，優(yōu)選為所述單位劑型為每單位包含I. O 2. 9g的三七葉總皂苷，更優(yōu)選為所述單位劑型為每單位包含2. O 2. 9g的三七葉總皂苷。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物，其特征在于，所述劑型選自口服制劑、腸胃外給藥制齊U、局部和吸入式給藥制劑和透皮制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于，所述劑型為選自如下的口服制劑片劑、 膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴劑、果汁劑或糖漿劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的藥物，其特征在于，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體或添加劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于，所述藥學(xué)上可接受的載體或添加劑選自 崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、填充劑、溶劑、香料、甜味劑、抗氧化劑、表面活性劑、防腐劑、矯味劑和色素。
7.制備權(quán)利要求I至6中任一項(xiàng)所述藥物的方法，其特征在于，所述方法包括取活性成分三七葉總皂苷O. 50 3g，優(yōu)選為I. O 2. 9g，更優(yōu)選為2. O 2. 9g，與適量藥學(xué)上可接受的載體或添加劑混合，制成單位劑型，即得。
8.三七葉總皂苷在制備預(yù)防和/或治療癲癇的藥物中的用途。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述癲癇包括部分性發(fā)作癲癇和全身性發(fā)作癲癇。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述三七葉總皂苷的有效劑量范圍為8. Omg/kg體重/日 51. 2mg/kg體重/日；更優(yōu)選為16mg/kg體重/日 48mg/kg體重 /日；最優(yōu)選為32mg/kg體重/日 48mg/kg體重/日。
全文摘要
本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療癲癇的藥物，其為包含活性成分三七葉總皂苷的單位劑型形式，所述單位劑型為每單位包含0.50～3g的三七葉總皂苷。本發(fā)明還提供了三七葉總皂苷在制備抗癲癇的藥物中的用途。本發(fā)明所提供的藥物具有顯著的抗癲癇療效，能夠明顯的抗驚厥、降低死亡率、延長(zhǎng)驚厥潛伏期、降低發(fā)作等級(jí)，是一種高效無(wú)毒的抗癲癇藥物，在預(yù)防和/或治療癲癇中具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61P25/08GK102872176SQ201110193889
公開日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2011年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月12日
發(fā)明者向飛軍, 項(xiàng)輝, 黃掌欣 申請(qǐng)人:廣東環(huán)球制藥有限公司, 中山大學(xué)