專利名稱：一類新型的akt/pkb激酶激動劑的獲得及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類新型的AKT/PKB激酶激動劑的獲得及其用途。其技術(shù)特征在于利用高通量Cytoblot篩選方法，對華北制藥新藥研究開發(fā)公司1693種含微生物來源的代謝單體化合物進行篩選，發(fā)現(xiàn)一種可以顯著激活AKT/PKB激酶磷酸化的單體化合物；通過 UV衍射，HPLC分析，NMR解碼，鑒定該化合物為阿扎霉素B (Elaiophylin)；并發(fā)現(xiàn)其衍射物 11-0-monomethylelaiophylin和Efomycin同樣可以顯著激活AKT/PKB激酶的活性。在GK 大鼠糖尿病模型中，發(fā)現(xiàn)阿扎霉素B可以激活GK大鼠心肌細胞和腎臟細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及下游靶點，并顯著改善GK大鼠心臟功能和腎臟功能。同時在裸鼠皮下瘤模型中， 該化合物盡管可以激活皮下瘤AKT/PKB磷酸化的水平，但并不促進腫瘤的生長。專利內(nèi)容屬于糖尿病治療領(lǐng)域。二、背景資料糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)是一種多病因的慢性內(nèi)分泌代謝疾病，伴隨著胰島β細胞胰島素分泌及(或)作用缺陷所引起的糖脂和蛋白質(zhì)代謝紊亂。據(jù)2009年國際糖尿病聯(lián)盟公布的資料，全世界成年糖尿病患者人數(shù)約有2億8千萬，其中2型糖尿病患者的人數(shù)占整個糖尿病患者90%以上，據(jù)其預測到2030年，全世界罹患糖尿病的人數(shù)預計會達到4億3千萬；2010年，我國學者在新英格蘭雜志最新報道，據(jù)流行病學資料預測我國患者目前已達9240萬以上，而且發(fā)病人數(shù)正以驚人的數(shù)目增長。糖尿病已是繼心腦血管病和腫瘤之后，危害人類生命健康的重大疾病。伴隨著糖尿病的進程，人體內(nèi)的代謝紊亂如得不到較好的控制，將會導致視力受損甚至喪失，糖尿病心肌損害，腎臟損害，神經(jīng)退行性病變和微血管病變等多種難以治愈的并發(fā)癥，甚至導致死亡。特別是2型糖尿病的心血管并發(fā)癥之一一一糖尿病心肌病已成為老年糖尿病患者死亡的主要原因。目前用于2型糖尿病的治療藥物除了 hsulin、雙胍類、磺脲類、α-糖苷類抑制劑和噻唑烷二酮類外；針對糖尿病復雜的病理生理特點，同時出現(xiàn)了多種新型的小分子靶向藥物，包括DPP-4抑制劑(dipeptidyl peptidase-4 inhibitor), GLP-1 受體拮抗劑(glucagon-like peptide-1 receptor agonists), SGLT 抑制劑(sodium-glucose co-transporter inhibitor), CBl 抑制劑(carmabinoid receptor 1)等，它們都在不同程度上對糖尿病的癥狀和進程起到了改善和控制的作用。AKT/PKB激酶是細胞信號通路中一個非常關(guān)鍵的中心節(jié)點，它能感受諸如胰島素、胰島素樣生長因子等細胞內(nèi)外多種生長因子和細胞因子刺激，在葡萄糖轉(zhuǎn)運、 糖酵解、蛋白合成、脂質(zhì)合成、糖原合成、糖異生、細胞生存、細胞大小及細胞周期等細胞生物行為中發(fā)揮重要作用。眾多研究提示AKT/PKB激酶有可能在胰島素抵抗和糖尿病的發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用。1、研究證實，AKT/PKB激酶可以調(diào)控胰島素抵抗和糖尿病病理生理進展過程中的多種重要靶分子，譬如可以介導胰島素刺激引起的葡萄糖轉(zhuǎn)運體蛋白GLUT4發(fā)生膜轉(zhuǎn)位， 增加細胞對葡萄糖的吸收；使得eNOS磷酸化，促進胰島素刺激下的舒血管作用，對保護和修復血管內(nèi)皮細胞具有重要意義；抑制GSK33磷酸化，促進糖原合成，有利用為骨骼肌和心肌細胞提供能量并維持血糖濃度；磷酸化轉(zhuǎn)錄因子F0X01，促進胞核中的F0X01轉(zhuǎn)位到胞漿中，抑制胞核中的F0X01啟動下游靶基因；同時有報道，發(fā)現(xiàn)AKT/PKB激酶可以介導糖脂代謝關(guān)鍵基因PPAR- Y的轉(zhuǎn)錄等；2、AKT/PKB基因敲除小鼠(knockout mice)實驗提示，Akt_2缺失的小鼠會出現(xiàn)典型的糖尿病表型，包括胰島素抵抗，高糖血癥，高胰島素血癥和糖耐量減低等。非常有意思的是，在Akt-2缺失的小鼠成纖維細胞中，外源性的表達Akt-2基因后，可以成功恢復細胞對糖的吸收能力；3、在GK糖尿病大鼠模型和2型糖尿病患者的骨骼肌細胞，脂肪細胞，甚至是血管內(nèi)皮細胞中，普遍存在AKT/PKB激酶磷酸化被抑制的現(xiàn)象；但是，目前還未見明確以激活AKT/PKB激酶磷酸化為靶點的藥物在糖尿病中的應用報道。那麼外源性的激活AKT/PKB激酶磷酸化是否真的對胰島素抵抗和糖尿病具有治療價值呢？
三

發(fā)明內(nèi)容
基于以上理論背景和重大的醫(yī)療需求，本發(fā)明將公開一類新型的AKT/PKB激酶激動劑的獲得及其用途。通過該方案獲得的AKT/PKB激動劑可以顯著激活AKT/PKB激酶磷酸化，并可以激活GK糖尿病大鼠心肌細胞和腎臟細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及其下游靶點， 提高GK糖尿病大鼠耐受葡萄糖的能力，有效改善其心臟和腎臟的功能。本發(fā)明的理論基礎(chǔ)基于現(xiàn)有研究對AKT/PKB激酶在糖尿病等代謝性疾病中的重要性的深入認識。在糖尿病模型或糖尿病患者的大多數(shù)胰島素抵抗的組織和細胞中，AKT/ PKB激酶都不能被有效的磷酸化，促使我們尋找一種能夠激活AKT/PKB激酶的小分子激動劑，外源性的激活AKT/PKB激酶磷酸化的活性，恢復其正常的功能。目前這樣的小分子激動劑還未見報道。本發(fā)明提供一類含通式(說明書附圖2B)新型的AKT/PKB激酶的小分子激動劑，將它們用于預防和治療糖尿病心肌病和糖尿病腎病。本發(fā)明具有以下效果1.阿扎霉素B及其衍射物可以在低濃度下顯著激活AKT/PKB激酶磷酸化，是一類含通式(I)的新型的AKT/PKB激酶激動劑；2.阿扎霉素B可以顯著激活GK糖尿病大鼠心肌細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及其下游靶分子，有效改善心肌功能；3.阿扎霉素B可以顯著激活GK糖尿病大鼠腎臟細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及其下游靶分子，有效改善腎臟功能；4.阿扎霉素B并不促進腫瘤生長，隨著濃度升高，反而可以顯著抑制腫瘤細胞生長。
四

附圖1 :Cytoblot方法篩選出阿扎霉素B(Elaiophylin)及Western方法進一步驗證該化合物為AKT/PKB激酶激動劑。圖IA顯示=Cytoblot篩選模型中，阿扎霉素B可以顯著提高AKT(kr473)位點磷酸化水平的熒光信號。用濃度均為500nM陽性藥物雷帕霉素 (Rapamycin)和阿扎霉素B，處理BEAS-2B細胞釙后行Cytoblot檢測熒光信號，各設4個復孔。圖IB顯示阿扎霉素B顯著激活BEAS-2B細胞中AKT/PKB激酶磷酸化。用濃度為500nM的阿扎霉素B處理BEAS-2B細胞，Western檢測不同時間點AKT (Ser473)位點磷酸化水平的變化。圖IC顯示阿扎霉素B的衍射物11-0-monomethylelaiophylin和efomycin 均可以顯著激活BEAS-2B細胞中AKT/PKB激酶磷酸化。以濃度為500nM阿扎霉素為陽性對照，11-0-monomethylelaiophylin 和 efomycin 均選用 500nM 處理 BEAS-2B 細胞不同的時間，Western檢測其對AKT 6er473)位點磷酸化水平的影響。附圖2 阿扎霉素B結(jié)構(gòu)圖及其衍射物結(jié)構(gòu)通式。圖2A顯示阿扎霉素B結(jié)構(gòu)圖； 圖2B顯示阿扎霉素B的衍射物結(jié)構(gòu)通式，其中Rl，R2，R3，R4可以為氫或甲基。附圖3 阿扎霉素B可以明顯改善GK大鼠心臟功能。圖A-D分別為采用灌胃的方法，給予不同劑量的阿扎霉素B后的心臟超聲圖，可見隨著劑量的增加，GK大鼠的心肌收縮能力逐漸增強，但是心肌的厚度并未增加；分別計算左心室的射血分數(shù)和短軸縮短率，顯示左心室射血分數(shù)顯著增加(圖E，” *”代表和生理鹽水組比較ρ < 0. 05)，短軸縮短率亦明顯改善(圖F，” *”代表和生理鹽水組比較？ < 0. 05。)附圖4 阿扎霉素B顯著激活GK大鼠心肌細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及下游靶點的活性。隨著阿扎霉素B劑量的增加，可見AKT (kr473)磷酸化水平呈劑量依賴性升高， 同時啟動一系列的下游靶基因的活性，包括介導葡萄糖轉(zhuǎn)移體蛋白Glut4發(fā)生明顯的膜轉(zhuǎn)位，糖原合成酶激酶3 (GSIC3)磷酸化水平被明顯抑制，mTOR下游的重要靶分子4EBP1和 S6K1磷酸化被激活，F(xiàn)0X01發(fā)生明顯的胞漿轉(zhuǎn)位，核內(nèi)的F0X01表達下降。附圖5 阿扎霉素B可以明顯改善GK大鼠腎臟功能。圖A-D分別為對應各組中GK 大鼠腎臟組織Masson染色后的結(jié)果，可見隨著劑量的增加，GK大鼠腎臟纖維化的程度逐漸減輕。在觀察終點，收集各組大鼠M小時尿量，用ELASA方法檢測尿蛋白的含量，計算出M 小時尿蛋白的含量。如圖E所示，各處理組M小時尿蛋白含量顯著減少(圖E，”*”代表和生理鹽水組比較P < 0. 05)。附圖6 阿扎霉素B可以顯著激活GK大鼠腎臟細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及下游靶點的活性。以正常的Wistar大鼠為陽性對照，未處理組GK糖尿病大鼠為陰性對照，隨著不同劑量的阿扎霉素B均可以顯著激活AKT (kr473)磷酸化水平，同時啟動一系列的下游靶基因的活性，包括和葡萄糖轉(zhuǎn)運相關(guān)的蛋白p-CBP(kr436)、p-AS160和Glutl，及與腎臟纖維化相關(guān)的指標p-PKC-zeta、p-ERKl/2、p-Smad2,都得到明顯的改善，基本恢復到 Wistar大鼠的水平。附圖7 口服糖耐量實驗(oral glucose tolerance test, 0GTT)顯示，口服高濃度葡萄糖后，不同給藥組的GK大鼠和生理鹽水組比較，各個時間點中血糖升高的幅度均降低，在60min和90min時，低劑量組和中劑量組具有統(tǒng)計學意義。附圖8 阿扎霉素B可以激活皮下瘤中AKT/PKB磷酸化的水平，并呈梯度依賴性的抑制腫瘤生長。圖A顯示，不同劑量的阿扎霉素B腹腔注射3周后，皮下瘤生長的情況，隨著藥物劑量的增加，腫瘤的生長明顯受抑制；圖B顯示，處死小鼠后，免疫組化檢測皮下瘤中AKT(kr473)磷酸化水平可以被藥物激活；圖C和圖D分別顯示不同劑量組中皮下瘤的重量和體積的變化(圖C和圖D中，” *”代表和對照組比較ρ < 0. 05)。
五具體實施例方式實施例1 =Cytoblot篩選過程的實施
1.將對數(shù)生長期的支氣管上皮細胞系BEAS-2B細胞，胰酶消化后，均勻種在含 IOOul完全培養(yǎng)基(DMEM+10% FBS)的96孔板內(nèi)，每孔含細胞20 000個；2. 37°C,5% C02 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48h ；3.將原培養(yǎng)基棄除后，每孔加入IOOul無血清培養(yǎng)基，同時加入Iul各濃度梯度的待測樣品(每種待測樣品含8個濃度梯度，各梯度之間呈3倍稀釋，初始濃度為ang/ml)；每輪篩選中均含4個復孔的陰性對照(DMSO)，4個復孔的陽性對照(Rapamycin 500nM)，4個復孔的底物空白對照(不加一抗)；4. 37°C,5% C02 培養(yǎng)箱孵育釙；5.棄培養(yǎng)基，加入IOOul 4%的預冷甲醛，4°C密封固定Ih ；6.棄固定液，加入50ul預冷無水甲醇，4°C破膜30min;7.棄甲醇，加入 IOOul 封閉液(含 lXCasine+0. 1% Tween-20)，室溫封閉 Ih ；8.棄封閉液，加入50ul —抗稀釋液(含IX封閉液+1 200p-AKT(ser473) 一抗)，4°C孵育過夜9.棄一抗稀釋液，加入IOOul漂洗液(含1XPBS+0. 1% Tween-20)，漂洗3次，每次 IOmin ；10.棄漂洗液，加入50ul 二抗稀釋液(含1 X封閉液+1 1000HRP 二抗)，室溫孵育Ih ；11.棄二抗稀釋液，加入IOOul漂洗液(含1XPBS+0. 1 % Tween-20)，漂洗5次，每次 IOmin ；12.棄漂洗液，加入40ul HRP顯色底物，室溫避光孵育，分別在孵育后5min， 10min,15min,20min,25min點儀器檢測發(fā)光信號，分析數(shù)據(jù)；13.對于陽性化合物，進行復篩；復篩后的化合物，Western進一步檢測其對AKT/ PKB激酶磷酸化水平的影響。確定編號為L8⑩的樣品，可以明顯激活p-AKT(Ser47;3)磷酸化水平。但是僅知道該樣品為單體化合物，還未確定其結(jié)構(gòu)。實施例2活性化合物的制備及結(jié)構(gòu)鑒定該樣品產(chǎn)出菌為N98-1634，根據(jù)16S rDNA序列(GenBank序列號DQ787153)鑒定為吸水鏈霉菌。將其發(fā)酵液中加入5%的珍珠巖助濾劑，攪拌30min后過濾。取菌絲體，用 3-4倍體積的乙醇浸泡，攪拌120min后過濾，并用少量乙醇頂洗。獲得的浸提液用HZ816樹脂吸附，70%的乙醇解吸液經(jīng)減壓濃縮，乙酸乙酯重結(jié)晶得到純度為95%的成品。通過UV、IR、MS和NMR數(shù)據(jù)綜合解析，鑒定該單體化合物為阿扎霉素B。阿扎霉素B:分子式C54H88018，分子量IOM，白色結(jié)晶性粉末，溶于甲醇、氯仿、 乙醇、乙酸乙酯，微溶于丙酮，不溶于苯、醚、水；UVXmax(Iim) 252 (MeOH) ；IR顯示主要吸收峰為3423，2970，1696，1639，1225,985 ;lH-NMR(500MHz，CDC13) δ :6. 99(1H，dd ；15. 0, 11. 5),6. 13 (1H, dd ；15. 0，11. 5)，5. 68 (1H, d ；15. 0) ,5. 65 (1H, dd ；15. 0，10. 0)，5. 07 (1H, s)，4. 75 (1H, d ； 10. 0)，4. 11 (1H, d ；9. 5) 3. 98 (2H, m)，3. 98 (1H, m)，3. 95 (1H, m) 3. 90 (1H, m)， 3. 62 (1H, s)，2. 54 (1H, m)，2. 38 (1H, dd ；11. 5,3. 0), 1. 95 (1H, m)，1. 84 (1H, m)，1. 78 (1H, m)， 1. 72 (1H, q ；6. 8)，1. 63 (1H, m)，1. 43 (1H, m)，1. 25 (3H, d ；3. 8), 1. 20 (1H, m)，1. 16 (1H, m)， 1. 11 (3H, d ；5. 7), 1. 04 (3H, d ；5. 5), 1. 01 (3H, d ；6. 8)，0. 85 (3H, t ；7. 5) ,0. 82 (3H, d ；6. 5)； 13C-NMR(125MHz, CDC13) δ :169. 9，145. 1,144. 4，131. 9，120. 9,99. 1,93. 2,77. 8,71. 4，70. 6,69. 9,66. 6,66. 1,66. 0,48. 2,41. 5,40. 8,38. 7,35. 8,33. 2，19. 2，19. 0，16. 8，14. 9， 8. 9,8. 7,7. 0.實施例3 體內(nèi)驗證阿扎霉素B對GK大鼠糖尿病心肌細胞和腎臟細胞中AKT/PKB 激酶的激活作用及對GK大鼠心臟功能和腎臟功能的影響1、選用GK大鼠，在高脂飲食的喂養(yǎng)下，第14周測定空腹葡萄糖水平，確定其處于糖尿病狀態(tài)。為驗證阿扎霉素B對GK大鼠心肌細胞中AKT/PKB激酶的影響，及是否能夠逆轉(zhuǎn)GK大鼠糖尿病心肌病和糖尿病腎病的進程，保護其心臟功能和腎臟功能，我們于第M周開始喂服阿扎霉素B，依灌胃的劑量不同，而分為4個組對照組(生理鹽水組)、低劑量組 (lmg/kg)、中劑量組(5mg/kg)、高劑量組(10mg/kg)，每組10只，每天一次，均連續(xù)灌胃滿12 周。2、在灌胃結(jié)束時，處死大鼠前，采用GE vivid 7高頻超聲系統(tǒng)檢查各組大鼠心臟功能，分別計算射線分數(shù)、心臟短軸收縮率及心肌各肌壁的厚度。同時收集各組大鼠的尿液和外周血，檢測相關(guān)生化數(shù)據(jù)。3、處死大鼠后，分別收取各組大鼠心肌組織和腎臟組織，Western檢測AKP/PKB激酶磷酸化水平及其下游靶點的變化。4、糖尿病心肌相關(guān)的結(jié)果A、處死前的GK大鼠心臟超聲顯示，給藥組的大鼠心臟射血分數(shù)明顯增加，心臟的短軸收縮率也明顯增加，心律失常的頻率明顯降低，同時并未發(fā)現(xiàn)心肌肥大現(xiàn)象。B、Western檢測處死后各組GK大鼠心肌組織中AKT/PKB激酶的活性， 發(fā)現(xiàn)給藥組心肌組織中，ρ-ΑΚΤ(Ser473)磷酸化的水平明顯升高，并呈劑量依賴性；C、AKT/ PKB激酶活性升高的同時，細胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運體蛋白Glut4明顯升高，Glut4的膜轉(zhuǎn)位預示著心肌細胞對高濃度葡萄糖的攝取能力增加；D、糖原合成酶激酶3(GSK!3)磷酸化水平被明顯抑制，GSK3是AKT/PKB下游的重要靶分子，其磷酸化水平降低，側(cè)面反映糖原合成酶水平上調(diào)，進而刺激心肌細胞中糖原的合成，有助于保護心肌細胞的功能；E、F0X01和GSK3 一樣，是一種重要的AKT/PKB激酶的負向調(diào)節(jié)因子，一般情況下，F(xiàn)0X01主要定位在胞核中， 當有胰島素刺激或者是AKP/PKB激酶被激活時，胞核中的F0X01會轉(zhuǎn)位并聚集到胞漿中， 通過泛素-蛋白酶體途徑降解。給藥組中，可以明顯發(fā)現(xiàn)胞核中的F0X01減少，胞漿中的 F0X01增加，提示心肌細胞中蛋白合成代謝增加；F、同時還發(fā)現(xiàn)，mTOR蛋白的重要下游靶分子4EBP1和S6K1磷酸化水平同樣被激活。mTOR蛋白作為ΡΙΙ/ΑΚΤ通路重要的下游分支， 被稱為調(diào)控細胞代謝、生長和增值的中心元件，主要依賴于4EBP1和S6K1兩種重要的下游靶蛋白，調(diào)控蛋白的合成。給藥組大鼠心肌細胞中4EBP1和S6K1磷酸化水平升高，提示阿扎霉素激活AKT/PKB激酶的同時，激活4EBP1和S6K1，增強心肌細胞蛋白的合成能力。G、 OGTT實驗顯示，不同給藥組的GK大鼠和生理鹽水組的GK大鼠比較，口服高濃度的葡萄糖后各時間點葡萄糖升高的幅度均降低，其中低劑量組和中劑量組在60min和90min時間點時具有統(tǒng)計學意義。5、糖尿病腎臟相關(guān)的結(jié)果A、處死前的GK大鼠M小時尿蛋白含量，給藥組尿蛋白的含量明顯減少；B、處死后的GK大鼠腎臟組織，采用Masson染色顯示，給藥組中腎臟纖維化的程度明顯好轉(zhuǎn)；C、以正常的Wistar大鼠為對照，Western檢測不同劑量組腎臟組織中， P-AKT (Ser473)磷酸化的水平明顯升高，并在ang/kg組時已經(jīng)非常明顯；同時AKT的下游靶分子，包括和葡萄糖轉(zhuǎn)運相關(guān)的蛋白p-CBP(kr436)、p_AS160和Glutl，及與腎臟纖維化相關(guān)的指標p-PKC-zeta、p-ERKl/2、p-Smad2,都得到明顯的改善，基本恢復到正常Wistar 大鼠的水平。實施例4 體內(nèi)驗證低濃度阿扎霉素B對并不促進腫瘤的生長，當濃度升高時，阿扎霉素B可以顯著抑制腫瘤的生長。1、由于腫瘤組織多伴有AKT激酶的異常活化，為排除阿扎霉素B通過進一步激活 AKT激酶活性而促進腫瘤的生長，我們選用3-4周齡裸鼠，分別皮下種植1 X IO5宮頸癌細胞系Hela細胞、卵巢癌細胞系A(chǔ)2780細胞和ClI細胞，5天后隨機分為6組，每組3只，給予阿扎霉素B腹腔注射治療，觀測不同劑量的阿扎霉素B對腫瘤生長的影響。分組為PBS 組、20ug/kg 組、100ug/kg 組、200ug/kg 組、400ug/kg 組、800ug/kg 組。隔天給藥，治療后定期用游標卡尺測量腫瘤長、寬徑，共治療3周。用公式V = Width2X length/2，計算腫瘤的體積大小。治療結(jié)束時，處死小鼠，隨機收取各組皮下瘤中的一個，多聚甲醛固定后，包埋蠟塊備用。同時分別收取高劑量組(800ug/kg)小鼠心、肝、脾、肺、腎、腸，HE染色檢測各臟器組織結(jié)構(gòu)的完整性，以排除明顯的臟器毒性。2、實驗結(jié)果表明實驗過程中，各處理組小鼠的活動和飲食并無明顯差異 ’實驗結(jié)束時，各處理組小鼠的體重基本一致。低劑量藥物組20ug/kg組和100ug/kg組的腫瘤大小與PBS組相當；隨著給藥劑量的增加，腫瘤逐漸縮小。HE染色顯示，腫瘤中AKT(kr473) 磷酸化水平逐漸升高，同時高劑量組中小鼠的主要臟器，并未出現(xiàn)明顯的組織損傷。
權(quán)利要求
1.一類可以激活AKT/PKB激酶磷酸化的小分子化合物，包括阿扎霉素 B(Elaiophylin)、ll-0-monomethylelaiophylin 和 Efomycin，及其他含通式(說明書附圖 2B)的化合物；Rl, R2，R3，R4為氫或甲基。
2.權(quán)利要求1中任一種化合物在用于防治糖尿病及糖尿病心臟和腎臟并發(fā)癥中的應用。
3.權(quán)利要求1中任一種化合物在用于抗卵巢癌、宮頸癌等實體腫瘤中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開一類新型的AKT/PKB激酶激動劑的獲得及其用途，屬糖尿病治療領(lǐng)域。它們都含有通式(說明書附圖2B)。其技術(shù)特征在于利用高通量篩選，發(fā)現(xiàn)一種可以顯著激活AKT/PKB激酶磷酸化的單體化合物；經(jīng)鑒定該化合物為阿扎霉素B(elaiophylin)；同時發(fā)現(xiàn)其衍射物11-O-monomethylelaiophylin和efomycin同樣可以顯著激活AKT/PKB激酶的活性，進而推測出通式(說明書附圖2B)。在GK大鼠糖尿病模型中，發(fā)現(xiàn)阿扎霉素B可以明顯激活GK大鼠心肌細胞和腎臟細胞中AKT/PKB激酶磷酸化及下游靶點，改善GK大鼠心臟功能和腎臟功能。該類化合物通過外源性的激活AKT/PKB激酶活性，為防治糖尿病心臟和腎臟并發(fā)癥提供獨特的干預手段。
文檔編號A61P35/00GK102344468SQ20111019496
公開日2012年2月8日 申請日期2011年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月13日
發(fā)明者盧運萍, 周劍峰, 夏曦, 張華 , 方勇, 楊漾, 汪道文, 路新華, 鄭智慧, 馬丁 申請人:張華 , 汪道文, 馬丁