專利名稱：一種藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物及其在制備治療心血管疾病的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
心肌缺血是目前中老年人常見的心血管病之一，是指因冠狀動(dòng)脈狹窄、供血不足而引起的心肌機(jī)能障礙或器質(zhì)性病變，在心肌梗死的急性期溶栓治療和介入是保證病人預(yù) 后的非常重要的手段，在溶栓的同時(shí)常會伴隨有心肌缺血再灌的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明研究丹酚酸B和人參皂苷Rgl配伍在心肌缺血再灌中的心肌保護(hù)作用。目前國內(nèi)已研制出不少治療心肌缺血的配方,但在心肌缺血再灌中對心肌保護(hù)的藥物研究的還比較少，中藥單體配伍的研究更少；單體化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl的配伍治療心肌缺血再灌，在國內(nèi)未見相同研發(fā)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種藥物組合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該藥物組合物在制備治療心血管疾病的藥物中的用途。本發(fā)明的藥物組合物包括化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl，按重量份計(jì)，所述化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl的配比為I : 5 5 : 5，優(yōu)選為2 5 3 5。本發(fā)明的藥物組合物組分的用量也是發(fā)明人經(jīng)過大量摸索總結(jié)得出的，所述化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl的配比為2 5 3 5時(shí)療效最佳。本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步通過加入常規(guī)輔料(如崩解劑、潤滑劑、粘合劑等)以常規(guī)方法制成任何一種常用口服劑型，如片劑、膠囊、口服液等。本發(fā)明的藥物組合物在心肌缺血再灌中具有心肌保護(hù)作用，可用于制備治療心血管疾病的藥物，其中，所述心血管疾病是心肌缺血再灌、心肌梗死、心肌缺血、心肌肥大或心力衰竭。


圖I顯示了不同重量份配比的丹酚酸B和Rgl給藥組的大鼠血流動(dòng)力學(xué)檢測，其中“##”表示與假手術(shù)組比較卩< O. 01，“*”表示與缺血再灌組比較P < O. 05。圖2顯示了假手術(shù)對照組、缺血再灌模型組、丹酚酸B給藥組、Rgl給藥組以及丹酚酸B與Rgl聯(lián)合給藥(配比為2 5)組的大鼠血流動(dòng)力學(xué)檢測，說明丹酚酸B與Rgl合用可明顯改善心臟功能。其中“#”表示與假手術(shù)組比較P < O. 05，“##”表示與假手術(shù)組比較P < O. 01，“*”表示與缺血再灌組比較P < O. 05，“#”表示與缺血再灌組比較P < O. 01。圖3顯示了本發(fā)明的藥物組合物可明顯降低心臟的梗死面積。其中“##”表示與假手術(shù)組比較P < O. 01，表示與缺血再灌組比較P < O. 05。
圖4顯示了本發(fā)明的藥物組合物對大鼠受損心臟結(jié)構(gòu)和形態(tài)的改善作用，其中A為假手術(shù)對照組圖，B為缺血再灌模型組，C為丹酚酸B給藥組，D為Rgl給藥組，E為丹酚酸B與Rgl聯(lián)合給藥(配比為2 5)組。
具體實(shí)施例方式以下將通過試驗(yàn)例并結(jié)合附圖來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物組合物的有益效果。制備實(shí)施例

藥品丹酚酸B、人參皂苷Rgl購自上海友思生物科技有限公司(純度高于98%)。實(shí)施例I以I : 5為例說明藥物的配置方法分別稱取O. 83mg丹酚酸B和4. 17mg人參皂苷Rgl混合均勻(總量為5mg),溶于O. 5ml已過濾的生理鹽水,潤旋3分鐘直至混合物完全溶解，得到本發(fā)明所述I : 5的藥物組合物。按照上述方法，分別制備重量份比例為2 5、3 : 5、4 : 5和5 : 5的藥物組合物。試驗(yàn)例藥品紅四氮唑(TTC)購自sigma，水合氯醛購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，氯胺酮購自江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，化合物純度均高于95 %。I.試驗(yàn)例I本發(fā)明藥物組合物的配比篩選藥效試驗(yàn)I. I 方法I. I. I大鼠急性心肌缺血再灌模型實(shí)驗(yàn)前采用300mg/kg水合氯醛腹腔注射的方式對大鼠(購自中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)實(shí)施麻醉。通過后背位固定方式將動(dòng)物固定于手術(shù)臺上，II導(dǎo)聯(lián)連接檢測心電。剃凈左胸毛，用75%酒精消毒皮膚，沿胸骨左緣Icm左右縱向剪開皮膚，鈍性分離肌肉，剪斷第四根肋骨，剝開心包，暴露心臟，于肺動(dòng)脈圓錐及左心耳之間找出冠狀動(dòng)脈前降支，用無創(chuàng)縫合針6/0絲線穿過冠狀動(dòng)脈前降支起始部下2_處打結(jié)。觀察心臟左心室部位是否發(fā)白并配合心電確定結(jié)扎位置的準(zhǔn)確性，40分鐘后檢測心電圖并剪斷無創(chuàng)縫合線使缺血心肌恢復(fù)灌流。復(fù)灌的同時(shí)進(jìn)行尾靜脈給藥并縫合肌肉及皮膚，將大鼠置于37°C保溫臺，蘇醒后放回籠中。復(fù)灌60分鐘后進(jìn)行心電及血流動(dòng)力學(xué)評價(jià)。1.1.2分組及給藥實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為以下7組假手術(shù)對照組、缺血再灌模型組以及不同重量份配比的丹酚酸B (Sal B)與人參皂苷Rgl (I 5、2 5、3 : 5、4 : 5和5 : 5)聯(lián)合給藥組，即為上述制備實(shí)施例I制備的藥物組合物。每組至少8個(gè)重復(fù)。給藥濃度10mg/ml，按每IOOg體重O. Iml給藥，體重240g的大鼠須抽取O. 24ml藥液進(jìn)行尾靜脈注射，即每kg小鼠的給藥量是10mg。I. I. 3血流動(dòng)力學(xué)檢測大鼠腹腔注射氯胺酮(10mg/kg)后，尾靜脈給予200單位肝素，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈并插入連接壓力傳感器(MLT0380/D，ADINSTRUMETS)的PE管，用Powerlab 8/30生理記錄儀(ML870，ADINSTRUMETS)記錄頸動(dòng)脈壓、心室內(nèi)壓、左心室最大收縮速度、左心室最大舒張速度等血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。
I. 2實(shí)驗(yàn)結(jié)果I. 2. I血流動(dòng)力學(xué)檢測顯示(圖I)，缺血再灌模型組與假手術(shù)對照組比較左心室最大舒張速度，左心室最大收縮速度均顯著性降低(P < O. 01)。丹酚酸B與人參皂苷Rgl聯(lián)合給藥組與缺血再灌模型組相比，左心室最大收縮速度和最大舒張速度都有一定的改善。特別是丹酚酸B和人參皂苷Rgl的配比為2 5和3 5時(shí)，左心室最大收縮速度(P< O. 05)和最大舒張速度(P < O. 05)顯著增加。I. 2. 2小結(jié)左心室最 大收縮速度，即左心室收縮壓變化的最大速率，反映了心臟收縮的功能，變化的速率越大說明心肌的收縮力越好；左心室最大舒張速度即左心室舒張壓變化的最大速率，反映了心臟舒張的功能，變化的速率越大說明心肌的舒張?jiān)胶?，提示心肌的順?yīng)性較好。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果說明給藥后心臟的收縮和舒張功能均得到一定程度的改善，尤其是2 : 5和3 : 5組心臟的收縮和舒張功能明顯改善，心肌順應(yīng)性接近正常。試驗(yàn)例2本發(fā)明藥物組合物的藥效試驗(yàn)(以2 : 5為代表與單用作比較)2. I 方法2. I. I大鼠急性心肌缺血再灌模型方法同試驗(yàn)例I中I. I. I。2. I. 2分組及給藥實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為以下5組假手術(shù)對照組、缺血再灌模型組、丹酚酸B給藥組(IOmg/kg)、Rgl給藥組(10mg/kg)、丹酹酸B與Rgl聯(lián)合給藥組(10mg/kg)。聯(lián)合給藥組丹酹酸B和Rgl的配比是2 5 (重量份)，即為上述制備實(shí)施例I制備的藥物組合物。每組至少9
個(gè)重復(fù)。2. I. 3血流動(dòng)力學(xué)檢測方法同試驗(yàn)例I中I. I. 3。2. I. 4心肌梗死面積測定開胸，摘取心臟，用生理鹽水沖洗血污，濾紙吸干多余水分，稱取全心重，然后從心尖部開始將心臟切成O. 2cm厚的心肌片。于37°C下，在O. I %四氮唑溶液中孵育15min，取出心肌片，用水沖洗多余染料，梗死心肌不著色，非梗死區(qū)被TTC染成紅色，拍照并采用IPP圖像處理系統(tǒng)分析梗死百分比。2. I. 5組織學(xué)染色對TTC染色后的心臟樣本進(jìn)行甲醛固定、石蠟包埋、切片等處理后，再進(jìn)行蘇木素-伊紅(蘇木素購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，伊紅購自上海試劑三廠)染色，拍照。2. 2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2. 2. I血流動(dòng)力學(xué)檢測顯示(圖2)，缺血再灌模型組與假手術(shù)對照組比較，最大壓，左心室最大舒張速度和左心室最大收縮速度均有極其顯著性降低(P < 0.01)，末端舒張壓、舒張時(shí)程等有顯著性差異(P < O. 05)。丹酚酸B與人參皂苷Rgl聯(lián)合給藥組與缺血再灌模型組相比，最大壓(P < O. 05)、左心室最大收縮速度(P < O. 01)和最大舒張速度(P<0.05)具有顯著性增加，末端舒張壓、舒張時(shí)程有改善的趨勢。各組心率均無明顯變化。提示丹酚酸B與人參皂苷Rgl合用可明顯改善心臟損害動(dòng)物的心臟功能。2. 2. 2TTC染色結(jié)果顯示(圖3)，丹酚酸B與人參皂苷Rgl合用可明顯降低缺血區(qū)域的面積，說明丹酚酸B與人參皂苷Rgl聯(lián)合用藥可明顯降低心肌壞死的程度(P < O. 05)。
2. 2. 3通過蘇木素伊紅染色的方法對各組動(dòng)物的心臟結(jié)構(gòu)進(jìn)行評價(jià)，結(jié)果見圖4。圖4A為假手術(shù)組，在光鏡下可見心肌細(xì)胞排列整齊，未見出血及細(xì)胞變性壞死；B為缺血再灌組，光鏡下可見心肌細(xì)胞排列紊亂，缺血再灌區(qū)可見大量紅細(xì)胞漏出，部分心肌細(xì)胞腫脹變性甚至出現(xiàn)壞死灶；(為丹酚酸B給藥組，光鏡下可見心肌細(xì)胞排列欠整齊，缺血再灌區(qū)紅細(xì)胞漏出，部分心肌細(xì)胞腫脹變性；D為Rgl給藥組，光鏡下可見心肌細(xì)胞排列較整齊，缺血再灌區(qū)少量紅細(xì)胞漏出，部分心肌細(xì)胞腫脹變性出為丹酚酸B與Rgl聯(lián)合給藥(配比為2 5)組，光鏡下可見心肌細(xì)胞排列較整齊，缺血再灌區(qū)少量紅細(xì)胞漏出，未見心肌細(xì)胞腫脹變性。以上結(jié)果表明丹酚酸B與人參皂苷Rgl聯(lián)合給藥組與缺血再灌模型組相比，小血管破裂出血及心肌細(xì)胞腫脹變性的程度明顯改善，心肌細(xì)胞排列較整齊。2. 2. 4小結(jié)丹酚酸B與人參皂苷Rgl的重量配比為2 5時(shí)可有效的減少心肌細(xì)胞的壞死，改善心肌的收縮和舒張功能，并且分別強(qiáng)于單獨(dú)給予丹酚酸B組和單獨(dú)給予人參皂苷Rgl組。以上結(jié)果表明，單體化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl配伍在心肌缺血再灌中減少·了心肌的出血及壞死，改善了心肌的收縮和舒張功能，對心肌具有保護(hù)作用，并且二者重量比為2 5 3 5時(shí)效果最佳?？捎糜谥苽渲委熜难芗膊〉乃幬?，其中，所述心血管疾病是心肌缺血再灌、心肌梗死、心肌缺血、心肌肥大或心力衰竭。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，包括化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl，按重量份計(jì)，所述化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl的配比為I : 5 5 : 5。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于，所述化合物丹酚酸B和人參皂苷Rgl的重量份配比為2 5 3 5。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物在制備治療心血管疾病的藥物中的用途。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述心血管疾病是心肌缺血再灌、心肌梗死、心肌缺血、心肌肥大或心力衰竭。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，其主要是由化合物丹酚酸B和人參皂苷Rg1按一定重量份配比制備而成。本發(fā)明的藥物組合物在心肌缺血再灌中對心肌起保護(hù)作用，可用于治療心血管疾病。
文檔編號A61K31/343GK102908355SQ201110222980
公開日2013年2月6日 申請日期2011年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月4日
發(fā)明者果德安, 姜寶紅, 鄧燕萍 申請人:中國科學(xué)院上海藥物研究所