專利名稱：芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途，屬于藥用天然產(chǎn)物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
大量的流行病學(xué)研究表明，血糖異常升高是糖尿病發(fā)生的一個(gè)危險(xiǎn)因素，糖尿病是一種常見的內(nèi)分泌代謝性疾病，是繼心血管疾病及癌癥之后危害人類健康的第三大疾患。由于糖尿病具有患病率、致殘率及并發(fā)癥高的特點(diǎn)，因此已成為醫(yī)學(xué)界頗為矚目并倍加重視的疾病之一。目前的降血糖藥物多為西藥或中藥的大復(fù)方，西藥(包括注射劑和口服降糖藥) 作用強(qiáng)而迅速，過量導(dǎo)致病人低血糖癥而被迫停藥，結(jié)果又致停藥癥狀反跳；中藥大復(fù)方基本上是都是由天然中草藥經(jīng)簡(jiǎn)單的炮制和提取制成的，不僅成分相當(dāng)復(fù)雜、制備不便，而且難以進(jìn)行更深入的結(jié)構(gòu)/藥效研究，也不利于藥物質(zhì)量控制和中藥現(xiàn)代化。我國(guó)有著豐富的中草藥資源，如何合理開發(fā)這些天然植物資源，利用現(xiàn)代藥物化學(xué)分析技術(shù)和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手段，尋找一類安全有效的天然植物降血糖藥物已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)、 生物學(xué)領(lǐng)域廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)，也是提升我國(guó)降血糖藥物產(chǎn)業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的關(guān)鍵。芫根(Brassica rapa L.)，又名蔓菁，二年生草本，現(xiàn)廣泛栽種于青藏高原。芫根生長(zhǎng)在海拔高、溫差大、日照強(qiáng)的高原環(huán)境中，適應(yīng)能力強(qiáng)，產(chǎn)量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，通常作為飼料應(yīng)用于畜牧業(yè)，其肉質(zhì)根還可以作為蔬菜或果品供人食用，具有清熱解毒、滋補(bǔ)增氧的功效。目前開發(fā)利用芫根已公開的方法中，尚未見關(guān)于芫根總黃酮降血糖功效方面的報(bào)道。黃酮類化合物指化學(xué)結(jié)構(gòu)上屬于黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、花色素類、黃烷醇類、雙苯吡酮類、異黃酮類等化合物及其與單糖或寡糖形成的糖苷或其他形式的衍生物。它們廣泛存在于自然界，尤其是高等植物和羊齒類植物中，是一類重要的天然有機(jī)化合物，其生理活性多種多樣。大量研究表明黃酮類化合物具有防治高血壓、治療冠心病、抑制血栓形成、抗肝毒、抗炎、瀉下、降血脂、雌激素樣作用等功效。因此，開發(fā)利用植物黃酮具有巨大的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)意義。本發(fā)明通過提取芫根總黃酮并對(duì)其進(jìn)行降血糖活性檢測(cè)，拓寬了芫根綜合開發(fā)的途徑，為探索天然的、有效的降血糖藥物提供了理論依據(jù)，符合高原植物資源的有效利用和藏藥新藥開發(fā)的需要，有利于推動(dòng)民族地區(qū)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供以黃酮類化合物為主要成分的芫根總黃酮提取物；本發(fā)明還提供上述芫根總黃酮提取物的制備方法；本發(fā)明還提供上述芫根總黃酮提取物在治療和/預(yù)防血糖異常升高癥的藥物制備中的用途。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為從芫根根塊中提取到總黃酮，得率為0. 2 1. 0重量％，呈固態(tài)淡黃色，易溶于乙醇，易溶于水。利用四氧嘧啶和腎上腺素所致的糖尿病小鼠模型進(jìn)行芫根總皂苷降血糖作用功效實(shí)驗(yàn)，除非另有說明，本發(fā)明中的％為重量百分比。本發(fā)明芫根總黃酮提取物的制備方法具體為方法A:(1)將芫根原料用5 15倍體積的蒸餾水煮沸；(2)攪拌的同時(shí)緩慢加入石灰乳或者NaOH堿性溶液，調(diào)pH至8 10，持續(xù)煮沸 20 60min，趁熱用4層紗布抽濾，濾液用中速濾紙進(jìn)行再次過濾；(3)濾渣再用5 15倍體積蒸餾水煎煮，趁熱抽濾，重復(fù)提取1 3次，(4)合并兩次濾液，在60 80°C條件下，用濃鹽酸調(diào)pH至4 6，攪勻后靜置Mh， 抽濾；(5)用蒸餾水將沉淀物洗至中性，干燥后得到粗制總黃酮，(6)用沸水重結(jié)晶，干燥后得到精制總黃酮，得率為0. 2 0. 7重量％，純度為 37% 75%。方法B:(1)用5 15倍體積的50 95%乙醇或甲醇作為溶劑，于50 80°C對(duì)芫根原料進(jìn)行回流提取1 4h，進(jìn)行1 4次重復(fù)提??；(2)用中速濾紙過濾提取液，合并濾液，減壓濃縮至濾液無醇味；(3)在濾液中，按1 1 3體積加入石油醚萃取3 5次，60°C揮去60°C水浴揮發(fā)掉溶液中的石油醚石油醚，又按1 1 3體積加入乙酸乙酯對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取3 5次，將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥，得到粗總黃酮浸膏；(4)將粗總黃酮浸膏溶于少量50 95%乙醇，得到總黃酮上柱液，利用大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為1 2. 5ml/min，用2 8倍柱體積的 20 95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液，將洗脫液50 80°C減壓濃縮、干燥得到精制的總黃酮，得率為0. 5 0. 7重量％，純度為75% 95%。方法C(1)將芫根原料用10 30倍體積的60 95%乙醇浸泡1 3h ；(2)在常壓下，以微波功率500 900w，微波輻射20 60s，間歇輻射2 5次，進(jìn)行微波輔助浸?。?3)過濾收集濾液，將濾液濃縮成無醇味的浸膏；(4)將浸膏溶于少量熱水中，按1 1 3體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對(duì)浸膏液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯部分，減壓回收溶劑，干燥后得到粗總黃酮浸膏；(5)將粗總黃酮浸膏溶于少量50 95%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為1 2. 5ml/min，用2 8倍柱體積的 20 95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液50 80°C減壓濃縮、干燥得到精制的芫根總黃酮。得率為0.3 0.9重量％。純度為43% 75%。所述制備方法中的芫根原料均為芫根的塊根，經(jīng)切片后自然風(fēng)干，然后粉碎得到粉狀物，粉碎細(xì)度達(dá)到40 200目；上述方法B、方法C中所用的大孔吸附樹脂為DlOl或AB-8 ；所述干燥方法為減壓真空干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。
將芫根總黃酮制備成各種，例如粉劑、片齊IJ、膠囊、顆粒齊IJ、緩釋片、緩釋膠囊、滴丸或液體制劑。所述制劑應(yīng)用于臨床治療高血糖癥及制成含芫根總黃酮降血糖保健品。本發(fā)明用鹽酸-鎂粉反應(yīng)檢測(cè)所提的芫根總黃酮，泡沫處呈現(xiàn)紫紅色；取樣品的 60 %乙醇溶液滴在濾紙上后，與1 % AlCl3乙醇溶液反應(yīng)在可見光下呈現(xiàn)灰黃色，在紫外光下呈現(xiàn)黃色熒光斑點(diǎn)；取樣品乙醇的60%溶液滴在濾紙上，用濃氨水熏過后，在紫外光下呈現(xiàn)黃褐色熒光斑點(diǎn)，說明提取物確實(shí)為黃酮。芫根總黃酮的定量測(cè)定是利用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用紫外分光光度法測(cè)定芫根總黃酮含量。通過上述方法制備的芫根總黃酮在降血糖方面有顯著的效果。利用四氧嘧啶和腎上腺素所致的糖尿病小鼠模型進(jìn)行芫根總黃酮降血糖作用功效實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，芫根總黃酮對(duì)四氧嘧啶和腎上腺素致糖尿病小鼠具有顯著降血糖作用。本發(fā)明方法得到的芫根總黃酮原料易得，方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品中總黃酮含量較高，質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1采用方法Α，取曬干芫根塊根粉碎至100目，用5倍體積的蒸餾水煮沸，煮沸后不停攪拌的同時(shí)，緩緩加入NaOH，將溶液PH調(diào)至10。繼續(xù)保持煮沸20min。趁熱用四層紗布?jí)|在布氏漏斗上進(jìn)行抽濾，抽濾完畢用中速濾紙對(duì)濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用5倍體積的蒸餾水再次煎煮20min，抽濾、過濾，這樣對(duì)濾渣重復(fù)提取3次，合并濾液。將濾液加熱到60°C，緩緩加入濃鹽酸，將溶液PH調(diào)至4，攪拌均勻后，靜置24h后，抽濾，收集沉淀物。 用大量蒸餾水沖洗沉淀物，直至PH為7，60°C減壓真空干燥沉淀物，得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶，60°C減壓真空干燥結(jié)晶，得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為 0. 32%，純度為 57%。實(shí)施例2采用方法A，取曬干芫根塊根粉碎至40目，用15倍體積的蒸餾水煮沸，煮沸后不停攪拌的同時(shí)，緩緩加入石灰乳，將溶液PH調(diào)至9。繼續(xù)保持煮沸60min。趁熱用四層紗布?jí)|在布氏漏斗上進(jìn)行抽濾，抽濾完畢用中速濾紙對(duì)濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用15倍體積的蒸餾水再次煎煮60min，抽濾、過濾，這樣對(duì)濾渣重復(fù)提取1次，合并濾液。將濾液加熱到80°C，緩緩加入濃鹽酸，將溶液PH調(diào)至4，攪拌均勻后，靜置24h后，抽濾，收集沉淀物。 用大量蒸餾水沖洗沉淀物，直至PH為7，80°C干燥沉淀物，得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶，冷凍干燥所得結(jié)晶，得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為0.62%，純度為 39%。實(shí)施例3采用方法A，取曬干芫根塊根粉碎至200目，用10倍體積的蒸餾水煮沸，煮沸后不停攪拌的同時(shí)，緩緩加入石灰乳，將溶液PH調(diào)至8。繼續(xù)保持煮沸40min。趁熱用四層紗布?jí)|在布氏漏斗上進(jìn)行抽濾，抽濾完畢用中速濾紙對(duì)濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用5 倍體積的蒸餾水再次煎煮40min，抽濾、過濾，這樣對(duì)濾渣重復(fù)提取2次，合并濾液。將濾液加熱到70°C，緩緩加入濃鹽酸，將溶液PH調(diào)至4，攪拌均勻后，靜置24h后，抽濾，收集沉淀物。用大量蒸餾水沖洗沉淀物，直至PH為7，70°C減壓真空干燥沉淀物，得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶，70°C減壓真空干燥結(jié)晶，得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為0. 24%，純度為73%。實(shí)施例4采用方法B，用5倍體積的95%乙醇作為溶劑，于50°C對(duì)芫根原料進(jìn)行回流提取 lh，進(jìn)行4次重復(fù)提取。用中速濾紙過濾提取液，合并濾液，減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中，按1 1體積加入石油醚萃取3次，60°C揮去石油醚，又按1 2體積加入乙酸乙酯對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取3次，將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥，得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量95%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用DlOl大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為2. 5ml/min，用8倍柱體積的20%、60%、95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液50°C減壓濃縮、減壓真空干燥得到淡黃色的精制總黃酮，得率為0. 33%純度為85%。實(shí)施例5采用方法B，用10倍體積的50%乙醇作為溶劑，于60°C對(duì)芫根原料進(jìn)行回流提取 lh，進(jìn)行5次重復(fù)提取。用中速濾紙過濾提取液，合并濾液，減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中，按1 1體積加入石油醚萃取4次，60°C揮去石油醚，又按1 1體積加入乙酸乙酯對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取4次，將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥，得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量60%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為2ml/min，用4倍柱體積的30^^50%,80^^95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、冷凍干燥得到淡黃色的精制總黃酮，得率為0. 63%，純度為77%。實(shí)施例6采用方法B，用15倍體積的70%乙醇作為溶劑，于70°C對(duì)芫根原料進(jìn)行回流提取 lh，進(jìn)行3次重復(fù)提取。用中速濾紙過濾提取液，合并濾液，減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中，按1 1體積加入石油醚萃取4次，60°C揮去石油醚，又按1 3體積加入乙酸乙酯對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取4次，將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥，得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量70%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為lml/min，用2倍柱體積的30%、60%、95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、冷凍干燥得到淡黃色的精制總黃酮， 得率為0. 43%，純度為91%。實(shí)施例7采用方法C，將芫根原料用20倍體積的60%乙醇浸泡Ih。在常壓下，以微波功率 700w,微波輻射40s，間歇輻射3次，進(jìn)行微波輔助浸取。過濾收集濾液，將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中，按1 3體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對(duì)浸膏液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯部分，減壓回收溶劑，干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量60%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為2ml/min，用5倍柱體積的20%、50%、80%、95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為 0. 83%，純度為 45%。
實(shí)施例8采用方法C，將芫根原料用10倍體積的75%乙醇浸泡池。在常壓下，以微波功率 500w,微波輻射60s，間歇輻射2次，進(jìn)行微波輔助浸取。過濾收集濾液，將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中，按1 1體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對(duì)浸膏液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯部分，減壓回收溶劑，干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量75%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為lml/min，用3倍柱體積的30%、60 %、90%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色， 收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為0. 46%, 純度為60%。實(shí)施例9采用方法C，將芫根原料用30倍體積的、95%乙醇浸泡池。在常壓下，以微波功率 900w,微波輻射20s，間歇輻射5次，進(jìn)行微波輔助浸取。過濾收集濾液，將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中，按1 2體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對(duì)浸膏液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯部分，減壓回收溶劑，干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量95%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用DlOl大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為2. 5ml/min，用8倍柱體積的30^^60^^90%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液50 80°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮，得率為 0. 59%，純度為 72%。實(shí)施例10片劑取芫根總黃酮50g，加入50g可壓淀粉和40g羧甲基淀粉鈉，混合均勻，以 70%的乙醇為潤(rùn)濕劑，制軟材，18目篩制粒，烘干，16目篩整粒，加入3g硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑， 混合均勻，壓片、包衣，制成1000片包衣片。實(shí)施例11膠囊取芫根總黃酮50g，加入80g可壓淀粉和20g羧甲基纖維素鈉，混合均勻，以 70%的乙醇為濕潤(rùn)劑，制軟材，24目篩制粒，烘干，20目篩整粒，加入3g硬脂酸鎂，混合均勻，裝膠囊，制成1000粒膠囊。實(shí)施例12顆粒劑取芫根總黃酮100g，加入450g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素和50g檸檬酸，混合均勻，以3% PVP為潤(rùn)濕劑制軟材，20目篩制粒，烘干，18目篩整粒，分裝，制成粒徑為830 880 μ m的1000袋顆粒劑。每袋重0. 72 0. 78g。實(shí)施例13粉針劑取芫根總黃酮12g，羥丙基-ρ-環(huán)糊精135g，加注射用水3L，攪成糊狀，再加70°C 85°C的注射用水3L，溶解時(shí)溫度控制在70°C 85°C，加甘露醇450g溶解，再用 ImoL/L鹽酸溶液調(diào)pH值至5. 6，加入針用炭后室溫?cái)嚢?，過濾脫炭，精濾.濾液按每只2ml 進(jìn)行分裝，采用速凍法干燥，將制品取出，進(jìn)行封口，即得到性狀為白色疏松塊狀物或粉末， 即得粉針劑。實(shí)施例14滴丸將150g聚乙二醇4000在水浴上加熱得熔融液，趁熱加入芫根總黃酮50g， 攪拌均勻，65°C保溫1小時(shí)，用滴丸機(jī)滴制，滴速120滴/分鐘，滴制溫度65 75°C，在15°C左右的液體石蠟中冷卻，制得丸重約60mg，干燥，包衣，即得滴丸。實(shí)施例15口服液取蒸餾水適量，加入20g芫根總黃酮、180g蔗糖粉、20g檸檬酸，攪拌溶解， 過濾，濾液補(bǔ)充蒸餾水至10000ml，加入香精適量，攪拌均勻，分裝，每支10ml，壓蓋，100°C 消毒1小時(shí)，檢查合格，即得口服液。實(shí)施例16粉劑取芫根總黃酮30g，粉碎成粒徑為20 μ m粉狀物，加入500g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素混合均勻，分裝，制成1000袋粉劑。每袋重0. 68 0. 73g。 添加量為食品或飼料的0. 01 1%。將上述制備實(shí)施例2所得的芫根總黃酮進(jìn)行如下藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)將實(shí)施例2所制得的芫根總黃酮對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的降血糖作用實(shí)驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)材料與方法取雄性昆明種小鼠60只，28-32g,適應(yīng)性飼養(yǎng)后隨機(jī)分組，禁食12小時(shí)；每只小鼠尾靜脈注射85mg/kg的四氧嘧啶，7 后眼眶取血測(cè)定血糖，血糖達(dá)到界定值 (^ 16. 9mmol/L)的則確定為糖尿病小鼠，按血糖的高低隨機(jī)分組，分別為模型組、陽性組和總黃酮1(0. 5g/kg)、總黃酮II(lg/kg)和總黃酮III(2g/kg)組；對(duì)模型組每日給予 0. 5%羧甲基纖維素鈉(CMC)溶液0. 4ml,陽性組給予50mg/kg格列本脲，總黃酮各組給予相應(yīng)劑量的總黃酮提取物，給藥持續(xù)7天，第八天眼眶取血，以葡萄糖氧化酶法測(cè)定血清血糖。小鼠第八天眼眶取血后處死，解剖分別取肝、腎、胸腺和脾臟，稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS10. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1芫根總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠血糖的影響
權(quán)利要求
1.一種芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總黃酮提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總黃酮是通過如下步驟制備的(1)將芫根原料用5 15倍體積的蒸餾水煮沸；(2)攪拌的同時(shí)緩慢加入石灰乳或者NaOH堿性溶液，調(diào)pH至8 10，持續(xù)煮沸20 60min，趁熱用4層紗布抽濾，濾液用中速濾紙進(jìn)行再次過濾；(3)濾渣再用5 15倍體積蒸餾水煎煮，趁熱抽濾，重復(fù)提取1 3次，(4)合并兩次濾液，在60 80°C條件下，用濃鹽酸調(diào)pH至4 6，攪勻后靜置Mh，抽濾；(5)用蒸餾水將沉淀物洗至中性，干燥后得到粗制總黃酮，(6)用沸水重結(jié)晶，干燥后得到精制總黃酮，得率為0.2 0. 7重量％，純度為37% 75%。
2.一種芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總黃酮提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總黃酮是通過如下步驟制備的(1)用5 15倍體積的50 95%乙醇或甲醇作為溶劑，于50 80°C對(duì)芫根原料進(jìn)行回流提取1 4h，進(jìn)行1 4次重復(fù)提??；(2)用中速濾紙過濾提取液，合并濾液，減壓濃縮至濾液無醇味；(3)在濾液中，按1 1 3體積加入石油醚萃取3 5次，60°C揮去60°C水浴揮發(fā)掉溶液中的石油醚石油醚，又按1 1 3體積加入乙酸乙酯對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取3 5次， 將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥，得到粗總黃酮浸膏；(4)將粗總黃酮浸膏溶于少量50 95%乙醇，得到總黃酮上柱液，利用大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為1 2. 5ml/min，用2 8倍柱體積的20 95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液，將洗脫液50 80°C減壓濃縮、干燥得到精制的總黃酮，得率為0. 5 0. 7重量％，純度為75% 95%。
3.一種芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總黃酮提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總黃酮是通過如下步驟制備的(1)將芫根原料用10 30倍體積的60 95%乙醇浸泡1 汕；(2)在常壓下，以微波功率500 900w，微波輻射20 60s，間歇輻射2 5次，進(jìn)行微波輔助浸??；(3)過濾收集濾液，將濾液濃縮成無醇味的浸膏；(4)將浸膏溶于少量熱水中，按1 1 3體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對(duì)浸膏液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯部分，減壓回收溶劑，干燥后得到粗總黃酮浸膏；(5)將粗總黃酮浸膏溶于少量50 95%乙醇，得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水沖洗到流出液無色后，以流速為1 2. 5ml/min，用2 8倍柱體積的20 95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫至無色，收集洗脫液。將洗脫液50 80°C減壓濃縮、干燥得到精制的芫根總黃酮。得率為0.3 0.9重量％。純度為43% 75%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中所述芫根原料均為芫根的塊根，經(jīng)切片后自然風(fēng)干，然后粉碎得到粉狀物，粉碎細(xì)度達(dá)到40 200目。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中所述的干燥方法為減壓真空干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中將芫根總黃酮提取物制備成粉劑、片劑、膠囊、顆粒劑、緩釋片、緩釋膠囊、滴丸或液體制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總黃酮制備降血糖藥物的用途，本發(fā)明的芫根總黃酮在各劑量均顯示出顯著的降血糖活性，可利用芫根總黃酮制備藥物或者保健食品用于預(yù)防或者治療高血糖病癥。
文檔編號(hào)A61K36/83GK102293868SQ20111023903
公開日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2011年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月19日
發(fā)明者蔣思萍, 高平 申請(qǐng)人:西藏自治區(qū)高原生物研究所