專利名稱：一種納米顆粒藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體地，涉及一種納米顆粒藥物組合物的制備方法和該制備方法得到的納米顆粒藥物組合物。
背景技術(shù)：
納米顆粒藥物組合物是指藥物與納米載體形成的粒徑介于1-1OOOnm的顆粒藥物組合物。納米顆粒藥物組合物與其它藥物組合物相比，具有顯著優(yōu)勢(shì)(I)超微小體積，可通過(guò)人體最小的毛細(xì)血管，不易被吞噬細(xì)胞迅速清除，延長(zhǎng)了在循環(huán)系統(tǒng)中的存留時(shí)間；[2]到達(dá)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)分布集中的肝、脾、肺、骨髓、淋巴等靶部位；(3)能穿透組織間隙并被細(xì)胞吸收，有利于透皮吸收和細(xì)胞內(nèi)藥效發(fā)揮；(4)提高藥物的生物利用度和降低毒副作用等。
例如，現(xiàn)有的一種納米顆粒藥物組合物的制備方法是使用丙烯酰胺聚合物將藥物包封后 得到的，該制備方法得到的納米顆粒藥物組合物的藥物釋放難以得到控制，并且該納米顆粒藥物組合物的體內(nèi)定位難以觀測(cè)。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服納米顆粒藥物組合物的藥物釋放難以得到控制并且體內(nèi)定位難以觀測(cè)的缺陷，提供一種可以通過(guò)pH值和溫度控制藥物釋放并且可以通過(guò)熒光成像觀測(cè)體內(nèi)定位的納米顆粒藥物組合物及其制備方法。
本發(fā)明提供了一種納米顆粒藥物組合物的制備方法，該方法包括在水中，將水溶性藥物、載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇與親水性聚合物接觸，得到接觸后的產(chǎn)物，并且離心分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物；所述接觸的條件使得所述親水性聚合物能夠包封所述水溶性藥物和所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇，形成粒徑為100-300nm的納米顆粒； 所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的總含量至少為90 重量％。
本發(fā)明還提供了上述方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。
通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法得到的納米顆粒藥物組合物可以通過(guò)pH值和溫度控制藥物釋放并且可以通過(guò)熒光成像觀測(cè)體內(nèi)定位。
本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式
部分予以詳細(xì)說(shuō)明。


圖1A表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜。圖1B表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物在365nm紫外光照射下的突光圖像。圖1C表示實(shí)施例I中經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物在365nm紫外光照射下的圖像。
圖2表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物透射電鏡圖。
圖3表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的粒徑分布。
圖4表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物均的平均粒徑-溫度變化圖實(shí)。
圖5表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的平均粒徑-pH值變化圖。
圖6表示實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的5-氟尿嘧啶釋放曲線。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體實(shí)施方式
僅用于說(shuō)明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。
在本發(fā)明中，在未作相反說(shuō)明的情況下，使用的術(shù)語(yǔ)“溶液”的范圍并不限于分散質(zhì)的粒子直徑小于Inm的分散系(真溶液)，而是泛指均一的液態(tài)混合物，可以包括膠狀分散體(膠體溶液)。
在本發(fā)明中，在未作相反說(shuō)明的情況下，氣體和液體的體積數(shù)值均為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的數(shù)值。
本發(fā)明提供了一種納米顆粒藥物組合物的制備方法，該方法包括在水中，將水溶性藥物、載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇與親水性聚合物接觸，得到接觸后的產(chǎn)物，并且離心分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物；所述接觸的條件使得所述親水性聚合物能夠包封所述水溶性藥物和所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇，形成粒徑為100-300nm的納米顆粒； 所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的總含量至少為90 重量％。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，優(yōu)選情況下，相對(duì)于每毫克的所述水溶性藥物，以載體蛋白計(jì)，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的用量為O. 5-2mg,以固體的量計(jì)，所述親水性聚合物的用量為30-3000mg。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，所述接觸的條件使得所述親水性聚合物只要能夠包封所述水溶性藥物和所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇即可，優(yōu)選情況下，所述接觸的條件包括溫度為1-10°C，進(jìn)一步優(yōu)選為2-7°C;時(shí)間為10-80小時(shí)，進(jìn)一步優(yōu)選為30-60小時(shí)。
本發(fā)明中，所述離心的條件可以是常規(guī)的選擇，例如，所述離心的條件包括速度為20000-40000X g，溫 度為2-10°C，時(shí)間為30_100min。離心后，下層的沉降物即為所述產(chǎn)物中的固形物。所述產(chǎn)物中的固形物即可作為所述納米顆粒藥物組合物。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，所述水溶性藥物的選擇沒(méi)有特別的限制，例如可以選擇室溫下在水中溶解度大于5mg/ml的藥物；優(yōu)選情況下，為5-氟尿嘧啶、阿霉素、米托蒽醌、柔紅霉素和表柔比星等水溶性抗腫瘤藥物中的至少一種；進(jìn)一步優(yōu)選情況下，所述水溶性藥物為5-氟尿嘧啶。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇中，相對(duì)于每毫克的載體蛋白，金納米簇的含量可以為O. 00004-0. 0004mmolo
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的選擇及其制備方法可以為本領(lǐng)域公知的選擇和制備方法，例如文獻(xiàn)(袁媛等，牛血清載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇用于活細(xì)胞熒光成像，高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)，2010，31 (11) ,2167-2172)中所述的方法，優(yōu)選情況下，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的制備方法包括在堿和水存在下，將載體蛋白和氯金酸在30-40°C下混合后溫育15-30小時(shí)。
其中，所述載體蛋白可以為人血清白蛋白、牛血清白蛋白和去鐵鐵蛋白中的至少一種。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，為了進(jìn)一步提高成像的效果和可控釋放的效果， 優(yōu)選情況下，在所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的制備方法中，相對(duì)于每毫克的載體蛋白，氯金酸的用量為O. 00004-0. 0004mmol,堿的用量為O. 0004-0. 004mmol,水的用量為 O. 01-0.1ml ;所述堿為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀。
其中，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇可以為該制備方法得到的產(chǎn)品，具體地， 指該方法得到的經(jīng)過(guò)或未經(jīng)過(guò)透析的完成所述溫育后的液體。
所述透析是指將所述完成所述溫育后的液體置于用透析膜隔離的透析囊中，并且使含有所述完成所述溫育后的液體的透析囊浸沒(méi)或部分浸沒(méi)于透析液中。所述透析膜可以為能夠截留分子量12000以上物質(zhì)的透析膜，例如購(gòu)自北京拜耳迪生物技術(shù)有限公司的貨號(hào)為16051-01的產(chǎn)品。所述透析液是指滲透壓低于所述完成所述溫育后的液體的液體， 例如去離子水。其中，相對(duì)于每毫升的所述完成所述溫育后的液體，所述透析膜的用量為 5-20cm2，所述透析液的用量為lOO-lOOOml，進(jìn)行透析的時(shí)間可以為1_15天。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，為了進(jìn)一步提高成像的效果和可控釋放的效果，優(yōu)選情況下，所述親水性聚合物的分子量為12000-60000Da，所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的重量比為1: 3-14。其中，所述親水性聚合物的分子量是指重均分子量，其數(shù)值是以超速離心沉降速度法測(cè)定得到的數(shù)值。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中，所述親水性聚合物制備方法可以包括在惰性氣體保護(hù)下，將含有丙烯酸和N-異丙基丙烯酰胺的單體與引發(fā)劑在水溶液聚合條件下接觸，得到聚合產(chǎn)物；所述單體中，丙烯酸和N-異丙基丙烯酰胺的總含量至少為90重量％。
其中，所述惰性氣體可以為氮?dú)?。其中，丙烯酸和N-異丙基丙烯酰胺的重量比可以為1: 3-14。其中，丙烯酸和所述引發(fā)劑的重量比可以為1: 0.3-2。其中，所述引發(fā)劑可以為過(guò)硫酸鉀、過(guò)硫酸銨和偶氮二異丁腈中的至少一種。其中，所述水溶液聚合條件可以包括單體總濃度為0. 5-2重量％ ;溫度為65-75°C，時(shí)間為7_10小時(shí)。其中，所述聚合產(chǎn)物可以為所述水溶液聚合條件下完成接觸后的液相產(chǎn)物，也可以是該液相產(chǎn)物經(jīng)離心后分離得到的下層沉降物。
其中，為了達(dá)到提高交聯(lián)的效果，優(yōu)選情況下，所述單體可以進(jìn)一步含有N， N'-亞甲基雙丙烯酰胺。其中，丙烯酸和N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺的重量比可以為 1 0. 7-2. 4。
其中，所述親水性聚合物可以是由上述制備方法得到的產(chǎn)品，具體地，指該方法得到的經(jīng)過(guò)或未經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物。
所述透析是指將所述聚合產(chǎn)物置于用透析膜隔離的透析囊中，并且使含有所述聚合產(chǎn)物的透析囊浸沒(méi)或部分浸沒(méi)于透析液中。所述透析膜可以為能夠截留分子量12000以上物質(zhì)的透析膜，例如購(gòu)自北京拜耳迪生物技術(shù)有限公司的貨號(hào)為16051-01的產(chǎn)品。所述透析液是指滲透壓低于所述聚合產(chǎn)物的液體，例如去離子水。其中，相對(duì)于每克所述聚合產(chǎn)物，所述透析膜的用量為5-20cm2,所述透析液的用量為100-1000ml,進(jìn)行所述透析的時(shí)間為1-15天。
本發(fā)明還提供了上述方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。
根據(jù)本發(fā)明特別優(yōu)選的一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供的納米顆粒藥物組合物的制備方法包括如下步驟
(I)在堿和水存在下，將載體蛋白和氯金酸在30_40°C下混合后溫育15-30小時(shí)； 并且任選地，透析分離得到完成所述溫育后的液體中分子量大于12000的組分；
相對(duì)于每毫克的載體蛋白，氯金酸的用量為O. 00004-0. 0004mmol，堿的用量為 O. 0004-0. 004mmol,水的用量為O. 01-0.1ml ;所述堿為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀；
(2)在惰性氣體保護(hù)下，將含有丙烯酸、N-異丙基丙烯酰胺和可選的N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺的單體與引發(fā)劑在水溶液聚合條件下接觸，得到聚合產(chǎn)物；并且任選地，透析分離得到所述聚合產(chǎn)物中分子量大于12000的組分；
所述單體中，丙烯酸和N-異丙基丙烯酰胺的總含量至少為90重量％ ；
優(yōu)選地，相對(duì)于I 重量份的丙烯酸，N-異丙基丙烯酰胺的用量為3-14重量份，N, N'-亞甲基雙丙烯酰胺的用量為O. 7-2. 4重量份，所述引發(fā)劑的用量為O. 3-2重量份，所述引發(fā)劑可以為過(guò)硫酸鉀、過(guò)硫酸銨和偶氮二異丁腈中的至少一種，單體總濃度為O. 5-2 重量％，溫度為65-75°C，時(shí)間為7-10小時(shí)；
(3)在水中，將水溶性藥物、載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇與親水性聚合物接觸， 得到接觸后的產(chǎn)物，并且離心分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物；
所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇為步驟(I)得到的所述完成所述溫育后的液體和/或所述完成所述溫育后的液體中分子量大于12000的組分；所述親水性聚合物為步驟(2)得到的聚合產(chǎn)物和/或所述聚合產(chǎn)物中分子量大于12000的組分；
相對(duì)于每毫克的所述水溶性藥物，以載體蛋白計(jì)，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的用量為O. 5-2mg,以固體的量計(jì)，所述親水性聚合物的用量為30-3000mg ;所述接觸的條件包括溫度為1-10°C，進(jìn)一步優(yōu)選為2-7°C;時(shí)間為10-80小時(shí)，進(jìn)一步優(yōu)選為30-60 小時(shí)；
所述離心的條件包括速度為20000-40000 X g，溫度為2_10 V，時(shí)間為 30_100mino
以下，通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1
本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明提供的制備方法以及通過(guò)本發(fā)明提供的納米顆粒藥物組合物。
(I)將ImL氯金酸水溶液(10mmol/L，37°C )、5mL牛血清白蛋白(BSA)溶液(50mg/ mL, 37°C )和O.1mL濃度為lmol/L的NaOH溶液混合均勻后置于37°C搖床溫育24h后，得到完成所述溫育后的液體。
(2)稱取O. 1833g的N-異丙基丙烯酰胺、O. 02703g過(guò)硫酸鉀、O. 0308g的N， N'-亞甲基雙丙烯酰胺和O. 0129g的丙烯酸于IOOml三口燒瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用25ml 三次蒸餾水?dāng)嚢枞芙夂笊郎刂?0°C，保持9小時(shí)，得到液相產(chǎn)物。將所得液相產(chǎn)物在 40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離得到的下層沉降物。將所述下層沉降物置于用透析膜(能夠截留分子量12000以上物質(zhì)的透析膜，購(gòu)自北京拜耳迪生物技術(shù)有限公司的貨號(hào)為16051-01的產(chǎn)品)隔離的透析囊中，并且使含有所述下層沉降物的透析囊浸沒(méi)于去離子水中。相對(duì)于每克所述聚合產(chǎn)物，所述透析膜的用量為5cm2，去離子水的用量為100ml，進(jìn)行所述透析的時(shí)間為7天，得到經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物。經(jīng)過(guò)超速離心沉降速度法測(cè)得該聚合產(chǎn)物中親水性聚合物的重均分子量為52000Da。
(3)取20mg的步驟(I)得到的完成所述溫育后的液體(以牛血清白蛋白的量計(jì))、 IOmg的5-氟尿喃唳與300mg的步驟(2)得到的經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物(以固體的量計(jì))加入到IOml三次蒸餾水中，混合均勻后放入4°C冰箱中孵育48小時(shí)，得到接觸后的產(chǎn)物，將接觸后的產(chǎn)物在40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物。
該固形物即為通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。
實(shí)施例2
本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明提供的制備方法以及通過(guò)本發(fā)明提供的納米顆粒藥物組合物，并且通過(guò)以下步驟完成
(I)將 5mL 氯金酸水溶液(10mmol/L, 37 °C )、5mL BSA 溶液(50mg/mL, 37 °C )和 0. 5mL lmol/L NaOH溶液混合均勻后置于37°C搖床溫育24h后，得到完成所述溫育后的液體。
(2)稱取O. 1611g的N-異丙基丙烯酰胺、0.02703g過(guò)硫酸鉀、0.0308g的N， N'-亞甲基雙丙烯酰胺和O. 0257g的丙烯酸于IOOml三口燒瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用25ml 三次蒸餾水?dāng)嚢枞芙夂笊郎刂?0°C，保持9小時(shí)，得到液相產(chǎn)物。將所得液相產(chǎn)物在 40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離得到的下層沉降物。將所述下層沉降物置于用透析膜(能夠截留分子量12000以上物質(zhì)的透析膜，例如購(gòu)自北京拜耳迪生物技術(shù)有限公司的貨號(hào)為16051-01的產(chǎn)品)隔離的透析囊中，并且使含有所述下層沉降物的透析囊浸沒(méi)于去離子水中。相對(duì)于每克所述聚合產(chǎn)物，所述透析膜的用量為20cm2，去離子水的用量為 1000ml，進(jìn)行所述透析的時(shí)間為7天，得到經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物。經(jīng)過(guò)超速離心沉降速度法測(cè)得該聚合產(chǎn)物中親水性聚合物的重均分子量為52000Da。
(3)取2mg的步驟(I)得到的完成所述溫育后的液體(以牛血清白蛋白的量計(jì))、 2mg的5-氟尿喃唳與300mg的步驟(2)得到的經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物(以固體的量計(jì))加入到IOml三次蒸餾水中，混合均勻后放入4°C冰箱中孵育48小時(shí)，得到接觸后的產(chǎn)物，將接觸后的產(chǎn)物在40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物。
該固形物即為通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。
實(shí)施例3
本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明提供的制備方法以及通過(guò)本發(fā)明提供的納米顆粒藥物組合物，并且通過(guò)以下步驟完成
(I)將 IOmL 氯金酸水溶液(10mmol/L，37°C )、5mL BSA 溶液(50mg/mL, 37°C )和 ImL lmol/L NaOH溶液混合均勻后置于37°C搖床溫育24h后，得到完成所述溫育后的液體。
(2)稱取0. 1358g的N-異丙基丙烯酰胺、0.01352g過(guò)硫酸鉀、0.0308g的N， N'-亞甲基雙丙烯酰胺和0.0432g的丙烯酸于IOOml三口燒瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用25ml 三次蒸餾水?dāng)嚢枞芙夂笊郎刂?0°C，保持9小時(shí)，得到液相產(chǎn)物。將所得液相產(chǎn)物在 40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離得到的下層沉降物。將所述下層沉降物置于用透析膜(能夠截留分子量12000以上物質(zhì)的透析膜，例如購(gòu)自北京拜耳迪生物技術(shù)有限公司的貨號(hào)為16051-01的產(chǎn)品)隔離的透析囊中，并且使含有所述下層沉降物的透析囊浸沒(méi)于去離子水中。相對(duì)于每克所述聚合產(chǎn)物，所述透析膜的用量為IOcm2，去離子水的用量為500ml，進(jìn)行所述透析的時(shí)間為7天，得到經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物。
經(jīng)過(guò)超速離心沉降速度法測(cè)得該聚合產(chǎn)物中親水性聚合物的重均分子量為 52000Da。
(3)取0.05mg的步驟(I)得到的完成所述溫育后的液體(以牛血清白蛋白的量計(jì))、0· Img的5-氟尿喃唳與300mg的步驟(2)得到的經(jīng)過(guò)透析的聚合產(chǎn)物(以固體的量計(jì))加入到IOml三次蒸餾水中，混合均勻后放入4°C冰箱中孵育48小時(shí)，得到接觸后的產(chǎn)物，將接觸后的產(chǎn)物在40000Xg、7°C條件下離心I小時(shí)后分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物。
該固形物即為通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。
測(cè)試實(shí)施例1
將實(shí)施例1-3得到的納米顆粒藥物組合物分別按如下方法進(jìn)行熒光激發(fā)和發(fā)射光譜測(cè)試、顯微形態(tài)觀察、粒徑分布測(cè)試和藥物可控釋放的測(cè)試
通過(guò)Pekin Elmer Instruments (Shanghai) Co. Ltd 公司 LS-55 型的突光 / 憐光 / 發(fā)光分光光度計(jì)，測(cè)得實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物如圖1A所示的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜。并且實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物在365nm紫外光照射下具有如圖1B所示的熒光圖像。
通過(guò)透射電鏡(美國(guó)FEI，Tecnai G220S-TWIN，200kV)觀察實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物，可見實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物如圖2所示的顯微形態(tài)，其粒徑為200nm左右。
通過(guò)激光粒度儀對(duì)實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物進(jìn)行動(dòng)態(tài)光散射 (Zetasizer NanoZS)測(cè)定,測(cè)得實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物具有如圖3所示的粒徑分布，其平均粒徑為221nm，分散系數(shù)為O. 102。
分別在20°C、25°C、30°C、35°C、40°C、45°C和 5(TC下(分別通過(guò)從 20°C加熱至 50°C以及從50° C冷卻至20°C實(shí)現(xiàn)所述溫度梯度)，通過(guò)激光粒度儀測(cè)定實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的平均粒徑，可見實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物具有如圖4所示的平均粒徑-溫度變化圖。實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物具有隨溫度升高，粒徑變小的溫度敏感特性。
分別在pH值為3、5、7和9的條件下，通過(guò)激光粒度儀測(cè)定實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的平均粒徑，可見實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物具有如圖5所示的平均粒徑-pH值變化圖。從該可以看出實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物顯示了 pH敏感特性。在pH從3變化到7. 6的過(guò)程中，粒徑逐漸變大；在pH從7. 6變化到9的過(guò)程中，粒徑逐漸變小。
分別在(l)25°C，pH值為7. 4的情況下，(2)37°C，pH值為7. 4的情況下，(3)37。。， PH值為5.3的情況下，按照文獻(xiàn)(陳瓊等，5-氟尿嘧啶脂質(zhì)體的制備與評(píng)價(jià)，中華醫(yī)藥雜志，2006年第6卷第9期976-978頁(yè))中的方法，測(cè)定實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物的5-氟尿嘧啶的釋放曲線，可見實(shí)施例1得到的納米顆粒藥物組合物具有如圖6所示的 5-氟尿嘧啶的釋放曲線。
對(duì)實(shí)施例2和3得到的納米顆粒藥物組合物進(jìn)行如上相同的測(cè)試，得到與如上基本相同的檢測(cè)結(jié)果，本發(fā)明在此不再贅述。
以上結(jié)合附圖詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型，這些簡(jiǎn)單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
另外需要說(shuō)明的是，在上述具體實(shí)施方式
中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過(guò)任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對(duì)各種可能的組合方式不再另行說(shuō)明。
此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。
權(quán)利要求
1.一種納米顆粒藥物組合物的制備方法，該方法包括在水中，將水溶性藥物、載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇與親水性聚合物接觸，得到接觸后的產(chǎn)物，并且離心分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物；所述接觸的條件使得所述親水性聚合物能夠包封所述水溶性藥物和所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇，形成粒徑為100-300nm的納米顆粒；所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的總含量至少為90重量％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其中，相對(duì)于每毫克的所述水溶性藥物，以載體蛋白計(jì)，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的用量為O. 5-2mg，所述親水性聚合物的用量為30-3000mgo
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其中，所述接觸的條件包括溫度為1-10°C，時(shí)間為10-80小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其中，所述接觸的條件包括溫度為2-7°C，時(shí)間為30-60小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的制備方法，其中，所述水溶性藥物為5-氟尿嘧啶、阿霉素、米托蒽醌、柔紅霉素和表柔比星中的至少一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的制備方法，其中，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇中，相對(duì)于每毫克的載體蛋白，金納米簇的含量為O. 00004-0. 0004mmolo
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的制備方法，其中，所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的制備方法包括在堿和水存在下，將載體蛋白和氯金酸在30-40°C下混合后溫育15-30小時(shí)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其中，在所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇的制備方法中，相對(duì)于每毫克的載體蛋白，氯金酸的用量為O. 00004-0. 0004mmol，堿的用量為O.0004-0. 004mmol,水的用量為O. 01-0.1ml ;所述堿為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀。
9.根據(jù)權(quán)利要求1、2、4、6或8所述的制備方法，其中，所述親水性聚合物的重均分子量為12000-60000Da，所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的重量比為1: 3-14。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的制備方法得到的納米顆粒藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種納米顆粒藥物組合物的制備方法，該方法包括在水中，將水溶性藥物、載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇與親水性聚合物接觸，得到接觸后的產(chǎn)物，并且離心分離出所述接觸后的產(chǎn)物中的固形物；所述接觸的條件使得所述親水性聚合物能夠包封所述水溶性藥物和所述載體蛋白介導(dǎo)合成的金納米簇，形成粒徑為100-300nm的納米顆粒；所述親水性聚合物中，丙烯酸結(jié)構(gòu)單元和N-異丙基丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的總含量至少為90重量％。本發(fā)明還提供了上述方法制備得到的納米顆粒藥物組合物。通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法得到的納米顆粒藥物組合物可以通過(guò)pH值和溫度控制藥物釋放并且可以通過(guò)熒光成像觀測(cè)體內(nèi)定位。
文檔編號(hào)A61K45/00GK103006565SQ20111030129
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2011年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月28日
發(fā)明者聶廣軍, 吳雁, 蘇世帥, 孫云, 王海 申請(qǐng)人:國(guó)家納米科學(xué)中心