專利名稱：血脂異常的防治的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供血脂異常癥，特別是高甘油三酯血癥、高膽固醇血癥、高低密度脂蛋白膽固醇血癥、高非高密度脂蛋白膽固醇血癥和低高密度脂蛋白膽固醇血癥的治療及預(yù)防藥及其使用方法。
背景技術(shù)：
心血管疾病已成為我國(guó)的常見(jiàn)病和多發(fā)病。心血管疾病是一個(gè)多種原因引起的疾病。但血脂過(guò)多是影響心血管疾病發(fā)展的一個(gè)重要因素。他汀類藥物(Statin)和其他降血脂藥物的應(yīng)用能有效的降低血液中的膽固醇和其他脂類水平，從而減低了心血管疾病的發(fā)生。而研究表明Statin藥物對(duì)我國(guó)患者的功效并不像對(duì)西方人那樣好。雖有20%到30%的國(guó)內(nèi)病人服Statin后有較明顯的降低血管粥樣斑塊的減少的作用，而70%到80 %的病人對(duì)此藥沒(méi)有效果。血脂異常指的是血液中脂類水平包括膽固醇、甘油三酸酯或磷脂的反常，血脂異常是引起心血管疾病(CVD)病的主要因素之一。血脂過(guò)多特別是高水平低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)膽固醇是引起心血管疾病潛在危險(xiǎn)。胰島素抗性是指正常水平的胰島素不足以產(chǎn)生對(duì)脂肪細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和肝細(xì)胞的正常對(duì)胰島素相應(yīng)的反應(yīng)在脂肪細(xì)胞內(nèi)，胰島素抗性導(dǎo)致儲(chǔ)存的甘油三脂的水解，進(jìn)而提高血漿內(nèi)自由脂肪酸的含量。在肌肉細(xì)胞內(nèi)，胰島素抗性降低葡萄糖的吸收；而在肝細(xì)胞內(nèi)，降低葡萄糖的儲(chǔ)備，兩者共同導(dǎo)致血糖含量的提高。胰島素抗性引起的血中高胰島素和高血糖經(jīng)常導(dǎo)致代謝綜合征和2型糖尿病。胰島素抗性和血脂異常是兩個(gè)引起肥胖病、心血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化和II型糖尿病的主要因素。因此，利 用藥物治療、防治和改善胰島素抗性，降低血漿甘油三酯和增加高密度脂蛋白(HDL)的量在防止心血管疾病有重要意義?！愦胧?，例如鍛煉、減輕體重、不喝酒是控制血脂異常的第一步。然而，如果甘油三酯水平很高，需要利用Fibric酸的衍生物,例如Gemfibrozil或煙酸治療。Gemfibrozil降低甘油三酯的程度大約在25-35%，并稍微提高高密度脂蛋白量，但對(duì)胰島素抗性沒(méi)有作用。煙酸反而增加胰島素抗性。而且，煙酸導(dǎo)致許多副作用，包括皮膚紅斑或瘙癢甚至哮喘等過(guò)敏反應(yīng)限制了其應(yīng)用。因此，研發(fā)有效的治療血脂異常，提高高密度脂蛋白的水平和改善胰島素抗性的藥物是非常必要的。本發(fā)明提供的方法利用其二十碳五烯酸(eicosapentaenoate,EPA)藥用的鹽和酯中的至少一種改善血液脂類的水平從而防止與心血管相關(guān)的疾病發(fā)生。本發(fā)明中，其藥物構(gòu)成包含不超過(guò)5%的二十二碳六烯酸(docosahexaenoi, DHA)酸或者衍生物，或根本可以不含DHA或酸或鹽的衍生物。本發(fā)明中，EPA乙酯類的含量至少是所有脂肪酸含量的95 %，其他脂肪酸包含不超過(guò)5 %。本發(fā)明提供了一種方法治療和預(yù)防血脂異常，包括每天病人服用EPA乙酯一到四次。具體發(fā)明的其他細(xì)節(jié)將在下面敘述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供用于血脂異常癥，特別是高膽固醇(Cho)血癥、高甘油三酯(TG)血癥、高低密度脂蛋白膽固醇(LDLCho)血癥、高非高密度脂蛋白膽固醇(HDLCho)血癥和低高密度脂蛋白膽固醇血癥的改善或治療以及抑制代謝綜合征、冠狀心臟病、血管病、動(dòng)脈粥樣硬化、心率失常、高血壓、心肌梗塞和其他及冠狀心臟病的方法，安全性高，有效性優(yōu)異，易使用的血脂異常癥的改善或治療藥及其使用方法。“治療”的定義包括，但并不限制于，抑止疾病或功能紊亂，例如，阻止疾病或功能紊亂的發(fā)展；消除疾病或功能紊亂；減輕疾病或功能紊亂。“預(yù)防”的定義包括防止機(jī)體功能紊亂最初的發(fā)生。或通過(guò)早檢測(cè)和適當(dāng)?shù)闹委熥铚驕p輕現(xiàn)有疾病的惡化；但主要是指未被診斷的功能紊亂或疾病，防止進(jìn)一步發(fā)展為疾病或功能紊亂。本發(fā)明中，“血脂異常癥”為血中脂質(zhì)成分的至少一種脫離正常范圍的病狀。作為血中脂質(zhì)成分，如總 Cho、TG、LDLCho, HDLCho VLDLCho、非 HDLCho、IDLCho, VHDLCho、游離脂肪酸、磷脂、乳糜微粒ApoB、Lp (a)、RLPCho, sdLDLCho等。特別是本發(fā)明列出的Cho、TG、LDLCho、非HDLCho和HDLCho作為臨床上重要的脂質(zhì)成分，進(jìn)而的例子，如TG作為主要治療對(duì)象。此外，與血脂異常癥伴隨的末梢血液循環(huán)障礙也包含在本發(fā)明中使用的“血脂異常癥”的范圍。只要不特別說(shuō)明， 本發(fā)明中的“血脂異常癥”的用語(yǔ)含有上述血中脂質(zhì)成分異常和與血脂異常癥伴隨或引起的心血管疾病及末梢血液循環(huán)障礙意思的全部。EPA是碳原子數(shù)為20，分子內(nèi)具有5個(gè)碳-碳雙鍵，從甲基側(cè)數(shù)在第3個(gè)位置具有最初的雙鍵的ω 3多元不飽和脂肪酸的全部順式5，8，11，14，17 二十碳五烯酸(all cis-5,
8,11,14,17-1cosapentaenoic acid)。本發(fā)明中的“EPA”的用語(yǔ),只要不特別說(shuō)明，則以不僅含有EPA，還含有其可藥用的鹽、酯、酰胺、磷脂、甘油酯等EPA衍生物的意思使用。本發(fā)明中使用的EPA可以為合成品、半合成品或天然品中的任意一種，也可以為含有它們的天然油的方式。其中，天然品指的是由含有EPA的天然油通過(guò)已知的方法提取得到的制品，粗純化得到的制品，或?qū)⑺鼈冞M(jìn)一步高度純化得到的制品。半合成品可含有微生物等產(chǎn)生的多元不飽和脂肪酸，此外也含有對(duì)該多元不飽和脂肪酸或天然的多元不飽肪酸實(shí)施酯化、酯交換等化學(xué)處理而得到的制品。本發(fā)明中，作為EPA，可以單獨(dú)使用其中的一種或?qū)?兩種以上組合來(lái)使用。本發(fā)明中，作為EPA，具體地說(shuō)，可以舉出EPA，作為其可藥用鹽的鈉鹽、鉀鹽等無(wú)機(jī)鹽，芐基胺鹽、二乙基胺鹽等有機(jī)鹽，精氨酸鹽、賴氨酸鹽等與堿性氨基酸的鹽，以及作為酯的乙酯等烷基酯，單、二以及TG等的酯。首選為乙酯，即EPA-E。對(duì)EPA的純度不特別限定，但是通常作為本藥物組合物的全部脂肪酸中的EPA的含量，首選以其含量的25%以上，更進(jìn)一步首選以其含量的45%以上，進(jìn)一步首選其含量的70%以上，更進(jìn)一步首選其含量的85%以上，特別首選其含量的96%以上。此外，本藥物組合物可以含有二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸、α亞麻酸等EPA以外的ω3多元不飽和脂肪酸，它們的可藥用的鹽或酯，作為首選例子，可以是EPA-E和DHA-E的組合。例如使用EPA-E和DHA-E時(shí)，若EPA的本藥物組合物純度是上述的純度，則對(duì)EPA-E/DHA-E的組成比以及全部脂肪酸中的EPA-E+DHA-E的含量比不特別限定，但是作為優(yōu)選的組成比，優(yōu)選EPA-E/DHA-E為O. 8以上，更優(yōu)選為1. O以上，進(jìn)一步優(yōu)選為1. 2以上。EPA-E+DHA-E優(yōu)選純度高，例如全部脂肪酸及其衍生物中的EPA-E+DHA-E含量比為40%以上，則優(yōu)選的純度為55 %以上，進(jìn)一步優(yōu)選的純度為84 %以上，進(jìn)一步更優(yōu)選的純度為96. 5%以上。即本藥物組合物優(yōu)選全部脂肪酸中的ω 3多元不飽和脂肪酸純度應(yīng)很高。優(yōu)選ω3多元不飽和脂肪酸以外的脂肪酸含如長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸中ω6多元不飽和脂肪酸，特別是花生四烯酸含量應(yīng)少，優(yōu)選后的含量小于2 %，進(jìn)一步優(yōu)選小于后的含量I %，進(jìn)一步優(yōu)選后的產(chǎn)品不含有花生四烯酸的配方。用本發(fā)明改善或治療藥使用的EPA-E與魚(yú)油或魚(yú)油的濃縮物相比，飽和脂肪酸、花生四烯酸等的雜質(zhì)少，攝取后可以不存在營(yíng)養(yǎng)過(guò)多、維生素A過(guò)量的問(wèn)題。此外，由于為酯衍生物，與主要為原魚(yú)油等相比，通過(guò)添加抗氧化劑，氧化穩(wěn)定性高，可以得到充分穩(wěn)定的藥物制劑。本發(fā)明中的血脂異常治療法的適應(yīng)癥包括，但并不局限在，高甘油三酯，高膽固醇和混合型的血脂異常及極高甘油三酯水平。本發(fā)明中的血脂異常治療法包括用于在飲食或禁食的情況下，甘油三酯水平至少 150mg/d,至少大約 200mg/dl、至少 300mg/dl、至少 400mg/dl、至少 500mg/dl、至少600mg/dl、至少 700mg/dl、至少 800mg/dl、至少 900mg/dl、至少 IOOOmg/dl、至少 IlOOmg/dl、至少 1200mg/dl、至少 1300mg/dl、至少 1400mg/dl 或者大約至少 1500mg/d。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)或正在使用Lovaza 并且LDL-C水平有所升高或沒(méi)有變動(dòng)和non-HDL-C水平也沒(méi)有變動(dòng)?；颊呖赏Ｖ故褂肔ovaza 并換用本發(fā)明的治方法。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)或正在使用Statin藥物并且LDL-C水平有所下降，沒(méi)有或者有n on-HDL-C和甘油三酯水平變動(dòng)。患者可停止使用Statin藥物并換用本發(fā)明的治方法。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)Statin或正在使用藥物并且LDL-C水平有所下降，沒(méi)有或者有non-HDL-C和甘油三酯水平變動(dòng)?；颊呖膳cStatin和用本發(fā)明的治療方法合用。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)或正在使用中草藥藥物并且LDL-C水平有所下降，沒(méi)有或者有non-HDL-C和甘油三酯水平變動(dòng)。患者停用中草藥藥物用并換用本發(fā)明的治方法。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)或正在使用中草藥藥物并且LDL-C水平有所下降，沒(méi)有或者有non-HDL-C和甘油三酯水平變動(dòng)?；颊呖捎弥胁菟幩幬锱c本發(fā)明的治療方法合用。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已使用過(guò)或正在使用抗肥胖藥物(西藥或中藥)，患者可停止使用抗肥胖藥物改用本發(fā)明的方法治療或與用本發(fā)明的治方合用。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能已早先使用過(guò)或正在使用抗糖尿病藥物(西藥或中藥)，患者可停止使用抗糖尿病藥物改用本發(fā)明的方法治療或與用本發(fā)明的治方合用。本發(fā)明中的血脂異常治的對(duì)象可能是早期高甘油三酯或還沒(méi)有高甘油三酯的出現(xiàn)，但可以用本發(fā)明預(yù)防。
本發(fā)明中的血脂異常治療的對(duì)象可能是早期高甘油三酯或還沒(méi)有高甘油三酯的出現(xiàn)，但可以用本發(fā)明結(jié)合飲食、鍛煉降低血液甘油三酯和增加HDL，降低心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于心血管疾病的預(yù)防，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可連續(xù)用藥，例如連續(xù)用藥大約I到200個(gè)星期，大約I到100個(gè)星期，大約I到80個(gè)星期，大約I到50個(gè)星期，大約I到40個(gè)星期，大約I到20個(gè)星期，大約I到15個(gè)星期，大約I到12個(gè)星期，大約I到10個(gè)星期，大約I到5個(gè)星期，大約I到2個(gè)星期或大約I個(gè)星期，其治療結(jié)果是使患者的甘油三酯降低或穩(wěn)定在用藥前的基礎(chǔ)水平。對(duì)于心血管疾病的預(yù)防，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，在醫(yī)生監(jiān)督下長(zhǎng)期連續(xù)用藥。對(duì)于心血管疾病的預(yù)防，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，其用藥量可為O. 5克/天、I克/天、2克/天、3克/天、4克/天、5克/天、6克/天。對(duì)于心血管疾病的治療，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，用本發(fā)明的方法治療后可以是以下一種或幾個(gè)結(jié)果例如，降低甘油三酯水平；降低Apo B水平；增加HDL-C水平；LDL-C水平增加；降低LDL-C水平；降低non-HDL-C水平；降低vLDL水平；apo A-1水平增加；apo A-1或apo B比率的增加；降低脂蛋白A水平；降低LDL微粒數(shù)目；LDL顆粒大小的增加；降低氧化的LDL ;降低血紅蛋白A Ic (HbA Ic);降低胰島素抗性；降低脂蛋白結(jié)合的磷脂酶A2 ;降低interleukin-6 ;清液或血楽;EPA的增加；紅血球(RBC)膜EPA增加。以上的變化是指以患者的起始相應(yīng)參數(shù)的濃度為基礎(chǔ)。對(duì)于心血管疾病的治療，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，用本發(fā)明的方法治療后其下列各項(xiàng)指標(biāo)可以降低或穩(wěn)定在用藥前的基礎(chǔ)水平甘油三酸酯，Apo B, HDL-C, LDL-C, non-HDL-C, vLDL、apo A-1、apo A-1 或 apo B 比率、脂蛋白A、LDL微粒大小、LDL數(shù)目、被氧化的LDL、血紅蛋白A Ic (HbA Ic)、脂蛋白結(jié)合的磷脂酶A2、interleukin-6 、血清憐脂等。對(duì)于心血管疾病的治療，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，其用藥量可為0. 5克/天、I克/天、2克/天、3克/天、4克/天、5克/天、6克/天。對(duì)于心血管疾病的治療，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可連續(xù)用藥，例如連續(xù)用藥大約I到200個(gè)星期，大約I到100個(gè)星期，大約I到80個(gè)星期，大約I到50個(gè)星期，大約I到40個(gè)星期，大約I到20個(gè)星期，大約I到15個(gè)星期，大約I到12個(gè)星期，大約I到10個(gè)星期，大約I到5個(gè)星期，大約I到2個(gè)星期或大約I個(gè)星期，其治療結(jié)果是使患者的甘油三酯降低或穩(wěn)定在用藥前的基礎(chǔ)水平。對(duì)于心血管疾病的治療或預(yù)防，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可與飲食和鍛煉結(jié)合，用本發(fā)明的方法治療后可以是以下一種或幾個(gè)例如，降低甘油三酸酯水平；降低的Apo B水平；增加HDL-C水平；在LDL-C水平增加；降低LDL-C水平；降低non-HDL-C水平；降低vLDL水平的減少；在apo A-1水平的增加；apo A-1或apo B比率的增加；降低脂蛋白A水平；降低LDL微粒數(shù)字；在0^顆粒大小的增；降低氧化的LDL;降低血紅蛋白A Ic (HbA Ic);降低胰島素抗性；降低脂蛋白結(jié)合的磷脂酶A2 ;降低interleukin-6 ;在清液或血漿EPA的增加；在紅血球(RBC)膜E。以上的變化是指以患者的起始相應(yīng)的濃度為基礎(chǔ)。對(duì)于心血管疾病的治療，或是肥胖病和糖尿病的治療或預(yù)防，患者可連續(xù)用藥后出現(xiàn)甘油三酯水平降低，EPA和DPA(n-3)的總量和在紅血球中EPA的量增加。本發(fā)明的方法應(yīng)在患者用藥之前測(cè)量一個(gè)或多個(gè)化驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。用藥中或用藥后繼續(xù)采樣，用以對(duì)照。應(yīng)用本發(fā)明的方法應(yīng)在患者用藥之前禁食至多12小時(shí)探血，例如大約禁食10個(gè)小時(shí)后探血。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供一種治療或預(yù)防原發(fā)性高膽固醇血癥和/或混合型血脂異常(Fredrickson類型IIa和IIB)的方法。在另一個(gè)相關(guān)實(shí)施例中，當(dāng)Statin或煙酸緩釋單約治療時(shí)被認(rèn)為治療效果不好時(shí)(弗雷德里克森(Frederickson) IV型高脂血癥)本發(fā)明提供了一個(gè)降低甘油三酯水平方法。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供了心肌梗死病史的病人在治療或預(yù)防復(fù)發(fā)性非致死性心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)的一個(gè)方法，可以和其他藥物合用。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供了緩慢脈粥樣硬化性疾病的進(jìn)展，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的回復(fù)的一個(gè)方法，可以和其他藥物合用。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防血清甘油三酯水平非常高(例如類型IV和V)高脂血癥的病人一種治療方法。本發(fā)明也可以和其他藥物合用。在另一實(shí)施例中，本發(fā)明提供了治療具有非常高的血清甘油三酯水平(如大于1000mg/dL或大于2000毫 克/升)和胰腺炎危險(xiǎn)的一種治療方法。在另一實(shí)施例中，使用本發(fā)明方法的藥物組成包括二十碳五烯酸，或藥學(xué)上可接受的酯，衍生產(chǎn)品，共軛或鹽?；蛏鲜鋈魏涡问剑诖私y(tǒng)稱為“EPA”?！八幱谩痹诖饲闆r下是指不會(huì)產(chǎn)生不可接受的毒性或與其他成分的相互作用。在另一個(gè)實(shí)例中，EPA包括所有 all-cis-5,8,11,14,17-eicosa pentaenoic 酸。EPA在另一個(gè)實(shí)例中，包括二十碳五烯酸酯。在另一個(gè)實(shí)例中，EPA包括一個(gè)C1-C5的二十碳五烯酸烷基酯。EPA的另一種形式，包括二十碳五烯酸乙酯，二十碳五烯酸甲基酯，二十碳五烯酸丙酯，二十碳五烯酸丁酯。在另一個(gè)實(shí)施例中，EPA包括環(huán)保局包括所有cis-5，8，
11,14,17-eicosa pentaenoic 酸乙酉旨。在另一個(gè)實(shí)施例中，EPA是指烯酸酯EPA，EPA的鋰鹽，單，雙或甘油三酯環(huán)EPA或任何其他酯或鹽的EPA，或游離酸形式的EPA。EPA也可能是一個(gè)2-位取代的衍生物或其他衍生物減慢其被氧化速度，但不改變其生物活性。 在另一個(gè)實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的有效成分，按重量計(jì)不超過(guò)約5 %的二十二碳六烯酸(DHA)。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的組成不含有二十二碳六烯酸。在另一個(gè)實(shí)施例中，EPA的含量按重量計(jì)算含至少90%，至少95%，至少95%，至少97 %，至少98 %，至少99 %，或所有脂肪酸的100 %，_在一個(gè)實(shí)施例中，發(fā)明的組成包括超純度EPA。本發(fā)明利用“超純”EPA，包括按重量至少含95% ;超純EPA包括按重量至少含96% ;超純EPA包括按重量至少含97%，超純EPA包括按重量至少含98%。其中EPA可以是任何形式的EPA。在另一個(gè)實(shí)施例中，按照本發(fā)明的方法其藥物組成中其他脂肪酸的總含量低于5%，例如亞麻酸(LA)、花生四烯酸(AA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α -亞麻酸(ALA)、stearadonic(STA)、eicosatrienoic(ETA)、docosapentaenoic(DPA)。在另一個(gè)實(shí)施例中，該藥物的構(gòu)成形式是膠囊，大約500毫克至Ig/膠囊。本發(fā)明中，該藥物的組分可包括約0. 05%到0. 4%的其他組分，例如約0. 2%維生素E。在一個(gè)實(shí)施方案的組分實(shí)質(zhì)上沒(méi)有DHA或其衍生物，如乙基DHA。其他添加成分或雜質(zhì)不超過(guò)0. 5%左右，添加成分可以是一個(gè)或多個(gè)抗氧化劑(如維生素E)。本發(fā)明中，其施藥方法可以每天一次、兩次或三次。也可以服1、2、3、4、5或6粒/次，每片含EPA大約I克。本發(fā)明提供一種方法治療中度或重度高甘油三酯血癥，包括空腹血中甘油三酯水平超過(guò)500毫克/升，其服藥量為I克到5克左右二十碳五烯酸乙酯。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供防止甘油三酯血癥的方法。其服用量為I克至5克二十碳五烯酸乙酯。實(shí)施例子接著通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體的說(shuō)明，但是本發(fā)明并不被這些實(shí)施例所限定。I)對(duì)動(dòng)物的研究，在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境下，CDl小鼠喂食高脂肪的飲食與高度純度的EPA乙酯，按2克/公斤每天，聯(lián)續(xù)喂食八個(gè)星期。飲食中包含所有必需脂肪酸，以及維生素和礦物質(zhì)的混合物，使其達(dá)到動(dòng)物的微量營(yíng)養(yǎng)素的需求。為了防止氧化，占總脂肪量的0. 02% T-BHQ添加于飲食中并將食物保存于4°C。在8周結(jié)束時(shí)，小鼠禁食5小時(shí)并用過(guò)量的異氟醚麻醉和頸椎脫位法將小鼠殺死。所有的動(dòng)物護(hù)理和試驗(yàn)程序得到了動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)批準(zhǔn)。小鼠麻醉后，使用含有肝素毛細(xì)管經(jīng)球后靜脈采500微升的血液,放置含有EDTA的離心管中。離心后^OOXg ;20分鐘)，收集血漿，分裝，冷凍，然后測(cè)量非酯化脂肪酸(游離脂肪酸)，總膽固醇，甘油三酯和血漿胰島素得量。利用homeostasis模型(HOMA-1R)衡量胰島素抵抗的改善程度，其計(jì)算列公式為胰島素抵抗=空腹血清胰島素(μ單位/毫升)X空腹血糖(毫克/分升)/405。與測(cè)定的⑶I小鼠體重，TC，TG, NEFA和葡萄糖的基準(zhǔn)值相比，喂食高脂肪的飲食輔以EPA乙酯的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)組8周后，與對(duì)照組動(dòng)物組(沒(méi)喂輔以EPA乙酯的高脂肪的飲食)血漿TC濃度下降19% (P彡0. 05)，TG濃度下降為22% (P彡0. 05)，NEFA濃度下降28%(P ( 0. 05)。實(shí)驗(yàn)組的血糖濃度、血漿胰島素濃度和HOMA-1R沒(méi)有顯著改變。2)大鼠實(shí)驗(yàn)的所有程序動(dòng)物護(hù)理和試驗(yàn)程序得到了動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)批準(zhǔn)。將動(dòng)物分為四個(gè)實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組，對(duì)照+EPA乙酯組，超重組，超重+EPA乙酯組。給Wistar大鼠一般飲食和去離子水，并給予4天的適應(yīng)期。對(duì)照組，對(duì)照+EPA組給予標(biāo)準(zhǔn)的顆粒飼料，含有76%的碳水化合物，脂類6%和1 8%的蛋白質(zhì)(1515kJ/100克(362千卡/100克))。另一方面，超重組和超重+_EPA乙酯組飼喂高脂肪的飲食。飲食的組成是9%蛋白質(zhì)，29%碳水化合物和62%脂質(zhì)。喂養(yǎng)動(dòng)物5周的水和上述食物。與此同時(shí)，超重+EPA乙酯組和對(duì)照+EPA乙酯組每日口服治療6周的高度純化的EPA乙酯(3克/公斤動(dòng)物體重)，口服給藥的同時(shí)給予相同體積的水。沒(méi)有給藥(EPA)的對(duì)照組和超重組可以作為本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照，在我們的研究設(shè)計(jì)中，每天測(cè)量體動(dòng)物的重和食物攝入量，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)間，經(jīng)過(guò)一個(gè)通宵的禁食，處死動(dòng)物獲取標(biāo)本。我們對(duì)二十碳五烯酸乙酯對(duì)體內(nèi)脂肪墊重量、血清葡萄糖和胰島素水平的影響進(jìn)行了測(cè)定。EPA(3克/公斤)能夠部分防止高脂肪飲食的超重大鼠體重增加，但沒(méi)有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的區(qū)別。此外，EPA乙酯治療降低所有脂肪墊的重量，尤其是在與標(biāo)準(zhǔn)的飲食喂養(yǎng)的動(dòng)物對(duì)照組。EPA乙酯用藥組大鼠，腹腔內(nèi)脂肪組織重量顯著減了 45% (P < O · 05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，EPA乙酯治療組胰島素血漿水平顯著降低47% (P < O · 05) 0此外，對(duì)胰島素的敏感性進(jìn)行了分析評(píng)估表明，對(duì)照和超重組EPA治療組大鼠的胰島素葡萄糖比值和HOMA-1R指數(shù)均顯著下降了 40%到50% (P < O. 05)，說(shuō)明EPA乙酯能增加胰島素的敏感性。

測(cè)量對(duì)照和超重大鼠組的TC，TG, NEFA和葡萄糖的基準(zhǔn)值表明。EPA乙酯用藥組高脂肪飲食喂養(yǎng)8周后，血漿TC濃度降低15% (P <0.05)、TG濃度降低19% (P < O. 05)、NEFA濃度降低17% (P < 00. 05)。在正常體重的身體組也觀察到的上述參數(shù)值的降低，但差別并不像在超重大鼠組的大。
權(quán)利要求
1.血脂異常的防治，其藥物選用二十碳五烯酸(eicosapentaenoate,EPA)的鹽和酯之中的至少一種。藥物的構(gòu)成中沒(méi)有或僅有很少二十二碳六烯酸(DHA)或者衍生物。
2.如權(quán)利要求1血脂異常的防治所述，其中高血脂異常指比正常高的膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇和極低密度脂蛋白膽固的至少一種。
3.如權(quán)利要求1血脂異常的防治所述，其選用藥物是二十碳五烯酸，及其鹽或酯類形式。
4.如權(quán)利要求1血脂異常的防治所述，其治療結(jié)果會(huì)出現(xiàn)以下一種或多種效果 (a)甘油三酸酯水平降低；(b) Apo B水平降低；(c)增加高密度脂蛋白膽固醇升高； (d)低密度脂蛋白膽固醇水平降低；(e)低密度脂蛋白膽固醇水平不變；(f)非高密度脂蛋白膽固醇水平降低；(g)極低密度脂蛋白膽固醇水平降低。以上結(jié)果的出現(xiàn)均以服藥前的水平為基準(zhǔn)。
5.如權(quán)利要求1血脂異常的防治所述，藥物的制劑是膠囊。
6.如權(quán)利要求1血脂異常的防治所述，主要防治糖尿病。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于一種有效和具有很少副作用的防治血脂異常方法，用本發(fā)明也可以預(yù)防、治療由于血脂異常引起的心血管疾病及預(yù)防/減慢糖尿病的進(jìn)展。其治療方法是選用EPA，其可藥用的鹽和酯中的至少一種，或與其他抗血脂藥物合用。
文檔編號(hào)A61P9/10GK103054845SQ201110317649
公開(kāi)日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2011年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月18日
發(fā)明者周華榮, 崔坤元, 梁東 申請(qǐng)人:周華榮, 崔坤元, 梁東