專利名稱：一種10-羥基喜樹堿的納微給藥體系及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種納微給藥體系及其制備方法，具體涉及一種難溶性藥物10-羥基喜樹堿(HCPT)的納微給藥體系及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著藥物高通量篩選技術(shù)的發(fā)展，有大量應(yīng)用于重大疾病治療的活性化合物被篩選出來(lái)，但大多因分子量高、疏水性強(qiáng)導(dǎo)致溶解性差，無(wú)法進(jìn)入臨床應(yīng)用。因此，提高難溶性藥物的溶解度和生物利用度一直是藥學(xué)研究的熱點(diǎn)。目前常用的方法有脂質(zhì)體包埋物、固體分散體、環(huán)糊精包合物。但這些方法存在載藥量低、制備工藝復(fù)雜及穩(wěn)定性較差、藥物釋放速度緩慢等問(wèn)題。10-羥基喜樹堿藥物是一種典型的高效但難溶的抗腫瘤藥物，其載體材料以脂質(zhì)體為主，該類藥物是以DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I (Top I)為作用靶標(biāo)，抑制生物體內(nèi)DNA的合成，從而發(fā)揮抗腫瘤作用，是所有天然及合成的喜樹堿類似物中活性最高的化合物。10-羥基喜樹堿在治療腫瘤方面具有較好的療效和較低的毒副作用，并且與其他常用抗癌藥物無(wú)交叉耐藥性，但由于其在血管中易聚集和堵塞，導(dǎo)致臨床中無(wú)法對(duì)患者進(jìn)行靜脈注射給藥。目前，市場(chǎng)上利用堿溶液將其內(nèi)酯環(huán)打開，形成可溶性羧酸鈉鹽注射劑應(yīng)用于臨床，但內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)已被證明是喜樹堿類藥物作用于靶酶(Top I)的必要結(jié)構(gòu)，因而這種開環(huán)結(jié)構(gòu)使得HCPT藥效顯著降低。一方面是10-羥基喜樹堿在治療中的優(yōu)異的使用性能，而另一方面卻是由于其自身的難溶性的特性導(dǎo)致其在實(shí)際使用中的諸多限制，如何使這種藥物發(fā)揮更大的臨床價(jià)值，成為當(dāng)今醫(yī)藥領(lǐng)域研究的一個(gè)重要課題。由于脂質(zhì)體包埋物、固體分散體、環(huán)糊精包合物給藥方法存在的諸多缺點(diǎn)，因此，將難溶性藥物10-羥基喜樹堿納米化，即將藥物包埋或分散在納微載體的內(nèi)部，作為一類新型的藥物載體而備受關(guān)注。難溶性藥物10-羥基喜樹堿與納微載體形成固體分散體后，藥物以微晶態(tài)存在，具有很大的分散度，給藥后可使藥物的溶出速度加快，使其變得容易吸收，大大提高難溶性藥物10-羥基喜樹堿的溶解性；另外，10-羥基喜樹堿納米化所得到的納米粒由于比表面積高而使其具有優(yōu)良的粘附性，大大增加藥物顆粒的比表面積，使之與組織的接觸面積增大，從而提高藥效和藥物的生物利用度，納米化藥物容易透過(guò)血管和組織屏障，因此也可增強(qiáng)藥物的靶向性。CN 1167469C公開了一種羥基喜樹堿聚乳酸納米粒的制備方法。通過(guò)表面活性劑處理羥基喜樹堿蒸餾水溶液；該水溶液加堿調(diào)節(jié)PH值為7. 5 12. 0，通過(guò)超聲波處理后冷卻至0°C 10°C，將聚乳酸的有機(jī)溶劑溶液加入到羥基喜樹堿水溶液中，混合溶液在 45°C 70°C的水浴中攪拌后，將攪拌后得到的沉淀物高速離心分離水洗后，再離心分離得羥基喜樹堿納米粒。CN 114(^62C公開了一種羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法。取葡聚糖1 IOOmg用蒸餾水溶解完后，用堿調(diào)節(jié)pH值8 12，將上述溶液加入丙酮或三氯甲烷攪拌；將羥基喜樹堿水溶液加堿調(diào)pH值9 10，將羥基喜樹堿液體加入葡聚糖有機(jī)溶劑的溶液中，加堿調(diào)PH值11 12 ；再用鹽酸調(diào)pH值，4 8，進(jìn)行超聲波處理1 10分鐘后，高速離心棄去上清液，加新鮮蒸餾水洗滌二次，得羥基喜樹堿葡聚糖納米粒。CN 102198101A公開了 10-羥基喜樹堿隱形納米粒緩釋制劑及其制備方法，10-羥基喜樹堿與藥物載體的質(zhì)量比為1 2 20。制備方法為將10-羥基喜樹堿與藥物載體按 1 O 20)的質(zhì)量比在有機(jī)溶劑中溶解，得溶液A ；將溶液A轉(zhuǎn)移到透析袋內(nèi)進(jìn)行透析； 將所得懸浮液凍干得10-羥基喜樹堿隱形納米粒緩釋制劑。在上述文獻(xiàn)中納微載體的制備方法為機(jī)械攪拌法、均質(zhì)乳化法或超聲乳化法等， 乳液制備過(guò)程會(huì)產(chǎn)生很高的剪切力，其分散過(guò)程非常劇烈，導(dǎo)致液滴反復(fù)破碎、聚并、造成粒徑不均一、不可控、重復(fù)性差、載藥量低、靶向性差等問(wèn)題，進(jìn)而造成治療重復(fù)性差的問(wèn)題，使其應(yīng)用受限。而且，喜樹堿一般需要納米化后進(jìn)行包埋，而制備分散性好的納米晶是一個(gè)關(guān)鍵難點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的之一在于提供一種10-羥基喜樹堿的納微給藥體系及其制備方法，本發(fā)明不需事先制備納米晶，并且可提高藥物溶解度和生物利用度。本發(fā)明所述的制備方法，包括以下步驟1)含藥乳滴的制備將海藻酸鹽、10-羥基喜樹堿溶于堿性水溶液中制備成為水相(W)，將所述水相與含乳化劑的油相(0)混合，制備油包水型(W/0型)預(yù)乳液；將所述W/ 0型預(yù)乳液處理得到尺寸均一的W/0型乳液；2)乳滴固化和10-羥基喜樹堿析晶分兩步進(jìn)行第一步先向步驟1)中尺寸均一的W/0型乳液中加入固化液，在乳滴固化成凝膠納微球的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿構(gòu)象的部分轉(zhuǎn)化，即析晶；第二步將得到的含10-羥基喜樹堿的凝膠微球懸浮于固化液中進(jìn)行第二步交聯(lián)固化，同時(shí)使HCPT得到進(jìn)一步析晶，獲得含閉環(huán)形式10-羥基喜樹堿納米晶的納微球；3)將步驟2)所得納微球洗滌干燥制成成品。其中含藥乳滴的制備過(guò)程中所述水相PH值范圍為7. 5 10. 0，優(yōu)選8. 0 9. 0。作為優(yōu)選，所述海藻酸鹽的濃度為0. 3wt% 5.0wt%，進(jìn)一步優(yōu)選0. 5wt% 2. Owt % ； 10-羥基喜樹堿與海藻酸鹽質(zhì)量配比為1.5 1 1 20，進(jìn)一步優(yōu)選1 2 1 15。作為優(yōu)選，所述的油相為常溫下呈液體狀且與水不互溶的油性物質(zhì)，優(yōu)選為液體石蠟、石油醚、橄欖油、棉子油、豆油、葵花子油、烷類碳?xì)浠衔?、或上述至少兩種以上的混合物，進(jìn)一步優(yōu)選為液體石蠟和石油醚的混合物，特別優(yōu)選液體石蠟和石油醚混合比例范圍為1 1 1 5，更優(yōu)選液體石蠟和石油醚混合比例范圍為1 1 1 3。作為優(yōu)選，所述的乳化劑為油溶性，優(yōu)選為失水山梨醇倍半油酸酯(ArlaCe183)、 P0-500、P0-310、聚氧乙烯氫化蓖麻油、失水山梨醇三油酸酯(司班85)、失水山梨醇單油酸酯(司班80)、失水山梨醇三硬脂酸酯(司班65)、親油-親水嵌段共聚物、或上述至少兩種以上的混合物，進(jìn)一步優(yōu)選乳化劑的濃度為0. 5wt% 20wt%，特別優(yōu)選乳化劑的濃度為 0. 5wt% IOwt %。作為優(yōu)選，所述的油包水型(W/0型)預(yù)乳液是通過(guò)采用均相乳化器或超聲波乳化器制得的。作為優(yōu)選，所述的尺寸均一的W/0型乳液是通過(guò)將W/0型預(yù)乳液在較高壓力作用下反復(fù)壓過(guò)微孔膜得到的。針對(duì)傳統(tǒng)乳化方法的不足，本發(fā)明采用了粒徑均一可控的納微載體制備方法-快速膜乳化法，其具有液滴單分散性及穩(wěn)定性好、制備過(guò)程溫和、能耗低、 易于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)勢(shì)，而粒徑均一，則藥物的溶出速率穩(wěn)定，并可以提高藥物在體內(nèi)的吸收，進(jìn)而提高藥效和生物利用度；粒徑可控則可以解決重復(fù)性差等問(wèn)題，進(jìn)一步提高藥效和生物利用度。這可以有效解決因粒徑不均一不可控所帶來(lái)的納微載體制備重復(fù)性差和載藥量低的關(guān)鍵問(wèn)題。作為優(yōu)選，所述的含藥乳滴，水相(W)與油相(0)體積比為1 20 1 50，優(yōu)選為 1 30 1 40。其中乳滴固化和10-羥基喜樹堿析晶中兩步交聯(lián)固化的溫度均為4°C 50°C，進(jìn)一步優(yōu)選4°C 40°C。作為優(yōu)選，兩步的交聯(lián)固化時(shí)間均為Ih 8h，進(jìn)一步優(yōu)選Ih 他。作為優(yōu)選，第一步所述固化液為酸性氯化鈣水溶液的細(xì)乳液，優(yōu)選酸性氯化鈣水溶液濃度為0. ImoL/L 1. OmoL/L, pH值范圍為2. 0 6. 0。作為優(yōu)選，第二步所述固化液為殼聚糖酸性水溶液或殼聚糖衍生物酸性水溶液， 優(yōu)選殼聚糖或殼聚糖衍生物的濃度為0. 5wt% 3. 0wt%，pH值范圍為2. 0 6. 0，進(jìn)一步優(yōu)選殼聚糖或殼聚糖衍生物的濃度為1.0Wt% 2. Owt% ；殼聚糖衍生物優(yōu)選殼聚糖季胺鹽，N-三甲基殼聚糖，N-馬來(lái)?；瘹ぞ厶牵燃谆鶜ぞ厶?，N, 0-羧甲基殼聚糖，β-環(huán)糊精接枝殼聚糖，羥丙基殼聚糖，鹽酸丁卡因殼聚糖，殼聚糖/聚N-異丙基丙烯酰胺，阿侖膦酸鈉殼聚糖。進(jìn)一步優(yōu)選，所述的酸性氯化鈣溶液或殼聚糖或殼聚糖衍生物酸性溶液，采用PH 值梯度降低的方式加入，以實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿的緩慢析晶。以海藻酸鹽/殼聚糖或其衍生物為載體材料，具有如下優(yōu)勢(shì)親水性海藻酸鹽、殼聚糖及殼聚糖衍生物有助于水(體液)進(jìn)入，使載有10-羥基喜樹堿的海藻酸鹽殼聚糖納米粒溶漲，進(jìn)而使難溶性藥物溶出，加快藥物的溶出速率，而現(xiàn)有的油溶性載體則不具備這方面的性能，藥物溶出只能依靠載體材料骨架溶蝕進(jìn)行，藥物溶出速率較親水性材料要慢； 而且，這類多糖類材料具有優(yōu)良的黏附特性，作為口服給藥載體，能夠大大增強(qiáng)藥物的口服生物利用度。10-羥基喜樹堿在不同pH條件下具有不同的結(jié)構(gòu)、溶解度和藥效，其在堿性條件下可溶性好但藥效不佳，而在酸性條件下溶解性差但藥效好。根據(jù)此性質(zhì)，本發(fā)明利用海藻酸鹽在堿性條件下溶解10-羥基喜樹堿，采用快速膜乳化技術(shù)制備均一乳滴，然后向乳液中加入酸性氯化鈣細(xì)乳液，在乳滴固化的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿由開環(huán)形式向閉環(huán)形式的轉(zhuǎn)化過(guò)程，即實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿的構(gòu)象轉(zhuǎn)化，以高效的閉環(huán)的納米晶形式將其包封于納微球中，從而大大提高了藥物的藥效。圖1是本發(fā)明所提供的10-羥基喜樹堿的納微給藥體系制備方法的一個(gè)流程示意圖。本發(fā)明的目的之一還在于提供一種10-羥基喜樹堿的納微球給藥體系，該體系是按照本發(fā)明所述的制備方法制得，所述體系為一種海藻酸鹽殼聚糖復(fù)合微球或微囊，10-羥基喜樹堿以晶粒形式存在于載體中，包埋率達(dá)60 % 95 %，析晶率達(dá)20 % 50 %。
所述微球或微囊粒徑均一、可控，平均粒徑在300nm 2 μ m之間，粒徑多分散系數(shù)范圍為0. 005 0. 2 ； 10-羥基喜樹堿晶粒尺寸為納米級(jí)，在IOnm到200nm之間，優(yōu)選在 20nm到IOOnm范圍內(nèi)。粒徑多分散系數(shù)(Polydispersity)禾Ij用 Zeta 電位儀(Brookhaven Instruments Corporation, USA)測(cè)得。粒徑多分散系數(shù)按下式計(jì)算Polydispersity = μ 2/Γ 2式中Γ =Dq2，其中，μ 2表示擴(kuò)散系數(shù)的方差，q表示散射矢量，D表示擴(kuò)散系數(shù)。所述的裝載有難溶性藥物10-羥基喜樹堿的納微球藥物包埋率定義為被包埋進(jìn)納微球中的藥物(包括開環(huán)形式和閉環(huán)形式)占制備納微球時(shí)加入的藥物的百分比，按下式計(jì)算EE = [ff/ff] X100%式中EE表示藥物包埋率，W1表示被包埋進(jìn)納微球中的藥物(包括開環(huán)形式和閉環(huán)形式)的質(zhì)量，W表示制備納微球時(shí)加入的藥物的總質(zhì)量。藥物析晶率定義為被包埋進(jìn)納微球中閉環(huán)形式的藥物占制備納微球時(shí)加入的藥物的百分比，按下式計(jì)算CE = [ff2/ff] X100%式中CE用于表示藥物析晶率，W2表示被包埋進(jìn)納微球中閉環(huán)形式藥物的質(zhì)量，W 表示制備納微球時(shí)加入的藥物的總質(zhì)量。本發(fā)明的目的之一還在于提供了本發(fā)明的制備方法的用途，即適用于溶于堿性且在酸性環(huán)境下析晶的難溶藥物的裝載。其他具有如10-羥基喜樹堿特性的藥物可利用本發(fā)明提供的制備方法制得具有較高藥效及生物利用度的給藥體系。利用本發(fā)明所提供的制備方法制得的納微球給藥體系粒徑均一、分散穩(wěn)定，且納微球中的藥物以閉環(huán)藥物納米晶的形式存在其中，可實(shí)現(xiàn)難溶藥物溶解度的增加和生物利用度的提高，并有效提高了難溶藥物的包埋率。


圖1難溶性藥物新型給藥體系構(gòu)建示意圖(ALG 海藻酸鹽；HCPT :10_羥基喜樹堿)。圖2實(shí)施例1中制備的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖3實(shí)施例1中制備的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球的粒徑分布圖。圖4實(shí)施例2中制備的載藥海藻酸鹽/殼聚糖季胺鹽復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖5實(shí)施例3中制備的載藥海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖6實(shí)施例4中制備的載藥海藻酸鹽/N-馬來(lái)酰化殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖7實(shí)施例5中制備的載藥海藻酸鹽/羧甲基殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖8實(shí)施例6中制備的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖9實(shí)施例7中制備的載藥海藻酸鹽/羥丙基殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖10實(shí)施例8中制備的載藥海藻酸鹽/鹽酸丁卡因殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖11實(shí)施例9中制備的載藥海藻酸鹽/N，0-羧甲基殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖12實(shí)施例9中制備的載藥海藻酸鹽/N，0-羧甲基殼聚糖復(fù)合微球的粒徑分布圖。圖13實(shí)施例10中制備的載藥海藻酸鹽/阿侖膦酸鈉殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖14實(shí)施例11中制備的載藥海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖復(fù)合微球的掃描電鏡照片。圖15實(shí)施例11中制備的載藥海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖復(fù)合微球激光共聚焦顯微鏡(LSCM)照片。
具體實(shí)施例方式為便于理解本發(fā)明，本發(fā)明列舉實(shí)施例如下。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，所述實(shí)施例僅僅用于幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的具體限制。實(shí)施例一實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開，實(shí)驗(yàn)選PH值為8的NaOH溶液來(lái)配制水相溶液，具體配制如下用pH為8的NaOH溶液配制1. Owt %的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為體積比為1 2的液體石蠟和石油醚的混合物，且含4.0wt%的乳化劑P0-500，其中油相與水相的體積比為30 1，取pH值為8的水相2mL與60mL油相混合預(yù)乳液；然后將預(yù)乳液在0. 280MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將乳液分別用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行第一步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到部分構(gòu)象轉(zhuǎn)化，即析晶，他后，將所得的載藥海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的載藥海藻酸鹽微球用殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。池后，將所得的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥4 得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用kta電位及粒度分析儀ktaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,掃描電鏡照片如圖2所示，粒徑分布圖如圖3所示，粒徑分布系數(shù)為0. 005，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率為32%，制備載藥海藻酸鹽殼聚糖復(fù)合微球的包埋率達(dá)到71%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為lOOnm。實(shí)施例二實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開，實(shí)驗(yàn)選用PH值為10的NaOH溶液來(lái)配制水相溶液，具體如下用pH值為10的NaOH 溶液配制1. Owt %的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，其中油相(0)為橄欖油，且含2.0wt%的乳化劑ArlaCe183，油相與水相體積比為40 1 ；取pH值為10的水相2mL與SOmL油相混合制備預(yù)乳液；然后將預(yù)乳液在壓力為0. 280MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行第一步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到部分構(gòu)象轉(zhuǎn)化，即析晶，紐后，將所得的載藥海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的載藥海藻酸鹽微球用殼聚糖季胺鹽的酸溶液進(jìn)行第二步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。池后，將所得的載藥海藻酸鹽/殼聚糖季胺鹽復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥4 得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用kta電位及粒度分析儀ktaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 007，掃描電鏡照片如圖4所示，結(jié)果表明所
制備的海藻酸鹽/殼聚糖季胺鹽納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率為31%，水相pH值為10時(shí)制備載藥海藻酸鹽 /殼聚糖季胺鹽復(fù)合微球的包埋率達(dá)到70%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為 IOOnm0實(shí)施例三實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH = 8的NaOH溶液配制0. 5wt%的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相(0)為棉子油，且含7. 的乳化劑P0-310，油相(0)與水相(W) 的體積比為30 1，取2mL濃度為0. 5wt %的海藻酸鹽水溶液與60mL油相混合制備預(yù)乳液，然后將預(yù)乳液在0. 300MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將此乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行第一步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到部分構(gòu)象轉(zhuǎn)化，即析晶，4h后，將所得的海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用N-三甲基殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。4h，將所得的載藥海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、 去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥4 得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用kta電位及粒度分析儀ktaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 015，掃描電鏡照片如圖5所示，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá) 32. 5 %，包埋率達(dá)到71. 5%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為90nm。實(shí)施例四實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH = 8的NaOH溶液配制1. 5wt%的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為豆油，且含10. 乳化劑聚氧乙烯氫化蓖麻油，其中油相(0) 與水相(W)的體積比為50 1，取2mL濃度為1.5Wt%的海藻酸鹽水溶液與IOOmL油相混合制備預(yù)乳液，然后將預(yù)乳液在0. 300MPa下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將此乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行第一步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到部分構(gòu)象轉(zhuǎn)化， 即析晶，紐后，將所得的海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用N-馬來(lái)酰化殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。lh，將所得的載藥海藻酸鹽/N-馬來(lái)?；瘹ぞ厶菑?fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 018，掃描電鏡照片如圖6所示，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽/N-馬來(lái)?；瘹ぞ厶羌{微球粒徑均一。其中 10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)31%，包埋率達(dá)到72%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為llOnm。實(shí)施例五實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH為8的NaOH溶液配制濃度為1. 海藻酸鹽水溶液，且含10-羥基喜樹堿作為水相，其中10-羥基喜樹堿濃度為5mg/mL。油相為體積比為1 3的液體石蠟和石油醚的混合物，且含6.0襯％的乳化劑P0-500，油相(0)與水相(W)的體積比為30 1，取2mL水相與60mL油相混合制備預(yù)乳液，然后在0. 280MPa的壓力下過(guò)膜5次得到粒徑均一的載藥海藻酸鹽乳液，再將海藻酸鹽乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液固化，且藥物得到部分析晶，5h后， 將所得的海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用羧甲基殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。2h，將所得的載藥海藻酸鹽/羧甲基殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 015，掃描電鏡照片如圖7所示，結(jié)果表明所
制備的海藻酸鹽/羧甲基殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)31%，包埋率達(dá)到72%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為130nm。實(shí)施例六實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH為8的NaOH溶液配制濃度為1. Owt %海藻酸鹽水溶液，且含10-羥基喜樹堿作為水相，其中10-羥基喜樹堿濃度為10mg/mL。油相為葵花子油，且含8. Owt%的乳化劑 P0-310，其中油相(0)與水相(W)的體積比為20 1，取3mL水相與60mL油相混合制備預(yù)乳液，然后在0. 280MPa的壓力下過(guò)膜3次得到粒徑均一的載藥海藻酸鹽乳液，再將海藻酸鹽乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液固化，且藥物得到部分析晶，4h后，將所得的海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化， 即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。3h后，將所得的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 010，掃描電鏡照片如圖8所示，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽殼聚糖納微球粒徑均一。
其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)32%，包埋率達(dá)到69%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為160nm。實(shí)施例七實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開 。用PH為8的NaOH溶液配制濃度為Iwt %海藻酸鹽水溶液，且含10-羥基喜樹堿作為水相，其中10-羥基喜樹堿濃度為15mg/mL。油相為橄欖油，且含4. Owt%的乳化劑聚氧乙烯氫化蓖麻油，其中油相(0)與水相(W)的體積比為40 1，取2mL水相與SOmL油相混合制備預(yù)乳液，然后在0. 280MPa的壓力下過(guò)膜4次得到粒徑均一的載藥海藻酸鹽乳液，再將海藻酸鹽乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液固化，且藥物得到部分析晶，5h后，將所得的海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用羥丙基殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。2h后，將所得的載藥海藻酸鹽/羥丙基殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm,粒徑分布系數(shù)為0. 170，掃描電鏡照片如圖9所示，結(jié)果表明所
制備的海藻酸鹽/羥丙基殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)22. 5%，包埋率達(dá)到62. 5%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為200nm。實(shí)施例八選用孔徑1.4μπι的微孔膜制備較小粒徑的載藥海藻酸鹽微球，且將孔徑為 1. 4 μ m疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH = 8的NaOH溶液配制1. Owt %的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為豆油，且含9. 的乳化劑司班85，其中油相(0)與水相(W) 的體積比為40 1，取2mL水相與SOmL油相混合制備預(yù)乳液，然后將預(yù)乳液在0.900MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將此乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行固化，且藥物得到部分析晶，6h后，將所得的載藥海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用鹽酸丁卡因殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。Ih后，將所得的載藥海藻酸鹽/鹽酸丁卡因殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為300. Onm，粒徑分布系數(shù)為0. 156，掃描電鏡照片如圖10所示，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽/鹽酸丁卡因殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)21 %，包埋率達(dá)到56%。實(shí)施例九選用孔徑為9. O μ m的微孔膜制備載藥海藻酸鹽微球，將孔徑為9. O μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH = 8 的NaOH溶液配制1. Owt %的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為棉子油，且含6. 的乳化劑司班80，其中油相(O)與水相(W)的體積比為 20 1，取2mL水相與40mL油相混合制備預(yù)乳液，然后將預(yù)乳液在0. 150MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將此乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行固化，且藥物得到部分析晶，4h后，將所得的載藥海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的海藻酸鹽微球用N，0-羧甲基殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，即10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C下進(jìn)行。2h后，將所得的載藥海藻酸鹽/N，0-羧甲基殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微 球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為1000. Onm，粒徑分布系數(shù)為0. 01，掃描電鏡照片如圖11所示，粒徑分布如圖12所示，結(jié)果表明所制備的海藻酸鹽/N，O-羧甲基殼聚糖納微球粒徑均一。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)33%，包埋率達(dá)到70%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為lOOnm。實(shí)施例十為了使藥物更好的析晶，針對(duì)第一步固化所用氯化鈣溶液的pH值梯度對(duì)藥物進(jìn)行析晶，具體實(shí)施如下將孔徑為2. 8μπι的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用pH = 8的NaOH溶液配制濃度為1. Owt %海藻酸鹽，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為葵花子油，且含2. Owt%的乳化劑司班65，其中油相(0)與水相(W)的體積比為40 1，取2mL水相與SOmL油相混合制備預(yù)乳液，然后在0. 280MPa的壓力下過(guò)膜3次得到粒徑均一的載藥海藻酸鹽乳液，再將載藥海藻酸鹽乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液梯度進(jìn)行第一步固化，即實(shí)現(xiàn)緩慢析晶，首先用PH值為 4. 0酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行固化，藥物得到小部分析晶，2h后，再用pH值為2. 0的0. 2mol/L 酸性氯化鈣細(xì)乳液繼續(xù)固化，在乳滴固化的同時(shí)實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿的構(gòu)象轉(zhuǎn)化并將其包封于納微球中。將所得的載藥海藻酸鹽及微球依次用石油醚、丙酮、酸溶液進(jìn)行洗滌，然后再與酸性阿侖膦酸鈉殼聚糖溶液進(jìn)行第二步固化，藥物得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在4°C 下進(jìn)行。Ih后，將載藥海藻酸鹽/阿侖膦酸鈉殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球，微球粒徑為600. Onm。掃描電鏡照片如圖13所示，其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)36%，包埋率達(dá)到80%，用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為80nm。由此說(shuō)明通過(guò)緩慢析晶的方法可有助提高藥物的析晶率和包埋率。實(shí)施例i^一為了使藥物更好的析晶，針對(duì)第二步固化所用殼聚糖酸溶液的pH值梯度對(duì)藥物進(jìn)行析晶，具體實(shí)施如下將孔徑為2. 8μπι的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開。用PH = 8的NaOH溶液配制濃度為1. 0襯％海藻酸鹽，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為液體石蠟和石油醚的混合物，且含4. 的乳化劑親油-親水嵌段共聚物，其中油相(0)與水相(W)的體積比為 30 1，取2mL水相與60mL油相混合制備預(yù)乳液，然后在0.280MPa壓力下過(guò)膜4次得到粒徑均一的載藥海藻酸鹽乳液，再將載藥海藻酸鹽乳液用酸性氯化鈣細(xì)乳液梯度進(jìn)行第一步固化，即實(shí)現(xiàn)緩慢析晶，首先用PH值為4. O酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行固化，且酸性氯化鈣水溶液的濃度為0. 5moL/L ；使藥物部分析晶，2h后，再用pH值為2. O的0. 2mol/L酸性氯化鈣細(xì)乳液繼續(xù)固化2h，使藥物 進(jìn)一步析晶；將所得的載藥海藻酸鹽及微球依次用石油醚、丙酮、 酸溶液進(jìn)行洗滌，然后再用不同PH值的酸性N-三甲基殼聚糖溶液梯度進(jìn)行第二步固化，具體如下先用PH值為4. O的酸性N-三甲基殼聚糖溶液固化30min，隨后離心將微球分離， 并接著加入至PH值為2. O的酸性N-三甲基殼聚糖溶液繼續(xù)固化30min，藥物得到進(jìn)一步析晶。兩步固化均在4°C下進(jìn)行，隨后將載藥海藻酸鹽/N-三甲基殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌，收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球，其粒徑尺寸為600. Onm。掃描電鏡照片如圖14所示，激光共聚焦顯微鏡照片如圖15所示，其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率達(dá)45%，包埋率達(dá)到95%，用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為 60nm。由此說(shuō)明通過(guò)兩步固化均采用緩慢析晶的方法，大大提高了藥物的析晶率和包埋率。實(shí)施例十二實(shí)驗(yàn)采用孔徑為2. 8 μ m的微孔膜制備載藥凝膠微球，具體實(shí)施如下將孔徑為 2. 8 μ m的疏水性膜置于親油性的物質(zhì)中浸潤(rùn)，使孔膜充分濕潤(rùn)以確保膜上的疏水鏈完全舒展開，實(shí)驗(yàn)選PH值為8的NaOH溶液來(lái)配制水相溶液，具體配制如下用pH為8的NaOH溶液配制1. Owt %的海藻酸鹽水溶液，且含濃度為lmg/mL的10-羥基喜樹堿作為水相，油相為體積比為1 2的液體石蠟和石油醚的混合物，且含4.0襯％的乳化劑P0-500，其中油相與水相的體積比為30 1，取pH值為8的水相2mL與60mL油相混合預(yù)乳液；然后將預(yù)乳液在0. 280MPa壓力下反復(fù)壓過(guò)膜孔直至得到粒徑均一的W/0乳液，并將乳液分別用酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行第一步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到部分構(gòu)象轉(zhuǎn)化，即析晶，6h后，將所得的載藥海藻酸鹽微球依次用石油醚、丙酮、水進(jìn)行洗滌，將得到的載藥海藻酸鹽微球用殼聚糖的酸溶液進(jìn)行第二步固化，同時(shí)10-羥基喜樹堿得到進(jìn)一步析晶，兩步固化均在40°C下進(jìn)行。2h后，將所得的載藥海藻酸鹽/殼聚糖復(fù)合微球依次用酸溶液、去離子水進(jìn)行洗滌， 收集，真空冷凍干燥48h得成品載藥微球。微球的平均粒徑和粒徑分布采用Zeta電位及粒度分析儀ZetaPlus測(cè)量，在水中微球的平均直徑為600. Onm，粒徑分布系數(shù)為0. 005。其中10-羥基喜樹堿藥物的析晶率為20%，制備載藥海藻酸鹽殼聚糖復(fù)合微球的包埋率達(dá)到60%。用激光共聚焦顯微鏡觀察HCPT晶粒尺寸約為120nm。申請(qǐng)人:聲明，本發(fā)明通過(guò)上述實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程， 但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)， 對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種10-羥基喜樹堿的給藥體系的制備方法，包括以下步驟1)含藥乳滴的制備將海藻酸鹽、10-羥基喜樹堿溶于堿性水溶液中制備成為水相 (W)，將所述水相與含乳化劑的油相(0)混合，制備油包水型(W/0型)預(yù)乳液；將所述W/0 型預(yù)乳液處理得到尺寸均一的W/0型乳液；2)乳滴固化和10-羥基喜樹堿析晶分兩步進(jìn)行第一步先向步驟1)中尺寸均一的 W/0型乳液中加入固化液，在乳滴固化成凝膠納微球的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿構(gòu)象的部分轉(zhuǎn)化，即析晶；第二步將得到的含10-羥基喜樹堿的凝膠微球懸浮于固化液中進(jìn)行第二步交聯(lián)固化，同時(shí)使HCPT得到進(jìn)一步析晶，獲得含閉環(huán)形式10-羥基喜樹堿納米晶的納微球；3)將步驟幻所得納微球洗滌干燥制成成品。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述水相PH值范圍為7.5 10. 0，優(yōu)選 8. 0 9. 0 ；優(yōu)選地，步驟1)中所述海藻酸鹽的濃度為0. 3wt% 5. 0wt%，進(jìn)一步優(yōu)選0. 5wt% 2.0wt% ;10_羥基喜樹堿與海藻酸鹽質(zhì)量配比為1.5 1 1 20，進(jìn)一步優(yōu)選1 2 1 15 ；優(yōu)選地，步驟1)中所述的油相為常溫下呈液體狀且與水不互溶的油性物質(zhì)，優(yōu)選為液體石蠟、石油醚、橄欖油、棉子油、豆油、葵花子油、烷類碳?xì)浠衔铩⒒蛏鲜鲋辽賰煞N以上的混合物，進(jìn)一步優(yōu)選為液體石蠟和石油醚的混合物，特別優(yōu)選液體石蠟和石油醚混合比例范圍為1 1 1 5，更優(yōu)選液體石蠟和石油醚混合比例范圍為1 1 1 3;優(yōu)選地，步驟1)中所述的乳化劑為油溶性，優(yōu)選為失水山梨醇倍半油酸酯 (Arlacel83)、P0-500、P0_310、聚氧乙烯氫化蓖麻油、失水山梨醇三油酸酯(司班85)、失水山梨醇單油酸酯(司班80)、失水山梨醇三硬脂酸酯(司班65)、親油-親水嵌段共聚物、或上述至少兩種以上的混合物，進(jìn)一步優(yōu)選乳化劑的濃度為0. 5wt% 20wt%，特別優(yōu)選乳化劑的濃度為0. 5wt% IOwt % ；優(yōu)選地，步驟1)中所述的油包水型(W/0型)預(yù)乳液是通過(guò)采用均相乳化器或超聲波乳化器制得的；優(yōu)選地，步驟1)中所述的尺寸均一的W/0型乳液是通過(guò)將W/0型預(yù)乳液在較高壓力作用下反復(fù)壓過(guò)微孔膜得到的；優(yōu)選地，步驟1)中所述的含藥乳滴，水相(W)與油相(0)體積比為1 20 1 50， 優(yōu)選為1 30 1 40。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟幻中兩步交聯(lián)固化的溫度均為 4°C 50°C，進(jìn)一步優(yōu)選4°C 40°C ；優(yōu)選地，步驟O)中兩步交聯(lián)固化時(shí)間均為Ih 他，進(jìn)一步優(yōu)選Ih 他；優(yōu)選地，步驟O)中第一步所述固化液為酸性氯化鈣水溶液的細(xì)乳液，優(yōu)選酸性氯化鈣水溶液濃度為0. ImoL/L 1. OmoL/L, pH值范圍為2. 0 6. 0 ；優(yōu)選地，步驟O)中第二步所述固化液為殼聚糖酸性水溶液或殼聚糖衍生物酸性水溶液，優(yōu)選殼聚糖或殼聚糖衍生物的濃度為0. 5wt% 3. 0襯％，？!1值范圍為2.0 6.0，進(jìn)一步優(yōu)選殼聚糖或殼聚糖衍生物的濃度為1. 2. Owt殼聚糖衍生物優(yōu)選殼聚糖季胺鹽，N-三甲基殼聚糖，N-馬來(lái)酰化殼聚糖，羧甲基殼聚糖，N, 0-羧甲基殼聚糖，β -環(huán)糊精接枝殼聚糖，羥丙基殼聚糖，鹽酸丁卡因殼聚糖，殼聚糖/聚N-異丙基丙烯酰胺，阿侖膦酸鈉殼聚糖。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的酸性氯化鈣溶液或殼聚糖或殼聚糖衍生物酸性溶液，采用PH值梯度降低的方式加入，以實(shí)現(xiàn)10-羥基喜樹堿的緩慢析晶。
5.一種10-羥基喜樹堿的納微球給藥體系，其特征在于，按照權(quán)利要求1 4任一項(xiàng)所述的制備方法制得，所述體系為一種海藻酸鹽殼聚糖復(fù)合微球或微囊，10-羥基喜樹堿以晶粒形式存在于載體中，包埋率達(dá)60% 95%，析晶率達(dá)20% 50%。
6.如權(quán)利要求5所述的10-羥基喜樹堿的給藥體系，其特征在于，所述微球或微囊粒徑均一、可控，平均粒徑在300nm 2 μ m之間，粒徑多分散系數(shù)范圍為0. 005 0. 2 ； 10-羥基喜樹堿晶粒尺寸為納米級(jí)，在IOnm到200nm之間，優(yōu)選在20nm到IOOnm范圍內(nèi)。
7.如權(quán)利要求1 4任一項(xiàng)所述制備方法的用途，其特征在于，所述制備方法適用于溶于堿性且在酸性環(huán)境下析晶的難溶藥物的裝載。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種難溶性藥物10-羥基喜樹堿(HCPT)的給藥體系及其制備方法。本發(fā)明利用海藻酸鹽在堿性條件下溶解HCPT，然后向制備的均一含HCPT乳液中加入酸性氯化鈣細(xì)乳液進(jìn)行交聯(lián)固化，在乳滴固化的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)HCPT構(gòu)象部分轉(zhuǎn)化，即析晶，再用酸性殼聚糖溶液或酸性殼聚糖衍生物進(jìn)行第二步固化，以使HCPT進(jìn)一步析晶。利用該方法制得的產(chǎn)品為一種裝載有HCPT的尺寸均一、分散穩(wěn)定的海藻酸鹽殼聚糖復(fù)合微球或微囊給藥體系。該體系中納微球粒徑均一、分散穩(wěn)定，且納微球中的藥物以閉環(huán)藥物納米晶的形式存在其中，可實(shí)現(xiàn)難溶藥物溶解度的增加和生物利用度的提高，并有效提高了難溶藥物的包埋率。
文檔編號(hào)A61K9/14GK102349871SQ20111031956
公開日2012年2月15日 申請(qǐng)日期2011年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月20日
發(fā)明者周煒清, 張?jiān)懒? 楊娟娟, 楊婷媛, 王連艷, 馬光輝 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所