專(zhuān)利名稱：一種飽和胺類(lèi)化合物在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物的新用途，特別是涉及一種飽和胺類(lèi)化合物三二甲氨基) 乙基)胺(代號(hào)TA01)在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
缺血性疾病是臨床上一種嚴(yán)重危害健康，降低生活質(zhì)量，致死、致殘率高的疾病， 分為慢性和急性缺血性疾病。隨著人民生活水平提高及人口老年化，慢性缺血性疾病如心腦血管梗塞，視網(wǎng)膜缺血性病變發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，如周?chē)鷦?dòng)脈疾病的發(fā)病率在3% -7%, 超過(guò)70歲的人群發(fā)病率高達(dá)15% -20%。急性缺血性疾病如下肢缺血損傷是臨床常見(jiàn)的疾病之一，如不及時(shí)診斷和正確處理，可迅速引起肢體壞死，導(dǎo)致截肢甚至危及生命。其最常見(jiàn)的病因是下肢動(dòng)脈栓塞和動(dòng)脈狹窄伴急性血栓形成。目前下肢缺血的主要治療手段有內(nèi)科藥物治療、手術(shù)治療和微創(chuàng)的血管腔內(nèi)治療。常規(guī)內(nèi)科藥物治療對(duì)早期的病人藥物治療有一定效果，但見(jiàn)效較慢，且恢復(fù)較差；還有一些其他的手段，比如說(shuō)傳統(tǒng)的開(kāi)刀手術(shù)， 可以把病變段通過(guò)人工搭橋的方法跨過(guò)去，這種簡(jiǎn)單的血管搭橋也可以使病人缺血的癥狀得到緩解，挽救肢體?，F(xiàn)在更多的是微創(chuàng)治療，也就是老百姓經(jīng)常提到的介入治療，這種辦法就是用一個(gè)導(dǎo)磁導(dǎo)管擴(kuò)張，用微穿針進(jìn)行穿刺，用球囊擴(kuò)張，必要時(shí)候用支架做一個(gè)內(nèi)支撐，保證血管短期不再狹窄，或者閉塞的血管不再堵塞。目前臨床上采用的內(nèi)科藥物、血管搭橋、介人手術(shù)等方式治療，但具有一定的局限性。對(duì)于動(dòng)脈流出道差，無(wú)法進(jìn)行動(dòng)脈搭橋或介入者，或體質(zhì)差無(wú)法耐受搭橋手術(shù)者的治療方法有限，而內(nèi)科保守治療效果較差。因此，無(wú)創(chuàng)性細(xì)胞治療藥物通過(guò)動(dòng)員自體骨髓中內(nèi)皮祖細(xì)胞到缺血部位修復(fù)血管新生成為治療缺血性疾病的從基礎(chǔ)到臨床已成為新的熱點(diǎn)。干細(xì)胞技術(shù)是近年來(lái)治療下肢缺血性疾病的新方法。內(nèi)皮祖細(xì)胞治療下肢血管病是根據(jù)干細(xì)胞可以分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞，形成新生血管的原理，將患者骨髓中干細(xì)胞動(dòng)員到外周血，趨化到其缺血的下肢肌肉內(nèi)，使其逐漸分化并形成新的毛細(xì)血管，促其血管再生，改善和恢復(fù)下肢血流，達(dá)到治療下肢缺血的目的。動(dòng)員自體內(nèi)皮祖細(xì)胞治療下肢缺血性病變?yōu)橐恍律委熓侄?，目的是血管再生，與以往主要是血管再通的治療理念不同，可使部分患者避免截肢或降低截肢風(fēng)險(xiǎn)，改善生活質(zhì)量，技術(shù)更安全，患者耐受度更好。成人骨髓是血細(xì)胞再生場(chǎng)所，也是血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞等干/祖細(xì)胞的棲息地。干細(xì)胞所在的特定的微環(huán)境稱為干細(xì)胞“龕”。組成“龕”的細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)及各種分子調(diào)節(jié)了干細(xì)胞的豐度和命運(yùn)。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞。內(nèi)皮祖細(xì)胞分化成血管的機(jī)制主要是四個(gè)不同又有互相聯(lián)系的機(jī)制，如血管發(fā)生、血管生成、動(dòng)脈形成和旁分泌機(jī)制。四種機(jī)制具有協(xié)同作用，旁分泌機(jī)制可促進(jìn)其他三種機(jī)制的形成發(fā)展，共同恢復(fù)缺血后的組織的供血和供氧。目前已被證實(shí)內(nèi)皮祖細(xì)胞不僅參與人胚胎血管發(fā)生， 同時(shí)也參與出生后的血管新生。近年來(lái)，人們對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的特點(diǎn)有相當(dāng)?shù)牧私庑难艿奈ｋU(xiǎn)因子、糖尿病、高血壓、吸煙等可減少循環(huán)系統(tǒng)的內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量；心肌缺血、下肢動(dòng)脈缺血、QRL09/還原酶抑制劑、雌激素、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、成血血管蛋白等因子、燒傷等血管損傷等等均可增加循環(huán)系統(tǒng)的內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量。正常情況下內(nèi)皮的損傷與周?chē)墒靸?nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮的修復(fù)處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)；病理狀態(tài)下，內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖并向外周血定向遷移、黏附功能減弱，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷不可修復(fù)甚至加重，從而成為許多血管相關(guān)疾病重要的致病因素之一。內(nèi)皮祖細(xì)胞的定義1997年Asahara等用免疫磁珠法第一次從外周血分離得到內(nèi)皮祖細(xì)胞，并觀測(cè)到這種細(xì)胞可以參與損傷后的血管新生。從形態(tài)上觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞呈圓形、梭形，無(wú)法與其它細(xì)胞相區(qū)分，目前鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞主要依靠其表面標(biāo)志物和生物學(xué)功能①目前比較公認(rèn)的表面標(biāo)志物鑒定標(biāo)準(zhǔn)為kal-r/Flk-l+/⑶133+。②其誘導(dǎo)后具有內(nèi)吞Dil-ac-LDL并與BS-Iectin結(jié)合。③在Matrivgel膜基質(zhì)上形成管腔樣結(jié)構(gòu)。內(nèi)皮祖細(xì)胞與缺血性心臟病2005年Werner等(Werner N, Kosiol S, Schiegl Τ, et al. Circulating endothelial progenitor cells and cardiovascular outcomes. N Engl J Med. 2005 ；353 (10) :999-1007.)指出內(nèi)皮祖細(xì)胞是否“健康”是預(yù)測(cè)缺血性心臟病諸多危險(xiǎn)因素中的一個(gè)重要指標(biāo)。2004年T0PCARE-AMI等(Schachinger V，Assmus B, Britten MB, et al.Transplantation of progenitor cells and regeneration enhancement in acute myocardial infarction :final one-year results of the T0PCARE-AMI Trial. J Am Coll Cardiol. 2004 ；44 (8) : 1690-1699.)在研究中將 59 例急性心肌梗死患者冠狀動(dòng)脈內(nèi)注射骨髓源或外周血來(lái)源的內(nèi)皮祖細(xì)胞，術(shù)后4個(gè)月隨訪左室造影發(fā)現(xiàn)左室射血分?jǐn)?shù)升高，左室收縮末期容積減少。同時(shí)采用增強(qiáng)對(duì)比的核磁共振技術(shù)， 后期增強(qiáng)(late enhancement, LE)容積衡量梗死范圍，術(shù)后4個(gè)月和12個(gè)月LE顯著減小。內(nèi)皮祖細(xì)胞與缺血性腦血管病Taguchi 等(Taguchi A, Matsuyama T, Moriwaki H, et al. Circulating CD34-positive cells provide an index of cerebrovascular function. Circulation. 2004 ； 109 (24) :2972-2975.)發(fā)現(xiàn)循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞與腦血管系統(tǒng)的維持和修復(fù)密切相關(guān)，靜脈注射從人臍靜脈血分離的內(nèi)皮祖細(xì)胞給予卒中后48h的大鼠，發(fā)現(xiàn)其在缺血區(qū)能誘導(dǎo)血管新生，并提供神經(jīng)生成的適宜環(huán)境，首次證實(shí)了在缺血性腦損害的修復(fù)中血管生成與神經(jīng)生成的直接關(guān)系。楊瑞瑞(楊瑞瑞.血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的動(dòng)員及其對(duì)腦梗死治療的實(shí)驗(yàn)研究[D].天津醫(yī)科大學(xué)碩士論文，2007.)研究了血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子動(dòng)員自體骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞，對(duì)腦缺血/再灌注損傷小鼠的影響。發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子持續(xù)增加，在第四天達(dá)到高峰，同時(shí)梗死灶體積明顯縮小。內(nèi)皮祖細(xì)胞與缺血性周?chē)懿≡趧?dòng)物實(shí)驗(yàn)中，移植體外培養(yǎng)擴(kuò)增的內(nèi)皮祖細(xì)胞可以有效增強(qiáng)缺血組織的血管生成和側(cè)支循環(huán)。Chade等(Chade AR，Zhu X, Lavi R, et al. Endothelial progenitor cells restore renal function in chronic experimental renovascular disease. Circulation. 2009 ；119 (4) :547-557.)給腎動(dòng)脈狹窄的豬輸注自體內(nèi)皮祖細(xì)胞，4周后用CT、組織化學(xué)、Western blotting等方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)增加，并且促進(jìn)了新血管生成及成熟、減緩了腎微血管重構(gòu)及腎動(dòng)脈纖維化。內(nèi)皮祖細(xì)胞與角膜疾病用自體內(nèi)皮祖細(xì)胞作為種子細(xì)胞種植于人工血管或者瓣膜及支架表面使其內(nèi)皮化，可防止人造血管表面形成血栓、被細(xì)菌污染、形成假性內(nèi)膜等問(wèn)題，同時(shí)避免異源性內(nèi)皮細(xì)胞種植帶來(lái)的免疫排斥反應(yīng)。邵春益等運(yùn)用豬角膜脫細(xì)胞基質(zhì) (CACM)為載體培養(yǎng)豬骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞體外構(gòu)建組角膜后板層，結(jié)果發(fā)現(xiàn)豬CACM排列整齊，內(nèi)皮祖細(xì)胞與CACM層貼合良好，構(gòu)建的組織工程角膜后板層與正常角膜相似。在正常狀態(tài)下，個(gè)體外周血中內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)含量極低，不能分離獲取足夠的數(shù)量用以移植治療。在組織發(fā)炎、受傷時(shí)，或在臨床上給予化學(xué)治療或細(xì)胞因子，均可以讓EPCs離開(kāi)骨髓的“龕”，這一過(guò)程稱之為動(dòng)員(mobilization)，與EPCs回歸骨髓的過(guò)程 (homing)恰好相反。EPCs的動(dòng)員起始于化學(xué)治療或細(xì)胞因子的重復(fù)刺激，導(dǎo)致嗜中性粒細(xì)胞或破骨細(xì)胞活化，進(jìn)而影響到骨髓的“龕”保留EPCs的能力，整個(gè)過(guò)程必須依賴細(xì)胞因子(SDF-1 α、VEGF, SCF 等)、趨化因子 CXCR4、粘附蛋白 VLA-4、VCAM-U fibronectin, N-cadherin等分子參與。在EPCs的歸巢和動(dòng)員過(guò)程中SDF-I α /CXCR4通路扮演了非常重要的角色。而且外周循環(huán)血中的SDF-I增加也會(huì)促使HSCs/HPCs離開(kāi)骨髓。在歸巢的過(guò)程中，SDF-I是由骨髓內(nèi)基質(zhì)細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞，成骨細(xì)胞所產(chǎn)生，EPCs表面表達(dá)趨化因子受體 CXCR40目前，關(guān)于通過(guò)動(dòng)員干/祖細(xì)胞治療缺血性疾病的藥物研究還較少，常規(guī)的內(nèi)科藥物治療效果不佳，外科手術(shù)由于患者耐受力低無(wú)法承受血管搭橋等，臨床上發(fā)現(xiàn)粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和AMD3100(商品名為Plerixafor，正進(jìn)入臨床III期試驗(yàn))具有一定的動(dòng)員造血干細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞的功能，但G-CSF動(dòng)員前給藥時(shí)間一般為一周且需要重復(fù)給藥，且同時(shí)帶來(lái)骨質(zhì)疏松、免疫反應(yīng)等副作用，AMD3100是CXCR4的特異拮抗劑，研究發(fā)現(xiàn)可快速動(dòng)員骨髓造血干細(xì)胞，對(duì)動(dòng)員內(nèi)皮祖細(xì)胞也有一定作用。已知的飽和胺類(lèi)化合物(代號(hào)TA01，具有式I所示的分子式)，它是氫鍵的受體， 通過(guò)氫鍵和特殊空間位點(diǎn)與蛋白和碳水化合物作用，屬于一種新型醫(yī)藥中間體，發(fā)明人之前已發(fā)現(xiàn)其具有動(dòng)員外周血造血干細(xì)胞的新作用并已提出200910241726. 3的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種飽和胺類(lèi)化合物TAOl的新用途，即在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。所述化合物TAOl具有式I所示的分子式
權(quán)利要求
1.一種飽和胺類(lèi)化合物在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述飽和胺類(lèi)化合物分子式如式I所示
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于式中，R1= R2 = CH3，所述飽和胺類(lèi)化合物為三二甲氨基)乙基)胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物的劑型為注射劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述注射劑的溶劑為pH7. 5-8. 5的TE緩沖液、生理鹽水、PBS或滅菌蒸餾水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于所述缺血性疾病包括急性下肢缺血、缺血性心腦血管疾病、糖尿病下肢并發(fā)癥、視網(wǎng)膜缺血性病變和外周血管疾病。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于所述缺血性疾病為急性下肢缺血疾病。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種飽和胺類(lèi)化合物的新用途，即其在制備治療缺血性疾病藥物中的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)證明，該化合物三(2-(二甲氨基)乙基)胺(代號(hào)TA01)能夠通過(guò)動(dòng)員骨髓中的內(nèi)皮祖細(xì)胞，有效的參與修復(fù)下肢缺血性疾病。本發(fā)明將在治療缺血性疾病藥物的研究和開(kāi)發(fā)中發(fā)揮重要作用，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號(hào)A61K31/132GK102389408SQ20111032190
公開(kāi)日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月20日
發(fā)明者任祥亮, 師偉, 張銳, 張靜, 李艷華, 裴雪濤, 陳海旭 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所