專利名稱：一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于金納米粒子的制備領(lǐng)域，特別涉及一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法。
背景技術(shù)：
金納米粒子(AuNPS)因其獨特的光學(xué)、電子和量子尺寸相關(guān)的性能，可以廣泛地應(yīng)用于生物、催化、光學(xué)以及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，因而受到科研工作者的關(guān)注。聚酰胺-胺樹狀大分子(PAMAM)是一類單分散性、高度支化且結(jié)構(gòu)規(guī)整的大分子化合物，在前期工作中已被用作模板來合成功能化的金納米粒子。以第五代PAMAM樹狀大分子為模板制備的金納米粒子可以分為兩類，分別是樹狀大分子包裹的金納米粒子(Au DENPs, Dendrimer-entrapped gold nanoparticles)和樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子(Au DSNPs,Dendrimer-stabilized gold nanoparticles)。通過對這些納米粒子進(jìn)行修飾和表面功能化，使其成為多功能、低毒性的納米粒子，有望應(yīng)用于臨床癌癥的診斷和治療，尤其是癌細(xì)胞的CT成像。傳統(tǒng)的CT成像劑通常都是一些含碘小分子化合物，如碘海醇、碘化油、泛影酸等。 由于其分子量比較小，因此很容易通過血液循環(huán)代謝排出體外，成像時間很短，而且這些小分子物質(zhì)缺乏特異性，不能對病變組織進(jìn)行靶向成像。因此，有報道將小分子的含碘化合物與有機大分子化合物相結(jié)合，并對其進(jìn)行修飾，以延長其血液循環(huán)時間，增強材料的靶向性。目前DTA修飾的聚酰胺-胺樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子的自還原制備方法還未見文獻(xiàn)報道和專利申請。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，該方法無需任何外加還原劑即將Au3+還原為Au°，簡化了材料的合成步驟，降低了材料的成本，同時使材料同時含有小分子含碘造影劑和AuNPs，并成功地應(yīng)用于小鼠的活體CT成像。本發(fā)明的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，包括(1)向N，N-二甲基甲酰胺溶解的泛影酸DTA溶液中加入1_(3_ 二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽EDC. HCl的二甲基亞砜溶液，攪拌反應(yīng)3 乩后，再加入 N-羥基硫代琥珀酰亞胺NHS的二甲基亞砜溶液，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3 他；反應(yīng)結(jié)束后將溶液加入樹狀大分子溶液中，反應(yīng)60 80h，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物透析，最后將產(chǎn)物冷凍干燥得固體；其中，DTA、EDC. HCl和NHS的摩爾比為1 10 10，DTA與樹狀大分子的摩爾比為 110 1 ；(2)取上述固體，用水將其溶解后，再加入氯金酸溶液，然后在室溫下攪拌反應(yīng) 60-120min,接著再加入三乙胺，攪拌混合20 40min后，向反應(yīng)液中加入乙酸酐，在室溫下攪拌反應(yīng)20 ^h，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物透析，最后將產(chǎn)物冷凍干燥，得到DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子；其中，三乙胺與樹狀大分子的摩爾比為550 1，乙酸酐與樹狀大分子的摩爾比為550 1。所述步驟(1)中的樹狀大分子為氨基封端的聚酰胺-胺型PAMAM樹狀大分子 (Dendritech Inc.，Midland, MI, USA)，樹狀大分子溶液中溶劑為二甲基亞砜溶液。所述步驟O)中的氯金酸溶液濃度為10mg/mL。所述步驟⑴或O)中的透析具體過程為逐次在PBS緩沖溶液中透析2 4次和超純水中透析2 4次，每次6-10h，透析3天。所述透析所用透析膜為纖維素透析膜，截留分子量為10000。所述步驟⑵中得到的DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子為{(AU°)5CI-G5. NHAc-DTA8I DSNPs ο所述DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子應(yīng)用于CT成像。本發(fā)明使用核磁共振譜(NMR)、紫外-可見分光光度計(UV-Vis)、透射電子顯微鏡(TEM)等方法表征本發(fā)明制備的樹狀大分子和納米顆粒，同時用Micro-CT測試來檢驗 DTA修飾的聚酰胺-胺樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子的小鼠活體成像效果，具體測試結(jié)果如下(I)NMR 譜核磁共振氫譜結(jié)果證實每個樹狀大分子表面修飾了 8個DTA分子(G5. NH2-DTA8)， 自還原制備的樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子結(jié)構(gòu)為{(AU°)5(1-G5.NHAC-DTA8}DSNPS，見附圖 1。(2)紫外-可見分光光度計的測試結(jié)果G5. NH2-DTA8的水溶液在^Onm左右出現(xiàn)了苯環(huán)的吸收峰，證實了 DTA被修飾在樹狀大分子表面。同時，在水溶液中合成的{(Au°)5C1-G5. NHAc-DTA8IDSNPS在522nm左右都有一個特征吸收峰，這是由于金納米顆粒的表面等離子體共振峰，參見附圖2 ；(3)透射電子顯微鏡測量將氯金酸和G5. NH2-DTA8的水溶液攪拌混合形成的樹狀大分子包裹的納米金顆粒的TEM圖片(附圖3)表明，金納米顆粒直徑約2. 51nm，尺寸分布較窄，具有良好的分散性。 進(jìn)一步乙酰化之后合成的{(AU°)5Q-G5.NHAC-DTA8}DSWS的TEM圖片(附圖4a)和粒度分布直方圖(附圖4b)表明，形成的{(AU°)5(1-G5.NHAC-DTA8}DSWS納米顆粒相當(dāng)均勻，粒徑分布在較窄的范圍內(nèi)，平均直徑為6. 02nm。附圖如是{(Au°) 5(1-G5. NHAc-DTA8I DSNPs的高分辨 TEM圖片，{(Au°) 5Q-G5. NHAc-DTA8IDSNPs的EDS譜則證實金元素的存在，見附圖4d。(4) X-射線衰減性能測試用CT測試儀測試各個樣品的HU值并得出X-射線衰減與金濃度的線性關(guān)系。附圖 5 (a)為{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 與{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs 在相同金濃度下的 X-射線衰減與金濃度的線性關(guān)系圖，附圖5(b)為{(AU°)5(1-G5.NHAC-DTA8}DSWS與歐乃派克在相同碘濃度下的X-射線衰減與金濃度的線性關(guān)系圖。從圖5(a)中可以看出相同金濃度條件下，{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 比{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs 的 HU 值大，說明 DTA 的存在可以增強材料的CT造影效果。同樣圖5(b)中相同碘濃度條件下，{(AU°)5(i-G5.NHAC-DTA8} DSNPs比歐乃派克的HU值大，證明本方法合成的{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs較單一的納米金顆粒造影劑或者碘造影劑具有較好的CT成像靈敏度。
(5)血液相容性測試取新鮮人血紅細(xì)胞，分別加入蒸餾水、PBS緩沖液和不同濃度的{(Au°)5(1-G5. NHAc-DTA8I DSNPs的PBS溶液中，震蕩混勻后室溫下靜置2h，隨后IOOOrpm離心Imin后取上清液測試其紫外吸收光譜(附圖6)。通過實驗證實{(Au°)5(i-G5. NHAc-DTA8IDSNPS濃度達(dá)到3 μ M時，仍未出現(xiàn)明顯的溶血現(xiàn)象，證實在該濃度下，{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs具有良好的血液相容性。(6)細(xì)胞毒性測試將不同濃度的{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs與KB細(xì)胞(人上皮癌細(xì)胞)共培養(yǎng) 4h后對細(xì)胞活力進(jìn)行MTT檢測(附圖7)，并利用流式細(xì)胞儀對MTT檢測的結(jié)果進(jìn)行了驗證 (附圖8)。實驗結(jié)果證實，(Au°)5Q-G5. NHAc-DTAJDSNPs濃度達(dá)到3μ M時，仍未對KB細(xì)胞產(chǎn)生明顯的毒性，說明{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs在3 μ M時仍具有良好的生物相容性。(7)小鼠活體血管成像將500 μ L 的{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs ([Au] = 0. lmol/L)尾部靜脈注射進(jìn)體重為30g的小鼠體內(nèi)，通過Micro-CT掃描檢測得到CT圖片(圖9)，從圖中能夠清楚地看到小鼠的下腔靜脈和腎靜脈，且小鼠未發(fā)現(xiàn)死亡，證明本方法合成的{(Au°)5(i-G5. NHAC-DTA8I DSNPs具有較低的生物毒性和較好的CT成像效果。通過用DTA修飾第5代的樹狀大分子(G5 PAMAM)和氯金酸混合后，可在室溫下經(jīng)原位自動還原合成金納米顆粒，且乙酰化修飾樹狀大分子表面氨基降低材料生物毒性的同時未對材料的穩(wěn)定性產(chǎn)生明顯影響，同時，生成的Au NPs尺寸分布較窄，形態(tài)均一，具有良好的穩(wěn)定性和CT成像效果，這一點對于用于不同醫(yī)學(xué)領(lǐng)域所需要的可定制的金屬納米顆粒表面功能化非常重要。有益效果(1)本發(fā)明方法簡單，反應(yīng)條件簡便、溫和、環(huán)保、易于操作，具有產(chǎn)業(yè)化實施的前
旦
足；(2)本發(fā)明設(shè)計合成的DTA修飾的樹狀大分子穩(wěn)定化的金納米顆粒材料，無需外加還原劑，其反應(yīng)均在室溫下完成，同時制備出的穩(wěn)定性能良好的金納米粒子可被成功地應(yīng)用于小鼠的活體成像；(3)本發(fā)明的樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子能夠長時間地分散在水基溶液中，沒有團(tuán)聚現(xiàn)象發(fā)生，所合成的納米顆粒的尺寸大小可控制，且具有較低的生物毒性、較高的 X-射線衰減強度和較好的CT成像效果，使它們具有了應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的前景。


圖 1 為本發(fā)明制備的 G5. NHAc-DTA8 (a)和{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs (b)的核磁共振氫譜圖；圖 2 為本發(fā)明制備的 G5. NHAc-DTA8 (a)、{(Au0) 50-G5. NH2-DTA8I DENPs (b)和 {(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs (c)的紫外吸收光譜圖；圖3為本發(fā)明制備的{(Au°)5Q-G5. NH2-DTAJDENPS的TEM圖片(a)和粒徑分布直方圖(b)。圖4為本發(fā)明制備的{(Au°)5Q-G5. NHAc-DTA8I DSNPS的TEM圖片(a)、粒徑分布直方圖(b)、高分辨TEM圖片(c)和能量分散(EDS)譜(d)；圖 5 為本發(fā)明制備的{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 與{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs 和傳統(tǒng)造影劑歐乃派克的X射線衰減系數(shù)對比圖；圖6為本發(fā)明制備的不同摩爾濃度的{(Au°)5C1-G5. NHAC-DTA8I DSNPS的紫外吸收光譜圖；圖7為本發(fā)明制備的不同摩爾濃度的{(Au°)5Q-G5. NHAc-DTA8I DSNPS與KB細(xì)胞共培養(yǎng)4h后的MTT實驗結(jié)果；圖8為本發(fā)明制備的不同摩爾濃度的{(Au°)5Q-G5. NHAc-DTA8}DSNPS(c-h濃度分別為0. 5μΜ、1· 0μΜ、1· 5μΜ、2· 0μΜ、2· 5μΜ禾口 3. 0 μ Μ)與KB細(xì)胞共培養(yǎng)4h后的流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果(a為未染色的KB細(xì)胞，b為二乙酸熒光素染色的KB細(xì)胞)；圖 9 為本發(fā)明制備的{(Au。) 5。-G5. NHAc-DTAJ DSNPs (500 μ L，[Au] =0. lmol/L)尾部靜脈注射進(jìn)小鼠體內(nèi)，通過Micro-CT掃描檢測得到的CT圖片(三角圖標(biāo)指示下腔靜脈， 箭頭指示腎靜脈)；圖10為本發(fā)明反應(yīng)方程式簡圖。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實施例1(1)向5mL N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解的干重為51. 92 77. 88mg的DTA溶液中加入1- (3- 二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC. HCl，162. 14 M3. 22mg) 的二甲基亞砜溶液，攪拌反應(yīng)池后加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺(NHS，97. 35 146. 02mg) 的二甲基亞砜溶液，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3h，其中DTA/EDC.HC1/NHS (摩爾比)=1 10 10。(2)取步驟(1)反應(yīng)液，將其滴加入樹狀大分子溶液中(20 30mg，IOmL 二甲基亞砜溶液)，反應(yīng)72h，其中DTA/樹狀大分子(摩爾比)為110 1。隨后將反應(yīng)產(chǎn)物用纖維素透析膜(MWC0 = 10000)逐次在PBS緩沖溶液0L)中透析3次，在超純水0L)中，透析 3次，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得G5. NH2-DTA8。合成過程中對樹狀大分子表面修飾用核磁進(jìn)行表征，對各個峰進(jìn)行積分計算可知樹狀大分子載體表面修飾了 8個DTA分子(附圖la)。對得到的產(chǎn)品G5. NH2-DTA8進(jìn)行紫外吸收表征(附圖2，曲線1)，DTA中苯環(huán)的吸收峰在^Onm，證明了 DTA已經(jīng)被成功地修飾在樹狀大分子表面。這些測試結(jié)果表明已成功制備了設(shè)計合成的功能化的樹狀大分子 G5. NH2-DTA8。實施例2取G5. NH2-DTA8L 00 2. OOmg 溶于水中，取 61. 7 123. 4 μ L 的 10mg/mL 的 HAuCl4 水溶液混合，攪拌反應(yīng)30min后溶液變成酒紅色，在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1 6h，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物用纖維素透析膜(MWC0 = 10000)逐次在PBS緩沖溶液4LX3和超純水4LX3， 透析3天，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得到DTA修飾的樹狀大分子包裹的金納米粒子{(Au0) 50-G5. NH2-DTA8I DENPs。合成過程中對所形成的Au DENPs用紫外吸收光譜(附圖2，曲線2)和TEM(附圖3)進(jìn)行了表征。附圖2中，Au DENPs的表面等離子體共振(SPR)峰在522nm，證明了 Au DENPs已經(jīng)被成功地制備。TEM圖片(附圖3)表明金納米顆粒直徑約2. 51nm，尺寸分布較窄，具有良好的分散性。這些測試結(jié)果表明已成功制備了設(shè)計合成的功能化的樹狀大分子包裹的納米金顆粒{(Au0) 50-G5. NH2-DTA8I DENPs。實施例3取{(Au0)50-G5. NH2-DTA8I DENPs2. 00 4. OOmg 溶于水中，攪拌下加入 2. 0 μ L 三乙胺，攪拌反應(yīng)30min后向反應(yīng)液中加入1. 3μ L乙酸酐，在室溫下攪拌反應(yīng)20 Mh，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物用纖維素透析膜(MWC0 = 10000)逐次在PBS緩沖溶液4LX3和超純水4LX3， 透析3天，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得到DTA修飾的樹狀大分子穩(wěn)定的金納米粒子 {(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs。合成過程中對所形成的Au DSNPs用紫外吸收光譜(附圖2，曲線3)和TEM(附圖4)進(jìn)行了表征。附圖2中，Au DSNPs的表面等離子體共振(SPR)峰在522nm，證明了 Au DSNPs已經(jīng)被成功地制備。TEM圖片(附圖4)表明金納米顆粒平均直徑約6. 02nm，尺寸分布較窄，具有良好的分散性。這些測試結(jié)果表明已成功制備了設(shè)計合成的功能化的樹狀大分子穩(wěn)定的納米金顆粒{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs。實施例4以體外CT測試的HU值來檢驗實施例3合成的材料{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 與{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs和傳統(tǒng)造影劑歐乃派克的CT值。取實施例3樣品44. 95mg溶解在500 μ L的PBS緩沖液中配制金濃度為0. IM的溶液，再分別稀釋到金濃度為0. 06Μ, 0. 02Μ，0· 01Μ, 0. 005Μ 的溶液各 200μ L。取{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs 40. 4&iig 溶解在 500 μ L 的PBS緩沖液中配制金濃度為0. IM的溶液，再分別稀釋到金濃度為0. 06Μ，0· 02Μ，0· 01Μ, 0. 005M的溶液各200 μ L。取歐乃派克42. 3mL (碘的濃度為300mg/mL)稀釋至ImL配置成碘濃度為0. IM的溶液，再分別稀釋到碘濃度為0. 048Μ，0· 0288Μ，0· 0096Μ，0· 0048Μ，0· 0024Μ 的溶液各200 μ L。用CT測試儀測試各個樣品的HU值并得出X-射線衰減與金或碘濃度的線性關(guān)系。附圖 5 (a)為{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 與{(Au0) 50-G5. NHAc} DENPs 在相同金濃度下的X-射線衰減與金濃度的線性關(guān)系圖，附圖5(b)為{(AU°)5(i-G5.NHAC-DTA8} DSWs與歐乃派克在相同碘濃度下的X-射線衰減與碘濃度的線性關(guān)系圖。從圖5(a)中可以看出相同金濃度條件下，{(Au°)5Q-G5. NHAc-DTAJ DSNPs 比{(Au°) 5(1-G5. NHAc} DENPs 的 HU 值大，說明DTA的存在可以增強材料的X-射線衰減強度。同樣圖5(b)中相同碘濃度條件下，{(Au°)5Q-G5.NHAC-DTA8}DSNPs比歐乃派克的HU值大，證明本方法合成的{(Au°) 5(1-G5. NHAc-DTA8IDSNPs較單一的納米金顆粒造影劑或者碘造影劑具有較好的X-射線衰減強度。實施例5取實施例3樣品2. OOmg溶解在444. 9 μ L的PBS緩沖液中配制樣品濃度為100 μ M 的溶液，再分別稀釋到樣品濃度為3. 0 μ Μ，2. 5 μ Μ，2. 0 μ Μ，1. 5 μ Μ，1. 0 μ Μ，0. 5 μ M的溶液各1. SmL0取新鮮人血紅細(xì)胞，分別加入蒸餾水、PBS緩沖液和上述配置的不同濃度的實例3 樣品的PBS溶液中，震蕩混勻后室溫下靜置2h，隨后IOOOrpm離心Imin后取上清液測試其紫外吸收光譜(附圖6)。通過實驗證實{(Au°)5Q-G5.NHAC-DTA8}DSNPS濃度達(dá)到3μΜ時，仍未出現(xiàn)明顯的溶血現(xiàn)象，證實在該濃度下，{(AU°)5Q-G5. NHAc-DTA8IDSNPS具有良好的血液相容性。實施例6以人口腔上皮癌細(xì)胞(KB)為模型細(xì)胞，通過MTT法考察其與不同濃度的 {(AU°)50-G5. NHAC-DTA8I DSNPs共培養(yǎng)后的細(xì)胞活力(附圖7)0取實例3樣品2. OOmg溶解在444. 9 μ L的PBS緩沖液中配制樣品濃度為100 μ M的溶液，再分別稀釋到樣品濃度為 3. 0 μ Μ，2. 5 μ Μ，2. 0 μ Μ，1. 5 μ Μ，1. 0 μ Μ，0. 5 μ M的溶液各1. OmL。隨后將配置好的溶液與 KB細(xì)胞共培養(yǎng)4h后，分別利用MTT (附圖7)法和流式細(xì)胞儀(附圖8)檢測細(xì)胞活力。結(jié)果表明自還原法得到的{(Au°)5Q-G5. NHAc-DTA} DSNPS在濃度達(dá)到3. O μ M時對細(xì)胞活力仍無明顯的影響。因此，本研究設(shè)計合成的{(Au°)5Q-G5.NHAC-DTA8}DSNPs具有良好的生物相容性。實施例7將500 μ L 實施例 3 中得到的{(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs ([Au] = 0. lmol/L) 尾部靜脈注射進(jìn)體重為20g的小鼠體內(nèi)，用藥后15min通過Micro CT掃描得到小鼠的CT 圖片(附圖9)。從圖中可以明顯觀察到小鼠的下腔靜脈和腎靜脈，證明本研究設(shè)計合成的 {(Au0) 50-G5. NHAc-DTA8I DSNPs 具有較好的 CT 成像效果。
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權(quán)利要求
1.一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，包括(1)向N，N-二甲基甲酰胺溶解的泛影酸DTA溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽EDC. HCl的二甲基亞砜溶液，攪拌反應(yīng)3 他后，再加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺NHS的二甲基亞砜溶液，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3 他；反應(yīng)結(jié)束后將溶液加入樹狀大分子溶液中，反應(yīng)60 80h，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物透析，最后將產(chǎn)物冷凍干燥得固體；其中，DTA、 EDC. HCl和NHS的摩爾比為1 10 10，DTA與樹狀大分子的摩爾比為110 1 ；(2)取上述固體，用水將其溶解后，再加入氯金酸溶液，然后在室溫下攪拌反應(yīng) 60-120min，接著再加入三乙胺，攪拌混合20 40min后，向反應(yīng)液中加入乙酸酐，在室溫下攪拌反應(yīng)20 ^h，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物透析，最后將產(chǎn)物冷凍干燥，得到DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子；其中，三乙胺、乙酸酐與樹狀大分子的摩爾比均為550 1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的樹狀大分子為氨基封端的聚酰胺-胺型PAMAM樹狀大分子，樹狀大分子溶液中溶劑為二甲基亞砜溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述步驟O)中的氯金酸溶液濃度為10mg/mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述步驟(1)或O)中的透析具體過程為逐次在PBS緩沖溶液中透析2 4次和超純水中透析2 4次，每次6-10h，透析3天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述透析所用透析膜為纖維素透析膜，截留分子量為10000。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述步驟O)中得到的DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子為{(AU°)5CI-G5. NHAc-DTA8I DSNPs ο
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，其特征在于所述DTA修飾的樹狀大分子的金納米粒子應(yīng)用于CT成像。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種泛影酸修飾樹狀大分子的金納米粒子的制備方法，包括(1)用DTA修飾樹狀大分子，透析，冷凍干燥得固體；(2)取上述固體，用水將其溶解，再加入氯金酸溶液，室溫攪拌1-2小時后，形成樹狀大分子包裹的納米金顆粒；再在反應(yīng)混合物中加入三乙胺，乙酸酐，乙酰化反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物透析，冷凍即得樹狀大分子穩(wěn)定的納米金顆粒。本發(fā)明提高了金納米粒子的穩(wěn)定性，同時將DTA和納米金兩種CT造影元素有效地整合在同一納米顆粒內(nèi)，并成功地應(yīng)用于小鼠的活體CT成像；本發(fā)明的方法簡單，反應(yīng)條件簡易且溫和、環(huán)保、易于操作，具有產(chǎn)業(yè)化實施前景。
文檔編號A61K51/06GK102380112SQ20111033247
公開日2012年3月21日 申請日期2011年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月27日
發(fā)明者史向陽, 彭琛 申請人:東華大學(xué)