專利名稱：一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物及其用途。
背景技術(shù)：
老年性腦癡呆癥(Senile dementia)，亦稱阿爾茨海默病(Alzheimer，s disease,AD)是一種以臨床和病理為特征的進行性退行性神經(jīng)病，該病嚴重影響著患者的生活能力和生活質(zhì)量，給家庭和社會帶來沉重的監(jiān)護負擔和醫(yī)療費用負擔。目前全世界約有1800萬人患有老年性腦癡呆癥。據(jù)推測，至2025年，全球老年性腦癡呆癥患者將劇增至3400萬人。在美國，65歲以上的人有10%患有老年性腦癡呆癥，是老年人死亡的第四位原因；在英國，65歲以上人群的發(fā)病率也達10%，85歲以上人群的發(fā)病率高達47% ；在我國超過60歲的人口占總?cè)丝诘?0. 15 %，約1.四億人，其中老年性腦癡呆癥患病率約為5 %，患者約為700萬人。這么龐大的發(fā)病群體勢必會日益加重社會負擔、家庭負擔，帶來一系列的家庭和社會問題。目前臨床上用于治療老年性腦癡呆的藥物集中在膽堿酯酶抑制劑、NMDA受體阻滯劑、清除自由基的抗氧化劑、雌激素類藥物四個方面，上述藥物多是臨床對癥治療藥物，只能一定程度上緩解AD某些癥狀，而不能使這些癥狀得到根本的治療和逆轉(zhuǎn)，也不能有效的預防AD，更為嚴重的是上述藥物均存在不同程度的毒副作用。因此研究治療作用確切、安全低毒、廉價易得的中藥復方創(chuàng)新藥物具有較大的市場競爭優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物。本發(fā)明的另一目的在于提供一種抗老年性腦癡呆癥的藥物。本發(fā)明的又一目的在于提供上述抗老年性腦癡呆癥藥物的制備方法。本發(fā)明的又一目的在于提供上述中藥組合物在制備抗老年性腦癡呆癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其在于由以下原料藥組成化橘紅、知母、杜仲葉和人參，所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為(1 10) (1 10) (1 10) (0.4 8)，所述原料藥的來源為中藥材或相當于中藥材生藥量的中藥提取物。優(yōu)選為化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為O 6) (1 5) (1 5) (0.6 4)。更進一步優(yōu)選為化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為4 2 2 1。上述的抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其在于所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參為藥材的水提取物、醇提取物或者中藥材直接打粉。一種抗老年性腦癡呆癥的藥物，其在于由上述的中藥組合物和藥學可接受的輔料制成。所述的藥物為口服劑型。所述的口服劑型優(yōu)選為膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液、滴丸劑、軟膠囊劑、蜜丸劑或水丸劑。
上述的抗老年性腦癡呆癥藥物的制備方法，包括以下步驟制得化橘紅、知母、杜仲葉和人參的醇提取物或水提取物，再向醇提取物或水提取物中加入藥學可接受的輔料，得到所述的藥物。上述的中藥組合物在制備抗老年性腦癡呆癥藥物中的應(yīng)用?；偌t蕓香科植物化州袖Citrus grandis iTomentosa'或袖Citrusgrandis (L)Osbeek的未成熟或近成熟的干燥外層果皮。前者習稱“毛橘紅”，后者習稱“光七爪”、“光五爪”性味與歸經(jīng)辛、苦，溫。歸肺、脾經(jīng)。功能與主治散寒，燥濕，利氣，消痰。用于風寒咳嗽，喉癢痰多，食積傷酒，嘔惡痞悶。知母為百合科知母屬植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bunge)的根狀莖。性味功能苦、寒、清熱除煩，潤肺滋腎。主治煩躁口渴、肺熱燥咳、消渴、午后潮熱等癥。臨床常用藥，不僅清肺火，又能清胃火，特別是清虛熱、胃陰熱等虛熱癥。杜仲葉為杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥葉。性狀杜仲葉面呈橢圓形或卵形，長7-15cm，寬3.5-7cm。表面黃綠色或黃褐色，微有光澤。先端漸尖，基部圓形成廣楔形，邊緣有鋸齒，具短葉柄。質(zhì)脆，搓之易碎，折斷面有少量銀白色橡膠絲相連。氣味，味微苦。性味與歸經(jīng)微辛，溫。歸肝、腎經(jīng)。功能與主治補肝腎，強筋骨。用于肝腎不足，頭暈?zāi)垦?，腰膝酸痛，筋骨痿軟。人參為五加科植物人參Panax ginseng C. A. Mey的干燥根。優(yōu)選為生曬參。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明的中藥組合物對抗老年性腦癡呆癥具有顯著的作用，可用于預防和治療老年性腦癡呆癥；且為純中藥制劑，安全低毒、廉價易得；經(jīng)藥理藥效學實驗證明，與現(xiàn)有技術(shù)中常用的西藥和重要對照物相比，其治療效果明顯提高。
具體實施例方式實施例1中藥組合物治療老年性腦癡呆癥的體外藥效學試驗中藥組合物由化橘紅、知母、杜仲葉和人參組成，組方I藥味質(zhì)量配比為4:2:2: 1 ；組方II藥味質(zhì)量配比為10 10 10 1 ；組方III藥味質(zhì)量配比為1:1:2:4。通過測定“疊氮鈉誘導的PC12細胞”的增殖率、LDH釋放量、細胞內(nèi)鈣離子濃度進行體外藥效學實驗。1、中藥組合物醇提取液和水提取液的制備組方I醇提取液稱取化橘紅22. Mg、知母11. 12g、杜仲葉11. 12g和人參5. 56g，加600ml 60%乙醇浸泡lh，然后回流提取，提取3次，每次提取時間為池；將3次濾液合并，旋蒸回收乙醇至無醇味，250ml容量瓶加蒸餾水定容，按照生藥材計算，得到濃度為200mg/ml藥液；取Iml濃度為200mg/ml的藥液，置于IOml容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，得到濃度為20mg/ml藥液；將藥液在超凈臺內(nèi)過濾除菌，4°C冰箱保存，備用。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。組方II醇提取液分別稱取化橘紅16. 14g、知母16. 14g、杜仲葉16. 14g和人參1. 61g，制備濃度為20mg/ml的藥液；制備方法同組方I制備醇提取液方法。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。組方III醇提取液分別稱取化橘紅6. 25g、知母6. 25g、杜仲葉12. 50g和人參25. 00g，制備濃度為20mg/ml的藥液；制備方法同組方I制備醇提取液方法。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。組方I水提取液稱取化橘紅22. 24g、知母11. 12g、杜仲葉11. 12g和人參5. 56g，用10倍量的水浸泡組方藥材lh，直火加熱提取3次，每次提取時間為lh，抽濾，將3次濾液合并濃縮后，置于250ml容量瓶加蒸餾水定容，按照生藥材計算，得到濃度為200mg/ml藥液；取Iml濃度為200mg/ml的藥液，置于IOml容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，得到濃度為20mg/ml藥液；將藥液在超凈臺內(nèi)過濾除菌，4°C冰箱保存，備用。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。組方II水提取液分別稱取化橘紅16. 14g、知母16. 14g、杜仲葉16. 14g和人參1. 61g，制備濃度為20mg/ml的藥液；制備方法同組方I制備水提取液方法。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。組方III水提取液分別稱取化橘紅6. 25g、知母6. 25g、杜仲葉12. 50g和人參25. 00g，制備濃度為20mg/ml的藥液；制備方法同組方I制備水提取液方法。加藥前，將藥液用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋到濃度為2mg/ml。2.細胞接板培養(yǎng)、分組造模與給藥實驗細胞大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(PC12細胞)，購于中國醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所。實驗藥品疊氮鈉(Amersco)，胰蛋白酶(AMRESCO，USA)；新生牛血清(NewbornCalf Serum, GIBCO Invitrogen Corporation, New Zealand) ；RPMI Medium 1640干粉培養(yǎng)基(GIBC0 Invitrogen) ；二甲基亞砜(dimethyl-sulfoxide，DMS0，江蘇永華精細化學品有限公司)；乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(南京建成生物制品有限公司，20101123)D-Hank' s 平衡鹽溶液配制NaCl 4. 00g, KCl 0. 20g, Na2HPO4 ‘ 12H20 0. 067g,KH2PO4O. 03g, NaHCO3 0. 175g,酚紅 0. Olg,三蒸水 500mL，調(diào)節(jié) pH 至 7. 0 7. 4 ；PBS 平衡鹽溶液配制:NaCl 8. 00g, KCl 0. 20g，Na2HPO4 · 12H20 3. 49g，KH2PO40. 20g,三蒸水 IOOOmL,調(diào)節(jié) pH 至 7. 2 7. 4 ；RPMI1640 培養(yǎng)液配制RPMI Medium 1640 干粉培養(yǎng)基(GIBC0Invitrogen) 10. 4g，NaHCO3 2. 0g,青霉素 000 萬 U 單位市售)0. 06g,鏈霉素(100 萬 U 單位市售)0. 1006g，三蒸水900mL配制，抽濾除菌；細胞營養(yǎng)液配制含10%新生牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基溶液；0.25%胰蛋白酶消化液配制將胰蛋白酶(Trypsind 250)AMRESC0，USA)溶解于PBS平衡鹽溶液中，0.22 um濾器過濾除菌；Triton X-100 (10% )配制精密移取 Triton X-100 1. OmL 用 PBS 平衡鹽溶液稀釋定容至IOmL即得。EGTA (Imo 1/L)配制精密稱取EGTA 3. 8006mg用4mL PBS平衡鹽溶液溶解，再用4M氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH為8. 4，最后用PBS平衡鹽溶液定容至IOmL即得。Fura 2-AM(lmmol/L)配制精密稱取 0. 5mg Fura 241，用 499口1^ DMSO 溶解即得，-20°C冰箱凍存。細胞培養(yǎng)取生長良好的PC12細胞經(jīng)0.25%胰蛋白酶消化，離心后用細胞營養(yǎng)液重懸制成細胞懸液，計數(shù)后調(diào)節(jié)細胞濃度為1 X IO5個/mL。將此細胞懸液接種于96孔細
5胞培養(yǎng)板中，除細胞板四周各孔外，每孔接種100 μ L0 96孔細胞培養(yǎng)板各孔各加入100 μ LD-Hank' s平衡鹽溶液。將接種細胞后的培養(yǎng)板置于5% C02、37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)Mh。細胞分組、造模與給藥將96孔細胞培養(yǎng)板除掉四周的孔外，其余各孔按列分組。從細胞板的第二列開始，依次設(shè)為空白組；模型組；給藥組，每組設(shè)置6個復孔。按照下述方法對各組細胞進行造模和給藥，并放入5 % CO2、37 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)Mh，備用。給藥組接種的PC12細胞培養(yǎng)24h后，棄去原培養(yǎng)液，分別加入含NaN3 (濃度為50mmol/l)的培養(yǎng)液100 μ 1，再加入分別含有組方I、II、III的水提取物和乙醇提取物的RPMI1640培養(yǎng)液20 μ 1。其中各組方的藥物在RPMI1640培養(yǎng)液中的含量為ang/ml。培養(yǎng)12h，測定OD值。模型組接種的PC12細胞培養(yǎng)24h后，棄去原培養(yǎng)液，加入含NaN3(濃度為50mmol/l)培養(yǎng)液100 μ 1，再加入新鮮培養(yǎng)液20 μ 1。培養(yǎng)12h，測定OD值?？瞻捉M接種的PC12細胞培養(yǎng)24h后，棄去原培養(yǎng)液，加入培養(yǎng)液120 μ 1。培養(yǎng)12h，測定OD值。3.組方藥物對疊氮鈉誘導的PC12細胞損傷修復作用-對受損細胞增殖活性的影響，檢測結(jié)果見表1。表1 各組方水提取物和醇提取物Omg/ml)對NaN3誘導的PC12細胞增殖活性的影響
權(quán)利要求
1.一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其特征在于由以下原料藥組成化橘紅、知母、杜仲葉和人參，所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為(1 10) (1 10) (1 10) (0.4 8)，所述原料藥的來源為中藥材或相當于中藥材生藥量的中藥提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其特征在于所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為O 6) (1 5) (1 5) (0.6 4)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其特征在于所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為4 2 2 1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物，其特征在于所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參為藥材的水提取物、醇提取物或者中藥材直接打粉。
5.一種抗老年性腦癡呆癥的藥物，其特征在于由權(quán)利要求1-4中任意一項所述的中藥組合物和藥學可接受的輔料制成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗老年性腦癡呆癥的藥物，其特征在于為口服劑型。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗老年性腦癡呆癥的藥物，其特征在于為膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液、滴丸劑、軟膠囊劑、蜜丸劑或水丸劑。
8.權(quán)利要求5所述的抗老年性腦癡呆癥藥物的制備方法，其特征在于包括以下步驟制得化橘紅、知母、杜仲葉和人參的醇提取物或水提取物，再向醇提取物或水提取物中加入藥學可接受的輔料，得到所述的藥物。
9.權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備抗老年性腦癡呆癥藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗老年性腦癡呆癥的中藥組合物及其用途。該中藥組合物由以下原料藥組成化橘紅、知母、杜仲葉和人參，所述的化橘紅、知母、杜仲葉和人參的質(zhì)量比為(1～10)∶(1～10)∶(1～10)∶(0.4～8)，所述原料藥的來源為中藥材或相當于中藥材生藥量的中藥提取物。本發(fā)明的中藥組合物對抗老年性腦癡呆癥具有顯著的作用，可用于預防和治療老年性腦癡呆癥；且為純中藥制劑，安全低毒、廉價易得；經(jīng)藥理藥效學實驗證明，與現(xiàn)有技術(shù)中常用的西藥和中藥對照物相比，其治療效果明顯提高。
文檔編號A61K36/8964GK102380024SQ201110336170
公開日2012年3月21日 申請日期2011年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月28日
發(fā)明者楊中林 申請人:楊中林