專利名稱：青蒿素b的制備方法及其新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種青蒿素Bfertemisinin B)的制備方法及其新用途，特別涉及一種青蒿素Bfertemisinin B)在制備預(yù)防和治療自身免疫性疾病、炎癥性疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來，隨著社會工業(yè)化程度的逐步提高，自身免疫性疾病、超敏反應(yīng)性疾病等由免疫反應(yīng)過度而引起的疾病也在不斷增加，尋找高效低毒的免疫抑制劑已成為當(dāng)前一個世界性的研究熱點。有證據(jù)表明，中藥免疫抑制劑具有高效低毒的特殊療效，但由于制劑質(zhì)量難以控制、作用機制難以明確，限制了其在臨床中的廣泛應(yīng)用。采用現(xiàn)代提取分離技術(shù)，從中藥中獲得具有免疫抑制活性的單體化合物，將克服這些不足，并有望創(chuàng)制免疫抑制新藥。青蒿為菊科植物黃花蒿Artemisia annua L的干燥地上部分，主要含有青蒿素、青蒿甲素、青蒿乙素、青蒿丙素、青蒿酸、青蒿內(nèi)酯、黃酮、香豆素和揮發(fā)油等成分，具有清熱解暑、除蒸、截瘧等功效。其中，化學(xué)單體青蒿素(artemisinir^Art)由我國藥學(xué)家首先于20 世紀70年代提取分離得到，分子式C15H22O5,是我國第一個被WHO認可按化藥研究標準開發(fā)的高效抗瘧藥。通過近十年的實驗及臨床研究證實，青蒿中多種有效成分具有免疫抑制活性，對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等自身免疫性疾病都顯示出不同程度的治療或保護作用， 具有抗炎和較為復(fù)雜的免疫抑制作用，但青蒿素B未見相關(guān)報道。青蒿乙素(Artearmuin B ；CAS No 50906-56-4)為從中藥青蒿(Artemisia annua L.)中提取分離得到的倍半萜內(nèi)酯類化合物，被認為是抗瘧活性成分青蒿素的生物合成前體，其化學(xué)結(jié)構(gòu)和絕對構(gòu)型經(jīng)光譜[D. JeremiC,A. JokiC,A. Behbud,and Μ. Stefanovic. Tetrahedron lett.，3039 (1973)·] 禾口 X 光 行射[D. G. Leppard, Μ. Rey, and Α. S. Dreiding, Helw. Chim. Acta. ，57，
權(quán)利要求
1.一種青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉干燥后，粉碎，用有機溶劑滲漉/浸泡提取，60°C以下減壓回收溶劑后，與柱層析硅膠混合，晾干，進行硅膠柱層析分離，用石油醚_乙酸乙酯或石油醚_丙酮混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)有機溶劑反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用4 8體積份有機溶劑浸泡24 76小時，用40 80體積份的有機溶劑滲漉，收集滲漉液，50 60°C以下減壓回收溶劑得浸膏，用有機溶劑溶解后，與2 4倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有25 50倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離，用石油醚-乙酸乙酯=1 0至5 5或石油醚-丙酮=1 0至6 4混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)有機溶劑反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
3.如權(quán)利要求2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用5體積份95%乙醇浸泡24小時，用50體積份95%乙醇滲漉，收集滲漉液，50°C以下減壓回收溶劑得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，與2倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有30倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)丙酮反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
4.如權(quán)利要求2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用4體積份乙酸乙酯浸泡50小時，用45體積份的乙酸乙酯滲漉，收集滲漉液，55°C以下減壓回收溶劑得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，與3倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有25倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)乙酸乙酯反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
5.如權(quán)利要求2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用7體積份石油醚浸泡70小時，用75體積份的石油醚滲漉，收集滲漉液，600C以下減壓回收溶劑得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，與4倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有45倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)乙醇反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
6.如權(quán)利要求2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用8體積份丙酮浸泡48小時，用60體積份丙酮滲漉，收集滲漉液，50°C以下減壓回收溶劑得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，與2倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有30倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離，用石油醚丙酮=1 0至6 4混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)乙醇反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
7.如權(quán)利要求2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法為青蒿葉1重量份干燥后，粉碎，用5體積份乙醚浸泡50小時，用40體積份的乙醚滲漉， 收集滲漉液，55°C以下減壓回收溶劑得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，與3倍浸膏重量的柱層析硅膠混合，晾干，加入裝有25倍浸膏重量柱層析硅膠的層析柱頂部進行硅膠柱層析分離， 用石油醚丙酮=1 0至6 4混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)丙酮反復(fù)重結(jié)晶純化，即得。
8.如權(quán)利要求1或2所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法中有機溶劑是指乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油中的一種或幾種。
9.如權(quán)利要求1-7任一所述的青蒿素B的制備方法，其特征在于該方法所得青蒿素B 的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)為無色方形結(jié)晶，熔點151-153°C，[a]-73.5°C (C = 1.01,Me0H), EI-MS m/e 248 (M+)，分子式為 C15H2tlO3 ；1H-WR(CDC13 300Hz)6. 14(1H, d, J = 3Hz，13_CH =),5. 42 (1H, d J = 3Hz，13-CH = ), 2. 70 (1H, s，5-CH)，1. 34 (3H，s，15_CH3)，0. 99 (3H， d, J = 6Hz, 14-CH3) ； 13C-NMR (CDCl3 75Hz) :43. 9 (C-I)，16. 4 (C_2)，24. 5 (C_3)，58. 2 (C_4)， 58. 7(C-5) ,81. 0(C-6) ,52. 8 (C_7)，21. 8 (C_8)，34. 0(C_9)，30. 7 (C-IO)，138. 7 (C-Il)， 169. 5 (C-12)，117. 2 (C-13)，18. 6 (C-14)，22. 7 (C-15)。
10.青蒿素B在制備免疫抑制的藥物中的應(yīng)用。
11.青蒿素B在制備預(yù)防和治療自身免疫性疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開青蒿素B的制備方法及其新用途。青蒿素B的提取分離方法為青蒿葉干燥，粉碎，用有機溶劑滲漉/浸泡提取，60℃以下減壓回收溶劑后，與柱層析硅膠混合，晾干，進行硅膠柱層析分離，用石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，以薄層層析法檢測洗脫液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶劑至小體積，放置析出粗結(jié)晶，再經(jīng)有機溶劑如丙酮、乙醇等反復(fù)重結(jié)晶純化，即得到青蒿素B。本發(fā)明青蒿素B(artemisinin B)用于制備免疫抑制的藥物，具有顯著的免疫抑制活性，可在制備預(yù)防和治療自身免疫性疾病、炎癥性疾病的藥物和臨床上應(yīng)用。
文檔編號A61P37/06GK102408431SQ20111038838
公開日2012年4月11日 申請日期2011年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月29日
發(fā)明者張東, 朱曉新, 李玉潔, 楊嵐, 楊慶, 翁小剛, 陳穎 申請人:中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所