專利名稱：用于治療盆腔炎的中藥組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及盆腔炎治療領域，特別地，涉及一種用于治療盆腔炎的中藥組合物。此外，本發(fā)明還涉及一種包括上述中藥組合物的制備方法和應用。
背景技術：
慢性盆腔炎是已婚婦女的常見病、多發(fā)病。該病具有病程遷延，病情頑固，治愈度低，復發(fā)率高等特點。西醫(yī)目前尚無效果顯著的療法。目前市場上的中成藥，均未明確針對濕熱所致的慢性盆腔炎功效。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供一種用于治療盆腔炎的中藥組合物及其制備方法和應用，以解決缺乏用于治療濕熱所致的慢性盆腔炎的中藥組合物的技術問題。為實現上述目的，根據本發(fā)明的一個方面，提供了一種用于治療盆腔炎的中藥組合物，由黃柏350 500g,椿皮350 500g,虎杖350 500g,白芷350 500g,香附350 500g,白頭翁550 650g，蒲公英550 650g，雞冠花550 650g，甘草180 250g組成。進一步地，由黃柏450g，椿皮450g，虎杖450g，白芷450g，香附450g，白頭翁600g， 蒲公英600g，雞冠花600g，甘草200g組成。根據本發(fā)明的另一方面，還提供了一種上述組合物的制備方法，包括以下步驟1)取黃柏，加7倍量70%乙醇回流提取75分鐘，之后分離藥渣和第一提取液，再次向藥渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分鐘，過濾得到第二提取液，合并第一提取液和第二提取液，過濾，制得醇提浸膏備用；2)虎杖粉碎成粉狀后與椿皮、白芷、香附、白頭翁、蒲公英、雞冠花、甘草一起加水浸泡30分鐘，第一次加8倍量水煎煮75分鐘，第二次加6倍量水煎煮60分鐘，合并提取液， 濾過、濾液濃縮至相對密度為1. 00 1. 05，離心，離心液濃縮至相對密度1. 05 1. 20 ；3)加入醇提浸膏，攪勻，調節(jié)相對密度1 1. 2，噴霧干燥，干燥粉加糊精，用80% 乙醇制粒，干燥，整粒，分裝即得藥物組合物。進一步地，噴霧干燥步驟中進風口的溫度為280°C 290°C。本發(fā)明具有以下有益效果本發(fā)明提供的中藥組合物能針對治療濕熱蘊結所致的慢性盆腔炎起效，臨床試驗結果總有效率95. 92%。除了上面所描述的目的、特征和優(yōu)點之外，本發(fā)明還有其它的目的、特征和優(yōu)點。 下面將參照實施例，對本發(fā)明作進一步詳細的說明。
具體實施例方式以下結合實施例對本發(fā)明的實施例進行詳細說明，但是本發(fā)明可以由權利要求限定和覆蓋的多種不同方式實施。
本發(fā)明提供的中藥組合物具有清熱利濕、理氣止痛、止帶止血之功用，能治療慢性盆腔炎屬濕熱蘊結證的安全、有效、療效穩(wěn)定、無毒副作用、服用方便的中藥制劑。藥效學顯示該制劑具有抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、止血、增強免疫等作用。無明顯毒副作用，本發(fā)明提供的用于治療盆腔炎的中藥組合物由黃柏350 500g，椿皮350 500g,虎杖；350 500g，白芷；350 500g，香附350 500g，白頭翁550 650g，蒲公英 550 650g，雞冠花550 650g，甘草180 250g組成。本組方中黃柏、椿皮具有清熱燥濕的作用，對濕熱蘊結型慢性盆腔炎具有主要治療作用?；⒄?、白頭翁和蒲公英具有清熱解毒的作用能起到輔助并加強療效的作用。雞冠花、白芷能治療由發(fā)炎引起的出血和發(fā)炎的癥狀，具有止血止帶、消腫止痛的作用。香附則能疏肝理氣，開郁散結，調經止痛，還能引諸藥入肝經，提高藥物的療效，使得藥物療效得到發(fā)揮。整個藥物組合物各組分的選擇嚴謹，恰中濕熱蘊結之病機，融清熱利濕，理氣止痛，止帶止血，起到了祛邪而不傷正之功效。按照上述重量稱取各組分藥物后，制成常用的中藥劑型均能起到治療效果。顯然的，在上述組方的基礎上僅需增加常見輔料，即可將其制成如液體劑型、浸膏、膠囊劑、片劑、分散片、咀嚼片等劑型。由黃柏450g，椿皮450g，虎杖450g，白芷450g，香附450g，白頭翁600g，蒲公英 600g，雞冠花600g，甘草200g組成。此為最優(yōu)實施例。上述藥物按以下方法制得，具體該方法包括以下步驟1)取黃柏，加7倍量70%乙醇回流提取75分鐘，之后分離藥渣和第一提取液，再次向藥渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分鐘，過濾得到第二提取液，合并第一提取液和第二提取液，過濾，制得醇提浸膏備用；2)虎杖粉碎為粉末后與椿皮、白芷、香附、白頭翁、蒲公英、雞冠花、甘草一起加水浸泡30分鐘，第一次加8倍量水煎煮75分鐘，第二次加6倍量水煎煮60分鐘，合并提取液，濾過、濾液濃縮至相對密度為1.00 1.05，離心，離心液濃縮至相對密度1.05 1.20(60°C下測得)；3)加入醇提浸膏，攪勻，調節(jié)相對密度1 1. 2，噴霧干燥，干燥粉加糊精，用80% 乙醇制粒，干燥，整粒，分裝即得。由于黃柏的主要有效成份在水中的溶解度較差，因而采用傳統(tǒng)的水提法很難將其完全提取出來。而這些有效成分在乙醇中有較好的溶解度。故將黃柏單獨用乙醇提取得到醇提的浸膏。其它藥材則用水提取。噴霧干燥時為防止中藥液與高溫氣體的接觸，因而將進入的熱風溫度限定為280 290°C。藥物制備時間縮短，有效成分不易因高溫而破壞。 本浸膏粉具有較強的引濕性，如果用水制粒，所得顆粒較粘稠，無法獲得具有獨立形狀的顆粒，因而采用乙醇制粒。本發(fā)明的另一方面還限定了該組合物的劑量為5. 45g/kg。按此計量使用療效最優(yōu)。實施例以下實施例中所用藥物及其他試劑均為市售。以下實施例中各藥物均按以下方法制備，該方法包括以下步驟1)取黃柏，加70%乙醇回流提取兩次，第1次加7倍量回流提取75分鐘，第2次加5倍量回流提取60分鐘，合并提取液，過濾，制得醇提浸膏備用；2)虎杖粉碎成粉末后與椿皮、白芷、香附、白頭翁、蒲公英、雞冠花、甘草一起加水浸泡30分鐘，第一次加8倍量水煎煮75分鐘，第二次加6倍量水煎煮60分鐘，合并提取液， 濾過、濾液濃縮至相對密度為1. 00 1. 05，離心，離心液濃縮至相對密度1. 05 1. 20 ；3)加入醇提浸膏，攪勻，調節(jié)相對密度1 1.2，噴霧干燥，此時進風口的溫度為 280°C 290°C，干燥粉加糊精，用80%乙醇制粒，干燥，整粒，分裝即得。實施例1由黃柏450g，椿皮450g，虎杖450g，白芷450g，香附450g，白頭翁600g，蒲公英 600g，雞冠花600g，甘草200g組成。得到藥物1。實施例2由黃柏350g，椿皮500g，虎杖500g，白芷500g，香附500g，白頭翁650g，蒲公英 650g，雞冠花650g,甘草250g組成。得到藥物2。實施例3由黃柏500g，椿皮350g，虎杖350g，白芷350g，香附350g，白頭翁550g，蒲公英 550g，雞冠花550g，甘草180g組成。得到藥物3。動物試騎以下各項檢測手段均為本領域常用。各項檢測均對上述藥品1進行檢測。一、抗炎試驗1.材料1. 1藥物藥物1用量為成人24g/日；婦樂沖劑，由四川瀘州制藥限公司生產，批號為9703151. 2動物=Wistar大鼠，體重200_300g，雌性由本校動物中心提供。動物合格證號醫(yī)動字20-009號。2 方法選用健康雌性大鼠40只，隨機分為4組，(1)模型對照組，婦樂沖劑組(5. 49g/kg， 相當于臨床用量的16倍)，(3)藥物1組(5.49g/Kg，相當于臨床用量的16倍，22.9g生藥 /kg)，(4)藥物1小劑量組(2. 74g/Kg，相當于臨床用量的8倍，11. 43g生藥/Kg)，在戊巴妥鈉麻醉下，剪去下腹部毛，75%酒精消毒皮膚，于下腹正中切口 2cm曝露子宮，以右側為對照，沿左側子宮角上Icm處作橫切口，將一塑料管(管徑2mm，長0. 5cm,重10mg，酒精消毒) 放置于宮內，與子宮切口縫合固定，以防脫落。術后2小時按上述分組灌胃給藥，每天1次， 連續(xù)7天，分別給蒸餾水、婦樂沖劑及藥物1，7天后殺死動物，取出兩側子宮組織，天平稱重，每鼠的左側子宮重減去右側子宮重量，即為炎癥腫脹程度，按公式計算各織.腫脹率及給藥組的腫脹抑制率。腫脹率E按下式計算得到。
種. 苤E(%) = X 100%其中Vn和Vt分別代表未致炎和致炎子宮平均重量
其中En和Ec分別代表給藥組和對照組的平均腫脹率。標本作病理切片，記錄子宮炎癥分級積分，結果進行統(tǒng)計學分析(組間均數比較采用q檢驗)。子宮炎癥的病理變化分級炎癥表現為血管擴張充血、水腫、漿細胞，淋巴細胞等炎癥細1浸潤，間質纖維結締組織增生，部分子宮內膜柱狀上皮變性壞死、脫落。根據炎癥累及子宮內膜的深淺和漿細胞浸潤的數量分為輕、中，重3級。輕度炎癥累及子宮淺表部分，占子宮內膜全層不到1/3部分，漿細胞浸潤較少， 每個高倍視野彡1 2個/HP，記為1分。中度炎癥累從子宮內膜全層的超過1/3，不到2/3部分，漿細胞浸潤較多，每個高倍視野< 10個/HP，記為2分。重度炎癥累及子宮內膜全層超過2/3部分，甚至全層，大量漿細胞浸潤子宮內膜間質，每個高倍視野> 10個/HP，記為3分。0級為無炎癥或炎癥消失。動物抗炎試驗結果本品對子宮炎癥、皮下肉芽腫模型動物的子宮腫脹及肉芽腫有抑制作用，并能減少炎癥子宮的漿細胞浸潤。二、抑菌試驗1.材料所用試劑和材料均為市售。2.試驗方法將瓊脂培養(yǎng)基溶化并冷卻至55°C左右水浴中備用。將各種不同劑量的藥物加入瓊脂中混勻，傾注平板。待凝固后于溫箱中30分鐘，使其表面干燥、取各種菌株的增菌液用 0. 5號麥氏管校正菌液濃度后再稀釋10倍，此時菌數1. 5 X 107CFU/ml，然后接種在含藥瓊脂平板上，同時接種在不含藥的瓊脂培養(yǎng)基，以資對照(白色念珠菌接種在Sabourand葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，其他菌株接種在MH瓊脂培養(yǎng)基)35°C培養(yǎng)18-M小時，觀察結果，藥物濃度范圍潔霉素、慶大霉素、制霉菌索0. 06 128 μ g/ml共12個倍比濃度，藥物1、婦樂沖劑 0. 003 0. 8g/ml，9個倍比濃度。結果判斷不含藥的瓊脂培養(yǎng)基上長菌者，此試驗結果方為有效。以最低藥物濃度抑制細菌生長者為該-菌株的最低抑菌濃度(MIC)。2. 1對40株細菌的MIC50和MIC90的測定。從臨床分離出腸鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌各10株，其他革蘭氏陰性菌10株，(包括變形桿菌3株、克雷伯菌3株、洛菲不動桿菌2株、產堿桿2株)。2. 2體內保護試驗2. 2. 1菌液及藥液稀釋取金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌的標準菌及臨床菌四種菌的原菌液用5%高活性干酵母液稀釋至所需濃度，測出試驗菌株的100%最小致死量(100% MLD)。藥液稀釋采用低比值系列稀釋法。從高到低，按1 0.75劑間距設置5個劑量組， 最高藥物劑量，藥物1為6. 86g/kg，婦樂沖劑為6. 86g/kg，均為臨床用量的20倍。2. 2. 2保護試驗方法取小鼠110只，雌雄各半，隨機分成藥物1、婦樂沖劑各5個劑量組、另設蒸餾水對照組，每組10只，以上各組均腹腔注射0. 5ml含IMLD菌量致小鼠感染，藥物1、婦樂沖劑組感染前6h，Ih兩次灌胃給藥，藥液體積為每只小鼠0. 5ml，對照組灌服等體積蒸餾水，觀察1 周，記錄各組小鼠死亡數，按Bliss法計算出各藥對小鼠感染的半數保護劑量(ED5tl)及95%可信限及兩藥ED5tl的顯著性檢驗。動物抑菌實驗結果通過體外抑菌作用試驗表明本品對體外金黃色葡萄球、鏈球菌、大腸桿菌等有明顯的抑制作用，小鼠體內保護試驗顯示，本品對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌感染的小鼠有明顯的保護作用。三、止血試驗1.材料1. 1藥物藥物1，按實施例1的配方制得。婦樂沖劑，由四川滬州制藥有限公司生廣批號為970315 ；枸椽酸鈉，上海化學試劑供應采購站出品，批號為960827。1.2動物昆明種小鼠，體重18_22g，雌雄各半；Wistar大鼠，體重180 220g，雌雄各半；由本校動物中心提供。動物合格證號醫(yī)動字第20-011號、第20-009號。1. 3 儀器ACL-200 自動血液凝集儀，Instrumentation Laboratory Company, U. S. A生產。2.試驗方法2. 1.藥物1對出血時間的影響取正常小鼠50只，隨機分為5組，每組10只，雌雄各半，(1)空白對照組；(2)婦樂沖劑組(2. 74g/Kg，相當于臨床用量的8倍)，(3)藥物1大劑量組(5. 59g/Kg)，中劑量組 (2. 74g/Kg)，小劑量組(1. 37g/kg)，給藥組灌胃給藥，對照組給等體積的蒸餾水，給藥一次， 40分鐘后分別用利剪將小鼠尾尖3mm處橫斷，立即開始記時，每隔20秒鐘用濾紙吸去血滴， 直至濾紙條上無血痕為止。2. 2.藥物1對凝血時間的影響動物、分組、給藥方法同前，于給藥后1小時，用內徑為Imm的玻璃毛細管插入小鼠左眼內眥球后靜脈叢取血，至毛細管內血柱達5cm左右時取出，每隔半分鐘連續(xù)折斷毛細管數小段、直至有血絲出現即為血凝，記錄凝血時間。2. 3藥物1對凝血酶原時間、白陶土部分凝血活酶時間的影響取Wistar大鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，每組10只，對照組、婦樂沖劑組 (2. 74g/kg，相當于臨床用量的8倍)、藥物1大、中、小三個劑量組(5. 45g/kg、2. 74g/kg， 1. 37g/kg)，灌胃給藥后lh，心臟取血3. Oml, 3. 8 %枸椽酸鈉溶液抗凝，離心取血漿，采用 AC1-200自動血液凝集儀進行下列測定①凝血酶原時間(PT).②白陶土部分凝血活酶時間(KPTT)。動物止血實驗結果觀察本品對正常小鼠的出血時間、凝血時間及凝血酶原時間、 白陶土部分凝血活酶時間的影響，結果表明本品能縮短出血、凝血、凝血酶原時間，說明具有止血作用。四、鎮(zhèn)痛試驗1.材料1. 1藥物藥物1，按實施例1的配方制得。婦樂沖劑，由四川滬州制藥有限公司生廣批號為970315 ；枸椽酸鈉，上?；瘜W試劑供應采購站出品，批號為960827。冰醋酸，廣州化學試劑廠生產，批號為9504061. 2動物昆明種小鼠，體重18_22g，由本校動物中心提供。動物合格證號醫(yī)動字第 20-011 號、第 20-009 號。
2.方法選取健康昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，每組10只，(1)對照組⑵ 婦樂沖劑組(2. 74g/kg，相當于臨床用量的8倍)；(3)藥物1的大、中、.小劑量組(5. 49g/ kg、2. 74g/Kg、1. 37g/kg，分別相當于臨床劑量的16倍、8倍、4倍)，每日灌胃給藥一次，對照組給等體積蒸餾水，連續(xù)7天，于最后一次給藥后30分鐘，5組均腹腔注射0. 6%冰醋酸 0. lml. IOg.記錄注射致痛劑后20分鐘內各小鼠的扭體次數(表現為腹部收縮內陷，軀體扭曲、后肢伸展及蠕行等)，動物鎮(zhèn)痛實驗結果能明顯減少小鼠因腹腔注射冰醋酸所致扭體次數，提示本品對化學物質致痛有明顯鎮(zhèn)痛作用。五、免疫試驗1 材料1. 1藥物藥物1，按實施例1的方法制得貞芪扶正沖劑，吉林化白山制藥廠生產，批號951106 ；環(huán)磷酰胺(CY)，上海華聯制藥公司生產，批號960210.1. 2試劑細胞株，ConA為美國Biochemical Corp生產，3H-TdR由中國科學院原子能研究所提供，RPMI-1640為美國Sigma公司制造，CTLL-2細胞株，瑞士 Basel免疫研究所贈送。1. 3動物BALB/c小鼠，體黃20 22g，由本校動物中心提供。動物合格證號為醫(yī)動字第20-012號。2.方法取20 22g的BALB/c小鼠，雌雄各半，隨機分成6組，每組10只，分組空白對照組，環(huán)磷酰胺+蒸餾水(CY)，CY+貞芪扶正沖劑組(3. 4g/Kg)相當于臨床用量的8倍，CY十柏椿顆粒大、中、小劑量三組(5. 49g/kg，2. 74g/kg，1. 37g/kg)，先給各組小鼠按100ml/Kg 腹腔注射壞磷酞肢一次，空自對照組除外，然后每天灌胃給藥一次，CY組和空白對照組相同體積的蒸餾水，連續(xù)7天，第8天處死小鼠，制備脾細胞懸液，檢測細胞免疫功能。2. 1淋巴細胞轉化試驗取小鼠脾細胞懸液，用3H-TdR摻入法，先加入 ConAllOy g/ml，培養(yǎng)72h，終止前他每孔加入H_TdR20 μ 1，多頭細胞收集器收集于玻璃纖維濾紙片上，自然干燥后，置液閃儀測β時線強度(cpm)，結果以刺激指數(Si)表示(Si = 實驗組cpm均值/對照組cpm均值)。2. 21L-2誘生和活性檢側取小鼠脾細胞總懸液加ConA，培養(yǎng)48h，收集上清液， 于_20°C保存待測，然后用對數生長期CTLL細胞將RPPMI-1640培養(yǎng)調到IX 105/ml，在培養(yǎng)板上每孔加100 μ 1，各孔加入不同稀釋度樣本100 μ 1，培養(yǎng)Mh，收獲前Mi加入3H-TdR, 收集于玻璃纖維濾紙上，自然干燥后用液閃儀測cpm值，結果用生長指數(GI)表示(GI = 樣本的cpm均值/對照樣本的cpm均值)。動物免疫實驗結果對環(huán)磷酰胺所致細胞免疫功能低下的小鼠，本品能促進淋巴細胞轉化，增加小鼠脾細胞產生IL-2，提高小鼠細胞免疫的水平。臨床試驗以藥物1制成片劑進行臨床試驗。以下所用對照藥物為婦樂沖劑，成分為忍冬藤500g、大血藤500g、甘草500g、大青葉150g、蒲公英150g、牡丹皮150g、赤芍150g、川楝子150g、延胡索150g、大黃(制)100g。
本品用法用量開水沖服，每天三次，每次Sg。并經中國中醫(yī)研究西苑醫(yī)院、天津中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院、湖北省中醫(yī)院、湖南中醫(yī)藥第一附屬醫(yī)院、湖南中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院五家臨床試驗基地醫(yī)院進行的多中心隨機雙盲II、III期臨床研究結果表明，本品在治療濕熱蘊結型亞急性盆腔炎時與對照藥物相比，療差異有顯著性。本品的總顯效率為 73. 47 %，總有效率 95. 92 %。由上述檢測結果可見，本發(fā)明提供的中藥組合物具有清熱利濕、理氣止痛、止帶止血之功用，藥效學顯示該制劑具有抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、止血、增強免疫等作用。能治療濕熱蘊結證慢性盆腔炎。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領域的技術人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種用于治療盆腔炎的中藥組合物，其特征在于，由黃柏350 500g，椿皮350 500g,虎杖；350 500g，白芷；350 500g，香附；350 500g，白頭翁550 650g，蒲公英 550 650g，雞冠花550 650g，甘草180 250g組成。
2.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，由黃柏450g，椿皮450g，虎杖450g，白芷450g，香附450g，白頭翁600g，蒲公英600g，雞冠花600g，甘草200g組成。
3.—種權利要求1或2所述的組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)取黃柏，加7倍量70%乙醇回流提取75分鐘，之后分離藥渣和第一提取液，再次向所述藥渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分鐘，過濾得到第二提取液，合并第一提取液和第二提取液，過濾，制得醇提浸膏備用；2)虎杖粉碎成粉狀后與椿皮、白芷、香附、白頭翁、蒲公英、雞冠花、甘草一起加水浸泡 30分鐘，第一次加8倍量水煎煮75分鐘，第二次加6倍量水煎煮60分鐘，合并提取液，濾過、 濾液濃縮至60°C時相對密度為1. 00 1. 05，離心，離心液濃縮至相對密度1. 05 1. 20 ；3)加入所述醇提浸膏，攪勻，調節(jié)相對密度1 1.2，噴霧干燥，干燥粉加糊精，用80% 乙醇制粒，干燥，整粒，分裝即得所述藥物組合物。
4.根據權利要求3所述的組合物的制備方法，其特征在于，所述噴霧干燥步驟中進風口的溫度為280°C 290°C。
5.一種權利要求1或2所述的組合物的應用，其特征在于，所述組合物的劑量為 5. 45g/kg0
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療盆腔炎的中藥組合物及其制備方法和應用，其中中藥組合物由黃柏350～500g，椿皮350～500g，虎杖350～500g，白芷350～500g，香附350～500g，白頭翁550～650g，蒲公英550～650g，雞冠花550～650g，甘草180～250g組成。該中藥組合物能針對治療濕熱蘊結所致的慢性盆腔炎起效，臨床試驗結果總有效率95.92％。
文檔編號A61K36/8905GK102416087SQ201110401960
公開日2012年4月18日 申請日期2011年12月6日 優(yōu)先權日2011年12月6日
發(fā)明者陳愛春 申請人:湖南湘雅制藥有限公司