專利名稱：一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法。
背景技術(shù)：
聚肌胞為一種干擾素誘導(dǎo)劑。在體內(nèi)細胞誘導(dǎo)下產(chǎn)生干擾素，有類似干擾素的作用，故有廣譜抗病毒和免疫調(diào)節(jié)功能。用于病毒感染性疾病和腫瘤的輔助治療。但是對于新城疫病毒和聚肌胞的結(jié)合還沒有相關(guān)的報道，因此本發(fā)明就是針對目前的情況，利用聚肌胞的廣譜抗病毒的原理，將聚肌胞設(shè)計為一種可有效提高新城疫病毒抗腫瘤效果的佐劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法。一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，其特征在于選擇健康的雞胚，接種新城疫病毒；收獲病毒NDV尿囊液；將 NDV尿囊液進行超濾濃縮；再經(jīng)過柱層析純化，然后加入聚肌胞，得到一種新的抗癌藥物。 本發(fā)明的優(yōu)點在于，加入聚肌胞佐劑可明顯提高抗腫瘤藥物的抗癌效果。一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法如下1.佐劑聚肌胞的制備取注射用水約900ml，攪拌溶解磷酸氫二鈉1. 55g、磷酸二氫鈉0. ^g、氯化鈉 8. 77g ；將此緩沖液平分成2份，并加熱至50°C。一份溶解聚肌苷酸0. 49g，另一份溶解聚胞苷酸0. 51g ；充分溶解后將聚胞苷酸溶液混入聚肌苷酸溶液中，在緩慢攪拌下維持30分鐘； 冷卻至室溫，定容至IOOOml ；0. 45 μ m濾芯過濾，灌封。2.抗腫瘤藥物的制備(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋放38°C孵化9天左右，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；次日在無菌條件下將雞胚在接種部位打個小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；于 37 °C培養(yǎng)96小時；(3)收獲NDV尿囊液在無菌條件下對培養(yǎng)四天的雞胚進行消毒；用大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取NDV尿囊液；收獲完的NDV尿囊液收集到一個瓶子里，測效價；(4)超濾濃縮在無菌環(huán)境下通過超濾系統(tǒng)對尿囊液超濾濃縮至原來的10倍，其中超濾膜包截留分子量為300KD，膜包0. Im2 ；(5)純化在無菌條件下將尿囊液打入層析柱中，通過凝膠過濾層析對尿囊液進行純化；
(6)加入佐劑在無菌條件境下按1 10的比例加入聚肌胞溶液，混勻。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進一步的說明實施例1一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，具體步驟如下1、雞胚選擇選擇受精雞蛋放38°C孵化9天左右，檢出死胚和寡蛋；2、病毒接種新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；次日在無菌條件下將雞胚在接種部位打個小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；于 37°C培養(yǎng)96小時。3、收獲NDV尿囊液在無菌條件下對培養(yǎng)四天的雞胚進行消毒；用大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取NDV尿囊液；收獲完的NDV尿囊液收集到一個瓶子里，測效價。4、超濾濃縮在無菌環(huán)境下通過超濾系統(tǒng)對NDV尿囊液超濾濃縮至原來的10倍，其中超濾膜包截留分子量為300KD，膜包0. Im2 ；5、純化在無菌條件下將尿囊液打入層析柱中，通過凝膠過濾層析對尿囊液進行純化。6、加入聚肌胞在無菌條件下按1 10的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得的制劑即為一種加入佐劑的新型抗癌藥物。實施例2一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，具體步驟如下1、雞胚選擇選擇受精雞蛋放38°C孵化10天左右，檢出死胚和寡蛋；2、病毒接種新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；次日在無菌條件下將雞胚在接種部位打個小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；于 37°C培養(yǎng)96小時。3、收獲NDV尿囊液在無菌條件下對培養(yǎng)四天的雞胚進行消毒；用大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取NDV尿囊液；收獲完的NDV尿囊液收集到一個瓶子里，測效價。4、超濾濃縮在無菌環(huán)境下通過超濾系統(tǒng)對NDV尿囊液超濾濃縮至原來的20倍，其中超濾膜包截留分子量為300KD，膜包0. Im2 ；5、純化
在無菌條件下將尿囊液打入層析柱中，通過凝膠過濾層析對尿囊液進行純化。6、加入聚肌胞在無菌環(huán)境下按1 20的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得制劑即為一種加入佐劑的新型抗癌藥物。實施例3一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，具體步驟如下1、雞胚選擇選擇受精雞蛋放39°C孵化12天左右，檢出死胚和寡蛋；2、病毒接種新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；次日在無菌條件下將雞胚在接種部位打個小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；于 37°C培養(yǎng)96小時。3、收獲NDV尿囊液在無菌條件下對培養(yǎng)四天的雞胚進行消毒；用大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取NDV尿囊液；收獲完的NDV尿囊液收集到一個瓶子里，測效價。4、超濾濃縮在無菌環(huán)境下通過超濾系統(tǒng)對NDV尿囊液超濾濃縮至原來的40倍，其中超濾膜包截留分子量為300KD，膜包0. lm2。5、純化將濃縮后的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液打入層析柱中，通過凝膠過濾層析對尿囊液進行純化。6、加入聚肌胞在無菌環(huán)境下按1 40的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得制劑即為一種加入佐劑的新型抗腫瘤藥物。實施例41.加入聚肌胞的病毒液和未加入聚肌胞的病毒液的血凝效價的比較，結(jié)果見下表
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，其特征在于選擇健康的雞胚，接種新城疫病毒；收獲病毒NDV尿囊液；將NDV尿囊液進行超濾濃縮；再經(jīng)過柱層析純化，然后加入聚肌胞，得到一種新的抗癌藥物。
2.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于(1)聚肌胞佐劑的制備；(2)選擇健康的雞胚，接種病毒；(3)收獲病毒液；(4)超濾濃縮；(5)純化；(6)加入佐劑。
3.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于所述步驟(1)先進行聚肌胞的制備。
4.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于所述步驟(2)選擇9-10日齡健康SPF雞胚，接種新城疫病毒。
5.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于所述步驟(3)收獲病毒液，培養(yǎng)96小時的NDV尿囊液即為病毒液。
6.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于所述步驟(4)超濾濃縮所用的膜包分子量為300KD。
7.一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于所述步驟(5)純化采用柱層析凝膠過濾方法。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種抗腫瘤藥物及其佐劑的制備方法，其特征是采用健康的雞胚接種新城疫病毒，經(jīng)過培養(yǎng)，收獲NDV尿囊液，通過超濾濃縮、純化之后加入佐劑，成為一種抗腫瘤藥物，其抗腫瘤效果有顯著提高。
文檔編號A61K39/17GK102488896SQ20111042012
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月15日
發(fā)明者侯本晶, 沈麗麗, 王國新, 王智佳, 趙鋼 申請人:天津濟命生生物科技有限公司