專利名稱：作為抗菌劑用于包括細菌生物膜的治療的生物醫(yī)學用途以及其它用途的鉍-硫醇的制作方法
技術領域：
本公開發(fā)明的實施方案涉及用于治療微生物感染的組合物和方法。特別地，本實施方案涉及用于在上皮組織中(包括在傷口例如慢性傷口和急性傷口中)，以及在臨床、個人保健和其它情況下(包括細菌生物膜和其它病狀的治療中)控制細菌感染的改善的治療。相關領域的描 述促進皮膚傷口愈合以及應答于和抗微生物感染和/或促進愈合或維持身體組織的一系列協(xié)同的細胞和分子相互作用的組合通常可受各種外部因素的不利影響，例如機會性感染和醫(yī)院感染(例如，可增加感染風險的臨床方案)、抗生素的局部或全身性施用(其可影響細胞生長、遷移或其它功能并且還可篩選抗生素抗性微生物)、頻繁的傷口敷料變化、曝露傷口以加速愈合、暫時性人工結構支撐體基質(zhì)或支架材料的使用、對于清創(chuàng)和/或反復手術以切除感染或壞死組織的可能需求和/或其因素。因此傷口愈合對于世界上的臨床醫(yī)師仍然是巨大挑戰(zhàn)。當前對于頑固性傷口的治療不實用并且無效，經(jīng)常需要多次手術以閉合傷口。例如，Regrtnex (貝卡普勒明，Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc.,可由 Ethicon, Inc.獲得，重組血小板衍生生長因子)列舉了少數(shù)可用的治療慢性傷口的一種，但是生產(chǎn)昂貴并且臨床實用性有限。慢件和急件傷口以及傷口牛物膜當組織內(nèi)細胞之間或組織之間的連續(xù)性受到例如，物理、機械、生物、病理和/或化學力(例如，燒傷、皮膚感染、刺傷、槍擊或彈片傷、皮膚潰瘍、輻射中毒、惡性腫瘤、壞疽、自身免疫病、免疫缺陷病、呼吸損傷(例如由吸入或感染)、胃腸損傷(例如由有害攝食或感染)、循環(huán)和血液紊亂(包括凝固缺陷))或其它外傷性損傷等的破壞時產(chǎn)生傷口。然而，傷口中有限水平的細菌污染或傷口的“集群”可能不一定妨礙傷口愈合的過程，但以足以壓倒宿主免疫防御的數(shù)量存在的細菌可導致急性傷口或慢性傷口或存在細菌生物膜的傷口，例如細菌生長對宿主產(chǎn)生損害的傷口感染。Bryant和Nix，Acute andChronic Wounds:Current Management Concepts, 2006 Mosby(Elsevier), NY;Baronoski,Wound Care Essentials !Practical Principles (第二版)2007 Lippincott, Williams 和Wilkins, Philadelphia, PA)。例如，急性傷口例如可由損傷、外傷、夕卜科手術或其它原因引起，通常沒有潛在的健康缺陷(health deficit)并且快速愈合,但有時由于存在感染而不能迅速愈合；已描述了在急性傷口中快速形成細菌生物膜(例如，W0/2007/061942)?？纱龠M慢性傷口發(fā)展的另外的因素包括活動性的喪失(例如，其導致施加于傷口部位的持續(xù)的壓力)，感覺或智力缺陷，傷口部位不易接近(例如，在呼吸道或胃腸道)和循環(huán)缺陷?？赏ㄟ^皮膚發(fā)紅、水腫、化膿和/或不良氣味的臨床征象，或者其它相關的臨床接受的標準來檢測在慢性傷口部位的感染。在高等生物中(包括但不限于人和其他哺乳動物)當宿主的免疫系統(tǒng)己被傷口部位(例如，急性傷口)的細菌感染所壓倒，產(chǎn)生細菌入侵和進一步破壞組織的允許條件時，可由此出現(xiàn)不能適當愈合的急性傷口，并且慢性傷口由此可得到發(fā)展。通常，慢性傷口為三個月內(nèi)未愈合，并且不是變小而是隨著細菌滲入發(fā)展而趨向增長的傷口。當隨著傷口發(fā)展附近的神經(jīng)開始受損(神經(jīng)病變)時，對于患者而言，慢性傷口可變得非常疼痛和令人緊張。這些傷口每年影響到四百萬美國人并且治療費花費約90億美元。受累個體大多數(shù)超過60歲。在一些情況下慢性傷口可起因于急性傷口并因此可包括，例如，槍擊或彈片傷口、燒傷、刺傷、靜脈性潰瘍、壓力性潰瘍、糖尿病性潰瘍、輻射中毒、惡性腫瘤、皮膚感染、壞疽、外科手術傷口、糖尿病性足潰瘍、褥瘡性潰瘍、靜脈性下肢潰瘍、感染的和/或含生物膜的未愈合外科手術傷口、壞疽性膿皮病、外傷性傷口、急性動脈功能不全、壞死性筋膜炎、骨髓炎(骨感染)和輻射性損傷，例如放射性骨壞死和軟組織放射性壞死或其它類型的傷口。例如，靜脈性潰瘍主要發(fā)生于下肢，由循環(huán)不良(例如，局部缺血)、靜脈瓣機能障礙或反復物理外傷(例如，反復性損傷)而引起。當施加在傷口部位處或附近的局部壓力大于血壓時可出現(xiàn)壓力性潰瘍，例如由此的循環(huán)不良、麻痹和/或褥瘡可促進慢性傷口或使其惡化。糖尿病性潰瘍可發(fā)生于患有糖尿病的個體中，例如，其中不受控制的高血糖可促進極端時的感覺喪失、導致反復性損傷和/或部分個體忽視對損傷的治療?？赡苁古R床發(fā)病和慢性傷口結果復雜化或其它有其它影響的因素包括受試者的免疫狀態(tài)(如，免疫抑制、病理上(例如HIV-AIDS)、放射治療上或藥理上受損的免疫系統(tǒng)；年齡；應激)；皮膚老化(包括光化學老化)和傷口內(nèi)生物膜的發(fā)生和進展。在呼吸道和/或胃腸道中上皮組織的情況下，難接近性、封閉、難以產(chǎn)生上皮表面清潔流體力或發(fā)展有利于微生物存活的局部微環(huán)境可以導致臨床并發(fā)癥。傷口相關的損傷可 能伴隨器官功能喪失或受損、休克、出血和/或血栓形成、細胞死亡(例如，壞死和/或凋亡)、應激和/或微生物感染。這些事件任一或全部(特別是感染)可以延遲或阻止傷口愈合中所涉及的有效的組織修復過程。因此，重要的是在遭受傷口的個體中盡可能早地從傷口部位去除無活力組織，該過程被稱為清創(chuàng)術，并且還有從傷口部位去除任何異物，亦稱為傷口清潔。嚴重傷口、急性傷口、慢性傷口、燒傷和潰瘍可能受益于細胞傷口敷料。幾種人工皮膚產(chǎn)品可用于非愈合傷口或燒傷，例如:Apligraft (Norvartis)、Demagraft .Bbbrane 、Transcyte (Advance Tissue Science)、 IntegraCt DermalRegeneration Template (來自 Integra Life Sciences Technology)和OrCel 然而，這些產(chǎn)品并不是為解決細菌組織侵潤和傷口擴大的問題而設計的。遺憾的是，全身性抗生素對于治療慢性傷口無效，并且一般不被使用，除非存在急性細菌感染。目前的方法包括施用或應用抗生素，但此類療法可能促進抗生素抗性菌菌株的出現(xiàn)和/或可能對于對抗細菌生物膜無效。因此，當檢測到耐藥菌(例如甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌((Staphylococcus aureus)或MRSA)時,使用抗菌劑可能變得特別重要。有許多廣泛使用的抗菌劑，但是產(chǎn)生的細菌群或亞群可能對這些試劑不應答，或者對任何其它目前可用的治療不應答。另外，許多抗菌劑在可有效抵抗所產(chǎn)生的細菌感染所需的濃度下對宿主細胞可能是毒性的，因此這些抗菌劑是不適合的。這一問題可能在嘗試從天然表面清除感染的情況下特別突出，所述天然表面包括內(nèi)上皮表面，例如呼吸道(例如，氣道、鼻咽喉通道、氣管、肺、支氣管、細支氣管、肺泡等)或胃腸道(例如，口腔、食管、胃、腸、直腸、肛門等)或其它上皮表面。特別有問題的是由細菌生物膜(最近得以認識的細菌組織)構成感染，借此游離的單細胞(“浮游的”)細菌通過細胞間粘附聚集成有組織的多細胞群落(生物膜(biofilm))，所述多細胞群落具有顯著不同的行為模式、基因表達和對包括抗生素在內(nèi)的環(huán)境物質(zhì)的敏感性。生物膜可以采用未在浮游細菌中發(fā)現(xiàn)的生物防御機制，所述機制可以保護生物膜群落免受抗生素和宿主免疫應答。已形成的生物膜可以阻止組織愈合過程。在持續(xù)和潛在的有害感染下常見的微生物污染物包括金黃色葡萄球菌(其包括MRSA(甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌))、腸球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、鏈球菌和鮑氏不動桿菌。這些微生物有些表現(xiàn)出在非營養(yǎng)性臨床表面上存活數(shù)月的能力。已經(jīng)顯示金黃色葡萄球菌在干燥玻璃上存活四周，并且在干血和棉纖維上存活3至6個月(Domenico等，1999 Infect.1mmun.67:664-669)。已經(jīng)顯示大腸桿菌和銅綠假單胞菌在干血和棉纖維上比金黃色葡萄球菌存活更長時間(如前所述)。微生物生物膜與對消毒劑和抗生素明顯增加的抗性有關。當細菌和/或真菌附著于表面時形成生物膜形態(tài)。該附著觸發(fā)基因轉(zhuǎn)錄改變，導致非常有彈性且難以穿透的多糖基質(zhì)的分泌，保護微生物。除了生物膜對抗生素非常顯著的抗性外，它們對哺乳動物免疫系統(tǒng)的抗性強。生物膜一旦形成則非常難以根除，所以預防生物膜形成是非常重要的臨床優(yōu)先原則。最近研究已顯示，開放性傷口可以被生物膜快速污染。這些微生物生物膜被認為可延遲傷口愈合，并且很可能與嚴重傷口感染的產(chǎn)生相關。例如，目前護理軍 事傷口(military wound)的指導原則規(guī)定強力和完全地沖洗和清創(chuàng)術(Blankenship CL, Guidelines for care of open combat casualty wounds,FleetOperations and Support.U.S.Bureau ofMedicine and Surgery)。雖然該早期介入是重要的，但其不足以預防感染的發(fā)生。在清創(chuàng)術之后需要采取其它治療步驟以促進愈合、減少微生物的生物負擔，從而減少形成傷口感染和傷口生物膜的機率。因為軍事外傷性傷口的復雜性，感染的可能性很大，特別是考慮到外來物和其它環(huán)境污染物的引入。軍事和臨床環(huán)境(包括這兩種環(huán)境中的人)兩者充當了潛在致病微生物的重要來源，特別是對于遭受開放性傷口和/或復雜傷口的那些人。急性和慢性傷口(包括手術傷口和軍事傷口)已經(jīng)損害了機體抵抗感染的主要防御和屏障；皮膚。因此，傷口使機體內(nèi)部(濕潤和營養(yǎng)環(huán)境)暴露于機會性感染和病原體感染。這些感染中的許多感染，特別是持續(xù)性傷口感染，可能與生物膜形成有關，如慢性傷口已顯示是這種情況(James等，2008)。醫(yī)院中傷口的感染構成醫(yī)院內(nèi)感染的最常見原因之一，并且軍事和天然災害環(huán)境中產(chǎn)生的傷口對微生物污染特別敏感。軍事傷口因為通常與組織損傷相關而易于感染，常常是廣泛且深入的，可以引入外來體并干擾局部血供應，可以伴隨骨折和發(fā)燒，并且可以導致休克和免疫防御受損。
皮膚構架和傷口愈合完整的功能性皮膚和其它上皮組織(例如，一般在微生物與其外部環(huán)境之間形成屏障的非血管上皮表面，例如皮膚中存在的那些以及呼吸道和胃腸道的襯膜、腺組織等中存在的那些)的維持對于人和其它動物的健康和存活是重要的。皮膚是人和其它高等脊椎動物(例如哺乳動物)中最大的身體器官，通過其屏障功能、機械強度和不透水性來防御環(huán)境侵害。作為重要的環(huán)境界面，皮膚提供保護性的身體外層，使生理學平衡得以維持。皮膚構架是熟知的。簡言之，作為皮膚外層的表皮被角質(zhì)層覆蓋，角質(zhì)層是死亡的表皮皮膚細胞(例如角質(zhì)形成細胞)和細胞外結締組織蛋白的保護層。隨著表皮由從下面表面顆粒細胞、棘細胞和基底細胞層向上推出的新物質(zhì)所替代，表皮經(jīng)受連續(xù)的脫落過程，其中連續(xù)的細胞分裂和蛋白合成產(chǎn)生新的皮膚細胞和皮膚蛋白(例如，角蛋白、膠原)。真皮位于表皮之下，是由結締組織蛋白(例如，膠原、彈性蛋白等)的真皮成纖維細胞加工的部位，所述結締組織蛋白聚集成細胞外基質(zhì)和纖維狀結構，該纖維狀結構賦予皮膚柔性、強度和彈性。真皮中還存在神經(jīng)、血管、平滑肌細胞、毛囊和皮脂腺。作為身體的第一道防線，皮膚是下述臨床侵害(例如可改變皮膚結構和功能的物理、機械、化學和生物(例如異生素、自身免疫)攻擊)的主要目標。皮膚還被認為是微生物免疫防御的重要組成部分 。皮膚中可以發(fā)現(xiàn)具有潛在抗原呈遞活性的遷移和駐留白血細胞(例如，淋巴細胞、巨噬細胞、肥大細胞)和表皮樹突狀(朗格漢斯)細胞，它們促進免疫保護?；讓又械纳睾谒丶毎諠撛谟泻Φ淖贤饩€(UV)輻射。皮膚破壞為受試者帶來不期望的風險，包括與機會性感染、不完全或不適當組織重塑、疤痕形成、活動能力受損、疼痛和/或其它并發(fā)癥相關的那些風險。與皮膚一樣，其它上皮表面(例如，呼吸道、胃腸道和腺襯(glandular lining))在健康時具有確定的結構屬性,使得感染或其它破壞可以帶來嚴重的健康風險。受損或破壞的皮膚可以源自例如傷口，例如割傷、刮傷、擦傷、刺傷、燒傷(包括化學燒傷)、感染、極端溫度、切口(例如，手術切口)、外傷和其它損傷。因此，在這些環(huán)境和類似環(huán)境下，通過傷口愈合的有效皮膚修復顯然是期望的。盡管皮膚在許多類型的損傷之后天然地表現(xiàn)出顯著的自我修復能力，但依然存在其中皮膚愈合不能足夠快地發(fā)生和/或其中不適當?shù)慕M織修復機制導致不完全重塑皮膚的許多情況，結果，不完全重塑皮膚可能缺乏完整性、屏障性、機械強度、彈性、柔性或未受損皮膚的其它期望的性質(zhì)。因此，皮膚傷口愈合例如在慢性傷口環(huán)境中帶來此類相關挑戰(zhàn)。傷口愈合以三個動態(tài)且重疊的階段發(fā)生，開始于纖維蛋白凝塊的形成。凝塊提供了臨時屏蔽和吸引細胞進入傷口的生長因子儲庫。它還用作修復期間細胞侵入的臨時性細胞外基質(zhì)(ECM)。與凝塊形成重疊的是炎癥期，其特征為吞噬細胞和中性粒細胞侵潤到傷口中，清理傷口的碎片和細菌，同時釋放生長因子，放大早期愈合反應?；謴吐懵秴^(qū)域的過程在愈合的增殖期開始，并且由免疫細胞分泌并聚集在凝塊中的趨化因子、細胞因子和蛋白酶驅(qū)動。刺激角蛋白細胞增殖并遷移，形成覆蓋傷口的新上皮層，而傷口血管發(fā)生遞送氧、營養(yǎng)素和炎癥細胞至傷口區(qū)域。重塑期是傷口修復的最后一個階段，并且通過肌纖維母細胞進行，肌纖維母細胞促進結締組織收縮，增加傷口強度，并沉積形成疤痕的 ECM (Martin, P.Wound Healing-Aiming for Perfect Skin Regeneration.Science1997;4:75-80)。
鉍硫醇-(BT)類抗菌劑許多具有抗微生物、特別是抗菌性質(zhì)的天然產(chǎn)物(例如抗生素)和合成化學品是本領域已知的，并且已經(jīng)至少部分地由化學結構和抗微生物作用來表征，所述抗微生物作用例如殺傷微生物的能力(“殺滅”作用，例如殺菌性質(zhì))，阻止或損害微生物生長的能力(“抑制”作用，例如抑菌性質(zhì))，或者干擾微生物功能，例如定植或感染部位、外泌多糖的細菌分泌和/或從浮游轉(zhuǎn)化為生物膜群體或生物膜形成的擴展的能力。例如，U.S.6，582，719討論了抗生素、消毒劑、抗菌劑等(包括鉍-硫醇或BT化合物)，包括影響此類組合物的選擇和使用的因素，包括例如殺菌或抑菌性質(zhì)、有效濃度和對宿主組織的毒性風險。鉍，V族金屬，是具有抗微生物性質(zhì)的元素(類似銀)。鉍自身可能沒有治療作用并且可能表現(xiàn)出某些不適當?shù)男再|(zhì)，因此取而代之，可通常與絡合劑、載體和/或其它媒介物一起遞送來施用，最常見的實例是Pepto Bwmol ,其中鉍與堿式水楊酸鹽組合(鰲合)。之前的研究已經(jīng)確定，某些含硫醇-(-SH，巰基)化合物例如乙二硫醇與鉍的組合提供示例性的鉍硫醇(BT)化合物，與目前可用的其它鉍制劑相比，改善了鉍的抗微生物功效。有許多可用于產(chǎn)生BTs的硫醇化合物(公開于例如Domenico等，2001 Antimicrob.Agent.Chemotherap.45 (5):1417-1421，Domenico 等，1997Antimicrob.Agent.Chemother.41 (8): 1697-1703，和 U.S.RE37，793，U.S.6，248，371，U.S.6，086，921 和U.S.6，380，248;還參見例如U.S.6，582，719)，這些制劑中的幾種能夠抑制生物膜形成。已經(jīng)證明BT化合物抗以下菌的活性:MRSA(甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)、MRSE (甲氧西林抗性表皮葡萄球菌(S.epidermidis))、結核絲桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)、鳥分枝桿菌(Mycobacterium avium)、藥物抗性銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(enterotoxigenic E.coli)、腸出血性大腸桿菌(enterohemorrhagic E.coli)、月市炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、艱難梭狀芽胞桿菌(Clostridium difficile)、幽門螺桿菌(Heliobacter pylori)、嗜肺性軍團病桿菌(Legionella pne umophila)、類腸球菌(Enterococcus faecals)、陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)、普通變形桿菌(Proteus vulgaris)、小腸結腸炎耶爾森菌(Yersinia enterocolitica)、霍亂弧菌(Vibrio cholera)和弗氏志賀菌(Shigella flexneri) (Domenico 等，1997Antimicrob..Agents Chemother.41:1697-1703) o還有抗巨細胞病毒、I型單純性疤疹病毒(HSV-1)和HSV-2、以及酵母和真菌例如白色念珠菌的證據(jù)。已經(jīng)證明BT減少細菌致病性、抑制或殺傷廣譜抗生素抗性微生物(革蘭氏陽性和革蘭氏陰性)、預防生物膜形成、預防敗血性休克、治療敗血癥和增加對之前對之表現(xiàn)出抗性的抗生素的細菌敏感性的作用(參見例如，Domenico 等，2001 Agents Chemother.45:1417-1421; Domenico 等，2000 Infect.Med.17:123-127;Domenico 等，2003Res.Adv.1n Antimicrob.Agents &Chemother.3:79-85;Domenico 等，1997Antimicrob.Agents Chemother.41 (8):1697-1703;Domenico 等，1999Infect.1mmun.67:664-669:Huang 等 1999 J Antimicrob.Chemother.44:601-605;Veloira 等，2003 J Antimicrob.Chemother.52:915-919;Wu 等，2002Am J Respir Cell Mot Biol.26:731-738)。盡管BT化合物已經(jīng)存在超過十年了，但有效選擇用于特定感染疾病適應癥的適當BT化合物依然是難以實現(xiàn)的目標，其中針對特定微生物的特定BT的行為不能被預測，其中針對特定微生物的特定BT和特定抗生素的協(xié)同活性不能被預測，其中體外BT作用可能不總是預測體內(nèi)BT作用，并且其中針對浮游(單細胞)微生物群體的BT作用可能不會預測針對微生物群落(例如組織成生物膜的細菌)的BT作用。此外，溶解度、組織通透性、生物利用度、生物分布等方面的限制可能在一些BT化合物中阻礙安全且有效遞送臨床益處的能力。本公開發(fā)明實施方案解決了這些需要并提供了其它相關優(yōu)點。發(fā)明概述如本文首次公開并且不期望受理論束縛，根據(jù)本文所述的某些實施方案，鉍-硫醇(BT)化合物可以用作用于治療多種臨床感染疾病和病狀以及用于個人健康的抗菌劑，同時還減少此類感染治療所產(chǎn)生的費用，包括節(jié)省通過至少部分由BTs介導的預防或預防來實現(xiàn)的那些費用。另外，如本文所述，在某些實施方案中，涉及用于治療含有細菌生物膜或與生物膜形成相關的細菌(例如，能夠形成或其它促進生物膜的細菌)的組織和/或表面的預期的制劑，所述制劑包含一種或多種BT化合物和一種或多種抗生素化合物，其中根據(jù)非限制性理論，基于本公開內(nèi)容BT化合物和抗生素的適當選定的組合物提供該制劑的迄今未預測的抗菌(包括抗生物膜)作用，和/或用于預防、預防和/或治療性有效治療針對包括含有細菌生物膜的感染在內(nèi)的微生物感染的未預測的增強作用。本發(fā)明還首次提供包含基本上單分散的微粒懸浮液的新鉍-硫醇組合物，及其合成和使用方法。根據(jù)本文所述的本發(fā)明的某些實施方案，由此提供一種鉍-硫醇組合物，其包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑，其中所述BT化合物包含鉍或鉍鹽和含硫醇的化合物。另一實施方案提供了鉍-硫醇組合物，包括多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑，并且通過包括以下步驟的方法形成:(a)在足以獲得基本上無固體沉淀的條件和 時間下混合:(i)包含鉍鹽(含至少50mM濃度的鉍)并且不含親水性、極性或有機增溶劑的酸性水溶液，與(ii)足以獲得包含按體積計至少約5%、10%、15%、20%、25%或30%乙醇的混合物的量的乙醇；(b)在足以形成包含含有所述BT化合物的微粒的沉淀的條件和時間下，向(a)的混合物中添加包含含硫醇的化合物的乙醇溶液以獲得反應溶液，其中所述含硫醇的化合物在所述反應溶液中以相對于鉍約1:3至約3:1的摩爾比存在。在某些實施方案中，所述鉍鹽是Bi (NO3) 3。在某些實施方案中，所述酸性水溶液包含按重量計至少5%、10%、15%、20%、22%或22.5%的鉍。在某些實施方案中，所述酸性水溶液包含按重量計至少0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%或5%的硝酸。在某些實施方案中，所述含硫醇的化合物包括一種或多種選自由以下組成的組的物質(zhì):1，2-乙二硫醇、2，3- 二疏基丙醇、疏氧批唳、二硫赤鮮糖醇、3，4- 二疏基甲苯、2，3- 丁二硫醇、1，3-丙二硫醇、2-羥基丙硫醇、1-巰基-2-丙醇、二硫赤蘚糖醇、α -硫辛酸和二硫蘇糖醇。在另一實施方案中提供了一種用于制備鉍-硫醇組合物的方法，所述鉍-硫醇組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4μπι至約5 μ m的體積平均直徑，所述方法包括以下步驟:(a)在足以獲得基本上不含固體沉淀的溶液的條件和時間下混合:(i)包含鉍鹽(含至少50mM濃度的鉍)并且不含親水性、極性或有機增溶劑的酸性水溶液，與(ii)足以獲得包含按體積計約5%、10%、15%、20%、25%或30%乙醇的混合物的量的乙醇；和(b)在足以形成包含含有所述BT化合物的微粒的沉淀的條件和時間下，向(a)的混合物中添加包含含硫醇的化合物的乙醇溶液以獲得反應溶液，其中所述含硫醇的化合物在所述反應溶液中以相對于鉍約1:3至約3:1的摩爾比存在。在某些實施方案中，所述方法還包括回收所述沉淀以去除雜質(zhì)。在某些實施方案中，所述鉍鹽是Bi (NO3) 3。在某些實施方案中，所述酸性水溶液包含按重量計至少5%、10%、15%、20%、22%或22.5%的鉍。在某些實施方案中，所述酸性水溶液包含按重量計至少0.5%、1%、1.5%、2%、
2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%或5%的硝酸。在某些實施方案中，所述含硫醇的化合物包括一種或多種選自由以下組成的組的物質(zhì):1，2-乙二硫醇、2，3- 二巰基丙醇、巰氧吡啶、二硫赤蘚糖醇、3，4_ 二疏基甲苯、2，3_ 丁二硫醇、1，3_丙二硫醇、2_輕基丙硫醇、1-疏基-2-丙醇、二硫赤蘚糖醇、α-硫辛酸、二硫蘇糖醇、甲硫醇(CH3SH [m-硫醇])、乙硫醇(C2H5SH [e_硫醇])、1-丙硫醇(C3H7SH [n-P 硫醇])、2-丙硫醇(CH3CH (SH) CH3 [2C3 硫醇])、丁硫醇(C4H9SH ([η- 丁基硫醇])、叔丁基硫醇(C(CH3)3SH[t-丁基硫醇])、戊硫醇(C5H11SH[戊基硫醇])、輔酶A、硫辛酰胺、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇、2-巰基吲哚、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、(11-巰基十一烷基)六(乙二醇)、(11-巰基十一烷基)四(乙二醇)、(11-巰基十一烷基)四(乙二醇)官能化的金納米粒子、1，I'，4'，I"-三聯(lián)苯基-4-硫醇、1，11-十一燒二硫醇、1，16-十六燒二硫醇、1，2-乙二硫醇(工業(yè)級)、1，3_丙二硫醇、
I,4-苯二甲硫醇、1，4- 丁二硫醇、1，4- 丁二硫醇二乙酸酯、1，5-戍二硫醇、1，6-己二硫醇、
I,8-羊二硫醇、1，9-壬二硫醇、金剛燒硫醇、1_ 丁硫醇、1_癸硫醇、1_十二燒硫醇、1_庚硫醇、1-庚硫醇(純)、1-十六烷硫醇、1-己硫醇、1-巰基-(三乙二醇)、1-巰基-(三乙二醇)甲醚官能化的金納米粒子、1-巰基-2-丙醇、1-壬硫醇、1-十八烷硫醇、1-辛硫醇、1-辛硫醇、1-十五烷硫醇、1-戊硫醇、1-丙硫醇、1-十四烷硫醇、1-十四烷硫醇(純)、1-1^一烷硫醇、11- (1H-吡咯-1-基)i^一烷-1-硫醇、11-氨基-1-1^一烷硫醇鹽酸鹽、11-溴-1-1^一燒硫醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基十一燒酸、11_疏基十一燒酸、11-巰基十一烷基三氟乙酸鹽、11-巰基十一烷基磷酸、12-巰基十二烷酸、12-巰基十二烷酸、15-巰基十五烷酸、16-巰基十六烷酸、16-巰基十六烷酸、1H，1H，2H，2H-全氟癸硫醇、2，2’-(亞乙_■氧基)_■乙硫醇、2，3- 丁_■硫醇、2- 丁硫醇、2_乙基己硫醇、2_甲基-1-丙硫醇、2_甲基-2-丙硫醇、2_苯乙硫醇、3，3, 4, 4, 5, 5, 6, 6, 6-九氣-1-己硫醇(純)、3_ ( 二甲氧基甲基甲娃燒基)_1_丙硫醇、3-氯-1-丙硫醇、3-疏基-1-丙醇、3-疏基-2_ 丁醇、3-疏基_N_壬基丙酸胺、3-疏基丙酸、3-疏基丙基官能化的娃I父、3-甲基-1- 丁硫醇、4，4’ -雙(巰基甲基)聯(lián)苯、4，4’_ 二巰基均二苯代乙烯、4-(6-巰基己氧基)芐醇、4-氰基-1-丁硫醇、4-巰基-1- 丁醇、6- ( 二茂鐵基)己硫醇、6-巰基-1-己醇、6-巰基己酸、8-巰基-1-辛醇、8-巰基辛酸、9-巰基-1-壬醇、聯(lián)苯基-4，4' - 二硫醇、3-巰基丙酸丁酯、1- 丁硫醇銅(I)、環(huán)己硫醇、環(huán)戊硫醇、癸硫醇官能化的銀納米粒子、十二烷硫醇官能化的金納米粒子、十_■燒硫醇官能化的銀納米粒子、/K (乙_■醇)單_11-(乙酸基硫基)十一燒基釀、疏基玻拍酸、3-疏基丙酸甲酷、nanoTether BPA-HH>NanoThinks 18>NanoThinks 8>NanoThinks ACIDlUNanoThinks ACID16,NanoThinks ALCOlUNanoThinks TH108、辛硫醇官能化的金納米粒子、PEG 二硫醇平均Mn8 ，000、PEG 二硫醇平均摩爾分子量1，500、PEG 二硫醇平均摩爾分子量3，400、S-(ll-溴十一烷基)硫代乙酸酯、S-(4-氰基丁基)硫代乙酸酯、苯硫酚、三乙二醇單-11-巰基十一烷基醚、三羥甲基丙烷三(3-巰基丙酸酯)、[11-(甲基羰基硫基)十一烷基]四(乙二醇)、間碳硼烷-9-硫醇、對三聯(lián)苯基_4，4”- 二硫醇、叔十二烷基硫醇和叔壬基硫醇。在另一實施方案中提供了一種保護天然表面，包括生物組織表面例如上皮組織表面抵抗細菌病原體、真菌病原體和病毒病原體中的一種或多種的方法，包括使所述上皮組織表面與有效量的BT組合物在足以滿足以下中的一種或多種的條件和時間下接觸:(i)預防所述表面被所述細菌、真菌或病毒病原體感染，( )抑制所述細菌、真菌或病毒病原體的基本上所有浮游細胞的細胞活力或細胞生長，(iii)抑制由所述細菌、真菌或病毒病原體的生物膜形成，和(iv)抑制所述細菌、真菌或病毒病原體的基本上所有形式生物膜的細胞的生物膜活力或生物膜生長，其中所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4μπι至約5μπι的體積平均直徑。在某些實施方案中，所述細菌病原體下述中的至少一種:(i) 一種或多種革蘭氏陰性菌；(ii) 一種或多種革蘭氏陽性菌；(iii) 一種或多種抗生素敏感菌；(iv) —種或多種抗生素抗性菌；(V)選自金黃色葡萄球菌(S.aureus)、MRSA(甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)、表皮葡萄球菌、MRSE (甲氧西林抗性表皮葡萄球菌)、結核分枝桿菌、鳥分枝桿菌、銅綠假單胞菌、藥物抗性銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌、腸出血性大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、艱難梭狀芽胞桿菌、幽門螺桿菌、嗜肺性軍團病桿菌、糞腸球菌、甲氧西林敏感糞腸球菌、陰溝腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、普通變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌、霍亂弧菌、弗氏志賀菌、萬古霉素抗性腸球菌(Enterococcus) (VRE)、洋蔥伯克霍爾德菌群(Burkholderia cepacia complex)、土拉弗朗西斯氏菌(Francisella tularensis)、炭疽桿菌(Bacillus anthracis)、鼠疫耶爾森氏桿菌(Yersinia pestis)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、萬古霉素抗性腸球菌、肺炎鏈球菌、青霉素抗性肺炎鏈球菌、大腸桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、多噬伯克霍爾德菌(Bukholderia multivorans)、恥垢分支桿菌(Mycobacterium smegmatis)和鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii)的細菌病原體。在某些實施方案中,所述細菌病原體表現(xiàn)出抗生素抗性。在某些實施方案中，所述細菌病原體表現(xiàn)出對選自以下的抗生素的抗性:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林(naficilin)、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素和妥布霉素。在某些實施方案中,所述天然表面包括口 /頰腔表面。在另外的實施方案中,天然表面包括生物學表面，例如 骨、關節(jié)、肌肉、韌帶或腱。在某些實施方案中，所述表面包括上皮組織表面，所述上皮組織包括選自以下的組織:表皮、真皮、呼吸道、胃腸道和腺襯。在某些實施方案中，接觸步驟進行一次或多次。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括噴霧、沖洗、浸潰和涂抹所述天然表面中的一者。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括吸入、攝取和口腔沖洗中的一者。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括通過選自局部、腹膜內(nèi)、口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、透皮、舌下、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)頰、鼻內(nèi)、經(jīng)吸入、眼內(nèi)、心房內(nèi)、心室內(nèi)、皮下、脂肪內(nèi)、關節(jié)內(nèi)和鞘內(nèi)的途徑施用。在某些實施方案中，所述BT組合物包含選自由以下組成的組的BT化合物中的一種或多種:BisBAL、BisEDT,Bis- 二巰基丙醇、Bis-DTT、Bis-2-巰基乙醇、Bis-DTE, Bis-Pyr、Bis-Ery、Bis-Tol、Bis-BDT、Bis-PDT、Bis-Pyr/Bal、Bis-Pyr/BDT、Bis-Pyr/EDT>Bis-Pyr/PDT>Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/Ery、鉍-1-巰基-2-丙醇和Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。在某些實施方案中，所述細菌病原體表現(xiàn)出抗生素抗性。在某些其它實施方案中，上述方法還包括與所述表面和所述BT組合物接觸的步驟同時或依次且以任何順序，使所述天然表面與協(xié)同抗生素和/或與增強性抗生素接觸。在某些實施方案中，所述協(xié)同和/或增強性抗生素包括選自以下的抗生素:氨基糖苷類抗生素、碳青霉烯類抗生素、頭孢菌素類抗生素、氟喹諾酮類抗生素、糖肽類抗生素、林肯酰胺類抗生素、青霉素酶抗性青霉素類抗生素和氨基青霉素類抗生素。在某些實施方案中，所述協(xié)同和/或增強性抗生素為選自以下的氨基糖苷類抗生素:阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素(rhodostreptomycin)、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。在本文所述的本發(fā)明的另一實施方案中，提供了一種用于在存在抗生素抗性菌病原體的天然表面上克服抗生素抗性(例如，對于抗至少一種對抵抗相同細菌菌種的細菌具有抗菌作用的已知抗生素的至少一種抗菌作用的細菌病原體，提供對抗生素敏感的這種病原體)的方法，其包括在足以滿足以下一種或多種的條件和時間下，使所述表面同時或依次且以任何順序與有效量的(I)至少一種鉍-硫醇(BT)組合物和(2)至少一種通過和/或能夠與至少一種BT組合物協(xié)同作用而增強的至少一種抗生素接觸:(i)預防表面被所述細菌病原體感染，(ii)抑制所述細菌病原體的基本上所有浮游細胞的細胞活力或細胞生長，(iii)抑制由所述細 菌病原體的生物膜形成，和(iv)抑制所述細菌病原體的基本上所有形式生物膜的細胞的生物膜活力或生物膜生長，其中所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑；并由此在上皮組織表面上克服抗生素抗性。在某些實施方案中，所述細菌病原體下述中的至少一種:(i) 一種或多種革蘭氏陰性菌；(ii) 一種或多種革蘭氏陽性菌；
(iii)一種或多種抗生素敏感菌；(iv) —種或多種抗生素抗性菌；(V)選自金黃色葡萄球菌(S.aureus)、MRSA(甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)、表皮葡萄球菌、MRSE (甲氧西林抗性表皮葡萄球菌)、結核分枝桿菌、鳥分枝桿菌、銅綠假單胞菌、藥物抗性銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌、腸出血性大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、艱難梭狀芽胞桿菌、幽門螺桿菌、嗜肺性軍團病桿菌、糞腸球菌、甲氧西林敏感糞腸球菌、陰溝腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、普通變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌、霍亂弧菌、弗氏志賀菌、萬古霉素抗性腸球菌(Enterococcus) (VRE)、洋蔥伯克霍爾德菌群(Burkholderia cepacia complex)、土拉弗朗西斯氏菌(Francisella tularensis)、炭疽桿菌(Bacillus anthracis)、鼠疫耶爾森氏桿菌(Yersinia pestis)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、萬古霉素抗性腸球菌、肺炎鏈球菌、青霉素抗性肺炎鏈球菌、大腸桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、多噬伯克霍爾德菌(Bukholderia multivorans)、恥垢分支桿菌(Mycobacterium smegmatis)和鮑氏不動桿菌((Acinetobacter baumannii)的細菌病原體。在某些實施方案中，所述細菌病原體表現(xiàn)出對選自以下的抗生素的抗性:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素、妥布霉素、克林霉素和加
替沙星。在某些實施方案中,所述天然表面包括口 /頰腔表面。在另外的實施方案中,天然表面包括生物學表面，例如骨、關節(jié)、肌肉、韌帶或腱。在某些實施方案中，所述表面包括選自由表皮、真皮、呼吸道、胃腸道和腺襯組成的組的組織。在某些實施方案中，接觸步驟進行一次或多次。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括噴霧、沖洗、浸潰和涂抹所述天然表面中的一者。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括吸入、攝取和口腔沖洗中的一者。在某些實施方案中，至少一個接觸步驟包括通過選自局部、腹膜內(nèi)、口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、透皮、舌下、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)頰、鼻內(nèi)、經(jīng)吸入、眼內(nèi)、心房內(nèi)、心室內(nèi)、皮下、脂肪內(nèi)、關節(jié)內(nèi)和鞘內(nèi)的途徑施用。在某些實施方案中，所述BT組合物包含選自以下BT化合物中的一種或多種:BisBAL、BisEDT、Bis-二巰基丙醇、Bis-DTT、Bis-2-巰基乙醇、Bis-DTE, Bis-Pyr、Bis-Ery、Bis-Tol, Bis-BDT,Bis-PDT、Bis-Pyr/Bal>Bis-Pyr/BDT>Bis-Pyr/EDT>Bis-Pyr/PDT>Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/EryJ1-1-巰基-2-丙醇和Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。在某些實施方案中，所述協(xié)同和/或增強性抗生素包括選自以下的抗生素:克林霉素、加替沙星、氨基糖苷類抗生素、碳青霉烯類抗生素、頭孢菌素類抗生素、氟喹諾酮類抗生素、糖肽類抗生素、林肯酰胺類抗生素、青霉素酶抗性青霉素類抗生素和氨基青霉素類抗生素。在某些實施方案中，所述協(xié)同和/或增強性抗生素為選自以下的氨基糖苷類抗生素:阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。轉(zhuǎn)向另一實施方案提供一種抗菌劑組合物，其包括(a)至少一種BT化合物；(b)至少一種通過和/或能夠與所述BT化合物協(xié)同作用的抗生素化合物；和(c)藥學上可接受的賦形劑或載體，包括局部使用的載體。在某些實施方案中，所述BT化合物選自:Bi sBAL、BisEDT、Bi S-二巰基丙醇、Bi s-DTT、Bis-2-巰基乙醇、Bis-DTE、Bi s-Pyr、Bis-Ery、Bis-Tol、Bis-BDT、Bis-PDT, Bis-Pyr/Bal, Bis-Pyr/BDT, Bis-Pyr/EDT, Bis-Pyr/PDT、Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/EryJi1-1-巰基 _2_ 丙醇和 Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。在某些實施方案中，所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑。在某些實施方案中，所述BT化合物選自BisEDT和BisBAL。在某些實施方案中，所述抗生素化合物包括選自以下的抗生素:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素、妥布霉素、克林霉素、加替沙星和氨基糖苷類抗生素。在某些實施方案中，所述氨基糖苷類抗生素選自:阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。在某些實施方案中，所述氨基糖苷類抗生素是阿米卡星。在某些其它實施方案中提供了一種用于治療支持或含有細菌生物膜的天然表面的方法，包括(a)將所述表面上或中的細菌感染鑒定為包括以下之一:(i)革蘭氏陽性菌，( )革蘭氏陰性菌，和(iii)包括⑴和(ii)兩者；和(b)向所述表面施用包含一種或多種鉍硫醇(BT)組合物的制劑，其中(i)如果所述細菌感染包括革蘭氏陽性菌，則所述制劑包含治療有效量的至少一種BT化合物和至少一種是利福霉素的抗生素，(ii)如果所述細菌感染包括革蘭氏陰性菌，則所述制劑包含治療有效量的至少一種BT化合物和阿米卡星，
(iii)如果所述細菌感染包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩者，則所述制劑包含治療有效量的一種或多種BT化合物、利福霉素和阿米卡星，并從而治療所述表面。在某些實施方案中，生物膜包含一種或多種抗生素抗性菌。在某些實施方案中，治療所述表面包括以下中的至少一種:(i)根除所述細菌生物膜，(ii)減少所述細菌生物膜，和(iii)減弱所述細菌生物膜的生長。在某些實施方案中，所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑。 本文所述的本發(fā)明的實施方案的這些方面和其它方面將參考以下具體描述和附圖而明顯。本說明書中提到的和/或申請數(shù)據(jù)表中列出的所有美國專利、美國專利申請公布、美國專利申請、外國專利、外國專利申請和非專利出版物，包括U.S.RE37, 793、U.S.6，248，371、U.S.6，086，921和U.S.6，380，248在此通過引用的方式整體并入本文，如同每一個單獨并入本文一樣。必要時，本發(fā)明的方面和實施方案可以被修改以采用各種專利、專利申請和專利公布的概念，以提供其它實施方案。附圖的幾個圖的簡述

圖1顯示了在10%胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)上37°C培養(yǎng)24小時，隨后經(jīng)所示治療18小時，銅綠假單胞菌菌落生物膜的存活數(shù)目(log CFU;菌落形成單位)。所示抗生素治療是Τ0Β，妥布霉素10XMIC;AMK，阿米卡星100XMIC;IPM，亞胺培南(imipenem) 10 X MIC; CEF,頭孢吡月虧 10XMIC;CIP,環(huán)丙沙星 100 X MIC; Cpd 2B,化合物2B(Bis-BAL，1:1.5)。(MIC;最低抑制濃度，例如，預防細菌生長的最低濃度)。圖2顯示了在10%胰蛋白酶大豆瓊脂上培養(yǎng)24小時，隨后經(jīng)所示治療，金黃色葡萄球菌菌落生物膜的存活數(shù)目(log CFU)。所示抗生素治療劑是利福平，RIF 100XMIC;達托霉素，DAP 320XMIC;米諾環(huán)素，MIN 100XMIC;氨芐西林，AMC 10XMIC;萬古霉素，VAN 10XMIC;Cpd 2B，化合物 2B(Bis-BAL,1:1.5)，Cpd 8-2，化合物 8-2 (Bis-Pyr/BDT (I: 1/0.5)。圖3顯示了暴露于生物膜的角質(zhì)形成細胞隨時間的刮傷閉合。(*)顯著不同于對照(Ρ〈0.001)。圖4Α和4Β顯示了逆轉(zhuǎn)對幾種抗生素的抗生素抗性的亞抑制性BisEDT。顯示了MRSA (甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)菌苔上有或沒有BisEDT (0.05 μ g/ml)的抗生素的作用。平板A只顯示標準抗生素滲透盤，平板B顯示與BisEDT(BE)組合的盤。[GM=慶大霉素，CZ=頭孢霉素，F(xiàn)EP=頭孢吡B, IPM=亞胺培南，SAM=氨節(jié)西林/舒巴坦，LVX=左氧氟沙
星。 圖5顯示了 BisEDT和抗生素對生物膜形成的作用。將表皮葡萄球菌在37°C下在TSB+2%葡萄糖的聚苯乙烯板中生長48h。加替沙星(GF)、克林霉素(CM)、米諾環(huán)素(MC)、慶大霉素(GM)、萬古霉素(VM)、頭孢唑林(CZ)、萘夫西林(NC)和利福平(RP)。結果表示為在0.25 μ MBisEDT時BPC (連續(xù)2倍稀釋步驟)的平均變化(η=3)。圖6顯示了 BisEDT和抗生素對表皮葡萄球菌在37°C的TSB+2%葡萄糖中生長48h的作用。結果表示為MIC(稀釋步驟)隨著BisEDT增加的平均變化(n=3)。參見圖5中對于抗生素定義的圖例。圖7為顯示在用含有或不含頭孢唑林抗生素治療的三種BT制劑、Bis-EDT、MB_11和MB-8-2治療后，來自活體大鼠模型中的開放骨折的骨和硬件(hardware)樣品上檢出的平均金黃色葡萄球菌水平的柱狀圖。平均數(shù)的標準誤差顯示為誤差線。早期安樂死的動物排除在分析之外，然而，由于嚴重污染排除來自組2中的一個動物的樣品。發(fā)明詳述本文公開的具體實施方案基于以下令人驚訝的發(fā)現(xiàn):本文提供的某些鉍-硫醇(BT)化合物(在某些實施方案中包括具有約0.4μπι至約5μπι體積平均直徑的BT微粒)而非某些其它BT化合物(即使作為微粒提供)表現(xiàn)出針對特定細菌的強的抗菌(antiseptic)、抗菌(antibacterial)和/或抗生物膜活性,所述細菌包括與許多臨床上嚴重感染(包括可含有細菌生物膜的感染)相關的細菌。出人意料的是，不是所有BT化合物一致地以可預測方式有效對抗此類細菌，而是取決于靶細菌菌種表現(xiàn)出不同的功效。具體而言，如本文所描述，發(fā)現(xiàn)某些BT化合物(優(yōu)選包括具有約0.4 μ m至約5 μ m體積平均直徑的BT微粒)對革蘭氏陰性菌表現(xiàn)出較高功效，而發(fā)現(xiàn)某些其它BT化合物(優(yōu)選包括具有約0.4 μ m至約5 μ m體積平均直徑的BT微粒)對革蘭氏陽性菌表現(xiàn)出較高功效，根據(jù)非限制性理論，方式可以是首次提供用于細菌感染(包括細菌生物膜感染)的處理的臨床相關策略。此外，如下文所更詳細描述，本文所述的本發(fā)明的某些方面涉及由新型鉍-硫醇(BT)組合物提供的令人驚訝的優(yōu)點，如本文所述，所述鉍-硫醇(BT)組合物可以被制成包括多個就粒度而言基本上單分散(例如具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑)的BT微粒的制劑。在某些這些和相關實施方案中，微粒BT并非提供為脂質(zhì)囊泡或脂質(zhì)體例如多層磷酸膽堿-膽留醇脂質(zhì)體或其它多層或單層脂質(zhì)體囊泡的組分。亦如本文某些實施方案所公開，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，之前發(fā)現(xiàn)對此類細菌感染沒有治療作用的某些抗生素的抗菌和抗生物膜功效可以通過用這些抗生素的一種或多種與選擇的BT化合物一起、同時或依次治療感染(例如通過直接應用于感染部位例如天然表面上或天然表面中)而被顯著增強(例如，以統(tǒng)計學上顯著的方式增加)。以本公開之前不能預測的方式，某些BT化合物可以與某些抗生素組合提供針對某些細菌菌種或細菌菌株的抗菌和/或抗生物膜活性的協(xié)同或增強性組合。如下文更詳細描述的此類組合的未預測性質(zhì)由以下觀察所證明:雖然某些BT/抗生素 組合物協(xié)同作用或顯示出對抗某些細菌的增強，但是某些其它BT/抗生素組合物未能表現(xiàn)出協(xié)同或增強抗菌和/或抗生物膜活性。根據(jù)這些和相關實施方案，抗生素和BT化合物可以同時或依次且以任何順序施用，并且值得注意的是，本文公開的用于治療特定感染(例如，革蘭氏陰性或革蘭氏陽性菌形成的生物膜)的一種或多種抗生素和一種或多種BT化合物的具體組合物不表現(xiàn)出可預測(例如，僅加合的)活性，而是以預料之外地協(xié)同或增強(超加合的)方式作用，作為選定抗生素、選定BT化合物和特別鑒定的靶細菌的函數(shù)。例如，作為示例說明而非限制，在多種實際或潛在微生物感染的天然表面的環(huán)境中，并且進一步在改良的基本單分散微粒BT制劑環(huán)境中，本文公開的特定抗生素化合物和特定BT化合物的任何一個或兩者在單獨使用時可能針對特定細菌菌株或菌種發(fā)揮有限的抗菌作用，但是所述抗生素化合物和所述BT化合物兩者的組合針對相同的細菌菌株或菌種發(fā)揮強抗菌作用，該作用在強度上大于(具有統(tǒng)計學顯著性)單獨使用時每種化合物作用的簡單加合，因此根據(jù)非限制性理論認為反映了 BT對抗生素功效和/或抗生素對BT功效的抗生素-BT協(xié)同性(例如，F(xiàn)ICI ( 0.5)或增強作用(例如，0.5<FICI <1.0)。因此，不是任何BT化合物都可以與任何抗生素協(xié)同或增強任何抗生素，并且不是任何抗生素可以與任何BT化合物協(xié)同，或增強任何BT化合物，使得抗生素-BT協(xié)同性和BT-抗生素增強一般是不可預測的。相反，根據(jù)本文公開的某些實施方案，協(xié)同或增強的抗生素和BT化合物的具體組合驚人地賦予針對特定細菌的強抗菌作用，所述抗菌作用包括在特定環(huán)境，例如本文所述的天然表面，并且在某些情況下還包括針對由特定細菌形成的生物膜的抗菌作用。也就是說，本文所述了某些BT協(xié)同抗生素，其包括能夠與包括本文提供的至少一種BT化合物的至少一種BT組合物協(xié)同作用(FICK0.5)的抗生素，其中這種協(xié)同性顯示為可檢測的作用，其強度大于(即，以相對于適當對照條件的統(tǒng)計學顯著的方式)存在抗生素而不存在BT化合物和/或存在BT化合物而不存在抗生素時可檢測的作用。類似地，某些BT-抗生素組合物顯示增強(0.5<FICI (1.0)，其中該增強顯示為可檢測作用，其強度大于(即，以相對于適當對照條件統(tǒng)計學顯著的方式)存在抗生素而不存在BT化合物和/或存在BT化合物而不存在抗生素時可檢測的作用。在某些實施方案中，此類可檢測的作用的實例可包括(i)預防細菌病原體的感染，(ii)抑制細菌病原體的基本上所有浮游細胞的細胞活力或細胞生長，(iii)抑制細菌病原體的生物膜形成，和(iv)抑制細菌病原體的基本上所有生物膜形式細胞的生物膜活力或生物膜生長，但本發(fā)明不是意圖被如此限制，使得在其它預期的實施方案中，抗生素-BT協(xié)同性可以顯示為一種或多種可檢測的作用，所述可檢測的作用可包括改變(例如統(tǒng)計學顯著的增加或減少)一種或多種其它臨床上顯著的參數(shù)，例如細菌病原體對一種或多種抗生素或其它藥物或化學劑的抗性或敏感性程度，細菌病原體對一種或多種化學、物理或機械條件(例如，pH、離子強度、溫度、壓力)的抗性或敏感性程度，和/或細菌病原體對一種或多種生物劑(例如，病毒、另一種細菌、生物活性多核苷酸、免疫細胞或免疫細胞產(chǎn)物例如抗體、細胞因子、趨化因子、包括降解酶在內(nèi)的酶、膜破壞蛋白、自由基例如活性氧類等)的抗性或敏感性程度。 本領域技術人員應理解這些標準和許多其它標準，通過所述標準特定物質(zhì)對細菌群體的結構、功能和/或活性的作用可以被測定(例如，Coico等(編輯)，CurrentProtocols in Microbiology,2008, John Wiley & Sons, Hoboken, NJ ；Schwalbe 等，Antimicrobial Susceptibility Testing Protocols, 2007, CRC Press, Boca Raton, FL),目的是確定抗生素-BT協(xié)同性或增強性，該協(xié)同性或增強性如本文提供在協(xié)同的或增強的抗生素-BT組合的作用超過組合的一個組分不存在時觀察到的作用的簡單加合時存在。例如，在某些實施方案中，協(xié)同性可以通過使用各種濃度的候選劑(例如，單獨和組合的BT和抗生素)測定抗菌作用(例如本文所述的那些)來測定，以計算分級抑制濃度指數(shù)(FICI)和分級殺菌濃度指數(shù)(FBCI)，根據(jù)Eliopoulos等(Eliopoulos和 Moellering, (1996)Antimicrobial combinations.1n Antibiotics in LaboratoryMedicine (Lorian, V.編輯)，第 330-96 頁,Williams 和 Wilkins,Baltimore,MD,USA)。協(xié)同性可以定義為FICI或FBCI指數(shù)彡0.5, >4時為拮抗作用(例如，Odds，F(xiàn)C (2003) Synergy,antagonism,and what the chequerboard puts between them.Journal of AntimicrobialChemotherapy 52:1)。協(xié)同性還可以常規(guī)定義為抗生素濃度> 4倍的減少，或者可選地，使用例如 Hollander 等(1998 Antimicrob.Agents Chemother.42:744)描述的分級抑制濃度(FIC) 0在某些實施方案中，協(xié)同性可定義為組合兩種藥物(例如，抗生素和BT組合物)產(chǎn)生的作用，其中組合的作用大于(例如，以統(tǒng)計學顯著的方式)如果第二藥物的濃度被第一藥物替換時的作用。因此，如本文所述及在某些優(yōu)選實施方案中，BT和抗生素的組合應被理解為當觀察到小于或等于0.5的FICI值時的協(xié)同化(Odds, 2003)。亦如本文所述，在某些其它優(yōu)選實施方案中并根據(jù)非限制性理論，公開了某些BT-抗生素組合物可顯示0.5和1.0之間的FICI值，其表示該協(xié)同性的高潛能，并且可使用顯示單獨或共同增強的合作的抗微生物功效的至少一種BT和至少一種抗生素的非最佳濃度來觀察FICI值。該作用在本文還可稱“增強的”抗菌活性或“增強的” BT活性。當存在下述兩者時，可根據(jù)某些實施方案來檢測增強的抗生素和/或BT活性:。(i)至少一種BT，其濃度低于(以統(tǒng)計學顯著方式)BT對給定靶微生物(例如，給定細菌菌種或菌株)的特征性最低抑制濃度(MIC)，(ii)至少一種抗生素，其濃度低于(以統(tǒng)計學顯著方式)特征性IC5tl(抑制50%微生物群體生長的濃度；例如，Soothill等，1992 JAntimicrob Chemother 29 (2): 137)和/或低于抗生素對給定祀微生物的生物膜預防濃度(BPC)，導致BT-抗生素組合物相對于如果在相同濃度使用任一抗微生物劑(例如，BT或抗生素)而缺少其它抗微生物劑(例如，抗生素或BT)將觀察到的抗微生物作用的增強的(以統(tǒng)計學顯著方式)抗微生物功效。在優(yōu)選實施方案中，當測定到FICI值小于或等于1.0，以及大于0.5時，存在“增強的”抗生素和/或BT活性。技術人員基于本公開應理解，在某些實施方案中，可根據(jù)本領域已知的方法來測定協(xié)同或增強的抗生素和/或BT活性，例如使用Loewe相加模型(例如，F(xiàn)IC指數(shù)，Greco模型)，或Bliss獨立模型(例如，非參數(shù)和半?yún)?shù)模型)或本文所述和本領域已知的其它方法(例如，Meletiadis等，2005 Medical Mycology 43:133-152)。用于測定協(xié)同或增強的抗生素和/或BT活性的說明性方法由此描述于,例如Meletiadis等,2005 Medical Mycology43:133-152以及本文所引用的參考文獻(還參見，Meletiadis等，2002Rev Med Microbiol13:101-117 ;White等，1996Antimicrob Agents Chemother 40:1914-1918 ;Mouton等，1999Antimicrob Agents Chemother 43:2473-2478)。某些其它實施方案預期如本文所述的一種或多種抗生素和一種或多種BT化合物的特定組合物，其在特定感染(例如，由革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌形成的生物膜)的體內(nèi)治療中可顯示協(xié)同化或增強的作用，即使其中BT化合物和抗生素未顯示可預測的(例如，僅加合的)體內(nèi)活性，而相反以未預測的協(xié)同或增強(例如，超加合；或賦予當兩種或更多種該物質(zhì)組合存在時的作用大于(例如，以統(tǒng)計學顯著方式)如果第二試劑的濃度被第一試劑所替換時獲得的作用)方式，作為選定抗生素、選定BT化合物和一種或多種特別鑒定的包含感染的靶細菌菌種的函數(shù)。因此應理解，根據(jù)這些和相關的實施方案，在某些體內(nèi)情況下FICI或FBCI值(其被體外測定)可能不易獲得，而與BT-抗生素協(xié)同性或增強作用相反，可能以由感染的可量化量度給予的方式來測定。例如，在一個實施方案中，例如在如實施例11所述的體內(nèi)開放性骨折的大鼠(Rattus norvegicus)股骨臨界缺損模型中，與抗生素治療或單獨的BT化合物相比,BT-抗生素組合后的治療觀察到統(tǒng)計學顯著的細菌計數(shù)減少，是協(xié)同性或增強作用的指示?？墒褂帽绢I域技術人員熟知的方法測定統(tǒng)計學顯著性。在某些其它實施方案中，在該體內(nèi)模型或其它體內(nèi)模型中觀察到在用于BT-抗生素組合損傷治療后中所觀察到的細菌計數(shù)與考慮抗生素治療或單獨的BT化合物為協(xié)同性或增強作用的指數(shù)相比減少至少5%、10%、20%、30%、40% 或 50%。體內(nèi)感染的其它示例性征候可根據(jù)已開發(fā)用于定量感染嚴重度的確立的方法學，例如，各種本領域技術人員已知的傷口得分系統(tǒng)來測定(參見，例如，歐洲傷口管理協(xié)會(EWMA)評論的得分 系統(tǒng)，Position Document:1dentifying criteria forwound infection.London:MEP Ltd, 2005) 可用于評價本文所述的BT-抗生素組合物的協(xié)同性或增強活性的說明性傷口得分系統(tǒng)包括ASEPSIS (Wilson AP, J Hosp Infect1995;29(2):81-86;Wilson 等，Lancet 1986; 1:311-13)，南安普敦傷口評價等級(Bailey
IS,Karran SE, Toyn K 等。BMJ 1992;304:469-71)。還參見，Horan TC, Gaynes P, MartoneWJ 等，1992 Infect Control Hosp Epidemiol 1992;13:606-08。另外，本領域臨床醫(yī)師已知的傷口愈合的公認臨床征候(例如傷口大小、深度、肉芽組織狀況、感染等)還可在BT化合物和/或抗生素存在或不存在時測量。因此，基于本公開內(nèi)容，技術人員應容易理解用于確定是否BT組合物-抗生素的組合改變體內(nèi)傷口愈合的各種方法(例如，相對于適當?shù)膶φ找越y(tǒng)計學顯著方式的增強或降低)。考慮到這些和相關實施方案，本文提供用有效量(例如，在某些實施方案中治療有效量)的如本文提供的組合物或制劑來治療微生物感染的天然表面(例如提供或包含細菌生物膜的表面)的各種方法，所述組合物或制劑包含一種或多種BT化合物，并任選地包含一種或多種抗生素化合物，例如一種或多種協(xié)同化抗生素，或一種或多種增強性抗生素。應理解，基于本公開內(nèi)容，某些抗生素現(xiàn)在預期用于治療給定類型的感染，其中該抗生素之前已被本領域內(nèi)的技術人員認為對相同類型的感染無效。某些實施方案由此嚴重度包含一種或多種用作抗菌劑的BT化合物的組合物?？咕鷦┦菤⑸锘蝾A防微生物生長的物質(zhì)，通?？蓱糜诨罱M織，這將此類物質(zhì)與通常應用于無生命物體的消毒劑區(qū)別開(Goodman and Gilman’ s" The PharmacologicalBasis of Therapeutics",第七版，GiIman等編輯，1985，Macmillan Publishing C0.,(下文，Goodman and Gilman")第959-960頁)?？咕鷦┑某Ｒ妼嵗且掖己偷怍?。殺菌劑包括殺傷微生物(例如微生物病原體)的抗菌劑。本文所述的某些實施方案預期包含一種或多種BT化合物和一種或多種抗生素化合物(例如，如本文所提供的協(xié)同性抗生素和/或增強性抗生素)的組合物?？股厥潜绢I域內(nèi)已知的并且通常包括由通過殺傷另一種屬的微生物的一種種屬的微生物所生產(chǎn)的化合物制備的藥物，或具有相同或類似化學結構和作用機理的合成產(chǎn)物，例如，在微生物內(nèi)或微生物上破壞微生物的藥物 ，包括當局部應用時的此藥物。本文公開的實施方案中的是其中抗生素可屬于下述類型之一的那些:氨基糖苷類、碳青霉烯類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類、糖肽類抗生素、林可酰胺類(例如，克林霉素)、青霉素酶抗性青霉素和氨基青霉素。因此抗生素可包括，但不限于，青霉素、哌拉西林、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢吡肟、亞胺培南、氨曲南、鏈霉素、妥布霉素、四環(huán)素、米諾環(huán)素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、紅霉素、利奈唑胺、磷霉素、卷曲霉素、異煙肼、安沙霉素(ansamycin)、碳頭孢烯、單胺菌素、硝基呋喃、青霉素、喹諾酮、磺酰胺、氯法齊明、氨苯砜、卷曲霉素、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、乙硫異煙胺、異煙肼、吡嗪酰胺、利福平(Rifampicin)、利福平(Rifampin)、利福布汀、利福噴丁、鏈霉素、胂凡納明、氯霉素、磷霉素、夫西地酸、利奈唑胺、甲硝唑、莫匹羅星、平板霉素、奎奴普丁、達福普汀、利福昔明、甲砜霉素、替硝唑、氨基糖苷、內(nèi)酰胺、青霉素、頭孢霉素、碳青霉烯、氟喹諾酮、酮內(nèi)酯、林肯(酰)胺、大環(huán)內(nèi)酯、噁唑烷酮、鏈陽菌素(stretogramin)、磺胺、四環(huán)素、甘氨酰環(huán)素、甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素、妥布霉素、阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素、阿泊拉霉素、克林霉素、加替沙星、氨基青霉素及本領域內(nèi)已知的其他抗生素。這些及其它臨床可用的抗生素一覽表是本領域技術人員可獲得的和已知的(例如，WashingtonUniversity School of Medicine,The Washington Manual of Medical Therapeutics(第32 版)，2007 Lippincott, Williams和 Wilkins, Philadelphia, PA:Hauser, AL,AntibioticBasics for Clinicians, 2007Lippincott, Williams 和 Wilkins, Philadelphia, PA)。本文公開的某些實施方案中與一種或多種BT化合物一起使用的示例性的一類抗生素是氨基糖苷類抗生素，其被綜述于Edson RS, Terrell CL.Theaminoglycosides.MayoClin Proc.1999年5月；74 (5): 519-28。該類抗生素通過結合并失活細菌核糖體亞基減少細菌蛋白合成而抑制細菌生長。除了此類抑菌性質(zhì)，氨基糖苷類還通過破壞革蘭氏陰性菌中的細胞壁而表現(xiàn)出殺菌作用。氨基糖苷類抗生素包括慶大霉素、阿米卡星、鏈霉素和其它，并且一般被認為用于治療革蘭氏陰性菌、分支桿菌和其它微生物病原體，盡管已經(jīng)報道了抗性菌株的病例。氨基糖苷類不是通過消化道吸收的，因此一般被認為不適于口服制劑。例如阿米卡星，盡管常常有效對抗慶大霉素抗性細菌菌株，但通常在靜脈內(nèi)或肌內(nèi)施用，這可以導致患者疼痛。此夕卜，與氨基糖苷類抗生素(例如阿米卡星)相關的毒性可以導致腎損傷和/或不可逆的聽力喪失。盡管有這些性質(zhì)，本文公開的某些實施方案預期口服施用例如用于治療沿口腔、胃腸道/消化道的一個或多個位置的上皮組織表面的協(xié)同BT/抗生素組合物(例如，其中抗生素不必限于氨基糖苷)。某些其它實施方案還可以預期本文所述的組合物和方法作為消毒劑的用途，消毒劑是指殺傷無生命物體外表面上微生物或阻止其生長的制劑。亦如本文其它地方所描述，BT化合物可以是包括鉍或鉍鹽和含硫醇(例如-SH或巰基)化合物的組合物，其包括在以下中描述的那些(包括其制備方法)=Domenico等，1997 Antimicrob.Agent.Chemother.41 (8):1697-1703, Domenico 等，2001 Antimicob.Agent.Chemother.45 (5): 1417-1421，和 U.S.RE37, 793、U.S.6，248，371、U.S.6，086，921 和U.S.6，380，248 ;還參見例如U.S.6，582，719。然而某些實施方案不是如此限制的，并且可以預期其它包含鉍或鉍鹽和含硫醇的化合物的BT化合物。含硫醇的化合物可以含有1、2、3、4、5、6個或更多個硫醇(例如-SH)基團。在優(yōu)選實施方案中，BT化合物包含通過離子鍵合和/或作為配位絡合物與含硫醇的化合物締合的鉍，而在一些其它實施方案中，鉍可以通過例如可以存在于有機金屬化合物中的共價鍵與含硫醇的化合物締合。然而，某些預期的實施方案明確排除是有機金屬化合物的BT化合物，例如其中發(fā)現(xiàn)鉍與有機部分共價鍵合的化合物。示例性的BT化合物顯示于表1:M I 示例件BT化合物！
權利要求
1.一種鉍-硫醇組合物，其包含: 多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4μπι至約5 μ m的體積平均直徑，其中所述BT化合物包含鉍或鉍鹽和含硫醇的化合物。
2.一種鉍-硫醇組合物，其包含: 多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑，并且通過包括以下步驟的過程產(chǎn)生: (a)在足以獲得基本上不含固體沉淀的溶液的條件和時間下混合:(i)包含鉍濃度至少50mM的鉍鹽并且不含親水性 、極性或有機增溶劑的酸性水溶液，與(ii)足以獲得包含按體積計約25%乙醇的混合物的量的乙醇；和 (b)在足以形成包含含有所述BT化合物的微粒的沉淀的條件和時間下，向(a)的混合物中添加包含含硫醇的化合物的乙醇溶液以獲得反應溶液，其中所述含硫醇的化合物在所述反應溶液中以相對于鉍約1:3至約3:1的摩爾比存在?！?br> 3.根據(jù)權利要求2所述的鉍-硫醇組合物，其中所述鉍鹽是Bi(NO3) 3。
4.根據(jù)權利要求2所述的鉍-硫醇組合物，其中所述酸性水溶液包含按重量計至少5%、10%、15%、20%、22% 或 22.5% 的鉍。
5.根據(jù)權利要求2所述的鉍-硫醇組合物，其中所述酸性水溶液包含按重量計至少0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5% 或 5% 的硝酸。
6.權利要求2所述的鉍-硫醇組合物，其中所述含硫醇的化合物包括一種或多種選自由以下組成的組的物質(zhì):1，2_乙二硫醇、2，3-二巰基丙醇、巰氧吡啶、二硫赤蘚糖醇、·3,4- 二疏基甲苯、2，3- 丁二硫醇、1，3-丙二硫醇、2_輕基丙硫醇、1_疏基-2-丙醇、二硫赤蘚糖醇、α-硫辛酸、二硫蘇糖醇、甲硫醇(CH3SH [m-硫醇])、乙硫醇(C2H5SH [e_硫醇])、1-丙硫醇(C3H7SH[n-P 硫醇])、2-丙硫醇(CH3CH (SH) CH3 [2C3 硫醇])、丁硫醇(C4H9SH ([η- 丁基硫醇])、叔丁基硫醇(C (CH3) 3SH[t- 丁基硫醇])、戊硫醇(C5H11SH [戊基硫醇])、輔酶A、硫辛酰胺、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇、2-巰基吲哚、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、(11-巰基十一烷基)六(乙二醇)、(11-巰基十一烷基)四(乙二醇)、(11-巰基十一烷基)四(乙二醇)官能化的金納米粒子、1，I'，4'，1"-三聯(lián)苯基-4-硫醇、1，11-十一燒二硫醇、1，16-十六燒二硫醇、工業(yè)級1，2-乙二硫醇、1，3-丙二硫醇、1，4-苯二甲硫醇、1，4- 丁二硫醇、1，4- 丁二硫醇二乙酸酯、1，5-戍二硫醇、1，6-己二硫醇、1，8-羊二硫醇、1，9-壬二硫醇、金剛燒硫醇、1- 丁硫醇、1_癸硫醇、1_十二燒硫醇、1_庚硫醇、純1-庚硫醇、1-十六烷硫醇、1-己硫醇、1-巰基-(三乙二醇)、1-巰基-(三乙二醇)甲醚官能化的金納米粒子、1-巰基-2-丙醇、1-壬硫醇、1-十八烷硫醇、1-辛硫醇、1-辛硫醇、1-十五烷硫醇、1-戊硫醇、1-丙硫醇、1-十四烷硫醇、純1-十四烷硫醇、1-1^一烷硫醇、·11-(1H-吡咯-1-基)i^一烷-1-硫醇、11-氨基-1-1^一烷硫醇鹽酸鹽、11-溴-1-1^一燒硫醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基十一燒酸、11_疏基十一燒酸、11-巰基十一烷基三氟乙酸鹽、11-巰基十一烷基磷酸、12-巰基十二烷酸、12-巰基十二烷酸、15-巰基十五烷酸、16-巰基十六烷酸、16-巰基十六烷酸、1H，1H，2H，2H-全氟癸硫醇、·2，2’-(亞乙_■氧基)_■乙硫醇、2，3- 丁_■硫醇、2- 丁硫醇、2-乙基己硫醇、2_甲基-1-丙硫醇、2_甲基-2-丙硫醇、2_苯乙硫醇、純3, 3, 4, 4, 5, 5, 6, 6, 6-九氣-1-己硫醇、3- ( 二甲氧基甲基甲娃燒基)_1_丙硫醇、3_氣-1-丙硫醇、3_疏基_1-丙醇、3_疏基-2- 丁醇、3_疏基-N-壬基丙酸胺、3-疏基丙酸、3-疏基丙基官能化的娃I父、3-甲基-1- 丁硫醇、4，4’ -雙(巰基甲基)聯(lián)苯、4，4’_ 二巰基均二苯代乙烯、4-(6-巰基己氧基)芐醇、4-氰基-1-丁硫醇、4-巰基-1-丁醇、6-( 二茂鐵基)己硫醇、6-巰基-1-己醇、6-巰基己酸、8-巰基-1-辛醇、8-巰基辛酸、9-巰基-1-壬醇、聯(lián)苯基-4，4' - 二硫醇、3-巰基丙酸丁酯、1- 丁硫醇銅(1)、環(huán)己硫醇、環(huán)戊硫醇、癸硫醇官能化的銀納米粒子、十二烷硫醇官能化的金納米粒子、十_■燒硫醇官能化的銀納米粒子、7K (乙_■醇)單_11-(乙酸基硫基)十一燒基釀、疏基玻拍酸、3-疏基丙酸甲酷、nanoTether BPA-HH、NanoThinks 18、NanoThinksTM8、NanoThinks ACID ll、NanoThinks ACID 16、NanoThinks ALCO lUNanoThinks TH108、辛硫醇官能化的金納米粒子、PEG 二硫醇平均Mn8，000、PEG 二硫醇平均摩爾分子量1，500、PEG 二硫醇平均摩爾分子量3，400、S-(ll-溴十一烷基)硫代乙酸酯、S-(4-氰基丁基)硫代乙酸酯、苯硫酚、三乙二醇單-11-巰基十一烷基醚、三羥甲基丙烷三(3-巰基丙酸酯)、[11-(甲基羰基硫基)十一烷基]四(乙二醇)、間碳硼烷-9-硫醇、對三聯(lián)苯基_4，4”- 二硫醇、叔十二燒基硫醇和叔壬基硫醇。
7.一種用于制備鉍-硫醇組合物的方法，所述鉍-硫醇組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑，所述方法包括以下步驟: (a)在足以獲得基本上不含固體沉淀的溶液的條件和時間下混合:(i)包含鉍濃度至少50mM的鉍鹽并且不含親水性、極性或有機增溶劑的酸性水溶液，與(ii)足以獲得包含按體積計約25%乙醇的混合物的量的乙醇；和 (b)在足以形成包含含有所述BT化合物的微粒的沉淀的條件和時間下，向(a)的混合物中添加包含含硫醇的化合物的乙醇溶液以獲得反應溶液，其中所述含硫醇的化合物在所述反應溶液中以相對于鉍約1:3至約3:1的摩爾比存在。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，還包括回收所述沉淀以去除雜質(zhì)。
9.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中所述鉍鹽是Bi(NO3) 3。
10.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中所述酸性水溶液包含按重量計至少5%、10%、15%、20%、22% 或 22.5% 的鉍。
11.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中所述酸性水溶液包含按重量計至少0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5% 或 5% 的硝酸。
12.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中所述含硫醇的化合物包括一種或多種選自由以下組成的組的物質(zhì):1，2-乙二硫醇、2，3- 二巰基丙醇、巰氧吡啶、二硫赤蘚糖醇、3，4- 二巰基甲苯、2，3- 丁二硫醇、1，3-丙二硫醇、2-羥基丙硫醇、1-巰基-2-丙醇、二硫赤蘚糖醇、二硫蘇糖醇、ct -硫辛酸、甲硫醇(CH3SH[m-硫醇])、乙硫醇(C2H5SH[e-硫醇])、1-丙硫醇(C3H7SH [n-P 硫醇])、2-丙硫醇(CH3CH (SH) CH3 [2C3 硫醇])、丁硫醇(C4H9SH ([η- 丁基硫醇])、叔丁基硫醇(C(CH3)3SH[t- 丁基硫醇])、戊硫醇(C5HnSH[戊基硫醇])、輔酶A、硫辛酰胺、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇、2-巰基吲哚、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、(I1-巰基十一烷基)六(乙二醇)、(I1-巰基十一烷基)四(乙二醇巰基十一烷基)四(乙二醇)官能化的金納米粒子、1，I'，4'，I"-三聯(lián)苯基-4-硫醇、1,1l-十一燒二硫醇、1，16-十六燒二硫醇、工業(yè)級1，2-乙二硫醇、1，3-丙二硫醇、1，4-苯二甲硫醇、1，4- 丁二硫醇、1，4- 丁二硫醇二乙酸酯、1，5-戊二硫醇、1，6-己二硫醇、1，8-辛二硫醇、1，9-壬二硫醇、金剛烷硫醇、1-丁硫醇、1-癸硫醇、1-十二烷硫醇、1-庚硫醇、純1-庚硫醇、1-十六烷硫醇、1-己硫醇、1-巰基-(三乙二醇)、1-巰基-(三乙二醇)甲醚官能化的金納米粒子、1-巰基-2-丙醇、1-壬硫醇、1-十八烷硫醇、1-辛硫醇、1-辛硫醇、1-十五烷硫醇、1-戊硫醇、1-丙硫醇、1-十四烷硫醇、純1-十四烷硫醇、1-1^一烷硫醇、11-(1H-吡咯-1-基)i^一烷-1-硫醇、11-氨基-1-1^一烷硫醇鹽酸鹽、11-溴-1-1^一燒硫醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基_1_十一燒醇、11_疏基十一燒酸、11_疏基十一燒酸、11-巰基十一烷基三氟乙酸鹽、11-巰基十一烷基磷酸、12-巰基十二烷酸、12-巰基十二烷酸、15-巰基十五烷酸、16-巰基十六烷酸、16-巰基十六烷酸、1H，1H，2H，2H-全氟癸硫醇、.2，2’-(亞乙二氧基)二乙硫醇、2，3- 丁二硫醇、2- 丁硫醇、2_乙基己硫醇、2_甲基-1-丙硫醇、2_甲基-2-丙硫醇、2_苯乙硫醇、純3, 3, 4, 4, 5, 5, 6, 6, 6-九氣-1-己硫醇、3- ( 二甲氧基甲基甲娃燒基)_1_丙硫醇、3_氣-1-丙硫醇、3_疏基_1-丙醇、3_疏基-2- 丁醇、3_疏基-N-壬基丙酸胺、3-疏基丙酸、3-疏基丙基官能化的娃I父、3-甲基-1- 丁硫醇、4，4’ -雙(巰基甲基)聯(lián)苯、4，4’_ 二巰基均二苯代乙烯、4-(6-巰基己氧基)芐醇、4-氰基-1-丁硫醇、4-巰基-1-丁醇、6-( 二茂鐵基)己硫醇、6-巰基-1-己醇、6-巰基己酸、8-巰基-1-辛醇、8-巰基辛酸、9-巰基-1-壬醇、聯(lián)苯基-4，4' - 二硫醇、3-巰基丙酸丁酯、1- 丁硫醇銅(1)、環(huán)己硫醇、環(huán)戊硫醇、癸硫醇官能化的銀納米粒子、十二烷硫醇官能化的金納米粒子、十二燒硫醇官能化的銀納米粒子、7K (乙二醇)單_11-(乙酸基硫基)十一燒基釀、疏基玻拍酸、3-疏基丙酸甲酷、nanoTether BPA-HH、NanoThinks 18、NanoThinksTM8、NanoThinks ACID ll、NanoThinks ACID 16、NanoThinks ALCO lUNanoThinks TH108、辛硫醇官能化的金納米粒子、PEG 二硫醇平均Mn8，000、PEG 二硫醇平均摩爾分子量1，500、PEG 二硫醇平均摩爾分子量3，400、S-(ll-溴十一烷基)硫代乙酸酯、S-(4-氰基丁基)硫代乙酸酯、苯硫酚、三乙二醇單-11-巰基十一烷基醚、三羥甲基丙烷三(3-巰基丙酸酯)、[11-(甲基羰基硫基)十一烷基]四(乙二醇)、間碳硼烷-9-硫醇、對三聯(lián)苯基_4，4”- 二硫醇、叔十二燒基硫醇和叔壬基硫醇。
13.一種保護天然表面抵抗細菌病原體、真菌病原體和病毒病原體中的一種或多種的方法，其包括: 使所述表面與有效量的BT組合物在足以滿足以下一種或多種的條件和時間下接觸: (i)預防所述表面被所述細菌、真菌或病毒病原體感染， (ii)抑制所述細菌、真菌或病毒病原體的基本上所有浮游細胞的細胞活力或細胞生長， (iii)抑制由所述細菌、真菌或病毒病原體的生物膜形成，和 (iv)抑制所述細菌、真菌或病毒病原體的基本上所有生物膜形式細胞的生物膜活力或生物膜生長， 其中所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑。
14.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述細菌病原體包括以下中的至少一種: (i)一種或多種革蘭氏陰性菌； (ii)一種或多種革蘭氏陽性菌； (iii)一種或多種抗生素敏感菌；(iv)—種或多種抗生素抗性菌； (V)選自由以下組成的組的細菌病原體:金黃色葡萄球菌(S.aureus), MRSA(甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)、表皮葡萄球菌、MRSE(甲氧西林抗性表皮葡萄球菌)、結核分枝桿菌、鳥分枝桿菌、銅綠假單胞菌、藥物抗性銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌、腸出血性大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、艱難梭狀芽胞桿菌、幽門螺桿菌、嗜肺性軍團病桿菌、糞腸球菌、甲氧西林敏感糞腸球菌、陰溝腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、普通變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌、霍亂弧菌、弗氏志賀菌、萬古霉素抗性腸球菌(VRE)、洋蔥伯克霍爾德菌群、土拉弗朗西斯氏菌、炭疽桿菌、鼠疫耶爾森氏桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、青霉素抗性肺炎鏈球菌、大腸桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、多噬伯克霍爾德菌、恥垢分支桿菌和鮑氏不動桿菌。
15.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述細菌病原體表現(xiàn)出抗生素抗性。
16.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述細菌病原體表現(xiàn)出對選自由以下組成的組的抗生素的抗性:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素和妥布霉素。
17.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述表面包括選自由表皮、真皮、呼吸道、胃腸道和腺襯組成的組的上皮組織表面。
18.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述接觸步驟進行一次或多次。
19.根據(jù)權利要求18所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括噴霧、沖洗、浸潰和涂抹所述表面中的一者。
20.根據(jù)權利要求18所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括吸入、攝取和口腔沖洗中的一者。
21.根據(jù)權利要 求18所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括通過選自以下的途徑施用于受試者:局部、腹膜內(nèi)、口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、透皮、舌下、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)頰、鼻內(nèi)、經(jīng)吸入、眼內(nèi)、心房內(nèi)、心室內(nèi)、皮下、脂肪內(nèi)、關節(jié)內(nèi)和鞘內(nèi)。
22.權利要求13所述的方法，其中所述BT組合物包含選自由以下組成的組的一種或多種 BT 化合物:BisBAL、BisEDT, Bis- 二巰基丙醇、Bis-DTT, Bis-2-巰基乙醇、Bis-DTE,Bis-Pyr>Bis-Ery、Bis-Tol、Bis-BDT、Bis-PDT、Bis-Pyr/Bal、Bis-Pyr/BDT、Bis-Pyr/EDT、Bis-Pyr/PDT、Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/Ery、鉍-1-巰基-2-丙醇和 Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。
23.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述細菌病原體表現(xiàn)出抗生素抗性。
24.權利要求13-23任一項所述的方法，所述方法還包括與所述表面和所述BT組合物接觸的步驟同時或依次且以任何順序，使所述表面與(i)協(xié)同抗生素和(ii)合作性抗微生物功效增強抗生素中的至少一者接觸。
25.根據(jù)權利要求24所述的方法，其中所述協(xié)同抗生素或合作性抗微生物功效增強抗生素包括選自由以下組成的組的抗生素:氨基糖苷類抗生素、碳青霉烯類抗生素、頭孢菌素類抗生素、氟喹諾酮類抗生素、糖肽類抗生素、林肯酰胺類抗生素、青霉素酶抗性青霉素類抗生素和氨基青霉素類抗生素。
26.根據(jù)權利要求25所述的方法，其中所述協(xié)同抗生素或合作性抗微生物功效增強抗生素是選自由以下組成的組的氨基糖苷類抗生素:阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。
27.一種用于克服其中存在抗生素抗性的細菌病原體的天然表面上的抗生素抗性的方法，其包括: 在足以滿足以下一種或多種的條件和時間下，使所述上皮組織表面同時或依次且以任何順序與有效量的(I)至少一種鉍-硫醇(BT)組合物和(2)至少一種能夠增強或與所述至少一種BT組合物協(xié)同作用的抗生素接觸: (i)預防所述上皮組織表面被所述細菌病原體感染， (ii)抑制所述細菌病原體的基本上所有浮游細胞的細胞活力或細胞生長， (iii)抑制由所述細菌病原體的生物膜形成，和 (iv)抑制所述細菌病原體的基本上所有生物膜形式細胞的生物膜活力或生物膜生長， 其中所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑；并從而克服在所述上皮組織表面上的抗生素抗性。
28.根據(jù)權利要求27所述的方法，其中所述細菌病原體選自由以下組成的組:金黃色葡萄球菌(S.aureus)、MRSA (甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌)、表皮葡萄球菌、MRSE (甲氧西林抗性表皮葡萄球菌)、結核分枝桿菌、鳥分枝桿菌、銅綠假單胞菌、藥物抗性銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌、腸出血性大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、艱難梭狀芽胞桿菌、幽門螺桿菌、嗜肺性軍團病桿菌、糞腸球菌、甲氧西林敏感糞腸球菌、陰溝腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、普通變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌、霍亂弧菌、弗氏志賀菌、萬古霉素抗性腸球菌(VRE)、洋蔥伯克霍爾德菌群、土拉弗朗西斯氏菌、炭疽桿菌、鼠疫耶爾森氏桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、青霉素抗性肺炎鏈球菌、大腸桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、多噬伯克霍爾德菌、恥垢分支桿菌和鮑氏不動桿菌。
29.根據(jù)權利要求27所述的方法，其中所述細菌病原體表現(xiàn)出對選自由以下組成的組的抗生素的抗性:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素、妥布霉素、克林霉素和加替沙星。
30.根據(jù)權利要求27所述的方法，其中所述表面包括選自由表皮、真皮、呼吸道、胃腸道和腺襯組成的組的組織的上皮表面。
31.根據(jù)權利要求27所述的方法，其中所述接觸步驟進行一次或多次。
32.根據(jù)權利要求31所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括噴霧、沖洗、浸潰、涂布和涂抹所述表面中的一者。
33.根據(jù)權利要求31所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括吸入、攝取和口腔沖洗中的一者。
34.根據(jù)權利要求31所述的方法，其中至少一個接觸步驟包括通過選自以下的途徑施用于受試者:局部、腹膜內(nèi)、口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、透皮、舌下、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)頰、鼻內(nèi)、經(jīng)吸入、眼內(nèi)、心房內(nèi)、心室內(nèi)、皮下、脂肪內(nèi)、關節(jié)內(nèi)和鞘內(nèi)。
35.根據(jù)權利要求27所述的方法，其中所述BT組合物包含選自由以下組成的組的一種或多種 BT 化合物:BisBAL、BisEDT、Bis- 二巰基丙醇、Bis-DTT、Bis_2-巰基乙醇、Bis-DTE、Bis-Pyr>Bis-Ery、Bis-Tol、Bis-BDT、Bis-PDT、Bis-Pyr/Bal> Bis-Pyr/BDT>Bis-Pyr/EDT>Bi s-Pyr/PDT、Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/Ery、鉍-1-巰基-2-丙醇和 Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。
36.根據(jù)權利要求35所述的方法，其中所述協(xié)同或增強抗生素包括選自由以下組成的組的抗生素:克林霉素、加替沙星、氨基糖苷類抗生素、碳青霉烯類抗生素、頭孢菌素類抗生素、氟喹諾酮類抗生素、青霉素酶抗性青霉素類抗生素和氨基青霉素類抗生素。
37.根據(jù)權利要求36所述的方法，其中所述協(xié)同或增強抗生素是選自由以下組成的組的氨基糖苷類抗生素:阿米卡星、阿貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。
38.一種用于治療含有細菌生物膜的天然表面的抗菌劑組合物，其包含: (a)至少一種BT組合物，所述BT組合物包含多個含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有的所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑；和(b)至少一種能夠與所述BT化合物協(xié)同作用或增強所述BT化合物的抗生素化合物。
39.根據(jù)權利要求38所述的組合物，其中所述BT化合物選自由以下組成的組:BisBAL,BisEDT,Bis- 二巰基丙醇、Bis-DTT、Bis_2_ 巰基乙醇、Bis-DTE、Bis-Pyr、Bis-Ery、Bis-Tol、Bis-BDT、Bis-PDT, Bis-Pyr/Bal, Bis-Pyr/BDT、Bis-Pyr/EDT、Bis-Pyr/PDT、Bis-Pyr/Tol、Bis-Pyr/EryJi1-1-巰基 _2_ 丙醇和 Bis-EDT/2-羥基-1-丙硫醇。
40.根據(jù)權利要求38所述的組合物，其中所述BT化合物選自由BisEDT和BisBAL組成的組。
41.根據(jù)權利要求38所述的組合物，其中所述抗生素化合物包括選自以下的抗生素:甲氧西林、萬古霉素、萘夫西林、慶大霉素、氨芐西林、氯霉素、多西環(huán)素、妥布霉素、克林霉素、加替沙星、頭孢唑林和氨基糖苷類抗生素。
42.根據(jù)權利要求41所述的組合物，其中所述氨基糖苷類抗生素選自由以下組成的組:阿米卡星、阿 貝卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、紅鏈霉素、鏈霉素、妥布霉素和阿泊拉霉素。
43.根據(jù)權利要求41所述的組合物，其中所述氨基糖苷類抗生素是阿米卡星。
44.一種用于治療含有細菌生物膜的天然表面的方法，其包括: (a)將所述表面中或表面上的細菌感染鑒定為包括以下之一:(i)革蘭氏陽性菌，(ii)革蘭氏陰性菌，和(iii)包括(i)和(ii)兩者；和 (b)向所述表面施用包含一種或多種鉍硫醇(BT)組合物的制劑，其中: (i)如果所述細菌感染包括革蘭氏陽性菌，則所述制劑包含有效量的至少一種BT化合物和至少一種是利福霉素的抗生素， (ii)如果所述細菌感染包括革蘭氏陰性菌，則所述制劑包含有效量的至少一種BT化合物和阿米卡星， (iii)如果所述細菌感染包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩者，則所述制劑包含有效量的一種或多種BT化合物、利福霉素和阿米卡星，并從而治療所述表面。
45.根據(jù)權利要求44所述的方法，其中所述細菌感染包括一種或多種抗生素抗性菌。
46.根據(jù)權利要求45所述的方法，其中所述治療包括下述中的至少一者:(i)根除所述細菌生物膜，( )減少所述細菌生物膜，和(iii)減弱所述細菌生物膜的生長。
47.根據(jù)權利要求44-46任一項所述的方法，其中所述BT組合物包含多個包含鉍-硫醇(BT)化合物的微粒，基本上所有所述微粒具有約0.4 μ m至約5 μ m的體積平均直徑。
全文摘要
本發(fā)明描述包括新型均勻微粒懸浮液的組合物和方法用于治療包含細菌生物膜的天然表面，其包括鉍-硫醇(BT)化合物和某些抗生素之間預料之外的協(xié)同性或增強作用，以提供包括抗菌制劑在內(nèi)的制劑。本發(fā)明還描述了公開的BT化合物和BT化合物+抗生素組合的之前未預測的抗菌性質(zhì)和抗生物膜性質(zhì)，其包括某些這種組合物對治療某些革蘭氏陽性菌感染的優(yōu)先功效和某些這種組合物對治療某些革蘭氏陰性菌感染的不同的優(yōu)先功效。
文檔編號A61K31/7042GK103079557SQ201180015305
公開日2013年5月1日 申請日期2011年2月3日 優(yōu)先權日2010年2月3日
發(fā)明者B·H·J·貝克 申請人:微生物公司