專利名稱：Hb-egf組合物和其治療與增強的尿道上皮滲透性相關的病癥的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及被稱為肝素結合性表皮生長因子樣生長因子(heparin-bindingepidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF)的蛋白質。更具體而言，本發(fā)明涉及包含HB-EGF的醫(yī)用組合物以及這些組合物修復與包括間質性膀胱炎在內的各種醫(yī)學病癥相關的尿道上皮損傷的應用。
背景技術：
肝素結合性表皮生長因子樣生長因子或HB-EGF是EGF蛋白家族成員，EGF蛋白家族還包括EGF、TGFa、雙調蛋白和β細胞素。HB-EGF本身最初是在1990年確定的巨噬細胞分泌的肝素結合性生長因子。象EGF家族的其他成員一樣，HB-EGF通過與EGF受體結合 來發(fā)揮其生物學作用。不過，與EGF家族的大部分成員不同，HB-EGF以高親和力與肝素結合，這看起來增強了與EGF受體(her_l、ErbBl)的結合。HB-EGF還結合受體her_4 (ErbB4)和nardilysin,這使其在EGF家族中是獨特的。1991 年報道了編碼人 HB-EGF 的 cDNA 的克隆(Higashiyama 等，Science, 251 936)。HB-EGF的成熟形式是從被稱為pro-HB-EGF的208個氨基酸的跨膜前體加工的分泌型蛋白。成熟HB-EGF包含跨本文中由SEQ ID NO : I表示的前體的殘基63-148的86個氨基酸。還已知HB-EGF的許多微不均一(microheterogeneous)形式,這些微不均一形式包括不同的N-末端截短的前體形式，包括殘基63-148、殘基73-148、殘基77-148和殘基82-148。人HB-EGF的一種特別有活性的形式包括殘基74-148 (SEQ ID NO :2)。這些蛋白質作為重組產物的產生在1998年9月22日授權的US 5，811，393中描述。已提出使用HB-EGF治療多種醫(yī)學適應征。在2007年10月2日授權的US7，276，479中，Besner和Pillai描述了在兒童和成人患者中使用HB-EGF治療與腸缺血如壞死性小腸結腸炎、休克、敗血癥以及腸絞痛相關的病癥。在2001年5月15日授權的US 6，232，289中，Keay等提出了使用HB-EGF抑制在間質性膀胱炎患者中升高的尿液荷載的抗增殖因子(APF)，間質性膀胱炎在一些患者中是以具有炎癥性成分和以疼痛為特征的膀胱尿道上皮糜爛以及在該受累個體中尿頻和尿急為特征的病癥。間質性膀胱炎(IC)的確切原因不清楚，但推斷的病因包括感染、過敏或免疫性疾病、內分泌失調、尿中毒性化學品、缺陷的過渡粘膜、精神性疾病、神經性疾病以及淋巴管或血管阻塞。提議的治療包括戊聚糖多硫酸鹽、葡糖氨基葡聚糖如透明質酸(參見US5，880，108)和硫酸軟骨素(參見US 6，083，933和US 7，772，210)、抗炎或免疫抑制劑治療、肌肉松弛劑、抗組胺藥和止痛藥。在這些中，FDA僅批準經口服遞送戊聚糖多硫酸鹽以及經膀胱內灌注遞送至膀胱的50%二甲亞砜溶液。不管是什么原因，間質性膀胱炎是一種尿道上皮疾病。由于尿道上皮的主要作用是(I)作為防止細菌和結晶粘附的屏障，和(2)防止尿中溶質滲透進入膀胱壁，因此當在IC中該屏障功能喪失發(fā)生時當然在該疾病的病理生理中起了重要的作用(參見Hurst等，April 2007, Urology, 69 (supplement 4A) : 17-23)。因此,期望提供一種有效促進尿道上皮生長和屏障性質的治療，以治療性用于患有膀胱炎以及其他與尿道上皮損傷相關的病癥的個體。

發(fā)明內容
現在已確定當通過灌注將HB-EGF給藥于膀胱時發(fā)生廣泛的增生性改變，導致尿道上皮和下面的膀胱組織層都增厚。而且，給藥HB-EGF具有雙重的作用，以及另外的降低尿道上皮細胞和組織滲透性的醫(yī)學益處，從而提高具有損傷的尿道上皮的個體如具有膀胱炎的患者所需的降低溶質敏感性的屏障功能。該HB-EGF作用是特別令人驚奇的，因為HB-EGF的受體EGFR在正常膀胱的傘狀細胞層中是不存在的。因此，本發(fā)明涉及使用有效減少尿道上皮滲透性的量的HB-EGF，特別是治療具有尿道上皮損傷的個體，包括具有膀胱炎以及尤其是具有間質性膀胱炎的個體。因此，根據本發(fā)明的一個方面，提供用于治療個體以減少受損尿道上皮滲透性的方法，所述方法包括遞送至所述個體的尿道上皮有效量的HB-EGF。在相關方面，實施該方 法以治療具有膀胱炎包括間質性膀胱炎和與受損的尿道上皮相關的相關病癥的個體。同樣地，本發(fā)明提供HB-EGF在制備減少需要其的個體中尿道上皮滲透性的藥物中的應用，所述個體包括具有間質性膀胱炎的個體。本發(fā)明還提供HB-EGF減少需要其的個體中尿道上皮滲透性的應用，所述個體包括具有間質性膀胱炎的個體。在本發(fā)明的相關方面，提供一種組合物，該組合物包含在需要其的個體中有效減少尿道上皮滲透性的單位劑量的HB-EGF。在實施方案中，該組合物包含單位劑量在IOmg至IOOOmg 范圍內，例如 50-200mg 的 HB-EGF。在進一步的相關方面，本發(fā)明提供一種試劑盒，該試劑盒包括當通過灌注遞送至需要其的個體的膀胱時有效減少尿道上皮的滲透性的單位劑量的HB-EGF和使用其實現該治療的說明書。在實施方案中，所述試劑盒還包括適合將HB-EGF重構成適合于膀胱內遞送的劑型的含水載體以及任選的用于灌注該組合物的導管。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點從下面的具體實施方式
將變得清楚。然而，應理解，該具體實施方式
和特定實施例盡管指出了本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，但是僅以例示的方式給出，因為從該具體實施方式
在本發(fā)明的精神和范圍內的各種變化和修改對本領域技術人員而
言將變得清楚。


本發(fā)明的這些和其它方面現在參考附圖更詳細地描述圖I顯示HB-EGF體內對正常小鼠中膀胱細胞增殖的作用；圖2顯示HB-EGF體內對酸損傷小鼠膀胱的滲透性的作用。
具體實施例方式本發(fā)明涉及使用肝素結合性表皮生長因子樣生長因子(HB-EGF)促進膀胱和其他組織的尿道上皮的增厚和/或減少膀胱和其他組織的尿道上皮的滲透性，其作為用于治療患有以尿道上皮損傷為特征的醫(yī)學病癥或疾病的個體的手段。這些病癥主要包括與尿道上皮損傷、糜爛或炎癥相關的那些病癥，尤其包括與增強的尿道上皮滲透性相關的那些病癥。HB-EGF蛋白是具有HB-EGF活性的蛋白質種類，并且包括SEQ ID NO 1的至少氨基酸82-148或其含有一個、兩個或三個氨基酸添加、取代(如保守氨基酸取代)或缺失的功能等價物，還包括保留HB-EGF活性的天然存在的HB-EGF的變體。例如，當在使用Balb/c3T3細胞的細胞增殖測定中蛋白質測試呈陽性時，則特定蛋白質的HB-EGF活性得以確認。在實施方案中，HB-EGF蛋白包含SEQ ID NO :I的氨基酸77-148或氨基酸73-148或氨基酸63-148。在一個具體的優(yōu)選實施方案中，HB-EGF蛋白是人HB-EGF，其包含氨基酸74-148 (SEQ ID NO :2)。認為該HB-EGF種類在人中是主要的內源性種類。應理解，在本發(fā)明中還可以使用任何其它微不均一形式的具有HB-EGF活性的人HB-EGF。另外，這些形式的HB-EGF活性變體也是有用的，該變體包含1、2或3個或更多個氨基酸添加、缺失或取代，其中取代期望是保守氨基酸取代，而添加和缺失期望是N和/或C末端添加或缺失。變體HB-EGF蛋白也期望保留肝素結合活性。HB-EGF產品可以從天然來源例如包括U-937(ATCC CRL 1593)的細胞系提取，并 可以通過化學方法合成，但優(yōu)選作為重組產物通過培養(yǎng)被遺傳工程化以從合適的啟動子表達HB-EGF編碼基因的宿主生物體產生，如在US5811393中所更詳細地描述的。HB-EGF現在還可作為細菌(大腸桿菌(E.coli))表達的重組產物商購獲得。或者，HB-EGF在真核宿主如酵母、絲狀真菌或哺乳動物細胞如CHO或COS中產生，從而表達產物被糖基化，特別是如在天然蛋白中在殘基75和85上被糖基化。應進一步理解，可以作為蛋白綴合物提供和使用HB-EGF蛋白，其中HB-EGF共價地或通過物理結合與可用于任何期望目的的載體分子綴合。該載體分子可以是IgG的Fe區(qū)以提供HB-EGF的二聚體形式，或用于延長或減慢活性藥物釋放的聚合物例如聚乙二醇、血清白蛋白、直鏈淀粉等，或在治療該病癥中有效用的其它蛋白或分子。HB-EGF可用于治療患有特征為尿道上皮損傷或與尿道上皮損傷有關的醫(yī)學病癥的個體，尿道上皮損傷表現為尿道上皮變薄和/或其滲透性增強，例如尿道上皮糜爛或炎癥。尿道上皮是襯于尿道大部分包括腎盂、輸尿管、膀胱和尿道一部分的組織層，并保護下面的組織免受有毒的尿液成分，包括可溶性刺激物如K+，同時還伸展以適應尿容量壓力?？墒褂媒⒂糜谠\斷具有間質性膀胱炎和相關膀胱疾病的患者的測試來揭示將受益于HB-EGF治療的個體。膀胱鏡檢查允許泌尿科醫(yī)生觀察膀胱，進行許多測試，并且在泌尿科是標準的調查。將小直徑管通過尿道插入膀胱中。其有兩個或更多個通道一個攜帶允許目視檢查膀胱內部的內窺鏡，另一個攜帶用于灌注入膀胱的液體。膀胱鏡檢查可以使用局部麻醉但沒有水擴張(hydrodistension)(拉伸膀胱)在醫(yī)生辦公室進行，或在全身或脊髓麻醉下有水擴張在診室中進行。辦公室局部麻醉下膀胱鏡檢查是排除癥狀其他原因如腫瘤、結石等可能性的調查。膀胱鏡檢查也使檢測膀胱壁的任何瘢痕或變薄(其可能是Hunner氏潰瘍/損傷)以及檢測腎絲球狀出血(其是在約90%的IC患者中可見的點狀瘀斑性出血)成為可能。當懷疑IC或相關的尿道上皮變薄時在全身或脊髓麻醉下實施膀胱鏡檢查，以進行水擴張，其中膀胱用液體充滿兩次，第一次到最大容量以評估麻醉下膀胱容量，第二次減少容量以檢查膀胱壁。Hunner氏損傷通常表現為具有向中央瘢痕輻射的小血管的界限性發(fā)紅粘膜區(qū)，有附著于該區(qū)的纖維蛋白沉積或凝塊。該部位隨著膀胱擴張增加而撕裂，有血液以瀑布的方式從損傷處和粘膜邊緣瘀點狀滲出。擴張后形成稍微大的泡性水腫，具有不同的外周延伸。此外，可進行膀胱活檢。這涉及從膀胱幾個不同部位的包括逼尿肌在內的膀胱壁的不同水平取最少三個小的組織樣品。然后，由病理學家對這些樣品進行顯微鏡檢查，并可發(fā)現在膀胱壁的逼尿肌中肥大細胞增加。肥大細胞在機體組織的過敏和炎癥反應中發(fā)揮作用。它們能脫顆粒并釋放組胺。肥大細胞計數在IC患者中經常比其他膀胱疾病患者高。還可由病理學家進行膀胱活檢以確定尿道上皮厚度。還可以使用鉀敏感測試評價個體候選人以確定具有漏尿膀胱(leaky bladder)即具有使得對灌注鉀敏感的損傷的膀胱的那些個體，如下所述。可使用HB-EGF靶向和治療的疾病包括影響上皮的感染性疾病，其中多種微生物(病毒、細菌、真菌)具有結合特定上皮細胞的特定特征的表面結構。一種常見的感染性疾病是尿路感染(UTI)。所有婦女中約一半在其一生中羸患UTI，這些婦女中約25%會患有復發(fā)性UTI。這些感染多數是由于尿道致病性大腸桿菌造成。不過，UTI也可以在醫(yī)療機構形成,此類感染更大地頻率由非大腸桿菌引起。 影響尿道上皮另一種病癥是間質性膀胱炎(IC)，該病癥具有類似于UTI的癥狀(尿頻、尿急、壓迫和/或尿痛)。不過，尿培養(yǎng)是陰性的。在膀胱水擴張中，小的瘀斑狀出血(又名腎絲球狀出血)在整個膀胱經常發(fā)現。較大的“Hunner氏潰瘍”，以其特征性的瀑布出血作用而聞名，代表較大面積的膀胱壁變薄和/或創(chuàng)傷。IC的原因目前尚不知道，不過一些認為其可能是遺傳性的，創(chuàng)傷性損傷(化學品接觸)、感染或自身免疫性疾病的結果。術語“間質性膀胱炎”可與其他術語例如“疼痛性膀胱綜合征”(PBS)、“膀胱疼痛綜合征”(BPS)和“過敏性膀胱綜合征”(HBS)互換使用。因此，HB-EGF可用于治療患有以尿道上皮損傷特別是膀胱尿道上皮損傷為特征的病癥的個體，所述病癥包括但不限于與損傷的膀胱尿道上皮例如滲透性膀胱上皮相關的尿路感染和與損傷的膀胱尿道上皮例如滲透性膀胱上皮相關的間質性膀胱炎，以及Hunner氏損害/潰瘍和包括出血性膀胱炎、放射誘發(fā)的膀胱炎、急性細菌性膀胱炎、放射性膀胱炎、慢性盆腔痛、尿道綜合征、膀胱過度活動征和前列腺炎在內的相關病癥?！跋嚓P”病癥可在給定的個體中使用所謂的鉀敏感測試(PST)揭示，在鉀敏感測試中將3% KCl溶液灌注入所述個體的膀胱中。包括尿痛或尿急感覺的反應指示該個體具有導致增強的滲透性的尿道上皮損傷，且是根據本發(fā)明的方法治療的候選人。此外，通過膀胱鏡檢查或活檢具有可見的膀胱襯壁損傷的個體也是本發(fā)明治療的候選人。在一個實施方案中，治療的個體是那些具有基本正常的尿抗增殖因子(APF)水平的個體，這如Keay等在例如2002年4月23日公開的US 6376197中所確定。在另一個實施方案中，治療的個體是那些具有升高的尿APF水平的個體。在相關的實施方案中，選擇用本發(fā)明的HB-EGF組合物治療的個體不評價內源性APF水平，在患者招募中沒有該步驟而直接進行HB-EGF給藥。使用對給定病癥最適合且遞送藥物產生期望效果的給藥方案治療所述個體。期望效果可以以任何在膀胱中保留的標記物如鼠李糖的血液水平的降低來揭示?；蛘撸谕Ч勺鳛槿缡褂免浢舾袦y試所測定的治療后對鉀敏感性降低來確立，或作為膀胱鏡檢查所觀察到的或當作為活檢組織進行組織學檢查所檢查到的膀胱壁外觀和生理的改善。或者，期望效果可以患者經歷的癥狀的減輕或緩解來揭示。
合適地，且在優(yōu)選的實施方案中，通過膀胱內灌注給藥，即使用導管直接將藥物遞送入膀胱來治療個體。對于遞送入膀胱，期望HB-EGF在含水溶液中提供。應當理解，膀胱可以容納的體積是有限制的，因此可灌注給藥至給定個體的藥物溶液的體積是有限制的。對于人膀胱，所述體積通常在IOmL至約IOOmL的范圍內，更期望地在20mL至約75mL的范圍內，適當地在40mL-60mL的范圍內。在該范圍的上限(IOOmL)，所述個體在所需治療期間對保留該溶液將有困難。在該范圍的下限(IOmL)，對于將足夠的藥物推過導管所需的體積可能不能達到。最期望地，藥物溶液的體積至少足以使整個膀胱襯壁沐浴/接觸藥物。使用中，灌注藥物溶液并由患者在排尿之前保持至少約30分鐘的時間，期望更長的時間?？梢赃M行重復治療，例如2-6周每周兩次，隨后另外的 4-8周每周一次的減少維持方案。治療應重復進行直到癥狀中的至少一個例如尿痛、尿急或頻率減輕或消除。這些癥狀的減少通常經驗性測量，使用Oleary SantIndex建立基線和治療期間的得分，以使得可以衡量進展情況。對于使用，因此期望將HB-EGF配制為含水溶液，例如使用鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)為載體。HB-EGF期望以每次灌注單位劑量提供，其在至少約5mg至所選載體中HB-EGF溶解度所限制的最大量的范圍。合適地，HB-EGF以每次灌注IOmg至IOOOmg范圍的單位劑量給藥。在實施方案中，每次灌注HB-EGF的單位劑量為20mg至800mg,30mg至600mg,40mg至 400mg, 50mg 至 200mg, 75mg 至 125mg,90mg 至 IlOmg,包括 lOOmg。因此，可以將 HB-EGF配制為溶液，所述溶液包含在體積為約IOmL至IOOmL范圍，20mL至50mL范圍，例如15mL、20mL、25mL、30mL、35mL、40mL、45mL或50mL的含水載體如鹽水或PBS中的這些單位劑量的HB-EGF。在特定的實施方案中，HB-EGF制劑包含在20mL PBS中的單位劑量為IOOmg的HB-EGF。因此，本發(fā)明提供了一種組合物，其包含通過膀胱內灌注有效治療膀胱炎及相關病癥的單位劑量的HB-EGF。應理解，所述組合物還可以作為多劑量制劑提供，所述多劑量制劑包含2個或更多個單位劑量的HB-EGF，用于在給藥前隨后的稀釋或分級。此外，本發(fā)明還提供一種試劑盒，其用于治療患有與尿道上皮損傷相關的病癥的個體，所述試劑盒包括(I)對該治療有效的單位劑量的HB-EGF，(2)任選的用于重構HB-EGF的含水載體,和(3)使用其治療所述病癥的說明書。在該試劑盒中，HB-EGF可在任何合適的無菌的容器例如小瓶、安瓿等中提供。應理解，用HB-EGF組合物治療的個體還可以用可用于控制目標疾病及其癥狀的其他藥物組合治療。其他有用的藥物包括· BCG(卡介苗)，最初是用于提供預防結核病的疫苗，現已用于治療不同類型的膀胱癌一些時間；·硫酸軟骨素，其可以不同的規(guī)格以商品名稱Uracyst (2. 0% )和Gepan Instill (O. 2% )獲得； 糖皮質激素也可膀胱內使用，單獨或以混合形式。色甘酸二鈉是抑制肥大細胞的物質；· DMSO ( 二甲基亞砜) 利多卡因(局部麻醉藥)，任選僅與碳酸氫鈉一起(堿化利多卡因)或與其它藥物一起組合使用；·戊聚糖多硫酸鈉；·氯化奧昔布寧；·奧昔氯生鈉(Chlorpactin )， 例如O. 2%濃度；·透明質酸鈉或玻尿酸(也稱為透明質酸)。下面非限制性實施例例示本發(fā)明實施例在以下的實施例中，所述HB-EGF是人HB-EGF (74-148)，其是在酵母宿主巴斯德畢 赤酵母(Pichia pastoris)中作為分泌性重組蛋白產生的HB-EGF的75個殘基的可溶形式。通過離心收集培養(yǎng)物上清液，過濾，并通過陽離子交換色譜之后用疏水性相互作用色譜來純化。將所得的蛋白質進行超濾/滲濾，然后進行離子交換色譜。將最終產物配制在150mM氯化鈉、20mM磷酸鈉緩沖液，pH6. O中，并儲存在4°C下。實施例I-HB-EGF促講尿道h.皮細朐體內增葙檢測HB-EGF體內對尿道上皮細胞增殖的作用。結果顯示在圖I中。雌性5_8周齡CBA/J小鼠通過霧化器遞送2-3%異氟烷麻醉，并用連接有30GX1/2”針頭的聚乙烯導管(I. D. O. 28mm, O. D. O. 61mm)插管。HB-EGF(74-148) (10mg/kg)或 PBS 通過輸液泵灌注(每個膀胱30秒內50ul)。通過用膠棉封閉尿道將藥物保留在膀胱中。2小時后，除去膠棉并停止麻醉。7天后收獲膀胱，將6mm切片(每個膀胱4個象限)用H&E染色并以雙盲方式評價。(圖1，上圖)使用以下的評分系統(tǒng)評價尿道上皮增殖(最大16) :1=正常-完整的多層尿道上皮，2-3個細胞層厚，位于亞細胞基質上；2 =邊緣改變-最小尿道上皮細胞層增厚；3 =輕度至中度變化-輕度但清楚的高度上皮化(hyperepithelialization) ；4 =嚴重至非常嚴重變化-總體高度上皮化尿道上皮層。(圖1，下圖)使用鏡臺測微計測量尿道上皮厚度(每個膀胱12次測量)。提供的數據是來自3個獨立研究的匯集。因此，如圖I中所示，向正常小鼠膀胱內給藥10mg/kg HB-EGF(74-148)導致可檢測的膀胱尿道上皮增殖，如盲法組織得分和測微計測量所評價。在正常小鼠中小于或等于lmg/kg的劑量沒觀察到作用。實施例2-HB-EGF體內減少受損膀胱尿道上皮滲誘件五周齡雌性CBA/J小鼠通過霧化器遞送2-3%異氟烷麻醉，并用連接有30Gxl/2"針頭的聚乙烯導管(I.D. 0. 28mm, 0. D. 0. 61mm)插管。通過接觸2%乙酸(HAc) I小時來引起膀胱損傷。用PBS沖洗膀胱，讓小鼠休息0. 5-1小時。然后讓小鼠每天接受HB-EGF (17. 5mg/kg)或PBS (2小時保留)治療。將HB-EGF配制在150mM氯化鈉、20mM磷酸鈉緩沖液，pH 6. O中。通過導管將其遞送至膀胱(參見上文)。通過用膠棉封閉尿道將藥物保留膀胱中，2小時后去除藥物。酸處理后48小時收獲膀胱，將6mm切片(每個膀胱4個象限)用H&E染色并以盲法評價。使用以下的評分系統(tǒng)評價尿道上皮增殖(最大16) :0=高度再上皮化的尿道上皮；I =正常-完整的多層尿道上皮，2-3個細胞層厚，位于亞細胞基質上；2 =輕度損害-尿道上皮細胞的表層的輕度脫落；3 =中度損害-尿道上皮上層的丟失；4 =嚴重損害-尿道上皮的完全剝脫或上皮層的嚴重變形部分。在收獲前30分鐘，用50ul熒光素鈉(NAF，50mg/ml)灌注膀胱。通過心臟穿刺收集血液，并用d-葡萄糖醛酸酶測定檢測血漿熒光素。
圖2總結了來自4個動物組的數據，如下所示I)僅用PBS治療的對照動物(無酸損傷)；2)酸損傷I小時后處死的動物；3)暴露酸損傷并用HB-EGF的兩種劑量治療并在48小時處死的動物；4)暴露酸損傷并用PBS的兩個劑量治療并在48小時處死的動物。在圖2中，上面的圖表顯示組織學損傷評分。其揭示酸處理在I小時誘導高程度的損傷，在對照(PBS)治療的動物中48小時減輕。這代表膀胱的自發(fā)再上皮化(愈合)。用HB-EGF治療對促進恢復具有另外的統(tǒng)計學上的顯著效果。圖2的下圖揭示體內滲透性的測定。動物接受膀胱內灌注熒光素鈉，如果膀胱滲漏則在血漿中產生可檢測到的熒光。該數據顯示在酸處理后I小時滲透性有非常大的增 力口，在用PBS治療的動物中48小時降低。用HB-EGF治療對降低滲透性具有另外的統(tǒng)計學上的顯著效果。SEQ ID NO : I (人 HB-EGF 前體)I mkllpsvvlk lflaavlsal vtgeslerlr rglaagtsnp dpptvstdql lplgggrdrk61 vrdlqeadld llrvtlsskp qalatpnkee hgkrkkkgkg lgkkrdpclr kykdfcihge121 ckyvkelrap scichpgyhg erchglslpv enrlytydht tilavvavvl ssvcllvivg181 llmfryhrrg gydveneekv klgmtnshSEQ ID NO 2( A HB-EGF 種)vtlsskpqal atpnkeehgk rkkkgkglgk kfdpclrkyk dfcihgecky vkelrapscichpgyhgerchglsl雖然參考現認為是優(yōu)選的實施例描述了本發(fā)明，但是應理解，本發(fā)明不限于所公開的實施例。相反，本發(fā)明意欲涵蓋在所附的權利要求的精神和范圍內的各種修改和等價安排。所有出版物、專利和專利申請在此以它們的全部內容引入本文作為參考，引入程度如同每個單個的出版物、專利或專利申請被特別和單個地指出以其全部內容引入作為參
考一樣。
權利要求
1.用于治療具有與增強的尿道上皮滲透性相關的病癥的個體的方法，所述方法包括通過灌注遞送至所述個體尿道上皮一種組合物的步驟，所述組合物包含有效減少尿道上皮滲透性的單位劑量的HB-EGF。
2.根據權利要求I所述的方法，其中所述病癥的特征是在鉀敏感測試中敏感。
3.根據權利要求I所述的方法，其中所述病癥是間質性膀胱炎。
4.根據權利要求I所述的方法，其中所述HB-EGF是具有SEQID NO 2的人HB-EGF。
5.根據權利要求I所述的方法，其中所述HB-EGF以50mg至200mg的單位劑量遞送。
6.根據權利要求I所述的方法，其中所述組合物包含含水載體。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述組合物具有IOmL至IOOmL的體積。
8.根據權利要求I所述的方法，其中所述組合物包含50至200mg單位劑量的HB-EGF和具有25-75mL體積的含水載體。
9.一種藥物組合物，其包含有效減少需要其的個體的尿道上皮滲透性的單位劑量的HB-EGF和體積在IOmL至IOOmL范圍內的含水載體。
10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其中所述含水載體是磷酸鹽緩沖鹽水。
11.根據權利要求9所述的藥物組合物，其中所述HB-EGF是人HB-EGF(74-148)。
12.根據權利要求10所述的藥物組合物，其包含50mg至200mg的人HB-EGF(74-148)和25mL至75mL體積的含水載體。
13.用于治療具有與異常尿道上皮滲透性相關的病癥的個體的試劑盒，所述試劑盒包含當灌注其至膀胱時有效減少尿道上皮滲透性的單位劑量的HB-EGF和使用其治療所述病癥的說明書。
全文摘要
本發(fā)明涉及利用HB-EGF治療與增強的尿道上皮滲透性相關的病癥，所述病癥包括間質性膀胱炎。
文檔編號A61P13/10GK102858363SQ201180020326
公開日2013年1月2日 申請日期2011年4月12日 優(yōu)先權日2010年4月21日
發(fā)明者羅伯特·尤格, 賓卡·佩特洛娃 申請人:延齡草治療公司