專利名稱：含有克拉夫定及阿德福韋酯的用于治療慢性乙型肝炎的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療慢性乙型肝炎的組合物，其含有克拉夫定(Clevudine)及阿德福韋酯(Adefovir dipivoxil )。本發(fā)明的克拉夫定及阿德福韋酯復(fù)合制劑與單一成分的制劑相比，具有以下效果，使乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化，顯示出對(duì)耐藥性病毒的相互抑制作用。
背景技術(shù)：
肝炎是指肝臟產(chǎn)生炎癥，肝細(xì)胞受到破壞的狀態(tài)。發(fā)生頻率最高的病因?yàn)椴《靖?染。在學(xué)術(shù)上，將病毒性肝炎中所占頻率最高的乙型肝炎定義為病毒表面抗原(HBsAg)持續(xù)6個(gè)月以上的情況。乙型肝炎病毒(HBV，Ifepatitis B Virus)在細(xì)胞內(nèi)感染后，發(fā)生復(fù)制，然后向血液內(nèi)排出表面抗原和被稱為包膜(envelope)抗原的HbeAg,以及保留了自身DNA的病毒體(virion)。因此，以上抗原被用作診斷肝炎的指標(biāo)。急性肝炎，其在肝炎發(fā)生后的3-4個(gè)月內(nèi)肝功能降低等臨床癥狀會(huì)得到恢復(fù)或痊愈。與此相反，慢性肝炎的情況下，是指肝功能及組織檢查中，肝炎持續(xù)6個(gè)月以上的狀態(tài)，據(jù)報(bào)道慢性HBV攜帶者中的約25%會(huì)因原發(fā)性HCC或肝硬化而死亡。根據(jù)WHO (世界衛(wèi)生組織)報(bào)告，乙型肝炎的慢性攜帶者約為4億名，每年約有百萬(wàn)名以上因病死亡。尤其是20%的慢性肝炎患者在感染后的1(Γ20年期間轉(zhuǎn)變?yōu)楦伟┗蚋斡不劳觯?0%的肝炎患者表現(xiàn)出了與乙型肝炎病毒感染的相關(guān)性，因此，切實(shí)需要開(kāi)發(fā)出一種有效抑制病毒復(fù)制的治療方法，以用于乙型肝炎的早期治療。至今為止，已開(kāi)發(fā)出的乙型肝炎治療劑不能將HBV完全從體內(nèi)消滅。此外，長(zhǎng)期使用該種類藥劑時(shí)，必然會(huì)產(chǎn)生對(duì)藥劑有抗性的變異型HBV。核苷系列的I- (2’ -脫氧-2’ -氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶(以下簡(jiǎn)稱為克拉夫定)正在以Levovir的商品名銷售,在給予克拉夫定時(shí),會(huì)減少慢性乙型肝炎患者肝細(xì)胞內(nèi)的cccDNA，因此，已知其具有以下優(yōu)點(diǎn)。在給藥結(jié)束后，也能夠長(zhǎng)時(shí)間地持續(xù)對(duì)病毒的抑制效果。作為抗病毒性藥物的阿德福韋酯，根據(jù)化合物命名法命名的名稱為9-[2_[雙(新戊酰氧基)甲氧基]磷酰甲氧基]乙基-腺嘌呤，其作為逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，對(duì)HIV及乙型肝炎病毒(HBV)顯示出了優(yōu)異的活體內(nèi)抗病毒活性。上述物質(zhì)的抗病毒活性可參照Barditch-Crovo P 等的《傳染病雜志》，176 (2):406,1997 (J. Infect. Dis. , 176 (2):406,1997)及 Starrett 等的《地中海化學(xué)》，37 1857-1864 (1994) (J. Med. Chem.，37 :1857-1864(1994))。在自然狀態(tài)下，已知阿德福韋酯具有無(wú)定形(amorphism)與結(jié)晶形(crystal)兩種形態(tài)，阿德福韋酯通過(guò)水分水解，生成分解生成物質(zhì)，因此，存在穩(wěn)定性差的問(wèn)題。為了解決這種穩(wěn)定性問(wèn)題，PCT專利申請(qǐng)(國(guó)際公開(kāi)號(hào)W00035460A)中公開(kāi)了更為穩(wěn)定的阿德福韋酯藥物組合物，其含有無(wú)水結(jié)晶性阿德福韋酯及二水合物結(jié)晶性阿德福韋酯及堿性賦形劑。為了對(duì)慢性乙型肝炎患者進(jìn)行有效的長(zhǎng)期治療，需要抗病毒制劑的聯(lián)合給藥。這些HBV抗病毒制劑的最大的問(wèn)題在于,給藥一定時(shí)間后,會(huì)出現(xiàn)耐藥病毒。一般，最廣為人知的耐藥病毒為耐拉米夫定病毒，相當(dāng)于HBV聚合酶B區(qū)域部分的rtL180M變異和C區(qū)域部分的rtM204I/V變異。對(duì)患者給予拉米夫定的情況下，如果開(kāi)始出現(xiàn)這種耐藥病毒，會(huì)使血液中的病毒濃度增加，使得ALT/AST數(shù)值急速上升，患者的狀態(tài)變得危險(xiǎn)，因此需要使用對(duì)這些耐藥病毒敏感的其它藥物進(jìn)行給藥。至今，允許作為慢性乙型肝炎治療劑銷售的藥物中，對(duì)耐拉米夫定病毒顯示出效果的藥物為阿德福韋酯。但阿德福韋酯在抗病毒效果方面，多少有些不盡如人意，在長(zhǎng)期給藥時(shí)，會(huì)出現(xiàn)對(duì)阿德福韋酯顯示出耐藥性的病毒，HBV聚合酶部分的rtA181V/T，rtN236T變異相當(dāng)于此。因此，為了最大限度地抑制對(duì)特定藥物顯示出的耐藥病毒的表達(dá)，并且有效地治療慢性乙型肝炎，與其說(shuō)是需要一種藥物，倒不如說(shuō)更需要的是對(duì)耐藥病毒顯示出相互抑制作用的藥物的聯(lián)合給藥，并且對(duì)此非常重視。美國(guó)專利第6，528，515號(hào)中，作為治療乙型肝炎病毒感染癥的治療方法，公開(kāi)了一種對(duì)現(xiàn)有的乙型肝炎病毒具有抗病毒效果的藥物的聯(lián)合給藥方法。作為一個(gè)例子，涉及 阿德福韋酯和克拉夫定的組合。并且，公開(kāi)了以下內(nèi)容這些藥物組合的效果，在克拉夫定的相對(duì)濃度最高時(shí)(I: I摩爾比)最低，兩個(gè)化合物的摩爾比為3:1時(shí)，獲得最優(yōu)異的整體相互作用。但是，這里只是例示了克拉夫定與阿德福韋酯的聯(lián)合給藥，并沒(méi)有公開(kāi)這些藥物組合的效果或?qū)ο嗷プ饔盟@得的效果進(jìn)行支持的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且完全沒(méi)有涉及抗性變異病毒。對(duì)此，本發(fā)明人想要開(kāi)發(fā)出一種新型的組合物，其通過(guò)HBV抗病毒制劑的聯(lián)合給藥，使乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化的同時(shí)，尤其具有對(duì)耐藥變異病毒的抑制作用。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問(wèn)題本發(fā)明的目的在于，提供一種藥物組合物，該藥物組合物具有以下效果，使慢性乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化，具有對(duì)耐藥病毒的相互抑制作用。解決問(wèn)題的方法為達(dá)成上述目的，本發(fā)明提供一種用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其含有克拉夫定及阿德福韋酯。本發(fā)明中，制備了克拉夫定與阿德福韋酯的重量比為3:廣1:1的制劑，該制劑的細(xì)胞效率試驗(yàn)結(jié)果表明，與單一制劑相比，克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑組合物，顯著提高了乙型肝炎病毒感染病的治療效果，并且隨著提高組合物內(nèi)克拉夫定的濃度，該效果更加顯著。尤其是本發(fā)明的復(fù)合制劑組合物，對(duì)具有拉米夫定及阿德福韋酯抗性的變異病毒顯示出了上升的效果，因此有助于說(shuō)明本發(fā)明的組合物對(duì)變異病毒具有優(yōu)異的抑制作用。本發(fā)明的克拉夫定及阿德福韋酯復(fù)合制劑，在用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的藥劑學(xué)組合物的給藥量，可以根據(jù)患者的年齡、癥狀、給藥劑型或藥物的種類而進(jìn)行多種調(diào)整，克拉夫定優(yōu)選為5 100mg，更有選為l(T30mg，阿德福韋酯優(yōu)選為5 30mg，更有選為5 IOmg0
此外，本發(fā)明的組合物可以使用藥劑學(xué)中允許使用的通常的賦形劑等進(jìn)行制備，為了獲得高的生物藥效率，可采用常規(guī)的制備方法。本發(fā)明的藥學(xué)上允許使用的載體為可以和活性成分一起給藥的有機(jī)或無(wú)機(jī)載體，包括用于固體藥學(xué)制劑化的載體，例如賦形劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑及崩解劑等。作為優(yōu)選的賦形劑，例如有乳糖、白糖、D-甘露醇、D-山梨醇、玉米淀粉、糊精、結(jié)晶性纖維素、低取代性羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、阿拉伯膠、糊精、支鏈淀粉、輕質(zhì)無(wú)水娃酸(lightanhydrous silicic acid)、合成娃酸招、娃酸招-鎂等。作為優(yōu)選的潤(rùn)滑劑，例如有硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石粉、硅膠。作為優(yōu)選的粘合齊U，例如有聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)膠化淀粉、玉米淀粉、蔗糖、谷蛋白、阿拉伯膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、結(jié)晶性纖維素、白糖、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素(HPMC)等。
作為優(yōu)選的崩解劑，例如有羧基乙酸淀粉鈉、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉、輕質(zhì)無(wú)水硅酸及低取代羥丙基纖維素等。發(fā)明的效果本發(fā)明的克拉夫定及阿德福韋酯復(fù)合制劑組合物與單一制劑相比，具有以下效果，使乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化，顯示出對(duì)耐藥病毒的相互抑制作用。


圖I是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)HBV野生型病毒的抗病毒效果的DNA印跡雜交(Southern Hybridization)結(jié)果。圖2是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)HBV野生型病毒的抗病毒效果的磷屏成像儀(PhosphorImager)結(jié)果。圖3是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)源自患者的rtM204I變異病毒的抗病毒效果的DNA印跡雜交結(jié)果。圖4是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)源自患者的rtM204I變異病毒的抗病毒效果的磷屏成像儀結(jié)果。
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體的說(shuō)明。但，這些實(shí)施例僅是本發(fā)明的例示，本發(fā)明的范圍并不僅限于此。實(shí)施例I :含有克拉夫定及阿德福韋酯的片劑[成分含量]30mg克拉夫定IOmg阿德福韋酯IOmg羧基乙酸淀粉鈉Img聚乙烯吡咯烷酮142mg D-甘露醇5mg滑石粉2mg硬脂酸鎂
使阿德福韋酯、克拉夫定、羧基乙酸淀粉鈉、聚乙烯吡咯烷酮、D-甘露醇過(guò)18目篩并進(jìn)行混合，使用水進(jìn)行顆?；?，進(jìn)行干燥，以使得利用水分測(cè)定法(KF法)不超過(guò)2%。將干燥物過(guò)25目篩后，混合滑石粉和硬脂酸鎂，使用8mm直徑的平面圓形沖頭直接壓縮混合物，制得200mg片劑。實(shí)施例2 :含有克拉夫定及阿德福韋酯的片劑[成分含量]20mg克拉夫定IOmg阿德福韋酯IOmg羧基乙酸淀粉鈉Img聚乙烯吡咯烷酮·152mg D-甘露醇5mg滑石粉2mg硬脂酸鎂使阿德福韋酯、克拉夫定、羧基乙酸淀粉鈉、聚乙烯吡咯烷酮、D-甘露醇過(guò)18目篩并進(jìn)行混合，使用水進(jìn)行顆?；?，進(jìn)行干燥，以使得利用水分測(cè)定法(KF法)不超過(guò)2%。將干燥物過(guò)25目篩后，混合滑石粉和硬脂酸鎂，使用8mm直徑的平面圓形沖頭直接壓縮混合物，制得200mg片劑。實(shí)施例3 :含有克拉夫定及阿德福韋酯的片劑[成分含量]IOmg克拉夫定IOmg阿德福韋酯IOmg羧基乙酸淀粉鈉Img聚乙烯吡咯烷酮162mg D-甘露醇5mg滑石粉2mg硬脂酸鎂使阿德福韋酯、克拉夫定、羧基乙酸淀粉鈉、聚乙烯吡咯烷酮、D-甘露醇過(guò)18目篩并進(jìn)行混合，使用水進(jìn)行顆粒化后，進(jìn)行干燥，以使得利用水分測(cè)定法(KF法)不超過(guò)2%。將干燥物過(guò)25目篩后，混合滑石粉和硬脂酸鎂，使用8mm直徑的平面圓形沖頭直接壓縮混合物，制得200mg片劑。效果試驗(yàn)例I :克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)HBV野生型病毒的抗病毒效果試驗(yàn)為了使對(duì)慢性乙型肝炎患者的治療效果極大化，需要聯(lián)合給予抗病毒制劑。為了確認(rèn)本發(fā)明的克拉夫定和阿德福韋酯復(fù)合制劑的抗病毒效果，進(jìn)行了如下試驗(yàn)。(I)病毒 DNA 的轉(zhuǎn)染(Transfection)在轉(zhuǎn)染約20-24小時(shí)前，將Huh-7細(xì)胞株在6孔板上以4X IO5細(xì)胞/孔的量放入，使其匯合(confluence)達(dá)到70 80%，并進(jìn)行培養(yǎng)。在轉(zhuǎn)化2小時(shí)前，從穩(wěn)定化的細(xì)胞中去除培養(yǎng)液，以2mL/孔的量更換培養(yǎng)基，上述培養(yǎng)基為無(wú)血清培養(yǎng)基，并且為以克拉夫定、阿德福韋酯或克拉夫定/阿德福韋酯復(fù)合制劑各自的濃度稀釋的培養(yǎng)基。然后，利用脂質(zhì)體(lipofectamine,英杰公司(Invitrogen))進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使得HVB野生型DNA每孔為2 μ g。藥物處理濃度如下?？死蚨镺. 9 μ M，阿德福韋酯為6. 3 μ Μ，復(fù)合制劑的情況下，使用克拉夫定與阿德福韋酯O. 9 μ Μ+6. 3 μ M或I. 8 μ Μ+6. 3 μ M同時(shí)進(jìn)行處理。轉(zhuǎn)染5小時(shí)后，替換為使用藥物處理過(guò)的培養(yǎng)液，每24小時(shí)，使用藥物處理的培養(yǎng)液進(jìn)行更換。(2)細(xì)胞收集及HBV DNA分離轉(zhuǎn)染后的第4天，使用冷的PBS清洗細(xì)胞后，進(jìn)行收集。利用冷的羥乙基哌嗪乙磺酸細(xì)胞溶解(Hepes Lysis)緩沖液(1%NP_40)進(jìn)行溶解，離心分離后，使用核酸酶(nuclease)處理上清液，從而去除轉(zhuǎn)染的細(xì)胞DNA。使用26%PEG溶液，沉淀殼體(capsid)形態(tài)的核心蛋白。然后，使用O. 5%的SDS溶液及蛋白酶K (ProteinaseK)進(jìn)行處理,從而去除殼體蛋白，分離殼體內(nèi)部的HBV DNA。(3) DNA印跡雜交
將分離的HBV DNA在1%的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳，向帶電陽(yáng)性的尼龍膜進(jìn)行毛細(xì)管轉(zhuǎn)移(capillary transfer)。在轉(zhuǎn)移的膜上，將標(biāo)記32P-的凝膠-精制的整體_長(zhǎng)度HBV片段進(jìn)行雜化(Hybridization)，利用SSC緩沖液清洗后，在X射線薄膜上進(jìn)行感光。利用磷屏成像儀測(cè)定了克拉夫定和阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)克拉夫定單獨(dú)或阿德福韋酯單獨(dú)處理組的抗病毒效果。圖I是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)HBV野生型病毒的抗病毒效果的DNA印跡雜交(Southern Hybridization)結(jié)果，圖2為磷屏成像儀結(jié)果。如圖I和圖2所示，本發(fā)明的阿德福韋酯和克拉夫定復(fù)合制劑與單一制劑相比，對(duì)HBV野生型病毒具有有效的抗病毒效果。具體地，將沒(méi)有用藥物進(jìn)行處理的對(duì)照組的HBV野生型病毒復(fù)制率作為100%時(shí)，克拉夫定處理組、阿德福韋酯單獨(dú)處理組中HBV野生型病毒復(fù)制率分別為65. 91%和55. 53%，使用上述兩種藥物同時(shí)處理的復(fù)合制劑的相對(duì)復(fù)制率為37. 44%。即，復(fù)合制劑處理組的HBV野生型病毒復(fù)制阻礙率為62. 56%，與克拉夫定單獨(dú)處理組的34. 09%相比，顯示出了約2倍的抗病毒效果，可以看出復(fù)合制劑對(duì)HBV野生型病毒的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于單獨(dú)制劑。效果試驗(yàn)例2 :克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)HBV變異病毒的抗病毒效果試驗(yàn)如上所述，HBV抗病毒治療劑的最大問(wèn)題是給藥一定時(shí)間后，會(huì)出現(xiàn)耐藥病毒。一般最廣為人知的耐藥病毒為耐拉米夫定病毒，相當(dāng)于HBV聚合酶B區(qū)域部分的rtL180M變異和C區(qū)域部分的rtM204I、rtM204V變異。作為耐阿德福韋酯病毒，HBV聚合酶部分的rtA181V、rtA181T，rtN236T變異相當(dāng)于此。本發(fā)明利用一般最廣為人知的對(duì)耐拉米夫定病毒有效的阿德福韋酯，與對(duì)耐阿德福韋酯病毒有效的克拉夫定，制備了復(fù)合制劑，按照下述方法，對(duì)本發(fā)明的復(fù)合制劑的耐藥病毒的抗病毒效果進(jìn)行了試驗(yàn)。(I)變異病毒克隆為了克隆具有耐拉米夫定病毒與耐阿德福韋酯病毒的HBV聚合酶部分變異的天然耐藥物HBV病毒，從患者的血清中分離HBV DNACQIAmp MinElute病毒自旋試劑盒(QIAmpMinElute Virus Spin Kit) (QIAGEN公司)，用PCR法擴(kuò)增HBV的逆轉(zhuǎn)錄酶部分，亞克隆到野生型整體基因表達(dá)載體上。使用試劑盒(愛(ài)思進(jìn)(Axygen))對(duì)DNA進(jìn)行了大量分離。
(2)病毒DNA轉(zhuǎn)染在轉(zhuǎn)染約20-24小時(shí)前，將Huh-7細(xì)胞株在6孔板上以4X IO5細(xì)胞/孔的量放入，使其匯合達(dá)到7(Γ80%，并進(jìn)行培養(yǎng)。在轉(zhuǎn)化2小時(shí)前，從穩(wěn)定化的細(xì)胞中去除培養(yǎng)液，以2mL/孔的量更換培養(yǎng)基，上述培養(yǎng)基為無(wú)血清培養(yǎng)基，并且為以克拉夫定、阿德福韋酯或克拉夫定/阿德福韋酯復(fù)合制劑各自的濃度稀釋的培養(yǎng)基。然后，利用脂質(zhì)體(英杰公司(Invitrogen))進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使得HVB野生型DNA每孔為2 μ g。藥物處理濃度如下?？死蚨镺. 9 μ M，阿德福韋酯為6. 3 μ Μ，復(fù)合制劑的情況下，使用克拉夫定與阿德福韋酯
O.9 μ Μ+6. 3 μ M或I. 8 μ Μ+6. 3 μ M同時(shí)進(jìn)行處理。轉(zhuǎn)染5小時(shí)后，替換為使用藥物處理過(guò)的培養(yǎng)液，每24小時(shí)，使用藥物處理的培養(yǎng)液進(jìn)行更換。(3)細(xì)胞收集及HBV DNA分離轉(zhuǎn)染后的第4天，使用冷的PBS清洗細(xì)胞后，進(jìn)行收集。利用冷的羥乙基哌嗪乙磺 酸細(xì)胞溶解緩沖液(1%ΝΡ_40)進(jìn)行溶解，離心分離后，使用核酸酶處理上清液，從而去除轉(zhuǎn)染的細(xì)胞DNA。使用26%PEG溶液，沉淀殼體形態(tài)的核心蛋白。然后，使用O. 5%的SDS溶液及蛋白酶K進(jìn)行處理，從而去除殼體蛋白，分離殼體內(nèi)部的HBVDNA。(4) DNA印跡雜交將分離的HBV DNA在1%的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳，向帶電陽(yáng)性的尼龍膜進(jìn)行毛細(xì)管轉(zhuǎn)移。在轉(zhuǎn)移的膜上，將標(biāo)記32P-的凝膠-精制的整體-長(zhǎng)度HBV片段進(jìn)行雜化，利用SSC緩沖液清洗后，在X射線薄膜上進(jìn)行感光。利用磷屏成像儀測(cè)定了克拉夫定和阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)克拉夫定單獨(dú)或阿德福韋酯單獨(dú)處理組的抗病毒效果。圖3是表示克拉夫定、阿德福韋酯，以及克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)源自患者的rtM204I變異病毒的抗病毒效果的DNA印跡雜交結(jié)果；圖4為磷屏成像儀結(jié)果。如圖3和圖4所示，本發(fā)明的阿德福韋酯和克拉夫定復(fù)合制劑與單一制劑相比，對(duì)源自患者的rtM204I變異具有有效的抗病毒效果。具體地，將沒(méi)有用藥物進(jìn)行處理的對(duì)照組的源自患者的rtM204I變異病毒復(fù)制率作為100%時(shí)，克拉夫定處理組、阿德福韋酯單獨(dú)處理組中變異病毒復(fù)制率分別為87. 43%和31. 17%，使用上述兩種藥物同時(shí)處理的復(fù)合制劑的相對(duì)復(fù)制率為24. 49%。此外，將克拉夫定濃度增加兩倍的復(fù)合制劑中，變異病毒復(fù)制率為13. 69%，顯著減小。即，復(fù)合制劑處理組的變異病毒復(fù)制阻礙率為75. 51%或86. 31%，可以看出，復(fù)合制劑的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于已知的對(duì)變異病毒有效的阿德福韋酯單獨(dú)處理組的68. 83%。效果試驗(yàn)例3 :克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)慢性乙型肝炎患者的抗病毒效果試驗(yàn)用于有效地治療慢性乙型肝炎患者的兩個(gè)藥劑的聯(lián)合治療效果，雖然其作為可以應(yīng)用于臨床的新的治療戰(zhàn)略，但還沒(méi)有關(guān)于克拉夫定與阿德福韋酯的復(fù)合制劑的研究。為了確認(rèn)本發(fā)明的克拉夫定與阿德福韋酯復(fù)合制劑對(duì)慢性乙型肝炎患者的抗病毒效果，進(jìn)行了以下試驗(yàn)。對(duì)慢性乙型肝炎患者的抗病毒效果試驗(yàn)對(duì)共40名的患者分為以下兩組。一組為每日單獨(dú)給予30mg克拉夫定的給藥組，共給藥24周(克拉夫定單獨(dú)組；n=20)。另一組為每日聯(lián)合給予30mg克拉夫定與IOmg阿德福韋酯，共給藥12周后，停止阿德福韋酯給藥，持續(xù)每天給予30mg克拉夫定的給藥組(克拉夫定+阿德福韋酯聯(lián)合組；n=20)。其結(jié)果為，在給藥12周時(shí)，克拉夫定單獨(dú)組的HBV DNA復(fù)制數(shù)為_(kāi)2. 671ogl0復(fù)制(copies)/mL,克拉夫定+阿德福韋酯聯(lián)合組為_(kāi)4. IlloglO復(fù)制/mL,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(p=0. 001)。在給藥24周時(shí)，克拉夫定單獨(dú)組為-4. 151ogl0復(fù)制/mL,克拉夫定+阿德福韋酯聯(lián)合組為-4. 971ogl0復(fù)制/mL，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(p=0. 036)。這說(shuō)明在對(duì)慢性乙型肝炎患者進(jìn)行初期治療時(shí)，無(wú)交叉抗性的克拉夫定+阿德福韋酯復(fù)合制劑的給藥比克拉夫定單獨(dú)給藥更能夠強(qiáng)烈抑制HBV增殖。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的克拉夫定及阿德福韋酯復(fù)合制劑組合物與單獨(dú)制劑相比，具有以下效果，使乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化，顯示出對(duì)耐藥病毒的相互抑制作用。因此尤其適合用于需要長(zhǎng)期治療的慢性乙型肝炎的治療中?！?br> 權(quán)利要求
1.一種用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，其含有克拉夫定及阿德福韋酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，其含有5 IOOmg的克拉夫定及5 30mg的阿德福韋酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，其含有l(wèi)(T30mg的克拉夫定及5 IOmg的阿德福韋酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，慢性乙型肝炎病毒為耐藥病毒。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，耐藥病毒為耐拉米夫定病毒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，耐拉米夫定病毒為顯示rtL180M、rtM204I或rtM204V變異的病毒。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，耐藥病毒為耐阿德福韋酯病毒。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，耐阿德福韋酯病毒為顯示rtA181V、rtA181T或rtN236T變異的病毒。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的用于治療慢性乙型肝炎病毒感染病的組合物，其特征在于，慢性乙型肝炎病毒為野生型乙型肝炎病毒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療慢性乙型肝炎的組合物，其含有克拉夫定及阿德福韋酯。本發(fā)明的復(fù)合制劑與單一成分的制劑相比，具有以下效果，使乙型肝炎病毒感染病的治療效果極大化，顯示出對(duì)耐藥性病毒的相互抑制作用。
文檔編號(hào)A61P31/12GK102917706SQ201180024843
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2011年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日
發(fā)明者李圣求, 李榮春 申請(qǐng)人:富光藥品株式會(huì)社