專利名稱：具有抗幽門螺旋桿菌活性的豌豆蛋白肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由胃腸道病原體,尤其是幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori),引起的感染的治療和/或預(yù)防。
背景技術(shù)：
胃腸道感染是許多人的主要問題，尤其是具有受損的免疫系統(tǒng)或胃腸道疾病的嬰兒和病人。所產(chǎn)生的疾病可能威脅生命。胃腸道感染經(jīng)常由大腸桿菌(Escherichia coli)、沙門氏菌(Salmonella)、彎曲桿菌(Campylobacter)、牙銀卩卜啉單胞菌(Porphyromonasgingivalis)、梭菌(Clostridium)、腸桿菌(Enterobacter)和螺旋桿菌(Helicobacter)(例如幽門螺旋桿菌)引起。幽門螺旋桿菌(H. pylori)是革蘭氏陰性、微量需氧的、有鞭毛的細(xì)菌，感染之后定殖在人的胃粘膜。已將幽門螺旋桿菌感染與嚴(yán)重的胃疾病關(guān)聯(lián)起來，例如胃炎、消化性潰瘍 和胃癌。幽門螺旋桿菌已被世界衛(wèi)生組織分類為I類致癌原。幽門螺旋桿菌感染通常是慢性的，并且沒有專門治療的話大多數(shù)不能痊愈。幽門螺旋桿菌感染主要在童年早期獲得。大多數(shù)兒童在生命最初5年內(nèi)被感染。到10歲時，在發(fā)展中國家總體患病率大于75%，而在發(fā)達(dá)國家10%的兒童被感染，但較低社會經(jīng)濟(jì)階層的兒童中患病率可以上升到30%-40%。關(guān)于通過抗生素治療和通過疫苗接種預(yù)防的問題，應(yīng)該預(yù)防幽門螺旋桿菌粘附并因此感染胃粘膜，最好通過飲食經(jīng)口干預(yù)。根除幽門螺旋桿菌感染的治療需要3到4種抗生素藥物療法。治療非常昂貴，并且有增加細(xì)菌菌株抗生素耐藥性和不成功治療后再次感染的風(fēng)險。對兒童進(jìn)行治療可能是降低感染發(fā)生率以及與幽門螺旋桿菌相關(guān)疾病有關(guān)的發(fā)病率和死亡率的最經(jīng)濟(jì)方法。到目前為止，在治療兒童的需求方面沒有指導(dǎo)方針。還沒有可用的人疫苗。預(yù)防和治療疫苗已經(jīng)在動物模型中成功，但是轉(zhuǎn)換到人疫苗仍然很難，部分是因?yàn)閷ξ傅拿庖邔W(xué)了解仍然很少。關(guān)于用抗生素治療和用疫苗接種預(yù)防的問題，應(yīng)該預(yù)防幽門螺旋桿菌粘附到胃粘膜。沒有所述細(xì)菌的粘附，導(dǎo)致胃炎或可能導(dǎo)致癌癥的相關(guān)炎癥的風(fēng)險可能最小。已經(jīng)證實(shí)，飲食調(diào)節(jié)可以在體內(nèi)和體外用于支持幽門螺旋桿菌感染的治療或預(yù)防。EP 1178104涉及一種包括特定精油和/或從所述精油分離的純的特定化合物的營養(yǎng)組合物，用于預(yù)防和治療螺旋桿菌樣生物體的感染。所述營養(yǎng)組合物還可以含有碳水化合物源、脂肪源和/或食用蛋白質(zhì)(dietary protein)源,豌豆蛋白是其中之一。JP 2005255679描述了一種通過用蛋白酶處理酪乳獲得的多肽，所述多肽不僅具有幽門螺旋桿菌到胃粘膜的粘附抑制效應(yīng)，還具有將幽門螺旋桿菌從幽門螺旋桿菌攜帶者的胃粘膜剝離的效應(yīng)。JP 2001335504描述了一種包括大豆蛋白的酶水解產(chǎn)物作為活性成分的幽門螺旋桿菌增殖抑制劑。
WO 2008/043424公開了一種用于治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體(尤其是幽門螺旋桿菌)感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的組合物。所述組合物包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物、完整豌豆蛋白和/或駝乳蛋白水解產(chǎn)物。公開了通過使用胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶進(jìn)行的水解獲得的豌豆蛋白水解產(chǎn)物。DE 10317935描述了酪蛋白用于制備用于預(yù)防或治療螺旋桿菌感染和用于預(yù)防由螺旋桿菌感染導(dǎo)致的疾病的組合物的用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種包括具體豌豆蛋白肽的組合物，用于治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病，所述感染尤其是由選自螺旋桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、牙齦卟啉單胞菌、彎曲桿菌、梭菌和腸桿菌的胃腸病原體引起的感染。本發(fā)明進(jìn)一步涉及具體豌豆蛋白水解產(chǎn)物(非胰凝乳蛋白酶水解產(chǎn)生)在制備用于治療和/或預(yù)防具體如上所述感染或疾病的組合物中的用途。本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，特定豌豆蛋白水解產(chǎn)物能夠抑制幽門螺旋桿菌粘附到胃粘膜細(xì)胞。對粘附的抑制使這些蛋白組分尤其適合用于治療和/或預(yù)防螺旋桿菌感染的方法。所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物已經(jīng)通過用胰蛋白酶水解豌豆蛋白分離物獲得。分離并鑒定了負(fù)·責(zé)對粘附的抑制的肽。本發(fā)明的肽 Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg (SEQID NO:I)和 Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg(SEQ ID NO:2)是豌豆豆球蛋白A和豌豆球蛋白的組成部分，被發(fā)現(xiàn)可以抑制幽門螺旋桿菌粘附到胃細(xì)胞。因?yàn)檫@些肽有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，所以所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物可以通過使用蛋白酶進(jìn)行的水解獲得(優(yōu)選通過胰蛋白酶，條件是所述蛋白酶不是胰凝乳蛋白酶)，或者通過使用蛋白酶制劑進(jìn)行的水解獲得(優(yōu)選為基本沒有胰凝乳蛋白酶活性的胰蛋白酶制劑)。本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽可以容易地添加到嬰兒配方、幼兒產(chǎn)品和年輕人產(chǎn)品中。該蛋白組分的容易且安全的應(yīng)用使得本發(fā)明特別重要，因?yàn)榭梢员荛_使用藥物時通常遇到的副作用的問題和昂貴的多藥物治療。本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽還適合被成人使用。本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽不必是單獨(dú)地給予(例如給予嬰兒)，而是可以在營養(yǎng)組合物內(nèi)共同給予。因?yàn)閶雰浩谥袃H母乳喂養(yǎng)的持續(xù)期延長可具有對抗慢性幽門螺旋桿菌感染和因此的胃癌風(fēng)險的長期保護(hù)效應(yīng)，所以尤其還需要保護(hù)接受嬰兒配方的嬰兒免受幽門螺旋桿菌感染。
具體實(shí)施例方式因此，本發(fā)明涉及一種用于治療和/或預(yù)防和/或減少哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的風(fēng)險的方法，所述方法包括給予所述哺乳動物包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物的組合物，條件是所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不是通過使用蛋白酶胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得。優(yōu)選地，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的。本發(fā)明還可以表述為一種包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物的組合物用于制備治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的組合物的用途，條件是所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不是通過使用蛋白酶胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得。本發(fā)明還可以表述為一種包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物的組合物，其可以用于治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病，條件是所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不是通過使用蛋白酶胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得。在一方面，本發(fā)明涉及一種用于治療和/或預(yù)防和/或減少哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的風(fēng)險的方法，所述方法包括給予所述哺乳動物包括至少一種肽的組合物，所述肽選自Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-ASn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是O-10的整數(shù)。本發(fā)明還可以表述為一種包括肽的組合物用于制備治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的組合物的用途，其中所述肽選自Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn_Arg-Xaam^P Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是0-10的整數(shù)。本發(fā)明還可以表述為一種包括至少一種肽的組合物，所述肽選自Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸,η和m獨(dú)立地是0_10的整數(shù)，所述組合物用于治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病。在另一方面，本發(fā)明還涉及一種含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和碳水化合物組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的15%-90%，其中所述蛋白質(zhì)組分包括(i)至少一種由豌豆蛋白水解產(chǎn)物組成的蛋白質(zhì)源，條件是所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不是通過使用蛋白酶胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解獲得，以及(ii)至少一種氮源，所述氮源選自乳蛋白、乳蛋白水解產(chǎn)物、卵蛋白、卵蛋白水解產(chǎn)物、大豆蛋白、大豆蛋白水解產(chǎn)物、小麥蛋白、小麥蛋白水解產(chǎn)物、稻蛋白、稻蛋白水解產(chǎn)物、游離氨基酸和它們的混合物。在又一方面，本發(fā)明涉及一種含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和碳水化合物組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的15%-90%，其中所述蛋白質(zhì)組分包括(i)至少一種肽，所述肽選自 Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個 Xaa 可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是0-10的整數(shù)，以及(ii)至少一種氮源，所述氮源選自乳蛋白、乳蛋白水解產(chǎn)物、卵蛋白、卵蛋白水解產(chǎn)物、大豆蛋白、大豆蛋白水解產(chǎn)物、小麥蛋白、小麥蛋白水解產(chǎn)物、稻蛋白、稻蛋白水解產(chǎn)物、游離氨基酸和它們的混合物。蛋白質(zhì)本發(fā)明提供了一種組合物及其用于本發(fā)明的治療的用途，其含有通過除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶獲得的豌豆蛋白水解產(chǎn)物。優(yōu)選地，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的，更優(yōu)選地，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用胰蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的。更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了胰蛋白酶水解獲得的特定豌豆蛋白降解妝，即 Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個 Xaa 可以獨(dú)立地是任何氣基酸，η和m獨(dú)立地是0-10的整數(shù)。因此，η和m可以獨(dú)立地是O、1、2、3、4、
5、6、7、8、9 或 10。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述肽 Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam中的每一種的計(jì)算分子量為IkDa到2. 5kDa，優(yōu)選為IkDa到2kDa，優(yōu)選為IkDa到1.5kDa。在一個實(shí)施方案中，η和m為O。因?yàn)檫@些肽有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，并且因?yàn)檫@些肽的較小片段被發(fā)現(xiàn)是沒有活性的，所以所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不能通過使用胰凝乳蛋白酶或通過使用胰蛋白酶加胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得。一旦吃下這些肽，它們將在人腸道中被進(jìn)一步降解。但是，因?yàn)橐饶榈鞍酌负推渌缸鳛轸然桶被拿钢辉谑改c釋放，所述肽仍然以其活性形式存在于胃中，即幽門螺旋桿菌主要存在的位置。因?yàn)檫@些肽還被發(fā)現(xiàn)來源自豌豆蛋白豆球蛋白A或豌豆球蛋白，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物優(yōu)選為通 過除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶而獲得的豌豆豆球蛋白A和/或豌豆球蛋白水解產(chǎn)物，其中所述蛋白酶優(yōu)選為胰蛋白酶。除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶商業(yè)制劑可能含有少量胰凝乳蛋白酶污染，因此可能顯示一些胰凝乳蛋白酶活性。對于制備本發(fā)明的水解產(chǎn)物這是可以接受的。少量的胰凝乳蛋白酶活性不會導(dǎo)致對所述SEQ ID NO: I和SEQ ID NO:2的肽的實(shí)質(zhì)水解。蛋白酶制劑尤其是胰蛋白酶制劑中的一些殘留胰凝乳蛋白酶活性被認(rèn)為只會影響包括序列SEQ ID NO: I或SEQ ID NO:2的水解產(chǎn)物中肽的產(chǎn)量。水解豌豆蛋白的方法是本領(lǐng)域中已知的。因此，優(yōu)選地，所述SEQ ID N0:1或SEQ ID NO:2的肽來源于豌豆蛋白，但是其還可以由不同的源提供。因此，在一個實(shí)施方案中，所述SEQ ID N0:1和/或SEQ IDN0:2的肽是以食品級蛋白的形式提供的。在一個實(shí)施方案中，所述SEQ ID N0:1和/或SEQID N0:2的肽是以豌豆蛋白水解產(chǎn)物的形式提供的。通過凝膠過濾色譜法(一種基于交聯(lián)的瓊脂/葡聚糖基質(zhì)的色譜方法)，測定了本發(fā)明蛋白水解產(chǎn)物中最有效的抗螺旋桿菌粘附的肽和/或復(fù)合糖(glycoconjugate)的分子量范圍。已發(fā)現(xiàn)，有效的抗螺旋桿菌粘附的肽在300-10000Da范圍內(nèi)。優(yōu)選地，有效的抗螺旋桿菌粘附的肽在500-5000Da范圍內(nèi)。因此，基于本發(fā)明蛋白水解產(chǎn)物的總重量計(jì)，本發(fā)明的蛋白水解產(chǎn)物優(yōu)選含有至少Iwt. %的分子量為300-10000Da的肽和/或復(fù)合糖(優(yōu)選為肽)，優(yōu)選為至少5wt. %，更優(yōu)選為至少50wt. %，最優(yōu)選為至少75wt. %。更優(yōu)選地，基于本發(fā)明蛋白水解產(chǎn)物的總重量計(jì)，本發(fā)明的蛋白水解產(chǎn)物包括至少Iwt. %的分子量為500-5000Da的肽和/或復(fù)合糖(優(yōu)選為肽)，優(yōu)選為至少5wt. %，更優(yōu)選為至少50wt. %，最優(yōu)選為至少75wt. %。除非另外指明，本文所提及的分子量是通過凝膠過濾色譜法測定的。所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物優(yōu)選以每天O. I-IOOg的量給予，優(yōu)選為每天O. 5-10g的量。所述本發(fā)明豌豆蛋白肽可以以較低劑量給予，即每天O. 005-50g的量，優(yōu)選為每天O. 05-5g 的量。最優(yōu)選地，本發(fā)明的豌豆肽是以豌豆蛋白水解產(chǎn)物的形式給予。或者，本發(fā)明的豌豆肽可以是合成的或是通過基因修改的(微)生物表達(dá)的。優(yōu)選地，所述組合物包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物，更優(yōu)選小于IOkDa的豌豆蛋白水解產(chǎn)物級分，更優(yōu)選小于7. 5kDa，因?yàn)榻o予所述水解產(chǎn)物在預(yù)防幽門螺旋桿菌粘附方面是最有效的。優(yōu)選的豌豆蛋白水解產(chǎn)物級分具有大約2kDa的平均分子量。優(yōu)選的豌豆蛋白水解產(chǎn)物級分在IkDa至2. 5kDa范圍內(nèi)具有高濃度。因此，優(yōu)選使用通過胰蛋白酶水解獲得的大小在I至2. 5kDa的豌豆肽。優(yōu)選地，基于豌豆蛋白水解產(chǎn)物的總重量計(jì)，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物包括多于35wt. %，更優(yōu)選地多于40wt. %的大小在IkDa至2. 5kDa的肽。胃腸病原體本發(fā)明的方法涉及哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的治療和/或預(yù)防，尤其是哺乳動物中選自螺旋桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、牙齦卟啉單胞菌、彎曲桿菌、梭菌和腸桿菌的胃腸病原體引起的感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的治療和/或預(yù)防。本發(fā)明特別提供用于哺乳動物中螺旋桿菌感染和/或與螺旋桿菌感染相關(guān)的疾病的治療和/或預(yù)防。所述螺旋桿菌優(yōu)選地選自幽門螺旋桿菌、Helicobacterbizzozeronii、H. salomonis、海爾曼螺桿菌(Helicobacter heilmannii)和貓胃螺桿菌(Helicobacter felis)。優(yōu)選地,本發(fā)明提供了對哺乳動物中幽門螺旋桿菌感染和/或與 幽門螺旋桿菌感染相關(guān)的疾病的治療和/或預(yù)防。食品組合物已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽可以有利地應(yīng)用于食物，例如嬰兒食品和臨床營養(yǎng)物，尤其是嬰兒營養(yǎng)物。本發(fā)明的營養(yǎng)組合物優(yōu)選地包括脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和碳水化合物組分。因此，本發(fā)明還涉及包括本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽的營養(yǎng)組合物及其在本發(fā)明的方法中的用途，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的15%-90%。本發(fā)明的組合物優(yōu)選地用作嬰兒配方，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的35%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的7. 5%-12. 5%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的40%-55%。為了計(jì)算所述蛋白質(zhì)組分在總卡路里的百分?jǐn)?shù)％，需要對蛋白質(zhì)、肽和氨基酸進(jìn)行總計(jì)。除本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽之外，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地含有額外的氮源，用于營養(yǎng)目的。所述額外的氮源優(yōu)選地選自蛋白質(zhì)、肽、氨基酸及它們的混合物。因此，在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物的蛋白質(zhì)成分包括(i)至少一種蛋白質(zhì)源，所述蛋白質(zhì)源選自不是通過胰凝乳蛋白酶水解獲得的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽；和(ii)至少一種氮源，所述氮源選自乳蛋白、卵蛋白、大豆蛋白、小麥蛋白、稻蛋白、游離氨基酸和它們的混合物。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包括(i)不是通過胰凝乳蛋白酶水解獲得的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽，以及(ii)至少一種氮源，所述氮源選自水解牛乳清、非水解牛乳清、水解牛酪蛋白、非水解牛酪蛋白和非水解大豆蛋白。優(yōu)選地，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過胰蛋白酶水解獲得的。當(dāng)本發(fā)明的蛋白質(zhì)成分(尤其是本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽)與額外的氮源組合給予時，基于蛋白質(zhì)總重量計(jì)，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包括0. l-50wt. %的本發(fā)明豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽，尤其是I-IOwt. %的本發(fā)明豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或跳 蛋白妝。當(dāng)本發(fā)明的蛋白質(zhì)成分(尤其是本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物)與額外的氮源組合給予時，基于蛋白質(zhì)總重量計(jì)，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包括l_50wt.%的本發(fā)明豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽，尤其是I-IOwt. %的本發(fā)明豌豆蛋白水解產(chǎn)物。
當(dāng)本發(fā)明的蛋白質(zhì)成分(尤其是本發(fā)明的豌豆蛋白肽)與額外的氮源組合給予時，基于蛋白質(zhì)總重量計(jì)，本發(fā)明的組合物優(yōu)選包括O. l-50wt. %的本發(fā)明豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽，尤其是O. I-IOwt. %的本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽?？上蕴妓衔镌纯梢蕴砑拥剿鰻I養(yǎng)配方中。本發(fā)明的組合物優(yōu)選地含有乳糖。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的蛋白質(zhì)成分(尤其是本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽)的抗胃腸病原體的抗感染作用，可通過與可溶、非消化性、可發(fā)酵的寡糖共同給予而提高。這些寡糖的給予可刺激乳酸菌(例如雙歧桿菌和乳酸桿菌)的生長，預(yù)防胃腸病原體的定殖和感染。因此，本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽以及本發(fā)明的寡糖在這方面起協(xié)同作用。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包括聚合度(DP)在2-250，更優(yōu)選3_60之間的非消化性寡糖。所述非消化性寡糖優(yōu)選地選自低聚果糖(例如菊粉)、低聚半乳糖(例如反式低聚半乳糖或β低聚半乳糖)、低聚葡糖(例如低聚龍膽二糖、低聚黑曲霉糖和環(huán)糊精寡糖)、低聚阿 拉伯糖、低聚甘露糖、低聚木糖、低聚巖藻糖、低聚阿拉伯半乳糖、低聚葡甘露糖、低聚半乳甘露糖、包括唾液酸的寡糖和糖醛酸寡糖。優(yōu)選地，所述組合物包括與非消化性寡糖結(jié)合的阿拉伯樹膠。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包括低聚果糖、低聚半乳糖和/或半乳糖醛酸寡糖，更優(yōu)選低聚半乳糖，最優(yōu)選反式低聚半乳糖。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物包括反式低聚半乳糖和低聚果糖的混合物。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包括聚合度為2-10的低聚半乳糖和/或聚合度為2-60的低聚果糖。所述低聚半乳糖優(yōu)選地選自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、巖藻糖乳糖、巖藻糖基化的LNT和巖藻糖基化的neo-LNT。在一個特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括給予反式低聚半乳糖([半乳糖]n_葡萄糖；其中η為1-60的整數(shù)，即2、3、4、5、6、…、59、60 ;優(yōu)選地，η選自2、
3、4、5、6、7、8、9 或 10)。例如，有以 Vivinal (Borculo Domo Ingredients, Netherlands)商標(biāo)銷售的反式低聚半乳糖(T0S)。優(yōu)選地，所述反式低聚半乳糖的糖是β連接的。低聚果糖是包括β連接的果糖單元鏈的非消化性寡糖，其聚合度或平均聚合度為2-250，更優(yōu)選10-100。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合型的多聚果糖。一種尤其優(yōu)選的低聚果糖是菊粉。適合用于所述組合物的低聚果糖也已經(jīng)是可以市購的，例如
HP (Orafti)0糖醛酸寡糖優(yōu)選地通過果膠降解獲得。糖醛酸寡糖優(yōu)選地為半乳糖醛酸寡糖。因此，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包括聚合度在2-100的果膠降解產(chǎn)物。優(yōu)選地，所述果膠降解產(chǎn)物是用蘋果果膠、甜菜果膠和/或柑橘果膠制備。優(yōu)選地，所述組合物包括反式低聚半乳糖、低聚果糖和果膠降解產(chǎn)物。反式低聚半乳糖低聚果糖果膠降解產(chǎn)物的重量比優(yōu)選地為(20-2) : I: (1-3)，更優(yōu)選(12-7) : I: (1-2)。優(yōu)選地，所述糖醛酸寡糖具有一個(優(yōu)選兩個)末端糖醛酸單元，其可以是游離的或酯化的。優(yōu)選地，所述末端糖醒酸單元選自半乳糖醒酸(galacturonic acid)、葡糖醒酸(glucuronic acid)、古洛糖醒酸(guluronic acid)、艾杜糖醒酸(iduronic acid)、甘露糖醒酸(mannuronic acid)、核糖醒酸(riburonic acid)和阿卓糖醒酸(altruronicacid)。這些單元可以是游離的或酯化的。在一個甚至更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述末端己糖單元(即糖醛酸)具有雙鍵，其優(yōu)選地位于末端己糖單元的C4和C5位置之間。優(yōu)選地，所述末端己糖單元之一包括所述雙鍵。這些糖醛酸單元中的所述羧酸基團(tuán)可以是游離的或(部分)酯化的，優(yōu)選地是至少部分甲基化的。用于本發(fā)明的糖醛酸寡糖優(yōu)選地制備自果膠、果膠酸鹽、藻酸鹽、軟骨素、透明質(zhì)酸、肝素、乙酰肝素、細(xì)菌碳水化合物、唾液酸聚糖(sialoglycans)、巖藻依聚糖(fucoidan)、低聚巖藻糖或角叉菜膠，更優(yōu)選地制備自果膠和/或藻酸鹽。所述糖醛酸寡糖優(yōu)選地是通過使用裂解酶、裂合酶和/或多聚半乳糖醛酸內(nèi)切酶的酶法消化而制備。優(yōu)選地，使用果膠的水解產(chǎn)物或裂解產(chǎn)物。所述糖醛酸寡糖優(yōu)選地是通過用果膠裂解酶、果膠裂合酶、多聚半乳糖醛酸內(nèi)切酶和/或果膠酶對果膠進(jìn)行酶法消化而獲得。該糖醛酸寡糖可預(yù)防腸病原體的粘附。包括本發(fā)明的豌豆蛋白肽/水解產(chǎn)物和所述糖醛酸寡糖的組合物將具有提高的抗幽門螺旋桿菌作用。一種優(yōu)選的寡糖是唾液酸乳糖，更優(yōu)選3’ -唾液酸乳糖，因?yàn)檫@種寡糖也干擾幽·門螺旋桿菌粘附。額外包括唾液酸乳糖(優(yōu)選3’ -唾液酸乳糖)的本發(fā)明組合物因此將具有提高的抗幽門螺旋桿菌作用。優(yōu)選地,所述組合物每IOOml包括80mg到2g非消化性寡糖,更優(yōu)選每IOOml包括150mg到I. 50g,甚至更優(yōu)選每IOOml包括300mg到lg?；诟芍赜?jì),所述組合物優(yōu)選地包括 O. 25wt. % 到 20wt. %,更優(yōu)選 O. 5wt. % 到 IOwt. %,甚至更優(yōu)選 I. 5wt. % 到 7. 5wt. %。因此，在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種組合物，所述組合物包括選自反式低聚半乳糖、低聚果糖、糖醛酸寡糖和唾液酸乳糖的非消化性寡糖，以及a)豌豆蛋白水解產(chǎn)物，條件是所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物不是通過使用蛋白酶胰凝乳蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的，或者優(yōu)選通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的豌豆蛋白水解產(chǎn)物；和/或b)至少一種妝，所述妝選自 Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam，其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是O-10的整數(shù)。大便不規(guī)則(例如硬大便、大便量不足、腹瀉)是具有幽門螺旋桿菌感染或幽門螺旋桿菌感染風(fēng)險的許多嬰兒和生病受試者中的特別問題。這些受試者經(jīng)常接受液體食品。已發(fā)現(xiàn)，大便問題可以通過在液體食品中給予本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物成分和/或豌豆蛋白肽而減少，所述液體食品的重量克分子滲透壓濃度為50-500m0sm/kg,更優(yōu)選100-400m0sm/kg。當(dāng)本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽與抗生素治療一起使用或在抗生素治療之后使用時，大便問題的預(yù)防尤其重要。鑒于以上所述，同樣重要的是所述液體食品不具有過量的卡路里密度，但仍然提供足夠卡路里以喂養(yǎng)受試者。因此，所述液體食品優(yōu)選的卡路里密度為O. 1-2. 5kcal/ml，甚至更優(yōu)選的卡路里密度為O. 5-1. 5kcal/ml,最優(yōu)選 O. 6-0. 8kcal/ml。應(yīng)思本發(fā)明提供了一種用于治療和/或預(yù)防哺乳動物(優(yōu)選人受試者)中胃腸病原體(尤其是幽門螺旋桿菌)感染和/或與胃腸病原體(尤其是幽門螺旋桿菌)感染相關(guān)的疾病的組合物和方法，所述方法包括將本發(fā)明的豌豆蛋白水解產(chǎn)物和/或豌豆蛋白肽給予所述哺乳動物或人受試者。在人中與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病包括持續(xù)性慢性胃炎、腹瀉、腹痛、潰瘍和/或胃癌。在人中與幽門螺旋桿菌感染相關(guān)的疾病包括持續(xù)性慢性胃炎、潰瘍和/或胃癌。本發(fā)明還提供了在哺乳動物(優(yōu)選處于換這些疾病的風(fēng)險中或需要治療的人受試者)中對這些疾病的治療和/或預(yù)防。本發(fā)明涉及哺乳動物中(優(yōu)選人或?qū)櫸?companion animal),更優(yōu)選人)中的治療和/或預(yù)防。本發(fā)明的組合物可有利地給予a)年齡在0-5歲的嬰兒，優(yōu)選0-2歲的嬰兒，和/或b)患有胃十二指腸疾病的患者，尤其是患有消化性潰瘍的患者。本發(fā)明還特別適合于在用一種或多種抗生素治療哺乳動物后，預(yù)防胃腸病原體(尤其是幽門螺旋桿菌)的再次感染。實(shí)施例I :豌豆蛋白水解產(chǎn)物級分抑制幽門螺旋桿菌粘附到胃粘膜I. I :抗粘附測定幽門螺旋桿菌ATCC 700824 (J99)被培養(yǎng)2或3代，以最小化OMP基因的相變轉(zhuǎn)換(phase-variable switching)的風(fēng)險。將幽門螺旋桿菌在補(bǔ)充5%去纖維蛋白綿 羊血(Oxoid, UK)的膜蛋白酶大豆瓊脂(Trypic Soy Agar, Becton Dickinson, Germany)上，于微量需氧條件和37°C下孵育48小時。將人胃上皮細(xì)胞(AGS細(xì)胞)在組織培養(yǎng)瓶(75cm2’Sarstedt, USA)和六孔板(Sarstedt, USA)中補(bǔ)充 10%FCS 的有 L-谷氨酰胺的 RPMI1640 (PAA, Germany)中，于 5%C02 中培養(yǎng)。將瓊脂上培養(yǎng)的幽門螺旋桿菌收獲并重懸在無菌碳酸鹽緩沖液(pH 9. 0)中，至密度為每ml中約I. OX IO8個細(xì)菌。加入10 μ I FITC溶液(1%在DMSO中)，與所述細(xì)菌孵育45分鐘。通過將所述細(xì)菌沉淀(3150 X g，5min)來終止熒光標(biāo)記。將細(xì)菌在PBS中洗滌兩次，以去除過量的FITC并輕輕重懸備用。關(guān)于測試化合物針對AGS細(xì)胞上FITC標(biāo)記幽門螺旋桿菌的抗粘附活性的體外試驗(yàn)是通過流式細(xì)胞計(jì)數(shù)方法(Niehues&Hensel, 2009J. Pharm. Pharamcol. 61:1303-1307)完成的。I. 2所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物的生物測定指導(dǎo)的分級分離將50g豌豆蛋白分離物(Nutralys F85F,84%w/w蛋白質(zhì)，來自RoquetteFreres (Lestrem, France))溶解在50°C的I. 5L蒸懼水中。通過加入0. 56g膜蛋白酶(NovoPTN 6. OS, Novozymes A/S, Bagsvaerd, Denmark)開始水解。通過加入NaOH將pH控制在 7· O。使所述反應(yīng)持續(xù)2小時。通過在85°C下維持5分鐘熱滅活所述酶而停止所述過程。通過在20°C下以3800g離心20分鐘將沉淀材料沉淀，并將上清在板框裝置中用700cm2 IOkDaNMWCO PES 膜(UltranLab, Schleicher&Schuell, Dassel, Germany)超濾。將滲余物凍干并用于所述豌豆蛋白肽的進(jìn)一步分離。如I. I所述測定抗幽門螺旋桿菌的活性。豌豆蛋白本身沒有顯示任何針對幽門螺旋桿菌的抗粘附活性。在將所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物超濾后，在滲余物級分中發(fā)現(xiàn)抗粘附活性(用0. 5mg/ml有56%細(xì)菌粘附)，在滲透物級分沒有發(fā)現(xiàn)抗粘附活性。使用填充有Toyopearl HW-50S (Tosoh Bioscience GmbH,Stuttgart, Germany)的42X5. Ocm ID柱通過分子排阻色譜法(SEC)將所述IOkDa滲余物分級分離。含有2% (v/v)2-丙醇的0. IM碳酸氫銨用作流動相。在4°C下以4ml/min的流速操作柱子。在UV 220nm下監(jiān)測洗脫化合物，以7ml間隔收集級分并合并以得到4個主要級分，即Fl到F4。Fl洗脫體積為約0-220ml，在0. 5mg/ml下顯示出76%的粘附，F(xiàn)2洗脫體積為約220-310ml，在O. 5mg/ml下顯示出94%的粘附活性，F(xiàn)3洗脫體積為約310_500ml，在O. 5mg/ml下顯示出25%的粘附活性，F(xiàn)4洗脫體積為約500_720ml，在O. 5mg/ml下顯示出118%的粘附活性。F3的進(jìn)一步純化是使用填充有Am丨KTChnmi. CG-161S樹脂(TosohBioscience GmbH, Stuttgart, Germany)的 11. 8X1. Ocm ID 柱通過反相色譜法(RPC)實(shí)現(xiàn)的。使用的流動相為在蒸餾水中O. 1%(ν/ν)的TFA (A)和在2-丙醇中O. 1%(ν/ν)的TFA(B)。用從5%B開始到60%B的線性梯度以7個柱體積，流速O. 85ml/min, UV 220nm完成洗脫。以每個4ml收集級分并合并以獲得三個主要級分F3. I到F3. 3。在進(jìn)一步分析前凍干所述級分。F3. I洗脫體積為約3-33ml，在O. 5mg/ml下顯示出109%的粘附活性，F(xiàn)3. 2洗脫體積為約33-54ml，在O. 5mg/ml下顯示出112%的粘附活性，F(xiàn)3. 3洗脫體積為約54_85ml，在
O.5mg/ml下顯示出40%的粘附活性,O. 2mg/ml下顯示出70%的粘附活性,O. lmg/ml下顯示·出78%的粘附活性。分子大小分布是用校準(zhǔn)Superdex 妝 10/300GL (Calibration Superdex Peptide10/300 GL, Amersham Biosciences Cat. No. 17-5176-01)測定的。將 2%w/v 的樣品(離心后的上清液)稀釋于30%CAN/水的O. 1%TFA溶液中。通過UV在214nm下檢測肽。大小分布
(總面積的百分?jǐn)?shù))如下
(.PCI i ’2 (,!>(\\\ (,}*( I'I
分子量范_ (Α0622)(Α0623) (Α0624)(Α0625)
......>.....IOkDa....................................................................................37......................................................................................................IM................................................................0:0......................................................................5:0..................................................................
IOkDa <>7,5 kDa 3,915,2 1 2OJ
7.5 kDa < > 5 kDa^ ^ΓΠβ16^9 MOA
TkDa^Tfsl^^ 6323^943
29^8173 463
I kDa < > 0.5 kDa^^Π39^8 16^223^6
< 0.5 kDa 10J50^6因此，級分F3的平均分子量為約2kDa，肽的最高量在IkDa至2. 5kDa范圍內(nèi)。I. 3所述肽的鑒定為清楚地鑒定活性肽，通過MALDI-T0F-T0F串MS分析研究了級分F3. I、F3. 2和F3.3。存在于活性級分中、但不存在于無活性混合物中的肽信號被特別地選擇，用于后續(xù)的基于串聯(lián)MS的氨基酸測序。6種肽序列(SI到S6)被通過該方法測定(序列在表I給出)，并清楚地被具有整合的Paragon 算法的ProteinPilot 軟件套件(AppliedBiosystems, Darmstadt, Germany)鑒定。選擇如下的參數(shù)以使得可以通過所述Paragon 算法將所述氨基酸指定到MALDI串聯(lián)MS數(shù)據(jù)中樣品類型鑒定；半胱氨酸烷基化無；消化胰蛋白酶；儀器4800 ;特殊因子 無;種類無限制；ID焦點(diǎn)生物修飾；數(shù)據(jù)庫=Uniprot/Swiss-Prot (包括污染物數(shù)據(jù)庫的2007年I月23日的版本，二者都為FASTA格式)；搜索力度完全。肽SI到S6被鑒定為來自豌豆豆球蛋白A或豌豆球蛋白的肽片段。隨后，合成各種肽以進(jìn)一步清楚地測試抗粘附性質(zhì)(Thermo Fisher Scientific (Ulm, Germany))。十一肽S3被發(fā)現(xiàn)是最大活性的化合物，顯著地減少幽門螺旋桿菌的粘附分別達(dá)81%和83% (75resp. 150 μ M 對應(yīng)于 O. lresp. O. 2mg/ml)。還有 S5，其抑制粘附達(dá) 6% 到 17%(75resp. 150 μ mo I),是從豌豆蛋白胰蛋白酶消化獲得的活性肽中被評估的兩個。
表I :肽SI到S6和合成肽S3A到S3H的序列，以及在以所述各個肽預(yù)處理后所述細(xì)菌后FITC標(biāo)記的幽門螺旋桿菌對AGS細(xì)胞的粘附平均值(土SEM)。數(shù)據(jù)涉及未處理的幽門螺旋桿菌對照(=100%)。陽性對照3’唾液酸乳糖(15mM)。
權(quán)利要求
1.一種包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物的組合物用于制備治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的組合物的用途，其中所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解而獲得的。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其中所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過水解豌豆蛋白豆球蛋白A或豌豆球蛋白獲得的。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的用途，其中所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用蛋白酶胰蛋白酶進(jìn)行的水解獲得的。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，其中基于所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物的總重量計(jì)，所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物具有多于35wt. %的大小在I至2. 5kDa之間的肽。
5.一種包括肽的組合物用于制備治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體感染和/或與胃腸病原體感染相關(guān)的疾病的組合物的用途，其中所述肽選自Xaa^Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是0_10的整數(shù)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中所述肽被包括于豌豆蛋白水解產(chǎn)物中。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，其中所述胃腸病原體選自螺桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、彎曲桿菌、牙齦卟啉單胞菌、梭菌和腸桿菌。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其中所述病原體為螺旋桿菌，更優(yōu)選為幽門螺旋桿菌。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，其中所述與感染相關(guān)的疾病選自胃炎、消化性潰瘍和胃癌。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，其中所述哺乳動物為(i)年齡在0-5歲的嬰兒或(ii)患有胃十二指腸疾病的患者。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，用于在用一種或多種抗生素治療所述哺乳動物后預(yù)防所述病原體的再次感染。
12.—種含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和碳水化合物組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的15%-90%，其特征在于，所述蛋白質(zhì)組分包括(i)至少一種由豌豆蛋白水解產(chǎn)物組成的蛋白質(zhì)源，其中所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解獲得的，以及(ii)至少一種氮源，所述氮源選自乳蛋白、乳蛋白水解產(chǎn)物、卵蛋白、卵蛋白水解產(chǎn)物、大豆蛋白、大豆蛋白水解產(chǎn)物、小麥蛋白、小麥蛋白水解產(chǎn)物、稻蛋白、稻蛋白水解產(chǎn)物、游離氨基酸和它們的混合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的組合物，其中所述豌豆蛋白水解產(chǎn)物是通過使用蛋白酶胰蛋白酶進(jìn)行的水解獲得的。
14.一種含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和碳水化合物組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總卡路里的5%-50%，所述碳水化合物組分提供總卡路里的15%-90%，其特征在于，所述蛋白質(zhì)組分包括(i)至少一種由肽組成的蛋白質(zhì)源，所述肽選自 Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個 Xaa 可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是0-10的整數(shù)，以及(ii)至少一種氮源，所述氮源選自乳蛋白、乳蛋白水解產(chǎn)物、卵蛋白、卵蛋白水解產(chǎn)物、大豆蛋白、大豆蛋白水解產(chǎn)物、小麥蛋白、小麥蛋白水解產(chǎn)物、稻蛋白、稻蛋白水解產(chǎn)物、游離氨基酸和它們的混合物。
15.根據(jù)權(quán)利要求12-14的任一項(xiàng)所述的組合物，其包括選自水解牛乳清、非水解牛乳清、水解牛酪蛋白、非水解牛酪蛋白、水解大豆蛋白和非水解大豆蛋白中的至少一種。
16.根據(jù)權(quán)利要求12-15的任一項(xiàng)所述的組合物，其包括可溶、非消化性、可發(fā)酵的寡糖。
17.一種組合物，包括選自反式低聚半乳糖、低聚果糖、糖醛酸寡糖和唾液酸乳糖的非消化性寡糖，以及 a.豌豆蛋白水解產(chǎn)物，其是通過使用除胰凝乳蛋白酶之外的蛋白酶進(jìn)行的水解獲得的；和/或 b.至少一種妝，所述妝選自Xaan-Asp-Phe-Leu-Glu-Asp-Ala-Phe-Asn-Val-Asn-Arg-Xaam 和 Xaan-Glu-Leu-Ala-Phe-Pro-Gly-Ser-Ala-Gln-Glu-Val-Asp-Arg-Xaam,其中每個Xaa可以獨(dú)立地是任何氨基酸，η和m獨(dú)立地是O-10的整數(shù)。
18.根據(jù)權(quán)利要求12-17的任一項(xiàng)所述的組合物，其具有50-500m0sm/kg的重量克分子滲透壓濃度。
19.根據(jù)權(quán)利要求12-18的任一項(xiàng)所述的組合物，其為營養(yǎng)組合物或藥物組合物的形式。
20.根據(jù)權(quán)利要求12-19的任一項(xiàng)所述的組合物，用于在哺乳動物中用于治療和/或預(yù)防胃腸病原體感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病，所述胃腸病原體優(yōu)選為幽門螺旋桿菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包括豌豆蛋白水解產(chǎn)物的組合物，用于治療和/或預(yù)防哺乳動物中胃腸病原體(尤其是幽門螺旋桿菌)感染和/或與所述胃腸病原體感染相關(guān)的疾病。
文檔編號A61P1/04GK102917724SQ201180026542
公開日2013年2月6日 申請日期2011年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月29日
發(fā)明者G·E·格奧爾基, M·歐拉, M·曼克, A·亨澤, M·尼許斯, M·克拉佩里希, B·斯塔爾 申請人:N·V·努特里奇亞