專利名稱：聚-n-乙酰葡萄糖胺納米纖維的抗菌應(yīng)用的制作方法
聚-N-乙酰葡萄糖胺納米纖維的抗菌應(yīng)用本申請要求2010年4月15日提交的美國臨時申請61/324，657的優(yōu)先權(quán)，其通過引用整體結(jié)合到本文中。1.領(lǐng)域本文描述了包含縮短的聚-N-乙酰葡萄糖胺和/或其衍生物的纖維(“sNAG納米纖維”)的組合物和所述組合物的抗菌應(yīng)用?？蓪NAG納米纖維配制成用于預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染和與這類感染有關(guān)的疾病的組合物。還描述了應(yīng)用這類組合物的方案。2.背景目前，抗生素是細(xì)菌感染的標(biāo)準(zhǔn)療法。然而，一些個體對某些抗生素有變態(tài)反應(yīng)，其他個體卻遭受到與抗生素有關(guān)的副作用，而且連續(xù)使用抗生素常常導(dǎo)致其效力降低。另夕卜，抗生素療法常常導(dǎo)致細(xì)菌的抗生素抗性菌株的出現(xiàn)。因此，不斷需要在不產(chǎn)生抗性或不隨時間變化而降低效力的情況下對于對抗感染是有效的新的抗菌劑。例如在皮膚、消化道和呼吸道感染性疾病治療中及在傷口治療中，需要可用于臨床情況下的非抗生素類抗菌劑。傷口感染是細(xì)菌感染的一種類型。傷口感染是嚴(yán)重問題，尤其在患有慢性病(例如糖尿病)或免疫抑制期間的患者中。這類患者的適當(dāng)炎癥反應(yīng)(包括嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的遷移和募集)被破壞，這使患者易患更重的感染(Singer，A.J.和R.A.Clark，1999，N Engl J Med 341(10):738-46)。另外，細(xì)菌感染可導(dǎo)致傷口愈合減弱和膿毒癥。鑒于許多現(xiàn)有抗生素治療不起作用，以及抗生素抗性細(xì)菌例如MRSA(耐甲氧西林(Methycillin)金黃色葡萄球菌(S.aureus))盛行，因此十分需要新的臨床治療。3.概沭
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一方面，本文描述了用于治療和/或預(yù)防對象的細(xì)菌感染和/或與細(xì)菌感染有關(guān)的或由細(xì)菌感染引起的疾病的方法。在某些實施方案中，本文描述了用于治療對象的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予對象。在一些實施方案中，診斷患有細(xì)胞感染或者出現(xiàn)一種或多種細(xì)菌感染癥狀的對象。診斷細(xì)菌感染和細(xì)菌感染癥狀的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或本文中有描述。細(xì)菌感染可以是皮膚感染、胃腸感染、呼吸道感染、尿路感染、生殖道感染或本文所述對象體內(nèi)任何其它器官或組織的感染。在一個實施方案中，感染為醫(yī)院內(nèi)感染、MRSA感染、假單胞菌(Pseudomonas)感染或艱難梭菌(C.dificule)感染。在某些實施方案中，本文描述了用于治療和/或預(yù)防與對象的細(xì)菌感染或細(xì)菌失衡有關(guān)的疾病的方法，所述方法包括將包含SNAG納米纖維的組合物局部給予對象。在一個這樣的實施方案中，所述方法包括治療和/或預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病。在另一個實施方案中，所述方法包括治療和/或預(yù)防與細(xì)胞失衡有關(guān)的疾病，例如本文所述的細(xì)胞微生物叢(bacterial microbiota)失衡。在某些實施方案中，所述方法包括治療現(xiàn)有的細(xì)菌感染。在這些實施方案的一些中，待接受治療的對象被診斷患有與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或者出現(xiàn)這類疾病的一種或多種癥狀。在其它實施方案中，待接受治療的對象被診斷患有與細(xì)胞失衡有關(guān)的疾病或者出現(xiàn)這類失衡的一種或多種癥狀。所述疾病可為皮膚疾病、胃腸道疾病、呼吸道疾病、尿路疾病、生殖道疾病或本文所述的對象體內(nèi)任何其它器官或組織的疾病。在一些實施方案中，所述疾病為皮膚疾病或胃腸道疾病。在一個實施方案中，所述疾病與醫(yī)院內(nèi)感染、MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染有關(guān)。在一些實施方案中，本文描述了用于預(yù)防細(xì)菌感染和/或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，所述方法包括將包含SNAG納米纖維的組合物局部給予對象。在一些實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物給予存在細(xì)菌感染高風(fēng)險的對象以預(yù)防細(xì)菌感染相關(guān)疾病。在具體實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物給予有傷口的對象或經(jīng)歷手術(shù)的對象。在一個實施方案中，將組合物給予無免疫應(yīng)答的對象。在一些實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物施予傷口，其中所述傷口存在細(xì)菌感染的高風(fēng)險。在某些實施方案中，傷口是開放性傷口。開放性傷口可為槍彈傷、刺傷、撕裂傷、擦傷、割傷、貫通傷、手術(shù)創(chuàng)傷或任何其它創(chuàng)傷。在某些實施方案中，傷口可為刺傷，例如血液透析術(shù)或?qū)Ч懿迦胄g(shù)造成的刺傷。在這類實施方案中，待接受治療的對象可被診斷患有血液透析相關(guān)感染或?qū)Ч懿迦胂嚓P(guān)感染。在一個實施方案中，通過sNAG組合物預(yù)防的細(xì)菌感染和/或細(xì)菌感染相關(guān)疾病不在傷口(例如開放性傷口)部位或與傷口無關(guān)。在一個這樣的實施方案中，細(xì)菌感染和/或細(xì)菌感染相關(guān)疾病不處于傷口部位(例如不處于開放性傷口部位)。在一些實施方案中，本文描述了用于治療對象的被細(xì)菌感染的傷口的方法，所述方法包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予對象的傷口部位。在一些實施方案中，待接受治療的對象被診斷患有細(xì)菌感染或者出現(xiàn)一種或多種細(xì)菌感染的癥狀。在某些實施方案中，傷口是開放性傷口。開放性傷口可為槍彈傷、刺傷、撕裂傷、擦傷、割傷、貫通傷、手術(shù)創(chuàng)傷或任何其它創(chuàng)傷。在某些實施方案中，傷口可為刺傷，例如血液透析術(shù)或?qū)Ч懿迦胄g(shù)造成的刺傷。在這類實施方案中，待接受治療的對象可被診斷患有血液透析相關(guān)感染或?qū)Ч懿迦胂嚓P(guān)感染。待使用本文所述方法治療或預(yù)防的細(xì)菌感染包括一種或多種下列屬的細(xì)菌感染:鮑特氏菌屬(Bordetella)、疏螺旋體屬(Borrelia)、布魯氏菌屬(Bruucella)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)、衣原體屬(Chlamydia)和 Clamidophylia、棱菌屬(Clostridium) >棒桿菌屬(Corynebacterium)、腸`球菌屬(Enterococcus)、埃希氏菌屬(Escherichia)、弗朗西絲氏菌屬(Francisella)、嗜血菌屬(Haemophilus)、螺桿菌屬(Helicobacter) >軍團(tuán)菌屬(Legionella)、鉤端螺旋體屬(Leptospira)、李斯特氏菌屬(Listeria)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)、枝原體屬(Mycoplasma)、奈瑟氏球菌屬(Neisseria)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、立克次氏體屬(Rickettsia)、沙門氏菌屬(Salmonella)、志賀氏菌屬(Shigella)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、密螺旋體屬(Treponema)、弧菌屬(Vibria)和耶爾森氏菌屬(Yersinia)。在一些實施方案中，sNAG組合物可用于治療和/或預(yù)防與被來自一種或多種所列細(xì)菌屬的細(xì)菌感染的有關(guān)疾病或者其一種或多種癥狀。待使用本文所述方法治療或預(yù)防的細(xì)菌感染還包括被一種或多種下列菌種的細(xì)菌感染:炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)、百日咳鮑特氏菌(Bordetellapertussis)、布氏疏螺旋體(Borrelia burgdorferi)、流產(chǎn)布魯氏菌(Brucella abortus) >狗布魯氏菌(Brucella canis)、馬耳他布魯氏菌(Brucella melitensis)、豬布魯氏菌(Brucella suis)、空腸彎曲桿菌(Campylobacter jejuni)、肺炎衣原體(Chlamydiapneumonia)、沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis)、嬰鳥踏熱衣原體(Clamidophilapsittaci)、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)、艱難梭菌(Clostridium difficule) >產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)、破傷風(fēng)梭菌(Clostridium tetani)、白喉棒桿菌(Cotynebacterium diphtheriae)、幾腸球菌(Enterococcus faecailis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、大腸桿菌(Escherichia coli)、土拉熱弗朗西絲氏菌(Francisella tularensis)、流感嗜血菌(Haemophilus influenae)、幽門螺桿菌(Helicobacter Pylori)、嗜肺軍團(tuán)菌(Legionella pneumphila)、肺炎性鉤端螺旋體(Leptospira pneumophila)、問號鉤端螺旋體(Leptospira interrogans)、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、麻風(fēng)分枝桿菌(Mycobacterium leprae)、結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)、肺炎枝原體(Mycoplasma pneumoniae)、淋病奈瑟氏球菌(Neisseria gonorrhoeae)、腦膜炎奈瑟氏球菌(Neisseria meningitides)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、奇異變形菌(Proteus mirabilis)、立氏立克次氏體(Rickettsia rickettsii)、傷寒沙門氏菌(Salmonella typhi)、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)、宋內(nèi)氏志賀氏菌(Shigella sonnei)、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、腐生葡萄球菌(Staphylococcussaprophyticus)、非解乳糖鏈球菌(Streptococcus agalactiae)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumonia)、釀月農(nóng)鏈球菌(Streptococcus pyogenes)、蒼白密螺旋體(Treponema pallidum)、霍亂弧菌(Vibria cholerae)和鼠疫耶爾森氏菌(Yersiniapestis)。在一些實施方案中，sNAG組合物可用于治療和/或預(yù)防與被來自一種或多種上列細(xì)菌菌種感染有關(guān)的疾病或者其一種或多種癥狀。在某些實施方案中，待采用本文所述方法治療或預(yù)防的細(xì)菌感染為MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染。在一些實施方案中，sNAG組合物可用于治療和/或預(yù)防與MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染有關(guān)的疾病或者其一種或多種癥狀。在某些實施方案中，待采用本文所述方法治療或預(yù)防的細(xì)菌感染是由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的 對標(biāo)準(zhǔn)抗菌療法有抗性(例如抗一種或多種抗生素)的細(xì)菌引起的。在一個實施方案中，待采用本文所述方法治療或預(yù)防的細(xì)菌感染是MRSA，例如醫(yī)院內(nèi)MRSA。在一些實施方案中，sNAG組合物可用于治療和/或預(yù)防與由抗一種或多種抗生素的細(xì)菌引起的感染有關(guān)的疾病。在一個實施方案中，sNAG組合物可用于治療和/或預(yù)防與MRSA(例如與醫(yī)院內(nèi)MRSA)有關(guān)的疾病。待使用本文所述方法治療的對象可為哺乳動物，優(yōu)選人。對象還可為家畜動物(例如雞、牛、豬、山羊)或?qū)櫸?例如狗或貓)或任何其它動物。本文所述方法中考慮的sNAG納米纖維可具有如下文第5.1部分所述的不同的長度、寬度和分子量。在某些實施方案中，大部分(在某些實施方案中，至少或超過60%、70%、80%、90%、95%或99% )的sNAG納米纖維或100%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間。在一些實施方案中，大部分(在某些實施方案中，至少或超過60%、70%、80%、90%、95%或99% )的sNAG納米纖維或100%的sNAG納米纖維的長度介于約2至10 μ mp之間，或介于4至7 μ m之間?？砂凑绽缦挛闹械?.2節(jié)中所述獲得所需長度的sNAG納米纖維。在某些實施方案中，通過照射(例如Y照射)聚-N-乙酰葡萄糖胺或其衍生物來產(chǎn)生sNAG納米纖維。在一些實施方案中，通過照射呈干燥纖維形式的聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺(例如以500-2，OOOkgy)，或照射呈濕纖維形式的聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺(例如以100-500kgy)，來產(chǎn)生sNAG納米纖維。在某些實施方案中，sNAG納米纖維來源于微藻類。在另一個實施方案中，sNAG納米纖維非來源于甲殼動物。在又一個實施方案中，sNAG納米纖維可來源于微藻類、甲殼動物(例如蝦)、真菌或任何其它來源。在一個實施方案中，sNAG納米纖維包含N-乙酰葡萄糖胺單糖和/或葡萄糖胺單糖，其中超過60%、70%、80%、90%、95%或99%的sNAG納米纖維的單糖為N-乙酰葡萄糖胺單糖。在另一個實施方案中，sNAG納米纖維包含N-乙酰葡萄糖胺單糖和/或葡萄糖胺單糖，其中超過70%的sNAG納米纖維的單糖為N-乙酰葡萄糖胺單糖。在某些實施方案中，用于本文所述方法的sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，或體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活基本不起作用。在一些實施方案中，例如，當(dāng)金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物體外用sNAG納米纖維處理/與sNAG納米纖維一起孵育時，sNAG納米纖維降低體外細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活低于 llog、0.751og、0.51og、0.251og、0.21og 或 0.1log0 測定 sNAG 納米纖維對細(xì)菌生長或存活的作用和對試驗結(jié)果的評價描述于例如下文第5.1節(jié)、實施例2 (例如第
6.2.2.5 節(jié))和圖 11E。在某些實施方案 中，用于本文所述方法的sNAG納米纖維在一個或多個生物相容性試驗中不起反應(yīng)。例如，當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，用于本文所述方法的sNAG納米纖維可不起反應(yīng)。在一些實施方案中，當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，本文所述組合物不起反應(yīng)。在其它實施方案中，當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，用于本文所述方法的sNAG納米纖維為O級或I級。在又一個實施方案中，當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，用于本文所述方法的sNAG納米纖維至多起輕微反應(yīng)。在一個實施方案中，按肌內(nèi)植入試驗的測定，sNAG納米纖維或包含這類納米纖維的組合物不起反應(yīng)。在某些實施方案中，本文所述組合物在例如施用部位不引起變態(tài)反應(yīng)或刺激。在其它實施方案中，本文所述組合物在例如施用部位至多引起輕微變態(tài)反應(yīng)或輕微刺激。本文所述組合物考慮的給藥方式為局部，例如皮膚局部；傷口、手術(shù)、細(xì)菌感染或感染癥狀(例如腫脹)部位的局部和體表例如皮膚、黏膜(例如陰道、肛門、咽喉、眼、耳)或其它組織表面的局部。在某些實施方案中，將sNAG納米纖維或包含這類納米纖維的組合物配制成敷料、繃帶、墊片(mat)、噴霧劑、液體制劑、混懸劑、膜、粉劑、軟膏劑、乳膏劑、糊劑、栓劑或凝膠劑。在一些實施方案中，將sNAG納米纖維或包含這類納米纖維的組合物配制成乳膏劑、凝膠劑、軟膏劑、膜、粉劑、噴霧劑或栓劑。另一方面，本文描述了用于本文所述方法的組合物。在一個具體實施方案中，所述組合物包含sNAG納米纖維。在某些實施方案中，本文所述組合物包含sNAG納米纖維和可用于預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染、細(xì)菌感染相關(guān)疾病或其癥狀的一種或多種其它的活性成分。在一些實施方案中，其它的活性成分是抗菌劑。這類其它的抗菌劑可以是抗生素。在另一個實施方案中，這類其它的抗菌劑是鋅。在又一個實施方案中，本文所述組合物不含抗生素。在另外其它的實施方案中，本文所述組合物不含任何其它抗菌劑。在一個實施方案中，本文所述組合物包含sNAG納米纖維為唯一的活性成分，且不含任何其它的活性成分。在具體實施方案中，組合物包含sNAG納米纖維和抗生素?？捎糜诒景l(fā)明組合物的抗生素的實例包括大環(huán)內(nèi)酯類(miCTolides)(例如紅霉素、阿奇霉素)、氨基糖苷類(例如阿米卡星、慶大霉素、新霉素、鏈霉素)、頭孢菌素類(例如頭孢羥氨芐、頭孢克洛、頭孢噻肟、頭孢吡肟)、氟喹諾酮類(例如環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)、青霉素類(例如青霉素、氨芐西林、阿莫西林)、四環(huán)素類(例如四環(huán)素、多西環(huán)素)和/或碳青霉烯類(例如美羅培南、亞胺培南)。sNAG納米纖維和本文所述藥物可用于這類組合物中。在一些實施方案中，組合物包含sNAG納米纖維和有效治療或預(yù)防或者通常用于治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌感染、MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染的藥物(例如有效對抗這類感染或常用來對抗這類感染的抗生素)。在其它實施方案中，本文所述組合物與一種或多種其它抗菌劑或任何其它合適的療法聯(lián)合給予。在一些實施方案中，其它抗菌劑或療法是抗生素(例如本領(lǐng)域已知的或本文描述的用于待治療的細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的標(biāo)準(zhǔn)抗生素療法)。在一些實施方案中，其它抗菌劑是有效治療或預(yù)防或者通常用于治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌感染、MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染的藥物(例如有效對抗這類感染或常用來對抗這類感染的抗生素)。在一些實施方案中，其它療法在給予sNAG納米纖維組合物之前、同時或之后給予。在又一個實施方案中，本文所述組合物不與任何其它療法聯(lián)合給予，例如不與抗生素聯(lián)合給予。3.1 術(shù)語本文所用術(shù)語“sNAG納米纖維”、“sNAG”、“Taliderm” 或“Talymed” (舊稱“Taliderm”)可互換使用，是指縮短的聚-N-乙酰葡萄糖胺和/或其衍生物的纖維。本文所用術(shù)語“約”意指給定值左右的范圍，其中所得值與明確列舉的值相同或基本相同(例如在10%、5%或1%以內(nèi))。在一個實施方案中，“約”意指在給定值或范圍的10%以內(nèi)。在另一個實施方案中，術(shù)語“約”意指在給定值或范圍的5%以內(nèi)。在另一個實施方案中，術(shù)語“約”意指在給定值`或范圍的1%以內(nèi)。本文所用術(shù)語“疾病”、“病癥”或“病況”可互換使用，是指對象的醫(yī)學(xué)病癥。在一個具體實施方案中，疾病是與細(xì)菌感染有關(guān)的或由細(xì)菌感染引起的病理狀態(tài)。本文所用術(shù)語“細(xì)菌感染”意指細(xì)胞或?qū)ο笾屑?xì)菌的侵入、繁殖和/或存在。本文所用數(shù)學(xué)術(shù)語“l(fā)og”是指logl。。本文所用術(shù)語“療法(therapies/therapy) ”可以指可用于預(yù)防或治療細(xì)菌感染或其相關(guān)癥狀或病況的任何方案、方法、組合物、制劑和/或物質(zhì)。在某些實施方案中，術(shù)語“療法”是指sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的藥物組合物。在其它實施方案中，術(shù)語“療法”是指sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的藥物組合物以外的療法。在具體實施方案中，“其它療法”和“其它治療”是指sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的藥物組合物以外的療法。在一個具體實施方案中，療法包括使用sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的藥物組合物作為輔助療法；例如，sNAG納米纖維組合物與藥物療法(例如抗生素)和/或可用于治療和/或預(yù)防細(xì)菌感染或其相關(guān)癥狀或病況的其它療法聯(lián)用。在將sNAG納米纖維組合物給予對象的情況下，本文所用術(shù)語“有效量”是指引起有益作用或治療作用的sNAG納米纖維的量。在具體實施方案中，sNAG納米纖維的“有效量”是指足以實現(xiàn)至少1、2、3、4或更多個下列作用的量:(i)清除細(xì)菌感染；(ii)根除與之相關(guān)的一種或多種癥狀，(iii)縮短清除細(xì)菌感染需要的時間；(iv)減輕或改善細(xì)菌感染和/或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的嚴(yán)重程度；(v)縮短細(xì)菌感染和/或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的持續(xù)時間；(vi)防止或延遲細(xì)菌的一個或多個抗性菌株的產(chǎn)生或減少所產(chǎn)生的細(xì)胞抗性菌株的數(shù)目；(vii)防止細(xì)菌感染和/或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的復(fù)發(fā)；(viii)減少或排除細(xì)菌細(xì)胞群；(ix)減輕由細(xì)菌感染引起的或與細(xì)菌感染相關(guān)的病況的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間；(X)減少對象的住院治療；(xi)縮短住院期長度；(xii)延長對象的生存期；(Xiii)提高或改善其它療法的治療效果；(XiV)降低死亡率；(XV)減少或消除細(xì)菌從一對象散布至另一對象，或者從一個器官或組織散布至另一器官或組織；(xvi)防止細(xì)菌數(shù)目的增加；(xvii)防止細(xì)菌感染或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的發(fā)生或發(fā)作；(xviii)減少與細(xì)菌感染有關(guān)的癥狀的數(shù)目；(xix)縮短/減輕由細(xì)菌感染引起的或與細(xì)菌感染有關(guān)的病況的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度；(XX)抑制或減少與細(xì)菌感染有關(guān)的一種或多種細(xì)菌毒素的產(chǎn)生；(xxi)穩(wěn)定或減輕細(xì)菌感染相關(guān)炎癥；(xxii)誘導(dǎo)一種或多種防衛(wèi)素蛋白和/或防衛(wèi)素樣蛋白表達(dá)；(χχ )誘導(dǎo)一種或多種Toll樣受體表達(dá)；(xxiv)誘導(dǎo)有益于清除或減輕細(xì)菌感染或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的一種或多種蛋白質(zhì)表達(dá)；(xxvi)減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的器官衰竭或與之相關(guān)的疾?。?xxvii)防止由細(xì)菌感染引起的或與細(xì)菌感染有關(guān)的病況的發(fā)作、發(fā)展或復(fù)發(fā)；和/或(xxviii)提高生命質(zhì)量，通過本領(lǐng)域眾所周知的方法(例如問卷法)來評價。在具體實施方案中，sNAG納米纖維的“有效量”是指本文規(guī)定的sNAG納米纖維組合物的量，例如第5.6節(jié)，見下文。本文所用術(shù)語“老年人”是指65歲以上的人。本文所用術(shù)語“成人”是指18歲以上的人。本文所用術(shù)語“兒童”是指I歲-18歲的人。本文所用 術(shù)語“嬰兒”是指新生兒-1歲的人。本文所用術(shù)語“早產(chǎn)嬰兒”是指孕齡小于37周(例如37周、36周、35周、34周、33周、32周、31周、30周、29周、28周之前或妊娠少于28周)便出生的新生兒至I歲的人。本文所用術(shù)語“幼童”是指I歲-3歲的人。本文所用術(shù)語“大多數(shù)”是指大于50 %，包括例如50.5 %、51 %、55 %等。本文所用術(shù)語“對象”和“患者”可互換使用，是指動物(例如牛、馬、綿羊、豬、X1、火雞、鵪鶉、貓、狗、小鼠、大鼠、兔、豚鼠等)。在一個具體實施方案中，對象是哺乳動物例如非靈長類或靈長類，例如人。在具體實施方案中，對象是人。有關(guān)按照本文提供的方法治療的患者的更多信息參見下文第5.5節(jié)。在基因表達(dá)的情況下，本文所用術(shù)語“低表達(dá)”(例如基于由基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)或肽的水平)是指表達(dá)低于基因的“正常”表達(dá)。在一個具體實施方案中，“低表達(dá)”是指基因表達(dá)低于“正常”基因表達(dá)的90%、低于80%、低于75%、低于70%、低于65%、低于60%、低于55%、低于50%、低于45%、低于40%、低于35%、低于30%、低于25%或低于20%。在另一個具體實施方案中，“低表達(dá)”是指基因表達(dá)是比“正?！被虮磉_(dá)低約20倍、約15倍、約10倍、約5倍、約4倍、約3倍、約2倍或約1.5倍。4.附圖簡沭圖1.納米纖維刺激Etsl的上游調(diào)節(jié)子Akt I活化。(A)磷酸-Akt在響應(yīng)NAG和sNAG刺激的血清饑餓的EC時的蛋白質(zhì)印跡分析。(B)被拼湊對照(scrambled control,“SCR”)或Aktl shRNA慢病毒感染的EC的RT-PCR分析和對Etsl和S26作為加載對照的表達(dá)進(jìn)行評價。(C)將信號自sNAG納米纖維轉(zhuǎn)導(dǎo)至Aktl、Etsl和防衛(wèi)素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑示意圖。圖2.通過Taliderm治療部分拯救的Aktl失效動物的遲緩的傷口愈合。⑷在用或不用Taliderm治療的情況下，受傷WT和AKTl失效小鼠的代表性圖像。(B)自致傷第3天起代表性小鼠皮膚切片的H&E染色。圖3.sNAG納米纖維刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞因子和防衛(wèi)素表達(dá)。㈧使用針對α-防衛(wèi)素的抗體，用或不用sNAG處理的EC的免疫組織化學(xué)。(B) ELISA顯示納米纖維處理的EC引起α -防衛(wèi)素1-3分泌(經(jīng)血清饑餓，用5 μ g/ml或10 μ g/ml sNAG處理)。圖4.sNAG納米纖維以Aktl依賴性方式刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的防衛(wèi)素表達(dá)。(A)和
(B)在有或沒有Η)98059(ΜΑΡΚ抑制劑，“H)”)、渥曼青霉素(PI3K抑制劑，“wtm”)存在時或者用拼湊對照(“SCR”)或Aktl( “AKT1”)shRNA慢病毒感染的、用或未用sNAG( “snag”)處理的血清饑餓的EC( “ss”)的定量RT-PCR分析，并對標(biāo)示基因的表達(dá)進(jìn)行評價。圖5.sNAG納米纖維刺激小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞中的β _防衛(wèi)素3表達(dá)。(A)在第3天，來自WT和Aktl失效動物的石蠟包埋小鼠皮膚傷口切片用β-防衛(wèi)素3(右上圖可見明亮染色；參見例如白色粗箭頭)和內(nèi)披蛋白(involucrin)抗體的免疫突光染色。(B)應(yīng)用NIHImageJ軟件(TX = Talidem ；Aktl = Aktl失效)，量化β -防衛(wèi)素3免疫熒光染色。
(C)WT和Aktl失效治療和未治療的角質(zhì)形成細(xì)胞用β -防衛(wèi)素3 (可見明売染色；參見例如白色粗箭頭)和T0PR0-3(核染色；參見例如白色細(xì)箭頭)的免疫熒光染色。注意在WT和Aktl Taliderm治療的傷口中β-防衛(wèi)素3染色增加。圖6.Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點的示意圖。應(yīng)用Genomatix軟件，針對DEF1`、4和5的mRNA上的保守位點對轉(zhuǎn)錄起始位點上游500bp進(jìn)行分析(ETS-黑色橢圓形；FKHD-條紋橢圓形；CREB-白色橢圓形；NFKB_方格橢圓形)。圖7.sNAG處理體外導(dǎo)致防衛(wèi)素表達(dá)和分泌。(A)用sNAG(50 μ g/ml)處理血清饑餓(“SS”)原代內(nèi)皮細(xì)胞達(dá)規(guī)定時間的RTPCR分析，并評價β-防衛(wèi)素3和α-防衛(wèi)素I的表達(dá)。⑶血清饑餓(未處理)或用sNAG納米纖維處理(10 μ g/ml達(dá)5小時)的內(nèi)皮細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記?？贵w是針對α-防衛(wèi)素5(FITC，左上圖)、β-防衛(wèi)素3(德克薩斯紅，右上圖)。核用T0PR0-3染色(藍(lán)色，左下圖)。右下圖表示三重疊加。(C)血清饑餓(未處理)或用sNAG納米纖維處理的(10 μ g/ml達(dá)5小時)的角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCat)的免疫熒光標(biāo)記?？贵w針對0-防衛(wèi)素5$11'(:，左上圖)、β-防衛(wèi)素3 (德克薩斯紅，右上圖)。核用T0PR0-3染色(藍(lán)色，左下圖)。圖8.sNAG誘導(dǎo)的防衛(wèi)素表達(dá)有賴于Aktl。(A)在用或不用Η)098059 ( “H)”)(50 μ Μ)、渥曼青霉素(“WTM”)(IOOnm)預(yù)處理的情況下，使用針對來源于自用或不用sNAG處理3小時的血清饑餓內(nèi)皮細(xì)胞分離的總RNA的α -防衛(wèi)素I的引物進(jìn)行定量RT-PCR分析。定量測定以S26蛋白亞基為基礎(chǔ)。(B)在有或沒有Η)98059(50μπι)、渥曼青霉素(IOOnm)的情況下，定量測定來源于自用或不用sNAG處理3小時的血清饑餓內(nèi)皮細(xì)胞分離的總RNA的β -防衛(wèi)素3表達(dá)，并以S26為基礎(chǔ)來表示。(C)用sNAG刺激規(guī)定時間的血清饑餓內(nèi)皮細(xì)胞(SS)中磷酸-Akt的蛋白質(zhì)印跡分析。線條表示其中的泳道已取出。(D)用拼湊對照(SCR)或AktlshRNA慢病毒感染的、用或不用sNAG處理的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞的定量RT-PCR分析，并對α -防衛(wèi)素4表達(dá)進(jìn)行評價。定量測定以S26為基礎(chǔ)來表示。(E)來源于自用拼湊對照(SCR)或Aktl shRNA慢病毒感染的、用或不用sNAG處理的血清饑餓內(nèi)皮細(xì)胞分離的總RNA的β -防衛(wèi)素3表達(dá)的定量測定。定量測定以S26為基礎(chǔ)來表示。全部實驗以至少一式三份進(jìn)行，且獨立重復(fù)至少3次，顯示了 P值。圖9.sNAG誘導(dǎo)的體內(nèi)防衛(wèi)素表達(dá)需要Aktl。(A)在致傷后第3天自WT(η = 3)和Aktl小鼠收獲的皮膚傷口的石蠟包埋切片。傷口不用或用sNAG膜治療。使用針對β-防衛(wèi)素3 (綠色，右上圖可見明亮染色；參見例如白色粗箭頭)、內(nèi)披蛋白(紅色)和Τοριχ)(藍(lán)色，核染色；參見例如白色細(xì)箭頭)的抗體進(jìn)行免疫熒光。(B)在第3天收獲的用sNAG治療的WT的石蠟包埋切片。使用針對β-防衛(wèi)素3 (綠色，可見明亮染色；參見例如白色粗箭頭)、內(nèi)披蛋白(紅色)和Topro (藍(lán)色，核染色；參見例如白色細(xì)箭頭)的抗體進(jìn)行免疫熒光。包括了這種較低的放大率(20χ)以更好地說明表達(dá)β-防衛(wèi)素3的表皮層。比例尺=50ymo (C)應(yīng)用NIH ImageJ軟件對自石蠟包埋切片表達(dá)的β-防衛(wèi)素3進(jìn)行定量測定。實驗獨立地重復(fù)3次，并給出P值。圖10.sNAG治療增加野生型小鼠的傷口閉合。來源于未用或用sNAG膜治療的C57B16野生型動物的傷口組織切片的H&E染色。各圖左邊表示致傷后天數(shù)。黑色實線沿著表明傷口閉合的角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞層劃線。黑色箭頭表示傷口床的邊緣。圖11.sNAG治療以Aktl依賴性方式減輕細(xì)菌感染。(A)WT小鼠的金黃色葡萄球菌感染傷口的組織革蘭氏染色。使用4mm活檢鉆使WT小鼠致傷。在致傷后立即用IxlO9Cfu/ml給小鼠接種。感染后30分鐘,治療組的小鼠用Taliderm治療。治療后5天采集皮膚樣品，切片用于分析。進(jìn)行組織革蘭氏染色。暗紫色染色表示革蘭氏陽性細(xì)菌和吞噬細(xì)菌的嗜中性粒細(xì)胞。顯示了在20x和40x放大倍數(shù)下的切片。(B)來自WT和Aktl失效小鼠(η=3)的石蠟包埋的金黃色葡萄球菌感染傷口的組織革蘭氏染色。在第3天和第5天收獲不用或用sNAG膜治療的感染傷口和傷口床用于分析。暗紫色染色表示傷口床中存在革蘭氏陽性細(xì)菌。黑色箭頭表示革蘭氏陽性細(xì)菌染色的實例。注意在用sNAG治療的WT動物中，在未治療的WT中缺乏陽性染色蓄`積。比例尺=50 μ m。(C)使用治療和未治療的WT (η =3)和Aktl小鼠(η = 3)兩者，從金黃色葡萄球菌感染傷口，定量測定致傷后第5天得到的CFU。與Aktl失效動物相比，接受sNAG治療的野生型小鼠傷口床中，細(xì)菌負(fù)荷顯著降低(P<.01)。全部實驗獨立地重復(fù)3次，并給出P值。(D)按(C)中所述類似方法，在致傷后第3天定量測定感染傷口的CFU。在第3天，sNAG治療的感染傷口顯示W(wǎng)T和Aktl失效動物兩者的CFU顯著降低，但與Aktl動物中的2倍差異相比，WT動物顯示約10倍差異。(E)未用或用不同量的sNAG納米纖維治療的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物中CFU的定量測定。每個實驗獨立地進(jìn)行3次，并給出P值。(F)在第3天，自用或未用β -防衛(wèi)素3肽(1.0uM)治療的WT小鼠(η = 3)的傷口收獲的金黃色葡萄球菌感染傷口的組織革蘭氏染色。注意用β-防衛(wèi)素3肽治療的感染傷口的革蘭氏陽性細(xì)菌染色減少。(G)用或未用β-防衛(wèi)素3肽治療的金黃色葡萄球菌感染的WT小鼠(η = 3)的CFU的定量測定。用肽治療的感染傷口顯示CFU顯著降低(P <.05)。比例尺=50 μ m。每個實驗獨立地進(jìn)行3次,并給出p值。圖12.通過sNAG治療金黃色葡萄球菌感染傷口快速誘導(dǎo)防衛(wèi)素表達(dá)。(A)使用針對來自sNAG治療的WT (η = 3)和未治療的WT小鼠(η = 3)兩者的β -防衛(wèi)素3 (綠色，右上圖和中下圖可見明亮染色；參見例如白色粗箭頭)、標(biāo)記角質(zhì)形成細(xì)胞層的內(nèi)披蛋白(紅色)和Topro (藍(lán)色，核染色；參見例如白色細(xì)箭頭)的抗體，對第3天自金黃色葡萄球菌感染傷口收獲的石蠟包埋組織切片進(jìn)行免疫熒光。無僅用第二抗體染色的初始對照(primarycontrol)表明角蛋白的非特異性染色。比例尺=50 μ m。(B)應(yīng)用NIH ImageJ軟件,來自石蠟包埋切片的β -防衛(wèi)素表達(dá)3的定量測定。用sNAG治療的金黃色葡萄球菌感染傷口顯示β -防衛(wèi)素3染色顯著增加(P <.05)。實驗獨立地重復(fù)3次，并給出P值。圖13.抗β -防衛(wèi)素3的抗體妨礙sNAG治療的抗菌效果。(A)在第3天收獲的WT小鼠(η = 3)的石蠟包埋的經(jīng)sNAG治療的金黃色葡萄球菌感染傷口的組織革蘭氏染色。在sNAG治療前，sNAG治療傷口用β -防衛(wèi)素3抗體或同種型對照山羊IgG抗體處理。代表性圖像顯示用針對β_防衛(wèi)素3的抗體處理的小鼠傷口床中革蘭氏陽性細(xì)菌染色(黑色箭頭)蓄積增加。比例尺=20μηι。(B)在sNAG治療治療前來自用β -防衛(wèi)素3抗體(η = 3)或?qū)φ誌gG抗體(η = 3)處理的金黃色葡萄球菌感染W(wǎng)T小鼠的CFU的定量測定。β -防衛(wèi)素3施用顯著提高(P <.05)CFU。圖14.sNAG治療降低銅綠假單胞菌的細(xì)菌感染。使用4mm活檢鉆使小鼠致傷，接種1.5x 109cfu/ml銅綠假單胞菌，感染后30分鐘，感染傷口不治療(η = 6)或用sNAG膜(η = 6)治療(η = 6)，在第3天收獲傷口床用于分析，培養(yǎng)30分鐘，鋪板，并定量測定未治療和治療的感染傷口的CFU。與未治療動物相比，sNAG治療的小鼠顯示傷口床中的細(xì)菌負(fù)荷顯著降低(P <.05) 0圖15.照射對pGlcNAc纖維的化學(xué)和物理結(jié)構(gòu)的作用。⑷pGlcNAc的分子量與照射水平/照射配比(formulation for irradiation)之間的相關(guān)性。(B)未照射的pGlcNAc漿(上線)、以IOOkGy照射的pGlcNAc漿(底線)和以200kGy照射的pGlcNAc漿(中線)的紅外線(IR)光譜。(C)pGlcNAc的掃描電子顯微鏡(SEM)分析。(D) sNAG的掃描電子顯微鏡(SEM)分析。圖16.pG lcNAc不影響代謝率。對于每個期間(即在24小時和48小時時)，4個條形柱每個(自左到右)的身份如下:血清饑餓(SS)、VEGF及50和100 μ g/ml的pGlcNAc(NAG)。圖17.pGlcNAc保護(hù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(EC)免于血清剝奪誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。對于每個期間(即在24、48和72小時時)，5個條形柱(自左到右)每個的身份如下:血清饑餓
(SS)、VEGF 及 50、100 和 250 μ g/ml 的 pGlcNAc (NAG)。圖18.sNAG誘導(dǎo)顯著提高的代謝率。5個條形柱(自左到右)每條的身份如下:血清饑餓(SS)、VEGF 及 50、I 00 和 200 μ g/ml 的 sNAG。圖19.sNAG不保護(hù)EC免受血清剝奪誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。對于每個期間(即在24小時和48小時時)，5個條形柱(自左到右)每條的身份如下:血清饑餓(SS)、VEGF及50、I00 和 200 μ g/ml 的 sNAG。5.詳述本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，sNAG納米纖維減少被金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌感染的皮膚傷口的細(xì)菌感染。雖然不受任何特定作用機(jī)制的束縛，但第6.2節(jié)提供的數(shù)據(jù)表明sNAG的抗菌作用并非是sNAG與細(xì)菌的直接作用所致，卻是由下游影響(例如由Aktl活化而調(diào)節(jié)防衛(wèi)素)所致。具體地講，數(shù)據(jù)顯示，體外用sNAG納米纖維處理細(xì)菌培養(yǎng)物不影響細(xì)菌計數(shù)，這就表明了 sNAG納米纖維不直接抑制細(xì)菌生長。在第6.2.2.5節(jié)所述和圖1lE所示的具體實施例中，sNAG納米纖維不直接影響金黃色葡萄球菌的生長或存活。下文第6.2.2.5節(jié)所述試驗，可用來測試sNAG納米纖維對細(xì)菌生長或存活缺乏直接作用。在該實施例中，溶液中金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物用不同濃度的sNAG納米纖維處理3小時，將培養(yǎng)物鋪板在37°C下過夜，并測定細(xì)菌CFU/ml。如圖1lE所示，觀察到對細(xì)菌生長或存活無作用。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，sNAG納米纖維可刺激防衛(wèi)素表達(dá)，其可提高固有的抗菌反應(yīng)。普遍認(rèn)可的是，防衛(wèi)素是先天免疫的重要參與者，并在抗菌活性中起作用。如下文第6.1節(jié)和第6.2節(jié)提供的實施例所證實的一樣，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，sNAG納米纖維可增加內(nèi)皮細(xì)胞中α型和β型防衛(wèi)素兩者的表達(dá)，體外增加角質(zhì)形成細(xì)胞中β型防衛(wèi)素的表達(dá)，體內(nèi)增加傷口愈合模型的β型防衛(wèi)素的表達(dá)。此外，如下文第6.1節(jié)和第6.2節(jié)提供的實施例所證實的一樣，但不受任何特定作用機(jī)制的束縛，在體外和體內(nèi)、在傷口愈合模型中Aktl似乎對sNAG依賴性防衛(wèi)素表達(dá)很重要。sNAG治療在野生型對照動物中始終減少被金黃色葡萄球菌感染的皮膚傷口的細(xì)菌感染，但在同樣治療的Aktl失效動物中并非如此。本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，通過sNAG治療人內(nèi)皮細(xì)胞，可增量調(diào)節(jié)許多Toll樣受體。Toll樣受體(“TLRs”或“TLR”)是高度保守的受體，其識別導(dǎo)致先天免疫活化的細(xì)菌組分的特定分子模式。最新的研究將人防衛(wèi)素表達(dá)與TLR活化聯(lián)系起來。具體地講，刺激TLR可導(dǎo)致防衛(wèi)素合成增加。因此，雖不受任何作用機(jī)制的束縛，但sNAG納米纖維可起通過AktI活化弓I起先天免疫和細(xì)菌清除的刺激物的作用。因此，本文描述了使用sNAG納米纖維作為用于預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染和與之相關(guān)的疾病的新方法。在某些實施方案中，用sNAG納米纖維治療細(xì)菌感染減少患者的細(xì)菌負(fù)荷。在具體實施方案中，sNAG納米纖維的使用加強(qiáng)傷口閉合，同時根除、減少或防止傷口的細(xì)菌感染 。5.1sNAG 納米纖維本文描述了 sNAG納米纖維組合物。sNAG納米纖維包含聚-N-乙酰葡萄糖胺和/或其衍生物的纖維，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法例如通過掃描電子顯微鏡(“SEM”)測量，其大多數(shù)的長度小于30微米，且長度為至少I微米。例如，可按本文所述獲得這種sNAG納米纖維。在某些實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%、99.8 %、99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %、55 % -75 %、65 % -75 %、75 % -85 %、75%-90%、80%-95%、90%-95%或95%-99%之間)sNAG納米纖維的長度小于約 30、25、20、15、12、10、9、8、7、6、5、4或3微米，且長度為至少I微米。在具體實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%，或者介于 55% -65%,55%-75%、65%-75%、75%-85%、75%-90%、80%-95%、90%-95%或95%-99%之間)sNAG納米纖維的長度小于約15微米或小于約12微米，且長度為至少I微米。在具體實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，全部(100%)sNAG納米纖維的長度小于約15微 米，且長度為至少I微米。在某些實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%，或者介于 55% -65%,55% -75%,65%-75%、75%-85%、75%-90%、80%-95%、90%-95%或95%-99%之間)8嫩6納米纖維的長度等于或小于14、13、12、11、10、9、8或7微米，且長度為至少I微米。在一些實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少 60%,70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%、99.9%或 100%，或者介于 55% -65%,55% -75%,65%-75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或95% -99%之間)sNAG 納米纖維的長度介于 1-15、2_15、2_14、1_12、2_12、1_10、2-10、3_12、
3-10、1-9、2-9、3-9、1-8、2-8、3-8、4-8、1-7、2-7、3-7、4-7、1-6、1-5、1-4 或 1-3 微米之間。在一個具體實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8 %,99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %,55 % -75 %,65 % -75 %,75 % -85 %、75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG 納米纖維的長度為約 8、7、6、5、4、3或2微米。在另一個具體實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%、99.8%、99.9%或 100%，或者介于 55% -65 %,55 % -75%,65% -75%、75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG 納米纖維的長度介于約2-約10微米、約3-約8微米或約4-約7微米之間。在另一個具體實施方案中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法(例如通過SEM)測量，全部(100%)SNAG納米纖維的長度介于約2-約10微米、約3-約8微米或約4-約7微米之間。在某些實施方案中，按電子顯微鏡的測定，sNAG納米纖維纖維的厚度和/或直徑介于0.005-5微米的范圍。在具體實施方案中，sNAG納米纖維的平均厚度和/或直徑為約0.0U0.02,0.03,0.04,0.05,0.06,0.07,0.08,0.09,0.U0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、
0.5、0.55、0.6、0.65、0.7`、0.75、0.8、0.85、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、
1.9、2、2.2,2.4,2.6、2.8、3或4微米，或之間的任何范圍(例如0.02-2微米、0.02-1微米、0.02-0.75 微米、0.02-0.5 微米、0.02-0.5 微米、0.05-1 微米、0.05-0.75 微米、0.05-0.5 微米、0.1-1微米、0.1-0.75微米、0.1-0.5微米等)。在具體實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少 60%,70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%，或者介于 55%-65%、55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80%-95%,90% -95%或95% -99%之間)sNAG納米纖維具有約0.02-1微米的厚度或直徑。在其它實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%、99.8 %,99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %、55 % -75 %,65 % -75 %,75 % -85 %、75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG 納米纖維具有約 0.05-0.5 微米的厚度或直徑。在具體實施方案中，全部(100%) SNAG納米纖維具有約0.02-1微米或約0.05-0.5微米的厚度或直徑。在某些實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%，或者介于 55% -65%,55%-75%、65%-75%、75%-85%、75%-90%、80%-95%、90%-95%或95%-99%之間)sNAG納米纖維具有約0.02-2微米、0.02-1微米、0.02-0.75微米、0.02-0.5微米、0.02-0.5微米、0.05-1 微米、0.05-0.75 微米、0.05-0.5 微米、0.1-1 微米、0.1-0.75 微米或 0.1-0.5微米的厚度或直徑。在某些實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95 %,98 %,99 %,99.5 %,99.8 %,99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %,55 % -75 %、65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG 納米纖維的長度介于I和15微米之間，且具有約0.02-1微米的厚度或直徑。在某些實施方案中，sNAG納米纖維的分子量小于100kDa、90kDa、80kDa、75kDa、70kDa、65kDa、60kDa、55kDa、50kDa、45kDa、40kDa、35kDa、30kDa 或 25kDa。在某些實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8 %,99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %,55 % -75 %,65 % -75 %,75 % -85 %、75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG 納米纖維具有小于 lOOkDa、90kDa、80kDa、75kDa、70kDa、65kDa、60kDa、55kDa、50kDa、45kDa、40kDa、35kDa、30kDa 或25kDa的分子量。在其它實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%，或者介于 55% -65%,55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95 %或 95 % -99%之間)sNAG 納米纖維具有介于約 5kDa-lOOkDa、約 IOkDa-lOOkDa、約 20kDa_lOOkDa、約 10kDa_80kDa、約20kDa-80kDa、20kDa-75kDa、約 25kDa_ 約 75kDa、約 30kDa_ 約 80kDa、約 30kDa_ 約 75kDa、約40kda-約 80kDa、約 40kDa_ 約 75kDa、約 40kDa_ 約 70kDa、約 50kDa_ 約 70kDa 或約 55kDa_ 約65kDa之間的分子量。在一個實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80 %,90 %,95 %,98 %,99 %,99.5 %,99.8 %,99.9 % 或 100 %，或者介于 55 % -65 %、55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)sNAG納米纖維具有約60kDa的分子量。在某些實施方案中，1%-5%,5% -10%,5% -15%,20% -30%或 25% -30% 的sNAG納米纖維脫去乙?；?。在一些實施方案中，1%、5%、10%、15%、20%、25%或30%的sNAG納米纖維脫去乙?；?。在其它實施方案中，小于30%、25%、20%、15%、10%、5%、4 %、3 %、2 %或I %的sNAG`納米纖維脫去乙酰基。在一些實施方案中，等于或大于I %、5 %、10% ,15%,20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%,80%、85%、90%、95%或99%或者全部(100%)的sNAG納米纖維脫去乙?；?。在其它實施方案中，小于 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或 100%的 sNAG 納米纖維脫去乙酰基。在某些實施方案中，70%-80%,75% -80%,75% -85%,85% -95%,90% -95%,90% -99%或95% -100%的sNAG納米纖維乙?；Ｔ谝恍嵤┓桨钢?，70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%的sNAG納米纖維乙?；?。在其它實施方案中，超過70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%、99.5%或 99.9% 的 sNAG 納米纖維乙?；?。在一些實施方案中，等于或大于 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95% 或 99% 或者全部(100%)的sNAG納米纖維乙?；?。在其它實施方案中，小于1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99% 或 100%的sNAG納米纖維乙?；?。在一些實施方案中，sNAG納米纖維包含至少一種葡萄糖胺單糖，且還包含至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95% 或 99% 的 N-乙酰葡萄糖胺單糖。在其它實施方案中，sNAG納米纖維包含至少一種N-乙酰葡萄糖胺單糖，且還包含至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或 99% 的葡萄糖胺單糖。一方面，在MTT測定法中，sNAG納米纖維提高血清饑餓人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(“EC”)的代謝率。MTT測定法是用于細(xì)胞增殖(細(xì)胞生長)的實施室試驗和標(biāo)準(zhǔn)比色測定(一種測量顏色改變的測定法)。簡單地說，黃色的MTT (3- (4，5- 二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑,一種四唑)在活細(xì)胞的線粒體中還原為紫色的甲膜(formazan)。這種還原只有當(dāng)線粒體還原酶有活性時才發(fā)生，因此該轉(zhuǎn)變可與有活力的(活的)細(xì)胞數(shù)正相關(guān)。細(xì)胞的代謝率可通過技術(shù)人員普遍已知的其它技術(shù)測定。另一方面，在錐蟲藍(lán)排斥試驗中，sNAG納米纖維不拯救血清饑餓EC的細(xì)胞凋亡。錐蟲藍(lán)排斥試驗是一種用于測定細(xì)胞懸液中存在的活細(xì)胞數(shù)的染料排斥試驗。它基于這樣的原理，即活細(xì)胞具有排除某些染料(例如錐蟲藍(lán)、伊紅或丙啶)的完整細(xì)胞膜，而死細(xì)胞則沒有。細(xì)胞的存活力可通過技術(shù)人員普遍已知的其它技術(shù)測定。在某些實施方案中，描述了包含sNAG納米纖維的組合物，其中sNAG納米纖維在MTT測定法中提高血清饑餓人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排斥試驗中不拯救血清饑餓人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。在一些實施方案中，sNAG納米纖維在MTT測定法中提高血清饑餓人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率，在錐蟲藍(lán)排斥試驗中不拯救血清饑餓人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。在一個具體實施方案中，sNAG納米纖維是生物相容性的。生物相容性可通過各種技術(shù)測定，包括但不限于如洗脫試驗、給動物對象肌內(nèi)植入或者皮內(nèi)注射或全身注射等這類方法。這類試驗描述于美國專利號6，686，342 (參見例如實施例10)，其通過引用以其整體結(jié)合到本文中。在某些實施方案中，用于本文所述方法的sNAG納米纖維在一個或多個生物相容性試驗中不起反應(yīng)。例如，當(dāng)在`洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗和/或全身試驗中測試時，用于本文所述方法的sNAG納米纖維可不起反應(yīng)。在其它實施方案中，用于本文所述方法的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，試驗分?jǐn)?shù)為O級或I級。在又一個實施方案中，當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時，用于本文所述方法的sNAG納米纖維至多起輕微反應(yīng)。在某些實施方案中，本文所述組合物不引起變態(tài)反應(yīng)或刺激。在其它實施方案中，本文所述組合物在例如施用部位引起至多輕微變態(tài)反應(yīng)或輕微刺激。相關(guān)試驗和試驗結(jié)果的評價描述于例如美國專利號6，686，342，其通過引用以其整體結(jié)合到本文中，并描述于下文第6.8節(jié)。在一個具體實施方案中，當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗時,sNAG納米纖維不起反應(yīng)。一方面，肌內(nèi)植入試驗是肌內(nèi)植入試驗-1SO 4周植入，見下文第6.8.3節(jié)。在某些實施方案中，通過洗脫試驗測定，sNAG納米纖維不具有生物反應(yīng)性(洗脫試驗等級=O)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維的試驗分?jǐn)?shù)于“O”和/或通過皮內(nèi)注射試驗測定，有至多可忽略的刺激性。在一些實施方案中，sNAG納米纖維在Kligman試驗中不引起真皮內(nèi)反應(yīng)(即I級反應(yīng))和/或通過Kligman試驗測定具有弱的變態(tài)反應(yīng)潛力。在某些方面，sNAG納米纖維是免疫中性的(即它們不引起免疫應(yīng)答)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維是生物可降解的。sNAG納米纖維優(yōu)選在給予或植入患者后的以下時間內(nèi)降解:約I天、2天、3天、5天、7天(I周)、8天、10天、12天、14天(2周)、17天、21天(3周)、25天、28天(4周)、30天、I個月、35天、40天、45天、50天、55天、60天、2個月、65天、70天、75天、80天、85天、90天、3個月、95天、100天或4個月。在某些實施方案中，sNAG納米纖維可引起可檢測的異物反應(yīng)。可能發(fā)生在傷口愈合期間的異物反應(yīng)，包括滲出物在損傷部位蓄積、炎性細(xì)胞浸潤以對該部位清創(chuàng)(debride)以及肉牙組織形成。異物的持續(xù)存在可抑制充分愈合。與其說是發(fā)生在傷口愈合中的吸收和再造，不如說異物反應(yīng)的特征在于異物巨細(xì)胞的形成、外物囊化和慢性炎癥。囊化是指密實的、通常無血管的膠原殼沉積在異物周圍，使之與宿主組織有效隔離開來。在一個實施方案中，用sNAG納米纖維治療的部位(例如傷口或傷口的細(xì)菌感染部位)在治療后I天、3天、5天、7天、10天或14天不引起可檢測的異物反應(yīng)。在一個這樣的實施方案中，用sNAG納米纖維治療的部位(例如傷口)在治療后I天、3天、5天、7天、10天或14天不引起異物囊化。在一些實施方案中，sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中大多數(shù)纖維的長度介于約I和15微米之間，和(ii) (a)在MTT測定法中提高血清饑餓EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排斥試驗中不拯救血清饑餓EC的細(xì)胞凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗時不起反應(yīng)。在某些實施方案中，sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中大多數(shù)纖維的長度介于約I和12微米之間，和(ii) (a)在MTT測定法中提高血清饑餓EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排斥試驗中不拯救血清饑餓EC的細(xì)胞凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗時不起反應(yīng)。在某些實施方案中，sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中大多數(shù)纖維的長度介于約4和7微米之間，和(ii) (a)在MTT測定法中提高血清饑餓EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排斥試驗中不拯救血清饑餓EC的細(xì)胞凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗時不起反應(yīng)。在某些實施方案中，按本領(lǐng)域技術(shù)人員的測定，sNAG納米纖維不直接影響細(xì)菌(例如金黃色葡萄球菌)的生長或存活。在其它實施方案中，按下文第6.2.2.5節(jié)給出的方法測定，sNAG納米纖維不直接影響細(xì)菌(例如金黃色葡萄球菌)的生長或存活。在一些實施方案中，sNAG納米纖維體外對細(xì)菌生長或存活沒有直接作用。在一個實施方案中，sNAG納米纖維對革蘭氏陰性細(xì)菌的生長或存活沒有直接作用(例如體外)。在另一個實施方案中，sNAG納米纖維對革蘭氏陽性細(xì)菌的生長或存活沒有直接作用(例如體外)。在又一個實施方案中，sNAG納米纖維革蘭氏陽性或革蘭氏陰性細(xì)菌的生長或存活沒有直接作用(例如體外)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維或sNAG納米纖維組合物不結(jié)合細(xì)菌(例如革蘭氏陽性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌或兩種類型的細(xì)胞)。在一些實施方案中，體外將細(xì)菌培養(yǎng)物與sNAG納米纖維(例如50-500 μ g的sNAG納米纖維)一起孵育,在以下時間內(nèi)不減少細(xì)菌負(fù)荷:10分鐘、30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時或96小時(其中細(xì)菌培養(yǎng)物可為革蘭氏陽性和/或革蘭氏陰性)。在一些實施方案中，體外將金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物與sNAG納米纖維(例如約80 μ g-300 μ g或約100-200 μ g的sNAG納米纖維)一起孵育，在以下時間內(nèi)不減少細(xì)菌負(fù)荷:2小時、3小時、6小時或24小時。在另外其它的實施方案中，例如，當(dāng)體外將金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物用sNAG納米纖維處理/與sNAG納米纖維一起孵育時，sNAG納米纖維體外降低細(xì)菌生長或存活達(dá)小于llog、0.91og、0.81og、0.751og、0.71og、0.61og、0.51og、0.41og、0.31og、0.251og、0.21og、0.llog、0.051og或0.0251og。 在一些實施方案中，例如，體外將金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物用sNAG納米纖維處理/與sNAG納米纖維一起孵育時，sNAG納米纖維體外降低細(xì)菌生長或存活達(dá)小于 Ix 104、2x 104、3x 104、4x 104、5x 104、6x 104、7x 104、8x 104、9x IO4 或 IOx104cfu/mlo sNAG納米纖維對細(xì)菌生長或存活的作用的試驗和對試驗結(jié)果的評價描述于例如實施例2 (例如第6.2.2.5節(jié))和圖11E，見下文。在一些實施方案中，sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中大多數(shù)纖維的長度介于約I和15微米、I和12微米或4和7微米之間，(ii)體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和(iii)當(dāng)在生物相容性試驗(例如肌內(nèi)植入試驗)測試時不起反應(yīng)。在某些實施方案中，在用sNAG納米纖維組合物處理或暴露在sNAG納米纖維組合物中的細(xì)胞、組織或器官中，sNAG納米纖維誘導(dǎo)某些模式的基因表達(dá)(通過例如RT-PCR、微陣列或ELISA測定的RNA或蛋白質(zhì)表達(dá))。準(zhǔn)確地講，在一些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種防衛(wèi)素蛋白、一種或多種防衛(wèi)素樣蛋白和/或一種或多種Toll樣受體的表達(dá)。在另外其它的實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)已知具有抗菌作用的一種或多種蛋白質(zhì)的表達(dá)。在某些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種 α -防衛(wèi)素(例如 DEFAl (即 α -防衛(wèi)素 I)、DEFAlB, DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFA6)、一種或多種 β -防衛(wèi)素(例如 DEFBl (即 β -防衛(wèi)素 I)、DEFB2、DEFB4、DEFB103A、DEFB104A、DEFB105B、DEFB107B、DEFB108B、DEFBl 10、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFBl 18、DEFBl 19、DEFB123,DEFB124、DEFB125、DEFB126、DEFB127、DEFB128、DEFB129、DEFB131、DEFB136)和 / 或一種或多種Θ -防衛(wèi)素(例如DEFT1P)表達(dá)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo) DEFAl、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFBl、DEFB3、DEFB103A、DEFB104A、DEFB108B、DEFB112、DEFBl 14, DEFBl 18, DEFBl 19, DEFB123、DEFB124, DEFB125, DEFB126,DEFB128, DEFB129和DEFB131的一種或多種的表達(dá)。在某些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種Toll受體(例如TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR`9、TLRlO、TLRlI 和 / 或 TLR12)表達(dá)。在其它實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)IL-1、CEACAM3、SPAGl1、SIGIRR(ILl樣受體)、IRAK1、IRAK2、IRAK4、TBK1、TRAF6和IKKi的一種或多種的表達(dá)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)IRAK2、SIGIRR、TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR8、TLRlO和TRAF6的一種或多種的表達(dá)。在一個實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)至少一種上列基因產(chǎn)物的表達(dá)。在一些實施方案中，與用sNAG納米纖維治療前對象的細(xì)胞、組織或器官中一種或多種上列基因的表達(dá)水平(例如一種或多種上列基因表達(dá)的已知平均水平)相比，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)的一種或多種上列基因表達(dá)的量等于或大于約
0.25倍、0.5倍、I倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、12倍、15倍或20倍。在一些實施方案中，與用sNAG納米纖維治療前對象的細(xì)胞、組織或器官中一種或多種上列基因的表達(dá)水平(例如一種或多種上列基因表達(dá)的已知平均水平)相比，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)的一種或多種上列基因表達(dá)的量等于或大于約 10%、25%、50%、75%、100%、125%、150%、175%、200%、225%、250%、275%,300%,350%,400%,450%,500%,550%,600%,650%,700%,750%,800%,900%或 1000% O在一些實施方案中，按本領(lǐng)域技術(shù)人員已知方法或本文所述測定，sNAG納米纖維而非長的聚-N-乙酰葡萄糖胺、殼多糖和/或脫乙酰殼多糖誘導(dǎo)上述一種或多種基因表達(dá)。在這些實施方案的一些中，按本領(lǐng)域技術(shù)人員已知方法或本文所述測定，與sNAG納米纖維誘導(dǎo)的上述一種或多種基因的表達(dá)水平相比，長的聚-N-乙酰葡萄糖胺、殼多糖和/或脫乙酰殼多糖不誘導(dǎo)上述一種或多種基因的表達(dá)或誘導(dǎo)較低水平(例如低1.25倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或1/10倍)的上述一種或多種基因的表達(dá)。在某些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)與下文表
1、表I1、表II1、表V、表VIII和表IX、第6.2-6.5節(jié)說明的一種或多種基因表達(dá)譜一致、類似、大致相同或相當(dāng)?shù)幕虮磉_(dá)譜。在一些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)在下文表1、表I1、表II1、表V、表VIII和表IX、第6.2-6.5節(jié)中表現(xiàn)為通過sNAG治療而增量調(diào)節(jié)的一種或多種的基因表達(dá)。在一些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)在下文表1、表I1、表II1、表V、表VIII和表IX、第6.2-6.5節(jié)中表現(xiàn)為通過sNAG治療而增量調(diào)節(jié)的大多數(shù)或全部基因的表達(dá)。在這些實施方案的一些中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知方法或本文所述,在用sNAG納米纖維組合物治療細(xì)胞、組織或器官后I小時、2小時、4小時、5小時、6小時、8小時、10小時、12小時、14小時、16小時、18小時、20小時、24小時、48小時、3天或5天測量基因表達(dá)水平。在某些實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)基因表達(dá)譜，其不同于由長的聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維誘導(dǎo)的表達(dá)譜。在具體實施方案中，由sNAG納米纖維誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜與下文表1、表I1、表II1、表V、表VIII和表IX、第
6.2-6.5節(jié)中所示的一致、類似、大致相同或相當(dāng)，而由長的聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維誘導(dǎo)的基 因表達(dá)譜與下文表VIII和/或表IX、第6.5節(jié)所示表達(dá)譜一致、類似、大致相同或相當(dāng)。在其它實施方案中，sNAG納米纖維或包含sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)基因表達(dá)譜，其不同于由殼多糖或脫乙酰殼多糖誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜。在一個具體實施方案中，通過照射聚-N-乙酰葡萄糖胺和/或其衍生物獲得sNAG納米纖維。有關(guān)聚-N-乙酰葡萄糖胺及其衍生物參見下文第5.1.1節(jié)，有關(guān)采用照射產(chǎn)生sNAG納米纖維的方法參見下文第5.2節(jié)?？刹捎谜丈淇s減聚-N-乙酰葡萄糖胺纖維和/或聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物纖維的長度形成縮短的聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺纖維和/或縮短的聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物纖維，即sNAG納米纖維。準(zhǔn)確地講，可采用照射縮減/減小聚-N-乙酰葡萄糖胺或其衍生物的長度和分子量而不干擾其微結(jié)構(gòu)。sNAG納米纖維的紅外線譜(IR)與未照射的聚_β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺或其衍生物的紅外線譜類似、大致相同或相當(dāng)。在一個實施方案中，sNAG納米纖維非來源于殼多糖或脫乙酰殼多糖。而在另一個實施方案中，本文所述組合物可來源于殼多糖或脫乙酰殼多糖，或者sNAG納米纖維可來源于殼多糖或脫乙酰殼多糖。5.1.1聚-N-乙酰葡萄糖胺及其衍生物美國專利號5，622，834、5，623，064、5，624，679、5，686，115、5，858，350、6，599，720,6, 686，342,7, 115，588和美國專利公布號2009/0117175 (其每一個通過引用結(jié)合到本文中)描述了聚-N-乙酰葡萄糖胺及其衍生物以及產(chǎn)生它們的方法。在一些實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺具有β -1 — 4構(gòu)型。在其它實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺具有α -1 — 4構(gòu)型。聚-N-乙酰葡萄糖胺及其衍生物可呈聚合物的形式或呈纖維的形式。聚-N-乙酰葡萄糖胺可通過例如微藻類、優(yōu)選硅藻產(chǎn)生，并且可從微藻類、優(yōu)選硅藻純化?？捎米鳟a(chǎn)生聚-N-乙酰葡萄糖胺的起始來源的硅藻包括但不限于圓篩藻屬(Coscinodiscus)、小環(huán)藻屬(Cyclotella)和海鏈藻屬(Thalassiosira)的成員?？赏ㄟ^許多不同的方法，包括本領(lǐng)域已知的機(jī)械力方法和化學(xué)/生物學(xué)方法，從硅藻培養(yǎng)物中獲得聚-N-乙酰葡萄糖胺(參見例如美國專利號5，622，834,5, 623，064,5, 624，679,5, 686，115、5，858，350,6, 599，720,6, 686，342和7，115，588，其每一個通過引用以其整體結(jié)合到本文中)。在某些實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺并非來源于以下的一種或多種:有殼類水生動物、甲殼動物、昆蟲、真菌或酵母。在一個實施方案中，聚-β-1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺來源于包括以下的處理方法:a)包含胞體和聚-1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺聚合物纖維的微藻類用能夠?qū)-乙酰葡萄糖胺聚合物纖維從胞體中分離的生物制劑(例如氫氟酸)處理足夠時間，使得聚-β_1 — 4- Ν-乙酰葡萄糖胺聚合物纖維從胞體中釋放出來；b)從胞體中分離聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺聚合物纖維；和c)從分離的聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺聚合物纖維中除去污染物，從而分離并純化出聚-β -1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺聚合物。在其它實施方案中，聚-1 — 4-Ν-乙酰葡萄糖胺可來源于以下的一種或多種:有殼類水生動物、甲殼動物、昆蟲、真菌或酵母。在某些實施方案中，本文所述組合物不含殼多糖或脫乙酰殼多糖?？墒咕?N-乙酰葡萄糖胺的一個或多個單糖單元脫酰基。在某些實施方案中，1% -5%、5% -10%、5% _15%、20% -30%或25% -30%的聚-N-乙酰葡萄糖胺脫去乙?；?。在一些實施方案中，1%、5%、10%、15%、20%、25%或30%的聚-N-乙酰葡萄糖胺脫去乙?；?。在其它實施方案中，低于30%，25%、20%、15%、10%、5%、4%、3%、2%或1%的聚-N-乙酰葡萄糖胺脫去乙?；?。在一些實施方案中，等于或大于I10%、15%、20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,90%,95%或99%或全部(100%)的聚-N-乙酰葡萄糖胺脫去乙酰基。在其它實施方案中，低于 I %、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%的聚-N-乙酰葡萄糖胺脫去乙?；?。在某些實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含70% -80%,75% -80%,75 % -85 %、85 % -95 %、90 % -95 %、90 % -99 % 或 95 % -100 % 的乙?；咸烟前?即 N-乙酰葡萄糖胺)單糖。在一些實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%的乙?；咸烟前?即N-乙酰葡萄糖胺)單糖。在其它實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含超過70 %、75 %、80 %、85 %、90 %、95 %、98 %、99 %、99.5 %或99.9 %的乙?；咸烟前贰Ｔ谝恍嵤┓桨钢?，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含等于或大于 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或 99%或全部(100% )的乙酰化葡萄糖胺。在其它實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含小于115110%、15%、20%、25%,30%,35%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,90%,95%,99%或100%的乙?；咸烟前?。在一些實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含至少一種葡萄糖胺單糖，且還包含至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95% 或 99% 的 N-乙酰葡萄糖胺單糖。在其它實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺組合物包含至少一種N-乙酰葡萄糖胺單糖，且還包含至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95% 或 99% 的
葡萄糖胺單糖。聚-N-乙酰葡萄糖胺的衍生物也可用于本文所述的組合物。聚-N-乙酰葡萄糖胺的衍生物和制備該種衍生物的方法描述于美國專利號5，623，064(參見例如第5.4節(jié))，其通過引用以其整體結(jié)合到本文中。聚-N-乙酰葡萄糖胺的衍生物可包括但不限于部分或完全脫乙?；?N-乙酰葡萄糖胺或其脫乙酰化衍生物。此外，聚-N-乙酰葡萄糖胺可通過硫酸化、磷酸化和/或硝化而衍生化。聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物包括例如硫酸化聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物、磷酸化聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物或硝化聚-N-乙酰葡萄糖胺衍生物。此外，聚-N-乙酰葡萄糖胺的一個或多個單糖單元可含有一個或多個磺酰基、一個或多個
O-酰基。另外，脫乙?；?N-乙酰葡萄糖胺的一個或多個單糖可含有N-?；＞?N-乙酰葡萄糖胺或其脫乙?；苌锏囊粋€或多個單糖可含有O-烷基。聚-N-乙酰葡萄糖胺的一個或多個單糖單元可為堿衍生物。聚-N-乙酰葡萄糖胺的脫乙?；苌锏囊粋€或多個單糖單元可含有N-烷基。聚-N-乙酰葡萄糖胺的脫乙酰化衍生物的一個或多個單糖單元可含有至少一個脫氧鹵(deoxyhalogen)衍生物。聚-N-乙酰葡萄糖胺的脫乙酰化衍生物的一個或多個單糖單元可形成鹽。聚-N-乙酰葡萄糖胺的脫乙?；苌锏囊粋€或多個單糖單元可形成金屬螯合物。在一個具體實施方案中，金屬為鋅。聚-N-乙酰葡萄糖胺的脫乙?；苌锏囊粋€或多個單糖單元可含有N-亞烷基或N-亞芳基。在一個實施方案中，衍生物是乙酸酯衍生物。在另一個實施方案中，衍生物不是乙酸酯衍生物。在一個實施方案中，聚-N-乙酰葡萄糖胺或脫乙酰化聚-N-乙酰葡萄糖胺用乳酸衍生化。其中，在另一個實施方案中，衍生物不用乳酸`衍生化。5.2制各sNAG納米纖維的方法聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維和上述聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維的任何衍生物可作為干的聚合物或纖維或者聚合物或纖維膜來照射。或者，聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維和上述聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維的任何衍生物可在潮濕時照射。通過照射制備sNAG納米纖維的方法和如此產(chǎn)生的sNAG納米纖維描述于美國專利公布號2009/0117175，其通過引用以其整體結(jié)合到本文中。在某些實施方案中，將聚-N-乙酰葡萄糖胺聚合物或纖維制成懸浮液/漿液或濕餅用于照射。可在將聚合物或纖維制成其最終制劑(例如敷料)之前、同時或之后進(jìn)行照射。一般而言，懸浮液/漿液的聚合物或纖維含量可變化，例如約0.5mg-約50mg的聚合物或纖維/Iml蒸餾水用于漿液，約50mg-約IOOOmg的聚合物或纖維/Iml蒸餾水用于濕餅制劑。可先將聚合物或纖維在液氮中凍干、冰凍并粉碎，使之更易于形成懸浮液/漿液或濕餅。同樣，可將懸浮液/漿液過濾除去水分，從而形成濕餅。在某些方面，照射作為包含約 0.5mg、lmg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、12mg、15mg、18mg、20mg、25mg或50mg的聚合物或纖維/ml蒸餾水或前述實施方案之間的任何范圍(例如l-10mg/ml、5-15mg/ml、2-8mg/ml、20-50mg/ml等)的懸浮液的聚合物或纖維。在其它方面，照射作為包含約50-1，OOOmg聚合物或纖維/Iml蒸餾水的濕餅的聚合物或纖維。在具體實施方案中，濕餅包含約 50、100、200、300、400、500、600、700、800、900 或 IOOOmg 聚合物或纖維 /Iml 蒸懼水或之間的任何范圍(例如 100-500mg/ml、300-600mg/ml、50-1000mg/ml 等)。照射優(yōu)選呈Y輻射、電子束輻射或X射線的形式。優(yōu)選兩種照射來源:放射性核素和電。在具體實施方案中，放射性核素為鈷-60和銫-137。這兩種核素發(fā)射Y射線，其是無質(zhì)量的光子。Y射線具有0.66-1.3MeV的能量。使用電，產(chǎn)生電子，并加速至高達(dá)IOMeV或更高的能量。當(dāng)照射聚合物或纖維以減小其大小時，要考慮的是通過IOMeV電子穿透密度類似于水的材料的深度在一側(cè)暴露時限于約3.7cm,或兩側(cè)暴露時限于約8.6cm。在較低的電子能量下，穿透深度減小。可通過將金屬(通常為鎢或鉭)靶標(biāo)置于電子光路中，來將電子能量轉(zhuǎn)換成X射線。X射線的轉(zhuǎn)換限于能量至多5MeV的電子。X射線是無質(zhì)量的光子，與Y射線類似，可穿透聚合物或纖維。在電子能量轉(zhuǎn)換為X射線能量時，僅有約8%效率。在X射線產(chǎn)生設(shè)備中需要高能電子束機(jī)器，是低轉(zhuǎn)換效率的原因。在一個具體實施方案中，照射為Y輻射。輻射的吸收劑量是每單位產(chǎn)品重量吸收的能量，以戈瑞(gy)或千戈瑞(kgy)測量。對于干的聚合物或纖維，優(yōu)選的吸收劑量為約500-2，OOOkgy輻射，最優(yōu)選約750-1，250kgy或約900-1，IOOkgy輻射。對于濕的聚合物或纖維，優(yōu)選的吸收劑量為約100-500kgy 輻射，最優(yōu)選約 150-250kgy 或約 200-250 kgy 輻射。輻射劑量可根據(jù)其對聚合物或纖維的長度的作用來描述。在具體實施方案中，所用輻射劑量優(yōu)選分別減短聚合物或纖維的長度介于聚合物或纖維的起始長度約10%至90 %之間。在具體實施方案中，平均長度減短達(dá)約10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80%或約90%或之間的任何范圍(例如20-40%、30-70%，等等)?；蛘撸幂椛鋭┝績?yōu)選減短聚合物或 纖維的長度大約I微米至100微米之間。在具體實施方案中，根據(jù)起始纖維長度，聚合物或纖維的平均長度減短至小于約15微米、小于約14微米、小于約13微米、小于約12微米、小于約11微米、小于約10微米、小于約8微米、小于約7微米、小于約5微米、小于約4微米、小于約3微米、小于2微米或小于I微米。在某些實施方案中，大多數(shù)(在某些實施方案中，至少 60%,70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%^；100%或者介于 55% -65%,55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或95% -99%之間)聚合物或纖維的長度減短至僅僅約20微米、僅僅約15微米、僅僅約12微米、僅僅約10微米、僅僅約8微米、僅僅約7微米或僅僅約5微米。在某些實施方案中，照射聚合物或纖維減短大多數(shù)(在某些實施方案中，至少60%、70%、80%、90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9%或 100%或者介于 55% -65%,55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或 95% -99%之間)纖維的長度至介于約1-20微米之間、介于約1-15微米之間、介于約2-15微米之間、介于約1-12微米之間、約2-12微米之間、約1-10微米之間、約2-10微米之間、介于約1-8微米之間、介于約2-8微米之間、介于約1-7微米之間、介于約2-7微米之間、介于約3-8微米之間、介于約4-7微米之間、介于約1-5微米之間、介于約2-5微米之間、介于約3-5微米之間、介于約
4-10微米之間，或已包括在內(nèi)的前述長度的任何范圍。還可根據(jù)其對聚合物或纖維的分子量的作用來描述輻射劑量。在具體實施方案中，所用輻射劑量優(yōu)選降低聚合物或纖維的分子量至聚合物或纖維初重的約10% -90%之間。在具體實施方案中，平均分子量降低達(dá)約10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80 %或約90%或之間的任何范圍(例如20-40%、30-70%，等等)?；蛘?，所用輻射劑量優(yōu)選降低聚合物或纖維的分子量至1，0000-1, 000, 000道爾頓之間。在具體實施方案中，根據(jù)起始分子量，平均聚合物或纖維的分子量降低至小于1，000, 000道爾頓、小于750，000道爾頓、小于500，000道爾頓、小于300，000道爾頓、小于200，000道爾頓、小于100，000道爾頓、小于90、000道爾頓、小于80，000道爾頓、小于70，000道爾頓、小于60，000道爾頓、小于50，000道爾頓、小于25，000道爾頓、小于10，000道爾頓或小于5，000道爾頓。在某些實施方案中，平均分子量降低至不少于500道爾頓、不少于1，000道爾頓、不少于2，000道爾頓、不少于3，500道爾頓、不少于5，000道爾頓、不少于7，500道爾頓、不少于10，000道爾頓、不少于25，000道爾頓、不少于50，000道爾頓、不少于60，000道爾頓或不少于100，000道爾頓。還包括前述平均分子量之間的任何范圍；例如，在某些實施方案中，聚合物或纖維的照射降低平均分子量至介于約10，000至100，000道爾頓之間、介于1，000和25，000道爾頓之間、介于50，000和500，000道爾頓之間、介于25，000和100，000道爾頓之間、介于30，000和90，000道爾頓之間、介于約40，000和80，000道爾頓之間、介于約25，000和75，000道爾頓之間、介于約50，000和70，000道爾頓之間或介于約55，000和65，000道爾頓之間等等。在某些實施方案中，聚合物或纖維的照射降低大多數(shù)的分子量，而在某些實施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%、99.8%、99.9%或 100%或者介于55% -65%,55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80%-95%,90% -95%或95% -99%之間的纖維降低至介于約20，000和100，000道爾頓、約25，000和75，000道爾頓、約30，000和90，000道爾頓、約40，000和80，000道爾頓、約50，000和70，000道爾頓或約55，000和65，000道爾頓之間。在某些實施方案中，聚合物或纖維的照射降低大多數(shù)的分子量，在某些實施方案中，至少 60%,70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.5%,99.8%,99.9% 或 100% 或者介于 55% -65%,55% -75%,65% -75%,75% -85%,75% -90%,80% -95%,90% -95%或95% -99%之間的纖維降低至約60，000道爾頓。在照射后，可將漿液過濾并干燥，并可將濕餅干燥，形成可用于本發(fā)明實踐的組合物(例如敷料和本文所述的其`它組合物)。5.3包含sNAG納米纖維的纟目合物可將sNAG納米纖維配制成各種組合物用于本文所述局部給藥?？蓪瑂NAG納米纖維的組合物配制成乳膏劑、膜、膜劑、液體溶液劑、混懸劑、粉劑、糊劑、軟膏劑、栓劑、明膠組合物、氣霧劑、凝膠劑或噴霧劑。在一個實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物配制成超薄膜。在一些實施方案中,將包含sNAG納米纖維的組合物配制成敷料、墊片或繃帶。還考慮了適于溶液中或懸浮液中的固體制劑、給藥前的液體制劑。將這類組合物整合在可植入裝置中或包覆在可植入裝置上也是可行的，例如其中抗菌活性可能是有益的矯形植入物(用于髖、膝、肩；釘、螺絲釘?shù)?、心血管植入物(支架、導(dǎo)管等)等°包含sNAG納米纖維的組合物可包括一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。合適的賦形劑可包括水、鹽水、鹽溶液、葡萄糖、甘油、乙醇等或其組合。合適的賦形劑還包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、稻米、面粉、白堊、硅膠、硬脂酸鈉、甘油單硬脂酸酯、油(包括石油、動物、植物或合成來源的油、例如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等)、滑石粉、氯化鈉、脫脂奶粉、丙烯、二醇等。另外，包含sNAG納米纖維的組合物可包括潤濕劑、乳化劑、PH緩沖劑和其它作用劑的一種或多種。還可將sNAG納米纖維組合物摻入生理上可接受的載體中，例如摻入適于局部施用的生理上可接受的載體中。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”意指經(jīng)聯(lián)邦或州政府管理機(jī)構(gòu)核準(zhǔn)或列于美國藥典或其它普遍公認(rèn)的藥典以用于動物，更特別用于人。合適藥用載體的實例描述于E.W.Martin的"Remington' s PhamaceuticalSciences"。組合物中sNAG納米纖維的最終用量可變化。例如，組合物(例如經(jīng)制備用于給予患者)中sNAG納米纖維的量可大于或等于50 %、約60 %、約70 %、約75 %、約80 %、約85 %、約90 %、約95 %、約98 %或約99 %重量/體積。在一個實施方案中，組合物中sNAG納米纖維的量為約95%、約98%、約99或約100%。同樣，組合物(例如經(jīng)制備用于給予患者)中sNAG納米纖維的量可為約50% -100%、約60% -100%、約70% -100%、約75% -100%、約 80% -100%、約 90% -100%、約 95% -100%、約 70%-95%、約 75% -95%,約 80% -95%、約 90% -95%、約 70% -90%、約 75% -90%或約 80% -90%重量 / 體積。組合物可包含超過 30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95% 或 99% sNAG 納米纖維溶液。可將sNAG納米纖維組合物配制成傷口敷料。在某些實施方案中，將sNAG納米纖維組合物配制成為呈屏障、膜或膜劑形式的傷口敷料?；蛘?，可將sNAG納米纖維組合物加入敷料襯墊例如屏障、膜或軟片中?？梢詷?biāo)準(zhǔn)尺寸提供屏障、膜或軟片，可進(jìn)一步剪切，使成待治療面積的大小。襯墊可以是常用的敷料材料，例如在給患者施用時將聚合物或纖維加入或包覆在之上的繃帶或紗布。或者，可將sNAG納米纖維配制成為用線、微珠、微球或微纖維制造的屏障、膜或軟片 ，或者可將組合物配制成為形成屏障的墊片。在某些實施方案中，至少75%、至少85%、至少90%或至少95%的敷料由sNAG納米纖維組成。在某些方面，敷料不含常用的敷料材料，例如紗布或繃帶。在這類實施方案中，將sNAG納米纖維本身配制成傷口敷料。包含sNAG納米纖維的組合物還可包含任何合適的天然或合成的聚合物或纖維。合適的聚合物或纖維的實例包括纖維素聚合物、黃原膠、聚芳酰胺、聚酰胺、聚酰亞胺、聚酰胺/酰亞胺、聚酰胺酰肼、聚酰肼、聚咪唑、聚苯并噁唑、聚酯/酰胺、聚酯/酰亞胺、聚碳酸酯/酰胺、聚碳酸酯/酰亞胺、聚砜/酰胺、聚砜酰亞胺等、其共聚物和混合物。聚合物或纖維的其它合適類別包括聚偏二氟乙烯(polyvinyledene fluoride)和聚丙烯腈。這些聚合物或纖維的實例包括描述于美國專利號RE 30，351,4, 705，540，4，717，393,4, 717，394、4，912，197,4, 838，900,4, 935，490,4, 851，505,4, 880，442,4, 863，496,4, 961，539 和歐洲專利申請O 219 878的那些，其全部均通過引用予以結(jié)合。聚合物或纖維可包括纖維素聚合物、聚酰胺、聚芳酰胺、聚酰胺/酰亞胺或聚酰亞胺的至少一種。在某些實施方案中，聚合物或纖維包括聚芳酰胺、聚酯、氨基甲酸乙酯和聚四氟乙烯。在一個實施方案中，本文所述組合物包含不止聚合物的一種類型(例如sNAG納米纖維和纖維素)。在某些方面，sNAG納米纖維是組合物中的唯一活性成分。在其它實施方案中，組合物包含一種或多種其它活性成分，以例如促進(jìn)抗菌作用和/或愈合(例如傷口愈合)。在一些實施方案中，其它活性成分是一種或多種抗菌劑(例如抗生素、防衛(wèi)素肽、防衛(wèi)素樣肽或Toll-受體樣肽)或生長因子。在具體實施方案中，其它活性成分是生長因子，例如 PDGF-AA、PDGF-AB, PDGF-BB, PDGF-CC, PDGF-DD, FGF-1、FGF-2、FGF-5、FGF-7、FGF-1O、EGF、TGF-a (HB-EGF)、雙調(diào)蛋白、上皮調(diào)節(jié)蛋白、β 細(xì)胞調(diào)節(jié)素(betacellulin)、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白、印igen、VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、胎盤生長因子(PLGF)、促血管生成素-、促血管生成素-2、IGF-1、IGF-11、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)的一種或多種。在其它實施方案中，其它活性成分是促進(jìn)免疫系統(tǒng)的作用劑、止痛藥或退熱藥。在某些實施方案中，其它活性成分是下列抗生素類之一的抗生素:大環(huán)內(nèi)酯類(例如紅霉素、阿奇霉素)、氨基糖苷類(例如阿米卡星、慶大霉素、新霉素、鏈霉素)、頭孢菌素類(例如頭孢羥氨芐、頭孢克洛、頭孢噻肟、頭孢吡肟)、氟喹諾酮類(例如環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)、青霉素類(例如青霉素、氨芐西林、阿莫西林)、四環(huán)素類(例如四環(huán)素、多西環(huán)素)和碳青霉烯類(例如美羅培南、亞胺培南)。在一些具體實施方案中，其它活性成分是以下的一種或多種:萬古霉素、磺胺藥(例如復(fù)方新諾明/甲氧芐啶-磺胺甲噁唑復(fù)方)、四環(huán)素(例如多西環(huán)素、米諾環(huán)素)、克林霉素、噁唑烷酮類(例如利奈唑胺)、達(dá)托霉素、替考拉寧、奎奴普丁 /達(dá)福普汀(共殺素)、替吉環(huán)素、蒜素、桿菌肽、呋喃西林、過氧化物、新生霉素、奈替米星、甲基乙二醛(methylglyoxal)、蜜蜂防衛(wèi)素_1、妥布霉素、二葡萄糖酸氯己定、葡萄糖酸氯己定、左氧氟沙星、鋅和銀。在一些實施方案中，組合物包含sNAG納米纖維和有效治療或預(yù)防或者通常用于治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌感染、MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染的其它活性成分(例如有效對抗這類感染或常用來對抗這類感染的抗生素)。sNAG納米纖維組合物可含有膠原，雖然在某些方面，sNAG納米纖維組合物不含膠原。在某些實施方案中，sNAG納米纖維組合物不含任何其它療法。在某些實施方案中，sNAG納米纖維組合物不含任何其它抗菌劑、防衛(wèi)素肽、防衛(wèi)素樣肽、Toll-受體樣肽或生長因子。在一些實施方案中，s NAG納米纖維組合物不含抗生素。在另外其它的實施方案中，sNAG納米纖維組合物可包含其它療法(例如抗生素)。在一個這樣的實施方案中，其它療法(例如抗生素)未包覆、固定或配制在sNAG納米纖維中。在其它方面，sNAG納米纖維組合物不含大量的蛋白質(zhì)材料。在具體實施方案中，sNAG納米纖維組合物的蛋白質(zhì)含量不大于0.1 %、0.5%或I %重量。在其它實施方案中，通過考馬斯染色無法檢出組合物的蛋白質(zhì)含量。在一個實施方案中，sNAG納米纖維組合物中還包括鋅。除其抗微生物性質(zhì)以外，鋅還在傷口愈合中起作用(參見Andrews等，1999,Adv Wound Care 12:137-8)。優(yōu)選以鹽的形式加入鋅，例如氧化鋅、硫酸鋅、乙酸鋅或葡糖酸鋅。5.4sNAG纟目合物的杭菌用涂可通過給予本文所述的sNAG納米纖維組合物來治療和/或預(yù)防多種細(xì)菌感染和與之相關(guān)的疾病(參見例如第5.4.1和5.4.2節(jié)，見下文)。在一個實施方案中，本文所述組合物是抑菌劑。在另一個實施方案中，本文所述組合物是殺菌劑。在一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防革蘭氏陽性細(xì)菌所致感染和/或任何與之相關(guān)的疾病。在另一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防革蘭氏陰性細(xì)菌所致感染和/或任何與之相關(guān)的疾病。在又一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防革蘭氏陰性細(xì)菌和革蘭氏陽性細(xì)菌兩者所致感染和/或任何與之相關(guān)的疾病?？墒褂帽疚乃鼋M合物治療和/或預(yù)防的細(xì)菌感染包括以下細(xì)菌所致感染:水螺菌科(Aquaspirillum family)、固氮螺菌科(Azospirillum family)、固氮菌科(Azotobacteraceae)、擬桿菌科(Bacteroidaceae)、巴爾通氏體屬(Bartonella)菌種、輕弧菌科(Bdellovibrio family)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)菌種、衣原體屬菌種(例如肺炎衣原體)、棱菌屬、腸桿菌科(Enterobacteriaceae)(例如朽1檬酸桿菌(Citrobacter)菌種、愛德華氏菌屬(Edwardsiella)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)、歐文氏菌屬(Erwinia)菌種、大腸桿菌、哈夫尼菌屬(Hafnia)菌種、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)菌種、摩根氏菌屬(Morganella)菌種、普通變形菌(Proteus vulgaris)、普羅威登斯菌屬(Providencia)、沙門氏菌屬(Salmonella)菌種、粘質(zhì)沙雷菌(Serratia marcescens)和弗氏志賀氏菌(Shigella flexneri))、加德納氏菌科(Gardinella family)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、鹽桿菌科(Halobacteriaceae)、螺桿菌科(Helicobacterfamily)、軍團(tuán)菌科(Legionallaceae)、李斯特氏菌屬((Listeria))菌種、甲基球菌科(Methylococcaceae)、分枝桿菌(例如結(jié)核分枝桿菌)、奈瑟氏菌科(Neisseriaceae)、海洋螺桿菌科(Oceanospirillum family)、巴斯德氏菌科(Pasteurellaceae)、肺炎球菌菌種、假單胞菌屬(Pseudomonas菌種)菌種、根瘤菌科(Rhizobiaceae)、螺菌科(Spirillumfamily)、螺狀菌科(Spirosomaceae)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)(例如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和釀胺葡萄球菌(Staphylococcus pyrogenes))、鏈球菌屬(Streptococcus)(例如腸炎鏈球菌(Streptococcus enteritidis)、Streptococcus fasciae 和肺炎鏈球菌)、Vampirovibr、螺桿菌科(Helicobacter family)和 / 或吸血弧菌科(Vampirovibriofamily)的細(xì)菌。在一個具體實施方案中，由這類細(xì)菌所致感染引起的疾病或與由這類細(xì)菌所致感染有關(guān)的疾病也可使用本文所述組合物預(yù)防和/或治療。可使用本文所述組合物治療和/或預(yù)防的細(xì)菌感染還包括由下列屬的細(xì)菌引起的感染:鮑特氏菌屬、疏螺旋體屬、布魯氏菌屬、彎曲桿菌屬、衣原體屬和Clamidophylia、棱菌屬、棒桿菌屬、腸球菌屬、埃希氏菌屬、弗朗西絲氏菌屬、嗜血菌屬、螺桿菌屬、軍團(tuán)菌屬、鉤端螺旋體屬、李斯特氏`菌屬、分枝桿菌屬、枝原體屬、奈瑟氏球菌屬、假單胞菌屬、立克次氏體屬、沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、葡萄球菌屬、鏈球菌屬、密螺旋體屬、弧菌屬和/或耶爾森氏菌屬。在一個具體實施方案中，由這類細(xì)菌所致感染引起的疾病或與由這類細(xì)菌所致感染有關(guān)的疾病也可使用本文所述組合物預(yù)防和/或治療?？墒褂帽疚乃鼋M合物治療和/或預(yù)防的細(xì)菌感染包括由下列菌種的細(xì)菌引起的感染:炭疽芽孢桿菌、百日咳鮑特氏菌、布氏疏螺旋體、流產(chǎn)布魯氏菌、狗布魯氏菌、馬耳他布魯氏菌、豬布魯氏菌、空腸彎曲桿菌、肺炎衣原體、沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肉毒梭菌、艱難梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、破傷風(fēng)梭菌、白喉棒桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、大腸桿菌、土拉熱弗朗西絲氏菌、流感嗜血菌、幽門螺桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎性鉤端螺旋體、問號鉤端螺旋體、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、麻風(fēng)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、肺炎枝原體、淋病奈瑟氏球菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、銅綠假單胞菌、奇異變形菌、立氏立克次氏體、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、宋內(nèi)氏志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、非解乳糖鏈球菌、肺炎鏈球菌、釀膿鏈球菌、蒼白密螺旋體、霍亂弧菌和/或鼠疫耶爾森氏菌。在一個具體實施方案中，由這類細(xì)菌所致感染引起的疾病或與由這類細(xì)菌所致感染有關(guān)的疾病也可使用本文所述組合物預(yù)防和/或治療。在一些實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防需氧細(xì)菌所致感染和/或與之相關(guān)的疾病。在其它實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防厭氧細(xì)菌所致感染和/或與之相關(guān)的疾病。在某些實施方案中，使用本文所述組合物治療和/或預(yù)防銅綠假單胞菌感染。假單胞菌是一種革蘭氏陰性需氧細(xì)菌，存在于油、水、其它潮濕環(huán)境、植物和動物、產(chǎn)生藍(lán)-綠色色素綠膿菌素和特有甜味的臨床分離菌種中。已知銅綠假單胞菌引起尿路感染、肺炎、呼吸系統(tǒng)感染、皮炎、軟組織感染、菌血癥(bacterimia)、骨與關(guān)節(jié)感染、胃腸感染和各種全身性感染。已知它是引起感染的重要原因，特別在燒傷患者、囊性纖維化患者、發(fā)生免疫抑制的患者(例如AIDS和癌癥患者)和住院超過I周的患者中。它是醫(yī)院內(nèi)感染例如但不限于肺炎、泌尿道感染和菌血癥的常見原因?？赏ㄟ^本文所述組合物來預(yù)防和/或治療這些感染的任一種或全部。在一些實施方案中，使用本文所述組合物治療和/或預(yù)防葡萄球菌感染，特別是金黃色葡萄球菌感染。在該實施方案和本文描述的其它實施方案中，sNAG納米纖維組合物的使用可阻止產(chǎn)生抗性生物以及允許不依賴抗生素地清除細(xì)菌感染。在某些實施方案中，本文所述組合物可用來對抗對一種或多種抗菌劑有抗性的細(xì)菌。例如，本文所述組合物可用來治療對一種或多種抗生素有抗性的細(xì)菌，例如對常用抗生素有抗性的細(xì)菌例如MRSA (耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)、VRSA (耐萬古霉素金黃色葡萄球菌)、VRE (耐萬古霉素腸球菌)、耐青霉素類腸球菌、PRSP (耐青霉素類肺炎鏈球菌)、耐異煙肼/利福平結(jié)核分枝桿菌和耐其它抗生素細(xì)菌的菌株(例如大腸桿菌、沙門氏菌屬、彎曲桿菌屬和鏈球菌的抗性菌株)。在一個實施方案中，本文公開的組合物可用來治療多重耐藥細(xì)菌。在一些具體實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(“MRSA”;它亦可稱為多重耐藥金黃色葡萄球菌或耐苯唑西林金黃色葡萄球菌(“0RSA”))。MRSA是對β -內(nèi)酰胺抗生素出現(xiàn)抗性的金黃色葡萄球菌的任何菌株，其包括但不限于青霉素類(青霉素類、甲氧西林、雙氯西林、萘夫西林、苯唑西林等)和頭孢菌素類。MRSA的一些已知菌株包括EMRSA15和EMRSA16 (亦稱MRSA252)，其對紅霉素和環(huán)丙沙星有抗性；CC8(亦稱 ST8:USA300) ；ST1:USA400 ；ST8:USA500 ；ST59:USA1000 ；ST93 菌株；ST80菌株和ST59菌株。MRSA是造成人的多種感染的原因。MRSA是一個嚴(yán)重的健康隱憂，引起約50%的衛(wèi)生保健相關(guān)的葡萄球菌感染。在美國，每年超過94，000人發(fā)生嚴(yán)重的MRSA感染，約19，000死于感染。尤其流行的MRSA是在醫(yī)院中；其中MRSA感染的風(fēng)險因素包括既往抗生素暴露(例如喹諾酮抗生素)、進(jìn)入重癥監(jiān)護(hù)室、手術(shù)和暴露于MRSA定居的患者。有開放性傷口的患者、無免疫應(yīng)答的患者(由于例如HIV/AIDS、癌癥、移植手術(shù)、重度哮喘所引起)、低齡兒童(例如嬰兒和幼童)和年長者(例如老年人)具有發(fā)生MRSA感染的高風(fēng)險。還在毒品注射者、糖尿病人、皮膚病患者、帶有侵入性裝置(例如血管內(nèi)導(dǎo)管)的患者和保健工作者和在有限空間(囚犯、士兵、長期醫(yī)療保健設(shè)施例如護(hù)理院中的患者)度過時光的其它人中觀察到MRSA感染的較高風(fēng)險率。金黃色葡萄球菌最常定居在鼻前孔(鼻孔)，雖然呼吸道的其余部位、開放性傷口、靜脈內(nèi)導(dǎo)管和泌尿道也是潛在的感染部位。大部分社區(qū)相關(guān)性MRSA感染位于皮膚和軟組織上 。MRSA的初期癥狀包括類似于丘疹、蜘蛛咬傷或癤的紅腫，可伴有發(fā)熱和皮疹；腫塊最稍后發(fā)展成灌膿癤。社區(qū)相關(guān)性MRSA的普遍現(xiàn)象是皮膚感染，例如壞死性筋膜炎或膿性肌炎、壞死性肺炎、感染性心內(nèi)膜炎、骨或關(guān)節(jié)感染。一些MRSA導(dǎo)致膿毒癥和中毒性休克綜合征，這可能是由于這類菌株(例如PVL、PSM)所帶毒素所致。MRSA可引起蜂窩組織炎。上述任一種或本領(lǐng)域已知的MRSA菌株、診斷有MRSA、MRSA的癥狀的患者、有MRSA和/或MRSA相關(guān)疾病風(fēng)險的患者群可用本文所述組合物治療。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種MRSA癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低一種或多種這些癥狀(例如本文所述癥狀)的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。本文所述組合物可用作殺死或毀壞有害細(xì)菌的殺菌劑。例如，本文所述組合物可用來治療已建立的細(xì)菌感染，預(yù)防性防止細(xì)菌感染或局部給予對象易受感染的部位或可能是適于細(xì)菌生長的位置的部位(例如牙齦、開放性傷口、褥瘡和陰道或腹肌溝部位)。在某些實施方案中，本文所述組合物降低細(xì)菌生長和/或細(xì)菌存活率超過菌落形成單位(CFU)/mL 的約 0.llog、0.21og、0.251og、0.31og、0.41og、0.51og、0.61og、0.71og、0.751og、0.81og、0.91og、llog、l.251og、l.51og、l.751og、21og、2.251og、2.51og、
2.751og、31og、3.251og、3.51og、3.751og、41og、4.51og、51og、5.51og、61og、6.51og、71og、
7.51og、81og、8.51og、91og、9.51og、lOlog、10.51og、11log、11.51og、121og、12.51og、131og、13.51og、141og、14.51og或151og。在某些實施方案中，本文所述組合物降低細(xì)菌生長和/或細(xì)菌存活率達(dá)菌落形成單位(CFU)/mL的約0.21og-151og、0.21og-101og、0.21og_51og、0.51og_151og、0.51og_101og、0.51og_51og、0.51og_31og、llog_151og、11og_l2log、Ilog-10log、llog_71og、llog_51og、I log-3log、1.51og-51og、21og_151og、21og-101og、21og_51og、31og-151og、31og-101og、31og-51og、41og-101og、21og_81og、31og-81og、41og-81og、21og-71og、31og-71og、21og_61og 和這些值之間的任何值。在某些實施方案中， 本文所述組合物降低細(xì)菌生長和/或細(xì)菌存活率達(dá)等于或大于Ix 1010,0.5xIO11Ux IO11U.5x 10n、2x 10n、2.5x 10n、3xl0n、4x 10n、5x 10n、7x IO11Ux IO12U.5x1012、2x 1012、3x 1012、5x 1012、7x 1012、8x 1012、1x IO13U.5x IO13 或 2x IO13 (CFU)/mL 或這些值之間的任何范圍的值。在一些實施方案中，在細(xì)菌感染用單次施用/劑量或多次施用/劑量的sNAG納米纖維組合物治療后的以下時間內(nèi)，實現(xiàn)細(xì)菌生長和/或存活率的這類降低:少于約30分鐘、I小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、11小時、12小時、15小時、18小時、20小時、22小時、24小時、36小時、48小時、60小時、72小時、I天、2天、3天、4天、5天、7天、10天、I周、2周、3周、4周、I月或2月。在一個實施方案中，待用sNAG納米纖維組合物治療的感染不是病毒感染、真菌感染、寄生物感染或酵母感染?？捎帽疚乃龅膕NAG納米纖維組合物治療和/或預(yù)防各種與細(xì)菌感染相關(guān)的疾病或病況(參見例如第5.4.2節(jié)，見下文)。在一個實施方案中，考慮了用于治療現(xiàn)有的細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法。在一些實施方案中，本文所述組合物可用來治療傷口(參見第5.4.1節(jié)，見下文)。在具體實施方案中，本文所述組合物用來治療細(xì)菌感染的傷口。在其它實施方案中，本文所述組合物用來預(yù)防傷口的細(xì)菌感染。在一些實施方案中，本文所述組合物用來治療已知與傷口感染有關(guān)的細(xì)菌，尤其用來治療金黃色葡萄球菌/MRSA、釀膿鏈球菌、腸球菌和/或銅綠假單胞菌感染和與這類感染有關(guān)的疾病。
在其它實施方案中，本文所述組合物非用于治療傷口。在一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療慢性傷口。在另一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療燒傷創(chuàng)面。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療手術(shù)創(chuàng)傷。在一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療慢性傷口、燒傷創(chuàng)面和手術(shù)創(chuàng)傷。在另一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療傷口和/或灼傷。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療未感染傷口。在一些實施方案中，本文所述組合物非用于治療細(xì)菌感染的傷口。在另一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療與傷口有關(guān)或因傷口引起的細(xì)菌感染。在一些實施方案中，本文所述組合物非用于治療已知與傷口感染有關(guān)的細(xì)菌，例如金黃色葡萄球菌/MRSA、釀膿鏈球菌、腸球菌和/或銅綠假單胞菌。在一些實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防各種細(xì)菌感染和因細(xì)菌感染引起或與細(xì)菌感染相關(guān)疾病，其與傷口無關(guān)(參見第5.4.2節(jié)，見下文)。在某些實施方案中，細(xì)菌感染相關(guān)疾病的治療包括將本文所述組合物之一給予對象或?qū)ο笕阂灾委熂膊』蛘攉@得有益效果或治療效果。在具體實施方案中，該治療在對象或?qū)ο笕褐袑崿F(xiàn)以下1、2、3、4、5種或更多種作用:(i)降低或改善疾病或與之相關(guān)癥狀的嚴(yán)重程度；(ii)縮短疾病或與之相關(guān)癥狀的持續(xù)時間；(iii)防止疾病或與之相關(guān)癥狀的發(fā)展；(iv)使疾病或與之相關(guān)癥狀消退；(V)預(yù)防與之相關(guān)癥狀的發(fā)生或發(fā)作；(vi)預(yù)防與之相關(guān)癥狀的復(fù)發(fā)；(vii)防止或減少疾病從對象或?qū)ο笕簜鞑ブ亮硪粚ο蠡驅(qū)ο笕海?viii)減少疾病相關(guān)器官衰竭；(ix)降低住院發(fā)生率；(X)縮短住院期長短；(xi)延長生存期；(xii)消除疾??；(xiii)提高或改進(jìn)另一療法的預(yù)防效果或治療效果；(xiv)提高生命質(zhì)量，通過本領(lǐng)域眾所周知的方法(例如問卷法)來評價；(XV)減少疾病癥狀的數(shù)目；和/或(xvi)降低死亡率。在 一些實施方案中，治療包括使用本文所述組合物的任何療法。在一些實施方案中，治療細(xì)菌感染包括將本文所述組合物之一給予對象或?qū)ο笕阂灾委熂?xì)菌感染或細(xì)菌感染的癥狀。在具體實施方案中，該治療在對象或?qū)ο笕褐袑崿F(xiàn)以下1、2、3、4、5種或更多種作用:(i)清除細(xì)菌感染；(ii)根除一種或多種與細(xì)菌感染有關(guān)的癥狀，(iii)縮短清除細(xì)菌感染需要的時間；(iv)減輕或改善細(xì)菌感染和/或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的嚴(yán)重程度；(V)縮短細(xì)菌感染和/或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的持續(xù)時間；(vi)防止或延遲細(xì)菌的一個或多個抗性菌株的產(chǎn)生或減少所產(chǎn)生的細(xì)胞抗性菌株的數(shù)目；(vii)防止與之有關(guān)的一種或多種癥狀的復(fù)發(fā)；(viii)減少或排除細(xì)菌細(xì)胞群(例如患者物樣品中細(xì)菌計數(shù)減少，按本領(lǐng)域已知的或本文描述的方法之一通過CFU/mL或log降低來測量)；(ix)減少對象的住院治療；(X)縮短住院期長度；(xi)延長對象的生存期；(xii)提高或改善其它療法的治療效果；(xiii)降低死亡率；(xiv)減少或消除細(xì)菌從一對象散布至另一對象，或者從一個器官或組織散布至另一器官或組織；(XV)防止細(xì)菌數(shù)目的增加；(xvi)防止與之有關(guān)的一種或多種癥狀的發(fā)生或發(fā)作；(xvii)減少與細(xì)菌感染有關(guān)的癥狀的數(shù)目；(xviii)抑制或減少與細(xì)菌感染有關(guān)的一種或多種細(xì)菌毒素的廣生；(XiX)穩(wěn)定或減輕與細(xì)菌感染相關(guān)的炎癥；(XX)減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的器官衰竭或與之相關(guān)的疾?。缓?或(XXi)提高生命質(zhì)量，通過本領(lǐng)域眾所周知的方法(例如問卷法)來評價。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予對象導(dǎo)致以下的一種或多種:(i)誘導(dǎo)一種或多種防衛(wèi)素蛋白和/或防衛(wèi)素樣蛋白表達(dá)；( )誘導(dǎo)一種或多種Toll樣受體表達(dá)；和/或(iii)誘導(dǎo)有益于清除或減少細(xì)菌感染或與之有關(guān)的一種或多種癥狀的一種或多種蛋白質(zhì)的表達(dá)。在某些實施方案中，預(yù)防細(xì)菌感染包括將本文所述組合物之一給予對象或?qū)ο笕阂詫崿F(xiàn)一種或多種下列作用:(i)抑制細(xì)菌感染或與之相關(guān)癥狀的發(fā)生或發(fā)作；和/或( )抑制細(xì)菌感染或與之相關(guān)癥狀的復(fù)發(fā)。在其它實施方案中，預(yù)防細(xì)菌感染包括將本文所述組合物之一給予對象或?qū)ο笕阂灶A(yù)防細(xì)菌感染相關(guān)疾病。在具體實施方案中，這類預(yù)防在對象或?qū)ο笕褐袑崿F(xiàn)一種或多種下列作用:(i)抑制細(xì)菌感染相關(guān)疾病或其癥狀的發(fā)生或發(fā)作；和/或(ii)抑制細(xì)菌感染相關(guān)疾病或與之相關(guān)癥狀的復(fù)發(fā)。5.4.1傷口細(xì)菌感染的治療或預(yù)防在某些實施方案中，本文所述sNAG納米纖維組合物可用于治療累及機(jī)體任何組織的各種細(xì)菌感染的傷口或防止有被細(xì)菌感染風(fēng)險的傷口被感染。有兩種傷口類型，開發(fā)性和閉合性傷口。按照引起傷口的物體，對開放性傷口分類。例如由邊緣光滑的鋒利物體例如刀、剃刀或玻璃碎片造成的切口或切傷(包括手術(shù)創(chuàng)傷)。撕裂傷是因位于硬組織上的軟組織受鈍擊所造成的不規(guī)則傷口(例如覆蓋顱骨的皮膚的撕裂傷)或由例如分娩造成的皮膚和其它組織撕裂。擦傷或擦破是其中皮膚的最上層(表皮)被擦傷的淺表傷口。刺傷由刺穿皮膚的物體(例如釘或針)造成。貫通傷由插入身體的物體(例如刀)造成。槍彈傷由射入身體(例如射入傷)和/或射穿身體(例如射出傷)的子彈或類似射彈造成 。在醫(yī)學(xué)情況下，所有的戳傷和槍彈傷都為開放性傷口。開放性傷口還包括由熱、化學(xué)或電擊傷引起的燒傷創(chuàng)面。閉合性傷口包括挫傷(更常稱為瘀傷，由損傷皮下組織的鈍物外傷造成)、血腫(亦稱blood tumor,由血管損傷造成,進(jìn)而造成皮下血液聚集)和擠壓傷(由在長時間內(nèi)施以極大力或過分使力造成)。在某些實施方案中，本文所述組合物用來治療細(xì)菌感染的開放性傷口或預(yù)防開放性傷口的細(xì)菌感染。在某些實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防槍彈傷、刺傷和/或貫通傷的細(xì)菌感染。在某些實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防術(shù)后細(xì)菌感染、手術(shù)部位細(xì)菌感染、導(dǎo)管相關(guān)性細(xì)菌感染或血液透析相關(guān)性細(xì)菌感染。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療或防止開放性傷口的細(xì)菌感染、槍彈傷、刺傷和/或貫通傷。在某些實施方案中，本文所述組合物非用于治療或預(yù)防術(shù)后細(xì)菌感染、手術(shù)部位細(xì)菌感染、導(dǎo)管相關(guān)性細(xì)菌感染或血液透析相關(guān)性細(xì)菌感染。在一些實施方案中，傷口是慢性傷口。慢性傷口可以是未能適當(dāng)愈合的任何傷口，包括手術(shù)創(chuàng)傷(例如植皮供區(qū))、皮膚潰瘍(例如糖尿病性潰瘍、靜脈淤滯性潰瘍、小腿潰瘍、動脈供血不足潰瘍(arterial insufficiency ulcer)或褥瘡)或燒傷創(chuàng)面。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防慢性傷口感染(例如與糖尿病性潰瘍、靜脈淤滯性潰瘍、小腿潰瘍、動脈供血不足潰瘍、褥瘡、手術(shù)創(chuàng)傷或灼傷相關(guān)的感染)。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療或預(yù)防慢性傷口細(xì)菌感染(例如非用于預(yù)防與糖尿病性潰瘍、靜脈淤滯性潰瘍、小腿潰瘍、動脈供血不足潰瘍、褥瘡、手術(shù)創(chuàng)傷或灼傷相關(guān)的細(xì)菌感染)。在某些實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防醫(yī)院內(nèi)細(xì)菌感染。醫(yī)院內(nèi)細(xì)菌感染中，手術(shù)創(chuàng)傷細(xì)菌感染占支配地位；統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示高達(dá)所有手術(shù)患者的8%。這類感染類型的直接成本每年約為45億美元。許多醫(yī)院傳染性細(xì)菌發(fā)展成抗生素抗性，因此需要非抗生素型治療。在醫(yī)院情況下使用本文所述sNAG組合物可扣減大部分成本，并顯著減少抗生素抗性菌種的產(chǎn)生。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療或預(yù)防醫(yī)院內(nèi)細(xì)菌感染，例如手術(shù)細(xì)菌感染。在一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防出血傷口(例如出血表面?zhèn)?的細(xì)菌感染。在一個實施方案中，本文所述組合物可用來治療槍彈傷、刺傷、貫通傷或手術(shù)創(chuàng)傷從而治療或預(yù)防這類傷口的細(xì)菌感染。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療或預(yù)防出血傷口(例如出血表面?zhèn)?的細(xì)菌感染。本文所述組合物可用于治療或預(yù)防皮膚傷口(例如累及皮膚表皮層和真皮層的傷口以及角膜和襯有上皮的器官的損傷)的細(xì)菌感染，從而治療或預(yù)防這類傷口的細(xì)菌感染。傷口可由各種物理創(chuàng)傷包括切傷、擦傷、燒傷、化學(xué)暴露、手術(shù)操作(例如手術(shù)切開術(shù)、植皮術(shù))造成。在一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療角膜和鞏膜創(chuàng)傷，包括累及眼的上皮層、基質(zhì)層和內(nèi)皮層的創(chuàng)傷，從而治療或預(yù)防這類傷口的細(xì)菌感染。在又一個實施方案中，本文所述組合物非用于治療或預(yù)防皮膚傷口的細(xì)菌感染。在一些實施方案中，本文所述組合物可用來治療被診斷患有細(xì)菌感染的患者的傷口。在某些實施方案中，在使用本文所述組合物治療細(xì)菌感染的傷口時，通過試驗或測定法，測定受細(xì)菌感染的傷口中細(xì)菌抗原的存在情況。在一個實施方案中，進(jìn)行傷口物培養(yǎng)以檢測患者傷口的細(xì)菌感染。在另外其它的實施方案中，由一種或多種細(xì)菌感染癥狀的存在情況，確定傷口被感染。在其它實施方案中，當(dāng)患者表現(xiàn)出一種或多種以下細(xì)菌感染癥狀時，可使用本文所述組合物治療患者的傷口，例如:傷口愈合緩慢；傷口部位發(fā)熱、發(fā)紅和/或腫脹；傷口部位觸痛；傷口部位液體或膿流出；和/或發(fā)熱。傷口細(xì)菌感染的癥狀包括但不限于局限性紅斑、局限性疼痛、局限性發(fā)熱、蜂窩組織炎、水腫、膿腫、可為粘性、變色和膿性的分泌物、傷口愈合遲緩、創(chuàng)緣內(nèi)和/或創(chuàng)`緣兩者上的組織變色、變脆、出血性肉牙組織、傷口部位發(fā)出異味、換藥部位突如其來的疼痛和/或觸痛、淋巴管炎(即源于傷口的紅線、并導(dǎo)致腫脹觸痛的淋巴腺在受累區(qū)域排除)和與傷口基部的傷口凹陷/突起(pocketing/bridging)有關(guān)的傷口破裂(即傷口在與跨越整個傷口床的不均勻散布的肉牙組織相對的基部發(fā)生肉牙組織條帶)。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在一個實施方案中，本文所述組合物可用于傷口愈合和傷口細(xì)菌感染治療，或用于傷口愈合和防止傷口細(xì)菌感染。在一個實施方案中，本文所述組合物用來加快傷口愈合，同時治療或預(yù)防傷口細(xì)菌感染。sNAG納米纖維組合物對傷口愈合的作用和傷口愈合應(yīng)用中sNAG納米纖維的一些用途描述于美國專利公布號2009/0117175，其通過引用以其整體結(jié)合到本文中(參見例如實施例2)。5.4.2其它細(xì)菌感染的治療或預(yù)防在某些實施方案中，本文所述sNAG納米纖維組合物可用于治療和/或預(yù)防皮膚、胃腸道、呼吸道、泌尿道、生殖道、血液、咽喉、耳、眼、鼻竇或機(jī)體的任何其它器官或組織的細(xì)菌感染。在另一個實施方案中，本文所述sNAG納米纖維組合物可用于治療和/或預(yù)防皮膚病況、胃腸病況、呼吸道病況和/或與細(xì)菌感染有關(guān)的任何其它器官或組織的病況。在一些實施方案中，將本文所述sNAG納米纖維組合物局部施用于患者的皮膚、口、耳、眼、肛門或腹股溝區(qū)以治療或預(yù)防細(xì)菌感染。在一些實施方案中，使用本文所述組合物治療和/或預(yù)防非處于傷口部位的機(jī)體器官或組織的細(xì)菌感染，和/或與傷口無關(guān)的或非由傷口造成的細(xì)菌感染。在某些實施方案中，本文所述sNAG納米纖維組合物用來治療現(xiàn)有的細(xì)菌感染。例如，這類組合物可用來治療通過試驗或測定(例如本文描述或本領(lǐng)域已知的試驗之一)被診斷患有細(xì)菌感染的對象。或者，這類組合物可用來治療出現(xiàn)細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的一種或多種癥狀，例如技術(shù)人員已知的(例如由治療醫(yī)生/醫(yī)師確定為細(xì)菌感染的癥狀)和/或本文描述的細(xì)菌感染的一種或多種癥狀的對象。在某些實施方案中，本文所述組合物用來治療與細(xì)胞微生物叢失衡有關(guān)的病況或與細(xì)胞微生物叢異常或細(xì)胞微生物叢變化有關(guān)的病況。例如，這類組合物可用來治療其皮膚細(xì)胞微生物叢不同于對照對象(例如無皮膚病況的癥狀的對象)的皮膚細(xì)胞微生物叢的患者的皮膚病況。在其它實例中，這類組合物可用來治療其腸細(xì)胞微生物叢(或其它組織或器官的微生物叢)不同于對照對象(例如無腸病況的癥狀的對象)的腸細(xì)胞微生物叢的患者的腸病況(或任何其它組織或器官的病況)。在其它實施方案中，本文所述組合物可用于治療已知與細(xì)菌感染有關(guān)或被細(xì)菌感染加重的任何疾病(例如痤瘡)。在一個實施方案中，本文所述組合物可用來治療被銅綠假單胞菌感染的囊性纖維化患者。在一些實施方案中，本文所述組合物有效對抗由細(xì)菌分泌或排出的毒素。在一個實施方案中，本文所述組合物可抑制/減少細(xì)菌毒素(和/或由細(xì)菌毒素引起的病況或癥狀)，例如由炭疽芽孢桿菌、艱難梭菌、白喉棒桿菌、銅綠假單胞菌產(chǎn)生的毒素；內(nèi)毒素和/或細(xì)胞溶素。一些防衛(wèi)素能 夠抑制細(xì)菌毒素，包括由炭疽芽孢桿菌、艱難梭菌、白喉棒桿菌、銅綠假單胞菌產(chǎn)生的細(xì)菌毒素，以及細(xì)胞溶素(由革蘭氏陽性細(xì)菌產(chǎn)生的溶解紅細(xì)胞的內(nèi)毒素)。鑒于防衛(wèi)素的這些功能，導(dǎo)致防衛(wèi)素表達(dá)和分泌途徑的活化可供抗生素依賴性地清除細(xì)菌感染，因此避免細(xì)菌抗性的產(chǎn)生。在某些實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防皮膚的一種或多種細(xì)菌感染，或與細(xì)菌感染有關(guān)的皮膚疾病。在一些實施方案中，本文所述組合物用來治療局限性皮膚感染和/或彌散性皮膚感染。在一些實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防皮膚感染或者與累及皮膚的表皮、真皮和/或皮下(下皮)組織的細(xì)菌感染有關(guān)的皮膚疾病。在這些實施方案的一些中，皮膚受累層包括表皮的一層或多層(即基底層、棘層、粒層、透明層(stratum licidum)和角質(zhì)層)、真皮組織的一種或多種類型(即膠原、彈性組織和網(wǎng)狀纖維)、真皮的一層或多層(即上層、乳頭層和下網(wǎng)狀層)；和/或下皮組織的一種或多種類型(即脂肪、彈性蛋白和結(jié)締組織)。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防皮膚表面的細(xì)菌感染。在另一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防皮膚的葡萄球菌(“Staph”)感染和/或皮膚的鏈球菌(“Str印”)感染。在又一個實施方案中，本文所述組合物用來治療皮膚的白色葡萄球菌(Staphylococcus albus)和/或金黃色葡萄球菌感染。在一些實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防蜂窩組織炎、膿皰病、毛囊炎、紅癬、癰、癤、膿腫、丹毒和/或皮膚炭疽。在另一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防蜂窩組織炎。蜂窩組織炎影響較深層的真皮和皮下組織，通常影響臉、臂和腿，并幾乎總是因為導(dǎo)致細(xì)菌感染的皮膚破壞而發(fā)生。蜂窩組織炎的癥狀包括以下一種或多種:皮膚破壞的周圍皮膚腫脹、疼痛、觸痛、外部起泡體征、淋巴結(jié)間的紅線、發(fā)熱和發(fā)冷。在另一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防毛囊處皮膚細(xì)菌感染(例如毛囊炎)。毛囊炎的癥狀包括腫脹、毛發(fā)周圍膿皰、硬結(jié)和疼痛。在另一個實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防痤瘡。痤瘡的出現(xiàn)通常是細(xì)菌感染的癥狀。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)或由細(xì)菌感染造成的皮炎。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在某些實施方案中，本文所述組合物可用于治療和/或預(yù)防一種或多種腸/消化道細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的胃腸疾病。普通形式的腸細(xì)菌感染包括沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、大腸桿菌、棱菌屬、葡萄球菌屬、李斯特氏菌屬和耶爾森氏菌屬。這些細(xì)菌引起腹瀉和胃腸炎癥，亦稱胃腸炎(gastroeneteritus)。腸細(xì)菌感染的癥狀包括但不限于腹部疫攣和疼痛、血便、食欲不振、不時伴發(fā)嘔吐、發(fā)熱和腹瀉的惡心。在一些實施方案中，本文所述組合物用來治療出現(xiàn)常與細(xì)菌感染有關(guān)的食物中毒的一種或多種癥狀的患者。在某些實施方案中，本文所述組合物可用來治療與葡萄球菌感染(例如金黃色葡萄球菌感染)有關(guān)的疾病。在這些實施方案的一些中，所述疾病為皮膚、鼻、口和/或性區(qū)的葡萄球菌感染。在一些實施方案中，疾病為肺炎、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、中毒性休克綜合征和/或敗血癥。在一個實施方 案中，本文所述組合物可用來治療對一種或多種抗生素有抗性的葡萄球菌細(xì)菌，例如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(“MRSA”)。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予被診斷患有葡萄球菌感染的對象，或給予出現(xiàn)一種或多種葡萄球菌感染癥狀的對象(例如存在以下癥狀的一種或多種:小紅腫塊、脆紅腫塊、灌膿腫塊或膿腫、癤、眼瞼腺炎、水皰和/或紅色結(jié)痂皮膚，例如鼻和口周圍的紅色結(jié)痂皮膚或中毒性休克綜合征的一種或多種癥狀)。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在某些實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的感冒。例如，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防盡管使用標(biāo)準(zhǔn)止痛藥卻仍持續(xù)的感冒。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防鼻竇、耳或咽喉的細(xì)菌感染。這類細(xì)菌感染的癥狀包括局限性疼痛和腫脹。鼻竇細(xì)菌感染可導(dǎo)致流鼻涕和臉或額部劇烈疼痛。在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療膿毒性咽喉炎(釀膿鏈球菌)。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在一些實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防生殖器、泌尿道或肛門細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的泌尿道或生殖道疾病。在這些實施方案的一些中，本文所述組合物可用來治療與細(xì)菌感染有關(guān)的性傳播疾病。這類感染的癥狀包括但不限于尿痛、渾濁分泌物和/或性交疼痛。在這些實施方案的一些中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防梅毒、淋病、衣原體病(clamydia)和滴蟲病的一種或多種。在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療衣原體病(Chlamidya)。在另一個實施方案中，本文描述組合物用來治療淋病。淋病的癥狀包括局限性骨盆疼痛、搔癢和刺激、尿痛、稠的黃色或綠色分泌物、月經(jīng)期間出血。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防細(xì)菌性陰道病感染。細(xì)菌性陰道病的癥狀包括陰道分泌物、氣味、陰道搔癢和腹部疼痛。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在其它實施方案中，本文所述組合物可用于治療或預(yù)防呼吸道感染(例如肺部細(xì)菌感染)或與細(xì)菌感染有關(guān)的呼吸道疾病。在一些實施方案中，這類組合物用于治療或預(yù)防上呼吸道感染。在一個實施方案中，這類組合物用于治療或預(yù)防結(jié)核病。結(jié)核病由結(jié)核分枝桿菌(mucobacterium tuberculosis)引起,且是通過噴嚷或唾液從人傳播給人的高度傳染性疾病。因此，本文所述組合物不僅可用來治療被診斷患有結(jié)核病或表現(xiàn)結(jié)核病癥狀的對象，而且還可用來治療與這類對象接觸的個體(例如家庭成員、護(hù)理人或醫(yī)務(wù)人員)。結(jié)核病癥狀包括咳血、過度體重減輕、疲倦、食欲不振和持續(xù)發(fā)熱。在一些實施方案中，本文所述組合物防止一種或多種上列癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或縮短/降低這些癥狀的一種或多種的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療肺炎和/或肺炎鏈球菌感染。在另一個實施方案中，這類組合物用來治療支氣管炎。在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療黏膜炎莫拉氏菌(Moraxella catarrhalis)、肺炎鏈球菌和/或流感嗜血菌(Haemophilus influenza)。在一些實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防黏膜表面(例如口腔黏膜)細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的黏膜表面的疾病/病況。在一個實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防口腔細(xì)菌感染。例如，這類組合物可用于治療或預(yù)防與口的細(xì)菌感染有關(guān)的病況例如齦炎、齲齒和/或蛀牙。在一個實施方案中，本文所述組合物可用于口腔衛(wèi)生
女口在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療耳的細(xì)菌感染，例如中耳感染或與這類感染有關(guān)的疾病。在一個實施方案中，本文所述組合物用來治療由細(xì)菌感染造成的中耳炎。在一些實施方案中，本文所述組合物用于治療或預(yù)防植入假體(例如心臟瓣膜和導(dǎo)管)的細(xì)菌感染。在一些實施方案中，本文所述組合物用來治療動物咬傷(例如貓狗咬傷)以防止細(xì)菌感染。本文所述組合物可用于治療或預(yù)防各種細(xì)菌感染相關(guān)疾病包括但不限于麻風(fēng)(Hansen病)、霍亂、炭疽(例如皮膚炭疽、肺炭疽、胃腸炭疽)、百日咳、腹股溝肉芽腫、細(xì)菌性陰道病、淋病、新生兒眼炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、梅毒、先天性梅毒、頓咳、鳥分枝桿菌綜合征(mycobacterium avium complex)、類鼻疽(meliodosis)、鉤端螺旋體病、破傷風(fēng)、猩紅熱、鏈球菌感染、侵襲性A組鏈球菌病、鏈球菌中毒性休克綜合征、腦膜炎球菌病、菌血癥、膿毒性咽喉炎、傷寒發(fā)熱型沙門氏菌病、痢疾、結(jié)腸炎、伴發(fā)胃腸炎和小腸結(jié)腸炎的沙門氏菌病、細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、志賀菌病、白喉、皮膚白喉、呼吸道白喉、軍團(tuán)病、結(jié)核病、潛伏性結(jié)核、乙型流感嗜血菌、傷寒、副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌(vibrio vulnificus)、弧菌、耶爾森氏鼠疫桿菌腸道病、惠普爾病(Whipple’s disease)、急性闌尾炎、腦膜炎、腦炎、膿皰病、蜂窩組織炎、癰、癤、痤瘡、膿毒癥、敗血癥、肺炎、支原體肺炎、腦膜炎球菌病、腦膜炎、沃-弗綜合征(Waterhouse-Friderichsen syndrome)、尸喊食物中毒、葡萄球菌食物中毒、中毒性休克綜合征、壞死性肺炎、敗血癥、急性感染性心內(nèi)膜炎、汗腺感染(例如化膿性汗腺炎)、由蜱傳播的細(xì)菌疾病(例如落磯山斑疹熱、萊姆病)、肉毒中毒、鼠疫(例如黑死病、肺鼠疫)、土拉菌病、布魯氏菌病、急性腸炎、非淋病性尿道炎、性病性淋巴肉芽腫、沙眼、新生兒包涵體性結(jié)膜炎、鸚鵡熱、假膜性結(jié)腸炎、氣性壞疽、急性食物中毒、腹瀉、旅行者腹瀉、嬰兒腹瀉、出血性結(jié)腸炎、溶血性尿毒綜合征、支氣管炎、李斯特菌病、厭氧菌性蜂窩組織炎、消化性潰瘍、龐蒂亞克熱、膀胱炎、子宮內(nèi)膜炎、中耳炎、鼻竇炎、鏈球菌性咽炎、風(fēng)濕熱、丹毒、產(chǎn)褥熱、壞死性筋膜炎、醫(yī)院內(nèi)感染、假單胞菌感染和/或貓抓病。5.5患者群在某些實施方案中，可將本文所述sNAG納米纖維組合物給予未感染對象(naive subject)，即未患細(xì)菌感染的對象。在一個實施方案中，將本文所述組合物給予有受細(xì)菌感染風(fēng)險的未感染對象。在一個實施方案中，可將本文所述sNAG納米纖維組合物給予被診斷患有細(xì)菌感染的患者。在另一個實施方案中，可將本文所述組合物給予出現(xiàn)一種或多種細(xì)菌感染的癥狀的患者。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予被診斷患有細(xì)菌感染的患者。在某些實施方案中，在給予本文所述組合物之前，患者被診斷患有細(xì)菌感染。例如，當(dāng)在取自患者的生物樣品中檢出細(xì)菌抗原時，可將本文所述組合物給予患者。在一個實施方案中，生物樣品獲自將通過本文所述組合物治療的部位或區(qū)域或?qū)⒔o予本文所述組合物的區(qū)域。在一個實施方案中，使用拭子從疑似感染的部位采集細(xì)胞或膿以檢測細(xì)菌感染。在另一個實施方案中，從疑似感染部位(例如傷口)吸取液體以檢測細(xì)菌感染。在又一個實施方案中，進(jìn)行活組織檢查以檢測細(xì)菌感染。在一個實施方案中，當(dāng)疑似感染部位是傷口時，可進(jìn)行傷口物培養(yǎng)以檢測細(xì)菌感染。在 另一個實施方案中，生物樣品獲自患者的血液、尿液、痰或糞便。在一些實施方案中，可進(jìn)行血液或尿液檢驗以檢測細(xì)菌感染(例如當(dāng)懷疑細(xì)菌感染傳播到血液或其它組織/器官中時)。在一些實施方案中，采用DNA檢測方法例如PCR，測試所采樣品(例如細(xì)胞、組織或液體)的一種或多種細(xì)菌類型的情況。在其它實施方案中，免疫熒光分析、血清學(xué)、培養(yǎng)(例如血液瓊脂培養(yǎng))或本領(lǐng)域已知的和/或?qū)嵺`的可用于細(xì)菌感染實驗室診斷的任何其它試驗。在其它具體實施方案中，可將本文所述組合物給予被診斷患有或出現(xiàn)細(xì)菌感染相關(guān)疾病的一種或多種癥狀的患者。在某些實施方案中，在給予本文所述組合物之前，患者被診斷患有與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或者出現(xiàn)細(xì)菌感染相關(guān)疾病的一種或多種癥狀。細(xì)菌感染相關(guān)疾病可通過技術(shù)人員已知的任何方法診斷，包括評價患者的癥狀和/或檢測患者生物樣品中的細(xì)菌抗原(例如如上所述)。在一個實例中，治療醫(yī)師或其它醫(yī)學(xué)專業(yè)人士可將本文所述組合物給予被診斷患有細(xì)菌感染相關(guān)疾病的患者。在另一個實例中，在檢出細(xì)菌感染相關(guān)疾病的一種或多種癥狀時，患者可使用本文所述組合物。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予被診斷患有以下感染的患者:例如炭疽芽孢桿菌、百日咳鮑特氏菌、布氏疏螺旋體、流產(chǎn)布魯氏菌、狗布魯氏菌、馬耳他布魯氏菌、豬布魯氏菌、空腸彎曲桿菌、嬰I踏熱衣原體(Chlamydia psittaci)、肺炎衣原體、沙眼衣原體、嬰鳥踏熱衣原體、肉毒梭菌、艱難梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、破傷風(fēng)梭菌、白喉棒桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、大腸桿菌、土拉熱弗朗西絲氏菌、流感嗜血菌、幽門螺桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎性鉤端螺旋體、問號鉤端螺旋體、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、黏膜炎莫拉氏菌、麻風(fēng)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、肺炎枝原體、淋病奈瑟氏球菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、銅綠假單胞菌、奇異變形菌、卡氏肺孢菌(Pneumocystis jiroveci)、立氏立克次氏體、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、宋內(nèi)氏志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、非解乳糖鏈球菌、肺炎鏈球菌、釀膿鏈球菌、蒼白密螺旋體、霍亂弧菌、鼠疫耶爾森氏菌的細(xì)菌感染和/或本文所述或本領(lǐng)域已知的任何其它細(xì)菌感染。在一個實施方案中，將本文所述組合物給予被診斷患有由MRSA或銅綠假單胞菌所致細(xì)菌感染的患者。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予被診斷患有與細(xì)菌感染有關(guān)的以下疾病的患者:例如麻風(fēng)(Hansen病)、霍亂、炭疽(例如皮膚炭疽、肺炭疽、胃腸炭疽)、百日咳、腹股溝肉芽腫、細(xì)菌性陰道病、淋病、新生兒眼炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、梅毒、先天性梅毒、頓咳、鳥分枝桿菌綜合征、類鼻疽、鉤端螺旋體病、破傷風(fēng)、猩紅熱、鏈球菌感染、侵襲性A組鏈球菌病、鏈球菌中毒性休克綜合征、腦膜炎球菌病、菌血癥、膿毒性咽喉炎、傷寒發(fā)熱型沙門氏菌病、痢疾、結(jié)腸炎、伴發(fā)胃腸炎和小腸結(jié)腸炎的沙門氏菌病、細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、志賀菌病、白喉、皮膚白喉、呼吸道白喉、軍團(tuán)病、結(jié)核病、潛伏性結(jié)核、乙型流感嗜血菌、傷寒、副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、弧菌、耶爾森氏鼠疫桿菌腸道病、惠普爾病、急性闌尾炎、腦膜炎、腦炎、膿皰病、蜂窩組織炎、癰、癤、痤瘡、膿毒癥、敗血癥、肺炎、支原體肺炎、腦膜炎球菌病、腦膜炎、沃-弗綜合征、尸堿食物中毒、葡萄球菌食物中毒、中毒性休克綜合征、壞死性肺炎、敗血癥、急性感染性心內(nèi)膜炎、汗腺感染(例如化膿性汗腺炎)、由蜱傳播的細(xì)菌疾病(例如落磯山斑疹熱、萊姆病)、肉毒中毒、鼠疫(例如黑死病、肺鼠疫)、土拉菌病、布魯氏菌病、急性腸炎、非淋病性尿道炎、性病性淋巴肉芽腫、沙眼、新生兒包涵體性結(jié)膜炎、鸚鵡熱、假膜性結(jié)腸炎、氣性壞疽、急性食物中毒、腹瀉、旅行者腹瀉、嬰兒腹瀉、出血性結(jié)腸炎、溶血性尿毒綜合征、支氣管炎、李斯特菌病、厭氧菌性蜂窩組織炎、消化性潰瘍、龐蒂亞克熱、膀胱炎、子宮內(nèi)膜炎、中耳炎、鼻竇炎、鏈球菌性咽炎、風(fēng)濕熱、丹毒、產(chǎn)褥熱、壞死性筋膜炎、醫(yī)院內(nèi)感染、假單胞菌感染和/或貓抓病。在一些實施方案中，在感染癥狀出現(xiàn)之前或在感染癥狀變嚴(yán)重之前(例如在患者需要治療或住院之前)，將本文所述組合物給予患有細(xì)菌感染的患者。在一些實施方案中，在感染癥狀出現(xiàn)之后或在疾病癥狀變嚴(yán)重之后(例如患者需要治療或住院之后)，將本文所述組合物給予患病 患者。在一些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是動物。在某些實施方案中，動物是鳥。在某些實施方案中，動物是犬。在某些實施方案中，動物是貓。在某些實施方案中，動物是馬。在某些實施方案中，動物是牛。在某些實施方案中，動物是哺乳動物，例如馬、豬、小鼠或靈長類，優(yōu)選人。在一些實施方案中，動物是寵物或農(nóng)場動物。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是成人。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是50歲以上的成人。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是老年對象。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是早產(chǎn)嬰兒。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是幼童。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是兒童。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是嬰兒。在某些實施方案中，向其給予本文所述組合物的對象不是6月齡以下嬰兒。在一個具體實施方案中，本文所述待給藥的對象2歲或更小。
在另外其它的實施方案中，可將本文所述組合物給予有發(fā)生細(xì)菌感染風(fēng)險(例如有高風(fēng)險)的患者。有發(fā)生細(xì)菌感染高風(fēng)險的患者包括但不限于年長者(例如老年人)和無免疫應(yīng)答的人。在一些實施方案中，將本文所述組合物給予有發(fā)生細(xì)菌感染風(fēng)險的患者，例如但不限于無免疫應(yīng)答(例如因癌癥治療或移植術(shù)所致)的患者、兒童、早產(chǎn)嬰兒、老年人、糖尿病人、被診斷患有癌癥的人、已用傳統(tǒng)抗生素療程治療的患者、已進(jìn)行手術(shù)的患者和/或有傷口的患者。在一些實施方案中，可將本文所述組合物預(yù)防性給予有發(fā)生細(xì)菌感染風(fēng)險的患者，例如因例如年齡、營養(yǎng)不良、疾病、化學(xué)治療所致免疫系統(tǒng)缺乏免疫力的患者；用傳統(tǒng)抗生素療程治療的患者；或帶有傷口(例如開放性傷口)的患者。在其它實施方案中，有發(fā)生細(xì)菌感染風(fēng)險的患者是HIV/AIDS患者、癌癥患者、進(jìn)行移植手術(shù)的患者、哮喘(例如重度哮喘)患者、吸毒者、皮膚病患者、帶有侵入性裝置(例如血管內(nèi)導(dǎo)管)的患者、保健工作者或在空間受限設(shè)施中度過時光的患者(例如監(jiān)獄囚犯、士兵、長期醫(yī)療保健設(shè)施例如護(hù)理院等中的患者)。待給予本文所述組合物的患者還可以是患有慢性阻塞性肺病(COPD)、氣腫、鼻炎、支氣管炎、喉炎、扁桃體炎和/或囊性纖維化的患者。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予未診斷出病毒感染(例如HIV/AIDS)、真菌感染或酵母感染的患者。在某些實施方案中，將本文所述組合物給予不屬于一個或多個以下患者組:無免疫應(yīng)答患者、癌癥患者、HIV/AIDS患者、哮喘患者、進(jìn)行移植手術(shù)的患者、已進(jìn)行手術(shù)的患者和/或有傷口的患者。在一個實施方案中，待給予本文所述組合物的患者沒有傷口(例如慢性傷口或因例如手術(shù)或戰(zhàn)地創(chuàng)傷所致開放性傷口)。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是其一種或多種防衛(wèi)素肽無表達(dá)或表達(dá)水平低或者具有編碼一種或多種防衛(wèi)素肽的一種或多種基因的突變/缺失的對象。在一些實施方案中， 待給予本文所述組合物的對象是其中一種或多種α-防衛(wèi)素(例如DEFAl、DEFA1B、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFA6)、一種或多種 β -防衛(wèi)素(例如 DEFB1、DEFB2、DEFB4、DEFB103A、DEFB104A、DEFB105B、DEFB107B、DEFB108B、DEFBl 10、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFB118、DEFBl 19, DEFB123, DEFB124, DEFB125, DEFB126, DEFB127, DEFB128, DEFB129,DEFB131、DEFB136)和/或一種或多種Θ -防衛(wèi)素(例如DEFT1P)無表達(dá)或表達(dá)水平低或表達(dá)水平改變的對象。在一些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是其中DEFA1、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFBl、DEFB3、DEFB103A、DEFB104A、DEFB108B、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFBl 18、DEFBl 19、DEFB123, DEFB124, DEFB125, DEFB126, DEFB128, DEFB129 和 DEFB131 中的一種或多種無表達(dá)或表達(dá)水平低或表達(dá)水平改變的對象。在某些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是其中一種或多種Toll受體(例如TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLRlO、TLRl I和/或TLR12)無表達(dá)或表達(dá)水平低或表達(dá)水平改變的對象。在另外其它的實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是其中IL-1、CEACAM3、SPAGl1、SIGIRR(ILl 樣受體)、IRAK1、IRAK2、IRAK4、TBKl、TRAF6 和 IKKi 中的一種或多種無表達(dá)或表達(dá)水平低或表達(dá)水平改變的對象。在一些實施方案中，待給予本文所述組合物的對象是其中 IRAK2、SIGIRR、TLRl、TLR2、TLR4、TLR7、TLR8、TLRlO 和 TRAF6 的一種或多種無表達(dá)或表達(dá)水平低或表達(dá)水平改變的對象。基因的低表達(dá)水平是比正常表達(dá)水平低的水平(例如低1.25倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍)，其中正常表達(dá)水平是技術(shù)人員認(rèn)為在對象所屬物種中是正常的表達(dá)水平和/或是同一物種中大多數(shù)對象的表達(dá)水平?；虮磉_(dá)水平改變是不同于正常表達(dá)水平的水平(例如超過 20%,25%,30%,50%,75%,100%,150%,200%,250%,300% )，其中正常表達(dá)水平是技術(shù)人員認(rèn)為在對象所屬物種中是正常的表達(dá)水平和/或是同一物種中大多數(shù)對象的表達(dá)水平。其中“正常”表達(dá)的一種或多種防衛(wèi)素基因是:(i)已知存在于未出現(xiàn)癥狀的對象或未診斷出待治療的疾病或感染的對象的平均表達(dá)水平；(ii)在3、5、10、20、25、50名或更多名未出現(xiàn)癥狀的對象或未診斷出待治療的疾病或感染的對象中檢測的平均表達(dá)水平；和/或(iii)在疾病或感染發(fā)作之前在待給予本文所述組合物的患者中檢測的表達(dá)水平。5.6sNAG納米纖維纟目合物的給藥方式在某些實施方案中，本文描述了用于治療或預(yù)防細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，其中將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予需要這類治療的患者。在一些實施方案中，將sNAG納米纖維組合物局部應(yīng)用于細(xì)菌感染或疾病風(fēng)險加大的組織或器官。在一些實施方案中，將有效量的sNAG納米纖維和/或sNAG納米纖維組合物給予對象。在一些實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患者的細(xì)菌感染部位或細(xì)菌感染相關(guān)疾病累及的部位。在另外其它的實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患者的細(xì)菌感染部位和患者的細(xì)菌感染部位周圍或細(xì)菌感染相關(guān)疾病累及的部位。在另外其它的實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物施用在患者的細(xì)菌感染部位附近或細(xì)菌感染相關(guān)疾病累及的部位附近。在又一個實施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予有細(xì)菌感染高風(fēng)險的部位?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的局部給藥的許多合適方法的任一種給予本文所述sNAG納米纖維組合物，包括但不限于局部給予皮膚、局部給予機(jī)體的任何其它表面(例如黏膜表面)、通過吸入、鼻內(nèi)、陰道、直腸、口腔或舌下給予。局部給藥方式可隨待治療或預(yù)防的疾病而變化?？?配制sNAG納米纖維組合物用于局部給藥的各種類型。在一個實施方案中，可將包含sNAG納米纖維的組合物施用于患者的皮膚。例如，可將這類組合物局部施用于患者的皮膚用于治療和/或預(yù)防皮膚細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的皮膚疾病。在另一個實施方案中，可將本文所述組合物局部施用于患者的黏膜表面。例如，可將這類組合物局部施用于口腔黏膜用于治療和/或預(yù)防口或牙齦的細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的口或牙齦疾病。在一些實施方案中，可將包含sNAG納米纖維的組合物施用于患者的傷口。例如，可將這類組合物直接局部施用于傷口部位或患者的傷口部位附近用于治療和/或預(yù)防傷口的細(xì)菌感染或與傷口細(xì)菌感染有關(guān)的疾病。在一個這樣的實施方案中，傷口是細(xì)菌感染的傷口，例如按照本文所述方法之一診斷。傷口可以是本文所述傷口類型的任一種。在另外其它的實施方案中，未將包含sNAG納米纖維的組合物施用于患者的傷口，或未施用于患者的細(xì)菌感染的傷口。在一些實施方案中，可將本文所述組合物局部施用于患者的生殖器、尿路或肛門表面/區(qū)域。例如，可將這類組合物局部施用于生殖器、尿路或肛門表面/區(qū)域用于治療和/或預(yù)防生殖器、尿路或肛門細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的這類組織的疾病。用于局部給藥的上列方法可包括以乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、液體溶液劑、膜、軟片、噴霧劑、糊劑、粉劑或本文所述或本領(lǐng)域已知的任何其它制劑的形式給予sNAG納米纖維。例如，還可將sNAG納米纖維施用于敷料或繃帶，以治療患者的皮膚上的局限性感染/病況。在一些實施方案中，可將本文所述組合物作為噴霧劑施用于患者的口腔和/或呼吸系統(tǒng)。例如，可作為噴霧劑施用這類組合物用于治療和/或預(yù)防口、鼻、牙齦、咽喉或肺的細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的口、鼻、牙齦、咽喉或肺的疾病/病況。在一個這樣的實施方案中，可配制組合物以作為吸入器給予。在一些實施方案中，可將本文所述組合物作為栓劑施用于患者的直腸、陰道或尿道。例如，可作為栓劑施用這類組合物用于治療和/或預(yù)防消化道、泌尿道或生殖道的細(xì)菌感染或與細(xì)菌感染有關(guān)的這類組織的疾病。在另一個實施方案中，本文所述組合物可施用于手術(shù)操作部位。例如，可將這類組合物噴霧、作為乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、膜或粉劑施用或涂覆在待進(jìn)行手術(shù)操作的或已進(jìn)行手術(shù)操作的表面上。在一個實施方案中，將本文所述組合物施用于手術(shù)切開部位、切除組織的部位或手術(shù)縫線或縫合部位。本文所述組合物的這種給予可預(yù)防術(shù)后感染。例如，可在已知有細(xì)菌感染高風(fēng)險的手術(shù)操作期間或之后，使用本文所述組合物。已知有細(xì)菌感染高風(fēng)險的手術(shù)操作包括腸切除術(shù)、胃腸手術(shù)操作、腎手術(shù)等?？蓪⒈疚乃鼋M合物施用于任何上列手術(shù)操作或其它手術(shù)操作的部位。在另外其它的實施方案中，可將本文所述組合物涂覆在裝置(例如口腔衛(wèi)生或待用于患者或插入患者中的其它產(chǎn)品)上，以防止患者的細(xì)菌感染。在一些實施方案 中，本文考慮的方法包括檢測/診斷患者的細(xì)菌感染的步驟。在一些實施方案中，檢測/診斷包括患者生物樣品中一種或多種細(xì)菌或細(xì)菌抗原的試驗或測定。在其它實施方案中，診斷包括評價患者是否患有細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的一種或多種的癥狀。本文所述組合物可具有緩釋性質(zhì)和/或可以導(dǎo)致這類組合物緩釋的制劑給予。在一些實施方案中，如上文第5.1節(jié)中所述sNAG納米纖維隨時間進(jìn)行生物降解，sNAG納米纖維的這些性質(zhì)可導(dǎo)致或引起本文所述組合物的緩釋。在另外其它的實施方案中，采本領(lǐng)域已知的任何方法，將本文所述組合物配制成具有緩釋能力。本文所述組合物可在將組合物給予患者后相當(dāng)于或久于以下時間的一段時間內(nèi)緩釋:約6小時、12小時、18小時、24小時(I天)、2天、3天、5天、7天(I周)、10天、14天(2周)、3周或4周。所考慮的治療方案包括sNAG納米纖維組合物(例如乳膏劑、膜或敷料)的單劑量或單次施用或者sNAG納米纖維組合物的多劑量或多次施用方案?？擅啃r一次、每日一次、每周一次或每月一次給予劑量或施用。例如，可一天一次、一天兩次、一天3次、一天4次、一天5次、每3小時一次、每6小時一次、每12小時一次、每24小時一次、每48小時一次、每72小時一次、一周一次、一周2次、一周3次、每隔一天一次、2周一次、3周一次、4周一次或一月一次給予sNAG納米纖維組合物的劑量。可給予sNAG納米纖維組合物持續(xù)以下時間:等于或大于I周、2周、3周、I月、2月、3月、4月、5月、6月、9月、I年、1.5年、2年、2.5年、3年、4年、5年、7年、10年或更多年。在一個這樣的實施方案中，sNAG納米纖維組合物在治療期間不引起任何副作用或只引起輕微副作用。在一個這樣的實施方案中，sNAG納米纖維組合物在響應(yīng)治療時不失去其療效或不引起細(xì)菌抗性菌株的產(chǎn)生。在另一個實施方案中，sNAG納米纖維組合物不引起刺激(例如中度或重度刺激)或變態(tài)反應(yīng)(例如中度或重度變態(tài)反應(yīng))。組合物中sNAG納米纖維的濃度可改變。一般而論,使用有效量的sNAG納米纖維。有效量可為足以實現(xiàn)一種或多種本文所述作用的量，例如有效減輕或根除細(xì)菌感染，或者減輕或根除細(xì)菌感染的一種或多種的癥狀的量。例如，組合物可包含約0.2-20mg/cm2 sNAG納米纖維/劑量(施用)組合物，其呈適于局部遞送至患者的形式。在某些實施方案中，本文所述組合物包含約 0.25、20mg/cm2、約 0.5_20mg/cm2、約 l_20mg/cm2、約 l_15mg/cm2、約
1-12mg/cm2、約 1-lOmg/cm2、約 l_8mg/cm2、約 l_5mg/cm2、約 2_8mg/cm2 或約 2_6mg/cm2sNAG納米纖維/劑量(施用)組合物，呈適于局部遞送至患者的形式。5.7聯(lián)合療法sNAG納米纖維組合物可與其它療法聯(lián)合給予，例如加強(qiáng)免疫系統(tǒng)的物質(zhì)、抗菌劑(例如抗生素)、防衛(wèi)素肽、防衛(wèi)素樣肽、止痛療法(例如鎮(zhèn)痛劑)、解熱療法和/或已知有效對抗或常用于治療和/或預(yù)防細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的其它藥劑或藥物。在一些實施方案中，本文所述組合物與其它抗菌劑聯(lián)合給予，例如抗生素。在一個這樣的實施方案中，本文 所述組合物可與常用于治療所述細(xì)菌感染或所述疾病的標(biāo)準(zhǔn)療法聯(lián)用來治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病。在一個實施方案中，可將本文所述組合物與已知有效對抗所述細(xì)菌感染或所述疾病的標(biāo)準(zhǔn)抗菌劑(例如抗生素)聯(lián)合給予被診斷患有或出現(xiàn)細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的癥狀的患者。在某些實施方案中，與下列抗生素類之一的抗生素聯(lián)合給予本文所述組合物:大環(huán)內(nèi)酯類(例如紅霉素、阿奇霉素)、氨基糖苷類(例如阿米卡星、慶大霉素、新霉素、鏈霉素)、頭孢菌素類(例如頭孢羥氨芐、頭孢克洛、頭孢噻肟、頭孢吡肟)、氟喹諾酮類(例如環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)、青霉素類(例如青霉素、氨芐西林、阿莫西林)、四環(huán)素類(例如四環(huán)素、多西環(huán)素)和碳青霉烯類(例如美羅培南、亞胺培南)。在一些實施方案中，與有效治療或預(yù)防或通常用于治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌感染、MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染的藥劑(例如抗生素)聯(lián)合給予本文所述組合物。在一個具體實施方案中，與以下一種或多種藥物聯(lián)合給予本文所述組合物:萬古霉素、磺胺藥(例如復(fù)方新諾明/甲氧芐啶-磺胺甲噁唑復(fù)方)、四環(huán)素(例如多西環(huán)素、米諾環(huán)素)、克林霉素、噁唑烷酮類(例如利奈唑胺)、達(dá)托霉素、替考拉寧、奎奴普丁 /達(dá)福普汀(共殺素)、替吉環(huán)素、蒜素、桿菌肽、呋喃西林、過氧化物、新生霉素、奈替米星、甲基乙二醛和蜜蜂防衛(wèi)素-1。還可與包含以下一種或多種藥物的敷料聯(lián)合給予本文所述組合物:過氧化物、妥布霉素、二葡萄糖酸氯己定、葡萄糖酸氯己定、左氧氟沙星和銀。在一個實施方案中，與一種或多種所列藥劑一起給予本文所述組合物以治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌感染，特別是MRSA感染。在一些實施方案中，在給予其它療法之前(例如I分鐘、15分鐘、30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時或更多個小時或者介于之間的任何時間)、同時或之后(例如I分鐘、15分鐘、30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時或更多小小時或者在介于之間的任何時間后)給予本文所述組合物。例如，可在給予抗菌劑(例如抗生素)之前、同時或之后給予這類組合物。在這些實施方案的一些中，可在患者已用其它抗菌劑(例如抗生素)進(jìn)行治療細(xì)菌感染的療程后，將本文所述組合物給予患者以治療或預(yù)防細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病。在一些實施方案中，可將本文所述組合物給予已對一種或多種抗菌劑(例如抗生素)產(chǎn)生抗性的患者。在一個實施方案中，可將本文所述組合物給予已用抗生素(例如按標(biāo)準(zhǔn)用于治療所述細(xì)菌感染的抗生素)進(jìn)行治療的療程且已對所述抗生素產(chǎn)生抗性的患者。然而，在某些實施方案中，僅給予sNAG納米纖維組合物。在一個這樣的實施方案中，sNAG納米纖維組合物不與任何其它療法一起給予，例如，它不與免疫調(diào)節(jié)劑、抗菌劑(例如抗生素)、防衛(wèi)素肽、防衛(wèi)素樣肽、止痛療法(例如鎮(zhèn)痛劑)或解熱療法一起給予。在一個實施方案中，sNAG納米纖維組合物不與抗生素聯(lián)合給予。在某些實施方案中，sNAG納米纖維組合物不與抗病毒劑、抗真菌劑或抗酵母劑一起聯(lián)合給予。5.8試劑盒還考慮了包含任何上述sNAG組合物的藥包或試劑盒。藥包或試劑盒可包括一個或多個容器，容器中裝有一種或多種包含本文所述組合物的成分。優(yōu)選在沒有污染的情況下，將組合物裝在有利于取出組合物的密封防水無菌包裝內(nèi)?？芍圃烊萜鞯牟牧习ㄤX箔、塑料或容易滅菌的其它常用材料。試劑盒可裝有用于單次給予或多次給予組合物的材料，優(yōu)選其中用單獨的防水無菌包裝提供用于單次給予的材料。在另一個實施方案中，提供具有雙室的容器。第一室裝有任何上述sNAG組合物，而第二室裝有另一種活性劑例如另一種抗菌劑。在作戰(zhàn)或臨床上，第一室中的組合物易與第二室中的活性劑混合以便隨后給予患者。此外，為緊急用途或軍事用途設(shè)計的試劑盒還可裝有一次性預(yù)滅菌的儀器，例如剪刀、手術(shù)刀、夾子、止血帶、彈性或無彈性繃帶等。任選與所述試劑盒或藥包相關(guān)的可以是監(jiān)管醫(yī)藥品或生物制品制造、使用或銷售的政府機(jī)構(gòu)規(guī)定形式的通告，該通告反映了已經(jīng)制造、使用或銷售機(jī)構(gòu)核準(zhǔn)用于給予人。例如，試劑盒可包括有關(guān)FDA批準(zhǔn)的`通告和/或使用說明書。本文所包括的試劑盒可用于上述應(yīng)用和方法。
6.實施例6.1實施例1:來自海洋硅藻的sNAG納米纖維通討Aktl/Etsl依賴件涂徑促講傷口愈合和防衛(wèi)素表達(dá)該實施例表明，sNAG納米纖維促進(jìn)皮膚傷口愈合和防衛(wèi)素表達(dá)，且AktI — Etsl途徑在通過sNAG納米纖維調(diào)節(jié)皮膚傷口愈合中起重要作用。6.1.1材料與方法sNAG/Taliderm納米纖維由Marine Polymer Technologies生產(chǎn)和供應(yīng),被制成用于傷口治療的合適藥貼。將野生型C57Black和Aktl失效小鼠關(guān)養(yǎng)在南卡羅來納醫(yī)科大學(xué)(Medical University of South Carolina)動物設(shè)施中。8-12 周齡的野生型和 Aktl 失效小鼠用50%純氧和50%異氟燒氣麻醉。恰在致傷前,將Nair Hair Removal Lotion用于其背部，去脫去任何不需要的毛。使用切割活檢鉆，取出背部4mm的圓形皮膚區(qū)。在第O天將Taliderm置于各傷口上，或留下傷口不治療。在1、3、5和7天，對傷口拍照，測量，并用8mm活檢鉆切取，以確保完整取出傷口和周圍皮膚。將用或不用Taliderm治療的野生型和Aktl失效傷口包埋在石蠟中，以備用于H&E和免疫熒光染色。
將石蠟包埋件切片，置于顯微鏡載玻片上染色。載玻片用二甲苯洗滌，脫去石蠟，并通過一系列分級乙醇(graded alcohols)再水化。然后將切片在0.1% Triton xlOO中孵育以透化。將切片在煮沸的抗原修復(fù)溶液(Antigen Retrival solution)中孵育。在第一山羊抗體、β-防衛(wèi)素31: 400稀釋液中孵育前，使用1%動物血清封閉。然后將切片在第一抗體中在潮濕箱中于4°孵育過夜。使用免疫熒光第二驢α-山羊488抗體1: 200稀釋液，接著用T0PR0-3核染色。采用共焦顯微術(shù)拍攝照片。使用蘇木精和伊紅染色觀察基本結(jié)構(gòu)例如表皮、真皮、肌肉和血管，并測定傷口中的取向和大致位置。還采用Η&Ε染色以開始鑒定哪些細(xì)胞類型被Taliderm以Aktl依賴性方式刺激。其它材料與方法描述于


和下面的結(jié)果部分中，并按照本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行。6.1.2 結(jié)果sNAG納米纖維刺激Etsl的上游調(diào)節(jié)子Aktl活化。圖1A顯示在響應(yīng)血清饑餓EC的NAG和sNAG刺激時磷酸-Akt的蛋白質(zhì)印跡分析。圖1B顯示以拼湊對照或Aktl shRNA慢病毒感染的EC的RT-PCR分析和對tsl和S26作為加載對照的表達(dá)進(jìn)行評價。圖1C表示將信號自sNAG納米纖維傳導(dǎo)至Aktl、Etsl和防衛(wèi)素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。通過Taliderm(sNAG)治療部分挽救Aktl失效動物中傷口愈合的延遲。圖2A顯示在用或不用Taliderm治療的情況下致傷WT和AKTl失效小鼠的代表性圖像。圖2B顯示第3天傷口的代表性小鼠皮膚切片的H&E染色。野生型和Aktl傷口切取物的H&E染色表明角質(zhì)形成細(xì)胞增殖和遷 移的Taliderm依賴性增加。短劃線表示橫跨創(chuàng)緣的角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的區(qū)域。在野生型和Aktl治療的傷口兩者中，與野生型和Aktl對照相比，橫跨創(chuàng)緣的上皮再生明顯增加。這就表明Taliderm增加不依賴于Aktl途徑的角質(zhì)形成細(xì)胞募集。雖然Taliderm誘導(dǎo)表皮橫跨創(chuàng)緣的完全上皮再生，但是與野生型相比，在下層組織中實質(zhì)上仍缺乏血管重建。這在Aktl動物中由于大量出血和紅細(xì)胞浸潤而顯而易見。sNAG納米纖維刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞因子和防衛(wèi)素表達(dá)。圖3A顯示使用針對α-防衛(wèi)素的抗體，用或不用sNAG處理的EC的免疫組織化學(xué)。圖3Β表示顯示納米纖維處理的EC導(dǎo)致α -防衛(wèi)素1-3分泌的ELISA。sNAG納米纖維以Aktl依賴性方式刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的防衛(wèi)素表達(dá)。圖4A和圖4B顯示在有或沒有Η)98059(ΜΑΡΚ抑制劑)、渥曼青霉素(PI3K抑制劑)的情況下或者用拼湊對照或AktlshRNA慢病毒感染的、用或不用sNAG處理的血清饑餓EC的定量RT-PCR分析，并對標(biāo)示基因的表達(dá)進(jìn)行評價。sNAG納米纖維刺激小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞中的β -防衛(wèi)素3表達(dá)。圖5Α顯示在第3天得自WT和Aktl失效動物的石蠟包埋小鼠皮膚傷口切片用β -防衛(wèi)素3和內(nèi)披蛋白抗體染色的免疫熒光染色。在WT和Aktl失效小鼠兩者中開發(fā)出皮膚傷口愈合模型以評價體內(nèi)Taliderm的作用。這些研究結(jié)果表明，在Taliderm治療的動物中，β-防衛(wèi)素3的表達(dá)以Aktl依賴性方式增加。Taliderm在愈合傷口中增加防衛(wèi)素表達(dá)的能力對治療和控制傷口感染具有重大影響。圖5Β顯示應(yīng)用NIHImageJ軟件對β -防衛(wèi)素3免疫熒光染色的定量測定。圖5C顯示W(wǎng)T和Aktl失效治療和未治療的角質(zhì)形成細(xì)胞用β -防衛(wèi)素3和T0PR0-3的免疫熒光染色。注意在WT和Aktl Taliderm治療的傷口中，綠色β-防衛(wèi)素3染色增加。傷口切片的免疫熒光標(biāo)記表明，Taliderm治療的傷口顯示β -防衛(wèi)素3表達(dá)以Aktl依賴性方式增加。雖然Aktl治療的傷口顯示β_防衛(wèi)素3適度增加，但是野生型治療的傷口表現(xiàn)出更明顯的增加。這就表明防衛(wèi)素3表達(dá)不僅僅由施用納米纖維而增加，而且至少部分依賴于Aktl途徑。β -防衛(wèi)素3表達(dá)似乎限于角質(zhì)形成細(xì)胞，這表明了該表達(dá)是角質(zhì)形成細(xì)胞特異性的。Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。圖6顯示Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點的示意圖。應(yīng)用Genomatix軟件，針對DEF1、4和5的mRNA上的保守位點，對轉(zhuǎn)錄起始位點上游500bp進(jìn)行分析。6.1.3 結(jié)論所提供的數(shù)據(jù)表明，Etsl的sNAG納米纖維刺激由Aktl被這些納米纖維激活而引起。納米纖維治療導(dǎo)致參與細(xì)胞募集的基因表達(dá)顯著增加，所述基因例如IL-1(已知的Etsl靶標(biāo))、VEGF和幾種防衛(wèi)素(β 3、α 1、α 4和α 5)、近來表明起化學(xué)引誘物作用的抗微生物小肽。PI3K/Aktl途徑的藥理抑制和使用shRNA敲減Aktl兩者導(dǎo)致這些趨化因子的表達(dá)降低。Aktl失效小鼠顯示被Taliderm納米纖維部分挽救的傷口愈合表型遲緩。Taliderm治療的傷口還顯示作為Aktl依賴性的防衛(wèi)素表達(dá)增加。

在Taliderm治療的傷口中β -防衛(wèi)素3表達(dá)和角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的增加表明Taliderm作為有效的傷口愈合產(chǎn)品的有益應(yīng)用。Taliderm在角質(zhì)形成細(xì)胞中以Aktl依賴性方式起增加抗微生物肽表達(dá)的作用，這表明了 Aktl在sNAG納米纖維功能中的必不可少的作用。將其與來自抑制PI3K/Aktl途徑和使用shRNA敲減Aktl導(dǎo)致這些趨化因子表達(dá)降低的實驗室的其它研究(Buff, Muise-Helmericks,未發(fā)表)相互關(guān)聯(lián)。雖然β -防衛(wèi)素3表達(dá)的增加是Aktl依賴性的，但是8mm傷口切取物的H&E染色(圖2B)表明，Taliderm在傷口再上皮化中不依賴于Aktl起作用。即使新的角質(zhì)形成細(xì)胞橫跨整個創(chuàng)緣，下層組織也未表明血管生長被同樣刺激。這就說明缺乏Aktl是造成真皮中血管滲漏和大量浮動紅細(xì)胞的原因。這表明對于血管形成的增加，Taliderm依賴于Aktl途徑?？偟膩碚f，(i)sNAG納米纖維(Taliderm)部分通過刺激血管生成而增加傷口愈合；(ii)對內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行sNAG納米纖維治療激活A(yù)ktl/Etsl依賴性途徑，導(dǎo)致細(xì)胞移動和細(xì)胞因子分泌改變；(iii) Taliderm治療的傷口顯示β -防衛(wèi)素3的表達(dá)以Aktl依賴性方式增加；(iv)用Taliderm治療Aktl失效動物部分挽救該表型，導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞增殖/遷移顯著增加；和(V)生物信息學(xué)分析表明，ETSl可能參與導(dǎo)致傷口愈合和細(xì)胞因子分泌增加的sNAG活化途徑。總之,這些研究結(jié)果表明Aktl — Etsl途徑在通過sNAG納米纖維調(diào)節(jié)皮膚傷口愈合中的重要作用，并支持使用這些納米纖維作為促進(jìn)傷口愈合的新的有效方法。6.2實施例2:sNAG納米纖維增加防衛(wèi)素表達(dá)，提高傷口閉合的動力學(xué)并具有間接的防衛(wèi)素依賴性抗菌作用。該實施例表明，sNAG納米纖維具有體內(nèi)對抗金黃色葡萄球菌的有效抗菌作用，該作用是間接的和防衛(wèi)素依賴性的。該實施例還表明sNAG納米纖維以Akt-1依賴性方式誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中防衛(wèi)素的體外表達(dá)和皮膚傷口中防衛(wèi)素的體內(nèi)表達(dá)，并提高傷口閉合的動力學(xué)。
6.2.1材料與方法組織培養(yǎng)，藥理抑制，ELISA:在37°與5% CO2下，將人臍帶靜脈EC(Lonza)維持在內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 (Lonza)中。內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 (EBM2)補(bǔ)充了如Lonza方法描述的EC生長培養(yǎng)基2SingleQuots和1%青霉素類/鏈霉素(Invitrogen)。在補(bǔ)充0.1 %胎牛血清(Valley Biomedical)的EBM2中達(dá)80_90%匯合時進(jìn)行血清饑餓達(dá)24小時，接著用無菌水中的高度純化的 pGlcNAc (50 μ g/ml)納米纖維(sNAG)(由 Marine Polymer Technologies,Inc., Danvers, Mass., USA提供)刺激。用于本研究的pGlcNAc娃藻衍生的納米纖維是來源于較長形式(NAG)的短的生物可降解纖維，平均長度為4-7 μ m，聚合物分子量約為60, OOODa0對于使用Η)098059(50μΜ)或渥曼青霉素(IOOnM)的抑制，將細(xì)胞預(yù)處理45分鐘后，用sNAG(50 μ g/ml)刺激3小時。統(tǒng)計分析:至少一式三份且至少獨立3次地進(jìn)行各定量實驗。應(yīng)用MicrosoftExcell進(jìn)行全部統(tǒng)計分析以計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和斯圖登t檢驗。慢病毒感染:針對Aktl的使命(Mission) shRNA慢病毒構(gòu)建體購自Sigma/Aldrich。合成的pLK0.1shRNA載體購自Addgene。使慢病毒在293T細(xì)胞中繁殖，將293T細(xì)胞保持在上述已補(bǔ)充的DMEM中。采用來自Addgene的用于產(chǎn)生慢病毒顆粒的方案，使用購自Addgene的psPAX2和pMD2.G包裝載體，進(jìn)行慢病毒的生產(chǎn)。對于靶細(xì)胞的感染，將
7.5X IO5個細(xì)胞鋪板于IOOmm2板中，使之孵育過夜。次日，使用終濃度為I μ g/ml的1，5_二甲基-1, 5-二氮^ 亞甲基聚甲溴化物(polybrene)和拼湊對照或Aktl shRNA慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞。轉(zhuǎn)導(dǎo)后，使內(nèi)皮細(xì)胞血清饑餓過夜，用sNAG(50g/ml)刺激3小時。通過RT-PCR，監(jiān)測全部感染的適當(dāng)降低。RT-PCR:對于半定量RT-PCR，按照生產(chǎn)商的說明書，用RNAsol (Teltest，Inc.)提取 RNA。按照生產(chǎn)商的說明書，使用 Oligo(dT),用 Superscript First Strand SynthesisKit (Invitrogen)自2 μ g總`RNA合成cDNA。PCR反應(yīng)物含有等量的cDNA和1.25 μ M的合適引物對(Sigma-ProIigo, St.Louis, MO, USA)。用于這些分析的全部引物序列如下:
AktlFI 5’ GAGGCCGTCAGCCACAGTCTG 3’
AktlR5’ ATGAGCGACGTGGCTATTGTG 3’
P -防衛(wèi)素 3F 5’ GTGGGGTGAAGCCTAGCAG 3’β-防衛(wèi)素 3R 5’TTTCTTTCTTCGGCAGCATT 3’α -防衛(wèi)素 IF 5’ CACTCCAGGCAAGAGCTGAT 3’α -防衛(wèi)素 IR 5’ TCCCTGGTAGATGCAGGTTC 3’
S26F5’ CTCCGGTCCGTGCCTCCAAG 3’
S26R5’ CAGAGAATAGCCTGTCTTCAG 3’循環(huán)條件為:94°C 5分鐘；94°C I分鐘30-35個循環(huán)，55-65°C (根據(jù)引物Tm) I分鐘，72°C I分鐘；72°C7分鐘，并冷卻至4°C。對于每個所用引物對，憑經(jīng)驗確定循環(huán)數(shù)在該測定的線性范圍內(nèi)。核糖體蛋白亞基S26引物作為內(nèi)部對照，進(jìn)行全部的半定量RT-PCR。在BioRad 分子成像系統(tǒng)(BioRad Molecular Imaging System) (Hercules, CA, USA)中觀察產(chǎn)物。使用均購自 Stratagene 的 Brilliant CYBR 綠色 QPCR 試劑盒聯(lián)合 Mx3000P Real-TimePCR系統(tǒng)，進(jìn)行實時PCR。使用檢測核糖體亞基S26的引物作為內(nèi)部對照。切割傷口愈合模型:在所有實驗中使用野生型C57B1/6和Aktl_/_[43]。在阻斷完整蛋白質(zhì)表達(dá)的翻譯起始位點上采用插入誘變策略，產(chǎn)生Aktl失效動物。對介于8-12周齡間的經(jīng)麻醉的成年雄性小鼠進(jìn)行致傷。使用4mm活檢鉆(Miltex)產(chǎn)生2個全厚皮膚傷口，在各脅產(chǎn)生兩個相同的傷口。使用O2/異氟烷汽化麻醉機(jī)(VetEquip，Inc.)，使小鼠麻醉。使用4%異氟烷用于誘導(dǎo)；2%用于手術(shù)。手術(shù)前，通過脫毛術(shù)脫毛，使用70%乙醇將該區(qū)域清洗并滅菌。傷口用以蒸餾水濕潤的sNAG膜治療或不予治療。在第3和5天，使動物安樂死，使用8mm活檢鉆(Miltex)收獲包括皮膚周圍在內(nèi)的整個傷口。將傷口固定在4%低聚甲醛中在4°下過夜，在石蠟中包埋，切片用于分析。蘇木精和伊紅染色(H&E):全部H&E 染色在 Histology Core Facility at theMedical University of South Carolina, Department of Regenerative Medicine andCell Biology中進(jìn)行。簡單地說，使切片在二甲苯中透明，通過一系列分級乙醇再水化，依次放入蘇木精和酸醇中。然后將樣品放入氨水中，在乙醇中漂洗，暴露于伊紅中后，通過分級乙醇脫水，并在二甲苯中透明。使用Cytoseal-XYL(Richard-Allan Scientific)將切片封片。切片使用Olympus BX40顯微鏡(4x物鏡，0.13)觀察H&E，并使用OlympusCamera (DP25型)和DP2-BSW數(shù)據(jù)采集軟件拍攝。細(xì)菌接種，組織革蘭氏染色，菌落形成單位定量測定:如上所述使8-12周之間的雄性小鼠致傷。挑選金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)的一個菌落，在37°下培養(yǎng)過夜，并調(diào)節(jié)吸光度為OD6tltl = 0.53。將ImL的金黃色葡萄球菌在10，OOOrpm離心，重新懸浮于無菌PBS中，使用15μ1接種各傷口。接種后將sNAG膜施用于治療組30分鐘。在致傷后第3和5天，使小鼠安樂死，使用8mm活檢鉆收獲傷口。將每只動物一個傷口在4%低聚甲醛中于4°C固定過夜，將另一傷口培養(yǎng)和鋪板在沒有抗生素的LB培養(yǎng)基中用于細(xì)菌定量測定(見下文)。將用于組織革蘭氏染色的傷口在石蠟中包埋并切片。使切片在二甲苯中透明，通過一系列酒精再消化，并按照生產(chǎn)商所述方法使用組織革蘭氏染色劑(Sigma-Aldrich)染色。對于培養(yǎng)，將傷口切片放入0.5ml細(xì)菌培養(yǎng)基，在振蕩的同時，在37°C下孵育30分鐘。使用置于37°C過夜的稀釋系列，定量測定菌落形成單位(CFU)。統(tǒng)計菌落數(shù)/板/稀釋液，計算CFU/ml。為了測定sNAG處理的細(xì)菌培養(yǎng)物的CFU/ml，溶液中的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物用不同濃度的sNAG(10l.! 1和20μ 1 10.8mg/ml sNAG)處理3小時。然后將培養(yǎng)物鋪板在37°下過夜，計算CFU/ml。β_防衛(wèi)素3肽應(yīng)用:針對其在上述感染傷口愈合模型中對細(xì)菌生長的作用，對有生物活性的人β-防衛(wèi)素3肽(Peptide Institute, Inc.)的3個試驗濃度(1.ΟμΜ、2.5μΜ、5.0μΜ)進(jìn)行測試。各個濃度均負(fù)面影響細(xì)菌生長，因此選擇最低濃度用于分析。在每個傷口用金黃色葡萄球菌感染后，施用IOul肽。3天后，收獲傷口，包埋用于切片和革蘭氏染色，或按如上所述定量測定培養(yǎng)CFU/ml。β -防衛(wèi)素3抗 體阻斷:按上文的描述，給野生型雄性小鼠致傷，用15ul金黃色葡萄球菌感染。接種后，一個傷口用0.2ug/mL β_防衛(wèi)素3抗體(Santa Cruz)治療,而另一個用0.2ug/mL正常山羊IgG對照抗體(Santz Cruz)治療。在抗體治療后第O天，將sNAG膜施用于全部小鼠。每24小時施用抗體。在第3天使小鼠安樂死，使用8mm活檢鉆收獲傷口。在4°C下將傷口在4%低聚甲醛中固定過夜，在石蠟中包埋，切片，并使用組織革蘭氏染色劑進(jìn)行分析。如上所述，對第3天收獲的傷口進(jìn)行CFU/ml定量測定。
免疫熒光，顯微鏡術(shù):將石蠟包埋的組織切片通過二甲苯和系列分級乙醇再水化。切片用0.01% Triton-XlOO處理,在高壓鍋中使用抗原解屏蔽溶液(antigen unmaskingsolution) (Vector Laboratories)進(jìn)行抗原修復(fù)5分鐘,使之冷卻。皮膚切片用β _防衛(wèi)素3山羊多克隆抗體(Santa Cruz)、內(nèi)披蛋白兔多克隆抗體(Santa Cruz)和T0-PR0 3-碘化物(Molecular Probes)標(biāo)記。將切片在第一抗體中于4°孵育過夜，并在合適的第二免疫突光抗體(Invitrogen)中在室溫下孵育I小時。在沒有第一抗體的情況下，對各抗體的對照切片進(jìn)行染色。采用Olympus Fluro View激光掃描共焦顯微鏡(Model 1X70)觀察組織切片，使用Olympus Camera (Model FV5-ZM)和Fluoview 5.0數(shù)據(jù)采集軟件在環(huán)境溫度下拍攝。使用60χ油浸鏡頭(Olympus浸鏡油)對全部組織切片拍照。HUVEC或是血清饑餓的，或在培養(yǎng)中用sNAG處理5小時，用抗α -防衛(wèi)素5 (FITC)、β -防衛(wèi)素3 (德克薩斯紅)或T0PR0 3 (藍(lán)色)的抗體染色。使用免疫熒光顯微鏡術(shù)拍攝圖像。采用Zeiss Axiovert IOOM共焦顯微鏡觀察細(xì)胞培養(yǎng)防衛(wèi)素表達(dá)，并使用水作為介質(zhì)，使用LSM 510照相機(jī)(Zeiss Fluor63xW/l.2A物鏡)在環(huán)境溫度下拍攝。蛋白質(zhì)印跡分析:在用sNAG(50 μ 1/ml)刺激規(guī)定時程之前，使內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)血清饑餓。然后將細(xì)胞裂解，進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。用于蛋白質(zhì)印跡分析的抗體如下:PI3K的抗p85 亞基和憐酸特異性 Akt 抗體(Cell Signaling Technologies)。6.2.2 結(jié)果6.2.2.1當(dāng)用sNAG刺激時角質(zhì)形成細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)和分泌防衛(wèi)素該實施例表明，sNAG治療調(diào)節(jié)抗微生物小肽防衛(wèi)素的表達(dá)，防衛(wèi)素是先天免疫應(yīng)答的組成部分。為了研究sNAG處理對體外防衛(wèi)素表達(dá)的影響，使用培養(yǎng)物中的原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。當(dāng)用sNAG刺激時，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)α型防衛(wèi)素和β型防衛(wèi)素兩者。如圖7Α所示用sNAG處理的內(nèi)皮細(xì)胞顯示在刺激I小時內(nèi)β -防衛(wèi)素3和α -防衛(wèi)素ImRNA表達(dá)增量調(diào)節(jié)。還觀察到由sNAG處理所致α -防衛(wèi)素4和5的類似的增量調(diào)節(jié)(數(shù)據(jù)未顯示)。使用含有超過25種不同防衛(wèi)素基因的定制基因陣列以證實原代內(nèi)皮細(xì)胞中α型防衛(wèi)素的表達(dá)和角質(zhì)形成細(xì)胞中β型防衛(wèi)素的表達(dá)。sNAG刺激的內(nèi)皮細(xì)胞顯不防衛(wèi)素1、4和5和β_防衛(wèi)素3的特異性表達(dá)增加。此外，sNAG刺激的人角質(zhì)形成細(xì)胞增加β-防衛(wèi)素樣基因的表達(dá)，其中幾種列于表I中。這些研究結(jié)果表明，在響應(yīng)sNAG刺激時，在原代內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)至少3種α-防衛(wèi)素基因和β-防衛(wèi)素3，在原代角質(zhì)形成細(xì)胞中表達(dá)多種β-防衛(wèi)素基因。表1:基因陣列分析顯示通過sNAG增量調(diào)節(jié)多種防衛(wèi)素基因
權(quán)利要求
1.一種用于治療對象的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括: 將包含SNAG納米纖維的組合物局部給予被診斷患有細(xì)菌感染或出現(xiàn)細(xì)菌感染的一種或多種癥狀的對象， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時不起反應(yīng)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述感染是皮膚感染、胃腸感染、呼吸道感染、尿路感染或生殖道感染。
3.一種用于治療與對象的細(xì)菌感染或細(xì)菌失衡有關(guān)的疾病的方法，所述方法包括: 將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予被診斷患有與細(xì)菌感染或細(xì)胞失衡相關(guān)的疾病或出現(xiàn)與細(xì)菌感染或細(xì)胞失衡相關(guān)的疾病的一種或多種癥狀的對象， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時不起反應(yīng)。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述疾病與細(xì)菌感染有關(guān)。
5.權(quán)利要求3或4的方法，其中所述疾病為皮膚疾病或胃腸道疾病。
6.權(quán)利要求1-5中任一項的方法，其中所述感染是醫(yī)院內(nèi)感染。
7.一種用于預(yù)防細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，所述方法包括: 將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予對象， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時不起反應(yīng)。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述對象帶有傷口或進(jìn)行過手術(shù)。
9.一種用于治療對象的被細(xì)菌感染的傷口的方法，所述方法包括: 將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予被診斷患有細(xì)菌感染或出現(xiàn)細(xì)菌感染的一種或多種癥狀的對象的傷口部位， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I和15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時不起反應(yīng)。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述傷口是開放性傷口。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述開放性傷口是槍彈傷、刺傷、撕裂傷、割傷、擦傷、貫通傷或手術(shù)創(chuàng)傷。
12.權(quán)利要求11的方法，其中所述傷口是刺傷，其中所述刺傷由血液透析術(shù)或?qū)Ч懿迦胄g(shù)造成，且其中人類對象被診斷患有血液透析相關(guān)感染或?qū)Ч懿迦胂嚓P(guān)感染。
13.權(quán)利要求1-12中任一項的方法， 其中所述感染具有一種或多種下列菌種的細(xì)菌:炭疽芽孢桿菌、百日咳鮑特氏菌、布氏疏螺旋體、流產(chǎn)布魯氏菌、狗布魯氏菌、馬耳他布魯氏菌、豬布魯氏菌、空腸彎曲桿菌、肺炎衣原體、沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肉毒梭菌、艱難梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、破傷風(fēng)梭菌、白喉棒桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、大腸桿菌、土拉熱弗朗西絲氏菌、流感嗜血菌、幽門螺桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎性鉤端螺旋體、問號鉤端螺旋體、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、麻風(fēng)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、肺炎枝原體、淋病奈瑟氏球菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、銅綠假單胞菌、奇異變形菌、立氏立克次氏體、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、宋內(nèi)氏志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、非解乳糖鏈球菌、肺炎鏈球菌、釀膿鏈球菌、蒼白密螺旋體、霍亂弧菌和鼠疫耶爾森氏菌。
14.權(quán)利要求1-13中任一項的方法，其中所述細(xì)菌對標(biāo)準(zhǔn)抗生素療法有抗性。
15.權(quán)利要求1-12中任一項的方法，其中所述感染是MRSA感染、假單胞菌感染或艱難梭菌感染。
16.權(quán)利要求1-15中任一項的方法，其中所述對象是人。
17.權(quán)利要求1-16中任一項的方法，其中將所述sNAG納米纖維配制成乳膏劑、凝膠劑、軟膏劑、膜、粉劑、噴霧劑或栓劑。
18.權(quán)利要求1-17中任一項的方法，其中所述組合物包含一種或多種其它抗菌劑。
19.權(quán)利要求1-18中任一項的方法，其中所述組合物與一種或多種抗菌劑聯(lián)合給予。
20.權(quán)利要求18或19的方法，其中所述抗菌劑是抗生素。
21.權(quán)利要求1-20中任一項的方法，其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約2-10 μ m 之間。
22.權(quán)利 要求1-20中任一項的方法，其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約4-7 μ m之間。
23.權(quán)利要求1-20中任一項的方法，其中100%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間。
24.權(quán)利要求1-23中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維通過Y輻射聚-N-乙酰葡萄糖胺或其衍生物而產(chǎn)生，且其中以500-2，OOOkgy照射呈干燥纖維形式的聚-N-乙酰葡萄糖胺或其衍生物，或以100-500kgy照射呈濕纖維形式的聚-β -N-乙酰葡萄糖胺或其衍生物。
25.權(quán)利要求1-24中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維自微藻聚-N-乙酰葡萄糖胺產(chǎn)生。
26.權(quán)利要求1-25中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維包含N-乙酰葡萄糖胺單糖和/或葡萄糖胺單糖，且其中超過70%的sNAG納米纖維的單糖是N-乙酰葡萄糖胺單糖。
27.—種包含sNAG納米纖維和抗生素的組合物， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時不起反應(yīng)。
28.權(quán)利要求27的組合物，其中所述抗生素是來自下列抗生素類之一的抗生素:大環(huán)內(nèi)酯類(例如紅霉素、阿奇霉素)、氨基糖苷類(例如阿米卡星、慶大霉素、新霉素、鏈霉素)、頭孢菌素類(例如頭孢羥氨芐、頭孢克洛、頭孢噻肟、頭孢吡肟)、氟喹諾酮類(例如環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)、青霉素類(例如青霉素、氨芐西林、阿莫西林)、四環(huán)素類(例如四環(huán)素、多西環(huán)素)和碳青霉烯類(例如美羅培南、亞胺培南)。
29.—種包含sNAG納米纖維和鋅的組合物， 其中超過50%的sNAG納米纖維的長度介于約I至15 μ m之間， 其中所述sNAG納米纖維體外對金黃色葡萄球菌細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活不起作用，和 其中所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗`中測試時不起反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明描述了包含縮短的聚-N-乙酰葡萄糖胺和/或其衍生物纖維(“sNAG納米纖維”)的組合物和所述組合物的抗菌應(yīng)用?？蓪NAG納米纖維配制成用于預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染和與這類感染有關(guān)的疾病的組合物。還描述了使用這類組合物的方案。
文檔編號A61K31/70GK103108638SQ201180029320
公開日2013年5月15日 申請日期2011年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月15日
發(fā)明者約翰·N·沃納吉斯, 塞爾吉奧·芬基爾斯坦 申請人:海洋聚合物技術(shù)公司