專利名稱：抗表皮生長因子受體(egfr)的抗體及其用途的制作方法
抗表皮生長因子受體(EGFR)的抗體及其用途背景天然免疫系統(tǒng)已進(jìn)化到使得抗體能用于病原體的有效中和。從免疫的動(dòng)物中分離出來的天然抗體制劑是多克隆起源的，并且與單獨(dú)的抗體相比表現(xiàn)出免疫顯性，所述單獨(dú)抗體受限于特定抗原的一個(gè)或多個(gè)表位。中和抗體能夠阻斷與其結(jié)合的抗原的生物功能。中和抗體的混合物可比混合物中的任何單獨(dú)抗體發(fā)揮更大的中和作用。此結(jié)果已經(jīng)通過組合抗表皮生長因子受體EGFR(ErbBl)的兩種或更多種中和抗體而獲得。結(jié)合至并抑制EGFR的抗體已被證明能提供有用的抗癌益處，并且具有很大的醫(yī)療和商業(yè)價(jià)值。兩種對(duì)抗性但非競(jìng)爭性的抗EGFR抗體的特定組合與任一種單獨(dú)抗體的應(yīng)用相比導(dǎo)致更快和更有效的EGFR下調(diào)(Friedman等(2005) PNAS 102:1915-1920)。兩種交叉競(jìng)爭性(即，互相競(jìng)爭結(jié)合至抗原)抗EGFR抗體的組合已被證明是非協(xié)同的。多種抗體與EGFR的不同表位的結(jié)合可能在細(xì)胞表面上形成復(fù)合受體晶格，產(chǎn)生比用靶向單個(gè)表位的抗體所獲得的內(nèi)化和降解更有效的內(nèi)化和降解。抗EGFR受體抗體的特定二元組合也被報(bào)道產(chǎn)生相加的和在一些情況下協(xié)同的體內(nèi)抗腫瘤活性(Perera等(2005)Clin CancerRes 11:6390-6399)。針對(duì)突變體de2_7EGFR產(chǎn)生的單克隆抗體806與拮抗性抗體528的組合在膠質(zhì)瘤異種移植模型中顯現(xiàn)出比用任一種單獨(dú)抗體治療更顯著的抗腫瘤活性。協(xié)同抗腫瘤活性的機(jī)制被證明與EGFR的迅速下調(diào)相關(guān)聯(lián)，用所述單種抗體治療不能誘導(dǎo)所述EGFR的迅速下調(diào)。同樣地，EGFR磷酸化在另一二元組的抗EGFR抗體，西妥昔單抗和EMD55900 的存在下大大降低(Kamat 等(2008) Cancer Biol Ther7:726-33)。靶向相關(guān)受體ErbB2的抗體的某些組合也已經(jīng)被證明以協(xié)同的方式起作用(Friedman等(2005))。與帕妥珠單抗組合的曲妥單抗以對(duì)于單獨(dú)抗體無效的劑量抑制BT474乳腺癌細(xì)胞的生存(Nahta等(2004)Cancer Res 64:2343-2346)。在另一研究中，三種非競(jìng)爭性抗ErbB2抗體在組合時(shí)表現(xiàn)出的在體外殺死BT474細(xì)胞的有效性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于它們?cè)趩为?dú)使用時(shí)的有效性，并且類似的結(jié)果在BT474體內(nèi)異種移植模型(Spiridon等(2002)Clin Cancer Res 8:1699-701)中獲得。已經(jīng)報(bào)道組合不止一種抗體可以增強(qiáng)抗體對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長抑制(例如，細(xì)胞毒性)作用的其它證據(jù)。舉例來說，組合了針對(duì)腫瘤抗原17-1A的單克隆抗體，研究了腫瘤細(xì)胞裂解，并且發(fā)現(xiàn)單克隆抗體及競(jìng)爭抗體的組合是無效的，然而兩種或多種非競(jìng)爭抗體的組合導(dǎo)致完全的腫瘤細(xì)胞裂解。因此，仍然需要用于產(chǎn)生組合作用以便增強(qiáng)腫瘤對(duì)抗EGFR抗體組合的反應(yīng)性的另外途徑和方法，所述組合包括增強(qiáng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制的組合和提供更有效的抑制細(xì)胞生長的或細(xì)胞毒性的結(jié)果的組合。概述本文提供了結(jié)合至EGFR且抑制各種EGFR功能的新型單克隆抗體。這些抗體當(dāng)互相組合或與其它抗ErbB受體抗體(例如,其它抗EGFR抗體)組合時(shí),與單獨(dú)每種抗體的施用相比能夠表現(xiàn)出協(xié)同或 相加的治療效果。這些抗體尤其當(dāng)以本文提供的組合形式施用時(shí)，對(duì)治療與EGFR介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的多種病癥(例如，癌癥)有用。因此，本文還提供分離的結(jié)合至EGFR并抑制各種EGFR功能的新型單克隆抗體的組合。還提供了這些抗體用于診斷和治療目的的用途，也提供了如本文所公開的所述抗體組合的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了結(jié)合EGFR的單克隆抗體和此類抗體的組合。這些抗體和組合均表現(xiàn)出以下性質(zhì)中的一種或多種:(a)抑制AKT磷酸化或ERK磷酸化，例如，EGFR依賴性AKT磷酸化或EGFR依賴性ERK磷酸化，如基于細(xì)胞的測(cè)定所測(cè)量的；(b)抑制表達(dá)EGFR的細(xì)胞的生長；(c)抑制EGF配體結(jié)合至EGFR (例如，抑制結(jié)合EGFR的一種或多種配體的結(jié)合，所述配體包括EGF、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)或雙調(diào)蛋白)；(d)抑制EGFR 二聚化；或(e)下調(diào)細(xì)胞表面上的EGFR (例如，通過受體的內(nèi)化和再循環(huán)，和/或受體的內(nèi)化和降解)。在具體的實(shí)施方案中，所述抗體(即，當(dāng)組合時(shí))結(jié)合非重疊表位，如使用表面等離子體共振測(cè)定(例如，BIAC0RE)或FACS、或其它此類測(cè)定所確定的。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述抗體相加地或協(xié)同地提供如上所述的功能性質(zhì)的至少一種，即，(a)抑制AKT磷酸化或ERK磷酸化，例如，EGFR依賴性AKT磷酸化或EGFR依賴性ERK磷酸化，如基于細(xì)胞的測(cè)定所測(cè)量的；(b)抑制表達(dá)EGFR的細(xì)胞的生長；(c)抑制配體結(jié)合至EGFR(`例如，抑制結(jié)合EGFR的一種或多種配體的結(jié)合，所述配體包括EGF、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)或雙調(diào)蛋白)；(d)抑制EGFR 二聚化；或(e)下調(diào)細(xì)胞表面上的EGFR (例如，通過受體的內(nèi)化和再循環(huán)，和/或受體的內(nèi)化和降解)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單獨(dú)單克隆抗體抑制EGFR配體的作用，卻并不交叉競(jìng)爭(即，所述抗體結(jié)合至不同的表位)。本文提供的特定抗EGFR單克隆抗體包括那些包含含有選自由SEQ ID N0:1_11組成的組的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)或含有選自由SEQ ID NO:12-17和19-22組成的組的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗EGFR單克隆抗體。本文提供的抗體還包括那些包含含有以下氨基酸序列的重鏈和輕鏈可變區(qū)的抗體:
權(quán)利要求
1.一種包含抗EGFR抗體三元組的組合物,所述抗EGFR抗體三元組包括第一抗體、第二抗體和第三抗體，其中Q)所述第一抗體是選自由ca、cb和cc組成的組的抗體,或與選自由ca、cb和cc組成的組的抗體競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與選自由ca、cb和cc組成的組的抗體結(jié)合至相同的表位；Qi)所述第二抗體是選自由cd、ce和cf組成的組的抗體,或與選自由cd、ce和Cf組成的組的抗體競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與選自由cd、ce和cf組成的組的抗體結(jié)合至相同的表位；以及(iii)所述第三抗體是選自由cg、ch、c1、cj和ck組成的組的抗體，或與選自由eg、ch、c1、cj和ck組成的組的抗體競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與選自由eg、ch、c1、cj和ck組成的組的抗體結(jié)合至相同的表位。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中(i)所述第一抗體是抗體ca(包含分別在SEQ IDNO:29、30和34中示出的重鏈CDR1、2和3，以及分別在SEQ ID NO:48、45和49中示出的輕鏈⑶R1、2和3)，或與所述抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR，或與所述抗體ca結(jié)合至相同的表位；(ii)所述第二抗體是抗體cd (包含分別在SEQ ID NO:29、30和31中示出的重鏈⑶Rl、2和3，以及分別在SEQ ID N0:53、54和55中示出的輕鏈CDR1、2和3)，或與所述抗體cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與所述抗體cd結(jié)合至相同的表位；以及(iii)所述第三抗體是抗體ch (包含分別在SEQ ID NO:23、24和26中示出的重鏈CDR1、2和3，以及分別在SEQ ID NO:39、40和42中示出的輕鏈CDRl、2和3)，或與所述抗體ch競(jìng)爭結(jié)合至EGFR，或與所述抗體ch結(jié)合至相同的表位。
3.如權(quán)利要求1或2所述的組合物在制造用于癌癥的治療的藥劑中的用途。
4.如權(quán)利要求3所述的用途，其中所述癌癥的治療是通過與作為抗癌劑的另外的藥劑的聯(lián)合治療來進(jìn)行的治療。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其中所述抗癌劑包含拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑。
6.一種分離的單克隆抗體，所述抗體結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域并且包含含有選自由SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10和11組成的組的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，并且進(jìn)一步包含含有選自由SEQ ID NO`:12、13、14、15、16、17、19、20、21和22組成的組的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
7.一種分離的單克隆抗體，所述抗體結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域并且包含含有選自分別由以下組成的組的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū):(a)SEQID NO:9 和 SEQ ID NO:20 ；(b)SEQID NO:10 和 SEQ ID NO:21 ；(c)SEQID NO: 11和 SEQ ID NO:22 ；(d)SEQID NO:1 和 SEQ ID NO:12 ;(e)SEQID NO:2 和 SEQ ID NO:13 ;(f)SEQID NO:3 和 SEQ ID NO:14 ;(g)SEQID NO:4 和 SEQ ID NO:15 ;(h)SEQID NO:5 和 SEQ ID NO:16 ;(i)SEQ ID NO:6 和 SEQ ID NO: 17 ;以及(j)SEQ ID NO:8 和 SEQ ID NO:19。
8.一種分離的單克隆抗體，所述抗體結(jié)合EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域并且包含重鏈和輕鏈⑶R3、⑶R2及⑶Rl序列，其中所述重鏈和輕鏈⑶R3、⑶R2及⑶Rl序列分別選自:(a)SEQ ID N0:34、20和29的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID N0:49、45 和48的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (b)SEQID N0:37、36和35的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID N0:51、45 和50的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (c)SEQID N0:38、36和35的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO:52、45 和48的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (d)SEQID N0:31、30和29的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO: 55、54 和53的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (e)SEQID N0:32、30和29的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO: 56、54 和53的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (f)SEQ ID N0:33、30和29的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO:56、54 和53的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (g)SEQID N0:25、24和23的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID N0:41、40 和39的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (h)SEQID N0:26、24和23的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID N0:42、40 和39的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (i)SEQID N0:27、24和23的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID N0:43、40 和39的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列； (j) SEQ ID N0:28、24和23的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO:46、45 和44的輕鏈⑶R3、⑶R2及⑶Rl序列；以及 (k)SEQ ID N0:28、24和23的重鏈CDR3、CDR2及CDR1序列，以及SEQ ID NO:47、45 和44的輕鏈CDR3、CDR2及CDRl序列。
9.一種分離的單克隆抗體，所述抗體與如權(quán)利要求7所述的抗體的任一種競(jìng)爭結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，或與如權(quán)利要求7所述的抗體的任一種結(jié)合至相同的表位。
10.如權(quán)利要求5至9中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體是人抗體、嵌合抗體或人源化抗體。
11.如權(quán)利要求5至9或5至10中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體選自由以下組成的組:雙特異性抗體、免疫綴合物、Fab、Fab’ 2、ScFv、aff ibody、avimer、納米抗體以及結(jié)構(gòu)域抗體。
12.—種包含選自表II或表III中示出的二元組的抗體二元組的組合物，其中每種抗體是如權(quán)利要求5至9或5至11中任一項(xiàng)所述的抗體。
13.一種包含選自表IV或表V中列出的三元組的抗體三元組的組合物，其中每種抗體是如權(quán)利要求5至9或5至11中任一項(xiàng)所述的抗體。
14.如權(quán)利要求5至9或12或13中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物包含的抗體中的每種抗體均以優(yōu)于IOOnm的Kd結(jié)合至EGFR。
15.如權(quán)利要求5至9、或12、或13、或14中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物表現(xiàn)出以下性質(zhì)的至少一種: (a)抑制AKT磷酸化或ERK磷酸化，如基于細(xì)胞的體外測(cè)定所測(cè)量的； (b)體外抑制表達(dá)EGFR的腫瘤細(xì)胞的生長；(C)體內(nèi)抑制異種移植模型中表達(dá)EGFR的腫瘤細(xì)胞的生長； (d)體外抑制配體結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域； (e)體外抑制EGFR二聚化；或 (f)體外下調(diào)細(xì)胞表面上的EGFR。
16.如權(quán)利要求15所述的組合物，其中與包含以與所述組合物中的組合抗體的總量(以摩爾表示)相等的量(以摩爾表示)包含在所述組合物中的單獨(dú)抗體的制劑相比，所述抑制是相加或協(xié)同抑制。
17.一種包含兩種或更多種抗體的組合物，其中所述兩種或更多種抗體中的兩種選自由以下組成的組: (a)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體cd,或與抗體cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cd結(jié)合至相同表位的抗體； (b)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體ce,或與抗體ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ce結(jié)合至相同表位的抗體； (C)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體Cf,或與抗體Cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體Cf結(jié)合至相同表位的抗體； (d)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體eg,或與抗體eg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體eg結(jié)合至相同表位的抗體； (e)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體ch,或與抗體ch競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ch結(jié)合至相同表位的抗體； (f)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體ci,或與抗體ci競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ci結(jié)合至相同表位的抗體； (g)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體cj,或與抗體cj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cj結(jié)合至相同表位的抗體； (h)抗體ca,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體ck,或與抗體ck競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ck結(jié)合至相同表位的抗體； (i)抗體cb,或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cb結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體cd,或與抗體cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cd結(jié)合至相同表位的抗體； (j)抗體cb,或與抗體ca競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ca結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體ce,或與抗體ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ce結(jié)合至相同表位的抗體； (k)抗體cb,或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cb結(jié)合至相同表位的抗體，以及抗體Cf，或與抗體Cf競(jìng)爭結(jié)合EGFR或與抗體Cf結(jié)合至相同表位的抗體； (I)抗體cb，或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體cg，或與抗體eg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體eg結(jié)合至相同表位的抗體； (m)抗體cb，或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ch，或與抗體ch競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ch結(jié)合至相同表位的抗體； (η)抗體cb，或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ci，或與抗體ci競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ci結(jié)合至相同表位的抗體； (ο)抗體cb，或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體cj，或與抗體cj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cj結(jié)合至相同表位的抗體；(P)抗體cb，或與抗體cb競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ck，或與抗體Ck競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ck結(jié)合至相同表位的抗體； (q)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體cd，或與抗體cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cd結(jié)合至相同表位的抗體； (r)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ce，或與抗體ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ce結(jié)合至相同表位的抗體； (s)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體Cf，或與抗體cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cf結(jié)合至相同表位的抗體； (t)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體cg，或與抗體eg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體eg結(jié)合至相同表位的抗體； (U)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ch，或與抗體ch競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ch結(jié)合至相同表位的抗體。
(ν)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ci，或與抗體ci競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ci結(jié)合至相同表位的抗體； (w)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體cj，或與抗體cj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體cj結(jié)合至相同表位的抗體； (X)抗體cc，或與抗體cc競(jìng)爭結(jié)合至EGFR的抗體，以及抗體ck，或與抗體ck競(jìng)爭結(jié)合至EGFR或與抗體ck結(jié)合至相同表位的抗體。
18.如權(quán)利要求12至16中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗體是: (a)選自由抗體va和vd組成的組，以及與抗體va和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vd結(jié)合至相同表位的抗體；或 (b)由抗體va和ve組成的組,或與抗體va和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和ve結(jié)合至相同表位的抗體；或 (C)由抗體va和vf組成的組,或與抗體va和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (d)由抗體va和Vg組成的組,或與抗體va和Vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和Vg結(jié)合至相同表位的抗體； (e)由抗體va和vh組成的組,或與抗體va和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (f)由抗體va和vi組成的組,或與抗體va和vi競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vi結(jié)合至相同表位的抗體； (h)由抗體va和vj組成的組,或與抗體va和vj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vj結(jié)合至相同表位的抗體； (i)由抗體vb和vd組成的組,或與抗體va和vi競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va和vi結(jié)合至相同表位的抗體； (j)由抗體vb和ve組成的組,或與抗 體vb和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (k)由抗體vb和vf組成的組,或與抗體vb和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和vf結(jié)合至相同表位的抗體；(l)由抗體Vb和vg組成的組,或與抗體vb和Vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和Vg結(jié)合至相同表位的抗體； (m)由抗體vb和vh組成的組,或與抗體vb和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (η)由抗體vb和vi組成的組,或與抗體vb和vi競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和vi結(jié)合至相同表位的抗體； (O)由抗體vb和vj組成的組,或與抗體vb和vj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb和vj結(jié)合至相同表位的抗體； (P)由抗體vc和vd組成的組,或與抗體vc和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (q)由抗體vc和ve組成的組,或與抗體vc和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (r)由抗體vc和vf組成的組,或與抗體vc和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (S)由抗體VC和vg組成的組,或與抗體VC和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和Vg結(jié)合至相同表位的抗體； (t)由抗體vc和vh組成的組,或與抗體vc和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (U)由抗體vc和vi組成的組,或與抗體vc和vi競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和vi結(jié)合至相同表位的抗體；以及 (ν)由抗體VC和vj組成的組,或與抗體VC和vj競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc和vj結(jié)合至相同表位的抗體。
19.如權(quán)利要求12至18中任一項(xiàng)所述的組合物，進(jìn)一步包含第三抗體。
20.如權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述抗體是: (a)由抗體ca、eg、cd組成的組，以及與抗體ca、eg和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、eg和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (b)由抗體ca、eg、ce組成的組，以及與抗體ca、eg和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、eg和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (C)由抗體ca、eg、cf組成的組，以及與抗體ca、eg和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、eg和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (d)由抗體ca、ch、cd組成的組，以及與抗體ca、ch和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ch和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (e)由抗體ca、ch、ce組成的組，以及與抗體ca、ch和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ch和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (f)抗體ca、ch、cf,以及與抗體ca、ch和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ch和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (g)由抗體ca、c1、cd組成的組，以及與抗體ca、ci和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ci和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (h)由抗體ca、c1、ce組成的組，以及與抗體ca、ci和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ci和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (i)由抗體ca、c1、cf組成的組，以及與抗體ca、ci和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ci和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (j)由抗體ca、cj、cd組成的組，以及與抗體ca、cj和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、cj和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (k)由抗體ca、cj、ce組成的組，以及與抗體ca、cj和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、cj和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (I)由抗體ca、cj、cf組成的組，以及與抗體ca、cj和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、cj和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (m)由抗體ca、ck、cd組成的組，以及與抗體ca、ck和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ck和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (η)由抗體ca、ck、ce組成的組，以及與抗體ca、ck和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ck和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (O)由抗體ca、ck、cf組成的組，以及與抗體ca、ck和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體ca、ck和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (P)由抗體cb、eg、cd組成的組，以及與抗體cb、eg和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、eg和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (q)由抗體cb、eg、ce組成的組，以及與抗體cb、eg和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、eg和ce結(jié)合至相同表位的抗體； Cr)由抗體cb、eg、cf組成的組，以及與抗體cb、eg和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、eg和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (S)由抗體cb、ch、cd組成的組，以及與抗體cb、ch和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ch和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (t)由抗體cb、ch、ce組成的組，以及與抗體cb、ch和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ch和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (U)由抗體cb、ch、cf組成的組，以及與抗體cb、ch和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ch和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (ν)由抗體cb、c1、cd組成的組，以及與抗體cb、ci和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ci和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (W)由抗體cb、c1、ce組成的組，以及與抗體cb、ci和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ci和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (X)由抗體cb、c1、cf組成的組，以及與抗體cb、ci和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ci和cf結(jié)合至相同表位的抗體； (y)由抗體cb、cj、cd組成的組，以及與抗體cb、cj和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、cj和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (Z)由抗體cb、cj、ce組成的組，以及與抗體cb、cj和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、cj和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (aa)由抗體cb、cj、cf組成的組，以及與抗體cb、cj和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、cj和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(bb)由抗體cb、ck、cd組成的組，以及與抗體cb、ck和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ck和cd結(jié)合至相同表位的抗體；(cc)由抗體cb、ck、ce組成的組，以及與抗體cb、ck和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ck和ce結(jié)合至相同表位的抗體；(cc)由抗體cb、ck、cf組成的組，以及與抗體cb、ck和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cb、ck和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(dd)由抗體cc、eg、cd組成的組，以及與抗體cc、eg和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、cg和cd結(jié)合至相同表位的抗體； (ee)由抗體cc、eg、ce組成的組，以及與抗體cc、eg和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、eg和ce結(jié)合至相同表位的抗體； (ff)由抗體cc、eg、cf組成的組，以及與抗體cc、eg和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、eg和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(gg)由抗體cc、ch、cd組成的組，以及與抗體cc、ch和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ch和cd結(jié)合至相同表位的抗體；(hh)由抗體cc、ch、ce組成的組，以及與抗體cc、ch和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體 cc、ch和ce結(jié)合至相同表位的抗體；(ii)由抗體cc、ch、cf組成的組，以及與抗體cc、ch和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ch和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(j j)由抗體cc、c1、cd組成的組，以及與抗體cc、ci和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ci和cd結(jié)合至相同表位的抗體；(kk)由抗體cc、c1、ce組成的組，以及與抗體cc、ci和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ci和ce結(jié)合至相同表位的抗體；(11)由抗體cc、c1、cf組成的組，以及與抗體cc、ci和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、Cl和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(mm)由抗體cc、cj、cd組成的組，以及與抗體cc、cj和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、cj和cd結(jié)合至相同表位的抗體；(nn)由抗體cc、cj、ce組成的組，以及與抗體cc、cj和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、cj和ce結(jié)合至相同表位的抗體；(OO)由抗體cc、cj、cf組成的組，以及與抗體cc、cj和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、cj和cf結(jié)合至相同表位的抗體；(PP)由抗體cc、ck、cd組成的組，以及與抗體cc、ck和cd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ck和cd結(jié)合至相同表位的抗體；(qq)由抗體cc、ck、ce組成的組，以及與抗體cc、ck和ce競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ck和ce結(jié)合至相同表位的抗體；以及(rr)由抗體cc、ck、cf組成的組，以及與抗體cc、ck和cf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體cc、ck和cf結(jié)合至相同表位的抗體。
21.如權(quán)利要求15所述的組合物，其中所述抗體是: (a)抗體va、v1、vd,或與抗體va、vi和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和vd結(jié)合至相同表位的抗體；(b)抗體va、v1、ve,或與抗體va、vi和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (C)抗體va、v1、vf,或與抗體va、vi和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (d)抗體va、vj、vg,或與抗體va、vi和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和vg結(jié)合至相同表位的抗體； (e)抗體va、vj、vh,或與抗體va、vi和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (f)抗體va、vj、vd,或與抗體va、vj和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vj和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (g)抗體va、vj、ve,或與抗體va、vi和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (h)抗體va、vj、vf,或與抗體va、vi和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vi和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (i)抗體va、vj、vg,或與抗體va、vj和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vj和vg結(jié)合至相同表位的抗體； (j)抗體va、vj、vh,或與抗體va、vj和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體va、vj和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (k)抗體vb、v1、vd,或與抗體vb、vi和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vi和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (I)抗體vb、v1、ve,或與抗體vb、vi和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vi和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (m)抗體vb、v1、vf,或與抗體vb、vi和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vi和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (η)抗體vb、v1、vg,或與抗體vb、vi和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vi和vg結(jié)合至相同表位的抗體； (O)抗體vb、v1、vh,或與抗體vb、vi和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vi和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (P)抗體vb、vj、vd,或與抗體vb、vj和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vj和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (q)抗體vb、vj、ve,或與抗體vb、vj和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vj和ve結(jié)合至相同表位的抗體； Cr)抗體vb、vj、vf,或與抗體vb、vj和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vj和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (S)抗體vb、vj、vg，或與抗體vb、vj和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vj和vg結(jié)合至相同表位的抗體； (t)抗體vb、vj、vh,或與抗體vb、vj和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vb、vj和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (U)抗體vc、v1、vd,或與抗體vc、vi和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vi和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (ν)抗體vc、v1、ve,或與抗體vc、vi和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vi和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (W)抗體vc、v1、vf,或與抗體vc、vi和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vi和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (X)抗體vc、v1、vg,或與抗體vc、vi和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vi和vg結(jié)合至相同表位的抗體； (y)抗體vc、v1、vh,或與抗體vc、vi和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vi和vh結(jié)合至相同表位的抗體； (Z)抗體vc、vj、vd,或與抗體vc、vj和vd競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vj和vd結(jié)合至相同表位的抗體； (aa)抗體vc、vj、ve,或與抗體vc、vj和ve競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vj和ve結(jié)合至相同表位的抗體； (bb)抗體vc、vj、vf,或與抗體vc、vj和vf競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vj和vf結(jié)合至相同表位的抗體； (cc)抗體vc、vj、vg,或與抗體vc、vj和vg競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vj和vg結(jié)合至相同表位的抗體；或 (dd)抗體vc、vj、vh,或與抗體vc、vj和vh競(jìng)爭結(jié)合至EGFR,或與抗體vc、vj和vh結(jié)合至相同表位的抗體。
22.如權(quán)利要求8至2 1中任一項(xiàng)所述的組合物在制造用于通過與另外的抗癌劑聯(lián)合治療而治療癌癥的藥劑中的用途。
23.如權(quán)利要求22所述的組合物，其中所述另外的抗癌劑包含拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑。
24.一種試劑盒，所述試劑盒包含處于容器中的如權(quán)利要求8至23中任一項(xiàng)所述的組合物。
25.如權(quán)利要求24所述的試劑盒，其中所述容器包含處于單個(gè)小瓶中的所述組合物。
26.一種用于選擇單克隆抗體的組合的方法，所述組合中的每種單克隆抗體均結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，所述方法包括選擇至少兩種抗體，每種抗體均具有優(yōu)于80nM的、用于抑制EGFR介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的IC90，并且每種抗體不互相競(jìng)爭結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域并且每種抗體均表現(xiàn)出以下性質(zhì)的至少一種: (i)體內(nèi)抑制異種移植模型中表達(dá)EGFR的細(xì)胞的生長； (ii)體外抑制配體結(jié)合至EGFR細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域； (iii)體外抑制EGFR二聚化；或 (iv)體外下調(diào)細(xì)胞表面上的EGFR。
(ν)抑制AKT磷酸化或ERK磷酸化，如基于細(xì)胞的體外測(cè)定所測(cè)量的。
全文摘要
公開了抗EGFR抗體、包含抗EGFR抗體組合的治療組合物以及使用此類抗體和組合物治療EGFR相關(guān)病癥(例如，癌癥)的方法。
文檔編號(hào)A61K39/395GK103189073SQ201180033109
公開日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2011年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月4日
發(fā)明者R·布克哈利德, M·菲爾德豪斯, A·金, N·科利, E·克勞蘭德, U·尼爾森 申請(qǐng)人:梅里麥克制藥股份有限公司