抗ngf組合物及其用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及對NGF具有結(jié)合特異性的抗體和其片段，尤其是抑制NGF與TrkA和/或p75或p75和/或TrkA相互作用的那些抗體和其片段。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及本文所描述的包含本文所描述的VH、VL和CDR多肽序列的抗體和其結(jié)合片段，以及編碼它們的多核苷酸。本發(fā)明還涵蓋了抗NGF抗體和其結(jié)合片段與一個(gè)或多個(gè)功能性或可檢測的部分綴合所形成的綴合物。本發(fā)明還涵蓋了制備所述抗NGF抗體和其結(jié)合片段的方法。本發(fā)明的實(shí)施方案還涉及抗NGF抗體和其結(jié)合片段用于診斷、評估以及治療與NGF相關(guān)的疾病和病癥的用途。
【專利說明】抗NGF組合物及其用途
[0001]相關(guān)申請
[0002]本申請要求2010年12月I日提交的美國臨時(shí)專利申請?zhí)?1/418，832的優(yōu)先權(quán)益，所述臨時(shí)專利申請的內(nèi)容以引用的方式整體并入本文。另外，本申請涉及代理人案號 67858-740003(序列號待分配)，名稱為 “METHODS OF PREVENTING OR TREATING PAINUSING ANT1-NGF ANTIBODIES THAT SELECTIVELY INHIBIT THE ASSOCIATION OF NGF WITHTRKA, WITHOUT AFFECTING THE ASSOCIATION OF NGF WITH P75” ；案號 67858-740004 (序列號待分配)，名稱為“METHODS OF PREVENTING INFLAMMATION AND TREATING PAIN USINGANT1-N GF COMPOSITIONS” ；案號 67858-740005 (序列號待分配)，名稱為 “METHODS OFPREVENTING OR TREATING PAIN USING ANT1-NGF ANTIBODIES”;以及案號 67858-740006 (序列號待分配)，名稱為“NGF ANTIBODIES AND USE THEREOF”，所述所有案件均被轉(zhuǎn)讓給Alder Biopharmaceuticals公司，并且所有案件均于2011年12月I日提交,所述所有案件的內(nèi)容均以引用的方式整體并入本文。
[0003]發(fā)明背景
發(fā)明領(lǐng)域
[0004]本發(fā)明涉及對人神經(jīng)生長因子(在下文中為“NGF”)具有結(jié)合特異性的抗體和其片段(包括Fab片段)。本發(fā)明還涉及篩選與NGF相關(guān)的疾病和病癥的方法，以及通過施用所述抗體或其片段來預(yù)防或治療與NGF相關(guān)的疾病和病癥的方法。
[0005]本發(fā)明還涉及對人神經(jīng)生長因子(在下文中為“NGF”)具有結(jié)合特異性的單價(jià)劑(包括Fab片段和以下所鑒定的其它單價(jià)NGF結(jié)合劑)，以及在治療個(gè)體疼痛的方法中使用所述單價(jià)劑中的一種或多種的方法，其中在施用一種或多種單價(jià)劑之后，個(gè)體的炎癥反應(yīng)大致上沒有增加。任選地可以如通過添加聚乙二醇(PEG)或其它水溶性聚合物等)對這些單價(jià)劑進(jìn)行修飾以延長它們的循環(huán)半衰期。
[0006]本發(fā)明涉及抗疼痛藥劑，所述藥劑包含至少一種NGF拮抗劑化合物，所述化合物選擇性地抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合，優(yōu)選的是，這些NGF拮抗劑化合物將包含對人神經(jīng)生長因子(在下文中為“NGF”)具有結(jié)合特異性的抗體或其片段(包括Fab片段和以下所鑒定的其它單價(jià)劑)；以及使用所述NGF拮抗劑化合物(例如抗體和其片段)中的一種或多種治療個(gè)體疼痛的方法。當(dāng)對抗體和片段進(jìn)行示例時(shí)，預(yù)期可以使用適當(dāng)?shù)慕Y(jié)合和/或功能測定來選擇具有類似拮抗劑特性的其它NGF拮抗劑，例如選擇性抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的NGF或TrkA多肽片段、小分子、反義RNA以及沉默RNA等。當(dāng)單獨(dú)或與另一種活性劑(例如，NSAID或阿片類鎮(zhèn)痛劑)聯(lián)合施用時(shí)，這些化合物(例如抗體和抗體片段)可以作為單一療法用來治療或預(yù)防有需要的受試者的不同類型的疼痛。更確切地說，本發(fā)明涉及抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段包括抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的單價(jià)劑?？梢匀缃?jīng)由連接PEG或其它聚合物或通過連接其它部分(如可檢測的試劑或功能性試劑)對這些抗體和片段(例如，單價(jià)劑)進(jìn)行修飾以影響循環(huán)半衰期。這些單價(jià)劑包括例如Fab、Fab'、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫藥物)、駱騎抗體(camelbody)、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
[0007]另外并且與之相關(guān)，本發(fā)明涉及治療個(gè)體的疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的新型方法，所述方法包括施用有效量的選擇性抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的任何NGF拮抗劑化合物。優(yōu)選的是，這些拮抗劑化合物將包含抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。本發(fā)明進(jìn)一步任選地包括治療疼痛的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用第二抗NGF抗體或片段，所述第二抗NGF抗體或片段抑制NGF與p75締合并且另外可能抑制NGF與TrkA締合。[0008]相關(guān)技術(shù)的描述
[0009]神經(jīng)生長因子(NGF)(又稱為β神經(jīng)生長因子(β-NGF))在具有18個(gè)氨基酸的信號肽裂解之后以長度為222個(gè)氨基酸的成熟蛋白質(zhì)形式產(chǎn)生。編碼NGF的基因位于染色體1ρ13.1上。NGF的生物活性形式是一種發(fā)生同二聚并且被并入到更大的復(fù)合體中的分泌性蛋白。NGF是神經(jīng)營養(yǎng)素(NT)中的一員，所述神經(jīng)營養(yǎng)素是一組進(jìn)一步包括腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、ΝΤ-3、以及ΝΤ-4/5的結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白。(Wyman等，GeneTherapy (1999)，6:1648-1660)。NT維持了特定類型的神經(jīng)元和神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的存活，由支配神經(jīng)元所靶向的細(xì)胞產(chǎn)生。同上?；浊澳X、黑質(zhì)、腦干、皮質(zhì)、以及脊髓是已證實(shí)對NGF具有反應(yīng)性的神經(jīng)系統(tǒng)區(qū)域。同上。
[0010]所有NT均與被鑒定為p75的低親和力受體結(jié)合。(Sarchielli等，Expert Rev.Neurotherapeutics (2004) ,4(1): 115-127)。NGF選擇性地與高親和力神經(jīng)營養(yǎng)素受體TrkA結(jié)合并且對高親和力神經(jīng)營養(yǎng)素受體TrkA展現(xiàn)出高親和力。同上。最近據(jù)證實(shí)，NGF經(jīng)由它的低親和力受體P75在體內(nèi)成肌分化和肌肉修復(fù)所必需的發(fā)育調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起作用 O (Deponti 等，Mol.Biol.Cell (2009)，20:3620-3627)。
[0011]還已經(jīng)證實(shí)了 NGF與成年動(dòng)物體內(nèi)的疼痛信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)相互作用，并且在對許多物種進(jìn)行局部或全身施用時(shí)會造成痛覺過敏。(Sarchielli等，Expert Rev.Neurotherapeutics (2004)，4 (I):115-127)。已經(jīng)顯示，在將NGF輸注到大鼠CSF中時(shí)，NGF會誘發(fā)疼痛樣反應(yīng)，并且已經(jīng)證實(shí)，NGF維持慢性疼痛。此外，已經(jīng)證實(shí)，NGF會導(dǎo)致在8-12小時(shí)后出現(xiàn)機(jī)械性痛覺異常(mechanical allodynia)的產(chǎn)生并且會導(dǎo)致繼發(fā)性疼痛反應(yīng)。同上。
[0012]常常可以通過施用某些麻醉劑或非類固醇抗炎藥(NSAID)來解決疼痛。然而，施用這些治療可能會以某些負(fù)面后果為代價(jià)。NSAID有可能會引起腎衰竭、腸道出血、以及肝功能異常。麻醉劑有可能會引起惡心、嘔吐、心理功能受損、以及成癮。因此，希望鑒定出用于疼痛的替代治療以便避免這些負(fù)面后果中的某些。
[0013]NGF被認(rèn)為在眾多疾病和病癥中起作用，所述疾病和病癥包括但不限于與廣泛疾病和病癥相關(guān)的疼痛，如與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛、以及神經(jīng)源性疼痛。由于認(rèn)識到NGF牽涉到廣泛的疼痛相關(guān)疾病和病癥中，所以在本領(lǐng)域中仍需要可用于預(yù)防或治療與NGF相關(guān)的疾病和病癥，并且尤其可用于預(yù)防或治療與疼痛相關(guān)的那些疾病和病癥的組合物和方法。特別優(yōu)選的抗NGF組合物是在對患者施用時(shí)具有最小的有害反應(yīng)(如炎癥)或使有害反應(yīng)降至最低的那些組合物。減少或抑制與NGF相關(guān)的疾病或病癥(如疼痛)的組合物或方法對有需要的患者是有益的。
[0014]發(fā)明簡述[0015]本發(fā)明涉及對NGF具有結(jié)合特異性的特異性抗體和其片段，特別是具有所需的表位特異性、高親和力或親合力和/或功能特性的抗體。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及本文所述的抗體，所述抗體包含本文所述的Vh、'和CDR多肽序列；以及編碼所述抗體的多核苷酸。
[0016]本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)，所述抗體和其片段能夠與NGF結(jié)合和/或抑制由NGF與p75受體和TrkA受體結(jié)合而介導(dǎo)的生物活性。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及嵌合或人源化抗體和其片段，所述抗體和其片段能夠與NGF結(jié)合并且選擇性地抑制由NGF與TrkA受體結(jié)合而介導(dǎo)的生物活性，而不明顯抑制由NGF與p75受體結(jié)合而介導(dǎo)的生物活性。
[0017]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，如由步態(tài)分析(如在本文實(shí)施例中所述)所測量，全長抗體和其Fab片段能夠顯著減少鼠科動(dòng)物模型的體內(nèi)疼痛。本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案涉及Fab抗體片段在減輕或治療疼痛的方法中的用途。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，如步態(tài)分析之后在鼠科動(dòng)物模型體內(nèi)所證實(shí)，對NGF具有結(jié)合特異性的單價(jià)劑(如本文所述的全長抗體的Fab片段)可用于減輕或治療個(gè)體的疼痛，而與在相同濃度下給藥的全長抗體相比大致上不增加炎癥。
[0018]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，能夠與NGF結(jié)合的嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)抑制TFl細(xì)胞增殖。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，能夠與NGF結(jié)合的嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)抑制PC-12神經(jīng)突生長。
[0019]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，這些抗體和人源化型式可以源自于兔免疫細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)，并且可以基于它們與人生殖系序列的同源性(序列同一性)來加以選擇。這些抗體可能需要最小限度的序列修飾或不需要序列修飾，從而有助于在人源化后保留功能特性。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及來自抗NGF抗體的片段，所述抗NGF抗體包含例如源自于兔免疫細(xì)胞的VH、'和CDR多肽；以及編碼所述片段的多核苷酸；以及這些抗體片段和編碼它們的多核苷酸在產(chǎn)生能夠與NGF和/或NGF/p75和NGF/TrkA復(fù)合體結(jié)合的新型抗體和多肽組合物中的用途。
[0020]本發(fā)明還涵蓋了抗NGF抗體和其結(jié)合片段與一個(gè)或多個(gè)功能性或可檢測的部分綴合所形成的綴合物。本發(fā)明還涵蓋了制備所述嵌合或人源化抗NGF、抗NGF/p75復(fù)合體或抗NGF/TrkA復(fù)合體的抗體和其結(jié)合片段的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合片段包括但不限于Fab、Fab'、F(ab' )2、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、以及 IgNAR。
[0021]本發(fā)明的實(shí)施方案涉及抗NGF抗體和其結(jié)合片段用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥的用途。本發(fā)明還涵蓋了抗NGF抗體的片段用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥的用途。本發(fā)明的其它實(shí)施方案涉及在重組宿主細(xì)胞中產(chǎn)生抗NGF抗體或其片段，所述宿主細(xì)胞例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如CH0、NS0或HEK293細(xì)胞；植物或酵母細(xì)胞(例如二倍體酵母，如二倍體畢赤酵母(Pichia))以及其它酵母菌株。
[0022]本發(fā)明還涉及治療個(gè)體的疼痛而大致上不增加炎癥反應(yīng)的方法。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涵蓋了衍生自特異性抗體和其片段并且對NGF具有結(jié)合特異性的抗人NGF單價(jià)劑，特別是具有所需的 表位特異性、高親和力或親合力和/或功能特性的單價(jià)劑。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及抗人NGF單價(jià)劑,所述抗人NGF單價(jià)劑衍生自本文所述的抗體并且對NGF具有結(jié)合特異性，包含本文所述的\、\和CDR多肽序列；以及編碼所述單價(jià)劑的多核苷酸。此類單價(jià)劑包括例如結(jié)合NGF的Fab、Fab'、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱騎抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
[0023]在一些實(shí)施方案中，這些單價(jià)劑將阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。在其它實(shí)施方案中，可以如通過聚乙二醇化或通過連接于其它水溶性聚合物上來對這些單價(jià)劑進(jìn)行化學(xué)修飾以改變循環(huán)半衰期。
[0024]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，如由步態(tài)分析(如在本文實(shí)施例中所述)所測量，抗人NGF單價(jià)劑(如本文所述的抗體的Fab片段)能夠顯著減少鼠科動(dòng)物模型的體內(nèi)疼痛。本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案涉及抗人NGF的單價(jià)Fab、Fab'、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合在減輕或治療疼痛的方法中的用途。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，如步態(tài)分析之后在鼠科動(dòng)物模型體內(nèi)所證實(shí)，對NGF具有結(jié)合特異性的單價(jià)劑(如本文所述的全長抗體的Fab片段或者Fab'、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合，以上各物對NGF具有結(jié)合特異性)可用于減輕或治療個(gè)體的疼痛，而與在相同濃度下給藥的全長抗體相比大致上不增加炎癥。
[0025]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，這些單價(jià)劑可以衍生自親本抗體和人源化型式，所述親本抗體和人源化型式本身源自于兔免疫細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)并且任選地基于它們與人生殖系序列的同源性(序列同一性)來加以選擇。這些親本抗體可能需要最小限度的序列修飾或不需要序列修飾，從而有助于在人源化之后，在將它們用作單價(jià)劑的來源之前保留功能特性。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及衍生自抗人NGF抗體的抗人NGF單價(jià)劑,所述抗人NGF抗體包含例如源自于兔免疫細(xì)胞的VH、'和CD`R多肽；以及編碼它們的多核苷酸；以及這些抗體和其片段以及編碼它們的多核苷酸在產(chǎn)生新型單價(jià)劑和包含所述單價(jià)劑的組合物中的用途，所述新型單價(jià)劑和包含所述單價(jià)劑的組合物能夠與NGF結(jié)合并且減少個(gè)體的疼痛，而大致上不增加所述個(gè)體的炎癥反應(yīng)。如所指出，在一些實(shí)施方案中，這些單價(jià)劑將阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。這些單價(jià)劑包括例如對NGF具有結(jié)合特異性的Fab、Fab'、Fv、SCFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、I gNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合，優(yōu)選地是含有本文所示例的抗體的CDR和/或具有相同的表位特異性的單價(jià)劑。
[0026]本發(fā)明還涵蓋了單價(jià)劑與一個(gè)或多個(gè)功能性或可檢測的部分綴合所形成的綴合物，所述部分例如影響半衰期的部分或影響單價(jià)劑的其它治療特性的試劑。本發(fā)明還涵蓋了制備所述嵌合或人源化抗NGF單價(jià)劑的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，單價(jià)劑包括但不限于Fab,Fab1、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、MetMab樣抗體分子、駱駝抗體、納米抗體、以及IgNAR。本發(fā)明的實(shí)施方案涉及抗NGF單價(jià)劑用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥的用途。如所指出，在一些實(shí)施方案中，這些單價(jià)劑將阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。
[0027]本發(fā)明還涵蓋了單價(jià)劑用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥的用途。[0028]本發(fā)明還涉及治療疼痛的方法和用于其中的組合物，所述組合物包括對NGF具有結(jié)合特異性的抗體和其片段，特別是在治療疼痛時(shí)具有所需的表位特異性、高親和力或親合力和/或功能特性的抗體。更確切地說，本發(fā)明涉及抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的NGF拮抗劑，例如小分子、多肽、核酸，并且優(yōu)選地是抗人NGF抗體或其片段，包括單價(jià)抗體片段和二價(jià)抗體片段。可以如經(jīng)由連接PEG或其它聚合物或通過連接其它部分(如可檢測的試劑或功能性試劑)對這些抗體和片段(例如，單價(jià)劑)進(jìn)行修飾以影響循環(huán)半衰期。這些單價(jià)劑包括例如Fab、Fab'、Fv、SCFv片段、SMIP(小分子免疫藥物)、駱馬它抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
[0029]本發(fā)明還涉及治療疼痛的方法和用于其中的組合物，所述組合物包括對NGF具有結(jié)合特異性的抗體和其片段，特別是在治療疼痛時(shí)具有所需的表位特異性、高親和力或親合力和/或功能特性的抗體。更確切地說，本發(fā)明涉及抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的NGF拮抗劑，例如小分子、多肽、核酸，并且優(yōu)選地是抗人NGF抗體或其片段，包括單價(jià)抗體片段和二價(jià)抗體片段。另外，本發(fā)明涉及治療疼痛的方法和用于其中的組合物，所述組合物包含抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合的抗人NGF抗體或其片段，包括單價(jià)抗體片段和二價(jià)抗體片段?？梢匀缃?jīng)由連接PEG或其它聚合物或通過連接其它部分(如可檢測的試劑或功能性試劑)對這些抗體和片段(例如，單價(jià)劑)進(jìn)行修飾以影響循環(huán)半衰期。這些單價(jià)劑包括例如Fab、Fab'、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱騎抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
[0030]本發(fā)明具體來說包括了結(jié)合NGF的單價(jià)抗體分子，所述單價(jià)抗體分子類似于MetMab分子。MetMab是對Met具有特異性的單價(jià)抗體。(Met是由Park等，Proc.Natl.Acad.Sc1.84，7479—(1987)中所闡述的核苷酸序列編碼的蛋白質(zhì)或其片段、以及相關(guān)多 肽，包括但不限于等位基因變體、剪接變體、衍生性變體、取代型變體、缺失型變體和/或插入型變體、融合多肽、以及種間同源物)。MetMab抗體是被稱為包括0A_5d5(基因泰克公司(Genentech))在內(nèi)的不同名稱的單價(jià)抗體,并且還被稱為單臂5d5、5d5、MetMab、PR0143966以及其它名稱。抗體0A_5d5 (包括它的結(jié)構(gòu)和特性)以及其制備和使用的方法描述在美國公布號2007/0092520中。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體可以包含與Fe區(qū)連接的單個(gè)Fab區(qū)。在這個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體可以包含本文所述的輕鏈可變域和重鏈可變域。在這樣一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是單價(jià)的并且可以包含完整的Fe區(qū)。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，例如在W02005/063816中所述，F(xiàn)e區(qū)可以包含至少一個(gè)突出結(jié)構(gòu)(杵狀結(jié)構(gòu))和至少一個(gè)空腔結(jié)構(gòu)(白狀結(jié)構(gòu))，其中突出結(jié)構(gòu)和空腔結(jié)構(gòu)的存在增強(qiáng)了包含突出結(jié)構(gòu)的Fe多肽與包含空腔結(jié)構(gòu)的Fe多肽之間的復(fù)合體的形成。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體的Fe區(qū)可以包含第一 Fe多肽和第二 Fe多肽，其中相對于野生型人Fe，第一多肽和第二多肽各自包含一個(gè)或多個(gè)突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，空腔結(jié)構(gòu)突變是T366S、L368A和/或Y407V。在另一個(gè)實(shí)施方案中，突出結(jié)構(gòu)突變是T366W。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的單價(jià)抗體可以包含依照W02005/063816中所述而合成的單臂抗體。在這個(gè)實(shí)施方案中，單臂抗體可以包含F(xiàn)e突變，所述Fe突變構(gòu)成了 W02005/063816中所述的“杵狀結(jié)構(gòu)”和“臼狀結(jié)構(gòu)”。舉例來說，臼狀結(jié)構(gòu)突變可以是Fe多肽中T366A、L368A和/或Y407V中的一個(gè)或多個(gè)，并且空腔結(jié)構(gòu)突變可以是T366W。
[0031]本發(fā)明還涉及抗人NGF單價(jià)劑,所述抗人NGF單價(jià)劑與本文所公開的抗體或抗體片段結(jié)合于相同的NGF表位和/或與抗NGF抗體競爭結(jié)合于NGF,所述抗體包括但不限于選自以下的抗 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
[0032]另外并且與之相關(guān)，本發(fā)明涉及治療個(gè)體的疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的新型方法，所述方法包括施用有效量的抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合的NGF拮抗劑，例如抗人NGF抗體或其片段。本發(fā)明提供了多種新型抗人NGF抗體和其片段，所述抗人NGF抗體和其片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。這些抗體和片段可以被用作單一療法或可以聯(lián)合其它活性劑一起使用，所述其它活性劑包括其它鎮(zhèn)痛劑以及其它抗NGF抗體和抗體片段(包括抑制NGF與p75相互作用的抗體和抗體片段)。
[0033]另外，本發(fā)明提供了用于產(chǎn)生、鑒定以及分離其它抗人NGF抗體或其片段的方法，所述其它抗人NGF抗體或其片段包括二價(jià)和單價(jià)片段,如Fab、Fab' >F(ab/ )2、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納`米抗體、以及IgNAR，所述其它抗人NGF抗體或其片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及使用本文所述的包含本文所述的VH、Vl和CDR多肽序列的抗體以及編碼它們的多核苷酸通過選擇性地抑制NGF與TrkA締合而不抑制NGF與p75締合來治療或預(yù)防疼痛的方法。本發(fā)明提供了在治療上適用于處理疼痛的新型人單克隆抗體以及其片段和綴合物。
[0034]本發(fā)明具體來說提供了以下兩種類型的新型抗體和抗體片段:第一種類型，與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，并且抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；和第二種類型，與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，并且抑制NGF與TrkA締合而且進(jìn)一步抑制NGF與p75締合。這兩種類型的抗體和抗體片段均可用于治療或預(yù)防疼痛，例如與癌癥相關(guān)的疼痛、偏頭痛、手術(shù)前或手術(shù)后相關(guān)疼痛以及其它疼痛相關(guān)病狀。優(yōu)選的是，單克隆抗體或片段是人類或人源化單克隆抗體或其片段或綴合物，它們中和NGF的生物活性并且可用于改善NGF介導(dǎo)的疼痛反應(yīng)(即，牽涉到TrkA通路的疼痛反應(yīng))的影響。
[0035]一方面，本發(fā)明的特征為一種用于預(yù)防或治療手術(shù)后疼痛(可互換地稱為“切口后疼痛”或“創(chuàng)傷后疼痛”)的方法，所述方法是通過施用根據(jù)本發(fā)明的對NGF具有特異性的抗體或抗體片段或其它NGF拮抗劑來實(shí)現(xiàn)的，所述抗體或抗體片段或其它NGF拮抗劑與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合，并且另一方面，本發(fā)明提供了類似的方法，所述方法使用與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合的NGF拮抗劑(根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段)。這包括了抑制或阻止由手術(shù)后疼痛引起的疼痛，包括由手術(shù)或切口性或創(chuàng)傷性傷口所致的疼痛。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與P75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同的途徑和給藥方案來施用的。
[0036]另一方面，本發(fā)明提供了用于降低個(gè)體的手術(shù)后疼痛的發(fā)生率、改善手術(shù)后疼痛、緩和手術(shù)后疼痛和/或延緩手術(shù)后疼痛的產(chǎn)生或進(jìn)展的方法，所述方法包括施用有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明的對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或所述藥物組合物含有根據(jù)本發(fā)明的對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與P75締合?？梢匀缃?jīng)由連接PEG或其它聚合物或通過連接其它部分(如可檢測的試劑或功能性試劑)對這些抗體和片段(例如，單價(jià)劑)進(jìn)行修飾以影響循環(huán)半衰期。這些單價(jià)劑包括例如Fab、Fab'、Fv、SCFv片段、SMIP(小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0037]另一方面，本發(fā)明提供了用于提高個(gè)體的痛閾的方法，所述方法包括施用有效量的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明的對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途 徑和給藥方案來施用的，優(yōu)選地通過皮下或靜脈內(nèi)或鼻內(nèi)或經(jīng)皮途徑施用。
[0038]另一方面，本發(fā)明提供了用于增強(qiáng)個(gè)體因手術(shù)和/或損傷所誘發(fā)的創(chuàng)傷性傷口恢復(fù)的方法，所述方法包括施用有效量的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，抑制、改善和/或預(yù)防靜息疼(resting pain),在一些實(shí)施方案中，抑制、改善和/或預(yù)防機(jī)械誘發(fā)性疼痛(包括由運(yùn)動(dòng)引起的疼痛)，并且在一些實(shí)施方案中，抑制、改善和/或預(yù)防熱誘發(fā)性疼痛。在一些實(shí)施方案中，通過施用以下物質(zhì)來抑制、改善和/或預(yù)防機(jī)械誘發(fā)性疼痛:根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段，所述抗NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，通過施用以下物質(zhì)來抑制、改善和/或預(yù)防靜息疼:根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段，所述抗NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，通過施用以下物質(zhì)來抑制、改善和/或預(yù)防熱誘發(fā)性疼痛:根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段，所述抗NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，抑制、改善和/或預(yù)防痛覺異常(即，對通常無害刺激的反應(yīng)增加(即，有害感覺增加))，和/或抑制、改善和/或預(yù)防痛覺過敏(即，對通常有害或使人不愉快的刺激的反應(yīng)增加)。在再另外的實(shí)施方案中，痛覺異常和/或痛覺過敏在性質(zhì)上是熱性疼痛或機(jī)械性疼痛(觸覺性)或靜息疼。在一些實(shí)施方案中，疼痛是慢性疼痛。在其它實(shí)施方案中，疼痛與切口、傷口或創(chuàng)傷的部位相關(guān)，和/或鄰近于、處于或接近于切口、傷口和/或創(chuàng)傷的部位。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明的至少一種NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。[0039]本發(fā)明的另一個(gè)方面在于使用選擇性地抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與P75締合的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合的根據(jù)本發(fā)明的抗體或抗體片段，或另一種如NGF或TrkA片段的多肽或核酸)能夠使患有慢性內(nèi)臟疼痛的患者的痛苦得到緩解的能力或通過使用根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在慢性疼痛的情況下，根據(jù)本發(fā)明的主題NGF拮抗劑(例如，抗體或抗體片段)能夠抑制或阻止內(nèi)臟功能失調(diào)的病理生理學(xué)中所存在的內(nèi)臟高敏感性。在本文中，措辭慢性內(nèi)臟功能失調(diào)被理解為包括例如神經(jīng)源性內(nèi)臟敏感性失調(diào)，又被稱為內(nèi)臟痛。所述內(nèi)臟包括消化器官、呼吸器官和泌尿生殖器官以及內(nèi)分泌系統(tǒng)，以及脾臟、心臟和大血管。從醫(yī)學(xué)觀點(diǎn)來看，慢性內(nèi)臟痛特征在于對回應(yīng)于外部機(jī)械刺激的疼痛的敏感性閾值與正常閾值相比有所降低。另外，慢性內(nèi)臟疼痛特征在于功能失調(diào)不伴有炎癥情況。更確切地說，慢性內(nèi)臟疼痛包括以下慢性病癥:慢性消化不良，一種功能性消化功能失調(diào)，在不存在可檢測出的器質(zhì)性病變的情況下發(fā)生并且可以是其它疾病或其它病癥的癥狀；慢性痛經(jīng)，特征在于與月經(jīng)相關(guān)的疼痛；慢性胰腺炎，特征在于體重快速下降、虛弱、胰腺點(diǎn)處疼痛、伴有膽脹的黃疸以及由胰腺功能不全而引起的消化功能失調(diào)，包括遺傳性慢性胰腺炎，遺傳性慢性胰腺炎是一種常染色體顯性遺傳性疾病，從兒童期開始表現(xiàn)為腹部和復(fù)發(fā)性疼痛發(fā)作并且在成年人中特征在于胰腺功能不全的體征以及胰腺鈣化；慢性胃食管反流，特征在于酸性胃內(nèi)容物返回進(jìn)入食道中并且通常在進(jìn)餐后引起胸骨后燒灼感上升，有時(shí)伴有反酸；IBS(腸易激綜合征)，這是一種非炎癥性慢性疾病，特征在于腹痛以及腹瀉和/或便秘，而沒有可檢測出的生物化學(xué)和組織學(xué)改變。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或含有根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0040]慢性內(nèi)臟疼痛(特別是胃腸疼痛)特征在于患者或動(dòng)物對各種外部刺激的感受異常。這種對外部刺激的感受異常可以被定義為與對照受試者相比，患者或動(dòng)物對這些外部刺激的敏感性閾值降低。這種生理病理學(xué)病狀被稱為痛覺異常，其中在正常情況下不會引起疼痛的刺激被感受為會引起疼痛，并且所述病狀對應(yīng)于敏感性閾值降低。對患有慢性內(nèi)臟疼痛的受試者施用根據(jù)本發(fā)明的抗體或抗體片段會使得有可能避免這個(gè)受試者對外部刺激的敏感性閾值降低，而回到與在對照健康受試者中所觀察到的敏感性閾值類似的敏感性閾值。根據(jù)本發(fā)明的主題抗體或片段可以被用于制造旨在預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛的藥劑。
[0041]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于增強(qiáng)阿片類鎮(zhèn)痛劑疼痛治療的方法，所述方法包括施用有效量 的阿片類鎮(zhèn)痛劑聯(lián)合有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或聯(lián)合有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。本文所用的聯(lián)合施用包括同時(shí)施用和/或在不同時(shí)間施用。聯(lián)合施用還涵蓋了以共同制劑形式施用(即，根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或片段與阿片類鎮(zhèn)痛劑存在(組合)于同一組合物中)和/或以單獨(dú)的組合物形式施用。
[0042]本文所用的“聯(lián)合施用”意指涵蓋如下任何情況，其中向個(gè)體施用有效量的以下藥劑:根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或片段，所述NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合；以及另一種活性劑，例如另一種鎮(zhèn)痛劑或生物制劑。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0043]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)，所述抗體和其片段能夠與NGF結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合，并且進(jìn)一步抑制TFl細(xì)胞增殖。[0044]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)能夠與NGF結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合并且抑制PC12神經(jīng)突生長。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的所提供的所述嵌合或人源化抗體和其片段(包括Fab片段)，所述抗體和其片段能夠與NGF結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與P75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合，并且進(jìn)一步抑制TFl細(xì)胞增殖。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0045]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，這些抗體和人源化型式可以源自于兔免疫細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)，并且可以基于它們與人生殖系序列的同源性(序列同一性)來加以選擇。這些抗體可能需要最小限度的序列修飾或不需要序列修飾，從而有助于在人源化之后保留功能特性。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及來自抗NGF抗體的片段，所述抗NGF抗體包含例如源自于兔免疫細(xì)胞的VH、'和CDR多肽；以及編碼所述片段的多核苷酸；以及將這些抗體片段和編碼它們的多核苷酸用于產(chǎn)生能夠與NGF和/或NGF/p75和NGF/TrkA復(fù)合體結(jié)合的新型抗體和多肽組合物的方法。
[0046]本發(fā)明還涵蓋了根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如抗NGF抗體和其結(jié)合片段與一個(gè)或多個(gè)功能性或可檢測的部分綴合所形成的綴合物，所述抗NGF抗體和其結(jié)合片段與神經(jīng)生長因子結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。另外，可以使這些化合物與影響(增強(qiáng)或抑制)體內(nèi)半衰期或促進(jìn)對所需細(xì)胞的靶向作用的部分連接。本發(fā)明還涵蓋了制備所述嵌合或人源化抗NGF、抗NGF/p75復(fù)合體或抗NGF/TrkA復(fù)合體的抗體和其結(jié)合片段的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合片段包括但不限于Fab、Fab'、F(ab' )2、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、MetMab樣單價(jià)抗體片段、以及IgNAR。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的以下物質(zhì)與一個(gè)或多個(gè)功能性或可檢測的部分綴合所形成的所述綴合物:抗NGF抗體和其結(jié)合片段，所述抗NGF抗體和其結(jié)合片段與神經(jīng)生長因子結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。
[0047]本發(fā)明的實(shí)施方案涉及根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如抗NGF抗體和其結(jié)合片段用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥(尤其是疼痛相關(guān)病癥)的用途，所述抗NGF抗體和其結(jié)合片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。本發(fā)明還涵蓋了抗NGF抗體的片段用于診斷、評估以及治療與NGF或其異常表達(dá)相關(guān)的疾病和病癥的用途，所述抗NGF抗體的片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。本發(fā)明的其它實(shí)施方案涉及抗NGF抗體或其片段的產(chǎn)生以及編碼所述抗體或片段的核酸，所述抗體或片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合，它們是通過在重組宿主細(xì)胞中表達(dá)這些核酸而產(chǎn)生的，所述宿主細(xì)胞例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如CHO、NSO或HEK293細(xì)胞；或酵母細(xì)胞(例如二倍體酵母，如二倍體畢赤酵母)以及其它酵母菌株。另外，本發(fā)明提供了用于所述方法中的藥學(xué)上可接受的組合物。[0048]如本文所進(jìn)一步論述，應(yīng)了解，可以在不同的給藥頻率和/或時(shí)間間隔下施用根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，抗NGF抗體或片段)與其它活性劑(例如，阿片類鎮(zhèn)痛劑)。舉例來說，可以每周一次施用根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段，而可以更頻繁地施用阿片類鎮(zhèn)痛劑。應(yīng)了解，可以使用相同的施用途徑或不同的施用途徑來施用NGF抗體或片段與阿片類鎮(zhèn)痛劑，并且不同的給藥方案可以在一次或多次施用的過程中發(fā)生變化。可以在疼痛發(fā)作之前進(jìn)行施用。
[0049]另一方面，本發(fā)明提供了用于降低個(gè)體疼痛的發(fā)生率、改善疼痛、緩和疼痛和/或延緩疼痛產(chǎn)生或進(jìn)展的方法，所述方法包括施用有效量的阿片類鎮(zhèn)痛劑聯(lián)合有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或片段，所述NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。本發(fā)明的方法適用于治療或預(yù)防具有任何病因?qū)W的任何疼痛，所述疼痛包括通常規(guī)定使用阿片類鎮(zhèn)痛劑的疼痛，例如胰腺炎、腎結(jié)石、頭痛、痛經(jīng)、肌肉骨骼疼痛(例如，下背疼痛)、扭傷、內(nèi)臟疼痛、卵巢囊腫、前列腺炎、膀胱炎、化學(xué)性灼傷或熱灼傷或癌癥(如轉(zhuǎn)移到骨的前列腺癌、已經(jīng)轉(zhuǎn)移到骨的乳癌、已經(jīng)轉(zhuǎn)移到骨的肺癌、胰腺癌)。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0050]另一方面，本發(fā)明特征為一種用于治療(或在其它實(shí)施方案中，預(yù)防)疼痛的方法，所述方法包括施用一定量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或片段)聯(lián)合另一種活性劑(例如，NSAID)以便提供有效的疼痛緩解作用。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性`的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0051]另一方面，本發(fā)明提供了用于增強(qiáng)NSAID疼痛治療的方法，所述方法包括施用有效量的NSAID聯(lián)合有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與P75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。本文所用的聯(lián)合施用包括同時(shí)施用和/或在不同時(shí)間施用。聯(lián)合施用還涵蓋了以共同制劑形式施用(即，NGF抗體與NSAID存在(組合)于同一組合物中)和/或以單獨(dú)的組合物形式施用。本文所用的“聯(lián)合施用”意指涵蓋如下任何情況，其中向個(gè)體施用有效量的NSAID和抗NGF抗體。如本文所進(jìn)一步論述，應(yīng)了解，可以在不同的給藥頻率和/或時(shí)間間隔下施用NGF抗體或片段與NSAID。舉例來說，可以每周一次施用根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，抗NGF抗體)，而可以更頻繁地施用NSAID。應(yīng)了解，可以使用相同的施用途徑或不同的施用途徑來施用NGF抗體與NSAID，并且不同的給藥方案可以在一次或多次施用的過程中發(fā)生變化。可以在疼痛發(fā)作之前進(jìn)行施用。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明的至少一種NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0052]另一方面，本發(fā)明提供了用于降低個(gè)體疼痛的發(fā)生率、改善疼痛、緩和疼痛和/或延緩疼痛產(chǎn)生或進(jìn)展的方法，所述方法包括施用有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑聯(lián)合有效量的NSAID，根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑例如根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或抗體片段，所述NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與P75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。本發(fā)明的方法適用于治療或預(yù)防具有任何病因?qū)W的任何疼痛，所述疼痛包括通常規(guī)定使用NSAID的疼痛。在一些實(shí)施方案中，疼痛是手術(shù)后疼痛。在一些實(shí)施方案中，疼痛是與灼傷相關(guān)的疼痛。在其它實(shí)施方案中，疼痛是與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疼痛。在其它實(shí)施方案中，疼痛是與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疼痛。
[0053]另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明的至少一種NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0054]另一方面，本發(fā)明特征為一種用于預(yù)防或治療骨癌疼痛的方法，所述骨癌疼痛包括與骨轉(zhuǎn)移相關(guān)的癌癥疼痛(又稱為“骨轉(zhuǎn)移疼痛”)，所述方法是通過施用以下物質(zhì)來實(shí)現(xiàn)的:根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，將根據(jù)本發(fā)明的NGF拮 抗劑(例如，NGF抗體或片段)與阿片類鎮(zhèn)痛劑共同施用。在一些實(shí)施方案中，將根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或抗體片段與NSAID共同施用。在一些實(shí)施方案中，將NGF拮抗劑與阿片類鎮(zhèn)痛劑和NSAID共同施用。在一些實(shí)施方案中，未將NGF拮抗劑與阿片類鎮(zhèn)痛劑共同施用。在一些實(shí)施方案中，未將NGF拮抗劑與NSAID共同施用。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0055]另一方面，本發(fā)明提供了用于降低個(gè)體的骨癌疼痛(包括與骨轉(zhuǎn)移相關(guān)的癌癥疼痛)的發(fā)生率、改善骨癌疼痛(包括與骨轉(zhuǎn)移相關(guān)的癌癥疼痛)、緩和骨癌疼痛(包括與骨轉(zhuǎn)移相關(guān)的癌癥疼痛)和/或延緩骨癌疼痛(包括與骨轉(zhuǎn)移相關(guān)的癌癥疼痛)產(chǎn)生或進(jìn)展的方法，所述方法包括施用有效量的根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體或片段，所述NGF抗體或片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合。在一些實(shí)施方案中，將根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，NGF抗體或片段)與阿片類鎮(zhèn)痛劑共同施用。在一些實(shí)施方案中，將NGF抗體或片段與NSAID共同施用。在一些實(shí)施方案中，將根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，NGF抗體或片段)與阿片類鎮(zhèn)痛劑和NSAID共同施用。在一些實(shí)施方案中，未將根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，NGF抗體或片段)與阿片類鎮(zhèn)痛劑共同施用。在一些實(shí)施方案中，未將根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑(例如，NGF抗體或片段)與NSAID共同施用。另外，本發(fā)明提供了適用于治療或預(yù)防所述疼痛適應(yīng)癥，優(yōu)選地適用于人類療法的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的根據(jù)本發(fā)明對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。如以下所論述，這些組合物可能是可以通過不同途徑和給藥方案來施用的。
[0056]本發(fā)明還提供了:載體，含有編碼此類NGF抗體和片段的核酸；和細(xì)胞，包括如細(xì)菌細(xì)胞、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞或鳥類細(xì)胞，所述細(xì)胞表達(dá)這些核酸，并且最優(yōu)選地將本發(fā)明的單克隆抗體和片段分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中。本發(fā)明的抗體和抗體片段以及其它NGF拮抗劑除了用于治療和處理疼痛的用途之外，還可用于治療神經(jīng)痛和炎癥性疼痛相關(guān)反應(yīng)，所述治療包括使用NGF拮抗劑，例如與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合的抗體或抗體片段或其它化合物，所述抗體或抗體片段或其它化合物抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合；或與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合的抗體，所述抗體抑制NGF與TrkA締合并且進(jìn)一步抑制NGF與p75締合。
[0057]與之相關(guān)，本申請描述了單克隆抗體和片段，所述單克隆抗體和片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合以及NGF與p75締合；和/或?qū)GF具有特異性的抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合，所述抗體和片段還可用于治療或預(yù)防疼痛病癥以及其它病癥(如炎癥)。可以如經(jīng)由連接PEG或其它聚合物或 通過連接其它部分(如可檢測的試劑或功能性試劑)對這些抗體和片段(例如，單價(jià)或二價(jià)劑)進(jìn)行修飾以影響循環(huán)半衰期。這些單價(jià)劑包括例如Fab、Fab'、Fv.scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
[0058]附圖中各視圖的簡述[0059] 圖1提供了對應(yīng)于全長抗體Abl的多核苷酸序列和多肽序列。
[0060]圖2提供了對應(yīng)于全長抗體Ab2的多核苷酸序列和多肽序列。
[0061]圖3提供了對應(yīng)于全長抗體Ab3的多核苷酸序列和多肽序列。
[0062]圖4提供了對應(yīng)于全長抗體Ab4的多核苷酸序列和多肽序列。
[0063]圖5提供了對應(yīng)于全長抗體Ab5的多核苷酸序列和多肽序列。
[0064]圖6提供了對應(yīng)于全長抗體Ab6的多核苷酸序列和多肽序列。
[0065]圖7提供了對應(yīng)于全長抗體Ab7的多核苷酸序列和多肽序列。
[0066]圖8提供了對應(yīng)于全長抗體AbS的多核苷酸序列和多肽序列。
[0067]圖9提供了對應(yīng)于全長抗體Ab9的多核苷酸序列和多肽序列。
[0068]圖10提供了對應(yīng)于全長抗體AblO的多核苷酸序列和多肽序列。
[0069]圖11提供了對應(yīng)于全長抗體Abll的多核苷酸序列和多肽序列。
[0070]圖12提供了對應(yīng)于全長抗體Abl2的多核苷酸序列和多肽序列。
[0071]圖13提供了對應(yīng)于全長抗體Abl3的多核苷酸序列和多肽序列。
[0072]圖14提供了對應(yīng)于全長抗體Abl4的多核苷酸序列和多肽序列。
[0073]圖15提供了對應(yīng)于全長抗體Abl5的多核苷酸序列和多肽序列。
[0074]圖16提供了對應(yīng)于全長抗體Abl6的多核苷酸序列和多肽序列。
[0075]圖17提供了對應(yīng)于全長抗體Abl7的多核苷酸序列和多肽序列。
[0076]圖18提供了對應(yīng)于全長抗體AblS的多核苷酸序列和多肽序列。
[0077]圖19提供了對應(yīng)于全長抗體Abl9的多核苷酸序列和多肽序列。
[0078]圖20提供了對應(yīng)于全長抗體Ab20的多核苷酸序列和多肽序列。
[0079]圖21提供了對應(yīng)于通過在巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)中表達(dá)而產(chǎn)生的全長抗體Ab21的多核苷酸序列和多肽序列。
[0080]圖22提供了 Fabl的重鏈多肽序列和輕鏈多肽序列。
[0081]圖23提供了 Fab2的重鏈多肽序列和輕鏈多肽序列。
[0082]圖24提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl和Ab2所獲得的NGFELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0083]圖25提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab3所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0084]圖26提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab4所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0085]圖27提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab5和Ab6所獲得的NGFELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0086]圖28提供了遵循以下所述的方案針對Fabl所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0087]圖29提供了遵循以下所述的方案針對Fab2所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0088]圖30提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab7和Ab8所獲得的NGFELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0089]圖31提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab9和AblO所獲得的NGFELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0090]圖32提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abll所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0091]圖33提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl2所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0092]圖34提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl3所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。[0093]圖35提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl4所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0094]圖36提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl5所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0095]圖37提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl6所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0096]圖38提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl7和Abl8所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0097]圖39提供了遵循以下所述的方案針對抗體Abl9所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0098]圖40提供了遵循以下所述的方案針對抗體Ab20所獲得的NGF ELISA結(jié)合數(shù)據(jù)。
[0099]圖41提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Abl和Ab2所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0100]圖42提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab3和Ab4所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0101]圖43提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab5和Ab6所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0102]圖44提供了遵循實(shí)施例1針對Fabl抗體片段和Fab2抗體片段所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0103]圖45提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab7和Ab8所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。 [0104]圖46提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab9和AblO所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0105]圖47提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Abll和Abl2所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0106]圖48提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Abl3和Abl4所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0107]圖49提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Abl5所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0108]圖50提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab 16所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0109]圖51提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Abl7和Abl8所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0110]圖52提供了遵循實(shí)施例1針對抗體Ab 19和Ab20所獲得的TFl細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)。
[0111]圖53提供了遵循實(shí)施例5針對抗體Ab3和Ab4所獲得的對NGF_p75相互作用的抑制作用數(shù)據(jù)?？贵wAb3和Ab4未展示出能夠抑制NGF與p75相互作用的能力。
[0112]圖54提供了遵循實(shí)施例5針對抗體Abl5和Abl6所獲得的對NGF_p75相互作用的抑制作用數(shù)據(jù)?？贵wAbl5和Abl6未展示出能夠抑制NGF與p75相互作用的能力。
[0113]圖55提供了遵循實(shí)施例5針對抗體Ab5所獲得的對NGF_p75相互作用的抑制作用數(shù)據(jù)?？贵wAb5展示出能夠抑制NGF與p75相互作用的能力。
[0114]圖56示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abl存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0115]圖57示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab2存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0116]圖58示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab3存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。結(jié)果還證實(shí)了在相同抗體濃度下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用小于針對于展現(xiàn)不同的NGF結(jié)合選擇性的抗NGF抗體(即，抑制NGF與TrkA和p75兩者相互作用的抗體)所觀測到的抑制作用。
[0117]圖59示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab5存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0118]圖60示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab6存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0119]圖61示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab7存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0120]圖62示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab8存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0121]圖63示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab9存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0122]圖64示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體AblO存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。 [0123]圖65示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abll存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0124]圖66示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abl3存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0125]圖67示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abl7存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0126]圖68示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab 18存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0127]圖69示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Ab 19存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。
[0128]圖70示出了遵循實(shí)施例7在與針對于對照所獲得的結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab2、Ab6、以及AbS之后通過步態(tài)分析所評估的疼痛統(tǒng)計(jì)顯著性減少。
[0129]圖71示出了遵循實(shí)施例7在與針對于對照所獲得的結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab6和Fabl之后通過步態(tài)分析所評估的疼痛統(tǒng)計(jì)顯著性減少。
[0130]圖72示出了遵循實(shí)施例7在與針對于對照所獲得的結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab3之后通過步態(tài)分析所評估的疼痛統(tǒng)計(jì)顯著性減少。
[0131]圖73示出了遵循實(shí)施例7在與針對于對照所獲得的結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab6和抗體Ab21之后通過步態(tài)分析所評估的疼痛統(tǒng)計(jì)顯著性減少。
[0132]圖74示出了遵循實(shí)施例8在與對照的炎癥結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab2、Ab6、以及Ab8中的每一個(gè)之后炎癥增加。
[0133]圖75示出了在與對照的炎癥結(jié)果相比時(shí)，在施用Fabl抗體片段之后炎癥沒有顯著增加。相比之下，遵循實(shí)施例8在與對照的炎癥結(jié)果相比時(shí)，施用抗體Ab6導(dǎo)致炎癥增加。
[0134]圖76示出了遵循實(shí)施例8在與對照的炎癥結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab3之后炎癥增加。
[0135]圖77同樣示出了遵循實(shí)施例8在與對照的炎癥結(jié)果相比時(shí)，在施用抗體Ab6和抗體Ab21之后炎癥增加。
[0136]圖78示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abl6存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。結(jié)果還證實(shí)了在相同的抗體濃度下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用小于針對于展現(xiàn)不同的NGF結(jié)合選擇性的抗NGF抗體(即，抑制NGF與TrkA和p75兩者相互作用的抗體)所觀測到的抑制作用。
[0137]圖79示出了遵循實(shí)施例6所獲得的在遞增濃度的抗體Abl5存在下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用。結(jié)果還證實(shí)了在相同的抗體濃度下對PC-12神經(jīng)突生長的抑制作用小于針對于展現(xiàn)不同的NGF結(jié)合選擇性的抗NGF抗體(即，抑制NGF與TrkA和p75兩者相互作用的抗體)所觀測到的抑制作用。
[0138]優(yōu)選實(shí)施方案的詳述
[0139]定義
[0140]應(yīng)了解，本發(fā)明不限于所述的具體方法、方案、細(xì)胞系、動(dòng)物種或?qū)?、以及試劑，因?yàn)樗鲞@些可以發(fā)生改變。還應(yīng)了解，本文所用的術(shù)語僅出于描述具體實(shí)施方案的目的而不意圖限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍將僅受所附權(quán)利要求書限制。除非上下文另外明確地指出，否則本文所用的單數(shù)形式“一個(gè)(種)(a/an) ”和“所述(the) ”包括復(fù)數(shù)對象。因此，例如，提及“一個(gè)細(xì)胞”包括了多個(gè)此類細(xì)胞并且提及“所述蛋白”包括了提及一種或多種蛋白以及其為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的等效物，諸如此類。除非另外明確地指出，否則本文所用的所有技術(shù)性和科學(xué)性術(shù)語所具有的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員通常所了解的含義相同。
[0141]神經(jīng)生長因子(NGF):本文所用的NGF(又稱為β-NGF ；HSAN5 ;以及NGFB)不僅涵蓋了可從安迪生物科技有限公司(R&D Systems) (Minneapolis, MN)獲得的下列成熟氨基酸序列作為智人β-神經(jīng)生長因子(β-NGF):
[0142]SSSHPIFHRGEFSVCDSVSVWVGDKTTATDIKGKEVMVLGEVNINNSVFKQYFFETKCRDPNPVDSGCRGIDSKHWNSYCTTTHTFVKALTMDGKQAAWRFIRIDTACVCVLSRKAVRRA (SEQ ID NO: 411)，而且還涵蓋了這個(gè)NGF氨基酸序列的任何前體形式、成熟形式、可溶性形式和/或膜結(jié)合形式，以及這個(gè)序列的突變體(突變蛋白(mutien))、剪接變體、亞型、直系同源物、同源物以及變體。
[0143]“神經(jīng)生長因子拮抗劑”是拮抗或抑制由NGF所誘導(dǎo)的至少一種生物活性，優(yōu)選地牽涉到NGF與TrkA和/或p75相互作用的活性的分子。這些拮抗劑可以包括多肽(如TrkA, p75或NGF的片段)、核`酸或結(jié)合NGF、TrkA或p75的抗體。在所示例的實(shí)施方案中，NGF拮抗劑或者是對NGF具有特異性的至少一種抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段與神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合，抑制NGF與TrkA締合和/或抑制NGF與p75締合。
[0144]本文中的“重組宿主”或“宿主細(xì)胞”典型地是指細(xì)胞或非人生物體，所述細(xì)胞或非人生物體經(jīng)過基因工程改造以便產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的NGF拮抗劑，例如根據(jù)本發(fā)明的NGF抗體、NGF抗體片段或其它NGF拮抗劑。這些宿主和宿主細(xì)胞包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞、酵母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、植物細(xì)胞，以及轉(zhuǎn)基因植物或動(dòng)物，如嚙齒動(dòng)物、植物以及?？苿?dòng)物。典型地，抗體或抗體片段在哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞以及酵母細(xì)胞中表達(dá)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，主題抗體或抗體片段在專有的分泌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)，所述分泌表達(dá)系統(tǒng)使用了二倍體畢赤酵母培養(yǎng)物來表達(dá)抗體。這種表達(dá)系統(tǒng)公開于2011年4月19日頒布的Cregg的美國專利號7，927，863中，所述專利的內(nèi)容以引用的方式并入本文。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，NGF拮抗劑(例如，抗人NGF抗體和抗體片段)在酵母，優(yōu)選地在有交配能力的酵母中表達(dá)。
[0145]有交配能力的酵母菌種:在本發(fā)明中，所述酵母菌種意圖寬泛地涵蓋可以在培養(yǎng)物中生長的任何二倍體或四倍體酵母。此類酵母菌種可以呈單倍體、二倍體或其它多倍體形式存在。具有給定倍數(shù)性的細(xì)胞可以在適當(dāng)?shù)臈l件下以那種形式增殖無限的代數(shù)。二倍體細(xì)胞還可以形成孢子以形成單倍體細(xì)胞。連續(xù)交配可以通過二倍體菌株的進(jìn)一步交配或融合而產(chǎn)生四倍體菌株。本發(fā)明涵蓋了使用單倍體酵母，以及例如通過交配或原生質(zhì)球融合而產(chǎn)生的二倍體或其它多倍體酵母細(xì)胞。此類酵母包括酵母科(Saccharomycetaceae)的成員，所述酵母科包括阿斯眉酵母屬(Arxiozyma);?？瞬冀湍笇?Ascobotryozyma);固囊酵母屬(Citeromyces);德巴利酵母屬(Debaryomyces);德克酵母屬(Dekkera);假囊酵母屬(Eremothecium);伊薩酵母屬(Issatchenkia);哈薩克斯坦酵母屬(Kazachstania)；克魯維酵母屬(Kluyveromyces);柯達(dá)酵母屬(Kodamaea);路德酵母屬(Lodderomyces)；管囊酵母屬(Pachysolen);畢赤酵母屬；酵母屬(Saccharomyces) ; 土星形酵母屬(Saturnispora);特派斯波羅酵母屬(Tetrapisispora);有抱圓酵母屬(Torulaspora)；擬威爾酵母屬(Williopsis);以及接合酵母屬(Zygosaccharomyces)。可能可用于本發(fā)明中的其它類型的酵母包括耶氏酵母屬(Yarrowia);紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium);假絲酵母屬(Candida);漢遜酵母屬(Hansenula);線黑粉酵母屬(Filobasium);鎖擲酵母屬(Sporidiobolus);布勒擲孢酵母屬(Bullera);白冬孢酵母屬(Leucosporidium)以及線狀黑粉菌屬(Filobasidella)。
[0146]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，有交配能力的酵母是畢赤酵母屬中的一員。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，畢赤酵母屬中有交配能力的酵母是以下菌種之一:巴斯德畢赤酵母、甲醇畢赤酵母(Pichia methanolica)、以及多形漢遜酵母(HansenulapoIymorpha)(安格斯畢赤酵母(Pichia angusta))。在本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，畢赤酵母屬中有交配能力的酵母是巴斯德畢赤酵母菌種。
[0147]選擇標(biāo)記:選擇標(biāo)記是如下的基因或基因片段，所述基因或基因片段賦予例如通過轉(zhuǎn)化事件而接受所述基因的細(xì)胞以生長表型(物理生長特征)。選擇標(biāo)記允許所述細(xì)胞在選擇性生長培養(yǎng)基中在未接受所述選擇標(biāo)記基因的細(xì)胞不能生長的條件下存活并且生長。選擇標(biāo)記基因通常分為以下幾種類型，包括陽性選擇標(biāo)記基因，如在使兩個(gè)ts突變體雜交或使ts突變體進(jìn)行轉(zhuǎn) 化時(shí)賦予細(xì)胞對抗生素或其它藥物、溫度的抗性的基因；陰性選擇標(biāo)記基因，如生物合成基因，所述生物合成基因賦予細(xì)胞以在不含為不具有所述生物合成基因的所有細(xì)胞所需的特定營養(yǎng)物的培養(yǎng)基中生長的能力，或經(jīng)過誘變的生物合成基因，所述經(jīng)過誘變的生物合成基因使得細(xì)胞不能通過不具有野生型基因的細(xì)胞生長；以及類似選擇標(biāo)記。適合的標(biāo)記包括但不限于:ZE0 ；G418 ；LYS3 ；MET1 ；MET3a ；ADE1 ；ADE3 ；URA3 ;以及類似標(biāo)記。
[0148]表達(dá)載體:這些DNA載體含有有助于對外源蛋白在目標(biāo)宿主細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)進(jìn)行操縱的元件。常常，首先在細(xì)菌宿主(例如，大腸桿菌(E.coli))中對序列進(jìn)行操縱并且產(chǎn)生用于轉(zhuǎn)化的DNA，并且通常，載體將包括促成此類操縱的序列，所述序列包括細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn)和適當(dāng)?shù)募?xì)菌選擇標(biāo)記。選擇標(biāo)記編碼為在選擇性培養(yǎng)基中生長的經(jīng)過轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞存活或生長所必需的蛋白。未被含有選擇基因的載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞將不能在所述培養(yǎng)基中存活。典型的選擇基因編碼如下蛋白，所述蛋白(a)賦予對抗生素或其它毒素的抗性，(b)彌補(bǔ)營養(yǎng)缺陷型缺陷，或(c)供給不可從復(fù)合培養(yǎng)基中獲得的關(guān)鍵營養(yǎng)物。用于轉(zhuǎn)化酵母的不例性載體和方法描述在例如Burke, D., Dawson, D.和Stearns, T.(2000).Methodsin yeast genetics: a Cold Spring Harbor Laboratory course manual.Plainviewj N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press 中。
[0149]用于本發(fā)明的方法中的表達(dá)載體將進(jìn)一步包括宿主細(xì)胞特異性序列，所述序列包括用于鑒定經(jīng)過轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞或宿主菌株的選擇營養(yǎng)缺陷型標(biāo)記或藥物標(biāo)記。藥物標(biāo)記可以進(jìn)一步被用來擴(kuò)增宿主細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中載體的拷貝數(shù)。
[0150]目標(biāo)多肽編碼序列與轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)節(jié)序列可操作地連接，所述調(diào)節(jié)序列使多肽能夠在宿主細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中表達(dá)。這些載體部件可以包括但不限于以下各項(xiàng)中的一種或多種:增強(qiáng)子元件、啟動(dòng)子、以及轉(zhuǎn)錄終止序列。還可以包括用于分泌多肽的序列，例如信號序列等。宿主細(xì)胞復(fù)制起點(diǎn)是任選的，這是因?yàn)槌３⒈磉_(dá)載體整合至宿主細(xì)胞基因組中。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，目標(biāo)多肽與使得多肽從宿主細(xì)胞(例如，酵母二倍體細(xì)胞)中的分泌得到優(yōu)化的序列可操作地連接或融合。
[0151]當(dāng)使核酸與另一個(gè)核酸序列處于某種功能關(guān)系時(shí)，所述核酸是“可操作地連接”的。舉例來說，如果信號序列的DNA被表達(dá)為參與多肽分泌的前蛋白，那么所述信號序列的DNA與多肽的DNA可操作地連接；如果啟動(dòng)子或增強(qiáng)子影響了編碼序列的轉(zhuǎn)錄，那么所述啟動(dòng)子或增強(qiáng)子與所述編碼序列可操作地連接。總體而言，“可操作地連接”意指所連接的DNA序列是鄰接的，并且在分泌前導(dǎo)序列的情況下，是鄰接的并且處于閱讀框架中。然而，增強(qiáng)子未必是鄰接的。通過在適宜的限制性酶切位點(diǎn)上進(jìn)行接合或者作為替代方案經(jīng)由本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的PCR/重組方法(Gatewa/技術(shù)；加利福利亞州卡爾斯巴德市的英杰公司(Invitrogen, Carlsbad California))來實(shí)現(xiàn)連接。如果不存在所述位點(diǎn),那么根據(jù)常規(guī)慣例使用合成的寡核苷酸接頭或連接子。
[0152]啟動(dòng)子是位于結(jié)構(gòu)基因起始密碼子上游(5,端)的非翻譯序列(一般在約IOObp至1000bp范圍內(nèi))，所述非翻譯序列控制與它們可操作地連接的特定核酸序列轉(zhuǎn)錄和翻譯。所述啟動(dòng)子分成以下幾個(gè)類別:誘導(dǎo)型啟動(dòng)子、組成型啟動(dòng)子、以及阻抑型啟動(dòng)子(所述啟動(dòng)子能夠回應(yīng)于不存在阻抑物的情況而使轉(zhuǎn)錄水平提高)。誘導(dǎo)型啟動(dòng)子可以回應(yīng)于培養(yǎng)條件的某種改變(例如，存在或不存在營養(yǎng)物或溫度的改變)促使在它們的控制下進(jìn)行的DNA轉(zhuǎn)錄的水平有所提高。
[0153]啟動(dòng)子片段還可以充當(dāng)同源重組和使表達(dá)載體整合至酵母基因組中的相同位點(diǎn)中的位點(diǎn)；或者，使用選擇標(biāo)記作為同源重組的位點(diǎn)。畢赤酵母轉(zhuǎn)化描述于Cregg等(1985)Mol.Cell.Biol.5:3376-3385 中。`
[0154]來自畢赤酵母的適合啟動(dòng)子的實(shí)例包括AOXl和啟動(dòng)子(Cregg等(1989)1Cell.Biol.9:1316-1323) ；ICL1 啟動(dòng)子(Menendez 等(2003) Yeast20 (13):1097-108);甘油醛-3-磷酸脫氫酶啟動(dòng)子(GAP) (Waterham等(1997)應(yīng)膽186 (I):37-44);以及FLDl啟動(dòng)子(Shen等(1998)Gene216(l):93-102)。GAP啟動(dòng)子是強(qiáng)組成型啟動(dòng)子，并且AOX和FLDl
啟動(dòng)子是誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。
[0155]其它酵母啟動(dòng)子包括ADH1、醇脫氫酶I1、GAL4、PH03、PH05、Pyk、以及源自于它們
的嵌合啟動(dòng)子。另外，可以在本發(fā)明中使用非酵母啟動(dòng)子，如哺乳動(dòng)物啟動(dòng)子、昆蟲啟動(dòng)子、植物啟動(dòng)子、爬行動(dòng)物啟動(dòng)子、植物啟動(dòng)子、兩棲動(dòng)物啟動(dòng)子、病毒啟動(dòng)子、以及鳥類啟動(dòng)子。最典型的是，所述啟動(dòng)子將包含哺乳動(dòng)物啟動(dòng)子(可能是所表達(dá)基因的內(nèi)源性啟動(dòng)子)或?qū)诮湍赶到y(tǒng)中提供高效轉(zhuǎn)錄的酵母啟動(dòng)子或病毒啟動(dòng)子。
[0156]目標(biāo)多肽不僅可以通過重組方式直接產(chǎn)生，而且還可以通過重組方式與異源多肽以融合多肽形式產(chǎn)生，所述異源多肽例如在成熟蛋白或多肽的N端上具有特異性裂解位點(diǎn)的信號序列或其它多肽?？傮w而言，信號序列可以是載體的部件，或所述信號序列可以是插入至載體中的多肽編碼序列的一部分。所選擇的異源信號序列優(yōu)選地是可以經(jīng)由宿主細(xì)胞內(nèi)可獲得的標(biāo)準(zhǔn)通路之一進(jìn)行識別和加工的異源信號序列。釀酒酵母(S.cerevisiae) α因子前原信號已經(jīng)過證實(shí)可以有效地使多種重組蛋白從巴斯德畢赤酵母中分泌出來。其它酵母信號序列包括α交配因子信號序列、轉(zhuǎn)化酶信號序列、以及源自于其它分泌性酵母多肽的信號序列。另外，可以對這些信號肽序列進(jìn)行工程改造以便在所選的表達(dá)系統(tǒng)中提供增強(qiáng)的分泌作用。其它目標(biāo)分泌信號還包括哺乳動(dòng)物信號序列，所述信號序列可以與所分泌的蛋白質(zhì)異源，或可以是所分泌的蛋白質(zhì)的天然序列。信號序列包括前肽序列，并且在一些情況下可以包括原肽序列。許多此類信號序列是本領(lǐng)域中已知的，包括存在于免疫球蛋白鏈上的信號序列，例如Κ28前原毒素序列、PHA-E, FACE、人MCP-1、人血清白蛋白信號序列、人Ig重鏈、人Ig輕鏈等。例如，參見Hashimoto等，Protein Engll (2) 75 (1998);和Kobayashi 等,Therapeutic Apheresis2(4)257(1998)。
[0157]可以通過將轉(zhuǎn)錄激活序列插入至載體中來增加轉(zhuǎn)錄。這些激活序列是DNA的順式作用元件(通常為約IObp至300bp)，所述順式作用元件對啟動(dòng)子起作用以便增加它的轉(zhuǎn)錄。轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子在內(nèi)含子內(nèi)以及在編碼序列本身內(nèi)的定向和位置是相對獨(dú)立的，存在于轉(zhuǎn)錄單位的5'端和3'端。可以將增強(qiáng)子剪接至表達(dá)載體中編碼序列的5'位或3'位上，但所述增強(qiáng)子優(yōu)選地位于啟動(dòng)子的5,位點(diǎn)上。
[0158]用于真核宿主細(xì)胞中的表達(dá)載體還可以含有終止轉(zhuǎn)錄和使mRNA穩(wěn)定所必需的序列。此類序列通常可在真核生物或病毒DNA或cDNA的非翻譯區(qū)中從翻譯終止密碼子的3'端獲得。這些區(qū)含有在mRNA的非翻譯部分中被轉(zhuǎn)錄為多聚腺苷酸化片段的核苷酸區(qū)段。
[0159]建構(gòu)含有以上所列出的一個(gè)或多個(gè)部件的適合載體采用了標(biāo)準(zhǔn)接合技術(shù)或PCR/重組方法。將分離的 質(zhì)?；駾NA片段裂解、定制、并且重新接合成為產(chǎn)生所需的質(zhì)粒所希望的形式或經(jīng)由重組方法產(chǎn)生所需的質(zhì)粒。為了分析以確認(rèn)所建構(gòu)的質(zhì)粒中的正確序列，使用接合混合物來轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，并且在適當(dāng)時(shí)通過抗生素抗性(例如，氨比西林(ampicillin)或博來霉素(Zeocin))來選擇成功的轉(zhuǎn)化體。對來自所述轉(zhuǎn)化體的質(zhì)粒進(jìn)行制備，通過限制性核酸內(nèi)切酶消化進(jìn)行分析和/或測序。
[0160]作為對片段進(jìn)行限制和接合的一個(gè)替代方案，可以使用基于att位點(diǎn)的重組方法和重組酶來將DNA序列插入至載體中。此類方法例如由Landy (1989) Ann.Rev.Biochem.58:913-949描述；并且所述方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知。此類方法利用了由λ U遼菌體和大腸桿菌(E.coli)編碼的重組蛋白的混合物介導(dǎo)的分子間DNA重組。重組在相互作用的DNA分子上的特異性連接(att)位點(diǎn)之間發(fā)生。關(guān)于對att位點(diǎn)的描述,參見Weisberg和Landy (1983)Site-Specific Recombination in Phage Lambda, in Lambda II, Weisberg編著(Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Press),第 211-250 頁。對側(cè)接于重組位點(diǎn)的DNA區(qū)段進(jìn)行轉(zhuǎn)換，從而使得在重組之后，att位點(diǎn)是包含由每個(gè)親本載體所貢獻(xiàn)的序列的雜合序列。重組可以在具有任何拓?fù)涞腄NA之間發(fā)生。
[0161]可以通過以下手段將att位點(diǎn)引入到目標(biāo)序列中:將目標(biāo)序列接合至適當(dāng)?shù)妮d體中；通過使用特異性引物而產(chǎn)生含有att B位點(diǎn)的PCR產(chǎn)物；產(chǎn)生已被克隆至含有att位點(diǎn)的適當(dāng)載體中的cDNA文庫；等。
[0162]本文所用的折疊是指多肽和蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)，其中氨基酸殘基之間發(fā)生相互作用以使結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。雖然非共價(jià)相互作用在決定結(jié)構(gòu)方面至關(guān)重要，但通常，目標(biāo)蛋白質(zhì)將具有由兩個(gè)半胱氨酸殘基形成的分子內(nèi)和/或分子間共價(jià)二硫鍵。對于天然存在的蛋白質(zhì)和多肽或其衍生物和變體，正確的折疊典型地是產(chǎn)生最佳生物活性的排列，并且可以方便地通過活性(例如配體結(jié)合、酶活性等)的測定來監(jiān)測。
[0163]在一些情況下，例如在所需的產(chǎn)物是合成源性產(chǎn)物時(shí)，基于生物活性的測定將較沒有意義?？梢曰谖锢硖匦?、能量考慮、建模研究等來確定此類分子的正確折疊。
[0164]可以通過引入編碼一種或多種酶的序列來進(jìn)一步修飾表達(dá)宿主，所述一種或多種酶會增強(qiáng)折疊和二硫鍵形成，即折疊酶、伴侶蛋白等。可以使用如本領(lǐng)域中已知的載體、標(biāo)記等在酵母宿主細(xì)胞中組成性地或誘導(dǎo)性地表達(dá)此類序列。優(yōu)選的是，通過靶向方法，將包括足以實(shí)現(xiàn)所希望的表達(dá)型態(tài)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件在內(nèi)的序列穩(wěn)定地整合至宿主細(xì)胞基因組中。
[0165]舉例來說，真核生物PDI不僅是蛋白半胱氨酸氧化和二硫鍵異構(gòu)化的有效催化劑，而且還展現(xiàn)出伴侶蛋白活性。PDI的共表達(dá)可以促成具有多個(gè)二硫鍵的活性蛋白產(chǎn)生。同樣，相關(guān)的是BIP(免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白)、親環(huán)蛋白等的表達(dá)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，單倍體親本菌株中的每一種均表達(dá)相異的折疊酶，例如一種菌株可能表達(dá)BIP，而另一種菌株可能表達(dá)PDI或其組合。
[0166]術(shù)語“所需的蛋白”或“所需的抗體”是可互換使用的，并且通常是指如本文所描述的對靶標(biāo)(即，NGF)具有特異性的親本抗體或源自于它們的嵌合或人源化抗體或其結(jié)合部分。術(shù)語“抗體”意圖包括具有特定形狀的任何含有多肽鏈的分子結(jié)構(gòu)，所述分子結(jié)構(gòu)與表位相配合并且識別表位，其中一種或多種非共價(jià)結(jié)合相互作用使分子結(jié)構(gòu)與表位之間的復(fù)合體穩(wěn)定。原型抗體分子是免疫球蛋白，并且來自所有來源(例如人、嚙齒動(dòng)物、兔、母牛、綿羊、豬、狗、其它哺乳動(dòng)物、雞、其它鳥類等)的所有類型的免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、IgE、IgD等均被認(rèn)為是“抗體”。用于產(chǎn)生可用作根據(jù)本發(fā)明的起始物質(zhì)的抗體的一個(gè)優(yōu)選來源是兔。已經(jīng)描述了許多的抗體編碼序列；并且可以通過本領(lǐng)域中熟知的方法來產(chǎn)生其它的抗體編碼序列。其實(shí)例包括嵌合抗體、人抗體和其它非人哺乳動(dòng)物抗體、人源化抗體、單鏈抗體(如scFv)、駱騎抗體、納米抗體、IgNAR(源自于S魚的單鏈抗體)、小分子免疫藥物(SMIP)`、以及抗體片段，如Fab、Fab'、F(ab' )2等。參見StreltsovVA 等，Structure of a shark IgNAR antibody variable domain and modeling of anearly-developmental isotype,Protein Sc1.2005 年 11 月；14 (11):2901-9.2005 年 9 月30日電子出版；Greenberg AS等，A new antigen receptor gene family that undergoesrearrangement and extensive somatic diversification in sharks, Nature.1995年 3 月 9 日；374 (6518): 168-73 ;Nuttall SD 等，Isolation of the new antigenreceptor from wobbegong sharks, and use as a scaffold for the display ofprotein loop libraries, Mol Immunol.2001 年 8 月;38(4):313-26 ;Hamers_CastermanC 等，Naturally occurring antibodies devoid of light chains，Nature.1993 年 6 月3 日;363(6428):446-8 ；Gill DS 等，Biopharmaceutical drug discovery using novelprotein scaffolds, Curr Opin Biotechnol.2006 年 12 月;17(6):653-8.2006 年 10 月 19日電子出版。
[0167]舉例來說，可以通過基因工程改造產(chǎn)生抗體或抗原結(jié)合片段。在這種技術(shù)中，如同其它方法一樣，使抗體產(chǎn)生細(xì)胞對所需的抗原或免疫原敏感。使用PCR擴(kuò)增，將從抗體產(chǎn)生細(xì)胞中分離出的信使RNA用作模板來制備cDNA。通過將擴(kuò)增了的免疫球蛋白cDNA的適當(dāng)區(qū)段插入到表達(dá)載體中來產(chǎn)生載體的文庫，所述載體各自含有保留了初始抗原特異性的一個(gè)重鏈基因和一個(gè)輕鏈基因。通過將重鏈基因文庫與輕鏈基因文庫組合來建構(gòu)組合性文庫。這會產(chǎn)生共表達(dá)重鏈和輕鏈的克隆(類似于抗體分子的Fab片段或抗原結(jié)合片段)的文庫。將攜帶這些基因的載體共轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞中。當(dāng)在經(jīng)過轉(zhuǎn)染的宿主中誘導(dǎo)抗體基因合成時(shí)，重鏈蛋白和輕鏈蛋白自行組裝而產(chǎn)生活性抗體，可以通過用抗原或免疫原進(jìn)行篩選來檢測所述活性抗體。 [0168]目標(biāo)抗體編碼序列包括由天然序列編碼的那些序列，以及由于遺傳密碼的簡并而與所公開的核酸在序列上不相同的核酸及其變體。變體多肽可以包括氨基酸(aa)取代、添加或缺失。氨基酸取代可以是保守性氨基酸取代或消除非必需氨基酸的取代，如改變糖基化位點(diǎn)的取代，或通過并非為功能所必需的一個(gè)或多個(gè)半胱氨酸殘基的取代或缺失使錯(cuò)誤折疊減至最少的取代。變體可以經(jīng)過設(shè)計(jì)以便保留蛋白質(zhì)的特定區(qū)(例如，功能性結(jié)構(gòu)域、催化性氨基酸殘基等)的生物活性或具有增強(qiáng)的生物活性。變體還包括了本文所公開的多肽的片段，特別是生物活性片段和/或?qū)?yīng)于功能性結(jié)構(gòu)域的片段。用于對克隆的基因進(jìn)行體外誘變的技術(shù)是已知的。在本發(fā)明中還包括了如下的多肽，已使用普通分子生物學(xué)技術(shù)對所述多肽進(jìn)行修飾，以便改良它們對蛋白質(zhì)水解降解的抗性或優(yōu)化可溶性特性或使得它們更適合作為治療劑。
[0169]本文的嵌合抗體包括通過對至少2種不同抗體的一個(gè)或多個(gè)部分進(jìn)行組合而獲得的任何抗體，所述至少2種不同抗體可以來自相同或不同的物種。通常，嵌合抗體含有源自于人抗體和非人抗體的部分。在本文中，嵌合抗體包括人源化抗體，因?yàn)槿嗽椿贵w含有源自于人抗體和非人抗體的部分，即它們典型地包含人框架殘基和非人抗體CDR。因此，在本申請中，嵌合抗體與人源化抗體有時(shí)可互換引用。
[0170]可以通過重組手段，通過將從一種物種的抗體產(chǎn)生細(xì)胞中獲得的可變輕鏈區(qū)和可變重鏈區(qū)('和Vh)與來自另一種物種的恒定輕鏈區(qū)和恒定重鏈區(qū)進(jìn)行組合來制備嵌合抗體。然而，本文所指出的“嵌合抗體或嵌合抗體片段”意圖寬泛地涵蓋任何抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段包含起源于或源自于至少2種不同抗體的氨基酸殘基，所述至少2種不同抗體可以來自相同或不同的物種。典型地在本文中，嵌合抗體組合了嚙齒動(dòng)物或兔的可變區(qū)與人恒定區(qū)，以便產(chǎn)生主要具有人結(jié)構(gòu)域的抗體。此類嵌合抗體的產(chǎn)生在本領(lǐng)域中是熟知的，并且可以通過標(biāo)準(zhǔn)手段(如例如在美國專利號5，624，659中所述，所述專利以引用的方式整體并入本文)來實(shí)現(xiàn)。進(jìn)一步涵蓋的是，本發(fā)明的嵌合抗體的人恒定區(qū)可以選自 IgGU IgG2、IgG3、IgG4、IgG5、IgG6、IgG7、IgG8、IgG9、IgGlO、IgGlU IgG12、IgG13、IgG14、IgG15、IgG16、IgG17、IgG18 或 IgG19 恒定區(qū)。
[0171]根據(jù)本發(fā)明的人源化抗體典型地經(jīng)過工程改造以含有甚至更類似于人的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，并且可以僅并有動(dòng)物源性抗體的(所有或大部分)互補(bǔ)決定區(qū)，然而，還可以存在來自動(dòng)物源性抗體的一個(gè)或多個(gè)框架殘基。優(yōu)選的是，將這種情況減至最少以避免免疫原性。這可以通過仔細(xì)檢查單克隆抗體的可變區(qū)的高變環(huán)的序列，并且使它們與人抗體鏈的結(jié)構(gòu)相配合來實(shí)現(xiàn)。雖然所述方法在表面上是復(fù)雜的，但所述方法實(shí)際上卻是簡單的。參見，例如美國專利號6，187，287，所述專利以引用的方式完全并入本文。在一些情況下，可以在人源化抗體中改變動(dòng)物源性抗體的一個(gè)或多個(gè)CDR殘基，例如，條件是取代的殘基在人抗體中的這個(gè)位置上是極為常見的和/或這種改變不會不利地影響抗原結(jié)合。[0172]除了整個(gè)免疫球蛋白(或它們的重組對應(yīng)物)之外，還可以合成包含表位結(jié)合位點(diǎn)的免疫球蛋白片段(例如，F(xiàn)ab’、F(ab’)2或其它片段)?？梢岳弥亟M免疫球蛋白技術(shù)設(shè)計(jì)“片段”或最小的免疫球蛋白。舉例來說，可以通過合成融合的可變輕鏈區(qū)和可變重鏈區(qū)來產(chǎn)生用于本發(fā)明中的“Fv”免疫球蛋白。抗體的組合也是相關(guān)的，例如雙功能抗體(diabody),所述雙功能抗體包含兩種相異的Fv特異性。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，免疫球蛋白片段涵蓋了 SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、以及IgNAR。
[0173]可以對免疫球蛋白和其片段進(jìn)行翻譯后修飾，例如以便添加效應(yīng)部分，如化學(xué)連接子、可檢測的部分(如熒光染料、酶、毒素、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)、化學(xué)發(fā)光部分等)或特異性結(jié)合部分(如鏈霉親和素、抗生物素蛋白或生物素)，并且類似的效應(yīng)部分可以被用在本發(fā)明的方法和組合物中。以下提供了另外的效應(yīng)分子的實(shí)例。
[0174]如果根據(jù)遺傳密碼翻譯多核苷酸序列會產(chǎn)生多肽序列(即，多核苷酸序列“編碼”多肽序列)，那么所述多核苷酸序列“對應(yīng)”于所述多肽序列，如果兩個(gè)多核苷酸序列編碼相同的多肽序列，那么這兩個(gè)多核苷酸序列中的一個(gè)多核苷酸序列“對應(yīng)”于另一個(gè)多核苷酸序列。
[0175]DNA構(gòu)建體的“異源”區(qū)域或結(jié)構(gòu)域是更大的DNA分子內(nèi)可鑒定的DNA區(qū)段，所述區(qū)段在自然界中不與所述更大的分子結(jié)合存在。因此，當(dāng)異源區(qū)域編碼哺乳動(dòng)物基因時(shí)，所述基因通常將由原始生物體的基因組中不側(cè)接于哺乳動(dòng)物基因組DNA的DNA所側(cè)接。異源區(qū)域的另一個(gè)實(shí)例是編碼序列本身不存在于自然界中的構(gòu)建體(例如，基因組編碼序列含有內(nèi)含子的cDNA或具有不同于天然基因的密碼子的合成序列)。等位基因變異或天然存在的突變事件不會產(chǎn)生本文所定義的DNA的異源區(qū)域。
[0176]“編碼序列”是密碼子的框內(nèi)序列，所述序列(從遺傳密碼的觀點(diǎn)來看)對應(yīng)于或編碼蛋白質(zhì)或肽序列。如果兩個(gè)編碼序列或它們的互補(bǔ)序列編碼相同的氨基酸序列，那么這兩個(gè)編碼序列彼此對應(yīng)。與適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)序列締合的編碼序列可以被轉(zhuǎn)錄并且翻譯成多肽。多聚腺苷酸化信號和轉(zhuǎn)錄終止序列通常將位于編碼序列的3'端?！皢?dòng)子序列”是能夠結(jié)合細(xì)胞中的RNA聚合酶并且引發(fā)下游(3'方向)編碼序列轉(zhuǎn)錄的DNA調(diào)節(jié)區(qū)。啟動(dòng)子序列典型地含有用于結(jié)合調(diào)節(jié)分子(例如，轉(zhuǎn)錄因子)的另外位點(diǎn)，所述調(diào)節(jié)分子影響編碼序列的轉(zhuǎn)錄。當(dāng)在細(xì)胞中RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)子序列并且將編碼序列轉(zhuǎn)錄成mRNA，然后所述mRNA繼而被翻譯成由編碼序列編碼的蛋白質(zhì)時(shí)，所述編碼序列在啟動(dòng)子序列的“控制之下”或與啟動(dòng)子“可操作地連接”。
[0177]載體被用來將外來物質(zhì)(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))引入至生物體或宿主細(xì)胞中。典型的載體包括重組病毒(用于多核苷酸)和脂質(zhì)體(用于多肽)?！癉NA載體”是復(fù)制子，如質(zhì)粒、噬菌體或粘粒，所述復(fù)制子可以與另一個(gè)多核苷酸區(qū)段連接以便使得所連接的區(qū)段進(jìn)行復(fù)制?！氨磉_(dá)載體”是DNA載體，所述DNA載體含有將引導(dǎo)由適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞進(jìn)行多肽合成的調(diào)節(jié)序列。這通常意指結(jié)合RNA聚合酶并且引發(fā)mRNA轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子、以及引導(dǎo)所述mRNA翻譯成一種或多種多肽的核糖體結(jié)合位點(diǎn)和起始信號。在適當(dāng)?shù)奈稽c(diǎn)上并且在正確的閱讀框架中將多核苷酸序列并入表達(dá)載體中，接著通過載體轉(zhuǎn)化適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞，能夠使由所述多核苷酸序列編碼的多肽產(chǎn)生。
[0178]多核苷酸序列的“擴(kuò)增”是在體外產(chǎn)生特定核酸序列的多個(gè)拷貝。經(jīng)過擴(kuò)增的序列通常呈DNA的形式。 用于進(jìn)行這種擴(kuò)增的多種技術(shù)描述在Van Brunt的綜述文章(1990, Bio/Technol.,8(4):291-294)中。聚合酶鏈反應(yīng)或PCR是核酸擴(kuò)增的典型，并且PCR在本文中的用途應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為示例了其它適合的擴(kuò)增技術(shù)。
[0179]如今完全了解了脊椎動(dòng)物中的抗體的一般結(jié)構(gòu)(Edelman, G.M.，Ann.N.Y.Acad.Sc1.，190:5(1971))。抗體由兩條相同的分子量為約23，000道爾頓的輕多肽鏈(“輕鏈”)和兩條相同的分子量為53，000-70，000的重鏈(“重鏈”)組成。這四條鏈由二硫鍵連接成“Y”構(gòu)型，其中輕鏈承托起始于“Y”構(gòu)型的開口處的重鏈。“Y”構(gòu)型的“分支”部分被指定為Fab區(qū)；“Y”構(gòu)型的主干部分被指定為F。區(qū)。氨基酸序列定向是從“Y”構(gòu)型頂部處的N端到每條鏈底部處的C端。N端具有可變區(qū)，所述可變區(qū)對誘出它的抗原具有特異性，并且所述N端的長度是約100個(gè)氨基酸，在輕鏈與重鏈之間以及在抗體之間存在略微不同。
[0180]在每條鏈中可變區(qū)與恒定區(qū)連接，所述恒定區(qū)延伸鏈的剩余長度并且在抗體的特定類別內(nèi)不會隨著抗體的特異性(即，誘出它的抗原)而變化。存在五個(gè)已知的主要恒定區(qū)類別，所述恒定區(qū)類別決定了免疫球蛋白分子的類別(對應(yīng)于Y、U、α、δ、以及 ε ( (gamma)、μ (mu)、α (alpha)、δ (delta)或 ε (epsilon))重鏈恒定區(qū)的 IgG、IgM、IgA、IgD以及IgE)。恒定區(qū)或類別決定了后續(xù)的抗體效應(yīng)功能，所述功能包括補(bǔ)體活化(Kabat, E.A., Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry,第二版，第 413-436 頁,Holt, Rinehart, Winston (1976)),和其它細(xì)胞反應(yīng)(Andrews, D.W.等，Clinical Immunobiology,第 1-18 頁，W.B.Sanders (1980) ；Kohl, S.等，Immunology, 48:187(1983));而可變區(qū)決定了將與它反應(yīng)的抗原。輕鏈被分類為K (kappa)或λ (lambda)。每種重鏈類別可以與κ或λ輕鏈一起制備。當(dāng)通過雜交瘤或通過B細(xì)胞來產(chǎn)生免疫球蛋白時(shí)，輕鏈與重鏈彼此共價(jià)鍵合，并且兩條重鏈的“尾”部分由共價(jià)二硫鍵彼此鍵合。
[0181]措辭“可變區(qū)”或“VR”是指抗體中每對輕鏈與重鏈內(nèi)直接參與抗體與抗原結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。每條重鏈在一端上具有可變域(Vh)，接著是多個(gè)恒定域。每條輕鏈在一端上具有可變域(')，并且在它的另一端上具有恒定域；輕鏈的恒定域與重鏈的第一恒定域?qū)?zhǔn)，并且輕鏈可變域與重鏈的可變域 對準(zhǔn)。
[0182]措辭“互補(bǔ)決定區(qū)”、“高變區(qū)”或“CDR”是指存在于抗體的輕鏈或重鏈的可變區(qū)中的一個(gè)或多個(gè)高變區(qū)或互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)(參見Kabat, Ε.Α.等，Sequences of Proteins ofImmunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md.，(1987))。這些措辭包括由 Kabat 等(“Sequences of Proteins of Immunological Interest, jKabatE.等，US Dept, of Health and Human Services, 1983)所定義的高變區(qū)或在抗體三維結(jié)構(gòu)中的高變環(huán)(Chothia和Lesk, J Mol.Biol.196901-917(1987))。每條鏈中的CDR由框架區(qū)而保持緊密靠近，并且與其它鏈中的CDR—起促成抗原結(jié)合位點(diǎn)的形成。在CDR內(nèi)存在被描述為選擇性決定區(qū)(SDR)的選擇氨基酸，所述選擇性決定區(qū)表示在抗體-抗原相互作用中由 CDR 使用的關(guān)鍵接觸殘基(Kashmiri, S.，Methods, 36:25-34 (2005))。
[0183]措辭“框架區(qū)”或“FR”是指抗體輕鏈和重鏈的可變區(qū)內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)框架區(qū)(參見 Kabat, Ε.A.等，Sequences of Proteins of Immunological Interest, NationalInstitutes of Health, Bethesda, Md.，(1987))。這些措辭包括穿插在抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)內(nèi)的CDR之間的那些氨基酸序列區(qū)。
[0184]抗NGF抗體和其對NGF具有結(jié)合活性的結(jié)合片段[0185]杭體Abl
[0186]在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了抗體Abl或其片段或與Abl結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段、以及其單獨(dú)或與另一種活性劑(例如NSAID或阿片類鎮(zhèn)痛劑或另一種生物制劑)聯(lián)合用于治療或預(yù)防疼痛或痛覺缺失的用途，其中所述抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合和/或抑制或預(yù)防疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括嵌合抗體，所述嵌合抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的可變輕鏈序列:ALVMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASQNIYSNLAWYQQRPGQRPKLLIYGASNLDAGVPSRFRGSGSGTEYTLTISDLECDDVGTYYCQSAFDSDSTENTFGGGTEVWKR(SEQ ID NO:1)?
[0187]本發(fā)明還包括嵌合抗體，所述嵌合抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的輕鏈序列:ALVMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASQNIYSNLAWYQQRPGQRPKLLIYGASNLDAGVPSRFRGSGSGTEYTLTISDLECDDVGTYYCQSAFDSDSTENTFGGGTEVWKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:2)。
[0188]本發(fā)明進(jìn)一步包括嵌合抗體，所述嵌合抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的可變重鏈序列:QSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYAMSWVRQAPGKGLEWIGVITSIGSTVYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGYDDYDEMTYFNIWGQGTLVTVSS(SEQID NO:3)。
[0189]本發(fā)明還包括嵌合抗體，所述嵌合抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的重鏈序列:QSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYAMSWVRQAPGKGLEWIGVITSIGSTVYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGYDDYDEMTYFNIWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCP PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:4)。
[0190]本發(fā)明進(jìn)一步涵蓋了如下的抗體，所述抗體包含:多肽序列SEQ ID NO:5, SEQ IDN0:6、以及SEQ ID NO:7中的一個(gè)或多個(gè)，所述多肽序列對應(yīng)于可變輕鏈序列SEQ ID NO:1或輕鏈序列SEQ ID NO:2的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR或高變區(qū))；和/或多肽序列SEQ ID N0:8、SEQID N0:9、以及SEQ ID NO: 10中的一個(gè)或多個(gè)，所述多肽序列對應(yīng)于可變重鏈序列SEQ IDN0:3或重鏈序列SEQ ID N0:4的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR或高變區(qū))；或這些多肽序列的組合。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其片段包含或者其組成為以上所闡述的CDR、可變重鏈序列和可變輕鏈序列、以及重鏈序列和輕鏈序列中的一個(gè)或多個(gè)的組合，包括它們所有在內(nèi)。
[0191]本發(fā)明還涵蓋了對NGF具有結(jié)合特異性的抗體片段。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體片段包含或者其組成為多肽序列SEQ ID N0:1或SEQ ID N0:2。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體片段包含或者其組成為多肽序列SEQ ID N0:3或SEQID N0:4。
[0192]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，對NGF具有結(jié)合特異性的抗體片段包含或者其組成為多肽序列SEQ ID NO:5,SEQ ID N0:6、以及SEQ ID NO:7中的一個(gè)或多個(gè)，所述多肽序列對應(yīng)于可變輕鏈序列SEQ ID NO:1或輕鏈序列SEQ ID NO: 2的互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R或高變區(qū))。
[0193]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，對NGF具有結(jié)合特異性的抗體片段包含或者其組成為多肽序列SEQ ID NO:8, SEQ ID N0:9、以及SEQ ID NO: 10中的一個(gè)或多個(gè)，所述多肽序列對應(yīng)于可變重鏈序列SEQ ID N0:3或重鏈序列SEQ ID N0:4的互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R或高變區(qū))。
[0194]本發(fā)明還涵蓋了抗體片段，所述抗體片段包括本文所述的抗體片段中的一個(gè)或多個(gè)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，對NGF具有結(jié)合特異性的抗體片段包含或者其組成為下列抗體片段中的一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或更多個(gè)(包括所有在內(nèi)):SEQ ID NO:1的可變輕鏈區(qū)、SEQ ID NO: 3的可變重鏈區(qū)、SEQ ID NO:1的可變輕鏈區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)(SEQ ID NO: 5、SEQID N0:6、以及SEQ ID N0:7)、以及SEQ ID NO:3的可變重鏈區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)(SEQ ID N0:8、SEQ ID NO:9、以及 SEQ ID NO: 10)。
[0195]在本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，嵌合抗NGF抗體是Ab I，所述抗體包含或者其組成為SEQ ID N0:2和SEQ ID N0:4，并且具有本文所闡述的生物活性中的至少一種。
[0196]在本發(fā)明的另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗體片段包含或者其組成為本文所述的對NGF具有結(jié)合特異性的Fab (抗原結(jié)合片段)片段或MetMab樣單價(jià)劑。對于抗體Abl，所述Fab片段包括可變輕鏈序列SEQ ID NO:1和可變重鏈序列SEQ ID NO: 3。本發(fā)明的這個(gè)實(shí)施方案進(jìn)一步涵蓋了所述Fab中SEQ ID N0:1和/或SEQ ID N0:3的添加、缺失以及變體，同時(shí)保留對NGF的結(jié)合特異性。
[0197]在本文(以下)所描述的本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，F(xiàn)ab片段可以通過對Abl進(jìn)行酶消化(例如，木瓜蛋白酶)而產(chǎn)生。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗NGF抗體(如Abl或其Fab片段)可以經(jīng)由在以下各項(xiàng)中表達(dá)而產(chǎn)生:哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如CHO、NSO或HEK293細(xì)胞；真菌系統(tǒng)、昆蟲系統(tǒng)、植物系統(tǒng)、動(dòng)物系統(tǒng)或微生物系統(tǒng)，如細(xì)菌細(xì)胞或酵母細(xì)胞(例如二倍體酵母，如二倍體畢赤酵母)以及其它酵母菌株。適合的畢赤酵母菌種包括但不限于巴斯德畢赤酵母。
[0198]杭體 Ab2
[0199]在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了抗體Ab2或其片段或與Ab2結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段、以及其單獨(dú)或與另一種活性劑(例如NSAID或阿片類鎮(zhèn)痛劑或另一種生物制劑)聯(lián)合用于治療或預(yù)防疼痛或痛覺缺失的用途，其中所述抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且還抑制NGF與p75締合和/或抑制或預(yù)防疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括嵌合或人源化抗體，所述嵌合或人源化抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的可變輕鏈序列:DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQASQNIYSNLAWYQQKPGKAPKLLIYGASNLDAGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPDDFATYYCQSAFDSDSTENTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO:11).
[0200]本發(fā)明還包括嵌合或人源化抗體，所述嵌合或人源化抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的輕鏈序列:DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQASQNIYSNLAWYQQKPGKAPKLLIYGASNLDA GVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPDDFATYYCQSAFDSDSTENTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:12)。[0201]本發(fā)明進(jìn)一步包括嵌合或人源化抗體，所述嵌合或人源化抗體對NGF具有結(jié)合特異性并且具有包含以下所闡述的序列的可變重鏈序列:
【權(quán)利要求】
1.一種抗人NGF抗體或抗體片段，所述抗人NGF抗體或抗體片段與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上一個(gè)或多個(gè)相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上一個(gè)或多個(gè)相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
2.如權(quán)利要求1所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段與Ab3、Ab4、Abl5或Abl6特異性地結(jié)合完整人NGF多肽或其片段上一個(gè)或多個(gè)相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整人NGF多肽或其片段上一個(gè)或多個(gè)相同或重疊的表位。
3.如權(quán)利要求1所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整人NGF多肽或其片段上一個(gè)或多個(gè)相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
4.如權(quán)利要求1所述的抗體片段，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
5.如權(quán)利要求4所述的抗體片段，其中所述片段是Fab片段。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述Vh多肽與選自以下序列的序列具有至少90%同一性:SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ IDNO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93,SEQ ID NO:103,SEQ ID NO:113,SEQ IDNO:123,SEQ ID NO:133,SEQ ID NO:143,SEQ ID NO:153,SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:173、SEQ ID NO: 183,SEQ ID NO:193或SEQ ID NO:402 ;和/或'多肽序列，所述'多肽序列與選自以下的序列具有至少 90% 同一性:SEQ ID NO:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ IDN0:3USEQ ID NO:41,SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ IDN0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID N0:151、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191或SEQ IDN0:401。`
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述VhS肽與選自以下序列的序列具有至少95%同一性:SEQ ID NO:3,SEQID NO:13、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQID NO:93,SEQ ID NO:103,SEQ ID NO:113,SEQ ID NO:123,SEQ ID NO:133,SEQ ID NO:163、SEQ ID NO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID N0:193 或 SEQ ID NO:402 ;和/或八多肽序列，所述Vl多肽序列與選自以下的序列具有至少95%同一性:SEQ ID NO: USEQ ID NO:1USEQ IDN0:2USEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ ID N0:9USEQ IDNO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID N0:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述Vh多肽與選自以下序列的序列一致:SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID N0:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID NO: 193或SEQ ID N0:402 ;和/或Vl多肽序列，所述Vl多肽序列與選自以下的序列相同:SEQ ID NO:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQID N0:61、SEQ ID NO:71, SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181、SEQ IDNO:191 或 SEQ ID NO:401。
9.如權(quán)利要求5所述的Fab片段，所述Fab片段包含可變輕鏈，所述可變輕鏈包含CDRl序列 SEQ ID N0:55、CDR2 序列 SEQ ID NO:56 以及 CDR3 序列 SEQ ID NO:57 ;和 / 或可變重鏈，所述可變重鏈包含CDRl序列SEQ ID NO: 58、CDR2序列SEQ ID NO: 59以及CDR3序列SEQ ID NO:60。
10.如權(quán)利要求1所述的抗人NGF抗體，所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與選自以下的抗人NGF抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
11.如權(quán)利要求2所述的抗人NGF抗體，所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與Ab3、Ab4、Abl5或Abl6中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)。
12.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF 抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21，或如果不相同，那么所述 CDR 中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
13.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或抗體片段，所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的VH多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3, SEQ IDNO:13、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:153,SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:173,SEQ ID NO:183,SEQ ID NO:193或SEQ IDN0:402 ;和/或選自以下的VL多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO: 1、SEQID NO:1USEQ ID N0:2USEQ ID N0:3USEQ ID NO:41,SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQID N0:71、SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
14.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段是非糖基化的。
15.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體，所述抗人NGF抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
16.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
17.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
18.如權(quán)利要求17所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段特異性地結(jié)合NGF，所述NGF表達(dá)在患有與結(jié)合NGF的細(xì)胞相關(guān)的疾病的患者體內(nèi)的人細(xì)胞上或由所述人細(xì)胞表達(dá)。
19.如權(quán)利要求18所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述疾病是炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
20.如權(quán)利要求19所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述疾病選自癌癥疼痛或神經(jīng)痛。
21.如權(quán)利要求19所述的抗人NGF抗體或片段，其中所述疾病是癌癥疼痛。
22.如權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或片段，所述抗人NGF抗體或片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
23.一種核酸序列，所述核酸序列引起根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗人NGF抗體或抗體片段表達(dá)。
24.如權(quán)利要求23所述的核酸序列，所述核酸序列包含酵母或人優(yōu)選的密碼子。
25.—種載體，所述載體包含根據(jù)權(quán)利要求23或24所述的核酸序列。
26.如權(quán)利要求25所述的載體，所述載體是質(zhì)?；蛑亟M病毒載體。
27.一種重組細(xì)胞，所述重組細(xì)胞表達(dá)根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗體或抗體片段。
28.如權(quán)利要求27所述的細(xì)胞，所述細(xì)胞選自哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞、真菌細(xì)胞、植物細(xì)胞或昆蟲細(xì)胞。
29.如權(quán)利要求28所述的細(xì)胞，所述細(xì)胞是酵母細(xì)胞。
30.如權(quán)利要求29所述的細(xì)胞，所述細(xì)胞是二倍體酵母細(xì)胞。
31.如權(quán)利要求30所述的酵母細(xì)胞，所述酵母細(xì)胞是畢赤酵母(Pichia)。
32.—種治療方法，所述方法包括對患有與表達(dá)NGF的細(xì)胞相關(guān)的疾病或病狀的患者施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的至少一種抗人NGF抗體或片段。
33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述疾病選自炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
34.如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述疾病或病狀是癌癥疼痛或神經(jīng)痛。
35.如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述治療進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
36.一種檢測表達(dá)NGF的細(xì)胞的存在的體內(nèi)成像方法，所述方法包括施用診斷有效量的根據(jù)權(quán)利要求1所述的至少一種抗人NGF抗體。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中所述施用進(jìn)一步包括施用有助于檢測表達(dá)NGF的疾病部位處的所述抗體的放射性核素或熒光團(tuán)。
38.如權(quán)利要求36所述的方法，其中使用所述結(jié)果來促成適當(dāng)治療方案的設(shè)計(jì)。
39.一種分離的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含Vh多肽序列，所述Vh多肽序列選自:SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:33,SEQ ID NO:43,SEQ ID NO:53,SEQID NO:63,SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183或SEQ ID NO: 193或SEQ ID NO:402中的全長重鏈多肽或其變體；并且進(jìn)一步包含Vl多肽序列，所述Vl多肽序列選自:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 11、SEQ IDNO:2USEQ ID NO:3USEQ ID NO:41,SEQ ID NO:5USEQ ID NO:6USEQ ID NO:7USEQ IDNO:81、 SEQ ID NO:91、 SEQ ID NO:101、 SEQ ID NO:111、 SEQ ID NO:121、 SEQ ID NO:131、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 181 或 SEQID NO:191或SEQ ID NO:401中的全長輕鏈多肽或其變體，其中所述Vh或'或所述全長重鏈多肽或輕鏈多肽中的框架殘基或CDR殘基(FR殘基)中的一個(gè)或多個(gè)已被另一個(gè)氨基酸殘基取代，從而產(chǎn)生特異性地結(jié)合NGF的抗NGF抗體。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分離的抗體，其中所述FR殘基中的一個(gè)或多個(gè)被親本兔抗NGF抗體中的相應(yīng)位點(diǎn)上所存在的氨基酸取代或通過保守性氨基酸取代而被取代，所述分離的抗體中所含的所述％和/或'多肽中所含的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)源自于所述親本兔抗NGF抗體。
41.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分離的抗體，其中所述分離的抗體中所含的所述V1^P/或'多肽是人源化的。
42.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分離的抗體，所述抗體含有所述Vh和/或\多肽或其變體之一，其中所述抗體是嵌合的。
43.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分離的抗體，所述抗體含有所述Vh和/或\多肽或其變體之一，所述分離的抗體包括單鏈抗體。
44.根據(jù)權(quán)利要求42所述的分離的嵌合抗體，其中所述嵌合抗體包含人F。。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的分離的嵌合抗體，其中所述分離的嵌合抗體中所含的所述人 F。源自于 IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgG5、IgG6、IgG7、IgG8、IgG9、IgGlO、IgGlU IgG12、IgG13、IgG14、IgG15、IgG16、IgG17、IgG18 或 IgG19。
46.根據(jù)權(quán)利要求39至45中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體抑制NGF與p75和/或TrkA和/或其多聚體締合。
47.一種分離的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含與如權(quán)利要求39所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大同源性的多肽序列。
48.一種分離的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含與如權(quán)利要求39所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少95%或更大同源性的多肽序列。
49.根據(jù)權(quán)利要求45所述的分離的抗體，其中所述抗體以小于或等于10_4S'5X IO-V5 X IO-6S^15 X IO^V IO-7S-1 的解離速率(Koff)結(jié)合至 NGF。
50.根據(jù)權(quán)利要求39至45中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體抑制NGF與TrkA和/或其多聚體締合。
51.一種根據(jù)權(quán)利要求39至50中任一項(xiàng)所述的抗體的片段，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F (ab’)2片段。
52.根據(jù)權(quán)利要求39至51中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的分離的抗體，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的分離的抗體，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
55.根據(jù)權(quán)利要求53所述的分離的抗體，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
56.—種改善或減少與NGF相關(guān)的疾病或病癥的癥狀的方法，所述方法包括對展現(xiàn)出與NGF相關(guān)的疾病或病癥的癥狀的患者施用治療有效量的如權(quán)利要求39至45中任一項(xiàng)所述的抗體。
57.如權(quán)利要求56所述的方法，其中所述與NGF相關(guān)的疾病或病癥選自炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
58.一種制備根據(jù)權(quán)利要求39至55中任一項(xiàng)所述的抗體的方法，在含有編碼所述抗體的一種或多種異源多核苷酸的重組宿主細(xì)胞或非人轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或植物中制備所述抗體。
59.如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞是細(xì)菌細(xì)胞、真菌細(xì)胞、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、鳥類細(xì)胞或昆蟲細(xì)胞。
60.如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞是多倍體酵母培養(yǎng)物，所述多倍體酵母培養(yǎng)物穩(wěn)定地表達(dá)并且向培`養(yǎng)基中分泌至少10毫克/升至25毫克/升的所述抗體，并且所述方法包括: (i)將至少一種表達(dá)載體引入至單倍體酵母細(xì)胞中，所述表達(dá)載體含有與啟動(dòng)子和信號序列可操作地連接的編碼所述抗體的一種或多種異源多核苷酸； (?)通過交配或原生質(zhì)球融合由所述第一單倍體酵母細(xì)胞和/或第二單倍體酵母細(xì)胞產(chǎn)生多倍體酵母； (iii)對穩(wěn)定表達(dá)所述抗體的多倍體酵母細(xì)胞進(jìn)行選擇；以及 (iv)由所述多倍體酵母細(xì)胞產(chǎn)生穩(wěn)定的多倍體酵母培養(yǎng)物，所述多倍體酵母細(xì)胞向所述培養(yǎng)基中穩(wěn)定地表達(dá)至少10毫克/升至25毫克/升的所述抗體。
61.如權(quán)利要求60所述的方法，其中所述酵母選自下列屬:阿斯眉酵母屬、?？瞬冀湍笇?、固囊酵母屬、德巴利酵母屬、德克酵母屬、假囊酵母屬、伊薩酵母屬、哈薩克斯坦酵母屬、克魯維酵母屬、柯達(dá)酵母屬、路德酵母屬、管囊酵母屬、畢赤酵母屬、酵母屬、土星形酵母屬、特派斯波羅酵母屬、有孢圓酵母屬、擬威爾酵母屬或接合酵母屬。
62.如權(quán)利要求61所述的方法，其中所述酵母屬是畢赤酵母屬。
63.如權(quán)利要求62所述的方法,其中畢赤酵母屬的菌種選自巴斯德畢赤酵母、甲醇畢赤酵母或多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母)。
64.—種分離的多核苷酸,所述多核苷酸包含編碼選自以下的抗NGFVh抗體氨基酸序列或編碼其變體的多核苷酸:SEQ ID NO:3, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO:23, SEQ ID N0:33、SEQ ID NO:43,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID N0:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ IDNO: 153,SEQ ID NO: 163,SEQ ID NO: 173,SEQ ID NO: 183或SEQ ID NO: 193或SEQ ID NO:402中所含的完整重鏈，其中至少一個(gè)框架殘基(FR殘基)已被兔抗NGF抗體Vh多肽中的相應(yīng)位置上存在的氨基酸取代或通過保守性氨基酸取代而被取代。
65.—種載體,所述載體包含根據(jù)權(quán)利要求64所述的分離的多核苷酸序列。
66.—種宿主細(xì)胞，所述宿主細(xì)胞包含根據(jù)權(quán)利要求65所述的載體。
67.如權(quán)利要求66所述的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是屬于畢赤酵母屬的酵母細(xì)胞。
68.如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述異源多核苷酸包含編碼選自以下的抗NGFVl氨基酸序列或編碼任何以下所述序列的變體的多核苷酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO:2USEQ ID NO:3USEQ ID NO:41,SEQ ID NO:51,SEQ ID NO:6USEQ ID NO:71、SEQ ID NO:8U SEQ ID NO:9U SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 121, SEQ IDNO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181或SEQ ID NO: 191或編碼SEQ ID N0:401中的完整輕鏈或編碼任何前述序列的變體的多核苷酸序列，其中至少一個(gè)框架殘基(FR殘基)已被兔抗NGF抗體\多肽中的相應(yīng)位置上存在的氨基酸取代或通過保守性氨基酸取代而被取代。
69.—種分離的多核苷酸,所述多核苷酸包含編碼選自以下的抗NGF Vlj抗體氨基酸序列或編碼其變體的多核苷酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO:21、SEQ IDNO:3USEQ ID NO:41,SEQ ID NO:5USEQ ID NO:6USEQ ID NO:7USEQ ID NO:8USEQ IDNO:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181 或 SEQ ID NO:191 或 SEQID N0:401中所含的完整輕鏈多肽，其中至少一個(gè)框架殘基(FR殘基)已被兔抗NGF抗體'多肽中的相應(yīng)位置上存在的氨基酸取代或通過保守性氨基酸取代而被取代。
70.一種載體，所述載體包含根據(jù)權(quán)利要求60所述的多核苷酸序列。
71.—種宿主細(xì)胞，所述宿主細(xì)胞包含根據(jù)權(quán)利要求70所述的載體。
72.如權(quán)利要求71所述的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是屬于畢赤酵母屬的酵母細(xì)胞。
73.如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述異源多核苷酸包含編碼以下序列中所含的多肽的序列:SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO: 3 ；SEQ ID NO: 11 和 SEQ ID NO: 13 ；SEQ ID NO: 21 和SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:31 和 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID N0:41 和 SEQ ID NO:43 ;SEQ IDNO:51 和 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 SEQ ID NO:63 ；SEQ ID NO:71 和 SEQ ID NO:73 ；SEQ ID NO:81 和 SEQ ID NO:83 ;SEQ ID NO:91 和 SEQ ID NO:93 ;SEQ ID N0:101 和 SEQID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 SEQ ID NO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 SEQ ID NO: 123 ；SEQID NO: 131 和 SEQ ID NO: 133 ；SEQ ID NO: 141 和 SEQ ID NO: 143 ；SEQ ID NO: 151 和 SEQID NO: 153 ；SEQ ID NO: 161 和 SEQ ID NO: 163 ；SEQ ID NO: 171 和 SEQ ID NO: 173 ；SEQ IDNO: 181 和 SEQ ID NO: 183 ；SEQ ID NO: 191 和 SEQ ID NO: 193;或 SEQ ID N0:401 和 SEQ IDNO:402。
74.一種抗NGF抗體，所述抗NGF抗體與由權(quán)利要求73中所述的多核苷酸序列之一編碼的抗體或抗體片段結(jié)合相同或重疊的NGF表位和/或與抗NGF抗體競爭結(jié)合NGF。
75.根據(jù)權(quán)利要求70所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體與選自以下的抗NGF抗體結(jié)合相同或重疊的 NGF 表位:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
76.一種分離的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ ID NO:183 或 SEQ ID NO:193 或 SEQID N0:402中的完整重鏈；和/或選自以下的八多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQID NO:1、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:21,SEQ ID NO:31,SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:51,SEQID N0:61、SEQ ID NO:71, SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ IDNO: 171、SEQ ID NO: 181 或 SEQ ID NO: 191 或 SEQ ID N0:401 中的完整輕鏈。
77.根據(jù)權(quán)利要求74、75或76所述的分離的抗體，其中所述抗體是人源化抗體。
78.根據(jù)權(quán)利要求74、75或76所述的分離的抗體，其中所述抗體是嵌合的。
79.根據(jù)權(quán)利要求78所述的分離的抗體，其中所述嵌合抗體包含人F。。
80.根據(jù)權(quán)利要求74、75或76所述的分離的抗體，所述分離的抗體包括單鏈抗體。
81.根據(jù)權(quán)利要求79所述的分離的抗體，其中所述人F。源自于人IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgG5、IgG6、IgG7、IgG8、IgG9、IgGlO、IgGlU IgG12、IgG13、IgG14、IgG15、IgG16、IgG17、IgG18 或 IgG19。
82.根據(jù)權(quán)利要求74至81中任一項(xiàng)所述的分離的抗體，其中所述抗體與線性或構(gòu)象NGF表位結(jié)合。
83.一種分離的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含與權(quán)利要求76中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大同源性的\或Vh多肽或完整輕鏈或重鏈序列或完整重鏈或輕鏈。
84.根據(jù)權(quán)利要求83所述的抗體，其中所述抗體以小于或等于K^S'SXIOH、IO-5S-1AX ΙΟ?'ΙΟ?'δΧ 10-?-1 或 ΙΟΙ1 的解離速率(koff)結(jié)合至 NGF。
85.如權(quán)利要求74至83中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體抑制NGF與TrkA和/或其多聚體締合。
86.一種根據(jù)權(quán)利要求74至83中任一項(xiàng)所述的抗體的片段，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F (ab’)2片段。
87.根據(jù)權(quán)利要求74至86中任一項(xiàng)所述的抗體或片段，其中所述抗體進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
88.根據(jù)權(quán)利要求87所述的抗體，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
89.如權(quán)利要求88所述的抗體，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
90.如權(quán)利要求89所述的抗體，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
91.一種改善或減少與NGF相關(guān)的疾病或病癥的癥狀的方法，所述方法包括對展現(xiàn)出與NGF相關(guān)的疾病或病癥的癥狀的患者施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求74至90中任一項(xiàng)所述的抗體。
92.如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述與NGF相關(guān)的疾病或病癥選自炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
93.一種在多倍體酵母培養(yǎng)物中制備如權(quán)利要求74至90中任一項(xiàng)所述的抗體的方法，所述多倍體酵母培養(yǎng)物穩(wěn)定地表達(dá)并且向培養(yǎng)基中分泌至少10毫克/升至25毫克/升的所述抗體，所述方法包括: (i)將至少一種表達(dá)載體引入至單倍體酵母細(xì)胞中，所述表達(dá)載體含有與啟動(dòng)子和信號序列可操作地連接的編碼所述抗體的一種或多種異源多核苷酸； (?)通過交配或原生質(zhì)球融合由所述第一單倍體酵母細(xì)胞和/或第二單倍體酵母細(xì)胞產(chǎn)生多倍體酵母； (iii)選擇穩(wěn)定表達(dá)所述抗體的多倍體酵母細(xì)胞；以及 (iv)由所述多倍體酵母細(xì)胞產(chǎn)生穩(wěn)定的多倍體酵母培養(yǎng)物，所述多倍體酵母細(xì)胞向所述培養(yǎng)基中穩(wěn)定地表達(dá)至少10毫克/升至25毫克/升的所述抗體。
94.如權(quán)利要求93所述的`方法，其中所述酵母選自下列屬:阿斯眉酵母屬、?？瞬冀湍笇佟⒐棠医湍笇?、德巴利酵母屬、德克酵母屬、假囊酵母屬、伊薩酵母屬、哈薩克斯坦酵母屬、克魯維酵母屬、柯達(dá)酵母屬、路德酵母屬、管囊酵母屬、畢赤酵母屬、酵母屬、土星形酵母屬、特派斯波羅酵母屬、有孢圓酵母屬、擬威爾酵母屬或接合酵母屬。
95.如權(quán)利要求94所述的方法，其中所述酵母屬是畢赤酵母屬。
96.如權(quán)利要求95所述的方法,其中畢赤酵母屬的菌種選自巴斯德畢赤酵母、甲醇畢赤酵母或多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母)。
97.一種分離的多核苷酸，所述多核苷酸表達(dá)多肽，所述多肽含有源自于抗NGF抗體的至少一個(gè)CDR多肽，其中所述經(jīng)過表達(dá)的多肽單獨(dú)特異性地結(jié)合NGF或在與另一個(gè)多核苷酸序列聯(lián)合表達(dá)時(shí)特異性地結(jié)合NGF，所述另一個(gè)多核苷酸序列表達(dá)含有源自于抗NGF抗體的至少一個(gè)⑶R多肽的多肽，其中所述至少一個(gè)⑶R選自以下\或Vh多肽中所含的⑶R:SEQ ID NO:USEQ ID NO:3,SEQ ID NO:1USEQ ID NO: 13,SEQ ID N0:2USEQ ID NO:23,SEQID N0:3USEQ ID NO:33,SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:43,SEQ ID N0:5USEQ ID NO:53,SEQID N0:6USEQ ID NO:63,SEQ ID N0:7USEQ ID NO:73,SEQ ID N0:8USEQ ID NO:83,SEQID N0:9USEQ ID NO:93,SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO: 103,SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 113、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:141、SEQ IDNO:143,SEQ ID N0:151、SEQ ID NO:153,SEQ ID N0:161、SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:173、SEQ ID NO:181、SEQ ID NO:183、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID NO:193 或 SEQID N0:402或SEQ ID NO:401中的完整重鏈多肽和完整輕鏈多肽中所含的CDR。
98.一種載體，所述載體包含如權(quán)利要求97所述的多核苷酸序列中的至少一個(gè)。
99.一種宿主細(xì)胞，所述宿主細(xì)胞包含根據(jù)權(quán)利要求98所述的載體。
100.如權(quán)利要求99所述的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是屬于畢赤酵母屬的酵母細(xì)胞。
101.如權(quán)利要求93所述的方法，其中所述異源多核苷酸包含編碼選自以下的\或Vh多肽中所含的至少一個(gè)⑶R的多核苷酸序列中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NOiUSEQ ID N0:3、SEQ ID N0:1USEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:21,SEQ ID NO:23,SEQ ID N0:3USEQ ID NO:33、SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:43,SEQ ID N0:5USEQ ID NO:53,SEQ ID N0:6USEQ ID N0:63、SEQ ID NO:71,SEQ ID NO:73,SEQ ID N0:8USEQ ID NO:83,SEQ ID N0:9USEQ ID N0:93、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:121、SEQ IDNO:123,SEQ ID N0:131、SEQ ID NO:133,SEQ ID NO:141,SEQ ID NO:143,SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:173、SEQ IDN0:181、SEQ ID NO: 183,SEQ ID N0:191、SEQ ID NO: 193或SEQ ID N0:402和SEQ ID NO:401中的完整重鏈多肽和完整輕鏈多肽。
102.一種藥物或診斷組合物，所述組合物含有根據(jù)權(quán)利要求1、2或74至90之一所述的至少一種NGF抗體或片段，和藥學(xué)上可接受的載體。
103.根據(jù)權(quán)利要求102所述的藥物或診斷組合物，所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
104.如權(quán)利要求103所述的藥物或診斷組合物，所述藥物或診斷組合物是凍干的。
105.如權(quán)利要求102所述的藥物或診斷組合物,所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21或嵌合或人源化抗體或由其衍生的片段。
106.一種治療NGF相關(guān)疾病的方法，所述方法包括施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求102至105之一所述的藥物組合物。
107.如權(quán)利要求106所述的方法，其中所述疾病選自炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
108.如權(quán)利要求107所述的方法，其中所述疾病是癌癥疼痛或神經(jīng)痛。
109.一種檢測表達(dá)NGF的細(xì)胞的存在的體內(nèi)成像方法，所述方法包括施用診斷有效量的根據(jù)權(quán)利要求102至105中任一項(xiàng)所述的診斷組合物。
110.如權(quán)利要求109所述的方法，所述方法被用作用于以下疾病的有效治療方案設(shè)計(jì)的計(jì)劃性方案的一部分:炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
111.如權(quán)利要求110所述的方法，其中所述治療方案包括以下各項(xiàng)中的一種或多種:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
112.如權(quán)利要求111所述的方法，其中所述抗體包含根據(jù)權(quán)利要求1、2或72至80之一所述的抗NGF抗體或片段。
113.如權(quán)利要求80所述的抗體，其中所述單鏈抗體選自scFv、駱騎抗體、納米抗體、IgNAR.SMIP、MetMab樣單價(jià)劑或其組合、截短形式或修飾。
114.一種抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段對NGF具有結(jié)合特異性并且包含選自以下的可變輕鏈⑶R1、⑶R2、以及⑶R3多肽序列和可變重鏈⑶R1、⑶R2、以及⑶R3多肽序列:
115.如權(quán)利要求114所述的抗NGF抗體片段，其中所述抗體片段是scFv、駱駝抗體、納米抗體、MetMab樣單價(jià)劑、IgNAR (源自于S魚的單鏈抗體)、Fab、Fab’或F (ab’) 2片段。
116.如權(quán)利要求114所述的抗NGF抗體片段，其中所述抗體片段是Fab片段。
117.根據(jù)權(quán)利要求116所述的Fab抗體片段，所述Fab抗體片段選自Fabl或Fab2。
118.根據(jù)權(quán)利要求114所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段包含選自以下的可變輕鏈多肽序列和可變重鏈多肽序列:

119.根據(jù)權(quán)利要求114所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段包含選自以下的輕鏈多肽序列和重鏈多肽序列:_
120.根據(jù)權(quán)利要求110所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述可變輕鏈和可變重鏈多肽序列各自分別與所述可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO: K SEQ ID N0:1U SEQ ID N0:2USEQ ID N0:3USEQ ID N0:4USEQ ID N0:5USEQ ID NO:61,SEQ ID N0:7USEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO: 111、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 131、SEQ IDNO: 141、SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 181 以及 SEQ IDNO: 191 之一和所述可變重鏈多肽序列 SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 23、SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO: 153,SEQ ID NO: 163,SEQ ID NO: 173,SEQ ID NO: 183 以及 SEQ ID NO: 193 之一具有至少90%同一性。
121.根據(jù)權(quán)利要求114至119中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段是嵌合、人源化或人抗體或抗體片段。
122.根據(jù)權(quán)利要求110至115中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段是非糖基化的。
123.根據(jù)權(quán)利要求114至119中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段包含人恒定域。
124.根據(jù)權(quán)利要求123所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段是IgGU IgG2、IgG3 或 IgG4 抗體。
125.根據(jù)權(quán)利要求114至119中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗人NGF抗體或抗體片段含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用中的至少一種。
126.根據(jù)權(quán)利要求125所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述Fe區(qū)含有改變或消除糖基化作用的突變。
127.根據(jù)權(quán)利要求114至119中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
128.根據(jù)權(quán)利要求114至119中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
129.根據(jù)權(quán)利要求128所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
130.根據(jù)權(quán)利要求129所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
131.根據(jù)權(quán)利要求129所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
132.根據(jù)權(quán)利要求114或118所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述可變輕鏈和可變重鏈多肽序列各自分別與所述可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 11、SEQ IDNO:2USEQ ID NO:31,SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:5USEQ ID NO:6USEQ ID NO:7USEQ IDNO:81、 SEQ ID NO:91、 SEQ ID NO:101、 SEQ ID NO:111、 SEQ ID NO:121、 SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141,SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181或SEQ IDNO: 191 之一和所述可變重鏈多肽序列 SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 23, SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO: 153,SEQ ID NO: 163,SEQ ID NO: 173,SEQ ID NO: 183 或 SEQ ID NO: 193 之一具有至少95%同一性。
133.根據(jù)權(quán)利要求114或118所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述可變輕鏈和可變重鏈多肽序列各自分別與所述可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 11、SEQ IDNO:2USEQ ID NO:3USEQ ID NO:41,SEQ ID NO:5USEQ ID NO:6USEQ ID NO:7USEQ IDNO:81、 SEQ ID NO:91、 SEQ ID NO:101、 SEQ ID NO:111、 SEQ ID NO:121、 SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141,SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181 或SEQ IDNO: 191 之一和所述可變重鏈多肽序列 SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 23, SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:10 3、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO: 153,SEQ ID NO: 163,SEQ ID NO: 173,SEQ ID NO: 183 或 SEQ ID NO: 193 之一具有至少98%同一性。
134.根據(jù)權(quán)利要求118所述的抗NGF抗體或抗體片段，其中所述可變輕鏈和可變重鏈多肽序列各自分別與所述可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO: K SEQ ID N0:1U SEQ ID N0:2USEQ ID N0:31、SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:51,SEQ ID N0:61、SEQ ID N0:71、SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO: 111、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 131、SEQ IDNO:141,SEQ ID N0:151、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID NO:181或SEQ ID NO:191之一和所述可變重鏈多肽序列 SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ ID N0:33、SEQ ID NO:43,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID N0:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ IDNO: 153、SEQ ID NO: 163、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 183 或 SEQ ID NO: 193 之一具有至少99%同一性。
135.—種組合物，所述組合物含有根據(jù)權(quán)利要求114至134中任一項(xiàng)所述的抗NGF抗體或抗體片段。
136.根據(jù)權(quán)利要求135所述的組合物，所述組合物適用于治療性或診斷性用途。
137.根據(jù)權(quán)利要求135所述的組合物，所述組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
138.根據(jù)權(quán)利要求131所述的組合物，所述組合物是凍干的。
139.如權(quán)利要求135、136、137或138所述的組合物，所述組合物適合于靜脈內(nèi)或皮下施用。
140.一種治療患者疼痛的方法，所述方法包括施用有效量的抗NGF Fab抗體片段。
141.如權(quán)利要求140所述的方法，其中所述Fab抗體片段衍生自以下抗體中的任一種:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
142.如權(quán)利要求141所述的方法，其中所述Fab抗體片段是通過對以下抗體中的任一種進(jìn)行木瓜蛋白酶消化而獲得的:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
143.如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述異源多核苷酸包含編碼選自以下的抗NGFVh氨基酸序列的多核苷酸或編碼其變體的多核苷酸:SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 13, SEQ IDNO:23、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ IDN0:83、SEQ ID N0:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO: 113、SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 133、SEQ ID NO:143,SEQ ID NO:153,SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:173,SEQ ID NO:183或SEQ IDNO: 193，其中至少一個(gè)框架殘基(FR殘基)已被兔抗NGF抗體\多肽中的相應(yīng)位置上存在的氨基酸取代或通過保守性氨基酸取代而被取代。`
144.如權(quán)利要求140至142中任一項(xiàng)所述的方法，其中皮下或靜脈內(nèi)施用所述抗體或片段。
145.一種治療個(gè)體的疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，所述方法包括施用有效量的NGF拮抗劑，所述NGF拮抗劑抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。
146.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述NGF拮抗劑是多肽；NGF、TrkA的片段；反義RNA或siRNA ;或抗NGF或抗TrkA抗體或抗體片段。
147.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述NGF拮抗劑是抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75的締合。
148.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗體片段是選自以下的單價(jià)抗體片段:Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
149.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述疼痛是外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，或預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
150.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥所引起:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
151.如權(quán)利要求149所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
152.如權(quán)利要求149所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
153.如權(quán)利要求149所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛和/或熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛和/或熱誘發(fā)性疼痛。
154.如權(quán)利要求149所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
155.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
156.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
157.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
158.如權(quán)利要求157所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
159.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
160.如權(quán)利要求145所述的方法，其中所述施用經(jīng)由顱面粘膜施用來實(shí)現(xiàn)，所述顱面粘膜施用包括鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用或結(jié)膜施用。
161.如權(quán)利要求1 45所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
162.如權(quán)利要求161所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
163.如權(quán)利要求145所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
164.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致。
165.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。
166.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
167.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
168.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
169.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
170.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤所致。
171.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
172.如權(quán)利要求163所述的方法，其中所述骨癌疼痛由從不確定的組織轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
173.如權(quán)利要求145所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
174.如權(quán)利要求145所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
175.如權(quán)利要求174所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
176.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗體是Ab3、Ab4、Abl5或Abl6或其片段。
177.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗體與選自Ab3、Ab4、Abl5或Abl6的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或與選自Ab3、Ab4、Abl5或Abl6的抗人NGF抗體競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位。
178.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗體片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2 片段。
179.如權(quán)利要求178所述的方法，其中所述片段是Fab片段。
180.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗人NGF抗體包含Ab3、Ab4、Abl5或Abl6中所含的可變輕鏈區(qū)之一中的至少2個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(OTR)，并且包含Ab3、Ab4、Abl5或Abl6中所含的可變重鏈區(qū)之一中的至少2個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，其中所述可變重鏈多肽選自從以下序列中選出的序列:SEQ ID NO: 33,SEQ ID NO:43,SEQ ID NO: 143或SEQ ID NO: 153，并且所述可變輕鏈多肽選自:SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:41,SEQ ID N0:141 或SEQ ID NO:151。
181.如權(quán)利要求180所述的方法，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的⑶R相同:Ab3、Ab4、Abl5或Abl6，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至 多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
182.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:43、SEQ ID NO: 143或SEQ ID NO: 153 ;和/或選自以下的Vl多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQ IDNO:31, SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:141 或 SEQ ID NO:151。
183.如權(quán)利要求180至182中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
184.如權(quán)利要求180至182中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
185.如權(quán)利要求178至183中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
186.如權(quán)利要求182所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含\或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述方法中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
187.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
188.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接或與延長半衰期的部分連接。
189.如權(quán)利要求147所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分或水溶性聚合物。
190.如權(quán)利要求189所述的方法，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
191.如權(quán)利要求190所述的方法，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
192.如權(quán)利要求190所述的方法，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
193.如權(quán)利要求145或147所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
194.如權(quán)利要求145至193中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述NGF拮抗劑或抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
195.如權(quán)利要求194所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
196.如權(quán)利要求195所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
197.如權(quán)利要求194所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人NGF抗體:Ab3、Ab4、Abl5或Abl6。
198.如權(quán)利要求194所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是可皮下或靜脈內(nèi)施用的。
199.如權(quán)利要求147所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用另一種抗人NGF抗體或其片段，其中所述另一種抗體抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合，其中所述抗體是 Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21。
200.如權(quán)利要求194或199所述的方法，其中所述抗體是片段:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
201.如權(quán)利要求199所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)的疼痛或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛、預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
202.如權(quán)利要求201所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
203.如權(quán)利要求201所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
204.如權(quán)利要求201所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
205.如權(quán)利要求201所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
206.如權(quán)利要求201所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
207.如權(quán)利要求194或199所述的方法，所述方法治療選自以下的疼痛:與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛、以及神經(jīng)源性疼痛。
208.如權(quán)利要求194或199所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
209.如權(quán)利要求194或199所述的方法，其中所述所治療的疼痛是顱面疼痛或頭痛。
210.如權(quán)利要求209所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
211.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
212.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用經(jīng)由顱面粘膜施用或經(jīng)由皮下或靜脈內(nèi)施用來實(shí)現(xiàn)，所述顱面粘膜施用包括鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用或結(jié)膜施用。
213.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
214.如權(quán)利要求213所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
215.如權(quán)利要求213所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
216.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致。
217.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。`
218.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
219.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
220.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
221.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
222.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤或已從未知起源轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
223.如權(quán)利要求215所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
224.如前述權(quán)利要求145至223中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
225.如前述權(quán)利要求145至224中任一項(xiàng)所述的方法，其中經(jīng)由鼻內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮下施用來施用所述抗體。
226.如前述權(quán)利要求145至224中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
227.如權(quán)利要求226所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
228.如前述權(quán)利要求145至224中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的線性或構(gòu)象表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的線性或構(gòu)象表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
229.如權(quán)利要求228所述的方法，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
230.如權(quán)利要求229所述的方法，其中所述片段是Fab片段。
231.如權(quán)利要求54所述的方法，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
232.如權(quán)利要求231所述的方法，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
233.如權(quán)利要求231所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中 的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID NO:193或SEQ ID NO:402 ;和/或選自以下的'多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191 或SEQ IDN0:401。
234.如權(quán)利要求230至233中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
235.如權(quán)利要求230至234中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
236.如權(quán)利要求230至235中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
237.如權(quán)利要求230至236中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含 '或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述方法中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
238.如權(quán)利要求230至236中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
239.如權(quán)利要求230至238中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
240.如權(quán)利要求230至239中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
241.如權(quán)利要求240所述的方法，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
242.如權(quán)利要求241所述的方法，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
243.如權(quán)利要求241所述的方法，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
244.如權(quán)利要求145至243中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:鎮(zhèn)痛劑、抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
245.如權(quán)利要求199至244中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
246.如權(quán)利要求245所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
247.如權(quán)利要求246所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
248.如權(quán)利要求246或247所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
249.治療有效量的NGF拮抗劑的用途，所述治療有效量的NGF拮抗劑用于制備治療疼痛的藥劑，其中所述NGF拮抗劑抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。
250.如權(quán)利要求249所述的用途，其中所述NGF拮抗劑是多肽；小分子；NGF、TrkA的片段；反義RNA或siRNA ;或抗NGF或抗TrkA的抗體或抗體片段。
251.如權(quán)利要求249所述的用途，其中所述NGF拮抗劑是抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段抑制NGF與TrkA締合而不明顯抑制NGF與p75締合。
252.如權(quán)利要求251所述的用途，其中所述抗體是Ab3、Ab4、Abl5或Abl6。
253.如權(quán)利要求152所述的用途，其中所述抗體與選自Ab3、Ab4、Abl5或Abl6的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位。
254.如權(quán)利要求253所述的用途，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
255.如權(quán)利要求254所述的用途，其中所述片段是Fab片段或MetMab樣單價(jià)抗體。
256.如權(quán)利要求253所述的用途，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈(Vh)區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與Ab3、Ab4、Abl5或Abl6中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，其中所述抗人NGF抗體中所含的所述Vh多肽序列選自:SEQ IDNO: 33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO: 143 或 SEQ ID NO: 153，并且所述抗人 NGF 抗體中所含的所述'多肽序列選自:SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:41, SEQ ID N0:141 或 SEQ ID NO:151。
257.如權(quán)利要求256所述的用途，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的⑶R相同:Ab3、Ab4、Abl5或Abl6，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
258.如權(quán)利要求256所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:43、SEQ ID NO: 143或SEQ ID NO: 153 ;和/或選自以下的Vl多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQ IDNO:31, SEQ ID NO:41,SEQ ID NO:141 或 SEQ ID NO:151。
259.如權(quán)利要求249至258中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
260.如權(quán)利要求249至259中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
261.如權(quán)利要求249至260中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
262.如權(quán)利要求249至260中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述NGF拮抗劑是抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段包含與權(quán)利要求258中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大同源性的\或Vh多肽序列。
263.如權(quán)利要求249至262中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述NGF拮抗劑或抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
264.如權(quán)利要求263所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
265.如權(quán)利要求263所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
266.如權(quán)利要求265所述的用途，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
267.如權(quán)利要求266所述的用`途，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
268.如權(quán)利要求266所述的用途，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
269.如權(quán)利要求249至268中任一項(xiàng)所述的用途，所述用途進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
270.如權(quán)利要求249至269中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
271.如權(quán)利要求270所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
272.如權(quán)利要求270所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
273.如權(quán)利要求270所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人NGF抗體:Ab3、Ab4、Abl5或Abl6。
274.治療有效量的除NGF抗體或片段以外的NGF拮抗劑的用途，所述NGF拮抗劑用于制備通過抑制NGF與TrkA締合而不明顯影響NGF與p75締合來治療疼痛的藥劑。
275.治療有效量的抗人NGF抗體或其片段的用途，所述抗人NGF抗體或其片段用于制備通過抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合來治療疼痛的藥劑。
276.如權(quán)利要求275所述的用途，其中所述抗體是Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
277.如權(quán)利要求276所述的用途，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的線性或構(gòu)象表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的線性或構(gòu)象表位:Ab 1、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab 10、Ab 11、Ab 12、Ab 13、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
278.如權(quán)利要求277所述的用途，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
279.如權(quán)利要求278所述的用途，其中所述片段是Fab片段或MetMab樣單價(jià)抗體。
280.如權(quán)利要求277所述的用途，其中所述抗人NGF抗體在可變輕鏈區(qū)和可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
281.如權(quán)利要求277所述的用途，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
282.如權(quán)利要求280所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID NO:193或SEQ ID NO:402 ;和/或選自以下的'多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191 或SEQ IDN0:401。
283.如權(quán)利要求249至283中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
284.如權(quán)利要求249至283中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
285.如權(quán)利要求249至284中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
286.如權(quán)利要求282所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含\或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述用途中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
287.如權(quán)利要求286所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
288.如權(quán)利要求286所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
289.如權(quán)利要求286所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
290.如權(quán)利要求289所述的用途，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
291.如權(quán)利要求289所述的用途，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
292.如權(quán)利要求145所述的用途，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
293.如權(quán)利要求274所述的用途，所述用途進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:鎮(zhèn)痛劑、抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
294.如權(quán)利要求249至294中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
295.如權(quán)利要求294所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
296.如權(quán)利要求294所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
297.如權(quán)利要求294所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
298.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法或用途，其中所述NGF拮抗劑以小于或等于 5 X 10-7Μ、10-7 Μ、5 X 10-8Μ、10-8Μ、5 X 10-9Μ、10-9Μ、5 X I(T10M、I(T10M、5 X 10-ηΜ、10-ηΜ、5Χ 10_12Μ、10_12Μ、5Χ 10_13Μ 或 10-13Μ 的解離常數(shù)(Kd)結(jié)合至 NGF。
299.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法或用途，其中所述NGF拮抗劑以小于或等于5 X IO^10M的解離常數(shù)結(jié)合至NGF。
300.如權(quán)利要求299所述的方法，其中所述NGF拮抗劑是抗NGF抗體或片段。
301.一種治療個(gè)體疼痛的方法，所述方法包括施用治療有效量的對NGF具有結(jié)合特異性的抗人NGF單價(jià)劑，在施用所述單價(jià)劑之后，所述抗人NGF單價(jià)劑大致上不增加患者的炎癥反應(yīng)。
302.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述單價(jià)劑是Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
303.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述單價(jià)劑是Fab抗體片段，所述Fab抗體片段包含可變輕鏈，所述可變輕鏈包含CDRl序列SEQ ID NO:55、CDR2序列SEQ ID NO:56以及CDR3序列SEQ ID NO: 57 ;和/或可變重鏈，所述可變重鏈包含CDRl序列SEQ ID NO: 58,CDR2 序列 SEQ ID NO:59 以及 CDR3 序列 SEQ ID NO:60。
304.如權(quán)利要求301所述的方法,其中所述單價(jià)劑是Fab抗體片段或Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR或類似于MetMab的單價(jià)抗體分子，所述單價(jià)劑衍生自和/或含有以下抗體中的任一種中所含的CDR中的一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或所有六個(gè):Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
305.如權(quán)利要求304所述的方法，其中所述Fab抗體片段是通過對以下抗體中的任一種進(jìn)行木瓜蛋白酶消化而獲得的:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
306.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Ab 1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab 10、Ab 11、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
307.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
308.如權(quán)利要求307所述的方法，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述CDR中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
309.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑包含選自以下的Vh多肽序列中所含的⑶R 中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO:23, SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:153,SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:173,SEQ ID NO:183,SEQ ID NO:193或SEQ IDN0:402;和/或選自以下的Vl多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO: 1、SEQID NO:1USEQ ID N0:2USEQ ID N0:3USEQ ID NO:41,SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQID N0:71、SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
310.如權(quán)利要求306至309中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑是非糖基化的。
311.如權(quán)利要求309所述的方法`，其中所述抗人NGF抗體包含\或Vh多肽序列，所述Vl或Vh多肽序列與權(quán)利要求8中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
312.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
313.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
314.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
315.如權(quán)利要求314所述的方法，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
316.如權(quán)利要求315所述的方法，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
317.如權(quán)利要求315所述的方法，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
318.如權(quán)利要求301所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:鎮(zhèn)痛劑、抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
319.如權(quán)利要求301至309中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF單價(jià)劑包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
320.如權(quán)利要求319所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
321.如權(quán)利要求319所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
322.如權(quán)利要求301至321中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疼痛選自炎癥疼痛、手術(shù)后切口疼痛、復(fù)雜性局部疼痛綜合征、癌癥疼痛、原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質(zhì)疏松性骨折疼痛、由灼傷引起的疼痛、骨質(zhì)疏松癥、痛風(fēng)關(guān)節(jié)疼痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛和其它傷害感受性疼痛、以及肝細(xì)胞癌、乳癌、肝硬化、神經(jīng)源性疼痛、神經(jīng)痛、傷害感受性疼痛、三叉神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛、幻肢痛、纖維肌痛、痛經(jīng)、卵巢痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良、神經(jīng)源性疼痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經(jīng)病、坐骨神經(jīng)痛或偏頭痛。
323.如權(quán)利要求301至321中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疼痛與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，或預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
324.如權(quán)利要求323所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
325.如權(quán)利要求323所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
326.如權(quán)利要求323所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
327.如權(quán)利要求323所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
328.如權(quán)利要求327所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
329.如權(quán)利要求301至321中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
330.如權(quán)利要求301至321中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
331.如權(quán)利要求301至321中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
332.如權(quán)利要求331所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
333.如權(quán)利要求301所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
334.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述施用經(jīng)由顱面粘膜施用、鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用或結(jié)膜施用來實(shí)現(xiàn)。
335.如權(quán)利要求301至334中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述單價(jià)劑經(jīng)過修飾以延長體內(nèi)半衰期。
336.如權(quán)利要求335所述的方法，其中所述修飾包括添加至少一種水溶性聚合物或改變糖基化作用。
337.如權(quán)利要求335所述的方法，其中所述修飾包括將至少一個(gè)聚乙二醇添加至所述單價(jià)劑。
338.治療有效量的對NGF具有結(jié)合特異性的抗人NGF單價(jià)劑的用途，所述抗人NGF單價(jià)劑用于制備治療個(gè)體疼痛的藥劑，在施用之后，所述藥劑大致上不增加所述個(gè)體的炎癥反應(yīng)。
339.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述單價(jià)劑是Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、MetMab樣單價(jià)劑、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR或其一種或多種組八口 ο
340.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述單價(jià)劑是Fab抗體片段，所述Fab抗體片段包含可變輕鏈，所述可變輕鏈包含CDRl序列SEQ ID NO:55、CDR2序列SEQ ID NO:56以及CDR3序列SEQ ID NO:57 ;和/或`可變重鏈，所述可變重鏈包含CDRl序列SEQ ID NO: 58、CDR2 序列 SEQ ID NO:59 以及 CDR3 序列 SEQ ID NO:60。
341.如權(quán)利要求338所述的用途,其中所述單價(jià)劑是Fab抗體片段或Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR或類似于MetMab的單價(jià)抗體分子，所述單價(jià)劑衍生自和/或含有以下抗體中的任一種中所含的CDR中的一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或所有六個(gè):Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
342.如權(quán)利要求341所述的用途，其中所述Fab抗體片段是通過對以下抗體中的任一種進(jìn)行木瓜蛋白酶消化而獲得的:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
343.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的線性或構(gòu)象表位:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
344.如權(quán)利要求343所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
345.如權(quán)利要求344所述的用途，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl5、Abl6、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述CDR中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
346.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑包含選自以下的Vh多肽序列中所含的⑶R 中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO:23, SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ IDNO:93, SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:153,SEQ ID NO:163,SEQ ID NO:173,SEQ ID NO:183,SEQ ID NO:193或SEQ IDN0:402;和/或選自以下的Vl多肽序列中所含的⑶R中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO: 1、SEQID NO:1USEQ ID NO:2USEQ ID NO:3USEQ ID NO:41,SEQ ID NO:5USEQ ID NO:6USEQID NO:71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
347.如權(quán)利要求338至346中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑是非糖基化的。
348.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF抗體包含\或Vh多肽序列，所述Vl或Vh多肽序列與權(quán)利要求8中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
349.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
350.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
351.如權(quán)利要求338所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
352.如權(quán)利要求351所述的用途，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
353.如權(quán)利要求352所述的用途，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
354.如權(quán)利要求352所述的用途，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
355.如權(quán)利要求338所述的用途，所述用途進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
356.如權(quán)利要求338至355中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF單價(jià)劑包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
357.如權(quán)利要求356所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
358.如權(quán)利要求356所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
359.如權(quán)利要求338至358中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述單價(jià)劑經(jīng)過修飾以延長體內(nèi)半衰期。
360.如權(quán)利要求359所述的用途，其中所述修飾包括添加至少一種水溶性聚合物或改變糖基化作用。
361.如權(quán)利要求60所述的用途，其中所述修飾包括將至少一個(gè)聚乙二醇添加至所述單價(jià)劑。
362.如權(quán)利要求356所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物適合于靜脈內(nèi)或皮下或鼻內(nèi)或經(jīng)皮施用。
363.如權(quán)利要求301所述的方法，其中對NGF具有結(jié)合特異性的所述抗人NGF單價(jià)劑阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。
364.如權(quán)利要求301所述的方法，其中對NGF具有結(jié)合特異性的所述抗人NGF單價(jià)劑不明顯阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。
365.如權(quán)利要求338所述的用途，其中對NGF具有結(jié)合特異性的所述抗人NGF單價(jià)劑阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。
366.如權(quán)利要求338所述的用途，其中對NGF具有結(jié)合特異性的所述抗人NGF單價(jià)劑不明顯阻斷或抑制NGF與TrkA和/或p75相互作用。
367.一種治療個(gè)體的疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，所述方法包括施用有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段，其中所述抗NGF抗體選自Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21 或與以上所述抗體中的任一種競爭的抗體或抗體片段和/或與以上所述抗體中的任一種結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段。
368.如權(quán)利要求367所述的治療疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，其中所述抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合。
369.如權(quán)利要求368所述的治療疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，其中所述所施用的抗體或抗體片段是抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合，并且進(jìn)一步結(jié)合NGF/TrkA復(fù)合體和/或NGF/p75復(fù)合體。
370.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗體片段是二價(jià)或單價(jià)的抗體片段或藥劑。
371.如權(quán)利要求370所述的方法，其中所述單價(jià)劑選自Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
372.如權(quán)利要求367至371所述的方法，其中所述抗體、片段或單價(jià)劑經(jīng)過修飾以影響循環(huán)時(shí)間。
373.如權(quán)利要求372所述的方法，其中所述修飾包括添加水溶性聚合物，如聚乙二醇。
374.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述疼痛與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，或預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
375.如權(quán)利要求374所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
376.如權(quán)利要求374所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
377.如權(quán)利要求374所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
378.如權(quán)利要求374所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
379.如權(quán)利要求374所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
380.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
381.如權(quán)利要求367至380中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。 381.如權(quán)利要求367至380中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
382.如權(quán)利要求381所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
383.如權(quán)利要求367至380中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
384.如權(quán)利要求367至383中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用經(jīng)由以下方式實(shí)現(xiàn):顱面粘膜施用、鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用、結(jié)膜施用、靜脈內(nèi)施用、經(jīng)皮或真皮施用或皮下施用。`
385.如權(quán)利要求367至384中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
386.如權(quán)利要求385所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
387.如權(quán)利要求367至386中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
388.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致或所述骨癌疼痛由從不確定的組織轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
389.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。
390.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
391.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
392.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
393.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
394.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤所致。
395.如權(quán)利要求387所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
396.如權(quán)利要求367至395中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
397.如權(quán)利要求367至395中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體經(jīng)由靜脈內(nèi)、皮下或鼻內(nèi)施用來施用。
398.如權(quán)利要求367至395中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
399.如權(quán)利要求398所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
400.如權(quán)利要求367至399中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
401.如權(quán)利要求367至400中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
402.如權(quán)利要求401所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述V1^肽與選自以下序列的序列具有至少90%同一性:SEQ ID NO: 3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID NO: 193或SEQ ID N0:402 ;和/或Vl多肽序列，所述Vl多肽序列與選自以下的序列具有至少90%同一性:SEQ ID NOiUSEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ ID N0:9USEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121`、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
403.如權(quán)利要求401所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述V1^肽與選自以下序列的序列具有至少95%同一性:SEQ ID NO: 3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID N0:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID N0:402 ;和/或\多肽序列，所述八多肽序列與選自以下的序列具有至少95%同一性:SEQ ID N0:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ ID N0:9USEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
404.如權(quán)利要求401所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述Vh多肽與選自以下序列的序列相同:SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93,SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID NO: 402 ;和/或&多肽序列，所述\多肽序列與選自以下的序列相同:SEQ ID NO: USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID NO:61,SEQID N0:71、SEQ ID NO:81,SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:181、SEQ ID NO:191或SEQ IDN0:401。
405.如權(quán)利要求367至404中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
406.如權(quán)利要求400或405所述的方法，其中所述片段的所有CDR均與選自以下的抗人 NGF 抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述CDR中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
407.如權(quán)利要求400或405所述的方法，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
408.如權(quán)利要求400或405所述的方法，所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID N0:23、SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93,SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID NO:402 ;和/或選自以下的\多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID N0 :USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191 或SEQ IDN0:401。
409.如權(quán)利要求367至408中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
410.如權(quán)利要求367至409中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
411.如權(quán)利要求367至410中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
412.如權(quán)利要求367至410中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗NGF抗體是選自以下的單價(jià)劑:Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
413.如權(quán)利要求367至412中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含 '或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述方法中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
414.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
415.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段是Fab，所述Fab包含以下序列:SEQ ID NO:1 和 / 或 SEQ ID NO: 3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQID NO: 21 和 / 或 SEQ ID NO: 23 ；SEQ ID NO: 31 和 / 或 SEQ ID NO: 33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或SEQ ID NO:43 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 / 或 SEQ ID NO:63 ；SEQ ID N0:71和/或SEQ ID NO:73 ；SEQ ID N0:81和 / 或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID N0:91和/ 或 SEQ ID NO:93 ；SEQ ID NO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ IDNO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 / 或 SEQ ID NO: 123 ；SEQ ID NO: 131 和 / 或 SEQ ID NO: 133 ；SEQID NO: 141 和 / 或 SEQ ID NO: 143 ；SEQ ID NO: 151 和 / 或 SEQ ID NO: 153 ；SEQ ID NO: 161和 / 或 SEQ ID NO: 163 ；SEQ ID NO:171 和 / 或 SEQ ID NO: 173 ；SEQ ID NO:181 和 / 或 SEQID NO: 183 ；SEQ ID NO: 191 和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO: 405 和 / 或 SEQ ID NO: 406;以及 SEQ ID NO: 407 和 / 或 SEQ ID NO: 408。
416.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
417.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
418.如權(quán)利要求417所述的方法，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
419.如權(quán)利要求418所述的方法，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
420.如權(quán)利要求417所述的方法，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
421.如權(quán)利要求367所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
422.如權(quán)利要求367至421中`任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物`或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
423.如權(quán)利要求422所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
424.如權(quán)利要求422所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
425.如權(quán)利要求422所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21或其人源化或嵌合變體或片段。
426.如權(quán)利要求367所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段由抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合的抗體或片段組成。
427.如權(quán)利要求425所述的方法，其中所述抗體是以下抗體的片段:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
428.如權(quán)利要求425、426或427所述的方法，其中所述疼痛是與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)的疼痛相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，或預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
429.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
430.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
431.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
432.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
433.如權(quán)利要求428所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
434.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
435.如權(quán)利要求428所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
436.如權(quán)利要求434或435所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
437.如權(quán)利要求436所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
438.如權(quán)利要求367至437中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛 和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
439.如權(quán)利要求438所述的方法，其中所述施用經(jīng)由以下方式實(shí)現(xiàn):顱面粘膜施用、鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用、結(jié)膜施用、靜脈內(nèi)施用、皮下施用或經(jīng)皮施用。
440.如權(quán)利要求438所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
441.如權(quán)利要求440所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
442.如權(quán)利要求435所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
443.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致。
444.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。
445.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
446.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
447.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
448.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
449.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤所致。
450.如權(quán)利要求442所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
451.如權(quán)利要求425至428中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
452.如權(quán)利要求425至428中任一項(xiàng)所述的方法，其中經(jīng)由鼻內(nèi)施用來施用所述抗體。
453.如權(quán)利要求425至428中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
454.如權(quán)利要求453所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
455.如權(quán)利要求367至454中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
456.如權(quán)利要求455所述的方法，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
457.如權(quán)利要求456所述的方法，其中所述片段是Fab片段。
458.如權(quán)利要求457所述的方法，其中所述Fab是包含以下序列的Fab:SEQ ID NO:1和 / 或 SEQ ID NO:3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQ ID NO:21 和 / 或 SEQ IDNO:23 ；SEQ ID NO:31 和 / 或 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或 SEQ ID NO:43 ;SEQ IDNO:51和 /或SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61和 /或SEQ ID NO:63 ;SEQ ID NO:71和 /或SEQID NO:73 ；SEQ ID NO:81 和/或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID NO:91 和/或SEQ ID NO:93 ;SEQ IDNO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ ID NO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 /或 SEQ ID NO: 123 ；SEQ ID NO: 131 和 / 或 SEQ ID NO: 133 ；SEQ ID NO: 141 和 / 或 SEQ IDNO: 143 ；SEQ ID NO: 151 和 / 或 SEQ ID NO: 153 ；SEQ ID NO: 161 和 / 或 SEQ ID NO: 163 ；SEQID NO:171 和 /或 SEQ ID NO:173 ；SEQ ID NO:181和 /或 SEQ ID NO:183 ；SEQ ID NO:191和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO: 51 和 / 或 SEQ ID NO: 53 ；SEQ ID NO:405 和 / 或 SEQ IDN0:406;以及SEQ ID N0:407和/或SEQ ID N0:408，或含有以上所述的可變多肽中的任一個(gè)的⑶R的Fab。
459.如權(quán)利要求367至458中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
460.如權(quán)利要求367至458中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
461.治療有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段用于制備治療疼痛的藥劑的用途或診斷有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段用于制備在體外或體內(nèi)檢測NGF的診斷組合物的用途，其中所述至少一種抗體包含至少一種抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段選自 Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21或與以上所述抗體中的任一種競爭和/或與以上所述抗體中的任一種結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段。
462.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所述抗體是Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21 或其嵌合或人源化變體或片段。
463.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
464.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
465.如權(quán)利要求464所述的用途，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含以下序列:SEQ ID N0:1 和 / 或 SEQ ID NO:3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQ ID NO:21和 / 或 SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:31 和 / 或 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或 SEQ IDNO:43 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 / 或 SEQ ID NO:63 ;SEQ IDN0:71 和/或SEQ ID NO:73 ；SEQ ID N0:81 和 / 或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID N0:91 和/或 SEQID NO:93 ；SEQ ID NO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ ID NO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 / 或 SEQ ID NO: 123 ；SEQ ID N0:131 和 / 或 SEQ ID NO: 133 ；SEQ IDNO: 141 和 / 或 SEQ ID NO: 143 ；SEQ ID NO: 151 和 / 或 SEQ ID NO: 153 ；SEQ ID NO: 161 和 /或 SEQ ID NO: 163 ；SEQ ID NO: 171 和 / 或 SEQ ID NO: 173 ；SEQ ID NO: 181 和 / 或 SEQ IDNO: 183 ；SEQ ID NO: 191 和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQID NO:405 和 / 或 SEQ ID NO:406;以及 SEQ ID NO:407 和 / 或 SEQ ID NO:408。
466.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
467.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
468.如權(quán)利要求461所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID NO:402 ;和/或選自以下的'多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID N0:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191 或SEQ IDN0:401。
469.如權(quán)利要求461468中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的，和/或所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
470.如權(quán)利要求461至468中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
471.如權(quán)利要求468所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含\或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述用途中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
472.如權(quán)利要求468所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
473.如權(quán)利要求475所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
474.如權(quán)利要求467所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
475.如權(quán)利要求474所述的用途，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
476.如權(quán)利要求475所述的用途，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
477.如權(quán)利要求475所述的用途，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
478.如權(quán)利要求461至477中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物組合物中，所述藥物組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。``
479.如權(quán)利要求461至478所述的用途，其中所述抗體或片段處于藥物組合物中，所述藥物組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
480.如權(quán)利要求479所述的用途，其中所述藥物組合物是凍干的。
481.如權(quán)利要求478所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。`473.如權(quán)利要求452所述的用途，其中所述組合物適合于靜脈內(nèi)或皮下施用。
482.一種治療個(gè)體的疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，所述方法包括施用有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段，其中所述抗NGF抗體選自Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21 或與以上所述抗體中的任一種競爭的抗體或抗體片段和/或與以上所述抗體中的任一種結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段。
483.如權(quán)利要求482所述的治療疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，其中所述抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合。
484.如權(quán)利要求482所述的治療疼痛或引起鎮(zhèn)痛作用的方法，其中所述所施用的抗體或抗體片段是抗NGF抗體或抗體片段，所述抗NGF抗體或抗體片段抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合，并且進(jìn)一步結(jié)合NGF/TrkA復(fù)合體和/或NGF/p75復(fù)合體。
485.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗體片段是二價(jià)或單價(jià)的抗體片段。
486.如權(quán)利要求485所述的方法,其中所述單價(jià)劑選自Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
487.如權(quán)利要求484至486所述的方法，其中所述抗體、片段或單價(jià)劑經(jīng)過修飾以影響循環(huán)時(shí)間。
488.如權(quán)利要求487所述的方法，其中所述修飾包括添加水溶性聚合物，如聚乙二醇。
489.如權(quán)利要求484所述的方法，其中所述疼痛與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
490.如權(quán)利要求489所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
491.如權(quán)利要求489所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
492.如權(quán)利要求489所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
493.如權(quán)利要求489所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
494.如權(quán)利要求489所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
495.如權(quán)利要求492所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
496.如權(quán)利要求492所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
497.如權(quán)利要求492所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
498.如權(quán)利要求497所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
499.如權(quán)利要求492所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
500.如權(quán)利要求492所述的方法，其中所述施用經(jīng)由顱面粘膜施用來實(shí)現(xiàn)，所述顱面粘膜施用包括鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用或結(jié)膜施用。
501.如權(quán)利要求492所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
502.如權(quán)利要求501所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
503.如權(quán)利要求482所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
504.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致或所述骨癌疼痛由從不確定的組織轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
505.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。
506.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
507.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
508.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
509.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
510.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤所致。
511.如權(quán)利要求503所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
512.如權(quán)利要求482所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
513.如權(quán)利要求482所述的方法，其中經(jīng)由靜脈內(nèi)、皮下或鼻內(nèi)施用來施用所述抗體。
514.如權(quán)利要求482所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
515.如權(quán)利要求514所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
516.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
517.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
518.如權(quán)利要求517所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述V1^肽與選自以下序列的序列具有至少90%同一性:SEQ ID NO: 3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID NO: 193或SEQ ID N0:402 ;和/或Vl多肽序列，所述Vl多肽序列與選自以下的序列具有至少90%同一性:SEQ ID NOiUSEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ ID N0:9USEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
519.如權(quán)利要求517所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述V1^肽與選自以下序列的序列具有至少95%同一性:SEQ ID NO: 3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID N0:93、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ IDNO: 173,SEQ ID NO: 183,SEQ ID NO: 193或SEQ ID N0:402 ;和/或Vl多肽序列，所述Vl多肽序列與選自以下的序列具有至少95%同一性:SEQ ID NOiUSEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:5USEQ ID N0:6USEQ ID N0:7USEQ ID N0:8USEQ ID N0:9USEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:171、SEQ IDNO:181、SEQ ID NO:191 或 SEQ ID N0:401。
520.如權(quán)利要求517所述的方法，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含Vh多肽，所述Vh多肽與選自以下序列的序列相同:SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO:53,SEQ ID NO:63,SEQ ID NO:73,SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:93,SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID NO: 402 ;和/或\多肽序列，所述\多肽序列與選自以下的序列相同:SEQ ID N0:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID NO:61,SEQID N0:71、SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO: 101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191或SEQ IDN0:401。
521.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
522.如權(quán)利要求521所述的方法，其中所述片段的所有CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Ab 18, Ab 19, Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述CDR中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩 個(gè)氨基酸殘基不同。
523.如權(quán)利要求521所述的方法，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
524.如權(quán)利要求521所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID N0:193或SEQ ID NO:402 ;和/或選自以下的'多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID N0:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191 或SEQ IDN0:401。
525.如權(quán)利要求482至524中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的。
526.如權(quán)利要求482至525中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
527.如權(quán)利要求4824至525中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
528.如權(quán)利要求527所述的方法，其中所述抗NGF抗體是選自以下的單價(jià)劑:Fab、Fab’、Fv、scFv片段、SMIP (小分子免疫藥物)、駱駝抗體、納米抗體、IgNAR、類似于MetMab的單價(jià)抗體分子或其一種或多種組合。
529.如權(quán)利要求524所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含\或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述方法中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
530.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
531.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段是包含以下序列的 Fab:SEQ ID ΝΟ:1 和 / 或 SEQ ID NO:3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQ IDNO:21 和 / 或 SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:31 和 / 或 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或SEQ ID NO:43 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 / 或 SEQ ID NO:63 ；SEQ ID NO:71和/或SEQ ID NO:73 ；SEQ ID NO:81和 / 或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID NO:91和/ 或 SEQ ID NO:93 ；SEQ ID NO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ IDNO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 / 或 SEQ ID NO: 123 ；SEQ ID NO: 131 和 / 或 SEQ ID NO: 133 ；SEQID NO:141和 / 或SEQ ID NO:143 ；SEQ ID NO:151和 /或 SEQ ID NO:153 ；SEQ ID NO:161和 / 或 SEQ ID NO: 163 ；SEQ ID NO:171 和 / 或 SEQ ID NO: 173 ；SEQ ID NO:181 和 / 或 SEQID NO: 183 ；SEQ ID NO: 191 和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO: 405 和 / 或 SEQ ID NO: 406;以及 SEQ ID NO: 407 和 / 或 SEQ ID NO: 408。
532.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
533.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
534.如權(quán)利要求533所述的方法，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
535.如權(quán)利要求534所述的方法，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
536.如權(quán)利要求534所述的方法，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
537.如權(quán)利要求482所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用選自以下的另一種治療劑或治療方案:抗組胺劑、抗炎劑或抗生素。
538.如權(quán)利要求482至537中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物或診斷組合物中，所述藥物或診斷組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
539.如權(quán)利要求538所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
540.如權(quán)利要求539所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物是凍干的。
541.如權(quán)利要求539所述的方法，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21或其人源化或嵌合變體或片段。
542.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述抗人NGF抗體或其片段由抑制NGF與TrkA締合并且抑制NGF與p75締合的抗體或片段組成。
543.如權(quán)利要求542所述的方法，其中所述抗體是以下抗體的片段:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
544.如權(quán)利要求542所述的方法，其中所述疼痛與外科手術(shù)前或外科手術(shù)后相關(guān)，或與肌肉骨骼系統(tǒng)的創(chuàng)傷或損傷相關(guān)的疼痛，預(yù)防或治療慢性內(nèi)臟疼痛。
545.如權(quán)利要求544所述的方法，其中所述慢性內(nèi)臟疼痛是因選自以下的生理學(xué)病癥引起的:痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎、內(nèi)臟痛以及腸易激綜合征。
546.如權(quán)利要求544所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼和機(jī)械誘發(fā)性疼痛。
547.如權(quán)利要求544所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述熱誘發(fā)性疼痛。
548.如權(quán)利要求542所述的方法，其中所述手術(shù)后疼痛包括靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛，并且其中改善所述靜息疼、機(jī)械誘發(fā)性疼痛以及熱誘發(fā)性疼痛。
549.如權(quán)利要求544所述的方法，其中不顯著抑制傷口愈合。
550.如權(quán)利要求482 所述的方法，其中所述疼痛選自與癌癥相關(guān)的疼痛、神經(jīng)痛以及神經(jīng)源性疼痛。
551.如權(quán)利要求544所述的方法，其中所述治療包括治療急性疼痛或慢性疼痛。
552.如權(quán)利要求544所述的方法，其中所述疼痛是顱面疼痛或頭痛。
553.如權(quán)利要求552所述的方法，其中所述顱面疼痛或所述頭痛由顳下頜關(guān)節(jié)紊亂癥(TMJ)、偏頭痛或三叉神經(jīng)痛引起。
554.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述所治療的疼痛是急性疼痛、牙痛、由創(chuàng)傷所致的疼痛、手術(shù)疼痛、由截肢或膿腫引起的疼痛、灼痛、脫髓鞘疾病、三叉神經(jīng)痛、癌癥、慢性酒精中毒、中風(fēng)、丘腦性疼痛綜合征、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征(“AIDS”)、毒素、化學(xué)療法、一般性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、混合型血管或非血管綜合征、緊張性頭痛、一般性炎癥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性疾病、狼瘡、骨關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、炎癥性腸病、腸易激綜合征、炎癥性眼部病癥、炎癥性或不穩(wěn)定膀胱病癥、牛皮癬、帶有炎癥成分的皮膚疾患、曬傷、心臟炎、皮炎、肌炎、神經(jīng)炎、膠原血管疾病、慢性炎癥病狀、炎癥疼痛和相關(guān)痛覺過敏和痛覺異常、神經(jīng)痛和相關(guān)痛覺過敏或痛覺異常、糖尿病性神經(jīng)痛、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛、傳入神經(jīng)阻滯綜合征、哮喘、上皮組織損傷或功能異常、單純性皰疹、呼吸、泌尿生殖器、胃腸或血管區(qū)域的內(nèi)臟活動(dòng)紊亂、傷口、灼傷、過敏性皮膚反應(yīng)、瘙癢、白癜風(fēng)、一般性胃腸病癥、結(jié)腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、血管舒縮性或過敏性鼻炎或支氣管病癥、痛經(jīng)、消化不良、胃食管反流、胰腺炎或內(nèi)臟痛。
555.如權(quán)利要求482所述的方法，其中所述施用經(jīng)由以下方式來實(shí)現(xiàn):顱面粘膜施用、鼻內(nèi)施用、經(jīng)頰施用、舌下施用、皮下、靜脈內(nèi)或結(jié)膜施用。
556.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括施用至少一種NSAID。
557.如權(quán)利要求556所述的方法，其中所述NSAID選自由以下組成的組:布洛芬、萘普生、甲氧基甲基萘乙酸、雙氯芬酸、酮洛芬、托美丁、舒林酸、甲滅酸、甲氯滅酸、二氟尼柳、氟苯柳、吡羅昔康、舒多昔康、伊索昔康、塞來昔布、福費(fèi)昔布、DUP-697、氟舒胺、美洛昔康、6-甲氧基-2-萘乙酸、MK-966、萘丁美酮、尼美舒利、NS-398、SC-5766、SC-58215以及T-614。
558.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療骨癌疼痛。
559.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由原發(fā)于骨中的癌癥所致。
560.如權(quán)利要求559所述的方法，其中所述骨癌疼痛由骨肉瘤所致。
561.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的癌癥所致。
562.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的前列腺癌所致。
563.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的乳癌所致。
564.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肺癌所致。
565.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的肉瘤所致。
566.如權(quán)利要求558所述的方法，其中所述骨癌疼痛由轉(zhuǎn)移至骨的腎癌所致。
567.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用于治療伴有或不伴有神經(jīng)根病的背部或頸部疼痛，所述方法包括將有效量的所述抗體或片段提供至包含椎間盤的椎間盤部位，其中所述椎間盤是已發(fā)生退變的椎間盤。
568.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中經(jīng)由鼻內(nèi)施用來施用所述抗體。
569.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，所述方法被用來治療或預(yù)防受試者的與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛和/或下泌尿道癥狀。
570.如權(quán)利要求569所述的方法，其中與慢性前列腺炎和/或慢性骨盆疼痛綜合征相關(guān)的疼痛選自包括以下的組:下腹部(骨盆)疼痛；胃下部疼痛；膀胱疼痛；恥骨弓上疼痛；陰莖、睪丸、陰囊以及會陰疼痛；尿道疼痛；性交疼痛；可能隨著膀胱充盈而增加的疼痛、壓力或不適；排尿困難以及射精疼痛。
571.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
572.如權(quán)利要求571所述的方法，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
573.如權(quán)利要求572所述的方法，其中所述片段是Fab片段。
574.如權(quán)利要求573所述的方法，其中所述Fab是包含以下序列的Fab:SEQ ID NO:1和 / 或 SEQ ID NO:3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQ ID NO:21 和 / 或 SEQ IDNO:23 ；SEQ ID NO:31 和 / 或 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或 SEQ ID NO:43 ;SEQ IDN0:51 和 /或SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 / 或SEQ ID NO:63 ;SEQ ID N0:71 和 /或 SEQID NO:73 ；SEQ ID N0:81 和/或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID N0:91 和/或SEQ ID NO:93 ;SEQ IDNO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ ID NO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 /或 SEQ ID NO:123 ；SEQ ID NO:131 和 / 或SEQ ID NO:133 ；SEQ ID NO:141 和 / 或SEQ IDNO:143 ；SEQ ID NO:151和 / 或SEQ ID NO:153 ；SEQ ID NO:161和 / 或SEQ ID NO:163 ；SEQID NO:171和 /或 SEQ ID NO:173 ；SEQ ID NO:181 和 /或 SEQ ID NO:183 ；SEQ ID NO:191和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO: 51 和 / 或 SEQ ID NO: 53 ；SEQ ID NO:405 和 / 或 SEQ IDNO: 406;以及 SEQ ID NO: 407 和 / 或 SEQ ID NO: 408。
575.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
576.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
577.治療有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段的用途，所述治療有效量的至少一種抗人NGF抗體或其片段用于制備治療疼痛的藥劑，其中所述至少一種抗體包含至少一種抗人NGF抗體或其片段，所述抗人NGF抗體或其片段選自Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21 或與以上所述抗體中的任一種競爭和/或與以上所述抗體中的任一種結(jié)合相同或重疊的表位的抗體或抗體片段。
578.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述抗體是Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21 或其嵌合或人源化變體或片段。
579.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述抗體與選自以下的抗人NGF抗體特異性地結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位和/或競爭結(jié)合完整NGF多肽或其片段上相同或重疊的表位:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
580.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述片段選自Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
581.如權(quán)利要求5802 所述的用途，其中所述片段是Fab片段，所述Fab片段包含以下序列:SEQ ID N0:1 和 / 或 SEQ ID NO:3 ；SEQ ID NO: 11 和 / 或 SEQ ID NO: 13 ；SEQ IDNO:21 和 / 或 SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:31 和 / 或 SEQ ID NO:33 ；SEQ ID NO:41 和 / 或SEQ ID NO:43 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO:61 和 / 或 SEQ ID NO:63 ；SEQ ID N0:71和/或SEQ ID NO:73 ；SEQ ID N0:81和 / 或SEQ ID NO:83 ;SEQ ID N0:91和/ 或 SEQ ID NO:93 ；SEQ ID NO: 101 和 / 或 SEQ ID NO: 103 ；SEQ ID NO: 111 和 / 或 SEQ IDNO: 113 ；SEQ ID NO: 121 和 / 或 SEQ ID NO: 123 ；SEQ ID NO: 131 和 / 或 SEQ ID NO: 133 ；SEQID NO:141 和 / 或SEQ ID NO:143 ；SEQ ID NO:151和 /或 SEQ ID NO:153 ；SEQ ID NO:161和 / 或 SEQ ID NO: 163 ；SEQ ID N0:171 和 / 或 SEQ ID NO: 173 ；SEQ ID N0:181 和 / 或 SEQID NO: 183 ；SEQ ID NO: 191 和 / 或 SEQ ID NO: 193 ；SEQ ID NO:51 和 / 或 SEQ ID NO:53 ；SEQ ID NO: 405 和 / 或 SEQ ID NO: 406;以及 SEQ ID NO: 407 和 / 或 SEQ ID NO: 408。
582.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述抗人NGF抗體在所述可變輕鏈區(qū)和所述可變重鏈區(qū)中的每一個(gè)中包含至少2個(gè)與以下抗體中所含的互補(bǔ)決定區(qū)相同的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR):Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或 Ab21。
583.如權(quán)利要求582所述的用途，其中所有的所述CDR均與選自以下的抗人NGF抗體中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20或Ab21，或如果不相同，那么所述⑶R中的一個(gè)或多個(gè)與所述抗體中的對應(yīng)CDR有至多一個(gè)或兩個(gè)氨基酸殘基不同。
584.如權(quán)利要求582所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或抗體片段包含選自以下的Vh多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:3,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO:23,SEQID NO:53、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO: 103、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:173、SEQ IDNO: 183,SEQ ID NO:193或SEQ ID N0:402 ;和/或選自以下的'多肽序列中所含的CDR中的一個(gè)或多個(gè):SEQ ID NO:USEQ ID NO:1USEQ ID N0:21、SEQ ID N0:51、SEQ ID N0:61、SEQID NO:71,SEQ ID N0:81、SEQ ID N0:91、SEQ ID N0:101、SEQ ID NO:1lUSEQ ID NO: 121、SEQ ID N0:131、SEQ ID N0:161、SEQ ID N0:171、SEQ ID N0:181、SEQ ID NO:191或SEQ IDN0:401。
585.如權(quán)利要求582至584中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段是非糖基化的，和/或所述抗體含有Fe區(qū)，所述Fe區(qū)已經(jīng)過修飾以改變效應(yīng)功能、半衰期、蛋白質(zhì)水解作用和/或糖基化作用。
586.如權(quán)利要求582至595中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體是人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或嵌合抗體。
587.如權(quán)利要求586所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含\或Vh多肽序列，所述\或Vh多肽序列與所述用途中所述的多肽序列中的任一個(gè)具有至少90%或更大的同源性。
588.如權(quán)利要求586所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段特異性地結(jié)合表達(dá)NGF的人細(xì)胞和/或體內(nèi)循環(huán)的可溶性NGF分子。
589.如權(quán)利要求588所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段與可檢測的標(biāo)記或治療劑直接或間接地連接。
590.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段進(jìn)一步包含效應(yīng)部分。
591.如權(quán)利要求590所述的用途，其中所述效應(yīng)部分是可檢測的部分或功能性部分。
592.如權(quán)利要求591所述的用途，其中所述可檢測的部分是熒光染料、酶、底物、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)。
593.如權(quán)利要求591所述的用途，其中所述功能性部分是鏈霉親和素、抗生物素蛋白、生物素、細(xì)胞毒素、細(xì)胞毒性劑或放射性物質(zhì)。
594.如權(quán)利要求577至593中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述抗人NGF抗體或其片段包含在藥物組合物中，所述藥物組合物包含藥學(xué)上可接受的載體。
595.如權(quán)利要求594所述的用途，其中所述藥物組合物進(jìn)一步包含至少一種穩(wěn)定劑。
596.如權(quán)利要求594所述的用途，其中所述藥物組合物是凍干的。
597.如權(quán)利要求577所述的用途，其中所述藥物或診斷組合物包含選自以下的一種或多種抗人 NGF 抗體:Abl、Ab2、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Abl0、Abll、Abl2、Abl3、Abl4、Abl7、Abl8、Abl9、Ab20 或Ab21。
598.如權(quán)利要求597所述的用途，其中所述組合物適合于靜脈內(nèi)或皮下施用。
599.如權(quán)利要求482至598中任一項(xiàng)所述的方法或用途，其中皮下或靜脈內(nèi)施用所述NGF抗體或片段。
【文檔編號】A61K39/395GK103619879SQ201180066555
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2011年12月1日 優(yōu)先權(quán)日:2010年12月1日
【發(fā)明者】B·H·杜特扎, B·R·科瓦斯維奇, D·M·米歇爾, E·W·歐加拉, P·范, J·T·L·史密斯, P·D·麥克內(nèi)爾, J·比爾格倫, E·A·斯圖爾特, C·C·阿凱特蘇卡, B·Y-C·常, J·A·拉薩姆, L·F·加西亞-馬丁內(nèi)斯 申請人:奧爾德生物控股有限責(zé)任公司