專利名稱：一種雙層復(fù)合再生膜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物醫(yī)用材料領(lǐng)域的引導(dǎo)組織再生膜及其制備方法，該材料可用于缺損組織的修復(fù)，尤其是骨組織和牙周組織的修復(fù)。
背景技術(shù)：
引導(dǎo)組織再生術(shù)(guided tissue regeneration,GTR)已廣泛用于牙周手術(shù)中，被認(rèn)為是引起牙周組織生理性再生的有效手段。目前，用于引導(dǎo)組織再生術(shù)的膜材料分為可降解膜材料和不可降解膜材料兩類。不可降解膜材料雖然具有良好的生物相容性和力學(xué)性能，并取得一定的療效，但是不能被組織吸收，需要二次手術(shù)取出，增加了病人的痛苦，所以不被患者接受。生物可降解膜材料由于其具有可選擇性地引導(dǎo)缺損組織再生，并且完全可降解，不需要二次手術(shù)，手術(shù)方便等優(yōu)點(diǎn)，被受矚目。但現(xiàn)有技術(shù)的生物可降解膜材料在力學(xué)性能、降解性能、生物活性等問題，均無法滿足骨組織和牙周組織缺損修復(fù)的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種雙層復(fù)合引導(dǎo)再生膜及其制備方法，以改善引導(dǎo)膜的生物活性，促進(jìn)傷口的愈合，改善其力學(xué)性能，為組織缺損修復(fù)提供了一種新型膜材料。本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:一種雙層復(fù)合再生膜，包括致密層和疏松層，其特征在于:所述致密層由可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜復(fù)合而成。所述膠原膜中復(fù)合有納米銀粒子和/或藥物；所述疏松層是由選自殼聚糖，絲素蛋白，角質(zhì)蛋白，或膠原蛋白中的一種或幾種作為基體材料而形成。所述致密層為可降解 高分子纖維網(wǎng)與膠原膜交替層層疊加，最上層和最下層為膠原膜，厚度為0.5 2mm;所述疏松層中含有一定量的選自透明質(zhì)酸，硫酸軟骨素，鈣鹽，或骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP生長(zhǎng)因子中的一種或者幾種形成。進(jìn)一步地，所述可降解高分子纖維網(wǎng)的材料選自醫(yī)用級(jí)聚二氧六環(huán)酮，聚乳酸，聚乙丙交酯，聚己內(nèi)酯，聚(3-羥基丁酸酯-3-羥基戊酸酯)中的一種或幾種的組合。進(jìn)一步地，所述藥物選自紫杉醇、阿霉素、鏈霉素、頭孢拉定、慶大霉素、乙酰螺旋霉素、紅霉素、白霉素、阿莫西林、土霉素、卡那霉素、青霉素、甲硝唑、丹參素、新霉素、核糖霉素、四環(huán)素、萬古霉素、阿奇霉素中的一種或多種的組合。本發(fā)明還提供所述的雙層復(fù)合再生膜的制備方法，主要包括以下步驟:
步驟1，纖維增強(qiáng)致密層的制備，步驟I進(jìn)一步包括以下工藝:
用有機(jī)酸溶解膠原形成膠原溶液，將膠原溶液注入到模具中，然后冷凍干燥，制備膠原海綿膜；
用可降解高分子纖維編織成網(wǎng)作為增強(qiáng)層；以及
把制備好的膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)層疊壓制形成由可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜復(fù)合的可降解醫(yī)用高分子纖維增強(qiáng)的致密層；步驟2，疏松層的制備，步驟2進(jìn)一步包括以下工藝:
用有機(jī)酸溶解選自殼聚糖，絲素蛋白，角質(zhì)蛋白，膠原蛋白聚合物中的一種或幾種形成溶液；以及
將所得的溶液注入模具中，然后冷凍干燥，制備疏松層膠原海綿；
步驟3，致密層和疏松層進(jìn)行復(fù)合形成雙層復(fù)合再生膜。其中，步驟I中，所述膠原溶液為I型膠原蛋白，或I型膠原蛋白中含有少量III型膠原蛋白溶解于有機(jī)酸中形成的溶液；所述膠原溶液中進(jìn)一步復(fù)合有藥物和/或納米銀粒子。進(jìn)一步地，步驟I中，膠原溶液的質(zhì)量體積比濃度范圍為0.Γ2%,粘度系數(shù)為100(T4000Cp ;在膠原溶液中所述藥物的濃度為10-3 20mmol/L，納米銀的濃度為4(T800ppm;膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)層疊后，最上層和最下層為膠原海綿膜，然后放入平板之間壓制形成一定厚度的致密層。步驟2中，所述溶液注入模具之前進(jìn)一步復(fù)合一定量的選自透明質(zhì)酸，復(fù)合硫酸軟骨素，鈣鹽，BMP生長(zhǎng)因子中的一種或幾種物質(zhì)；溶液中所述殼聚糖的質(zhì)量體積比濃度為
0.廣3%，絲素蛋白的質(zhì)量體積比濃度為0.2飛％，角質(zhì)蛋白的質(zhì)量體積比濃度為0.廣8%，膠原蛋白聚合物的質(zhì)量體積比濃度為0.廣2%，透明質(zhì)酸的質(zhì)量體積比濃度為0.05^1.5%，硫酸軟骨素的質(zhì)量體積比濃度為0.05、.3%，鈣鹽的質(zhì)量體積比濃度為0.05 3% ；BMP生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積比濃度為0.0000Γ0.015%。步驟3中，是將纖維增強(qiáng)致密層進(jìn)行高溫交聯(lián)、疏松層進(jìn)行高溫交聯(lián)和化學(xué)交聯(lián)，然后對(duì)交聯(lián)的疏松層進(jìn)行清洗，冷凍干燥；最后進(jìn)行致密層和疏松層的復(fù)合，從而獲得雙層復(fù)合再生膜；致密層和疏松層復(fù)合的操作方法是在致密層的一面涂覆一層步驟I所制備的膠原溶液，然后放上疏松層、冷凍干燥。本發(fā)明的有益效果是:
本發(fā)明的雙層復(fù)合引導(dǎo)再生膜材料，用于骨組織，牙組織等組織修復(fù)的新型醫(yī)用膜材料，該膜具有以下特點(diǎn):(I)采用生物相容性和生物可降解的高分子聚合物制備引導(dǎo)膜，組織反應(yīng)小，不會(huì)引起機(jī)體免疫反應(yīng)和驗(yàn)證反應(yīng)；(2)有治療效果藥物的加入，促進(jìn)傷口的愈合作用；(3)纖維網(wǎng)的加入提高引導(dǎo)膜的機(jī)械強(qiáng)度，降解時(shí)間可控。進(jìn)一步地，無機(jī)成分和BMP生長(zhǎng)因子的加入增加的引導(dǎo)膜的成骨生物活性，促進(jìn)成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)。實(shí)踐證明，本發(fā)明制備的復(fù)合引導(dǎo)膜具有良好的生物活性，抗菌性，較好的力學(xué)強(qiáng)度，降解速率可調(diào)，促進(jìn)傷口愈合等優(yōu)點(diǎn)，在體內(nèi)降解或被機(jī)體完全吸收的時(shí)間為Γ12個(gè)月。采用GB/T 528來測(cè)試，該膜在濕態(tài)下的斷裂拉伸強(qiáng)度為5 40MPa。采用國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試細(xì)胞毒性為O級(jí)。該多層復(fù)合再生膜應(yīng)用于缺損組織的修復(fù)，特別是骨組織和牙組織的修復(fù)，具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的雙層復(fù)合再生膜，主要是用作口腔修復(fù)膜，是一種引導(dǎo)組織再生膜，其由纖維增強(qiáng)的致密層和疏松層組成。 所述致密層由可降解高分子纖維網(wǎng)復(fù)合膠原膜而形成的，所述膠原中可進(jìn)一步摻雜納米銀粒子和/或治療效果的藥物。疏松層是由殼聚糖，或絲素蛋白，或角質(zhì)蛋白，或膠原蛋白等為基體材料，可進(jìn)一步復(fù)合一定量的透明質(zhì)酸，或復(fù)合硫酸軟骨素，或復(fù)合一定量的鈣鹽，或骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)因子中的一種或者多種構(gòu)成。該纖維增強(qiáng)致密層由可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜交替層層疊加，較佳地，最上層和最下層為膠原膜，之后放入兩個(gè)平板之間，用一定機(jī)械力壓制一段時(shí)間制備得到一定厚度，如0.5 2mm的致密層。該纖維增強(qiáng)致密層中的可降解高分子纖維網(wǎng)的材料選自醫(yī)用級(jí)聚二氧六環(huán)酮(PDO)，或聚乳酸(PLA )，或聚乙丙交酯(PLGA)，聚己內(nèi)酯(PCL)，或聚(3-羥基丁酸酯_3_羥基戊酸酯)(PHBV)，或其類似物，以其中的一種或幾種組合而制成的。所述纖維增強(qiáng)致密層中的膠原膜是由膠原溶液、或膠原溶液復(fù)合納米銀粒子，或膠原溶液復(fù)合水溶性的藥物制備得到的。其中，膠原溶液主要是指由I型膠原蛋白，或I型膠原蛋白中摻合有少量(占總膠原蛋白的質(zhì)量比含量小于5%)的III膠原蛋白溶解于有機(jī)酸溶劑中形成的一種天然高分子聚合物溶液。納米銀粒子尺寸可選擇為Γιοο納米的納米銀顆粒。其中水溶性的藥物選自紫杉醇、阿霉素、鏈霉素、頭孢拉定、慶大霉素、乙酰螺旋霉素、紅霉素、白霉素、阿莫西林、土霉素、卡那霉素、青霉素、甲硝唑、丹參素、新霉素、核糖霉素、四環(huán)素、萬古霉素、阿奇霉素中的一種或多種的組合。也可根據(jù)使用需要選擇使用其它藥物。該疏松層由選自殼聚糖、絲素蛋白、角質(zhì)蛋白、膠原蛋白中的一種或多種為基體材料，并復(fù)合一定量選自透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、鈣鹽，或BMP生長(zhǎng)因子中的一種或者多種物質(zhì)而組成。鈣鹽包括但不限于羥基磷灰石、磷酸三鈣、硫酸鈣等。本發(fā)明的雙層復(fù)合再生膜(口腔修復(fù)膜)，其制備方法主要包括四個(gè)步驟，后文按步驟f步驟4的順序依次進(jìn)行詳細(xì)描述。其中，步驟廣3中的有些具體工藝，可適用于現(xiàn)有技術(shù)的其它方式來實(shí)現(xiàn)，而步驟4作為后處理的工序，可以選擇進(jìn)行或取舍，并非作為限定。步驟1，纖維增強(qiáng)致密層的制備，本實(shí)施例中制成的是可降解高分子纖維增強(qiáng)的致密層，步驟I具體包括以下工藝:
用有機(jī)酸溶劑包括但不限于醋酸或丙二酸，溶解膠原形成膠原溶液，從而形成混合天然高分子聚合物的溶液；可選擇性地進(jìn)一步復(fù)合選自有治療效果的水溶性藥物和/或納米銀粒子，將所得的溶液可先進(jìn)行真空脫出氣泡后再注入到自行設(shè)計(jì)的模具(或現(xiàn)有技術(shù)的其它模具)中，把模具進(jìn)行預(yù)冷凍一段時(shí)間，再冷凍干燥，制備得到膠原海綿膜，備用；
同時(shí)，將可降解高分子纖維編織成網(wǎng)備用；以及
最后把制備好的膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)交替層層疊加，最上層和最下層選擇為膠原海綿膜，放入兩個(gè)平板之間，用一定機(jī)械力，壓制一段時(shí)間，制備出由可降解高分子纖維網(wǎng)復(fù)合膠原膜形成的纖維增強(qiáng)致密層。
在具體實(shí)施方式
中，該步驟I中有機(jī)酸的pH=f 4，所述膠原溶液，主要是指由I型膠原蛋白，或I型膠原蛋白中摻合有少量(占總膠原蛋白的質(zhì)量比含量小于5%)的III膠原蛋白溶解于有機(jī)酸溶劑中形成的一種天然高分子聚合物溶液。膠原溶液的溶質(zhì)質(zhì)量體積比(m/v)濃度范圍為0.廣2%，且粘度系數(shù)為100(T4000Cp。在膠原溶液中，所述納米銀的濃度為4(T800ppm，水溶性藥物的濃度為10_P20mmol/L。納米銀粒子尺寸可選擇為f 100納米的納米銀顆粒。真空脫出氣泡時(shí)的真空度可為(TlOOPa。所述冷凍干燥條件可以是:在零下4(T90°C超低溫下冷凍2h，冷凍后放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，在零下5(T60°C條件下冷凍干燥24h?？山到忉t(yī)用高分子纖維的直徑范圍可為但不限于0.f 1_，編織交織成網(wǎng)的方法可采用醫(yī)用織物的常用編織方法。膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)交替疊加的層數(shù)為3 15層，壓制是在5 10 KN范圍的作用力下壓制4 24 h，從而形成厚度在0.5 2mm的致密層。壓制條件和層數(shù)可以根據(jù)實(shí)際需要而進(jìn)行調(diào)整和選擇。所指自行設(shè)計(jì)的模具，實(shí)質(zhì)包括一大面積的長(zhǎng)方形平板，模具可自動(dòng)控溫加熱和烘干，例如溫度控制范圍為(T80°C ;所述模具內(nèi)配套設(shè)置有展開器，模具和展開器一起使用時(shí)，可一次性制備大尺寸的均勻膜；展開器是一個(gè)內(nèi)部可盛裝溶液的微孔滾軸，滾軸內(nèi)的溶液在一定壓力下從微孔中緩慢流出，并隨自動(dòng)控制的滾軸不斷來回滾動(dòng)，均勻地將溶液在模具內(nèi)鋪展開；溶液通過連續(xù)進(jìn)料管注入展開器的滾軸內(nèi)?，F(xiàn)有技術(shù)的其它模具和方法同樣適用于本發(fā)明，因此本發(fā)明的步驟并不限定為自行設(shè)計(jì)的模具。步驟2，疏松層的制備，步驟2具體包括以下工藝:
用有機(jī)酸溶劑包括但不限于醋酸或丙二酸，溶解殼聚糖，或絲素蛋白，或角質(zhì)蛋白，或膠原蛋白聚合物中的一種或幾種配制成溶液，且還可進(jìn)一步復(fù)合一定量的透明質(zhì)酸，或復(fù)合硫酸軟骨素，或復(fù)合一定量的鈣鹽，或BMP生長(zhǎng)因子中的一種或者幾種配制成成溶液；將所得的溶液注入自行設(shè)計(jì)的模具(模具結(jié)構(gòu)同上且現(xiàn)有技術(shù)的模具同樣適用)；以及然后把模具放入超低溫冰箱里冷凍一段時(shí)間，再冷凍干燥，從而制得疏松層膠原海綿，其厚度小于3毫米，但可以根據(jù)實(shí)際適用進(jìn)行厚度調(diào)整。在具體實(shí)施方式
中，該步驟2的溶液中所述殼聚糖的m/v濃度為0.1^3%,絲素蛋白的m/v濃度為0.2^5%,角質(zhì)蛋白的m/v濃度為0.1^8%,膠原蛋白聚合物的m/v濃度為
0.1~2%，透明質(zhì)酸的m/v濃度為0.05^1.5%，硫酸軟骨素的m/v濃度為0.05、.3%，鈣鹽的m/V濃度為0.05 3% ；BMP生長(zhǎng)因子的m/v濃度為0.0OOOf 0.015%，其中m/v是指質(zhì)量體積比。冷凍干燥條件可以是:在零下4(T90°C超低溫下冷凍2h，冷凍后放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，在零下5(T60°C條件下冷凍干燥24h。步驟3，引導(dǎo)膜的制備，步驟3具體包括以下工藝:
將纖維增強(qiáng)的致密層進(jìn)行高溫交聯(lián)；
疏松層進(jìn)行真空高溫交聯(lián)和化學(xué)交聯(lián)，然后對(duì)交聯(lián)的疏松層進(jìn)行清洗，預(yù)冷凍、然后冷凍干燥一段時(shí)間；以及
最后進(jìn)行致密層和疏松層的復(fù)合、制備雙層復(fù)合的引導(dǎo)膜。在具體實(shí)施方式
中，該步驟3中，高溫交聯(lián)及真空高溫交聯(lián)是在8(Tl30°C下交聯(lián)反應(yīng)8 30h。進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)時(shí)，是在交聯(lián)劑中浸泡8 24 h，所述交聯(lián)劑選自戊二醛、京尼平、碳化二亞胺中的一種或多種，交聯(lián)劑的m/v濃度為0.廣2%。所述的清洗工藝是:進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)后的樣品在PBS溶液中浸泡l 3h，再20 60%的酒精溶液中浸泡0.5 2h，然后再生理鹽水中浸泡24h，不斷清洗，最后用蒸餾水進(jìn)行清洗24 h，不斷換水，除去樣品中殘留的交聯(lián)劑，并將樣品中的低分子物水洗掉。其它清洗工藝同樣適用；清洗完樣品后再在零下2(T80°C冷凍2h，然后在零下4(T60°C條件下冷凍干燥。致密層和疏松層復(fù)合的操作方法是在致密層的一面涂覆一層步驟I所制備的天然高分子聚合物溶液，然后放上疏松層、冷凍干燥，制備出由纖維增強(qiáng)的致密層和疏松層構(gòu)成的引導(dǎo)再生膜，冷凍及干燥工藝可按具體需要進(jìn)行調(diào)整或選擇。步驟4，把制備的引導(dǎo)膜直接從模具中取出，進(jìn)行裁剪、包裝和滅菌等工藝制備出引導(dǎo)膜產(chǎn)品。以下為具體實(shí)例，來說明本發(fā)明口腔修復(fù)膜及其制備方法，但不作為本發(fā)明保護(hù)范圍的限制。實(shí)施例1:增強(qiáng)致密層的制備
(1)取膠原樣品，用有機(jī)酸溶劑按照一定濃度溶解膠原形成天然高分子聚合物溶液，有機(jī)酸為醋酸或丙二酸；其中溶劑的PH=f 3，形成的混合液粘度2300cp，加入濃度為80ppm的納米銀，然后在室溫充分?jǐn)嚢?2h，得到均一混合的溶液，待用；
(2)取均一的膠原混合溶液，在真空度為OPa，靜置時(shí)間f IOmin ;脫出溶液中的大部分氣泡；
(3)將脫出氣泡的膠原與納米銀混合溶液澆注到自制的聚四氟模具中，然后鋪展開，把模具放入零下80°C條件下冷凍2h，然后在O Pa，零下56°C條件下冷凍干燥24 h，制備得到膠原海綿膜，備用；
(4)采用通用的醫(yī)用織物的制備方 法，將直徑為0.1mm的可降解高分子纖維編織成網(wǎng)，備用;
(5)然后把制備好的膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)交替層層疊加，最上層和最下層為膠原海綿膜，共7層，放入兩個(gè)聚四氟平板之間，在9 KN的作用力下壓制24h，制備出可降解醫(yī)用高分子纖維增強(qiáng)的致密層，厚度在0.5^1mm范圍內(nèi)。實(shí)施例2:疏松層的制備
(1)取膠原樣品，用有機(jī)酸溶劑溶解膠原蛋白聚合物形成溶液，并加入一定量的透明質(zhì)酸和BMP生長(zhǎng)因子；其中溶劑的PH=f 3，膠原蛋白溶液的粘度系數(shù)1200cp ;透明質(zhì)酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05 1.5% (m/v) ；BMP生長(zhǎng)因子的濃度為0.00008% (m/v)；
(2)把配置好的混合溶液按照一定量澆注在自制的聚四氟的模具中，把模具放入零下80°C條件下冷凍2h，然后在O Pa，零下56°C條件下冷凍干燥24h，制備出疏松層。實(shí)施例3增強(qiáng)致密層和疏松層的交聯(lián)及復(fù)合
(I)把制備好的致密層和疏松層分別放入真空干燥箱中，抽真空，真空度在0.1 Pa的狀態(tài)下，高溫交聯(lián)12 30 h ;高溫交聯(lián)的溫度為10(Tl30°C。(2)把高溫交聯(lián)后的疏松層放入容器中，加入交聯(lián)劑，交聯(lián)劑的濃度為0.Γ1.5%，交聯(lián)12h，選自戊二醛、京尼平、碳化二亞胺、環(huán)氧化合物等交聯(lián)劑中的一種或多種。(3)把化學(xué)交聯(lián)的疏松層清洗，條件為:在PBS溶液中浸泡I 3h，然后再20 60%的酒精溶液中浸泡0.5 2h，然后再生理鹽水中浸泡24h，不斷清洗，最后用蒸餾水進(jìn)行清洗24h，不斷換水；除去樣品中殘留的交聯(lián)劑，并將樣品中的低分子物質(zhì)用水洗掉。再進(jìn)行清洗完樣品后在零下2(T80°C冷凍2h，然后在零下4(T60°C條件下冷凍干燥，制備得到交聯(lián)的疏松層；
(4)最后將致密層和疏松層進(jìn)行復(fù)合，操作方法是在致密層的一面涂覆一層實(shí)例I所制備的天然高分子聚合物溶液，然后放上疏松層、冷凍干燥，即可制備得到雙層引導(dǎo)再生膜。
按上述方法所制備的雙層復(fù)合膜，該膜可用于骨組織，牙組織等組織修復(fù)。它是以天然高分子和合成高分子為基本原料，采用澆注、涂覆、壓制、冷凍干燥成型，并經(jīng)物理交聯(lián)或化學(xué)交聯(lián)改性制備而成的雙層復(fù)合膜，具有良好生物相容性和力學(xué)性能，生物可降解性能，且免疫排斥反應(yīng)較低、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。該材料廣泛用于組織修復(fù)，尤其是骨組織和牙周組織的修復(fù)。該膜具有以下特點(diǎn):(I)采用生物相容性和生物可降解的高分子聚合物制備引導(dǎo)膜，組織反應(yīng)小，不會(huì)引起機(jī)體免疫反應(yīng)和驗(yàn)證反應(yīng)；(2)有治療效果藥物的加入，促進(jìn)傷口的愈合作用；(3)纖維網(wǎng)的加入提高引導(dǎo)膜的機(jī)械強(qiáng)度，降解時(shí)間可控；(4)無機(jī)成分和BMP生長(zhǎng)因子的加入增加的引導(dǎo)膜的成骨生物活性，促進(jìn)成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明制備的復(fù)合引導(dǎo)膜具有良好的生物活性，抗菌性，較好的力學(xué)強(qiáng)度，降解速率可調(diào)，促進(jìn)傷口愈合等優(yōu)點(diǎn)，在體內(nèi)降解或被機(jī)體完全吸收的時(shí)間為4 12個(gè)月。采用GB/T 528來測(cè)試，該再生膜濕態(tài)下的斷裂拉伸強(qiáng)度為5 40 MPa。采用國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試細(xì)胞毒性為0級(jí)。該多層復(fù)合再生膜應(yīng)用于缺損組織的修復(fù)，特別是骨組織和牙組織的修復(fù)，具有廣闊的應(yīng)用前景。 ·
權(quán)利要求
1.一種雙層復(fù)合再生膜，包括致密層和疏松層，其特征在于:所述致密層由可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜復(fù)合而成。
2.如權(quán)利要求1所述的雙層復(fù)合再生膜，其特征在于:所述膠原膜中復(fù)合有納米銀粒子和/或藥物；所述疏松層是由選自殼聚糖，絲素蛋白，角質(zhì)蛋白，或膠原蛋白中的一種或幾種作為基體材料而形成。
3.如權(quán)利要求1所述的雙層復(fù)合再生膜，其特征在于:所述致密層為可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜交替層層疊加，最上層和最下層為膠原膜，厚度為0.5^2mm ;所述疏松層中含有一定量的選自透明質(zhì)酸，硫酸軟骨素，鈣鹽，或骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP生長(zhǎng)因子中的一種或者幾種形成。
4.如權(quán)利要求1所述的雙層復(fù)合再生膜，其特征在于:所述可降解高分子纖維網(wǎng)的材料選自醫(yī)用級(jí)聚二氧六環(huán)酮，聚乳酸，聚乙丙交酯，聚己內(nèi)酯，聚(3-羥基丁酸酯-3-羥基戊酸酯)中的一種或幾種的組合。
5.如權(quán)利要求2所述的雙層復(fù)合再生膜，其特征在于:所述藥物選自紫杉醇、阿霉素、鏈霉素、頭抱拉定、慶大霉素、乙酸螺旋霉素、紅霉素、白霉素、阿旲西林、土霉素、卡那霉素、青霉素、甲硝唑、 丹參素、新霉素、核糖霉素、四環(huán)素、萬古霉素、阿奇霉素中的一種或多種的組合。
6.如權(quán)利要求1飛中任一項(xiàng)所述的雙層復(fù)合再生膜，其制備方法包括以下步驟: 步驟1，纖維增強(qiáng)致密層的制備，進(jìn)一步包括以下工藝: 用有機(jī)酸溶解膠原形成膠原溶液，將膠原溶液注入到模具中，然后冷凍干燥，制備膠原海綿膜； 用可降解高分子纖維編織成網(wǎng)作為增強(qiáng)層；以及 把制備好的膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)層疊壓制形成由可降解高分子纖維網(wǎng)與膠原膜復(fù)合的可降解醫(yī)用高分子纖維增強(qiáng)的致密層； 步驟2，疏松層的制備，進(jìn)一步包括以下工藝: 用有機(jī)酸溶解選自殼聚糖，絲素蛋白，角質(zhì)蛋白，膠原蛋白聚合物中的一種或幾種形成溶液；以及 將所得的溶液注入模具中，然后冷凍干燥，制備疏松層膠原海綿； 步驟3，致密層和疏松層進(jìn)行復(fù)合形成雙層復(fù)合再生膜。
7.如權(quán)利要求6所述雙層復(fù)合再生膜的制備方法，其特征在于:步驟I中，所述膠原溶液為I型膠原蛋白，或I型膠原蛋白中含有少量III型膠原蛋白溶解于有機(jī)酸中形成的溶液；所述膠原溶液中進(jìn)一步復(fù)合有藥物和/或納米銀粒子。
8.如權(quán)利要求7所述雙層復(fù)合再生膜的制備方法，其特征在于:步驟I中，膠原溶液的質(zhì)量體積比濃度范圍為0.廣2%，粘度系數(shù)為lOOOlOOOcp ;在膠原溶液中所述藥物的濃度為10_，20mmol/L，納米銀的濃度為4(T800ppm ;膠原海綿膜和可降解高分子纖維網(wǎng)層疊后，最上層和最下層為膠原海綿膜，然后放入平板之間壓制形成一定厚度的致密層。
9.如權(quán)利要求6所述雙層復(fù)合再生膜的制備方法，其特征在于:步驟2中，所述溶液注入模具之前進(jìn)一步復(fù)合一定量的選自透明質(zhì)酸，復(fù)合硫酸軟骨素，鈣鹽，BMP生長(zhǎng)因子中的一種或幾種物質(zhì)；溶液中所述殼聚糖的質(zhì)量體積比濃度為0.廣3%，絲素蛋白的質(zhì)量體積比濃度為0.2飛％，角質(zhì)蛋白的質(zhì)量體積比濃度為0.廣8%，膠原蛋白聚合物的質(zhì)量體積比濃度為0.廣2%，透明質(zhì)酸的質(zhì)量體積比濃度為0.05^1.5%，硫酸軟骨素的質(zhì)量體積比濃度為0.05、.3%，鈣鹽的質(zhì)量體積比濃度為0.05 3% ；BMP生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積比濃度為.0.00001 0.015%。
10.如權(quán)利要求6所述雙層復(fù)合再生膜的制備方法，其特征在于:所述步驟3中，是將纖維增強(qiáng)致密層進(jìn)行高溫交聯(lián)、疏松層進(jìn)行高溫交聯(lián)和化學(xué)交聯(lián)，然后對(duì)交聯(lián)的疏松層進(jìn)行清洗，冷凍干燥；最后進(jìn)行致密層和疏松層的復(fù)合，從而獲得雙層復(fù)合再生膜；致密層和疏松層復(fù)合的操作方法是在致密層的一面涂覆一層步驟I所制備的膠原溶液，然后放上疏松層、冷凍 干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種雙層復(fù)合再生膜及其制備方法。再生膜包括致密層和疏松層，致密層由可降解高分子纖維網(wǎng)復(fù)合膠原膜，或復(fù)合膠原和納米銀粒子，或復(fù)合膠原和治療效果的藥物而形成；疏松層是由選自殼聚糖，絲素蛋白，角質(zhì)蛋白，或膠原蛋白中的一種或幾種作為基體材料而構(gòu)成。該制備方法主要包括纖維增強(qiáng)致密層的制備；疏松層的制備以及復(fù)合形成引導(dǎo)膜的制備等步驟。本發(fā)明的再生膜具有良好生物相容性和力學(xué)性能，生物可降解性能，免疫排斥反應(yīng)較低、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。該材料廣泛用于組織修復(fù)，尤其是骨組織和牙周組織的修復(fù)。
文檔編號(hào)A61K31/12GK103191085SQ20121000450
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2012年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月9日
發(fā)明者佘振定, 江宇 申請(qǐng)人:深圳蘭度生物材料有限公司