專利名稱：用于分離原代脂肪干細(xì)胞的儲(chǔ)脂桶及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種儲(chǔ)脂桶及其使用方法，特別是涉及一種用于從脂肪組織分離原代脂肪干細(xì)胞的儲(chǔ)脂桶及其使用方法，本發(fā)明還涉及一種包括儲(chǔ)脂桶的吸脂機(jī)。
背景技術(shù)：
在整形外科醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，吸脂術(shù)的出現(xiàn)為廣大患者和愛美人士帶來了健康和美麗。負(fù)壓吸脂機(jī)是該項(xiàng)手術(shù)的必備設(shè)備，術(shù)中脂肪被吸入到該設(shè)備的儲(chǔ)脂桶中，這些被吸出的脂肪中含有大量的原代脂肪干細(xì)胞，是研究原代脂肪干細(xì)胞的絕好細(xì)胞來源。目前常規(guī)的儲(chǔ)脂桶僅是一個(gè)普通的桶狀物，提取原代脂肪干細(xì)胞要經(jīng)過多個(gè)洗滌、消化和分離步驟，轉(zhuǎn)移數(shù)個(gè)容器后才能實(shí)現(xiàn)，這導(dǎo)致原代脂肪干細(xì)胞的提取費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且可能存在潛在的污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明正是基于上面的考慮而做出。根據(jù)本發(fā)明的一方面，用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細(xì)胞的儲(chǔ)脂桶包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側(cè)壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細(xì)胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個(gè)底部開口，該至少一個(gè)底部開口是可閉合的，用于排出本體內(nèi)的容納物。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提出一種包括上述儲(chǔ)脂桶的吸脂機(jī)。根據(jù)本發(fā)明的又 一方面，提出一種上述儲(chǔ)脂桶的使用方法，包括如下步驟:將脂肪組織通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口收集到儲(chǔ)脂桶的本體中；通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液，充分蕩洗，之后靜置；打開儲(chǔ)脂桶的至少一個(gè)底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液；重復(fù)上述步驟，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止；通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲(chǔ)脂桶置于恒溫?fù)u床，進(jìn)行消化，之后靜置；打開儲(chǔ)脂桶的至少一個(gè)底部開口，放出下層含細(xì)胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細(xì)胞。根據(jù)本發(fā)明，利用脂肪組織密度小，總是浮在水溶液上層的特點(diǎn)，在儲(chǔ)脂桶的底部設(shè)置至少一個(gè)底部開口，就可以實(shí)現(xiàn)只使用一個(gè)容器，便捷地完成洗滌、消化和提取原代脂肪干細(xì)胞的操作。由于無需二次更換容器，這樣既方便了操作，又避免了更換容器可能造成的污染，提高了科學(xué)研究的準(zhǔn)確性，同時(shí)還節(jié)省了科研成本，減少了醫(yī)療垃圾的產(chǎn)生，利于環(huán)保。


圖1是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第一實(shí)施例的示意圖。圖2是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第二實(shí)施例的示意圖。圖3是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第三實(shí)施例的示意圖。
圖4是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第四實(shí)施例的示意圖。
具體實(shí)施例方式下面參照附圖詳細(xì)描述本發(fā)明的用于從脂肪組織分離原代脂肪干細(xì)胞的儲(chǔ)脂桶。圖1是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第一實(shí)施例的示意圖。根據(jù)該實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶10包括本體11，本體11用于接收并容納脂肪組織，例如在吸脂術(shù)中用負(fù)壓吸脂機(jī)吸出的脂肪組織。本體11可以是任何形狀，例如圓筒形、方形等。該本體11具有頂部、側(cè)壁和底部。本體11的頂部可以是開放的，也可以具有蓋12，用于覆蓋本體11的空腔，蓋12上設(shè)置有開口 13，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細(xì)胞的試劑通過開放的頂部或蓋12上的開口 13注入到本體中。在該實(shí)施例中，本體11的側(cè)壁基本上平行于本體的縱向軸線，即，本體11具有恒定的橫向尺寸。本體11的底表面上設(shè)置有用于排出本體內(nèi)的容納物的可閉合的底部開口 14。雖然該實(shí)施例示出了一個(gè)底部開口 14，但是也可以根據(jù)具體情況在適當(dāng)?shù)奈恢迷O(shè)置多個(gè)底部開口 14，以便順利且有效地排出位于本體11底部的容納物。圖2是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第二實(shí)施例的示意圖。根據(jù)該實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶20包括本體21，與第一實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶10不同的是，至少一個(gè)可閉合的底部開口 24設(shè)置在本體21的側(cè)壁與底表面接合的位置。圖3是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第三實(shí)施例的示意圖。根據(jù)該實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶30包括本體31與第一實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶10不同的是本體31的橫向尺寸(寬度)從頂部到底部逐漸減小。根據(jù)該實(shí)施例，儲(chǔ)脂桶30中的容納物能夠通過底部開口可控地、精確地排出。圖4是本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶的第四實(shí)施例的示意圖。根據(jù)該實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶40包括本體41，與第一實(shí)施例的儲(chǔ)脂桶10不同的是，本體41的橫向尺寸在頂部附近是恒定的，而在底部附近逐漸減小。根據(jù)該實(shí)施例，能夠在本體不占用過大空間的情況下，使儲(chǔ)脂桶40中的容納物通過底部 開口可控地、精確地排出。在上述各實(shí)施例中，可閉合的底部開口可通過各種方式實(shí)現(xiàn)，例如，操作旋轉(zhuǎn)開關(guān)或撥動(dòng)開關(guān)使一擋片遮蔽/打開底部開口，又例如，將一閥門裝置連接于底部開口，通過閥門的操作實(shí)現(xiàn)底部開口的打開/閉合。在儲(chǔ)脂桶的底部設(shè)置有向下突出的開關(guān)或閥門的情況下，可以有選擇地用托架將儲(chǔ)脂桶支起或者使本體的側(cè)壁和底部圍成一凹部以容置所述開關(guān)或閥門。在上述各實(shí)施例中，本體可以由樹脂或金屬制成，可選擇的蓋也可以由樹脂或金屬制成。優(yōu)選地，本體由透明/半透明的樹脂制成；優(yōu)選地，在本體的側(cè)壁上設(shè)置有刻度布置。在本體由金屬制成時(shí)，可以在本體的側(cè)壁上設(shè)置觀察窗口和刻度布置。下面描述使用上述的儲(chǔ)脂桶分離出脂肪干細(xì)胞的方法。首先，將脂肪組織通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口收集到儲(chǔ)脂桶的本體中。然后，通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液(PBS)，并充分蕩洗。之后，靜置I分鐘，這時(shí)桶中溶液將分為兩層，下層為磷酸鹽緩沖液，上層為黃色脂肪組織，由于脂肪組織中含有紅細(xì)胞，磷酸鹽緩沖液洗滌后顏色變?yōu)榈t色。然后，打開儲(chǔ)脂桶的底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液。重復(fù)以上步驟，例如3-5次，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止。然后，通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲(chǔ)脂桶置于37°C恒溫?fù)u床，消化一段時(shí)間，例如30分鐘。之后，靜置I分鐘，這時(shí)桶中溶液將分為兩層，下層為I型膠原酶消化液，消化出的人脂肪干細(xì)胞即沉淀于其中，上層為黃色脂肪組織，可以看到部分脂肪組織被消化，脂肪層體積減小。隨后，打開儲(chǔ)脂桶的底部開口，放出下層含細(xì)胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細(xì)胞。此后，再通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，并重復(fù)以上消化步驟3-5次，直到脂肪組織消化殆盡。最后，收集離心得到的人脂肪干細(xì)胞，置于培養(yǎng)皿中培養(yǎng)、擴(kuò)增，常規(guī)方法純化、鑒定后用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)等。磷酸鹽緩沖液(PBS)是由適量氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鉀配置成的平衡緩沖液，PH值為7.4，具體配方為NaCl:8克，KCl:0.20克，Na2HPO4:3.49克，KH2PO4:
0.20克，加入蒸餾水中，定容為I升，0.22微米濾膜過濾除菌。市售I型膠原酶(粉狀)以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%溶解于磷酸鹽緩沖液中，0.22微米濾膜過濾除菌，即成為I型膠原酶消化液，用于消化脂肪組織。常規(guī)酶消化法分離人脂肪干細(xì)胞的步驟復(fù)雜，每一次沖洗、消化脂肪組織后都要更換一次容器，既增加了操作步驟和污染的風(fēng)險(xiǎn)，還造成了不必要的浪費(fèi)。采用本發(fā)明的儲(chǔ)脂桶可以極大地簡化分離原代人脂肪干細(xì)胞的步驟，并且節(jié)約實(shí)驗(yàn)容器的用量，減少了實(shí)驗(yàn)廢棄物的產(chǎn)生，有利于環(huán)保。雖然已經(jīng)結(jié)合具體實(shí)施例詳細(xì)地描述了本發(fā)明，但是顯然地，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的條件下，本領(lǐng) 域技術(shù)人員可以做各種改變和變型。
權(quán)利要求
1.一種儲(chǔ)脂桶，用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細(xì)胞，包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側(cè)壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細(xì)胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個(gè)底部開口，該至少一個(gè)底部開口是可閉合的，用于排出本體內(nèi)的容納物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的儲(chǔ)脂桶，其中，儲(chǔ)脂桶還包括蓋，所述頂部開口設(shè)置在蓋上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的儲(chǔ)脂桶，其中，所述至少一個(gè)底部開口設(shè)置在本體的底表面上或者設(shè)置在本體的側(cè)壁與底表面接合的位置。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，本體的側(cè)壁具有恒定的橫向尺寸或者具有從頂部到底部逐漸減小的橫向尺寸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，本體的側(cè)壁在頂部附近具有恒定的橫向尺寸，而在底部附近具有逐漸減小的橫向尺寸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，儲(chǔ)脂桶的本體由透明/半透明樹脂制成，并且其上設(shè)置有刻度布置。`
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，儲(chǔ)脂桶的本體由金屬制成，并且其上設(shè)置有觀察窗口和刻度布置。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，所述至少一個(gè)底部開口通過可操縱的擋片打開/閉合。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶，其中，所述至少一個(gè)底部開口連接到閥門。
10.一種吸脂機(jī)，包括根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶。
11.權(quán)利要求ι- ο中任一項(xiàng)的儲(chǔ)脂桶的使用方法，包括如下步驟: 將脂肪組織通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口收集到儲(chǔ)脂桶的本體中； 通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液，充分蕩洗，之后靜置； 打開儲(chǔ)脂桶的至少一個(gè)底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液； 重復(fù)上述步驟，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止； 通過儲(chǔ)脂桶的頂部開口向儲(chǔ)脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲(chǔ)脂桶置于37°c恒溫?fù)u床，進(jìn)行消化，之后靜置； 打開儲(chǔ)脂桶的至少一個(gè)底部開口，放出下層含細(xì)胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細(xì)胞的儲(chǔ)脂桶及其使用方法以及吸脂機(jī)。儲(chǔ)脂桶包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側(cè)壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細(xì)胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個(gè)底部開口，該至少一個(gè)底部開口是可閉合的，用于排出本體內(nèi)的容納物。使用該儲(chǔ)脂桶分離原代脂肪干細(xì)胞，無需二次更換容器，既方便了操作，又避免了中間環(huán)節(jié)可能造成的污染，提高了科學(xué)研究的準(zhǔn)確性，還節(jié)省了科研成本，減少了實(shí)驗(yàn)垃圾的產(chǎn)生，利于環(huán)保。
文檔編號(hào)A61M1/00GK103203043SQ20121000808
公開日2013年7月17日 申請(qǐng)日期2012年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月12日
發(fā)明者劉云松, 趙彥 申請(qǐng)人:劉云松, 趙彥