專利名稱：柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，屬于一種絲膠蛋白的加工方法。
背景技術(shù)：
羥基磷灰石(Caltl (PO4) 6 (OH)2,簡(jiǎn)稱HA)是天然骨的主要成分，具有良好的生物相容性和生物活性，能誘導(dǎo)新骨的形成并為其提供支架，能與骨組織直接形成良好的骨性結(jié)合， 是理想的骨組織替換材料。但純羥基磷灰石較脆且生物降解性差，從而限制了其在骨組織工程領(lǐng)域的應(yīng)用。而羥基磷灰石與有機(jī)高分子材料復(fù)合，可有效地改善羥基磷灰石的力學(xué)和生物降解性能。如
公開日為2010年08月04日，公開號(hào)為CN101791438A的中國(guó)專利中，公開了一
種骨修復(fù)用生物活性聚(乳酸-羥基乙酸)/膠原/羥基磷灰石復(fù)合纖維膜的制備方法，該制備方法的步驟包括將聚(乳酸-羥基乙酸)電紡納米纖維膜經(jīng)等離子體處理后涂層膠原，然后將其浸入模擬人體生理體液中礦化，獲得聚(乳酸-羥基乙酸)/膠原/羥基磷灰石復(fù)合纖維膜。該方法雖然能夠解決羥基磷灰石較脆且生物降解性差的問題，但是，該方法是先配置膠原乙醇溶液，然后需要采用等離子體處理方法將膠原引到聚(乳酸-羥基乙酸) 電紡納米纖維中，工藝較為復(fù)雜，生產(chǎn)成本較高。又如
公開日為2010年04月14日，公開號(hào)為CN101693126A的中國(guó)專利中，公開了
一種骨修復(fù)用聚(乳酸-羥基乙酸)/羥基磷灰石納米纖維復(fù)合支架的制備方法，該制備方法包括如下步驟將羥基磷灰石納米顆粒加入到四氫呋喃和二甲基甲酰胺的混合溶劑中， 然后加入聚(乳酸-羥基乙酸)，得到羥基磷灰石與聚(乳酸-羥基乙酸)的混合液，將混合液進(jìn)行靜電紡絲，獲得骨修復(fù)用聚(乳酸-羥基乙酸)/羥基磷灰石納米纖維復(fù)合膜支架。該方法雖然也能夠克服羥基磷灰石較脆且生物降解性差的缺陷，但是，該方法主要用于制備復(fù)合膜支架，而且制備工藝也較為復(fù)雜。絲膠蛋白(sericin)是一種具有良好生物相容性、生物降解性和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)等性能的天然有機(jī)高分子材料，絲膠蛋白中含有大量的羧基和羥基，能與Ca2+緊密結(jié)合，誘導(dǎo)羥基磷灰石礦化結(jié)晶，自組裝形成絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合材料。但是，目前還沒有一種工藝簡(jiǎn)單，制備條件溫和，生產(chǎn)周期短以及生產(chǎn)過(guò)程綠色環(huán)保的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，而提供一種工藝簡(jiǎn)單，制備條件溫和，生產(chǎn)周期短以及生產(chǎn)過(guò)程綠色環(huán)保的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法。本發(fā)明解決上述問題所采用的技術(shù)方案是該柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法的特點(diǎn)在于該方法依次包括如下步驟(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜；
(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35-45%的乙醇溶液中， 7-15min后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜；
(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1-2倍人體仿生液中，然后在溫度 35-39°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜；
(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本發(fā)明通過(guò)將絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上的方式來(lái)制作絲膠蛋白膜，工藝簡(jiǎn)單，制作容易，有利于方便的控制絲膠蛋白膜的厚度；本發(fā)明中的絲膠蛋白膜經(jīng)乙醇處理后，絲膠蛋白膜不僅能保持良好的形狀，還會(huì)產(chǎn)生優(yōu)良的柔性，有利于絲膠蛋白膜在生物材料領(lǐng)域的應(yīng)用，克服了絲膠蛋白膜烘干后易溶于水以及難以利用的缺陷；本發(fā)明以乙醇處理絲膠蛋白膜為模板，通過(guò)仿生液浸漬礦化處理制備柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜，拓展了絲膠蛋白膜的應(yīng)用領(lǐng)域，具有制備工藝簡(jiǎn)單，條件溫和，時(shí)間短以及綠色環(huán)保等特點(diǎn)，獲得的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜具有良好的柔性，克服了純羥基磷灰較脆的缺陷，羥基磷灰石晶體在該復(fù)合膜中呈現(xiàn)立體結(jié)構(gòu)，有利于細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)，該柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(1)中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理20-40min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為6%-1洲的絲膠蛋白溶液。由此使得本發(fā)明中的絲膠蛋白溶液的制備更加方便，性能更加可靠。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(2)中制得的乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為85-95um。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(3)中，乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3-7天，每天更換人體仿生液。由此使得本發(fā)明對(duì)乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的效果更好，制備而成的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的質(zhì)量更好。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(2)中，將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，IOmin后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜。由此使得本發(fā)明制備而成的乙醇處理絲膠蛋白膜的性能更加可靠。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(3)中，將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入 1. 5倍人體仿生液中，然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜。由此使得本發(fā)明制備而成的礦化處理絲膠蛋白膜的性能更加可靠。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述脫膠處理的時(shí)間為30min，所述制備而成的絲膠蛋白溶液的質(zhì)量濃度為8%。由此使得本發(fā)明制備而成的絲膠蛋白溶液的性能更加可靠。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(3)中所用的1.5倍人體仿生液包括以下濃度的離子 213.0 讓01/1的恥+，7.5 mmol/L 的 K+，2. 3 mmol/L 的Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+，221. 7 mmol/ L 的 Cl_，6. 3 mmol/L 的 HC03_，1. 5 mmol/L 的 HP042_，0. 8 mmol/L 的 S042_。由此使得本發(fā)明CN 102526801 A
對(duì)乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的效果更好。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果烘干絲膠蛋白膜易溶于水，難以利用，但經(jīng)乙醇處理后，絲膠蛋白膜不僅能保持良好的形狀，還會(huì)產(chǎn)生優(yōu)良的柔性，有利于絲膠蛋白膜在生物材料領(lǐng)域的應(yīng)用。本發(fā)明以乙醇處理絲膠蛋白膜為模板，通過(guò)仿生液浸漬礦化處理制備柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜，拓展了絲膠蛋白膜的應(yīng)用領(lǐng)域，具有制備工藝簡(jiǎn)單，條件溫和，時(shí)間短以及綠色環(huán)保等特點(diǎn)。本發(fā)明獲得的絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜材料具有良好的柔性，改善了純羥基磷灰較脆的缺點(diǎn)；羥基磷灰石晶體在柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜中呈現(xiàn)立體結(jié)構(gòu)， 有利于細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)；本發(fā)明制備而成的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜中，羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。本發(fā)明的工藝簡(jiǎn)單，操作容易，制備而成的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的性能可靠。


圖1是本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3中乙醇處理絲膠膜的表面結(jié)構(gòu)示意圖。圖2是本發(fā)明實(shí)施例1中礦化3天制備而成的柔性絲膠蛋白的表面結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是本發(fā)明實(shí)施例2中礦化5天制備而成的柔性絲膠蛋白的表面結(jié)構(gòu)示意圖。圖4是本發(fā)明實(shí)施例3中礦化7天制備而成的柔性絲膠蛋白的表面結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖并通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的解釋而本發(fā)明并不局限于以下實(shí)施例。實(shí)施例1。參見圖1和圖2，本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、量取一定量的絲膠蛋白溶液平鋪在聚乙烯(PE)板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于25°C的室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例步驟(1)中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的a、先將家蠶繭層切成碎片，家蠶繭層碎片的面積約為Icm2，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，浴比為1:30 ；b、家蠶繭層碎片在沸水中經(jīng)脫膠處理 30min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液；C、采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，調(diào)整獲得濃度為8%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入40%乙醇溶液中，IOmin后取出，獲得乙醇處理絲膠蛋白膜，該膜的厚度為90士5um，其表面顯微結(jié)構(gòu)如附圖1所示。
/羥基磷灰石復(fù)合膜 /羥基磷灰石復(fù)合膜 /羥基磷灰石復(fù)合膜
(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.5倍人體仿生液中，然后在溫度37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理，乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3天，每天更換人體仿生液，從而得到礦化處理3天的礦化處理絲膠蛋白膜。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于25°C的室溫條件下自然干燥，從而得到礦化處理3天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本實(shí)施例中制備而成的礦化處理3天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的彈性模量為4. 03士 1. 32，具有一定的柔性；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體沉積覆蓋在絲膠蛋白膜表面，略呈立體結(jié)構(gòu)，如附圖2所示；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。實(shí)施例2。參見圖1和圖3，本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、量取一定量的絲膠蛋白溶液平鋪在聚乙烯(PE)板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于25°C的室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例步驟(1)中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的a、先將家蠶繭層切成碎片，家蠶繭層碎片的面積約為Icm2，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，浴比為1:30 ；b、家蠶繭層碎片在沸水中經(jīng)脫膠處理 30min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液；C、采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，調(diào)整獲得濃度為8%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入40%乙醇溶液中，IOmin后取出，獲得乙醇處理絲膠蛋白膜，該膜的厚度為90士5um，其表面顯微結(jié)構(gòu)如附圖1所示。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.5倍人體仿生液中，然后在溫度37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理，乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為5天，每天更換人體仿生液，從而得到礦化處理5天的礦化處理絲膠蛋白膜。本實(shí)施例所用的1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L 的 K+，2. 3 mmol/L 的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+，221. 7 mmol/L 的 Cl、6. 3 mmol/L 的 HC03_，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042_，0· 8 mmol/L 的 S042—。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于25°C的室溫條件下自然干燥，從而得到礦化處理5天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本實(shí)施例中制備而成的礦化處理5天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的彈性模量為23. 02士 10. 83，具有一定的柔性；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體沉積覆蓋在絲膠蛋白膜表面，呈明顯的立體結(jié)構(gòu)，晶體中還含有大量孔洞結(jié)構(gòu)，如附圖3所示；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。實(shí)施例3。
參見圖1和圖4，本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、量取一定量的絲膠蛋白溶液平鋪在聚乙烯(PE)板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于25°C的室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例步驟(1)中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的a、先將家蠶繭層切成碎片，家蠶繭層碎片的面積約為Icm2，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，浴比為1:30 ；b、家蠶繭層碎片在沸水中經(jīng)脫膠處理 30min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液；C、采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，調(diào)整獲得濃度為8%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入40%乙醇溶液中，IOmin后取出，獲得乙醇處理絲膠蛋白膜，該膜的厚度為90士5um，其表面顯微結(jié)構(gòu)如附圖1所示。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.5倍人體仿生液中，然后在溫度37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理，乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為7天，每天更換人體仿生液，從而得到礦化處理7天的礦化處理絲膠蛋白膜。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于25°C的室溫條件下自然干燥，從而得到礦化處理7天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本實(shí)施例中制備而成的礦化處理7天的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的彈性模量為57. 02士 1.04，具有一定的柔性；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體沉積覆蓋在絲膠蛋白膜表面，呈規(guī)則的圓球形及明顯的立體結(jié)構(gòu)，如附圖4所示；該復(fù)合膜中的羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。實(shí)施例4。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 30min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為8%的絲膠蛋白溶液。本發(fā)明中對(duì)家蠶繭層的碎片進(jìn)行脫膠處理的時(shí)間通常為20-40min，制備而成的絲膠蛋白溶液的質(zhì)量濃度通常為6%_12%。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，IOmin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為90um。通常情況下，本實(shí)施例將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35-45%的乙醇溶液中，7-15min后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜。本發(fā)明中乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度通常為85-95um。由于烘干的絲膠蛋白膜易溶于水，難以利用，本實(shí)施例將干的絲膠蛋白膜經(jīng)乙醇處理后，絲膠蛋白膜不僅能保持良好的形狀，還會(huì)產(chǎn)生優(yōu)良的柔性，有利于絲膠蛋白膜在生物材料領(lǐng)域的應(yīng)用。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1. 5倍人體仿生液中，該1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L的K+，2. 3 mmol/L的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+，221. 7 mmol/L 的 Cl—, 6. 3 mmol/L 的 HC03_，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042—， 0.8 mmol/L的S042—。然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3天，每天更換人體仿生液。本發(fā)明中的處理時(shí)間通常為3-7 天。本發(fā)明的步驟(3)中，通常將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1-2倍人體仿生液中，然后在溫度35-39°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本實(shí)施例以乙醇處理絲膠蛋白膜為模板，通過(guò)仿生液浸漬礦化處理制備柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜，拓展了絲膠蛋白膜的應(yīng)用領(lǐng)域，具有制備工藝簡(jiǎn)單，條件溫和， 時(shí)間短以及綠色環(huán)保等特點(diǎn)。本實(shí)施例制得的絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜材料具有良好的柔性，改善了純羥基磷灰較脆的缺點(diǎn)；羥基磷灰石晶體在柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜中呈現(xiàn)立體結(jié)構(gòu)，有利于細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)；本發(fā)明制備而成的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜中，羥基磷灰石晶體屬于弱結(jié)晶范疇，與人體骨中HA的結(jié)晶態(tài)相似，有利于新骨的形成。實(shí)施例5。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的質(zhì)量濃度為6%的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本發(fā)明在步驟(1)中所說(shuō)的“一定量”對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)為公知常識(shí)，通常指平鋪到聚乙烯板上的絲膠蛋白溶液的厚度在50-160um之間，故此處不再對(duì)“一定量” 進(jìn)行詳述。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，15min 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為85um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.5倍人體仿生液中，然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為4天， 每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例6。
(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 20min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為10%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為45%的乙醇溶液中，7min 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為95um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1. 5倍人體仿生液中，該1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L的K+，2. 3 mmol/L的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+, 221. 7 mmol/L 的 Cl、6. 3 mmol/L 的 HCOf，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042、 0.8 mmol/L的S042—。然后在溫度為39°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為39°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為5天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例7。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的質(zhì)量濃度為12%的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35%的乙醇溶液中，15min 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為90um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1倍人體仿生液中，然后在溫度為35°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為35°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為6天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例8。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的質(zhì)量濃度為9%的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為38%的乙醇溶液中，iaiiin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為92um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入2倍人體仿生液中，然后在溫度為38°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為38°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為7天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例9。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 40min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為7%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為42%的乙醇溶液中，Smin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為89um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1. 5倍人體仿生液中，該1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L的K+，2. 3 mmol/L的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+, 221. 7 mmol/L 的 Cl、6. 3 mmol/L 的 HCOf，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042、 0.8 mmol/L的S042—。然后在溫度為36°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為36°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為7天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例10。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，Ilmin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為88um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.6倍人體仿生液中，然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3天， 每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例11。
本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的質(zhì)量濃度為10%的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為38%的乙醇溶液中，iaiiin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為94um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.4倍人體仿生液中，然后在溫度為38°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為38°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為5天， 每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例12。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35%的乙醇溶液中，Hmin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為85um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.5倍人體仿生液中，然后在溫度為37. 5°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37. 5°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為 7天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例13。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 25min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為9%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為45%的乙醇溶液中，9min 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為95um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.8倍人體仿生液中，然后在溫度為36. 8°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為36. 8°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為6天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例14。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，Ilmin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為88um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.7倍人體仿生液中，然后在溫度為37. 2°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37. 2°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為 4天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例15。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 35min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為9. 5%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為38%的乙醇溶液中，i;3min 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為94um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1.4倍人體仿生液中，然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3天， 每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。實(shí)施例16。本實(shí)施例中柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法依次包括如下步驟。(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜。本實(shí)施例中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 25min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為10%的絲膠蛋白溶液。(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，IOmin 后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜，該乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為91um。(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1. 5倍人體仿生液中，該1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L的K+，2. 3 mmol/L的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+, 221. 7 mmol/L 的 Cl、6. 3 mmol/L 的 HCOf，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042、 0.8 mmol/L的S042—。然后在溫度為37. 1°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜，本實(shí)施例中乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37. 1°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為5天，每天更換人體仿生液。(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。雖然本發(fā)明已以實(shí)施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，任何熟悉該項(xiàng)技術(shù)的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和范圍內(nèi)所作的更動(dòng)與潤(rùn)飾，均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于該方法依次包括如下步驟(1)、將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后將該平鋪有絲膠蛋白溶液的聚乙烯板置于室溫條件下進(jìn)行自然干燥，從而將絲膠蛋白溶液制成絲膠蛋白膜；(2)、將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35-45%的乙醇溶液中， 7-15min后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜；(3)、將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1-2倍人體仿生液中，然后在溫度 35-39°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜；(4)、將步驟(3)制得的礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，以洗去吸附在礦化處理絲膠蛋白膜上的可溶性鹽，然后將礦化處理絲膠蛋白膜置于室溫條件下自然干燥，從而得到柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中所用的絲膠蛋白溶液是采用以下步驟制備而成的先將家蠶繭層切成碎片，然后將家蠶繭層的碎片用去離子水清洗干凈后置于沸水中進(jìn)行脫膠處理，脫膠處理 20-40min后，用紗布過(guò)濾除雜，獲得絲膠蛋白母液，最后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對(duì)絲膠蛋白母液進(jìn)行濃縮，從而得到質(zhì)量濃度為6%-12%的絲膠蛋白溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中制得的乙醇處理絲膠蛋白膜的厚度為85-95um。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中，乙醇處理絲膠膜進(jìn)行礦化處理的條件如下處理溫度為37°C，振蕩速度為60轉(zhuǎn)/min，處理時(shí)間為3-7天，每天更換人體仿生液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中，將步驟(1)制得的絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為40%的乙醇溶液中，IOmin后取出絲膠蛋白膜得到乙醇處理絲膠蛋白膜。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中，將步驟(2)制得的乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1. 5倍人體仿生液中， 然后在溫度為37°C的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于 所述脫膠處理的時(shí)間為30min，所述制備而成的絲膠蛋白溶液的質(zhì)量濃度為8%。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，其特征在于 所述步驟(3)中所用的1. 5倍人體仿生液包括以下濃度的離子213. 0 mmol/L的Na+，7. 5 mmol/L 的 K+，2. 3 mmol/L 的 Mg2+，3. 8 mmol/L 的 Ca2+，221. 7 mmol/L 的 Cl、6. 3 mmol/L 的 HC03_，1. 5 mmol/L 的 ΗΡ042_，0· 8 mmol/L 的 S042—。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法，目前還沒有一種制備條件溫和，生產(chǎn)周期短以及生產(chǎn)過(guò)程綠色環(huán)保的柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的制備方法。本發(fā)明包括如下步驟將一定量的絲膠蛋白溶液平鋪到聚乙烯板上，然后在室溫條件下自然干燥，制成絲膠蛋白膜；將絲膠蛋白膜浸入體積百分濃度為35-45%的乙醇溶液中，7-15min后取出得到乙醇處理絲膠蛋白膜；將乙醇處理絲膠蛋白膜浸入1-2倍人體仿生液中，在35-39℃的恒溫培養(yǎng)箱中礦化處理得到礦化處理絲膠蛋白膜；將礦化處理絲膠蛋白膜用去離子水清洗數(shù)次，自然干燥得柔性絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本發(fā)明制備條件溫和，生產(chǎn)周期短和生產(chǎn)過(guò)程綠色環(huán)保。
文檔編號(hào)A61L27/32GK102526801SQ20121003817
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2012年2月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月20日
發(fā)明者張海萍, 朱良均, 楊明英, 王雪云, 閔思佳 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)