專(zhuān)利名稱(chēng)：改善基于葉酸類(lèi)化合物的受體型靶向制劑靶向效果的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種增加基于葉酸類(lèi)化合物的主動(dòng)靶向制劑中靶向基團(tuán)即葉酸類(lèi)化合物基團(tuán)在外水相的分布，進(jìn)而改善制劑主動(dòng)靶向效果的方法。
背景技術(shù)：
葉酸(FA)可還原為四氫葉酸，后者是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶，參與一碳單位代謝和嘌呤、胸腺嘧啶的從頭合成。葉酸受體在正常組織中的表達(dá)高度保守，只在肺、腎、脈絡(luò)膜和胎盤(pán)中有低至中等水平表達(dá)，且以β亞型為主，但在大部分惡性腫瘤中，如卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌、腎癌、乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌和鼻咽癌中均高度表達(dá)，有時(shí)可比正常組織高出100 300倍，且正常組織中葉酸受體主要定位于極化上皮尖端表面，血循環(huán)中葉酸復(fù)合物無(wú)法與其接觸。迄今為止的研究結(jié)果表明，葉酸通過(guò)其羧基與藥物載體系統(tǒng)連接形成葉酸復(fù)合物后，其與細(xì)胞表面受體親和力基本保持不變，克服了遞藥系統(tǒng)在生理狀態(tài)下難以穿透細(xì)胞膜的問(wèn)題，確保了通過(guò)葉酸介導(dǎo)將遞藥系統(tǒng)輸送至腫瘤細(xì)胞內(nèi)。葉酸作為腫瘤細(xì)胞的尋靶分子，具有無(wú)免疫源性、易于修飾和價(jià)廉易得等優(yōu)勢(shì)，已成為介導(dǎo)遞藥系統(tǒng)主動(dòng)靶向腫瘤的研究熱點(diǎn)之Yuan H等制備了葉酸偶聯(lián)的紫杉醇脂質(zhì)體，改善了制劑的細(xì)胞攝取，但其直接將葉酸與脂肪酸相連接，中間沒(méi)有聚乙二醇鏈，制成的脂質(zhì)體在體內(nèi)代謝過(guò)快，不具備長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體延緩藥物代謝、增加體內(nèi)循環(huán)時(shí)間的特點(diǎn)，較大程度的影響了藥效的發(fā)揮?；谌~酸的靶向制劑經(jīng)過(guò)多年的改進(jìn)，現(xiàn)一般通過(guò)親水性直鏈高分子將葉酸分子間接連接在制劑表面而獲得受體型靶向制劑，該方法彌補(bǔ)了普通制劑靶向性不足、易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中巨噬細(xì)胞膜表面Fe受體識(shí)別而被迅速?gòu)难h(huán)系統(tǒng)清除的缺點(diǎn)，為將藥物高比例導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)提供了一種較為實(shí)用的抗腫瘤藥物祀向載體。Robert J. Lee等把葉酸接在與類(lèi)脂結(jié)合的PEG分子遠(yuǎn)端，使其從脂質(zhì)體上靈活地伸展，進(jìn)而將FA-PEG-脂質(zhì)體復(fù)合物導(dǎo)入靶細(xì)胞。該制劑可作為傳送化療藥物的有效載體，但該方法制備脂質(zhì)體，葉酸基團(tuán)在制備過(guò)程中會(huì)因?yàn)樽陨淼氖杷员话裼谥|(zhì)體磷脂雙分子層之間，進(jìn)而降低制劑的主動(dòng)革巴向能力OPedro M制備了 PLGA-PEG-FA修飾的納米粒，發(fā)現(xiàn)只有20%的葉酸基團(tuán)位于納米粒外水相中，其它80 %則包覆于納米粒的疏水內(nèi)核中，證明葉酸基團(tuán)本身的疏水性極大的影響了其在主動(dòng)靶向制劑上的應(yīng)用。制劑制備過(guò)程中雖然可以通過(guò)增加靶向材料的投料量來(lái)增加暴露在水相的葉酸靶頭的絕對(duì)數(shù)目，但是一方面靶向材料成本較高，另外，因?yàn)榍捌诓迦胫苿┲黧w的靶向材料會(huì)通過(guò)其PEG鏈或其他親水鏈的空間位阻阻礙后期靶向材料的插入，所以靶向材料的修飾量并不能隨意增加。因此，如何便捷高效的提高葉酸基團(tuán)在外水相的分布比例，目前已成為國(guó)內(nèi)外基于葉酸的主動(dòng)靶向制劑研究中亟待急待解決的問(wèn)題。中國(guó)專(zhuān)利(申請(qǐng)?zhí)?01110114306. 6)首先用磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-葉酸制備膠束，然后制備普通脂質(zhì)體并將兩者共同孵育，使膠束的磷脂酰乙醇胺基團(tuán)即磷脂基團(tuán)插入脂質(zhì)體的外層磷脂層，該融合過(guò)程可使葉酸基團(tuán)分布在脂質(zhì)體外，進(jìn)而更好的發(fā)揮
3葉酸的靶向能力。該專(zhuān)利較好的解決了葉酸受體靶向制劑經(jīng)典修飾方法中葉酸基團(tuán)大部分被包覆于制劑疏水內(nèi)核、無(wú)法暴露進(jìn)而影響與靶細(xì)胞表面受體發(fā)生相互作用的問(wèn)題，但該專(zhuān)利存在制備工藝繁瑣和孵育時(shí)磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-葉酸的磷脂酰乙醇胺基團(tuán)即磷脂基團(tuán)插入脂質(zhì)體效率有限的問(wèn)題。同時(shí)孵育法通用性非常有限，孵育法要求待修飾制劑主體表面為親水性和半固態(tài)，且靶向材料必須含有與制劑表面材料結(jié)構(gòu)完全相同或者具有高度親和力的基團(tuán)才能方便其插入、融合，以該專(zhuān)利為例，如果用于連接葉酸基團(tuán)的聚乙二醇鏈或其它親水鏈另一端連接的不是磷脂而是其他兩親性材料或者疏水性材料，則存在該材料與脂質(zhì)體磷脂層的親和性不強(qiáng)甚至無(wú)法插入的問(wèn)題，如果制劑表面為疏水性，制劑系統(tǒng)僅僅通過(guò)制劑個(gè)體間電荷斥力或其它作用力保持物理穩(wěn)定，或者制劑主體表面為固態(tài)，不具備恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性，則孵育法根本不能用于主動(dòng)靶向制劑的修飾，因?yàn)楹蟛迦脒@一關(guān)鍵過(guò)程根本無(wú)法實(shí)現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開(kāi)了一種增加基于葉酸的主動(dòng)靶向制劑中靶向基團(tuán)在外水相的分布，進(jìn)而改善制劑主動(dòng)靶向效果的方法。本發(fā)明的主要特點(diǎn)為在基于葉酸類(lèi)化合物的主動(dòng)靶向制劑制備過(guò)程中，含葉酸基團(tuán)的靶向材料和形成制劑主體的脂質(zhì)或高分子材料同時(shí)投料，共同參與制劑主體的自發(fā)形成，以弱堿性堿溶液作為外水相，從本質(zhì)上大幅增加葉酸類(lèi)化合物基團(tuán)的親水性，進(jìn)而使其在制劑主體自發(fā)形成過(guò)程中主動(dòng)分布于外水相，避免其因自身的疏水性被包埋于制劑主體的疏水部位，最終達(dá)到增強(qiáng)葉酸介導(dǎo)的主動(dòng)靶向效果的作用?；谌~酸的主動(dòng)靶向制劑的經(jīng)典制備方法為將脂質(zhì)材料和含葉酸基團(tuán)的靶向材料溶于有機(jī)溶劑，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入水相水合，探頭超聲，過(guò)濾除菌。本發(fā)明與普通制備方法的關(guān)鍵區(qū)別為不使用常用的水、滲透壓調(diào)節(jié)劑溶液或中性緩沖鹽溶液作為水相，而采用pH7. 5 10. O的弱堿性溶液。本發(fā)明的受體型靶向制劑的制備方法，包括將脂質(zhì)材料或高分子材料和含葉酸類(lèi)化合物基團(tuán)的靶向材料溶于有機(jī)溶劑，通過(guò)薄膜洗脫法、乙醇注入法、逆向蒸發(fā)法、透析法、乳化-溶劑揮發(fā)法或微乳法分散于水相，整粒后過(guò)濾除菌即得，制備載藥制劑之前，如藥物為脂溶性，則將藥物和脂質(zhì)材料或高分子材料一同溶于有機(jī)溶劑，如藥物為水溶性，則將藥物溶于水相，在上述制備中，關(guān)鍵是水相含路易斯堿，水相PH值保持在7. 5 10. O范圍內(nèi)。更優(yōu)選PH值為7. 8 8. 2。本發(fā)明方法制備的受體型靶向制劑能改善制劑主動(dòng)靶向效果。推測(cè)本發(fā)明的原理如下對(duì)靶向材料中葉酸基團(tuán)進(jìn)行極性化改造是從根本上解決葉酸基團(tuán)被包埋問(wèn)題的關(guān)鍵。在保持葉酸基團(tuán)空間構(gòu)象和化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的前提下，對(duì)其未取代的α游離羧基進(jìn)行改造是最簡(jiǎn)便可行的方法。ΡΗ7. 5 10. O的弱堿性水合介質(zhì)能使該α游離羧基離子化，使葉酸基團(tuán)由非極性轉(zhuǎn)為極性，大幅增強(qiáng)葉酸基團(tuán)自身親水性。以上理論由本發(fā)明首次提出。將含葉酸基團(tuán)的靶向材料和脂質(zhì)或高分子材料同時(shí)投料，共同參與制劑主體的自發(fā)形成，靶向材料的疏水基團(tuán)會(huì)和其他脂質(zhì)材料或高分子材料的疏水鏈段在水相通過(guò)疏水作用力相互吸引、自發(fā)聚集，并將PEG等親水鏈和親水性的改性葉酸基團(tuán)排擠到外水相，從根本上杜絕葉酸基團(tuán)在制劑疏水主體的包埋。以上設(shè)想經(jīng)Κ562細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)證明切實(shí)可行。關(guān)于外水相PH值范圍的選擇，制劑體系內(nèi)葉酸α羧基離子型數(shù)目和游離型數(shù)目的比值會(huì)隨外水相pH值的增加而增加,但該比值增加的速度會(huì)隨外水相pH 值的增加而迅速減小，即通過(guò)增加外水相pH值促進(jìn)α游離羧基離子化的效率會(huì)隨著外水相PH值的增加迅速變差，所以為了使葉酸的α游離羧基更完全地離子化，外水相應(yīng)具備較高、偏堿性的PH值，但不必過(guò)高，而且pH值過(guò)高會(huì)導(dǎo)致部分脂質(zhì)材料如磷脂的水解，結(jié)合制劑靜脈滴注時(shí)對(duì)血管刺激性的要求，我們?cè)囼?yàn)表明在PH7. 5 10. O的范圍能得到此效果， 更優(yōu)選PH7. 8 8. 2。對(duì)于pH值9. O 10. O的外水相，可采用堿性條件下化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定的高分子材料制備制劑。本發(fā)明相對(duì)于經(jīng)典的主動(dòng)靶向載體組裝方法，能簡(jiǎn)便的實(shí)現(xiàn)葉酸基團(tuán)的外水相分布，因?yàn)橹苽溥^(guò)程中葉酸基團(tuán)為親水性，從根本上防止了葉酸在載體疏水內(nèi)核中的分布，而且弱堿性的水合介質(zhì)不會(huì)影響葉酸基團(tuán)本身的化學(xué)穩(wěn)定性和葉酸與其靶細(xì)胞表面受體的結(jié)合能力，也不會(huì)影響脂質(zhì)材料的物化性質(zhì)和制劑本身的物理穩(wěn)定性及包封率，制劑最終 pH值也符合注射液要求,安全性良好。本發(fā)明相對(duì)于我國(guó)已有的孵育即后插入法的專(zhuān)利技術(shù)(CN201110114306. 6)，具備操作簡(jiǎn)便，靶向材料插入效率高的特點(diǎn)，更重要的是，該方法從本質(zhì)上改變了葉酸基團(tuán)的疏水性質(zhì)，具備良好的通用性，無(wú)論靶向材料中需要插入制劑主體的基團(tuán)為兩親性的磷脂類(lèi)材料還是完全疏水的烷基短鏈或高分子材料，因?yàn)榘邢虿牧蠀⑴c了制劑系統(tǒng)早期的自發(fā)形成過(guò)程而不是在制劑主體形成后再插入，該方法都能將絕大多數(shù)靶向材料牢固地錨定在制劑主體，不存在上述孵育即后插入技術(shù)中要求靶向材料錨定基團(tuán)必須為磷脂或必須與制劑表面材料具備高度結(jié)構(gòu)相似性的限制。同時(shí)，目前主動(dòng)靶向制劑為增強(qiáng)制劑本身的物理穩(wěn)定性，大多采用疏水內(nèi)核外包親水表層的組裝方法，即使臨床使用過(guò)程中采用葡萄糖注射液等稀釋?zhuān)茐牧舜偈谷~酸轉(zhuǎn)為親水性的外水相弱堿性環(huán)境，因?yàn)橹苿┍旧肀砻姘灿杏H水層，親水性減弱的葉酸基團(tuán)仍可穩(wěn)定分布于水相中而不會(huì)因?yàn)槠涫杷灾匦虏迦胫苿┦杷詢(xún)?nèi)核。所述的堿優(yōu)選路易斯堿，即能給出電子對(duì)的物質(zhì)中的一種或多種，更優(yōu)選碳酸鹽、 酸式碳酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、亞硫酸鹽、氨、胺中的一種或多種，進(jìn)一步優(yōu)選碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、亞硫酸鈉中的一種或多種。所述的葉酸類(lèi)化合物優(yōu)選葉酸、亞葉酸、二氫葉酸、四氫葉酸、5-甲酰四氫葉酸、 10-甲酰四氫葉酸、5-甲基四氫葉酸、5,10-亞甲基四氫葉酸、5,10-次甲基四氫葉酸、甲氨蝶呤、喋酰多谷氨酸、2-去氨基-羥基葉酸、I-去氨基-羥基葉酸、I-去氮葉酸、3-去氮葉酸或8-去氮葉酸。所述靶向材料為葉酸與其他醫(yī)學(xué)上允許使用材料的共價(jià)結(jié)合物即葉酸修飾的葉酸-分子復(fù)合物，優(yōu)選雙硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-葉酸(DSPE-PEG-FA)、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-葉酸(PE-PEG-FA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物-聚乙二醇-葉酸 (PLGA-PEG-FA)、膽固醇-聚乙二醇-葉酸(Chol-PEG-FA)、聚十六烷基氰基丙烯酸酯-聚乙二醇-葉酸(PHDCA-PEG-FA)或單硬脂酸聚氧乙烯酯-葉酸(S100-FA)。所述主動(dòng)靶向制劑為脂質(zhì)體、膠束、固體脂質(zhì)納米粒、納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體或乳脂體等常見(jiàn)劑型。所述主動(dòng)祀向制劑粒徑范圍優(yōu)選5nm_10 μ m。
所述的脂質(zhì)材料優(yōu)選三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、山崳酸甘油酯、辛酸/癸酸三甘油酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二癸酸酯、三肉豆蘧酸甘油酯、膽固醇、硬脂酸、微晶石蠟、鯨酯蠟、大豆磷脂、卵磷脂、蛋黃磷脂、氫化磷脂中的一種或多種。所用高分子材料優(yōu)選淀粉、阿拉伯膠、明膠、瓜爾豆膠、殼多糖、脫乙酰殼多糖、西黃蓍膠、海藻酸鈉、白蛋白、聚丙烯酸、丙烯酸樹(shù)脂、乙烯/醋酸乙烯共聚物、聚乳酸、聚羥基乙酸、乳酸/羥基乙酸共聚物中的一種或多種。本發(fā)明制劑水相中可以另外添加滲透壓調(diào)節(jié)劑，如氯化鈉、葡萄糖、甘露醇。本發(fā)明制備方法也適于將納米粒制成凍干制劑，納米粒制劑加入凍干保護(hù)劑如葡萄糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、山梨醇、右旋糖苷、甘油或甘氨酸，過(guò)濾除菌后冷凍干燥， 可制得納米粒凍干制劑。本發(fā)明制劑制備過(guò)程中還可以加入抗氧劑，優(yōu)選抗壞血酸、生育酚衍生物如維生素E。本發(fā)明制劑水相中還可以加入表面活性劑以減小納米粒粒徑，優(yōu)選泊洛沙姆188、 聚山梨酯80、聚氧乙烯蓖麻油、去氧膽酸鈉。制備納米粒時(shí)，所用藥物和原料一般按如下重量份數(shù)選取藥物1-3份，脂質(zhì) 0-150份，高分子材料0-300份，靶向材料1-300份，抗氧劑0_2份，凍干保護(hù)劑0-1000份， 滲透壓調(diào)節(jié)劑0-600份，路易斯堿1-300份，表面活性劑0-500份。下面是用常規(guī)方法制備的普通靶向制劑和本發(fā)明方法制備的改良的靶向制劑的效果比較普通靶向制劑制備稱(chēng)取大豆磷脂Sg、三月桂酸甘油酯lg、S100-FA(單硬脂酸聚氧乙烯酯與葉酸以共價(jià)鍵結(jié)合)O. 3g、香豆素-6儲(chǔ)備液適量(使香豆素_6最終制劑濃度為 10 μ g/mL),加入甲醇/二氯甲燒(I I, v/v)混合溶劑200mL溶解,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜,300mL去離子水37°C水合30min,探頭超聲,過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得普通革巴向制劑，粒徑54. 5nm。本發(fā)明改良的靶向制劑制備改良靶向制劑一稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、S100-FA0. 3g、香豆素_6 儲(chǔ)備液適量(使香豆素-6最終制劑濃度為10 μ g/mL)，加入甲醇/ 二氯甲烷(I I, v/v) 混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為7. 8的碳酸氫鈉水溶液，37°C水合 30min,探頭超聲,過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得,粒徑58. 3nm。改良靶向制劑二 稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、S100-FA0. 3g、香豆素_6 儲(chǔ)備液適量(使香豆素-6最終制劑濃度為10yg/mL)，加入甲醇/ 二氯甲烷(I I, ν/ ν)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為8. 4的碳酸鈉水溶液，37°C水合 30min,探頭超聲,過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得,粒徑54. 8nm。改良靶向制劑三稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、S100-FA0. 3g、香豆素_6 儲(chǔ)備液適量(使香豆素-6最終制劑濃度為10 μ g/mL)，加入甲醇/ 二氯甲烷(I I, v/v) 混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為9. O的氫氧化鈉水溶液，37°C水合 30min,探頭超聲,過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得,粒徑55. Inm0取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人源K562細(xì)胞以I X IO5個(gè)/孔接種于24孔板，完全培養(yǎng)基37°C 培養(yǎng)24h，移去培養(yǎng)液，用不含葉酸培養(yǎng)基清洗三次，再用不含葉酸培養(yǎng)基37°C培養(yǎng)24h，移去培養(yǎng)基，每孔加入O. 5mL用不含葉酸培養(yǎng)基稀釋100倍的上述載香豆素_6的普通主動(dòng)靶向制劑和改良主動(dòng)靶向制劑(η = 6)，分別于37°C孵育4h。棄去含制劑的培養(yǎng)液，用冰冷的 PBS洗滌三遍，采用熒光-HPLC法及BCA試劑盒法測(cè)定細(xì)胞中的香豆素_6和蛋白的濃度。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明改良靶向制劑一、二、三的細(xì)胞攝取量分別為普通靶向制劑的1.82、 1.89、1.73倍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖I。


圖I是香豆素-6普通及本發(fā)明改良靶向制劑K562細(xì)胞攝取(η = 6)
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、DSPE-PEG-FA O. 2g、阿霉素300mg，加入甲醇/ 二氯甲烷(1:1，v/v)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為8. O 的碳酸氫鈉水溶液，37°C水合30min，探頭超聲，過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得改良主動(dòng)靶向制劑，粒徑80. 6nm。實(shí)施例2稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、DSPE-PEG-FA O. 2g、米托蒽醌200mg，加入甲醇/ 二氯甲烷(I l，v/v)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為8. 2 的碳酸鈉水溶液，37°C水合30min，探頭超聲，過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得改良主動(dòng)靶向制劑，粒徑85. 3nm。實(shí)施例3稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、Chol-PEG-FA O. 2g、喜樹(shù)堿IOOmg,加入甲醇/ 二氯甲烷(I L v/v)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為8. 6的碳酸鈉水溶液，37°C水合30min，探頭超聲，過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得改良主動(dòng)靶向制劑， 粒徑 75. 4nm。實(shí)施例4稱(chēng)取PLGA-PEG O. lg,PLGA-PEG-FA O. Olg,移取香豆素_6母液適量(使香豆素_6 最終制劑濃度為I μ g/mL)，加入乙腈IOmL溶解，逐滴加入IOOmLpH值為8. 6的碳酸鈉水溶液中并劇烈攪拌，置8000-12000截留分子量透析袋中透析24h，即得改良主動(dòng)靶向制劑，粒徑 300. 3nm。實(shí)施例5稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、PE-PEG-FA O. 2g、醋酸地塞米松lOOmg，加入甲醇/ 二氯甲烷(I 1，V/V)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為 8. O的磷酸氫二鈉水溶液，37°C水合30min，探頭超聲，過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得改良主動(dòng)靶向制劑，粒徑77. 4nm。實(shí)施例6稱(chēng)取大豆磷脂8g、三月桂酸甘油酯lg、PE-PEG-FA O. 2g、布洛芬lOOmg，加入甲醇 / 二氯甲烷(I L v/v)混合溶劑200mL溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入300mLpH值為8. O的碳酸氫鈉水溶液，37 V水合30min，探頭超聲，過(guò)O. 22 μ m微孔濾膜，即得改良主動(dòng)靶向制劑，粒徑 72. 3nm。
權(quán)利要求
1.一種受體型靶向制劑的制備方法，包括將脂質(zhì)材料或高分子材料和含葉酸類(lèi)化合物基團(tuán)的靶向材料溶于有機(jī)溶劑，通過(guò)薄膜洗脫法、乙醇注入法、逆向蒸發(fā)法、透析法、乳化-溶劑揮發(fā)法或微乳法分散于水相，整粒后過(guò)濾除菌即得，制備載藥制劑之前，如藥物為脂溶性，則將藥物和脂質(zhì)材料或高分子材料一同溶于有機(jī)溶劑，如藥物為水溶性，則將藥物溶于水相，其特征是水相含路易斯堿，水相PH值為7. 5 10. O。
2.權(quán)利要求I的制備方法，其中水相pH值為7.8 8. 2。
3.權(quán)利要求I的制備方法，其中路易斯堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、亞硫酸鈉中的一種或幾種。
4.權(quán)利要求I的制備方法，其中葉酸類(lèi)化合物為葉酸、亞葉酸、二氫葉酸、四氫葉酸、 5-甲酰四氫葉酸、10-甲酰四氫葉酸、5-甲基四氫葉酸、5,10-亞甲基四氫葉酸、5,10-次甲基四氫葉酸、甲氨蝶呤、喋酰多谷氨酸、2-去氨基-羥基葉酸、I-去氨基-羥基葉酸、I-去氮葉酸、3-去氮葉酸或8-去氮葉酸。
5.權(quán)利要求I的制備方法，其中受體型靶向制劑為脂質(zhì)體、膠束、固體脂質(zhì)納米粒、納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體或乳脂體。
6.權(quán)利要求I的制備方法，其中脂質(zhì)材料選自三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、山崳酸甘油酯、辛酸/癸酸三甘油酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二癸酸酯、三肉豆蘧酸甘油酯、膽固醇、硬脂酸、微晶石蠟、鯨酯蠟、大豆磷脂、卵磷脂、蛋黃磷脂、氫化磷脂中的一種或幾種。
7.權(quán)利要求I的制備方法，其中高分子材料選自淀粉、阿拉伯膠、明膠、瓜爾豆膠、殼多糖、脫乙酰殼多糖、西黃蓍膠、海藻酸鈉、白蛋白、聚丙烯酸、丙烯酸樹(shù)脂、乙烯/醋酸乙烯共聚物、聚乳酸、聚羥基乙酸、乳酸/羥基乙酸共聚物中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種增加基于葉酸類(lèi)化合物的主動(dòng)靶向制劑中靶向基團(tuán)即葉酸類(lèi)化合物基團(tuán)在外水相的分布，進(jìn)而改善制劑主動(dòng)靶向效果的方法。其特征是本發(fā)明與普通制備方法的關(guān)鍵區(qū)別為不使用常用的水、滲透壓調(diào)節(jié)劑溶液或中性緩沖鹽溶液作為水相，而采用pH7.5～10.0的弱堿性溶液。本發(fā)明方法制備的受體型靶向制劑能改善制劑主動(dòng)靶向效果。
文檔編號(hào)A61K9/10GK102579343SQ20121004620
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年2月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月27日
發(fā)明者宗莉, 平其能, 石勇平, 肖衍宇 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)