專利名稱：比伐盧定-聚乙二醇化復合物的制作方法
比伐盧定-聚乙二醇化復合物
技術領域：
本發(fā)明涉及比伐盧定的聚乙二醇化復合物，其制備方法，含有它們的藥物組合物以及其在治療或預防血栓類疾病的藥物中的應用，包括在不穩(wěn)定型心絞痛、外周動脈介入治療、心肺移植手術及防栓治療中的藥物中的應用。
背景技術：
動脈粥樣硬化等引發(fā)的血栓病已經成為世界上首位死亡原因，其發(fā)病率在我國呈上升趨勢，而抗凝藥在該病的治療中極為重要。在目前眾多的抗凝藥中，Medicines公司的比伐盧定(Angiomax )是FDA于2000年批準上市的一種抗凝新藥，其抗凝成分是水蛭素類似物(片段)。這種藥是凝血酶直接的、特異的、可逆性抑制劑，無論凝血酶處于血循環(huán)中還是與血栓結合，其均可與其催化位點和陰離子結合位點(又稱底物識別位點)發(fā)生特異性結合，從而直接抑制凝血酶的活性。它克服了肝素、低分子肝素及水蛭素的缺點，在不穩(wěn)定型心絞痛、外周動脈介入治療、心肺移植手術及防栓治療中顯示出良好的作用。但比伐盧定對凝血酶活性位點的抑制持續(xù)時間較短,在人體內的半衰期約25分鐘。要實現對凝血酶活性位點的長時間抑制，有時需要反復多次注射給藥。而比伐盧定價格昂貴，多次反復用藥大大增加了患者的就醫(yī)成本，因此，開發(fā)長效、穩(wěn)定、經濟的類似藥物或制劑十分必要。蛋白藥物經聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)修飾后能顯著延長作用，增強水溶性和穩(wěn)定性，降低免疫原性和抗原性，已有多個PEG修飾的蛋白藥物上市。本發(fā)明通過在比伐盧定結構中引入半胱氨酸，以實現對比伐盧定進行定點聚乙二醇化修飾的方法及應用尚未見文獻報道。

發(fā)明內容本發(fā)明的目的之一是提供比伐盧定-聚乙二醇復合物?；瘜W合成多肽藥物比伐盧定是凝血酶的直接抑制劑，它克服了肝素、低分子肝素及水蛭素的缺點，在不穩(wěn)定型心絞痛、外周動脈介入治療、心肺移植手術及防栓抗栓治療中顯示出良好的作用。但比伐盧定的單次劑量為250毫克，目前價格為每克1000元左右。本研究希望通過合成比伐盧定的PEG化修飾產物，能延長比伐盧定的半衰期，減少用藥劑量或給藥頻率，將為比伐盧定帶來更廣闊的市場，創(chuàng)造更大的經濟效益和社會效益。比伐盧定來源于水蛭素復合物，由20個氨基酸殘基組成的多肽，分子量是2180，其結構式為D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-IIe-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OHο 研究表明其 N-端 Pro-Arg-Pro 和C-端Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu是其與凝血酶結合的兩個關鍵位點，5到8位的4個甘氨酸只是起連接作用，因此選擇5、6、7位或8位的甘氨酸進行修飾是理想的位點。本發(fā)明所述的比伐盧定(bivalirudin, BVLD)-聚乙二醇復合物為對比伐盧定序 列中第5位到第8位(由N-端到C-端)的任一甘氨酸進行半胱氨酸替代后在半胱氨酸側鏈進行聚乙二醇化修飾后得到的新結構化合物，所述復合物為具有式(I)結構的化合物
[Cys (PEG-M)] X-BVLD (I)其中
權利要求
1.一種比伐盧定(bivalirudin,BVLD)_聚乙二醇復合物,其特征在于所述復合物為對比伐盧定序列中第5位到第8位(由N-端到C-端)的任一甘氨酸進行半胱氨酸替代后在半胱氨酸側鏈進行聚乙二醇化修飾后得到的新結構化合物。
2.根據權利要求I所述的比伐盧定-聚乙二醇復合物，其特征在于所述復合物為具有式⑴結構的化合物[Cys (PEG-M)] X-BVLD (I) 其中
3.根據權利要求I所述比伐盧定-聚乙二醇復合物，其中該復合物的結構為[Cys (mPEG2000-MAL) ] 7-BVLD, [Cys (mPEG5000-MAL) ] 7-BVLD 和[Cys (mPEG10000-MAL) ] -BVLD。
4.一種藥物組合物，其特征在于含有權利要求1-3中至少一種比伐盧定-聚乙二醇復合物和藥用輔料。
5.根據權利要求1-3中任一項權利要求所述的比伐盧定-聚乙二醇復合物在制備用于治療或預防血栓類疾病的藥物中的應用，其特征在于所述要去用于治療不穩(wěn)定型心絞痛、外周動脈介入治療、心肺移植手術及防栓治療。
6.根據權利要求2所述的比伐盧定-聚乙二醇復合物的制備方法，其特征在于包括 將[Cys]X-BVLD溶于純水中，用碳酸氫鈉調節(jié)pH到7 8，加入2_3倍摩爾當量的PEG，室溫攪拌反應2-3小時，用反相高效液相色譜(RP-HPLC)監(jiān)測反應進程和分離目標產物，目標產物經冷凍干燥得比伐盧定-聚乙二醇復合物[Cys (PEG-MAL) ]X_BVLD，其中的PEG為馬來酰亞胺基聚乙二醇、乙烯基聚乙二醇或碘代乙?；垡叶肌?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及比伐盧定的聚乙二醇化復合物，其制備方法，含有它們的藥物組合物及用途。本發(fā)明中的比伐盧定的聚乙二醇化復合物指對比伐盧定序列中第5位到第8位的任一甘氨酸進行半胱氨酸替代后進行聚乙二醇化修飾后得到既保持比伐盧定活性又延長其半衰期的新結構化合物。本發(fā)明中的比伐盧定的聚乙二醇化復合物在治療或預防血栓類疾病的藥物中的應用，包括在不穩(wěn)定型心絞痛，外周動脈介入治療，心肺移植手術及防栓治療中的藥物中的應用。
文檔編號A61P7/02GK102641506SQ20121010432
公開日2012年8月22日 申請日期2012年4月11日 優(yōu)先權日2012年4月11日
發(fā)明者尹志峰, 李云峰, 王小青, 王良友, 趙紅玲, 高楊 申請人:承德醫(yī)學院中藥研究所