專利名稱：一種鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法及其制品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法及一種用于生醫(yī)材料或化妝品的制品。
背景技術(shù)：
鮪魚是全球主要的撈捕魚種,鮪魚魚種包括正鰹、黃鰭鮪、大目鮪、長(zhǎng)鰭鮪以及黑鮪；上述魚種均為數(shù)百萬(wàn)貧窮人民的重要糧食，也是世界高級(jí)生魚片市場(chǎng)的重心。然而，在生產(chǎn)食用鮪魚罐頭或生魚片的過(guò)程中，常會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄物，這些廢棄物大多為魚鱗、魚皮或魚鰾等結(jié)締組織，廢棄物除了會(huì)造成異味或蒼蠅滋生外，也會(huì)造成環(huán)保問(wèn)題。膠原蛋白(collagen)為普遍存在于動(dòng)物組織中的蛋白質(zhì)，分布于結(jié)締組織，約占 脊椎動(dòng)物總蛋白質(zhì)的30%。其結(jié)構(gòu)主要特色為由三條勝肽鏈組成三股螺旋(triple helix)的構(gòu)型，先前研究(Prockop and Kivirikko, Annu. Rev. Biochem. 64 :403-434 ； 1995)將膠原蛋白依結(jié)構(gòu)、勝肽鏈組成或基因座位置區(qū)分為19種類型(type)。但僅有部分膠原蛋白的生理功能被充分了解(Deyl and Miksik, J. Chromatogr. B. 739 :3-31 ；2000)，目前于生物醫(yī)學(xué)研究上仍以第一型、第二型及第三型膠原蛋白最為廣泛利用。膠原蛋白為高價(jià)值的生物高分子(biopolymer),由于其具高度生物相容性(biocompatibity)低度免疫性(immunogenictiy)且近幾年在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用逐漸受到重視，特別是吸引細(xì)胞遷移、促進(jìn)細(xì)胞增生與組織修補(bǔ)等特性，相信若能自低單價(jià)的鮪魚結(jié)締組織中萃取膠原蛋白，能促進(jìn)產(chǎn)業(yè)升級(jí)并提高業(yè)者的經(jīng)濟(jì)收益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為一種鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法。鮪魚皮自魚產(chǎn)公司采集后，將鮪魚結(jié)締組織去除肌肉與脂肪，并以機(jī)械粉碎增加表面積。并將處理后的鮪魚組織進(jìn)行下列步驟(a)取經(jīng)前處理的鮪魚組織；(b)將磷酸鹽溶液與該鮪魚組織共均質(zhì)后，產(chǎn)生均質(zhì)物，并利用攪拌機(jī)攪拌；(c)加入堿性溶液或堿金屬氫氧化物并浸泡該均質(zhì)物；(d)加入醇類攪拌；及(e)加入有機(jī)酸溶液及酵素后,獲得膠原蛋白溶液。本發(fā)明進(jìn)一步將該膠原蛋白溶液經(jīng)由活性碳過(guò)濾裝置去除異味，使該膠原蛋白溶液不會(huì)因異味而限制應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明萃取鮪魚組織的膠原蛋白的步驟(b)所使用的磷酸鹽濃度為O. 01 1%，當(dāng)磷酸鹽加入后，其攪拌時(shí)間為4 48小時(shí)。在步驟(C)所使用的堿性溶液或堿金屬氫氧化物包含氫氧化鈉，其濃度為O. 01 O. 60N(當(dāng)量濃度)及浸泡并攪拌4 48小時(shí)。在步驟(d)中，所使用的醇類包含乙醇，其濃度為10 50%及攪拌時(shí)間為4 48小時(shí)。在步驟(e)中所使用的有機(jī)酸包含乳酸、醋酸、檸檬酸或其組合，其濃度為O. 5 10. 0%，而所使用的酵素包含酵素胰蛋白酶、胃蛋白酶或無(wú)花果酵素或其組合，其中該酵素濃度為O. 05 10%。本發(fā)明所萃取的膠原蛋白溶液可經(jīng)由冷凍干燥處理獲得膠原蛋白粉末。本發(fā)明進(jìn)一步提供一種用于生醫(yī)材料、機(jī)能性食品或化妝品的制品，其包含上述方法所萃取鮪魚膠原蛋白溶液。其中該鮪魚膠原蛋白溶液應(yīng)用于膠原蛋白溶液、膠原蛋白粉末、可注射軟組織填補(bǔ)劑(soft tissue augmentation)、膠原蛋白薄膜、膠原蛋白膠體、止血?jiǎng)?haemostatic agent)、創(chuàng)傷敷料(wound dressing)、細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)(matrix)、組織接著劑(tissue adhesive)、膠囊或藥物傳遞系統(tǒng)(drug delivery system)。另一方面，本發(fā)明所萃取的鮪魚膠原蛋白溶液或粉末可呈水溶液、乳液、面膜、乳霜、凝膠、香膏、軟膏藥膏、或上述形式的組合用于外敷所接受的類型。更進(jìn)一步可做為膳食補(bǔ)充劑、食品、乳品、飲料或上述形式的組合。 承上所述，本發(fā)明主要特征是萃取鮪魚所含的膠原蛋白的方法及其制品，該方法可有效利用其所產(chǎn)生的廢棄物及解決環(huán)保問(wèn)題。


圖I為萃取鮪魚組織膠原蛋白溶液的流程圖。主要元件符號(hào)說(shuō)明10本發(fā)明的萃取膠原蛋白流程圖101鮪魚前處理102磷酸鹽溶液處理103堿性溶液或堿金屬氫氧化物溶液處理104醇類溶液處理105以有機(jī)酸溶液/酵素進(jìn)行萃取106獲得膠原蛋白溶液
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :鮪魚結(jié)締組織前處理方法鮪魚皮自魚產(chǎn)公司采集后，以碎冰包裹進(jìn)行保存，以自來(lái)水沖洗后，利用刀片將可見(jiàn)脂肪與肌肉組織切除，并以細(xì)切機(jī)將其切為2mm寬的條狀物，冷凍保存留待進(jìn)一步制備膠原蛋白之用。實(shí)施例2 :鮪魚組織的化學(xué)組成分析將實(shí)施例I所獲得的鮪魚結(jié)締組織參考美國(guó)官方分析化學(xué)學(xué)會(huì)A0AC(1995)的分析方法進(jìn)行水份、粗蛋白、粗脂肪及灰份分析，所得的結(jié)果如表表一、鮪魚結(jié)締組織的化學(xué)組成
化學(xué)組成含量(％)^
水份68. 50 + 1. 0權(quán)利要求
1.一種鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，包含以下步驟 (a)取前處理的鮪魚組織； (b)將磷酸鹽溶液與該鮪魚組織共均質(zhì)后，產(chǎn)生均質(zhì)物，并利用攪拌機(jī)攪拌； (C)加入堿性溶液或堿金屬氫氧化物并浸泡該均質(zhì)物； (d)加入醇類溶液攪拌；及 (e)加入有機(jī)酸溶液及酵素后，獲得膠原蛋白溶液。
2.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該膠原蛋白溶液進(jìn)一步經(jīng)由活性碳過(guò)濾裝置去除異味。
3.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該磷酸鹽濃度為O.Ol I %及攪拌時(shí)間為4 48小時(shí)。
4.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該堿性溶液或該堿金屬氫氧化物包含氫氧化鈉、氫氧化鉀、磷酸二氫鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈣或其組合物。
5.如權(quán)利要求4所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，該堿金屬氫氧化物濃度為.O.01 O. 60當(dāng)量濃度及浸泡并攪拌時(shí)間為4 48小時(shí)。
6.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該醇類溶液濃度為10 50%，使用的醇類溶液包括甲醇、正丙醇、乙醇、山梨糖醇、乙二醇、甘油醇或其組合物及攪拌時(shí)間為4 48小時(shí)。
7.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該有機(jī)酸包含鹽酸、磷酸、乳酸、醋酸、檸檬酸或其組合。
8.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該有機(jī)酸濃度為O.5 .10. 0%。
9.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該酵素包含酵素胰蛋白酶、胃蛋白酶或無(wú)花果酵素或其組合。
10.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該酵素濃度為O.05 10%。
11.如權(quán)利要求I所述的鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其中該膠原蛋白溶液進(jìn)一步以冷凍干燥處理，以獲得膠原蛋白粉末。
12.一種用于生醫(yī)材料、機(jī)能性食品或化妝品的制品，其包含如權(quán)利要求I的萃取方法所萃取的鮪魚膠原蛋白溶液。
13.如權(quán)利要求12所述的用于生醫(yī)材料、機(jī)能性食品或化妝品的制品，為膠原蛋白溶液、膠原蛋白粉末、可注射軟組織填補(bǔ)劑(soft tissue augmentation)、膠原蛋白薄膜、膠原蛋白膠體、止血?jiǎng)?haemostatic agent)、創(chuàng)傷敷料(wound dressing)、細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)(matrix)、組織接著劑(tissue adhesive)、膠囊或藥物傳遞系統(tǒng)(drug deliverysystem)。
14.如權(quán)利要求12所述的用于生醫(yī)材料、機(jī)能性食品或化妝品的制品，為呈水溶液、乳液、面膜、乳霜、凝膠、香膏、軟膏藥膏、或上述形式的組合用于外敷所接受的類型。
15.如權(quán)利要求12所述的用于生醫(yī)材料、機(jī)能性食品或化妝品的制品，為膳食補(bǔ)充劑、食品、乳品、飲料或上述形式的組合。
全文摘要
本發(fā)明提供一種鮪魚膠原蛋白溶液的萃取方法，其利用磷酸鹽、堿性溶液或堿金屬氫氧化物溶液及醇類溶液進(jìn)行前處理，并以有機(jī)酸溶液及酵素萃取膠原蛋白，并將該膠原蛋白利用活性碳過(guò)濾裝置去除異味。本發(fā)明進(jìn)一步提供一種用于生醫(yī)材料或化妝品的制品，其包含鮪魚膠原蛋白溶液。
文檔編號(hào)A61K8/65GK102952839SQ201210126729
公開日2013年3月6日 申請(qǐng)日期2012年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月26日
發(fā)明者林詠凱 申請(qǐng)人:大江生醫(yī)股份有限公司