專利名稱：一種口服緩釋制劑、包載材料及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，涉及ロ服緩釋制劑的制備，尤其涉及以海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉組合為載體的蛋白多肽類藥物的ロ服緩釋制劑及其制備和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著生物技術(shù)和基因工程的發(fā)展，蛋白多肽類藥物用于臨床治療呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但是制備エ藝復(fù)雜、投遞效率低、生物利用度差等原因成為了蛋白多肽類藥物臨床應(yīng)用的瓶頸。其中蛋白多肽類藥物給藥途徑問(wèn)題尤為重要。與注射制劑相比，ロ服制劑對(duì)患者具有更好的順應(yīng)性且服用方便，但是蛋白多肽類藥物的ロ服制劑研究困難較大(1)蛋白多肽類藥物的物理和化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定易被胃酸降解；(2)蛋白多肽類藥物易被胃腸道中各種消化酶分解；(3)蛋白多肽類藥物水溶性高、分子量大和透過(guò)性低，在胃腸粘膜滲透性低，存在吸收障礙、肝臟首過(guò)代謝作用高、生物利用度低等問(wèn)題。因此蛋白多肽類藥物ロ服制劑的研究一直是科學(xué)界的難題和熱點(diǎn)。明膠、殼聚糖、瓊脂糖、甲基纖維素、こ基纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、聚乳酸、PLGA (聚乳酸聚こ醇酸共聚物)、聚こ交酯丙交酯等材料常用作ロ服藥物的載體。然而，在多數(shù)蛋白多肽類藥物的ロ服制劑研究中，上述ロ服制劑材料存在許多缺陷如無(wú)法有效的包載蛋白多肽類藥物、難以保護(hù)藥物不被蛋白酶或胃酸破壞、形成微球后藥物不易釋放等，不適用于蛋白多肽類藥物ロ服制劑的制備。與上述材料相比，海藻酸鈉是ー種天然多糖，其具備pH敏感性在較低的pH環(huán)境中微球收縮，在較高的PH腸液中，快速溶解。海藻酸鈉具有藥物輔料所需的穩(wěn)定性、溶解性、粘性和安全性，無(wú)慢性毒性或致癌性反應(yīng)，其溫和的溶膠過(guò)程、良好的生物相容性使海藻酸鈉適于作為釋放或包埋藥物、蛋白與細(xì)胞的微膠囊，常用作消炎藥、泌尿系統(tǒng)及蛋白類藥物ロ服制劑的包載材料(Journal of Pharmacy Pharmacology, 1999, 51: 141-149;Biomaterials, 2010, 31 :9040_9047)。但是，以海藻酸鈉為單一材料制備的蛋白類ロ服制劑的體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，海藻酸鈉雖可有效保護(hù)蛋白多肽類藥物免遭胃酸及消化酶降解，但是藥物在模擬腸液的介質(zhì)中突釋，較短時(shí)間即可完全釋放，難以起到緩釋的作用。同樣具有pH敏感型溶解特征的透明質(zhì)酸鈉是ー種水溶性高分子，具有作為藥物載體的優(yōu)良特性生物相容性、非免疫原性、在體內(nèi)可由酶催化降解等特性。透明質(zhì)酸鈉已成功應(yīng)用于組織工程，醫(yī)學(xué)敷料等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，臨床中常用作鼻腔粘膜給藥的載體，較少應(yīng)用于ロ服制劑的研究。在蛋白多肽類藥物ロ服制劑材料篩選過(guò)程中，申請(qǐng)人單獨(dú)采用透明質(zhì)酸作為ロ服制劑的包裹材料時(shí)發(fā)現(xiàn)，制備的ロ服制劑無(wú)定形性且水溶性較高，在模擬胃酸環(huán)境中快速溶解，無(wú)法有效保護(hù)蛋白多肽類藥物免受胃酸及胃蛋白酶降解。大量試驗(yàn)結(jié)果表明，単一材料難以有效包載蛋白多肽類藥物制備ロ服緩釋制劑。以艾塞那肽為例說(shuō)明如下
艾塞那肽(Exenatide)是Exendin_4的人工合成物,與哺乳動(dòng)物的胰高血糖素樣肽_1(GLP-I)具有53%的同源性，是有效的GLP-I受體激動(dòng)劑，具有葡萄糖依賴型控制血糖濃度。、其藥理作用包括刺激胰島素分泌，抑制胰高血糖素分泌；抑制胰島β細(xì)胞凋亡；減緩胃排空，降低食欲。顯著改善II型糖尿病
患者的空腹及餐后血糖水平。艾塞那肽注射劑已于2005年4月獲美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，商品名為Byetta ，糖尿病治療效果明顯，且副反應(yīng)較小，但由于艾塞那肽的半衰期較短，頻繁注射使患者順應(yīng)性較差。與注射給藥相比，ロ服制劑對(duì)患者具有更好的順應(yīng)性且服用方便，迄今為止，僅有中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)CN102026646A (歐洲專利公開(kāi)號(hào)為NZ589390A)公開(kāi)了ー種用艾塞那肽、魚(yú)油和蛋白酶抑制劑的組合制備的ロ服制劑，但該ロ服制劑作用時(shí)間過(guò)短(僅130分鐘)，實(shí)用性低，已有的報(bào)道(Journal of Controlled Release, 2009,133 :172-177 ; Biomaterials,2011,32 2673-2682 )雖成功制備了艾塞那肽的ロ服制劑，但是體內(nèi)降血糖作用持續(xù)時(shí)間均 較短，不能有效維持血糖值在正常水平，且制備方法繁瑣。如胰島素、牛血清白蛋白(BSA)以及其它蛋白多肽類藥物均存在上述問(wèn)題。為解決上述問(wèn)題，發(fā)明人采用篩選兩種材料的組合的方法尋找適應(yīng)大多數(shù)蛋白多肽類藥物ロ服制劑的研究。在眾多材料組合的篩選過(guò)程中，根據(jù)常規(guī)思路，發(fā)明人采取“一種pH敏感材料+ —種pH不敏感材料”(即海藻酸鈉或透明質(zhì)酸+ —種常用ロ服制劑)的組合方式進(jìn)行研究，篩選的組合材料均不能有效的達(dá)到蛋白多肽類藥物ロ服或緩釋的目的。因此，如何突破常規(guī)思路，獲得可用于蛋白多肽類藥物ロ服或緩釋的包載材料，是本領(lǐng)域急需解決的技術(shù)問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供ー種蛋白多肽類ロ服緩釋制劑，以及用于包載蛋白多肽類藥物的包載材料，以解決現(xiàn)有技術(shù)中蛋白多肽類ロ服制劑作用持續(xù)時(shí)間短的問(wèn)題；本發(fā)明的另ー個(gè)目的是提供這種ロ服緩釋制劑的制備方法。為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是ー種蛋白多肽類ロ服緩釋藥物的包載材料，主要由海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物組成，以質(zhì)量計(jì)，海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為3 : I I : 3，海藻酸鈉的分子量為32000-250000道爾頓，透明質(zhì)酸鈉的分子量為500000-5000000 道爾頓。ー種蛋白多肽類ロ服緩釋制劑，采用上述包載材料制備而成，主要由蛋白多肽類藥物、海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物組成，以質(zhì)量計(jì)，藥物的含量為0. 5% 10%，海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物的含量為90 99. 5%。上述蛋白多肽類ロ服緩釋制劑的制備方法，包括以下步驟
(a)按上述的含量比配制海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物，溶于水，加入待加載蛋白類藥物，制成所述海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物濃度為5 100mg/ml的水相；
(b)在油相中加入乳化剤，將水相與油相在高速攪拌下混合形成乳化液，攪拌速度為200 2000rpm/min，水相與油相體積比為I : 5 I : 50 ;依靠機(jī)械剪切カ將粘稠的溶液分散為顆粒均勻的微球；
(c)向步驟(b)獲得的乳化液中加入交聯(lián)劑和催化劑，水相與交聯(lián)劑體積比為2 I
I 4，交聯(lián)劑與催化劑體積比為2 I I : 3 ;繼續(xù)攪拌，在20 50°C條件下反應(yīng)5min 4h ；(d)反應(yīng)完成后加入有機(jī)溶劑洗滌，然后靜置分層后棄上層，抽濾得到包載蛋白類藥物的微球。采用有機(jī)溶劑洗滌時(shí)，可以進(jìn)行攪拌。上述技術(shù)方案中，由于海藻酸鈉及透明質(zhì)酸鈉溶液較為粘稠，可以采用攪拌、超聲等操作加速溶解。所述油相選自ニ甲基硅油、石油醚、大豆油、液體石蠟或硬脂酸中的ー種，優(yōu)選地，水相與油相體積比為I : 5 I : 25。
所述乳化劑選自聚こ烯醇、油酸鈉、硬脂酸鈉、十二烷基硫酸鈉、羧甲基纖維素、吐溫或司盤中的一種或兩種的組合物，乳化劑的體積為油相體積的1% 10%。所述交聯(lián)劑選自脂肪雙酰肼(ADH)、戊ニ醛(GTA)、三磷酸三鈉(STMP)、ニこ烯基砜(SVS)或こニ醇縮水甘油醚(EX-810)中的ー種。所述催化劑為鹽酸、硫酸、磷酸、こ酸或甲酸中的ー種。優(yōu)選IM鹽酸。所述用于洗滌微球的有機(jī)溶劑為甲醇、こ醇、異丙醇、正己烷、石油醚或正庚烷中的ー種。步驟(c)中，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選為10分鐘到2小時(shí)。海藻酸鈉及透明質(zhì)酸鈉均有良好的生物相容性及安全性。但是目前，僅有報(bào)道(Tissue Engineering Part A,2009,15 :3449-3459 ;Journal of Biomedial MaterialsResearch, 1999,44 :149-155)和美國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)公開(kāi)US20120088832介紹海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉的組合用于組織工程中植入材料和防止外科手術(shù)粘連的敷料的研究，國(guó)內(nèi)外尚未有文獻(xiàn)或?qū)＠麍?bào)道將海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉組合用于制備蛋白類藥物ロ服制劑的研究。本發(fā)明克服了傳統(tǒng)的采取“ー種pH敏感材料+ —種pH不敏感材料”(即海藻酸鈉或透明質(zhì)酸+ —種常用ロ服制劑)的組合方式的研究模式，采用海藻酸鈉和透明質(zhì)酸兩種PH敏感型材料組合作為包載蛋白多肽類藥物ロ服制劑的載體，意外地發(fā)現(xiàn)該組合適合于蛋白多肽類藥物ロ服制劑的制備。發(fā)明人的研究表明，將海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉進(jìn)交聯(lián)，二者交聯(lián)形成的網(wǎng)絡(luò)狀微球可有效包載藥物，且二者的溶解過(guò)程均具有PH敏感性，在較低的pH環(huán)境中微球收縮，抑制藥物釋放；在較高的PH腸液中，快速溶解促進(jìn)藥物釋放。并且，二者交聯(lián)后制得的微球載藥微球表面孔徑較小，溶解速度較慢，延緩了藥物的釋放，可以達(dá)到控釋的目的。此后，通過(guò)對(duì)這兩種pH敏感型材料的組合的進(jìn)ー步篩選，得到這兩種材料的最佳組合，所制備的蛋白多肽類藥物ロ服制劑不僅適應(yīng)胃腸道PH的變化，能保護(hù)蛋白類藥物不受胃酸和胃腸道蛋白酶破壞，而且還有一定的緩釋作用，且透明質(zhì)酸鈉可促進(jìn)藥物的吸收。研究表明，該方法適合于大部分在胃腸道不穩(wěn)定的蛋白多肽類和大分子藥物的ロ服制劑的制備，如艾塞那肽、胰高血糖素樣肽-I、胰島素、降鈣素、白介素-2(IL-2)、干擾素(IFN)、BSA、葡萄糖氧化酶、天門冬酰胺酶、卵白蛋白等，是ー種應(yīng)用前景十分廣泛的ロ服藥物組合，為蛋白多肽類及大分子ロ服制劑的研究提供了思路及基礎(chǔ)。由于上述技術(shù)方案運(yùn)用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點(diǎn)
I.本發(fā)明提供的蛋白多肽類藥物ロ服緩釋微球制劑，不僅改變了蛋白多肽類藥物常規(guī)給藥方式，而且能延長(zhǎng)蛋白多肽類藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間。以艾塞那肽ロ服藥物為例，體內(nèi)降血糖試驗(yàn)證實(shí)一次ロ服艾塞那肽微球，12小時(shí)內(nèi)可有效維持血糖在正常水平，每天ロ服兩次即可保持II型糖尿病患者血糖值回復(fù)正常，與已報(bào)道的ロ服艾塞那肽制劑相比，本發(fā)明制備的艾塞那肽微球降血糖作用更持久。2.本發(fā)明采用的載體材料海藻酸鈉及透明質(zhì)酸鈉安全，生物相容性高，成本較低，通過(guò)海藻酸鈉與透明質(zhì)酸鈉的交聯(lián)，所得載藥微球表面孔徑較小，溶解速度較慢，有效達(dá)到緩釋的目的。3.制備的蛋白多肽類藥物微球制劑的給藥途徑為ロ服，方便有效，可明顯改善糖尿病患者的順應(yīng)性。4.本發(fā)明公開(kāi)的方法適用于大部分蛋白多肽類藥物ロ服緩釋制劑的制備，且方法簡(jiǎn)便易行。


圖I是本發(fā)明實(shí)施例2所制備的艾塞那肽微球的體外釋放曲線；
圖2是本發(fā)明實(shí)施例5所制備的艾塞那肽微球的體外釋放曲線；
圖3是本發(fā)明實(shí)施例2和5所制備艾塞那肽微球體內(nèi)降血糖試驗(yàn)結(jié)果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步描述，以艾塞那肽、胰島素和牛血清白蛋白(BSA)為例，具體說(shuō)明此類以海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合材料為載體的蛋白多肽類ロ服緩釋試劑的制備方法及艾塞那肽ロ服微球的應(yīng)用。實(shí)施例一
稱取艾塞那肽5mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉=2:3，艾塞那肽、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為25mg/ml，攪拌溶解后得到水相，20ml液體石蠟中加入2%司盤-80得到油相，將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌500rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入2ml 25%的戊ニ醛溶液及IOml IM稀鹽酸，20°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。稱取載藥的艾塞那肽微球lOOmg，相同條件下制備的空白微球lOOmg，各置于20ml體系中測(cè)定包封率，前2h置于pHl. 2的鹽酸溶液中，轉(zhuǎn)速200rpm/min，溫度37°C ±0. 5°C攪拌；2h后抽濾，將微球置于pH7. 4 PBS中，轉(zhuǎn)速500rpm/min，溫度37 0C ±0. 5°C攪拌，待微球完全溶解后取ΙΟΟμ I用BCA試劑盒測(cè)定艾塞那肽含量，載藥的艾塞那肽微球減去空白微球即為包載的艾塞那肽含量，艾塞那肽微球包封率為84%，粒徑〈220 μ m。實(shí)施例ニ
稱取艾塞那肽10mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉=1:1，艾塞那肽、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為20mg/ml,攪拌溶解后得到水相,50ml液體石臘中加入1%司盤-80得到油相,將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌700rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入20ml 25%的戊ニ醛溶液及10ml IM稀鹽酸，50°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20ml無(wú)水こ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的艾塞那肽微球包封率為78%，粒徑〈200 μ m。實(shí)施例三稱取艾塞那肽10mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉=1:3，艾塞那肽、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為40mg/ml，攪拌溶解后得到水相，20ml液體石蠟中加入1%司盤-80得到油相,將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌500rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入5ml 25%戊ニ醛溶液及5ml IM稀鹽酸，25°C反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的艾塞那肽微球包封率為86%，粒徑〈220 μ m。實(shí)施例四 稱取艾塞那肽10mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為2:1，艾塞那肽、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為30mg/ml,攪拌溶解后得到水相,50ml液體石臘中加入2%司盤-80得到油相，將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌700rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入20ml 25%戊ニ醛溶液和IOml IM稀鹽酸，30°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的艾塞那肽微球包封率為76%，粒徑〈200 μ m。實(shí)施例五
稱取艾塞那肽7mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為3:2，艾塞那肽、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為25mg/ml，攪拌溶解后得到水相，20ml液體石蠟中加入1%司盤-80得到油相，將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌300rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入15ml 25%戊ニ醛溶液及IOml IM稀鹽酸，50°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的艾塞那肽微球包封率為87%，平均粒徑〈220 μ m。實(shí)施例六
稱取胰島素10mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為2:3，胰島素、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為30mg/ml，攪拌溶解后得到水相，50ml液體石蠟中加入1%司盤_80得到油相，將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌700rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入IOml 25%戊ニ醛溶液及5ml IM稀鹽酸，40°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的胰島素微球包封率為79%，平均粒徑〈200 μ m。實(shí)施例七
稱取BSA 15mg、海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為1:1，BSA、海藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉混合物溶于三蒸水，濃度為20mg/ml，攪拌溶解后得到水相，20ml液體石蠟中加入2%司盤-80得到油相，將水相逐滴加入到油相中，磁力攪拌500rpm/min使水相在油相中均勻分散；向油相中加入15ml 25%戊ニ醛溶液及15ml IM稀鹽酸，30°C反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后加入20mlこ醇，室溫下攪拌15分鐘，靜置分層后棄去上層，下層抽濾后用こ醇洗滌若干次，冷凍干燥后即制備完成。BCA法測(cè)定的BSA微球包封率為82%，平均粒徑〈180 μ m。實(shí)施例八
微球體外釋放曲線的測(cè)定
將艾塞那肽ロ服緩釋微球制劑進(jìn)行釋放曲線測(cè)定，方法如下精密稱取含藥微球IOOmg置于燒杯中，0-2小時(shí)以pHl. 2的鹽酸溶液為釋放介質(zhì)，置于恒溫?cái)嚢杵髦?，轉(zhuǎn)速200rpm/min,溫度37°C ±0. 5°C條件下進(jìn)行微球體外釋放,姆小時(shí)取100 μ I,然后補(bǔ)加同溫同質(zhì)的溶液；2小時(shí)后將微球和pHl. 2的釋放介質(zhì)抽濾，將微球加入到20ml pH7. 4 PBS溶液中，轉(zhuǎn)速200rpm/min，溫度37°C ±0. 5°C條件下進(jìn)行微球體外釋放，3_8小時(shí)每小時(shí)取100 μ 1，然后8，10，12，24小時(shí)取100 μ 1，補(bǔ)加同溫同質(zhì)的溶液；最后用BCA法測(cè)定艾塞那肽微球的體外釋放曲線。圖1、2分別是實(shí)施例2、5所制備艾塞那肽微球制劑的體外釋放曲線。由圖1、2可知，兩種艾塞那肽微球前2小時(shí)在模擬胃液的介質(zhì)中釋放率〈20%，最終釋放率均>80%，微球在介質(zhì)中釋放速度的快慢及最大釋放率與所制備微球的條件及材料配比相關(guān)。，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩種微球都具有良好的緩釋效果及PH響應(yīng)的特征。實(shí)施例九
動(dòng)物試驗(yàn)
選取2個(gè)月鼠齡的雄性db/db小鼠28只，隨機(jī)平均分為四組，分別為長(zhǎng)效組，短效組，注射給藥組和空載體組；長(zhǎng)效組灌胃艾塞那肽微球(每只2. Omg，含艾塞那肽約32μ g)，短效組灌胃艾塞那肽微球(每只I. Omg，含艾塞那肽約32 μ g，短效組與長(zhǎng)效組按本發(fā)明中的制備方法得到，制備過(guò)程略有不同)，注射給藥組皮下注射艾塞那肽生理鹽水溶液(含艾塞那肽約3. 2 μ g)，空載體組灌胃不含艾塞那肽的空白載體加艾塞那肽水溶液(含艾塞那肽約32 μ g);試驗(yàn)前對(duì)小鼠禁食12h，試驗(yàn)中禁食，水無(wú)限制，給藥前先測(cè)定各只小鼠血糖值，然后分別按各組要求給藥，每隔2小時(shí)測(cè)定血糖值，直至測(cè)定到第18小時(shí)，血糖值用強(qiáng)生one-touch穩(wěn)豪型血糖儀測(cè)定。圖3為兩種艾塞那肽微球制劑的降血糖試驗(yàn)結(jié)果，長(zhǎng)效型為實(shí)施例ニ制備的艾塞那肽微球，短效型為實(shí)施例五制備的艾塞那肽微球。由圖3可知，注射艾塞那肽溶液組可在8小時(shí)內(nèi)有效維持db/db小鼠血糖值在正常范圍(正常血糖值范圍3. 9mmol/L-10mmol/L),空載體組未顯示明顯降血糖作用，短效組藥效可有效維持6小時(shí)，長(zhǎng)效組艾塞那肽ロ服微球可在12小時(shí)內(nèi)維持db/db小鼠血糖值在正常范圍。長(zhǎng)效組艾塞那肽ロ服微球不僅改變了傳統(tǒng)艾塞那肽的給藥方式，提高了糖尿病患者的順應(yīng)性，而且還延長(zhǎng)了艾塞那肽的降血糖時(shí)間，本發(fā)明制備的艾塞那肽微球制劑同時(shí)具有可ロ服及緩釋的作用。通過(guò)SPSS軟件計(jì)算，長(zhǎng)效組與短效組、注射組和空載體組相比，在各時(shí)間點(diǎn)均有顯著性差異(p〈0. 05，圖3)，說(shuō)明長(zhǎng)效組對(duì)db小鼠的降血糖作用與其他組相比有顯著性差異。以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的實(shí)施方法，是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方法對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)ー步詳細(xì)說(shuō)明，不能因此理解為本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明。除此之夕卜，實(shí)施例僅選取了艾塞那肽、胰島素和BSA ロ服微球制備方法進(jìn)行說(shuō)明，然而大部分蛋白及大分子類藥物均可采用上述制備方法制備ロ服微球，不能因此理解為本發(fā)明的方法僅適合于以上幾種蛋白類藥物。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，對(duì)實(shí)施例做出的若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種蛋白多肽類口服緩釋藥物的包載材料，其特征在于主要由海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物組成，以質(zhì)量計(jì)，海藻酸鈉透明質(zhì)酸鈉為3 : I I : 3，海藻酸鈉的分子量為32000-250000道爾頓，透明質(zhì)酸鈉的分子量為500000-5000000道爾頓。
2.一種蛋白多肽類口服緩釋制劑，其特征在于采用權(quán)利要求I所述的包載材料制備而成，主要由蛋白多肽類藥物、海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物組成，以質(zhì)量計(jì)，藥物的含量為0. 5% 10%，海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物的含量為90 99. 5%。
3.一種蛋白多肽類藥物口服緩釋制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (a)按權(quán)利要求I的含量配制海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物，溶于水，加入待加載藥物，制成所述海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物濃度為5 100mg/ml的水相；、 (b)在油相中加入乳化劑，將水相與油相在高速攪拌下混合形成乳化液，攪拌速度為200 2000rpm/min，水相與油相體積比為I 5 I 50; (c)向步驟(b)獲得的乳化液中加入交聯(lián)劑和催化劑，水相與交聯(lián)劑體積比為2 I I 4，交聯(lián)劑與催化劑體積比為2 I I : 3 ;繼續(xù)攪拌，在20 50°C條件下反應(yīng)5min 4h ； (d)反應(yīng)完成后加入有機(jī)溶劑洗滌，然后靜置分層后棄上層，抽濾得到包載待加載藥物的微球。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述油相選自二甲基硅油、石油醚、大豆油、液體石蠟或硬脂酸中的一種，水相與油相體積比為I : 5 I : 25。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述乳化劑選自聚乙烯醇、油酸鈉、硬脂酸鈉、十二烷基硫酸鈉、羧甲基纖維素、吐溫或司盤中的一種或兩種的組合物，乳化劑的體積為油相體積的I0/。 10%。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián)劑選自脂肪雙酰肼、戊二醛、三磷酸三鈉、二乙烯基砜或乙二醇縮水甘油醚中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述催化劑為鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸或甲酸中的一種。、
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述用于洗滌微球的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、正己烷、石油醚或正庚烷中的一種。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種口服緩釋制劑、包載材料及制備方法。采用海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物作為包載材料；制備的蛋白多肽類藥物口服緩釋制劑，以質(zhì)量計(jì)，藥物的含量為0.5%～10%，海藻酸鈉-透明質(zhì)酸鈉混合物的含量為90～99.5%。本發(fā)明的口服緩釋制劑不僅改變了蛋白多肽類藥物的常規(guī)給藥途徑，而且延長(zhǎng)了蛋白多肽類藥物作用時(shí)間，以艾塞那肽口服微球?yàn)槔?，成功維持血糖正常水平達(dá)12小時(shí)，明顯改善糖尿病患者用藥的順應(yīng)性，提高治療效果。
文檔編號(hào)A61K47/48GK102657871SQ20121013625
公開(kāi)日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月4日
發(fā)明者劉楠, 范宇, 陳依軍 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)