專利名稱：一種葫蘆巴水提物及其制備和應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物，具體地，涉及一種葫蘆巴水提物及其制備和應用。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種胰島素絕對、相對不足或靶細胞對胰島素敏感性減低引起的以糖代謝紊亂為主的慢性綜合性疾病。其中，2型糖尿病也叫成人發(fā)病型糖尿病，多在35 40歲之后發(fā)病，占糖尿病患者90%以上。2型糖尿病病友體內(nèi)產(chǎn)生胰島素的能力并非完全喪失，有的患者體內(nèi)胰島素甚至產(chǎn)生過多，但胰島素的作用效果卻大打折扣，因此患者體內(nèi)的胰島素可能處于一種相對缺乏的狀態(tài)。可以通過某些口服藥物刺激體內(nèi)胰島素的分泌，但到后期仍有部分病人需要像I型糖尿病那樣進行胰島素治療?？傊?型糖尿病治療的短期目標是控制血糖，長期目標是預防相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。其基礎(chǔ)治療方案主要由運動和飲 食構(gòu)成，但是藥物治療和血糖監(jiān)測往往也非常關(guān)鍵。隨著對糖尿病病理生理機制的深入認識，針對不同作用靶點的藥物正在被不斷研發(fā)。二肽基肽酶IV (DPPIV)是研究治療2型糖尿病的新靶點，DPP IV能夠迅速滅活腸促胰島素胰高血糖素樣肽I(GLP-I)和糖依賴性胰島素釋放肽(GIP)等多種激素，使血糖升高。而DPP IV抑制劑則延長和提高了內(nèi)源性GLP-I和GIP的活性，促進胰島素分泌，降低血糖。目前，已有相關(guān)化學合成的DPP IV抑制劑，但是，它們的生理毒性較高、穩(wěn)定性較差。文獻報道，植物葫蘆巴有一定程度的降糖作用，但降糖機制尚不明確，其對DPP IV的影響也未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種葫蘆巴水提物以及它的制備方法，該葫蘆巴水提物具有DPP IV抑制劑活性，并能夠用于治療2型糖尿病，由于葫蘆巴水提物為純天然植物提取物，因此，它對人體的生理毒害作用幾乎沒有。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案
一種葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾
液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物的制備方法，包括以下步驟
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾
液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。具體地，步驟(3)制得的葫蘆巴水提物的得率為18-25%。
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物在制備二肽基肽酶IV抑制劑中的應用。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物在制備治療2型糖尿病藥物中的應用。本發(fā)明具有以下有益效果
(1)本發(fā)明通過葫蘆巴種子提取了葫蘆巴水提物，其工藝簡單、易操作，無需大型儀器的介入，特別適于大規(guī)模生產(chǎn)利用；
(2)本發(fā)明提取的了葫蘆巴水提物對DPPIV的活性具有明顯的抑制效果，其體外實驗已充分證明，葫蘆巴水提物可以作為DPPIV抑制劑使用；
(3)通過小鼠體內(nèi)實驗證明，葫蘆巴水提物對于小鼠的體重、血糖、血脂等指標都有顯 著的影響，可以用作治療2型糖尿病的藥物使用。
具體實施例方式產(chǎn)品及制備實施例 實施例I
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡30分鐘，煮沸30分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡30分鐘，煮沸30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為25%。實施例2
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20分鐘，煮沸20分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20分鐘，煮沸20分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為18%。實施例3
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡25分鐘，煮沸25分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡25分鐘，煮沸25分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為22%。葫蘆巴水提物在制備二肽基肽酶IV抑制劑中的應用實施例 實驗一葫蘆巴水提物對二肽基肽酶IV活性抑制的體外實驗 實驗中的材料及藥品
葫蘆巴種子采自新疆和田地區(qū)；
二妝基妝酶 IV (Dipeptidyl Peptidase IV, from porcine kidney D7052-1VL,美國sigma 公司)；
甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺(G0513-25MG,美國sigma公司)；
Tris-HCL 緩沖液 PH=8. 2 ；
抑二肽素 A (IIe-Pro-IIe)美國 sigma 公司)。
將葫蘆巴水提物(由產(chǎn)品實施例的實施例I制得)配制成不同濃度梯度的溶液，觀察抑制率的變化
實驗分為4個組，每組設(shè)3個復孔，分別為
空白對照組(Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺)；
陰性對照組(二肽基肽酶IV +Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺)；
實驗空白對照組(葫蘆巴水提物+Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺)； 實驗組(葫蘆巴水提物+ 二肽基肽酶IV +Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對硝基苯
胺)；
由于葫蘆巴水提物為有色物，在405nm處檢測時會出現(xiàn)自身顏色干擾，因此在檢測時設(shè)置每種提取物各濃度的空白盡量避免假陽性現(xiàn)象。首先，將各濃度葫蘆巴水提物、二肽基肽酶IV、甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺及Tris-HCL緩沖液在37°C溫度下水浴15_30min，然后按照葫蘆巴水提物、二肽基肽酶IV、Tris-HCL緩沖液、甘氨酰脯氨酸對硝基苯胺的順序依次加入96孔板中，加入量如表I :
_表I ■■抑制DPPIV活性反應體系各組分加入量單位ML_
權(quán)利要求
1.一種葫蘆巴水提物，其特征在于，通過以下步驟制備完成 (1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液； (2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液； (3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。
2.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物的制備方法，包括以下步驟 (1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液； (2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液； (3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葫蘆巴水提物的制備方法，其特征在于，步驟(3)制得的葫蘆巴水提物的得率為18-25%。
4.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物在制備ニ肽基肽酶IV抑制劑中的應用。
5.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物在制備治療2型糖尿病藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液；(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物對DPPIV活性具有明顯的抑制作用，同時，可用于制備治療2型糖尿病的藥物。
文檔編號A61K36/48GK102670697SQ20121014794
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月14日
發(fā)明者李琳琳, 楊衛(wèi)星, 楊珍珍, 毛新民, 王燁, 陶義存, 駱新 申請人:新疆醫(yī)科大學