抗柯薩奇病毒的二萜酸及其制法和其藥物組合物與用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及從假地楓皮（Illicium?jiadifengpi?B.N.Chang）中分離得到的抗柯薩奇病毒有效成分包括六個(gè)新的松香烷型二萜酸類(lèi)(1-6)化合物和七個(gè)已知的松香烷型二萜酸類(lèi)(7-13)化合物，其藥效學(xué)上可接受的鹽，及其制備方法，含有這類(lèi)化合物的藥物組合物，以及這類(lèi)化合物在制備抗柯薩奇病毒制劑藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】抗柯薩奇病毒的ニ萜酸及其制法和其藥物組合物與用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，本發(fā)明涉及一類(lèi)松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-13)，其中包括新化合物(1-6)和已知化合物(7-13)，其藥效學(xué)上可接受的鹽，其制備方法，含有這類(lèi)化合物的藥物組合物，以及這類(lèi)化合物在制備抗柯薩奇病毒制劑藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]柯薩奇病毒屬于小核糖酸病毒科的腸道病毒屬。病毒基因組為單股正鏈RNA病毒，根據(jù)其生物學(xué)特點(diǎn)分為A類(lèi)和B類(lèi)，是ー類(lèi)常見(jiàn)的經(jīng)呼吸道和消化道感染人體的病毒，尤其是B型病毒，感染后人會(huì)引起心肌炎，柯薩奇病毒還可以引起腦膜炎、輕度麻痹、胸膜痛、肋間痛、呼吸性疾病、結(jié)膜炎以及手足ロ綜合征。但是，對(duì)于柯薩奇病毒引起的感染，到目前為止沒(méi)有特效藥物進(jìn)行治療，因此開(kāi)發(fā)出具有特異性抗柯薩奇病毒的藥物是很有必要的。我國(guó)藥用植物資源豐富和數(shù)千年的用藥歷史，從中尋找針對(duì)抗柯薩奇病毒的藥物先導(dǎo)化合物，進(jìn)而創(chuàng)制成新藥是具有重要的意義和實(shí)用價(jià)值。
[0003]假地楓皮(Illiciumjiadifengpi Β.N.Chang)為木蘭科(Magnoliaceae)八角屬植物，為假地楓皮的根皮和莖皮。產(chǎn)于廣西東北部、廣東北部(乳源)、湖南南部(宜章)、江西(遂川、上猶、安福)等地?！墩憬参镏尽?、《浙江民間常用草藥》均已收載，民間常用根皮和莖皮煎湯ロ服治療跌打損傷，瘀血腫痛。從目前該植物化學(xué)成分研究的結(jié)果來(lái)看，該植物主要含有揮發(fā)油類(lèi)、黃酮類(lèi)、ニ萜酸類(lèi)和倍半`萜類(lèi)等化合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種新的抗柯薩奇病毒的藥物，具體而言，本發(fā)明提供了六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6)和七個(gè)已知化合物(7-13)，及其藥效學(xué)上可接受的鹽。
[0005]本發(fā)明要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是，提供六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6 )和七個(gè)已知化合物(7-13)的制備方法。
[0006]本發(fā)明要解決的再一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是，提供ー種藥物組合物，其包括藥物有效劑量的、作為活性成分的六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6)和七個(gè)已知化合物(7-13)及制藥領(lǐng)域中常用的載體。
[0007]本發(fā)明要解決的再一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是，提供上述六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6)和七個(gè)已知化合物(7-13)在制備抗柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用。
[0008]從上述藥理活性研究結(jié)果來(lái)看，化合物1-3，5-13顯示了對(duì)CVB2抑制作用，化合物
1-3，5-13顯示了對(duì)CVB3的抑制作用；化合物1，2，8，9，11和12顯示了對(duì)CVB4的抑制作用；化合物1-6，8-12顯示了對(duì)CVB6的抑制作用；且化合物1，2，8，9，11和12對(duì)以上四型都具有作用。對(duì)于到目前為止無(wú)特異性抗柯薩奇病毒藥物的情況下，上述化合物是很有價(jià)值的。
[0009]我們研究首次從假地楓皮根及根皮中分離得到的松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-13)。
[0010]本發(fā)明化合物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的吋，如果需要，可將本發(fā)明化合物與ー種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為藥物使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?br> [0011]本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如ロ服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等，優(yōu)選ロ服給藥。
[0012]給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括Ο/V型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等。固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。
[0013]本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種
微粒給藥系統(tǒng)。
[0014]為了將単位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤(rùn)劑可以是水、こ醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、こ基纖維素、丙烯酸樹(shù)脂、卡波姆、聚こ烯吡咯烷酮、聚こニ丙醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚こ烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧こ烯山 梨糖醇脂肪酸酷、十二烷基磺酸鈉；潤(rùn)滑劑和助流劑可以是滑石粉、ニ氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚こニ醇等。
[0015]還可以將片劑進(jìn)ー步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
[0016]為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚こ烯吡咯烷酮、月桂酸聚こニ醇甘油酷、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃耆膠、明膠、こ醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、こ基纖維素等。
[0017]為了將給藥單元制成栓劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如聚こニ醇、卵磷脂、可可脂、高級(jí)醇、高級(jí)醇的酷、明膠、半合成甘油酯等。
[0018]為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發(fā)明六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6)和七個(gè)已知化合物(7-13)與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
[0019]例如，將本發(fā)明六個(gè)新松香烷型ニ萜酸類(lèi)化合物(1-6)和七個(gè)已知化合物(7-13)制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳剤、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含ー種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑剤、防腐剤、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、こ醇、聚こニ醇、1，3-丙ニ醇、こ氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧こ烯山梨醇脂肪酸酷等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、pH調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的。
[0020]此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。
[0021]為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
[0022]本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的性別、年齡、體重、性格及個(gè)體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來(lái)講，本發(fā)明中藥學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明化合物組合物中最后的制劑中所含有的實(shí)際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達(dá)到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的預(yù)防或治療目的。本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍為0.001-10mg/Kg體重，分2-4次服用。本發(fā)明的化合物或組合物可単獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用并調(diào)整劑量。
[0023]術(shù)語(yǔ)與簡(jiǎn)稱(chēng)
[0024]CV柯薩奇病毒
[0025]ES1-MS電噴霧質(zhì)譜
[0026]HMBC異核多鍵相關(guān)(一種測(cè)定分子中遠(yuǎn)程氫碳連接關(guān)系的ニ維核磁共振譜)
[0027]HPLC高效液相色譜`
[0028]HRES1-MS高分辨電噴霧質(zhì)譜
[0029]HSQC異核單量子相關(guān)(一種測(cè)定分子中氫碳直接相連關(guān)系的ニ維核磁共振譜)
[0030]TC50半數(shù)有毒濃度
[0031]IC5。半數(shù)抑制濃度
[0032]SI 選擇指數(shù)，SI=TC50/IC50
[0033]IR紅外光譜
[0034]NMR核磁共振
[0035]R0ESY旋轉(zhuǎn)坐標(biāo)系歐沃豪斯增益譜(一種測(cè)定分子中氫原子空間位置臨近關(guān)系的ニ維核磁共振譜)
[0036]UV紫外光譜
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0037]圖1假地楓皮的提取分離及松香烷型ニ萜酸(1-13)的制備流程圖【具體實(shí)施方式】
[0038]下面的實(shí)施例及藥物活性實(shí)驗(yàn)用來(lái)進(jìn)ー步說(shuō)明本發(fā)明，但這并不意味著對(duì)本發(fā)明的任何限制。
[0039]實(shí)施例1松香烷型ニ萜酸(1-13)的分離及結(jié)構(gòu)表征[0040]假地楓皮根及根皮10kg，粉碎，用959ffitOH (こ醇，50L)回流提取3次，每次2小吋。提取液減壓濃縮得到浸膏900g，用甲醇溶解后，用2kg硅藻土拌樣，依次用石油醚、こ酸こ酯和甲醇回流提取，得こ酸こ酯部位47g。こ酸こ酯部位經(jīng)硅膠柱(200-300目)色譜，用石油醚:丙酮(100: 0至100: 25)，ニ氯甲烷:甲醇(100: 4至100: 25)進(jìn)行洗脫，根據(jù)薄層板檢識(shí)合并流份，得到Y(jié)1-Y5五個(gè)流份。Y1 (2.3g)流份經(jīng)凝膠柱分離純化后(ニ氯甲烷)，得Y1-1-Y1-5五個(gè)流份。Yl-2 (0.5g)經(jīng)凝膠柱純化后(ニ氯甲烷)，得到化合物7 (200mg)。Yl-3 (0.5g)流份用制備型HPLC (ShimadzuLC_6AD型制備液相儀，YMC-pack 0DS-A色譜柱(250 X 20mm, 5 μ m)分離，流動(dòng)相:こ腈:0.03%三氟こ酸水(80: 20，v/v, 5ml/min),得到化合物 9 (200mg, tK=47minutes)。Y2 (1.6g)流份經(jīng)凝膠柱分離純化(ニ氯甲烷)，得Y2-1-Y2-3三個(gè)流份。Y2-1 (0.35g)流份用制備型HPLC(Shimadzu LC-6AD型制備液相儀,YMC-pack 0DS-A色譜柱(250X20mm, 5 μ m)分離，流動(dòng)相:こ腈:0.03% 三氟こ酸水(80: 20，v/v, 5ml/min),得到化合物 13 (38mg, tK=51minutes)。Y2-3 (0.4g)流份用制備型 HPLC (Shimadzu LC-6AD 型制備液相儀，YMC-pack 0DS-A 色譜柱(250 X 20mm, 5 μ m)分離，流動(dòng)相:こ月青:0.03%三氟こ酸水(45: 55, v/v, 5ml/min),得到化合物 1 (13mg, tE=55minutes),8 (28mg, tE=39minutes), 10 (38mg, tE=45minutes), 11(50mg, tR=48minutes)和 12 (34mg, tR=50minutes)。Y3 (14g)流份經(jīng)娃膠柱(200-300 目)色譜，洗脫劑:石油醚:丙酮(6: 1)得到Y(jié)3-1-Y3-5五個(gè)流份。Y3-2 (1.5g)流份經(jīng)凝膠柱色譜分離純化(ニ氯甲烷)，得到Y(jié)3-2-1-Y3-2-5五個(gè)流份。Y3-2-2(0.lg)流份經(jīng)重結(jié)晶(ニ氯甲燒:甲醇，v/v，l: 1)得到化合物2 (42mg)。Y3-4 (3.2g)用反相色譜柱(50 μ m, 340g)進(jìn)行分離，流動(dòng)相:甲醇:水(45: 55至100: 0)進(jìn)行洗脫，得到Y(jié)3-4-1-Y3-4-6六個(gè)流份。Y3-4-2 (0.45g)流份用制備型 HPLC (Shimadzu LC-6AD 型制備液相儀，YMC-pack 0DS-A 色譜柱(250X20mm, 5 μ m)分離，流動(dòng)相:こ腈:0.03%三氟こ酸水(30: 70，v/v, 7ml/min),得到化合物6 (26mg, tK=35minutes)。Y3_4_4 (0.25g)流份經(jīng)凝膠柱純化(ニ氯甲燒),得到化合物5 (17mg)。Y4 (7.5g)流份用反相色譜柱(50μπι，3408)進(jìn)行分離，流動(dòng)相:(5: 95至70: 30)進(jìn)行洗脫，得到Y(jié)4-1-Y4-10十個(gè)流份。Y4-9 (0.7g)經(jīng)凝膠柱色譜分離純化(甲醇:水，v/v，50: 50)，得到 Y4-9-1-Y4-9-9 九個(gè)流份。Y4_9_5(0.13g)流份用制備型 HPLC(Shimadzu LC-6AD 型制備液相儀，YMC-pack 0DS-A 色譜柱(250 X 20mm, 5 μ m)分離，流動(dòng)相:こ腈:0.03% 三氟こ酸水(25: 75，v/v, 7ml/min),得到化合物 3( 12mg, tK=77minutes)和化合物4 (10mg, tE=80minutes)o提取分離流程圖如附圖1所示。
[0041]化合物1-13的結(jié)構(gòu)式及鑒定方法
[0042]
【權(quán)利要求】
1.具有式1-13所示的松香烷型二萜酸類(lèi)化合物及其藥效學(xué)上可接受的鹽；
2.一種藥物組合物，其特征在于，含有有效劑量的權(quán)利要求1的任一化合物或其藥效學(xué)上可接受的鹽，以及藥效學(xué)上可以接受的載體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物選自片劑、膠囊、丸劑、注射劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物選自緩釋制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物選自控釋制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物選自微粒給藥系統(tǒng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1化合物的制備方法，其主要來(lái)源于假地楓皮(Illiciumjiadifengpi B.N.Chang)的地下部分。
8.權(quán)利要求1的任一化合物及其藥效學(xué)上可接受的鹽，在制備抗柯薩奇病毒的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其特征在于，所述的薩奇病毒為CVB2型、CVB3型、CVB4型或CVB6型。
10.權(quán)利要求1的任一化合物及其藥效學(xué)上可接受的鹽，在制備治療柯薩奇病毒的心肌炎，腦膜炎、輕度麻痹、胸膜痛、肋間痛、呼吸性疾病、結(jié)膜炎以及手足ロ綜合征的藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】A61K31/191GK103450011SQ201210171961
【公開(kāi)日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2012年5月29日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月29日
【發(fā)明者】庾石山, 蔣建東, 張貴杰, 李玉環(huán), 屈晶, 馬雙剛, 劉云寶, 李勇 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所