規(guī)模化培育北冬蟲夏草子實體及其保健和制藥應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體，包含北冬蟲夏草子實體蟲草素0.3%~3%、蟲草多糖8%~30%、腺苷0.055%~0.25%和蛋白質(zhì)10%~35%，所述規(guī)模化培育系通過可控光培養(yǎng)架調(diào)控光照強度和光照周期進行光照培養(yǎng)以提高子實體內(nèi)有效成分含量。本發(fā)明還提供含規(guī)?；嘤倍x夏草子實體的保健品，以及該規(guī)?；嘤倍x夏草子實體在制備保肝藥物、益腎藥物、制備促進免疫細胞生長藥物和制備增強機體非特異性抵抗力藥物上的應(yīng)用。
【專利說明】規(guī)模化培育北冬蟲夏草子實體及其保健和制藥應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體，含規(guī)?；嘤倍x夏草子實體的保健品及規(guī)?；嘤倍x夏草子實體在制藥上的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】[0002]北冬蟲夏草，又名蛹蟲草，蛹草，北蟲草，蛹草菌等，在吉林省首次發(fā)現(xiàn)，經(jīng)鑒定它與冬蟲夏草為同一屬，故定名為蛹草。分類學(xué)上屬于真菌門，子囊菌亞門，核菌綱，球殼目，麥角菌科，蟲草屬。北冬蟲夏草作為傳統(tǒng)珍貴中藥材，我國人民對其藥用價值早有認識。李時珍在《本草綱目》中指出，蟬花能主治“小兒天吊驚癇，夜啼，心悸”。據(jù)考證，當(dāng)時的“蟬花”包括了蟬蟲草和蛹蟲草等多種寄生于蟲體或蛹體上的蟲草。趙學(xué)敏在《本草綱目拾遺》中把蟲草類的藥用歸之為“能治百虛百損”。《新華本草綱要》稱，蛹草“全草:味甘，性平。有益肺腎，補精髓，止血化痰的功能”，可見其功效與冬蟲夏草近似，故一些醫(yī)家將其作為冬蟲夏草的替代品入藥應(yīng)用。北冬蟲夏草人工栽培成功以來，隨著人們對北冬蟲夏草的滋補保健功效和多種藥用價值的認識，其開發(fā)利用研究倍受關(guān)注。人們在藥理和毒理等方面進行了大量的研究，研究表明，北冬蟲夏草內(nèi)含有蟲草素、蟲草酸、多糖、腺苷等多種有效成分，在降血脂，防止動脈硬化，保護心、腦組織，鎮(zhèn)靜催眠，增強巨噬細胞的活性，抗炎、抗癌、抗菌、抗衰老等方面都有良好功效。
[0003]本 申請人:早先申請的中國專利申請CN 102037854A公開了一種北冬蟲夏草子實體的培養(yǎng)方法。該方法將接種后的培養(yǎng)容器排列堆放于可控光培養(yǎng)架上置組培室中培養(yǎng)，在避光培養(yǎng)后通過可控光培養(yǎng)架調(diào)控光照強度和光照周期進行光照培養(yǎng)，從而滿足了北冬蟲夏草正常生長對光照的需求，使出草率提高，生物轉(zhuǎn)化率提高，并通過調(diào)節(jié)出草管理階段的光照強度和光照周期使子實體內(nèi)有效成分含量提高和增加子實體內(nèi)生物量的積累。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體、其制備保肝藥物、益腎藥物、促進免疫細胞生長藥物和增強機體非特異性抵抗力藥物的應(yīng)用，及含北冬蟲夏草子實體的保健品。
[0005]本發(fā)明提供的規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體包含北冬蟲夏草子實體蟲草素
0.3%~3%、蟲草多糖8%~30%、腺苷0.0559Π).25%和蛋白質(zhì)10%~35%，所述規(guī)模化培育系通過可控光培養(yǎng)架調(diào)控光照強度和光照周期進行光照培養(yǎng)以提高子實體內(nèi)有效成分含量。
[0006]本發(fā)明對規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體的臨床前藥理學(xué)研究顯示:
[0007]1.規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體1000、500、250mg/kg劑量對CCL4誘發(fā)的小鼠肝臟ALT升高有一定的降低作用，其作用程度優(yōu)于野生冬蟲夏草，試驗結(jié)果表明北冬蟲夏草子實體對CCL4所致小鼠急性肝損傷有一定的保護作用。尤其高劑量組與聯(lián)苯雙酯比較，作用相當(dāng)。
[0008]2.規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體對慶大霉素誘發(fā)的小鼠急性腎損傷導(dǎo)致的BUN和Cr升高有一定的保護作用。北冬蟲夏草子實體對慶大霉素誘發(fā)的小鼠急性腎損傷導(dǎo)致的尿液異常有緩解作用。試驗結(jié)果表明北冬蟲夏草子實體對慶大霉素誘發(fā)的小鼠急性腎損傷有一定的保護作用。同劑量北冬蟲夏草子實體與野生冬蟲夏草相比作用程度相當(dāng)。
[0009]3.規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體1000、500、250mg/kg三個劑量組均明顯促進小鼠脾淋巴細胞增殖，有一定量效關(guān)系，野生冬蟲夏草與同劑量北冬蟲夏草子實體效應(yīng)相當(dāng)。北冬蟲夏草子實體三個劑量組和野生冬蟲夏草均能明顯激活NK細胞的活性，有一定量效關(guān)系，北冬蟲夏草子實體的作用優(yōu)于同劑量野生冬蟲夏草。
[0010]4.規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體1000、500、250mg/kg劑量能明顯延長小鼠在水中的持續(xù)游泳時間，三個劑量與對照組比較，均有顯著性差異，能提高體力和耐力，具有增強抗疲勞作用。尤其高劑量組與野生冬蟲夏草同劑量比較，作用相當(dāng)。
[0011]5.規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體1000、500、250mg/kg劑量對小鼠在常壓下有耐缺氧作用，能增強機體非特異性抵抗能力，中高劑量與對照組比較，有顯著差異，尤其高劑量組與野生冬蟲夏草同劑量比較，作用相當(dāng)。
[0012]規(guī)?；嘤谋倍x夏草在保護肝臟損傷、腎臟損傷、耐缺氧、抗疲勞、增強免疫力方面優(yōu)于或與同劑量野生冬蟲夏草相當(dāng)，故能作為野生冬蟲夏草的替代品。
[0013]因此，本發(fā)明提供規(guī)?；嘤倍x夏草子實體在制備保肝藥物上的應(yīng)用。
[0014]本發(fā)明提供規(guī)?；嘤倍x夏草子實體在制備益腎藥物上的應(yīng)用。
[0015]本發(fā)明提供規(guī)?；嘤倍x夏草子實體在制備促進免疫細胞生長藥物上的應(yīng)用。
[0016]本發(fā)明還提供規(guī)?；?培育北冬蟲夏草子實體在制備增強機體非特異性抵抗力藥物上的應(yīng)用。
[0017]本發(fā)明還提供包含規(guī)模化培育北冬蟲夏草子實體的保健品。所述保健品可只包含規(guī)模化培育北冬蟲夏草子實體，也可進一步包含選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅率中的一種或幾種。
[0018]所述保健品中包含北冬蟲夏草子實體0.5_2g;包含選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、獲茶、靈芝、紅率中的一種或幾種時，其量各為l-5g,紅率可為3-5枚。
[0019]所述保健品可用于煲湯或作茶飲?？筛鶕?jù)需要，將北冬蟲夏草子實體與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材或其飲片包裝成小袋。用于煲湯或作茶飲時，連袋或拆開放于雞/鴨/肉等各種湯中同煮，或與茶葉一起沖泡。
[0020]根據(jù)需要，所述保健品也可制成膠囊、顆粒劑、片劑或口服液。
[0021]在一個實施方式中，將北冬蟲夏草子實體與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材粉碎、篩取細粉，充填膠囊；或?qū)⒈倍x夏草子實體粉碎成細粉后，與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材的浸膏混合，粉碎，干燥，充填膠囊。
[0022]在另一個實施方式中，將北冬蟲夏草子實體粉碎成細粉后，與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材的浸膏混合，粉碎，干燥，制成顆粒劑。
[0023]在另一個實施方式中，將北冬蟲夏草子實體粉碎成細粉后，與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材的浸膏混合，粉碎，干燥，制粒，壓片，制成片劑。
[0024]在還有一個實施方式中，將北冬蟲夏草子實體與選自人參、黃芪、當(dāng)歸、黨參、枸杞、茯苓、靈芝、紅棗中的一種或幾種中藥材混合，用水浸泡，過濾，濃縮，灌裝，滅菌，制成口服液。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1A~IF分別是正常動物組、模型組(NS)、聯(lián)苯雙酯組(200mg/kg)、野生蟲草組(1000mg/kg)和規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體兩個劑量組(1000、250mg/kg)的小鼠肝臟組織切片圖。
[0026]圖2A~2F分別是正常動物組、模型組、野生蟲草組和規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體三個劑量組小鼠在實驗第8天時的腎臟組織切片圖。
[0027]圖3A~3F分別是正常動物組、模型組、野生蟲草組和規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體三個劑量組小鼠在實驗第15天時的腎臟組織切片圖。
【具體實施方式】
[0028]以下用實施例和實驗例對本發(fā)明作進一步闡述。本【技術(shù)領(lǐng)域】普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認識到，這些實驗例僅僅用于舉例說明本發(fā)明而不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制，對本發(fā)明所作的任何改變，只要不違背本發(fā)明的精神實質(zhì)，都將落在權(quán)利要求范圍內(nèi)。
[0029]實施例1:北冬蟲夏草子實體的規(guī)模化培育
[0030]將接種C.militaris后的培養(yǎng)容器排列堆放于可控光培養(yǎng)架上置組培室。在避光培養(yǎng)后進行光照培養(yǎng)，按照北冬蟲夏草的各個生長時期用可控光培養(yǎng)架調(diào)控光照強度和光照周期:`
[0031]菌絲轉(zhuǎn)色期:于20°C -22°C環(huán)境溫度、60% -70%相對濕度下，控制光照強度為IOOlux — 3001ux，光照周期為 12/12—24/0 (光 / 暗，h)；
[0032]子實體生長期的原基分化形成期:于20°C -22°C環(huán)境溫度、70% -75%相對濕度下，控制光照強度為2001ux—6501ux,光照周期為8/16—9/15 (光/暗，h)；
[0033]子實體生長期的子座生長期:于20°C -22°C環(huán)境溫度、65% -75%相對濕度下，控制光照強度為2001ux — 8001ux，光照周期為8/16-9/15光/暗，h)；
[0034]子實體生長期的子實體生長旺盛期:于20°C -22°C環(huán)境溫度、65% -75%相對濕度下，控制光照強度為7001ux — lOOOlux，光照周期為8/16 — 9/15 (光/暗，h)；
[0035]子實體生長期的子實體生殖生長期:于20°C -23°C環(huán)境溫度、65% _80%相對濕度下，控制光照強度為lOOOlux — 15001uX，光照周期為8/16 — 9/15 (光/暗，h)。
[0036]實施例2:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0037]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、枸杞l_5g混合包裝成小包。
[0038]實施例3:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0039]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、枸杞l_5g、紅棗3_5枚混合包裝成小包。
[0040]實施例4:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0041]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、黃芪、當(dāng)歸、枸杞各l_5g、紅棗3-5枚混合包裝成小包。[0042]實施例5:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0043]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、黨參、黃芪、當(dāng)歸、枸杞各l_5g、紅棗3-5枚混合包裝成小包。
[0044]實施例6:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0045]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、人參、茯苓、當(dāng)歸各l_5g、紅棗3-5枚混合包裝成小包。
[0046]實施例7:北冬蟲夏草子實體保健品的制備
[0047]將北冬蟲夏草子實體0.5_2g、人參、靈芝、枸杞各l_5g、紅棗3-5枚混合包裝成小包。
[0048]實驗例1:規(guī)?；嘤谋倍x夏草子實體對CCU引起的小鼠急性肝損傷的保護麵
[0049]1.實驗材料
[0050]I)受試藥物:規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體(以下簡稱北冬蟲夏草子實體，上海國寶企業(yè)發(fā)展中心產(chǎn)品)，研磨成粉末后用蒸餾水配至所需濃度；
[0051]2)陽性對照藥1:野生蟲草(蔡同德堂藥號，產(chǎn)地西藏)，研磨成粉末后用蒸餾水配至所需濃度；
`[0052]3)陽性對照藥2:聯(lián)苯雙酯片(江蘇鵬鷂藥業(yè)有限公司，批號1010071，25mg/片)，研磨成粉末后用蒸餾水配至所需濃度；
[0053]4)其他=CCl4 (國藥集團化學(xué)試劑有限公司)，以植物油稀釋。
[0054]2.實驗動物
[0055]雄性ICR小鼠，18_20g (上海西普爾-必凱實驗動物有限公司)
[0056]生產(chǎn)許可證號:SCXK(滬)2008-0016
[0057]使用許可證號:SYXK(滬)2009-0068
[0058]3.試驗方法
[0059]雄性健康ICR小鼠70只，隨機分為6組:北冬蟲夏草子實體兩個劑量組(1000、250mg/kg);野生蟲草陽性對照組(1000mg/kg);聯(lián)苯雙酯片(200mg/kg)陽性對照組；模型組(NS)和正常動物組。除正常動物組外，其余各組小鼠分別經(jīng)胃管給予北冬蟲夏草子實體、野生蟲草、聯(lián)苯雙酯和生理鹽水，0.5ml/20g體重，每天一次，連續(xù)灌胃14天。末次給藥后即刻腹腔注射CCL4油溶液(0.15%，10ml/kg)。
[0060]于注射CCL4后21小時全部受試動物摘眼球采血，分離血清,測定血清ALT。計算平均值，比較給藥組和對照組之間差異的顯著性。各組小鼠均作組織病理學(xué)檢查。
[0061]4.試驗結(jié)果
[0062]正常組10個小鼠肝臟均正常，模型組10個動物肝臟發(fā)白，紋理變粗，邊緣增厚。北冬蟲夏草子實體兩個劑量組、野生蟲草組和聯(lián)苯雙酯組的動物肝臟基本正常，與正常組小鼠肝臟無明顯差異。
[0063]正常對照組小鼠ALT為29.80，模型組為100.60，給予北冬蟲夏草子實體1000、250mg/kg的小鼠ALT分別為62.56、68.33，緩解率分別為37.82、32.07% ;野生蟲草組ALT為118.56，緩解率為0 ;聯(lián)苯雙酯組小鼠ALT為51.60，緩解率為48.71%。
[0064]組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，模型組動物肝細胞輕度濁腫，可見單個肝細胞壞死和炎癥細胞局灶性浸潤；北冬蟲夏草子實體各組、野生蟲草組、聯(lián)苯雙酯組動物肝細胞變性程度明顯輕于模型組，炎癥細胞浸潤不明顯。
[0065]試驗結(jié)果見表1和圖1A~1F。
[0066]表1.北冬蟲夏草子實體對CCL4引起的小鼠急性肝損傷的保護作用
[0067]
【權(quán)利要求】
1.規(guī)模化培育的北冬蟲夏草子實體，包含北冬蟲夏草子實體蟲草素0.3%~3%、蟲草多糖8%~30%、腺苷0.0559Π).25%和蛋白質(zhì)10%~35%，所述規(guī)?；嘤低ㄟ^可控光培養(yǎng)架調(diào)控光照強度和光照周期進行光照培養(yǎng)以提高子實體內(nèi)有效成分含量。
2.權(quán)利要求1所述北冬蟲夏草子實體在制備保肝藥物上的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述北冬蟲夏草子實體在制備益腎藥物上的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述北冬蟲夏草子實體在制備促進免疫細胞生長藥物上的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1所述北冬蟲夏草子實體在在制備增強機體非特異性抵抗力藥物上的應(yīng)用。
6.含權(quán)利要求1所述北冬蟲夏草子實體的保健品。
7.如權(quán)利要求6所述的保健品,其中還包含選自人參、黃苗、當(dāng)歸、黨參、枸杞、獲茶、靈芝、紅棗中的一種或幾種。
8.權(quán)利要求6或7所述保健品在煲湯和茶飲上的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求6或7所述保健品，所述保健品為膠囊、片劑或口服液。
【文檔編號】A61K38/00GK103479683SQ201210191457
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2012年6月12日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月12日
【發(fā)明者】唐永范, 唐亮 申請人:上海國寶企業(yè)發(fā)展中心, 上海國寶生物工程研究所