專利名稱：一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝。
背景技術(shù)：
黃苗為豆科多年生草本蒙古黃苗Astragalus membranaceus (Fisch. )Bge. var.mongholicus (Bge. ) Hsiao 或莢膜黃苗 Astragalus m embranaceus (Fisch.)的干燥根。經(jīng)查閱相關(guān)文獻(xiàn)，直到目前為止，對(duì)于黃芪提取工藝的研究主要集中在單提黃芪皂苷或黃芪多糖，對(duì)藥材的合理化利用造成極大的浪費(fèi)。目前檢索的專利文獻(xiàn)和非專利文獻(xiàn)中有報(bào)道微波單獨(dú)提取黃芪多糖或黃芪皂苷的文獻(xiàn)，其中選擇的溶劑和參數(shù)有區(qū)別，如胡如桂等(微波水提黃芪皂苷的工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18 (5) :1074-1075)，利用微波輔助提取技術(shù)，對(duì)黃芪中黃芪皂苷的提取，以水為溶劑，得到的最佳提取工藝為黃芪60目，微波功率800W，20倍量水提取2次，15min/次，得到的黃芪皂苷的含量為3. 497mg/g ;龔盛昭等(微波提取黃芪皂苷的工藝研究[J]，中成藥，2005，28 (8) :889-891 )，利用微波輔助提取技術(shù)，對(duì)黃芪中黃芪甲苷的提取，以95%的乙醇為溶劑，得到的最佳提取工藝為取黃芪粉50g，加入350mL 95%乙醇，用微波輻射30s，間隔Imin后再輻射30s，重復(fù)間隔輻射至總輻射時(shí)間為4min，過濾。按同樣條件重復(fù)提取I次。產(chǎn)率2. 42%。許海燕等(微波提取黃芪中多糖的工藝研究[J]，中草藥，2008. 39 (10) :1496-1499)，對(duì)黃芪中黃芪多糖的提取，以水為提取溶劑，得到的最佳提取條件為控溫70°C，提取3次，每次lOmin，所得黃芪多糖的提取率為9. 44%。龔盛昭等(微波輔助提取黃芪多糖的工藝研究[J]，華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2004，32 (8)93-96)，對(duì)黃芪中黃芪多糖的提取，以pH=9的堿水為提取溶劑，液料質(zhì)量比為12 I ;用飽和石灰水調(diào)節(jié)pH=9 ;微波功率300W時(shí)提取2次，每次提取lOmin，提取液真空濃縮后，加入乙醇使多糖沉淀，過濾，沉淀用乙醇洗滌多次，真空干燥后即得黃芪粗多糖，產(chǎn)率為14. 6%o目前檢索的文獻(xiàn)均是單獨(dú)提取黃芪皂苷或黃芪多糖，還沒有文獻(xiàn)報(bào)道同時(shí)提取這兩類有效成分的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝。本發(fā)明提供了一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，它包括如下步驟a、稱取黃芪藥材；b、將藥材置微波提取裝置中，微波功率500W-900W，溫度70°C，共提取3次，第I次加50%-90%的乙醇，提取10min-30min ;第2次加50%_90%乙醇，提取10min_30min ’第3次加蒸懼水，提取20min-40min ；C、將第1、2次的乙醇提取液濃縮，除去乙醇，再加入第3次的水提取液，混合，濃縮，即得本發(fā)明黃芪皂苷和黃芪多糖提取物。
其中，所述的黃芪藥材為藥材飲片或黃豆粒大小的飲片，或過1-3號(hào)篩的藥粉。其中，a步驟所述的藥材黃芪粉碎至24目以下。其中，b步驟所述的乙醇或水的用量為藥材重量的10-14倍。其中，b步驟所述的乙醇為70%的乙醇。其中，b步驟所述的微波功率500-700W。本發(fā)明提取工藝的具體優(yōu)點(diǎn)如下I、黃芪藥材的有效物質(zhì)利用率大大提高。本發(fā)明通過一套試驗(yàn)方案，同時(shí)提取黃 芪藥材中的有效物質(zhì)黃芪皂苷和黃芪多糖，大大提高了黃芪藥材的有效物質(zhì)利用率，并且通過此方法得到的黃芪皂苷和黃芪多糖的提取率都可穩(wěn)定在90%以上。2、黃芪多糖的提取率和產(chǎn)率大大提高。本發(fā)明方法得到的黃芪多糖的含量可穩(wěn)定在260mg/g左右。楊義芳等(申請(qǐng)?zhí)?00510026889. 1，發(fā)明名稱微波提取黃芪多糖的方法)在實(shí)施例2中得到黃芪多糖的產(chǎn)率在20. 4%，本發(fā)明方法所得黃芪多糖的產(chǎn)率在26%左右，以水提5次黃芪多糖的含量為100%計(jì)，測(cè)得本發(fā)明方法得到的黃芪多糖的提取率均可穩(wěn)定在91%左右。3、黃芪皂苷的提取率大大提高，產(chǎn)率相對(duì)提高。本發(fā)明方法得到的黃芪皂苷含量可穩(wěn)定在llmg/g左右，黃芪皂苷的提取率可穩(wěn)定在95%左右。王鑫等(黃芪提取工藝研究[J],中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)，2010，16 (9):17-18)，以乙醇回流的傳統(tǒng)方法進(jìn)行提取，僅以黃芪皂苷得率為指標(biāo)性成分，得到的黃芪皂苷的含量為1. 342mg/g。而胡如桂等(微波水提黃芪皂苷的工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18 (5):1074-1075)，以微波輔助方法進(jìn)行提取，僅以黃芪皂苷得率為指標(biāo)性成分，得到的黃芪皂苷的含量為3. 497mg/g。龔盛昭等(微波提取黃芪皂苷的工藝研究[J]，中成藥，2005，28 (8) :889-891 )，利用微波輔助提取技術(shù)，對(duì)黃芪中黃芪甲苷的提取，測(cè)得產(chǎn)率，以黃芪甲苷計(jì)，為2. 42%。雖然該文獻(xiàn)報(bào)道的黃芪皂苷的產(chǎn)率較高，但未做藥材有效成分提取率的考查。4、黃芪藥材的提取時(shí)間縮短。本發(fā)明最優(yōu)提取方案為不浸泡，共提取3次，每次提取30min，第4次40min，得到黃芪皂苷的含量為llmg/g左右，提取率為95%左右，而陳濤等(黃芪藥材的微波提取工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20 (2):349-350)，利用微波輔助提取技術(shù)，僅僅對(duì)黃芪中黃芪甲苷的提取，以水為溶劑，得到的最佳提取工藝為黃芪先浸泡6h后，然后提取3次，每次10倍量水、90min。5、提取工藝操作大大簡(jiǎn)化。同時(shí)要用到黃芪皂苷和黃芪多糖中藥復(fù)方，就要分別提取黃芪皂苷和黃芪多糖，本發(fā)明方法不需要對(duì)提取溶劑進(jìn)行PH處理。如龔盛昭等(微波輔助提取黃芪多糖的工藝研究[J]，華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2004，32 (8):93-96),對(duì)黃芪中黃芪多糖的提取，以PH=9的堿水為提取溶劑，產(chǎn)率也僅為14. 6%。本發(fā)明提取工藝，大大提高了黃芪藥材中有效成分的利用率(使用本試驗(yàn)方案，可一次性提取出黃芪中的黃芪皂苷和黃芪多糖，并且兩種有效成分提取率都可穩(wěn)定在90%以上)，提高黃芪藥材中黃芪多糖的產(chǎn)率(現(xiàn)有產(chǎn)率在20%左右，本發(fā)明提取方法黃芪多糖產(chǎn)率可穩(wěn)定在24%-26%，黃芪多糖提取率可穩(wěn)定在91%左右)；保證黃芪藥材中黃芪皂苷穩(wěn)定的產(chǎn)率(現(xiàn)有產(chǎn)率在0. 13%-2. 42%，通過本試驗(yàn)最優(yōu)工藝提取的黃芪皂苷產(chǎn)率可穩(wěn)定在1%-1. 1%，黃芪皂苷提取率可穩(wěn)定在95%左右)；相對(duì)縮短了試驗(yàn)時(shí)間，簡(jiǎn)化提取工藝步驟。


圖I黃芪藥材粒徑對(duì)提取工藝的影響(其中，1-5藥材粒徑分別為黃芪飲片、黃豆粒大小、通過I號(hào)篩、通過2號(hào)篩、通過3號(hào)篩)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I本發(fā)明提取工藝參數(shù)篩選試驗(yàn)I儀器和試藥I. I 儀器HWC-3型微波提取實(shí)驗(yàn)設(shè)備(天水華圓醫(yī)療設(shè)備有限公司);UV_6000紫外可見分光光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司)；搖擺式高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(DFY-300型，溫嶺市林大機(jī)械有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE52CS-1型，上海亞榮生化儀器廠)；真空干燥箱(DZG-6020型，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司);BP61型電子天平(萬(wàn)分之一，德國(guó)Satorius);電子天平(BP21ID型，十萬(wàn)分之一，德國(guó)Satorius) ;UPT-I_10T型超純水器(成都超純科技有限公司)；恒溫水浴鍋(金壇市鴻科儀器廠)；各型號(hào)移液槍。I. 2 試藥黃芪藥材(購(gòu)自成都荷花池中藥材市場(chǎng)，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室老師鑒定為正品);黃芪甲苷對(duì)照品(批號(hào)H-013-110621)(購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司)；D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品(批號(hào)I 10833-200302，供含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)。5%苯酚溶液；5%香草醛-冰醋酸溶液；濃硫酸、高氯酸、氨水、苯酚、香草醛等皆為分析純。2方法與結(jié)果2. I黃芪總皂苷的含量測(cè)定2. I. I黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品若干，置IOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀至刻度，搖勻，SP得黃芪甲苷對(duì)照品溶液。分別取0. 0,0. 4,0. 8，I. 2，I. 6mL對(duì)照品溶液置于IOmL具塞刻度試管中，水浴蒸干，冷卻，加5%香草醛-冰醋酸溶液0. 2mL及高氯酸0. 8mL，混勻，于60°C水浴加熱15min，取出，立即冰浴冷卻5min，再加冰醋酸5mL，充分混勻后，以“OmL”具塞刻度試管中的溶液為空白，于561nm測(cè)其吸收度。以黃芪甲苷對(duì)照品的質(zhì)量濃度m為橫坐標(biāo)，吸收度A為縱坐標(biāo)，建立回歸方程C=O. 0010+0. 0474A (r=0. 9997)。黃芪甲苷在0. 0816 0. 3254mg吸收度有良好的線性關(guān)系。2. I. 2黃芪總皂苷供試品溶液的制備精密吸取黃芪提取液40mL (相當(dāng)于4g原藥材)，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘?jiān)铀甀OmL,微熱使之溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40mL，合并正丁醇提取液，用氨試液洗2次，每次40mL，棄去氨液，正丁醇蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。2. I. 3精密度試驗(yàn)取同一供試品溶液，按照2. I. 2項(xiàng)下制備供試品溶液，重復(fù)測(cè)定5次，得RSD為
0.52%。2. I. 4穩(wěn)定性試驗(yàn)、
將同一對(duì)照品溶液顯色后，時(shí)間掃描lh，Abs在0. 8031-0. 8033間變化，表明供試品溶液在顯色后Ih內(nèi)穩(wěn)定。2. I. 5重復(fù)性試驗(yàn)取同一樣品溶液5份,每份0. 2mL,按2. I. 2項(xiàng)下制備供試品，測(cè)定黃苗總阜苷含量，測(cè)定RSD為I. 30%，表明該方法的重復(fù)性良好。2. 2黃芪多糖的含量測(cè)定2. 2. I黃芪多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取105°C干燥至恒重的D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品若干，至50mL容量瓶中，加去離子水至刻度，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取配置好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液0. 0,0. 2,0. 4,0. 8,1. 2、 I.6、2. OmL于IOmL具塞刻度試管中，加去離子水至2mL,加入5%苯酹溶液ImL,搖勻,加5mL濃硫酸振搖5min，沸水浴加熱15min，冷水浴冷卻30min，以空白溶劑為參比，490處測(cè)定吸光度。以D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品的質(zhì)量濃度m為橫坐標(biāo)，吸收度A為縱坐標(biāo)，建立回歸方程C=O. 0001+0. 0141A(r=0. 9995)。D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品在 0. 0025 0. 0250mg ml/1 吸收度有良好的線性關(guān)系。2. 2. 2黃芪多糖供試品溶液制備本實(shí)驗(yàn)采用苯酚-硫酸法測(cè)定黃芪多糖的含量，具體制備過程為取黃芪提取液0. 2mL至IOOmL容量瓶中，搖勻，取ImL溶液于IOmL具塞試管中，以下步驟按2. 2. I項(xiàng)下制備過程制備。2. 2. 3精密度試驗(yàn)取同一供試品溶液，按照2. 2. 2項(xiàng)下制備供試品溶液，重復(fù)測(cè)定5次，得RSD為0. 49%o2. 2. 4穩(wěn)定性試驗(yàn)將同一對(duì)照品溶液顯色后，時(shí)間掃描lh, Abs在0. 6151-0. 6154間變化,表明供試品溶液在顯色后Ih內(nèi)穩(wěn)定。2. 2. 5重復(fù)性試驗(yàn)取同一樣品溶液5份,每份0. 2mL,按2. I. 2項(xiàng)下制備供試品，測(cè)定黃苗總阜苷含量，測(cè)定RSD為I. 17%，表明該方法的重復(fù)性良好。2. 3單因素考查本試驗(yàn)方案首先對(duì)黃芪的粒徑，浸泡時(shí)間進(jìn)行了單因素考查；經(jīng)查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，粒徑主要影響的是黃芪總皂苷，所以在單因素考查中，只以黃芪總皂苷為指標(biāo)成分進(jìn)行篩選。2. 3. I黃芪藥材粒徑對(duì)提取工藝的影響此單因素考查共考查5種粒徑，分別為黃芪飲片、黃豆粒大小、過I號(hào)篩，過二號(hào)篩，過三號(hào)篩，具體結(jié)果見圖I。由上圖可知，隨著藥材粒徑的減小，黃芪總皂苷的提取量逐漸增大，到粒徑4時(shí)，總皂苷的提取量基本趨于穩(wěn)定，而隨著藥材粒徑的減少，對(duì)提取工藝的要求就越高，所以本試驗(yàn)選取通過2號(hào)篩的藥材粒徑。2. 3. 2黃芪藥材浸泡時(shí)間對(duì)提取工藝的影響本試驗(yàn)選取的浸泡時(shí)間為0、30、60min 3個(gè)梯度進(jìn)行考查，仍選擇黃芪皂苷為指標(biāo)性成分，結(jié)果見表I。
權(quán)利要求
1.一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，它包括如下步驟 a、稱取黃芪藥材； b、將藥材置微波提取裝置中，微波功率500W-900W，溫度70°C，共提取3次，第I次加50%-90%的乙醇，提取10min-30min ;第2次加50%_90%乙醇，提取10min_30min ’第3次加蒸懼水，提取20min-40min ； C、將第1、2次的乙醇提取液濃縮，除去乙醇，再加入第3次的水提取液，混合，濃縮，SP得本發(fā)明黃芪皂苷和黃芪多糖提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，其特征在于所述的黃芪藥材為藥材飲片或黃豆粒大小的飲片，或過1-3號(hào)篩的藥粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，其特征在于a步驟所述的黃芪藥材粉碎至24目以下。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，其特征在于b步驟所述的乙醇或水的用量為藥材重量的10-14倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，其特征在于b步驟所述的乙醇為70%的乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，其特征在于b步驟所述的微波功率500-700W。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微波輔助提取黃芪皂苷和黃芪多糖的工藝，它包括如下步驟a、稱取黃芪藥材；b、將藥材置微波提取裝置中，微波功率500W-900W，溫度70℃，共提取3次，第1次加50%-90%的乙醇，提取10min-30min；第2次加50%-90%乙醇，提取10min-30min；第3次加蒸餾水，提取20min-40min；c、將第1、2次的乙醇提取液濃縮，除去乙醇，再加入第3次的水提取液，混合，濃縮，即得本發(fā)明黃芪皂苷和黃芪多糖提取物。本發(fā)明提取工藝提高了黃芪藥材中有效成分的利用率，同時(shí)提高黃芪藥材中黃芪多糖和黃芪總皂苷的產(chǎn)率，縮短提取時(shí)間，提取工藝步驟簡(jiǎn)化。
文檔編號(hào)A61K36/481GK102727566SQ201210218449
公開日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月28日
發(fā)明者李小芳, 李航 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)