專利名稱：具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領域，具體涉及具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用。
背景技術(shù)：
帕金森癥(Parkinson’s disease, PD)是腦內(nèi)多巴胺(Dopamine)不足導致的一種慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性失調(diào)?；疾『?，患者的動作機能、語言能力等嚴重受損，并伴有痛疼，肢體僵直、震顫等癥狀導致患者的生活質(zhì)量嚴重下降。該病的發(fā)病率高達1.6%，而且隨著年齡的增加，患病的風險也在增加Neurology. 2000; 54: S24-7。據(jù)估計，中國是世界上I3D患者最多的國家，目前已有患者170萬Lancet 2005; 365:595-7 ] 隨著老齡化社會的來臨，ro帶來的醫(yī)療、家庭、社會等問題越發(fā)廣泛和嚴峻。目前，治療ro最有效的治療手段為多巴胺替代療法，即通過前體藥物左旋多巴(L-dopa)在患者腦中轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟桶?，以補充患者腦中多巴胺的不足EurNeurol. 2009;62:1-8。值得注意的是，L-dopa 只有到達大腦才能發(fā)揮作用，但由于L-dopa在外周組織中極易被代謝，單獨使用時幾乎沒有藥效。兒茶酚-0-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)介導的甲基化是L-dopa發(fā)生的一條主要代謝途徑，臨床研究已證實COMT酶抑制劑與L-dopa聯(lián)用確能增強L_dopa的療效PharmacolRev. 1999;51:593-628。因此，開發(fā)高效的COMT酶抑制劑對于帕金森癥的藥物治療至關(guān)重要。然而，已上市的COMT酶抑制劑(如托卡朋、恩托卡朋)主要存在體內(nèi)抑制活性偏低、代謝半衰期短、連續(xù)使用易引發(fā)肝、腎毒性等諸多缺陷，而帕金森癥患者則需要頻繁用藥，長期使用托卡朋、恩托卡朋等現(xiàn)有COMT酶抑制劑后會引發(fā)嚴重的不良反應NeurOlOgy2004; 62:39-46。因此開發(fā)新型安全有效的COMT抑制劑是已成為當前帕金森癥治療藥物開發(fā)領域的當務之急。兒茶酌■甲基化轉(zhuǎn)移酶(Catechol-O-methyltransferase, COMT)是一種續(xù)離子依賴型酶，其以SAM作為甲基供體催化兒茶酚類底物的甲基化，生成相應的0-甲基化兒茶酚。COMT酶在人體有兩種存在形式膜錨定型和游離型。在人體的外周組織主要以游離型COMT酶存在，但在大腦卻以膜錨定型COMT酶為主。兩種存在形式的COMT酶在氨基酸序列上幾乎一致，但在和底物的親和能力上表現(xiàn)出較大的差異。理想的COMT酶抑制劑應該僅對人體外周分布的游離型COMT酶具有較強的抑制能力同時并不進入大腦抑制中樞組織的C0MT，從而起到減緩L-dopa在外周組織的甲基化代謝，同時不影響中樞組織中內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)的甲基化代謝。利用強效外周COMT酶抑制劑提高L-dopa的口服生物利用度并延長L-dopa的作用時間是當前臨床治療帕金森癥的首選。因此，新型安全、強效兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑的開發(fā)對于帕金森癥的治療至關(guān)重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，該類黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物是兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶(COMT酶)抑制劑，該類抑制劑可作為帕金森癥治療藥物左旋多巴的增效劑使用。本發(fā)明提供了具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，該類黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物是兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑，具體包括黃芩素、野黃芩素及其結(jié)構(gòu)衍生物，該類強效COMT酶抑制劑具有黃酮骨架及兒茶酚基團，結(jié)構(gòu)通式如圖I所示，札為氫、羥基或甲氧基取代基；R2為氫、硝基、醛基或氰基取代基；R3為氫、羥基或葡萄糖醛酸取代基。本發(fā)明針對已有COMT酶抑制劑存在的多種缺陷(體內(nèi)抑制活性偏低、連續(xù)使用易引發(fā)肝、腎毒性等)，從天然中藥化學成分中篩選出高安全性的先導化合物并在此基礎上通過成藥性優(yōu)化改造獲得了新型高效、安全的黃酮兒茶酚類COMT酶抑制劑。本發(fā)明提供的具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，該類抑·制劑單體可單獨成劑型后與帕金森癥治療藥物(左旋多巴、卡比多巴/左旋多巴)聯(lián)合使用，可將黃酮兒茶酚單體與制劑常用輔料混合后制成片劑、緩釋片、膠囊劑、滴丸。也可與與帕金森癥治療藥物(左旋多巴、卡比多巴/左旋多巴)按比例混合后形成片劑、緩釋片、膠囊劑、滴丸等劑型作為藥物組合物使用。兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑與左旋多巴混合使用時的比例介于1:5-5:1之間。本發(fā)明涉及的黃酮兒茶酚類COMT酶抑制劑，該類黃酮兒茶酚類化合物人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物仍具有兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制活性，其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)仍可發(fā)揮帕金森癥治療藥物增效劑的用途。本發(fā)明涉及的黃酮兒茶酚類COMT酶抑制劑的優(yōu)點如下I.安全性高，該類化合物對人體主要臟器細胞無明顯毒性，且不會經(jīng)代謝激活產(chǎn)生活性中間體，不會與生物大分子形成毒性加合物；2. COMT酶抑制活性高，其半數(shù)抑制濃度IC5tl可達nM級，體內(nèi)PK研究顯示其與L-dopa聯(lián)用后，L-dopa的AUC最高可增加57% ；3.該類化合物不易穿透血腦屏障，不會干擾中樞中內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)的甲基化代謝；4.該類化合物的葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物仍具有COMT酶抑制活性。


圖I黃酮兒茶酚類COMT酶抑制劑的結(jié)構(gòu)通式；圖2黃芩素對COMT酶抑制效應圖；圖3野黃芩素對COMT酶抑制效應圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明予以進一步說明，但并不因此而限制本發(fā)明。實施例I.黃酮兒茶酚類系列化合物對COMT酶的抑制活性測定以原兒茶酸甲基化反應為探針反應，借助人肝細胞漿體外孵育體系，測定兒茶酚類系列化合物對COMT酶抑制的IC5tl，具體實驗流程如下(1) 200微升體外代謝反應體系中，加入5mM MgCl2, 2mM 二硫蘇糖醇，0. 2mM S-腺苷蛋氨酸，人肝細胞漿蛋白濃度為lmg/ml，抑制劑終濃度范圍為0. Ol ii M-I ii M，于37°C條件下預孵3分鐘；(2)向反應體系中加入底物(終濃度15uM)，起始反應；于37°C條件下反應30分鐘后，加入200 ill乙腈，劇烈震蕩后，終止反應；(3)采用高速冷凍離心機，在20，OOOXg的條件下，高速離心上述體系15分鐘后，取上清，進行HPLC-UV檢測分析；通過紫外吸收光譜在259nm下對原兒茶酸代謝產(chǎn)物進行定
量檢測。該類化合物對COMT酶呈現(xiàn)出底物依賴性的抑制,Lineweaver-Burk及Dixon作圖均顯示該類化合物是COMT酶的非競爭性抑制劑。各化合物的半數(shù)抑制濃度如表I所示，從中可以看出黃酮兒茶酚類系列化合物對COMT酶有較強的抑制活性，且多數(shù)化合物的抑制活性優(yōu)于托卡朋。 表I
權(quán)利要求
1.具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，其特征在于該類化合物是兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑，其結(jié)構(gòu)通式如下
2.按照權(quán)利要求I所述的具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，其特征在于所述抑制劑可單獨成藥后與帕金森癥治療藥物左旋多巴合用，也可與帕金森癥治療藥物左旋多巴按一定比例混合后做成藥物組合物使用。
3.按照權(quán)利要求I所述的具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，其特征在于所述藥物組合物中兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑與左旋多巴的摩爾比介于1:5-5:1 之間。
4.按照權(quán)利要求I所述的具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，其特征在于該抑制劑在應用時，可做成片劑、緩釋片、膠囊劑、滴丸使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物作為帕金森癥治療藥物的應用，該類具有黃酮骨架結(jié)構(gòu)的化合物是兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶的抑制劑，該類化合物具體包括黃芩素、野黃芩素及其結(jié)構(gòu)衍生物，可用做帕金森癥治療藥物左旋多巴的增效劑。體外活性測定發(fā)現(xiàn)該類化合物抑制兒茶酚甲基化轉(zhuǎn)移酶的IC50可達納摩爾級，其中野黃芩素及其衍生物的COMT酶抑制活性優(yōu)于已上市藥物托卡朋。大鼠整體藥代研究發(fā)現(xiàn)野黃芩素與左旋多巴聯(lián)合使用后，可顯著提高左旋多巴的血藥濃度。此外，該類化合物不會經(jīng)代謝激活產(chǎn)生活性中間體，不會與生物大分子形成毒性加合物，因此不會因代謝激活引發(fā)肝、腎毒性，提示該類化合物顯示具有良好的成藥前景。
文檔編號A61K31/198GK102755312SQ20121024420
公開日2012年10月31日 申請日期2012年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月16日
發(fā)明者夏楊柳, 孫曉宇, 楊凌, 洪沫, 葛廣波, 鄒超 申請人:中國科學院大連化學物理研究所