注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提出了一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑及其制備方法，包括凍干如下組分的溶液：重組人白細(xì)胞介素-2和藥學(xué)上可接受的增溶劑；所述溶液pH為6.0-8.0；所述增溶劑為甘露醇、山梨醇、氯化鈉、十二烷基硫酸鈉SDS、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一種或幾種的混合物。制備包括：（1）配制含有重組人白細(xì)胞介素-2和藥學(xué)上可接受的增溶劑的溶液，所述溶液的pH值為6.0～8.0；（2）將所得的溶液按常規(guī)方法除去熱原、過濾除菌；（3）將所得的溶液冷凍干燥。本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針制劑性能穩(wěn)定，易于運輸和貯存，方便臨床使用；本發(fā)明的制備方法簡單易行，成本低，有利于大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利說明】注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及白細(xì)胞介素-2【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是指一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]人白細(xì)胞介素-2(hIL_2)可提高人體對病毒、細(xì)菌、真菌、原蟲等感染的免疫應(yīng)答，使細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)、天然殺傷細(xì)胞(NK)、淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)和腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞(TIL)增值，并使其殺傷活性增強，進而清除體內(nèi)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞等。它還可以增加抗體和干擾素(IFN)等細(xì)胞因子的分泌，在機體的免疫應(yīng)答中具有非常重要的作用，是一種免疫增強劑，具有抗病毒、抗腫瘤和提高機體免疫功能等作用。
[0003]白細(xì)胞介素-2作為一種具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，不管是全身系統(tǒng)應(yīng)用、局部應(yīng)用、與其它細(xì)胞因子類生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑合用、與化療藥物合用、與LAK細(xì)胞合用、與TIL細(xì)胞合用等都可以產(chǎn)生較好的抗腫瘤作用。
[0004]由于注射用重組人白細(xì)胞介素-2在儲存和運輸過程中性能容易發(fā)生改變，主要成分降解導(dǎo)致活性下降，影響產(chǎn)品的質(zhì)量和使用效期。因此保證白細(xì)胞介素-2的穩(wěn)定性在制劑生產(chǎn)和臨床應(yīng)用都有重要的現(xiàn)實意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的 缺點，本發(fā)明提出一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑及其制備方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的:
[0007]一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，包括凍干如下組分的溶液:
[0008]重組人白細(xì)胞介素_2、藥學(xué)上可接受的增溶劑以及保護劑；
[0009]所述溶液pH 為 6.0-8.0 ；
[0010]所述的增溶劑為甘露醇、山梨醇、氯化鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一種或幾種的混合物。
[0011]上述的藥學(xué)上可接受的增溶劑通常是用于制備凍干制劑，作填充支架作用，使干燥的藥物能保持一定的體積的物質(zhì)，優(yōu)選甘露醇。
[0012]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述溶液pH為6.5-7.5。
[0013]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述溶液還包括保護劑，保護劑為藥學(xué)上可接受的保護劑，通常用于保護白細(xì)胞介素-2的活性，如人血白蛋白，用量為0.1% -1%。
[0014]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述溶液還包括藥學(xué)上可接受的可調(diào)節(jié)所述溶液pH值的pH調(diào)節(jié)劑。
[0015]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述藥學(xué)上可接受的pH調(diào)節(jié)劑為磷酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽和乳酸鹽在內(nèi)的緩沖系統(tǒng)中的一種或幾種的緩沖系統(tǒng)。其中磷酸鹽為磷酸鈉鹽和/或磷酸鉀鹽。[0016]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述的增溶劑用量是通常制備凍干制劑所用增溶劑的常規(guī)用量；所述的溶液以水和(或)藥學(xué)上可接受的有機溶劑為溶劑。
[0017]一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑的制備方法，包括:
[0018](I)配制含有重組人白細(xì)胞介素-2和藥學(xué)上可接受的增溶劑的溶液，所述溶液的pH值為6.0~8.0;
[0019](2)將第(I)步驟所得的溶液按常規(guī)方法除去熱原、過濾除菌；
[0020](3)將第(2)步驟所得的溶液冷凍干燥。
[0021]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述步驟(2)中使用微孔濾膜過濾除菌，所述微孔濾膜的孔徑為 0.22-0.45um。
[0022]本發(fā)明通過使用增溶劑復(fù)配，達(dá)到改善注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針穩(wěn)定性的目的，可有效地解決制劑的溶解、穩(wěn)定性、運輸貯存等問題。本發(fā)明的注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針制劑在使用之前，可以把它溶解于注射用水或其它注射液。所述的注射液可以是常規(guī)的注射液，如用于靜脈輸注的等滲水性介質(zhì)，如5%葡萄糖注射液或
0.9%氯化鈉注射液。根據(jù)治療過程和病人的狀況，使用本發(fā)明注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針制劑的用量一般以白細(xì)胞介素-2的量每次為5萬IU-100萬IU為宜。
[0023]由于白細(xì)胞介素-2易失活，在配制過程中要控制溫度，一般為室溫，同時添加藥學(xué)上可接受的保護劑，使得本發(fā)明的凍干制劑性能穩(wěn)定，有利于貯存和運輸。
[0024]有益效果
[0025](I)本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針制劑性能穩(wěn)定，易于運輸和貯存，方便臨床使用；
[0026](2)本發(fā)明的制備方法簡單易行，成本低，有利于大規(guī)模生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0027]下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0028]實施例1
[0029]取適量重組人白細(xì)胞介素-2原液及適量甘露醇注射液，加入檸檬酸鈉溶液，加入SDS，加入人血白蛋白，攪拌均勻，控制pH值在6.0~8.0之間，用注射用水定容，得到每毫升含重組人白細(xì)胞介素-210萬IU和甘露醇0.1g的溶液。將溶液用0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌，在無菌條件下將所得的溶液按每瓶1.0ml置無菌西林瓶中，用通氣膠塞半加塞，置冷凍干燥機內(nèi)冷凍干燥約24小時后，全真空壓塞，即得本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑A。
[0030]實施例2~4
[0031]分別取適量重組人白細(xì)胞介素-2原液及適量甘露醇注射液，加磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉緩沖液，加入SDS，加入人血白蛋白，攪拌均勻，控制pH值在6.0~8.0之間，用注射用水定容，得到每毫升含重組人白細(xì)胞介素-210萬IU和甘露醇0.05g、0.lg、0.15g的溶液。將溶液用0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌，在無菌條件下將所得的溶液按每瓶1.0ml置無菌西林瓶中，用通氣膠塞半加塞，置冷凍干燥機內(nèi)按照實施例8的方法冷凍干燥后，全真空壓塞，即得本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑B、C、D0
[0032]實施例5
[0033]取適量重組人白細(xì)胞介素-2原液及適量乳糖水溶液，加入磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉緩沖液，加入SDS，加入人血白蛋白，攪拌均勻，控制pH值在6.0~8.0之間，用注射用水定容，得到每毫升含重組人白細(xì)胞介素-210萬IU和乳糖0.1g的溶液。將溶液用0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌，在無菌條件下將所得的溶液按每瓶1.0ml置無菌西林瓶中，用通氣膠塞半加塞，置冷凍干燥機內(nèi)按照實施例8的方法冷凍干燥后，全真空壓塞，即得本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑E。
[0034]實施例6
[0035]取適量重組人白細(xì)胞介素-2原液及適量氯化鈉水溶液，加入磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉緩沖液，加入SDS，加入人血白蛋白，攪拌均勻，控制pH值在6.0~8.0之間，用注射用水定容，得到每毫升含重組人白細(xì)胞介素-210萬IU和氯化鈉0.1g的溶液。將溶液用
0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌，在無菌條件下將所得的溶液按每瓶1.0ml置無菌西林瓶中，用通氣膠塞半加塞，置冷凍干燥機內(nèi)按照實施例8的方法冷凍干燥后，全真空壓塞，即得本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑F。
[0036]實施例7
[0037]取適量重組人白細(xì)胞介素-2原液及適量右旋糖苷葡萄糖注射液,加入檸檬酸鈉溶液，加入SDS，加入人血白蛋白，攪拌均勻，控制pH值在6.0~8.0之間，用注射用水定容，得到每毫升含重組人白細(xì)胞介素-210萬IU和右旋糖苷葡萄糖0.1g的溶液。將溶液用
0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌，在無菌條件下將所得的溶液按每瓶1.0ml置無菌西林瓶中，用通氣膠塞半加塞，置冷凍干燥機內(nèi)冷凍干燥約25小時后，全真空壓塞，即得本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑G。
[0038]實施例8
[0039]將實施例2至6所得溶液按照以下方法冷凍干燥，制備本發(fā)明的重組人白細(xì)胞介素-2凍干粉針劑:
[0040]預(yù)凍:把分裝好的待凍干溶液放入凍干箱內(nèi)擱板上進行預(yù)凍，分別將凍干箱內(nèi)溫度降至-25 °C、-30 °C、-35 °C、-40 V、-50 V 左右。
[0041]升華干燥:待冷凝器溫度下降至_45°C以下，控制凍干箱內(nèi)真空度在10_30Pa之間。通過擱板下的加熱系統(tǒng)緩緩加熱，將擱板適當(dāng)加熱至10°C左右，以供給冰的升華所需的熱量，進行升華干燥12、11、13、15、12小時。
[0042]再干燥:將干燥溫度分別控制再15°C、20°C、25°C、30°C、10°C，板溫控制在3(TC以下，直至制品溫度與板溫重合，即達(dá)到干燥的終點。冷凝器溫度下降至-50°C以下，再干燥
11、10、13、12、15 小時。
[0043]實施例9
[0044]對實施例1-7制得的本發(fā)明制劑的溶解性能考察，本發(fā)明制劑A、B、C、D、E、F、G在加入注射用水后，均能很好地溶解，可見異物符合規(guī)定。
[0045]實施例10
[0046]對實施例制得的本發(fā)明制劑的穩(wěn)定性能進行考察。[0047]( I)穩(wěn)定性試驗
[0048]將本發(fā)明制劑B置于600勒克司照度、85% RH、60°C的條件下，分別于10、20天取樣，考察外觀、PH值、水分、含量的變化，試驗結(jié)果見下表。
[0049]表1本發(fā)明制劑穩(wěn)定性的試驗
[0050]
【權(quán)利要求】
1.一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，包括凍干如下組分的溶液: 重組人白細(xì)胞介素-2和藥學(xué)上可接受的增溶劑； 所述溶液PH為6.0-8.0 ； 所述增溶劑為甘露醇、山梨醇、氯化鈉、十二烷基硫酸鈉SDS、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一種或幾種的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述溶液還包括保護劑，保護劑為人血白蛋白，質(zhì)量百分比用量為0.1 % -1 %。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述溶液PH為6.5-7.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述溶液還包括藥學(xué)上可接受的可調(diào)節(jié)所述溶液PH值的pH調(diào)節(jié)劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述藥學(xué)上可接受的pH調(diào)節(jié)劑為磷酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽和乳酸鹽在內(nèi)的緩沖系統(tǒng)中的一種或幾種的緩沖系統(tǒng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述磷酸鹽為磷酸鈉鹽和/或磷酸鉀鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述溶液以水和/或藥學(xué)上可接受的有機溶劑為溶劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑，其特征在于，所述凍干制劑在使用前溶解于水或其它注射液中。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一權(quán)利要求所述的一種注射用重組人白細(xì)胞介素-2凍干制劑的制備方法，包括: (1)配制含有重組人白細(xì)胞介素-2和藥學(xué)上可接受的增溶劑的溶液，所述溶液的pH值為 6.0 ~8.0 ; (2)將第(I)步驟所得的溶液按常規(guī)方法除去熱原、過濾除菌； (3)將第(2)步驟所得的溶液冷凍干燥。
【文檔編號】A61K9/19GK103565757SQ201210274514
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年8月2日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月2日
【發(fā)明者】杜連強 申請人:江蘇金絲利藥業(yè)有限公司