專利名稱：銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)金黃色葡萄球菌耐藥性藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其是指銀花泌炎靈片的新的藥物用途。
背景技術(shù)：
銀花泌炎靈片，國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-526 (Z_107)-2003 (Z)0處方，金銀花，半枝蓮，扁蓄，瞿麥，石韋，川木通，車前子，淡竹葉，桑寄生，燈心草。本品為淡綠色糖衣片，除去糖衣后片芯呈深褐色，味微苦，澀。功能與主治，清熱解毒，利濕通淋，用于急性腎盂腎炎，急性膀胱炎，下焦?jié)駸嶙C，證見，發(fā)熱惡寒，尿頻急、尿道刺痛或尿血、腰痛等?？诜淮?片，一日4次，兩周為一個(gè)療程，可連服三個(gè)療程，或遵醫(yī)囑。金黃色葡萄球菌SA為革蘭氏陽性菌，是醫(yī)院感染的主要病原菌之一，可產(chǎn)生多種 外毒素，毒性高、侵襲性強(qiáng)，可引起兒童、老年人、免疫力低下者和長期住院患者罹患醫(yī)院獲得性肺炎、化膿性傷口感染和膿毒敗血癥等疾患，嚴(yán)重感染時(shí)常可導(dǎo)致死亡。自20世紀(jì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)出現(xiàn)以來，其多藥耐藥性及逐年增高的感染率已引起全球的廣泛關(guān)注，是臨床醫(yī)生抗感染治療的難點(diǎn)。銀花泌炎靈片對(duì)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有一定程度的抗菌作用，尤其對(duì)耐藥性細(xì)菌，具有抗生素?zé)o法比擬的抑菌活性。但銀花泌炎靈片與抗生素的聯(lián)合應(yīng)用能否逆轉(zhuǎn)抗生素濫用所致的耐藥SA的耐藥性方面的研究尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)金黃色葡萄球菌耐藥性藥物的應(yīng)用，以解決抗生素誘導(dǎo)金黃色葡萄球菌耐藥性的出現(xiàn)，使醫(yī)院感染愈來愈嚴(yán)重的問題。銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下誘導(dǎo)金黃色葡萄球菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。銀花泌炎靈片在治療耐藥性細(xì)菌感染方面已得到研究，由于其化學(xué)成分復(fù)雜，雖然能夠控制細(xì)菌耐藥性的發(fā)生，但是否能夠逆轉(zhuǎn)金黃色葡萄球菌SA對(duì)廣譜抗生素的耐藥性卻很難研究。本研究分別在含有銀花泌炎靈片、頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉和銀花泌炎靈片聯(lián)合頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉的M-H肉湯培養(yǎng)基中對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC25925進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng)，比較壓力傳代前后各組細(xì)菌是否被誘導(dǎo)或逆轉(zhuǎn)耐藥性。結(jié)果證明銀花泌炎靈片-頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉聯(lián)合用藥組的M-H肉湯培養(yǎng)基中傳代細(xì)菌MIC其沒有發(fā)生改變，同時(shí)頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉組的MIC提高了 5倍，即銀花泌炎靈片可逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下金黃色葡萄球菌SA細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。使用時(shí)，在正常使用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉治療時(shí)，同時(shí)根據(jù)患者的身體狀況，服用銀花泌炎靈片，一次21片，每日3 4次。
具體實(shí)施例方式下邊通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明。I、材料與方法1.1材料
I. I. I菌株來源金黃色葡萄球菌ATCC25925保存于吉林大學(xué)病原生物學(xué)教研室。I. I. 2 藥品:
銀花泌炎靈片(吉林華康藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)101215);頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉(山東羅欣藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)312022046)。I. I. 3 器材
生物安全柜(BHC-1300 II A/B3, AIRTECH),紫外分光光度計(jì)(2800UV/VIS，UNIC),高速低溫離心機(jī)(D-37520，Kendro)。I. I. 4 試劑:
營養(yǎng)瓊脂(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠批號(hào)20111202)，M-H肉湯培養(yǎng)基(北京雙旋微生物制品廠批號(hào)20111125)。I. 2實(shí)驗(yàn)方法
I.2. I肉湯二倍稀釋法測定銀花泌炎靈片MIC
二倍肉湯稀釋法定量測定金黃色葡萄球菌ATCC25925對(duì)銀花泌炎靈片的敏感性。M-H肉湯稀釋銀花泌炎靈片，將藥物稀釋為400mg/ml、300mg/ml、200mg/ml、150mg/ml、IOOmg/ml、75mg/ml、50mg/ml，每毫升培養(yǎng)基中接入濃度為108CFU/ml金黃色葡萄球菌500 μ I。放入細(xì)菌培養(yǎng)箱37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)。因?yàn)橹兴帨啙幔y以測定其OD值，故取IOOul混合液涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)，第一個(gè)出現(xiàn)稀疏單菌落的平板即為MIC。I. 2. 2微量肉湯稀釋法測定頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉MIC
微量肉湯稀釋法測定金黃色葡萄球菌ATCC27853對(duì)頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉的敏感性。在經(jīng)過滅菌處理的聚乙烯96孔板中稀釋頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉，最高濃度為60ug/ml，倍比稀釋20個(gè)孔，每孔接入濃度為106cfu/ml菌液100 μ 1，放入孵箱培養(yǎng)18-24小時(shí)，最后一個(gè)肉眼可見澄清的孔即為MIC。I. 2. 3藥物連續(xù)傳代壓力誘導(dǎo)下的細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生試驗(yàn)
分3組頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉組、銀花泌炎靈片-頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉聯(lián)合用藥組、空白對(duì)照組。頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉組藥物濃度為0.045ug/ml (MIC濃度);聯(lián)合用藥組取兩種藥物MIC濃度；以不添加任何抗生素或中藥液的M-H肉湯培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每12 h傳代I次，(首次細(xì)菌接入量為108cfu/ml)同時(shí)做菌落計(jì)數(shù)，公式參照Ν=3· 344X44/^0為傳代次數(shù)，N1為轉(zhuǎn)接細(xì)菌數(shù)，N2為培養(yǎng)12 h后的細(xì)菌數(shù))計(jì)算傳代倍數(shù)，培養(yǎng)至200代左右，傳代后接種在營養(yǎng)瓊脂上分離細(xì)菌。2 結(jié)果
金黃色葡萄球菌ATCC27853經(jīng)藥物壓力下誘導(dǎo)耐藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表I :頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉對(duì)各組金黃色葡萄球菌傳代前后的抑菌活性結(jié)果
權(quán)利要求
1.銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓カ下誘導(dǎo)金黃色葡萄球菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)金黃色葡萄球菌耐藥性藥物的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下誘導(dǎo)金黃色葡萄球菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明銀花泌炎靈片-頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉聯(lián)合用藥組的M-H肉湯培養(yǎng)基中傳代細(xì)菌MIC其沒有發(fā)生改變，同時(shí)頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉組的MIC提高了5倍，即銀花泌炎靈片可逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下金黃色葡萄球菌SA細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。
文檔編號(hào)A61P43/00GK102772691SQ20121027853
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月8日
發(fā)明者劉傳貴, 張曉天, 張超, 王放, 王槐棟, 胡亞, 賽景影 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)