治療糖尿病的植物萃取物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明系關(guān)于一種用于治療糖尿病的植物萃取物及其制備方法。該植物萃取物系來自煮飯花（Mirabilis?jalapa?L.）的根部，具降低血糖、增加胰島素敏感度、以及增加骨骼肌肝醣含量之功效。
【專利說明】治療糖尿病的植物萃取物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明系關(guān)于ー種治療糖尿病的煮飯花(Mirabilis jalapa L.)根部萃取物?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]糖尿病是ー種胰臟分泌胰島素的功能有缺陷或產(chǎn)生之胰島素效力不足所造成的慢性疾病。這樣的缺陷導(dǎo)致血液中的葡萄糖濃度增加，因而導(dǎo)致許多組織或器官的損害，特別是血管及神經(jīng)。
[0003]糖尿病有兩種型式，稱為第I型糖尿病及第II型糖尿病。第I型糖尿病,又稱胰島素依賴型糖尿病(insulin-dependent diabetes mellitus, IDDM)。IDDM 病患具有膜臟beta細(xì)胞的缺陷，導(dǎo)致無法正常分泌胰島素，且有致命危險(xiǎn)。通常好發(fā)于幼年或青少年期間，故又稱為幼年型糖尿病，但近年來亦漸漸發(fā)現(xiàn)成年型病患。第I型糖尿病病患終其一生必須藉由注射投與胰島素，以維持生命。第II型糖尿病，又稱非胰島素依賴型糖尿病(non-1nsulin-dependent diabetes mellitus, NIDDM),具家族性，亦與環(huán)境因子有密切關(guān)聯(lián)性。健康飲食、運(yùn)動(dòng)及避免體重過重可避免疾病的發(fā)生及惡化。在精致飲食的風(fēng)潮下，食用過多的油脂果糖為第二型糖尿病的罹病原因之一。第II型糖尿病病患需要服用藥物，以達(dá)理想的血糖控制，亦有部分病患須施予胰島素，以降低血糖含量。
[0004]糖尿病會衍生許多嚴(yán)重并發(fā)癥，例如，視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)損害、腳痛、靜脈曲張與腫脹、血液循環(huán)失調(diào)、行走困難、肝功能失調(diào)、高膽固醇癥、蛋白尿、高血脂癥、攝護(hù)腺腫大、高血壓等。妥善地控制血糖含量可有效控制病情及降低并發(fā)癥的產(chǎn)生。
[0005]目前用于治療糖尿病的藥物包括磺酰尿素類、美格耐德類(meglitinides)、雙胍類、噻唑烷二酮類，以及a-糖苷酶抑制劑，然而其具有許多限制，例如，副作用和高比例的繼發(fā)性藥物失效(secondary failure)。因此,越來越多病患傾向于自各種藥用植物中尋找新穎之天然的抗糖尿病藥物。
[0006]煮飯花(Mirabilis jalapa L.)，屬紫茉莉科植物，正式名稱為紫茉莉，又名草茉莉、夜嬌嬌、夜晚花、胭脂花、洗澡花、地雷花、白粉花、晚妝花、草茉莉、入地老鼠、粉團(tuán)花、野茉莉、粉豆花、素香等。煮飯花為多年生草本植物，主枝直立，側(cè)枝散生伏地，節(jié)部膨大，節(jié)部并顯粉紅色，株高可達(dá)I米左右。葉形為卵狀三角形，對生，翠綠，內(nèi)有淺色葉脈；花朵狀似喇叭，花瓣五裂，花徑2至3厘米，長4至5厘米，大多為大紅或紫色，亦有白、粉、黃及復(fù)色等；果實(shí)堅(jiān)硬，呈黑色，外形酷似地雷，故亦稱「地雷花」。煮飯花于傳統(tǒng)中藥上已被廣泛用于治療痢疾利尿、腹瀉、腹絞痛；其根部萃取物亦可治便秘、泌尿系統(tǒng)病變、急性關(guān)節(jié)炎等疾病。根據(jù)植物化學(xué)成分分析，已知煮飯花根包含生物堿、苷類、醣類及植物酉學(xué) %= (C.1.B.Walker, G.Trevisan, M.F.Rossato et al., “Antinociceptive activityof Mirabilis jalapa in mice, ^ Journal of Ethnopharmacology,vol.120, n0.2, pp.169-175，2008.)。但尚無文獻(xiàn)針對煮飯花根之萃取物提出明確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明其治療糖尿病之功效及針對分離其有效萃取物區(qū)分的制備方法。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]有別于相關(guān)習(xí)知技藝，本發(fā)明系關(guān)于ー種治療糖尿病的煮飯花(Mirabilisjalapa L.)根萃取物，該萃取物之特征在于以醇類溶液自煮飯花根之水粗萃物分離出醇類不溶物或再進(jìn)ー步以水純化該醇類不溶物而得，其與習(xí)知之煮飯花萃取物不同，可有效用于預(yù)防或治療糖尿病。
[0008]因此，本發(fā)明一方面提供一種治療糖尿病之組合物，其系包含煮飯花(Mirabilisjalapa)根之醇類不溶性萃取物，該萃取物之特征在于其HPLC分析圖于滯留時(shí)間為4.27及5.36分鐘具有吸收峰，其中HPLC分析條件如下:儀器:日立L-7100 HPLC幫浦(HitachiL-7100 HPLC Pump);注射體積:50 y I ;分析管柱:Shodex OHpak SB-804HQ, 10 u m,8X300mm ;排阻極限(exclusion limit):1,000,000 ;管柱溫控器:Eldex CH-150, 30°C ;流動(dòng)相:水r流速:lml/min ;以及蒸發(fā)光散色查看器=Sedere Sedex 75 ELSD，45°C，3.0巴。
[0009]根據(jù)本發(fā)明之具體實(shí)施例，該醇類不溶性萃取物系由包括下列步驟之方法所制得:將煮飯花根或干燥之煮飯花根，經(jīng)水萃取得粗萃物；再以醇類溶液自該粗萃物中分離出ー醇類不溶性萃取物。具體而言，該方法包括:
[0010](i)以水加熱煮飯花根或干燥之煮飯花根，并將其過濾而形成第一濾液；
[0011](ii)濃縮步驟(i)所述第一濾液以獲得ー濃縮濾液，并與醇類溶液混合形成一混合液；及
[0012](iii)過濾步驟(ii)所述混合液以獲得第二濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根之醇類不溶性萃取物。
[0013]另ー方面，本發(fā)明提供一種治療糖尿病之組合物，其系包含煮飯花根之水不溶性萃取物，該萃取物之特征在于其HPLC分析圖于滯留時(shí)間為4.85及5.58分鐘具有吸收峰，其中HPLC分析條件如下:儀器:日立L-7100HPLC幫浦(Hitachi L-7100 HPLC Pump);注射體積:50iil ;分析管柱:Shodex OHpak SB-804HQ, 10 u m, 8 X 300mm ;排阻極限(exclusionlimit):1, 000, 000 ;管柱溫控器:Eldex CH-150, 30°C ;流動(dòng)相:水；流速:lml/min ;以及蒸發(fā)光散色查看器:Sedere Sedex 75 ELSD，45°C，3.0 巴。
[0014]根據(jù)本發(fā)明之具體實(shí)施例，該水不溶性萃取物系由包括下列步驟之方法所制得:將煮飯花根或干燥之煮飯花根，經(jīng)水萃取得粗萃物；以醇類溶液自該粗萃物中分離出ー醇類不溶性萃取物；再以水進(jìn)行兩次萃取并分離出一水不溶性萃取物。具體而言，該方法包括:
[0015](i)以水加熱煮飯花植株根部或干燥之煮飯花根，并將其過濾而形成第一濾液；
[0016](ii)濃縮步驟(i)所述第一濾液以獲得ー濃縮濾液，并與醇類溶液混合形成一混合液；
[0017](iii)過濾步驟(ii)所述混合液以獲得第二濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根之醇類不溶性萃取物；
[0018](iv)以水溶解步驟(iii)所述不溶物并離心以收集其沉淀物；
[0019](V)再以水溶解步驟(iv)所述沉淀物并離心以獲得一上清液 '及
[0020](vi)過濾步驟(V)所述上清液以獲得第三濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根之水不溶性萃取物。
[0021]舉例而言，本發(fā)明所述醇類溶液可為甲醇或こ醇溶液，較佳為こ醇溶液。根據(jù)本發(fā)明之具體實(shí)施例，此處所述濃縮濾液系與等體積之こ醇溶液混合。
[0022]本文所使用的「こ醇」或「酒精」可交互使用，以百分比表示的こ醇或酒精是指溶于水的體積百分比(V/V)，例如，95%こ醇是指含有95%的こ醇及5%的水之溶液。
[0023]再一方面，本發(fā)明提供一種預(yù)防或治療糖尿病之醫(yī)藥組合物，其包含治療有效量之此處所述煮飯花根之醇類不溶性萃取物或水不溶性萃取物；以及ー醫(yī)藥上可接受之載劑。
[0024]本發(fā)明亦提供一種此處所述煮飯花根之醇類不溶性萃取物或水不溶性萃取物用于制備預(yù)防或治療糖尿病之藥物的用途。
[0025]除非另有定義，此處所有使用之技術(shù)及科學(xué)名詞與本發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】中熟習(xí)此技藝者所一般了解者具有相同的含意。
[0026]本說明書所使用的冠詞「一」或「該」，除非內(nèi)文另有清楚指明，系指該冠詞的一或ー個(gè)以上(即，至少ー個(gè))的受體。舉例而言，「ー樣本」系包括復(fù)數(shù)個(gè)此類本【技術(shù)領(lǐng)域】中熟習(xí)此技藝人士所知之樣本及其等效物。 [0027]此處所使用的「糖尿病」こ詞是ー種糖類代謝失調(diào)的疾病，包括「第I型糖尿病」及「第II型糖尿病」。此處所使用的「第I型糖尿病」又稱為「幼兒型糖尿病」或「胰島素依賴型糖尿病」，其系指胰臟制造極少或無胰島素為特征的疾病，起因是胰臟制造胰島素的功能不佳，病患終生需依賴胰島素控制病情。在無胰島素之下該病人可能造成嚴(yán)重的代謝性并發(fā)癥,例如酮酸血癥和昏迷。此處所使用的「第II型糖尿病」又稱為「成人型糖尿病」或「非胰島素依賴型糖尿病」，其系指不論是否有胰島素仍產(chǎn)生過量葡萄糖以及由于不良的萄萄糖廓清而造成循環(huán)葡萄糖含量過高為特征的疾病，起因于人體對胰島素作用反應(yīng)不佳，而非胰島素濃度不足。第II型糖尿病通常與飲食及肥胖有夫。
[0028]此處所使用的「萃取物」系指針對一物質(zhì)進(jìn)行萃取所得之產(chǎn)物，通常是藉由將所欲萃取的物質(zhì)浸泡或混合于溶劑中而獲得的溶液或濃縮制劑。典型地，萃取物系制備自新鮮植物或經(jīng)研磨或干燥之植物樣本。此領(lǐng)域已知有各種萃取方法，包括但不限于浸潰、滲濾、再滲濾、消解、逆流萃取、渦輪萃取、擠壓/壓擠/壓榨或超臨界流體二氧化碳萃取。適當(dāng)?shù)娜軇┌ǖ幌抻谒?、こ醇、こ?水混合物、甲醇、丁醇、正丁醇、異丁醇、丙酮、己烷、正己烷、石油醚、こ酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷或其他溶劑?？梢曅枰剡x擇試劑之種類或調(diào)配溶劑之濃度，以達(dá)適當(dāng)極性而進(jìn)行萃取。例如，本發(fā)明所提供一較佳實(shí)施例中，系以水為溶劑。溶劑與待萃取物質(zhì)之比例可為約1:1至約1:100 (w/v (g/ml))、(較佳為約1:1至約1:50 (w/v (g/ml))、更佳為約 1:1 至約 1:20、(w/v (g/ml)),還要更佳為約 1:15 或 1:10(w/v (g/ml))。萃取可在適當(dāng)溫度進(jìn)行，例如，在約5°C至約100°C、約10°C至約100°C、約20°C至約100°C、約40°C至約100°C、約60°C至約100°C、約70°C至約100°C、或約80°C至約IOO0C。在ー實(shí)例中，將新鮮植物或干燥的植物樣本之根部(視需要地經(jīng)切碎或磨碎)與水混合或浸泡并充分?jǐn)嚢柽_(dá)一段足夠的時(shí)間，例如，I小時(shí)或以上、4小時(shí)或以上、8小時(shí)或以上、10小時(shí)或以上、12小時(shí)或以上、14小時(shí)或以上、或16小時(shí)或以上，在室溫進(jìn)行或加熱進(jìn)行，經(jīng)由過濾移除固體殘留物(濾渣)，然后收集所獲得的汁液(粗萃液)；視需要濃縮粗萃液，并加入其他溶劑如醇類溶液進(jìn)ー步予以分割或分離。所得分割或分離之萃取物亦可再加入溶劑如水更進(jìn)一歩予以純化。
[0029]此處所使用的「治療」こ詞包括為了治愈、愈合、減輕、舒緩、改變、矯正、改善、改進(jìn)或影響該疾病、該疾病之癥狀、該疾病引起的殘疾或罹患該疾病之傾向的目的，而將包含一或多種活性劑之組合物施用或投與至患有該疾病、該疾病之癥狀或有罹患該疾病之傾向的個(gè)體，或?qū)υ摰葌€(gè)體進(jìn)行其他處理。例如，治療糖尿病通常包括施予病患一活性成分或藥物，以達(dá)到降低血液葡萄糖濃度、改善胰島素敏感度，降低胰島素抗性或増加葡萄糖的消耗等之目的。本說明書所使用的「預(yù)防」乙辭系指如個(gè)體發(fā)病前預(yù)先處理可避免產(chǎn)生該病癥。
[0030]此處所使用的「個(gè)體」乙詞特別指需此處所述治療的哺乳動(dòng)物，例如，人類，但亦可為寵物(如犬、貓等)、農(nóng)畜動(dòng)物(如牛、羊、馬、豬等)或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物(如，小白鼠、大鼠天、竺鼠、白兔等)。
[0031]本說明書所使用的「治療有效量」乙詞系指用于治療之物質(zhì)可提供治療功效之量，其系取決于施用的模式及待治療的狀況，包括但不限于年齡、體重、癥狀、治療效果、投藥路徑及治療時(shí)間。
[0032]本說明書所使用的「載劑」或「醫(yī)藥上可接受之載劑」乙詞是指用于醫(yī)藥之稀釋劑、賦形劑或類似物，包括制藥業(yè)一般知識者所熟知者主。
[0033]可以任何適合的路徑施用本發(fā)明之醫(yī)藥組合物，包括但不限于非經(jīng)腸道或口服投藥。非經(jīng)腸道投藥之醫(yī)藥組合物其形式包括溶液、懸浮液、乳液，及可在使用前刻溶解或懸浮于溶劑中之固體可注射組合物?？山逵扇芙?、懸浮或乳化一或多活性成分于稀釋劑中來制備該注射液。前述稀釋劑之實(shí)例為用于注射之蒸餾水、生理鹽水、植物油、醇類及其組合。又，該注射液可含有安定劑、助溶剤、懸浮劑、乳化剤、平滑劑、緩沖液、保存劑等。該等注射液系在最終制劑步驟中滅菌或以無菌程序制備。本發(fā)明之醫(yī)藥組合物亦可被制劑成無菌固體配制品，例如，藉由冷凍干燥，并可在使用前刻滅菌或溶解于無菌可注射水或其他無菌稀釋劑。
[0034]根據(jù)本發(fā)明，該醫(yī)藥組合物較佳為經(jīng)口投藥，其中該組合物可為固體或液體形式。固體組合物包括錠劑、丸劑、膠囊、分散性粉劑、顆粒及其類似物?？诜M合物亦包括漱口藥及舌下片劑。膠囊包括硬膠囊及軟膠囊。在此類口服固體組合物中，一或多活性化合物可自行混合，或與稀釋劑、結(jié)合劑、散解劑、潤滑劑、安定劑、助溶劑混合，接著以習(xí)知方法制劑成配制品。當(dāng)需要時(shí)，此等配制品可以涂布劑涂布，或可以二或多種涂布層涂布。另ー方面，口服液體組合物包括醫(yī)藥上可接受之液態(tài)溶液、懸浮液、乳液、糖漿、藥酒，及類似物。在此類組合物中，一或多活性化合物可被溶解、懸浮或乳化在通用稀釋劑中(如純化水、乙醇或其等之混合物等等)。除了此類稀釋劑，前述組合物亦可含有潤濕劑、懸浮劑、乳化剤、甜味劑、調(diào)味劑、香料、保存劑及緩沖液及其類似物。
[0035]在下列具體實(shí)施例中，本發(fā)明將被更特定地描述。值得注意的是，下列所述本發(fā)明之具體實(shí)施例僅系用于說明，并非為詳列或限縮本發(fā)明范圍至所揭露之特定形式。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0036]出于闡釋本發(fā)明的目的，在圖式中顯示當(dāng)前較佳的實(shí)施例。然而，應(yīng)理解的是，本發(fā)明不限于圖式中之較佳實(shí)施例。
[0037]圖1顯示本發(fā)明之煮飯花根之醇類不溶性萃取物之制備流程示意圖。
[0038]圖2顯示本發(fā)明之煮飯花根之水不溶性萃取物之制備流程示意圖。
[0039]圖3提供普路蘭(Pullulan)多醣標(biāo)準(zhǔn)品P-800、P-200、P-50及P-10水溶液等量混合的HPLC分析圖。
[0040]圖4提供普路蘭(Pullulan)多醣標(biāo)準(zhǔn)品P-400、P-100、P-20、P_5水溶液等量混合的HPLC分析圖。
[0041]圖5提供本發(fā)明之醇類不溶性(509ffit0H-1nsol)萃取物之HPLC分析圖。
[0042]圖6提供本發(fā)明之醇類可溶性(509ffit0H-Sol)萃取物之HPLC分析圖。
[0043]圖7提供本發(fā)明之水不溶性(H20-1nsol)萃取物之HPLC分析圖 。
[0044]圖8A、圖8B和圖8C顯示本發(fā)明之醇類不溶性萃取物(509ffit0H-1nsol)對于第二型糖尿病小鼠之葡萄糖耐受性的影響，其中圖8A至C分別表示小鼠于治療第0周、第I周及第2周之腹腔注射葡萄糖前后各時(shí)間點(diǎn)血糖值之變化情形。
[0045]圖9顯示本發(fā)明之醇類不溶性萃取物(509ffit0H-1nsol)對于第二型糖尿病小鼠之骨骼肌之肝醣含量的影響，其中P」顯示本發(fā)明之醇類不溶性萃取物所生功效與負(fù)對照組相較，具有統(tǒng)計(jì)上顯著之差異(P值〈0.05)。
[0046]圖1OA和圖1OB顯示本發(fā)明之醇類不溶性萃取物(509ffit0H-1nsol)對于第二型糖尿病小鼠之葡萄糖耐受性之影響，其中圖1OA提供經(jīng)ロ喂與葡萄糖前后各時(shí)間點(diǎn)血糖值之變化情形；及圖1OB提供血液中葡萄糖利用率之統(tǒng)計(jì)結(jié)果(AUC:曲線下面積)。
[0047]圖1lA和圖1lB顯示本發(fā)明之醇類不溶性萃取物(509ffit0H-1nsOl)對于第二型糖尿病小鼠之蔗糖耐受性之影響，其中圖1lA表示經(jīng)ロ喂與蔗糖前后各時(shí)間點(diǎn)血糖值之變化情形；及圖1lB提供血液中葡萄糖利用率之統(tǒng)計(jì)結(jié)果(AUC:曲線下面積)。
[0048]圖12A和圖12B顯示本發(fā)明之醇類可溶性萃取物(509ffit0H-Sol)對于第二型糖尿病小鼠之靜脈注射葡萄糖耐受性之影響，其中圖12A及圖12B分別表示于第7及14天所測得各時(shí)間點(diǎn)血糖值之變化情形。
【具體實(shí)施方式】
[0049](一)制備實(shí)例
[0050]制備實(shí)例I (こ醇不溶性萃取物)
[0051]取需要量之煮飯花根干燥粉末，加入約干燥粉末總重量之10倍體積水進(jìn)行萃?。粚⑦^濾所得濾液進(jìn)行減壓濃縮至剩下原濾液體積之約1/3，再加入與該濃縮濾液等體積之95%こ醇溶液進(jìn)行第二次萃取，經(jīng)過濾后保留濾液為こ醇可溶性萃取物并收集不溶物為こ醇不溶性萃取物，準(zhǔn)備進(jìn)行高效液相層析儀(High-Performance Lipid Chromatography ；HPLC)分析。圖1為こ醇不溶性萃取物之制備流程示意圖。
[0052]制備實(shí)例2 (水不溶性萃取物)
[0053]依制備實(shí)例I之萃取步驟進(jìn)行萃取得こ醇不溶性萃取物，加入適量水至該不溶物進(jìn)行第三次萃取，并離心取得其沉淀物后，再加入該沉淀物之約40至50倍體積之水進(jìn)行第四物萃取，并離心以獲得其上清液并進(jìn)行過濾，經(jīng)過濾后收集不溶物為水不溶性萃取物，準(zhǔn)備進(jìn)行HPLC分析。圖2為水不溶性萃取物之制備流程示意圖。
[0054]HPLC 分析
[0055]以分子篩選層析法(size exclusion chromatography)分析樣品，并使用凝膠過濾層析(gel filtration chromatography)管柱,將成份依分子量由大至小依序沖提。同時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)品比較滯留時(shí)間(RT)，用以預(yù)估分子量(麗)。[0056]1.標(biāo)準(zhǔn)品溶液之配制:將8個(gè)普路蘭(pullulan)多醣標(biāo)準(zhǔn)品(P_5、-10、-20、-50、-100、-200、-400、-800)分別配置成lmg/mL水溶液，加水緩和攪拌后置冷藏(4°C )隔夜，以確保其吸水膨脹后溶解成水溶液。以0.45 ii m濾膜過濾后供HPLC分析。
[0057]I1.萃取物溶液之配制:將待測樣品以水各配制成3mg/mL水溶液，室溫下不溶者視情況加熱攪拌(30分鐘，起泡)后，冷卻并冷藏(4°C )隔夜。以0.45 y m濾膜過濾后供HPLC分析。
[0058]II1.HPLC 條件:
[0059]儀器:日立L-71OOHPLC 幫浦(Hitachi L-7100 HPLC Pump);注射體積:50 y I ;分析管柱:Shodex OHpak SB-804HQ, 10 u m,8X300mm ;排阻極限(exclusion limit):1，000, 000 ;管柱溫控器:Eldex CH-150, 30°C ;流動(dòng)相冰；流速:lmL/min ;以及蒸發(fā)光散色查看器:Sedere Sedex 75 ELSD,45°C,3.0 巴。
[0060]V1.分析結(jié)果:
[0061]⑴標(biāo)準(zhǔn)品
[0062]標(biāo)準(zhǔn)品P-800、P-200、P-50及P-10水溶液等量混合的HPLC分析圖如圖3所示，P-400.P-100.P-20及P-5混合的HPLC分析圖如圖4所示。各標(biāo)準(zhǔn)品所對應(yīng)之分子量及其滯留時(shí)間顯示于表1:
[0063]表1
[0064]
【權(quán)利要求】
1.一種治療糖尿病的組合物，其系包含煮飯花(Mirabilis jalapa L.)根的醇類不溶性萃取物，該萃取物的特征在于其HPLC分析圖于滯留時(shí)間為4.27及5.36分鐘具有吸收峰，其中HPLC分析條件如下:儀器:日立L-7100 HPLC幫浦(Hitachi L-7100 HPLCPump);注射體積:50 u I ;分析管柱:Shodex OHpak SB-804HQ, 10 u m, 8X 300mm ;排阻極限(exclusion limit):1,000,000 ;管柱溫控器:Eldex CH-150, 30°C ;流動(dòng)相:水；流速:1ml/min ;以及蒸發(fā)光散色查看器:Sedere Sedex 75 ELSD, 45°C, 3.0巴。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中該醇類不溶性萃取物系由包括下列步驟的方法所制得: 將煮飯花根或干燥的煮飯花根，經(jīng)水萃取得粗萃物；再以醇類溶液自該粗萃物分離出ー醇類不溶性萃取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的醇類不溶性萃取物，其系由包括下列步驟的方法所制得: (i)以水加熱煮飯花根或干燥之煮飯花根，并將其過濾而形成第一濾液； (ii)濃縮步驟(i)所述第一濾液以獲得ー濃縮濾液，并與醇類溶液混合形成一混合液；及 (iii)過濾步驟(ii)所述混合液以獲得第二濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根的醇類不溶性萃取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的醇類不溶性萃取物，其中該濃縮濾液系與等體積之95%(v/v)以上醇類溶液混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的醇類不溶性萃取物，其中該醇類溶液系甲醇或こ醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的醇類不溶性萃取物，其中該醇類溶液系こ醇。
7.一種治療糖尿病的組合物，其系包含煮飯花根的水不溶性萃取物，該萃取物的特征在于其HPLC分析圖于滯留時(shí)間為4.85及5.58分鐘具有吸收峰，其中HPLC分析條件如下:儀器:日立L-7100HPLC幫浦(Hitachi L-7100 HPLC Pump);注射體積:50 U I ;分析管柱:Shodex OHpak SB-804HQ, 10 u m,8X300mm ;排阻極限(exclusion limit): 1，000，000 ;管柱溫控器=Eldex CH-150, 300C ;流動(dòng)相:水；流速:lml/min ;以及蒸發(fā)光散色查看器=SedereSedex 75 ELSD，45°C，3.0 巴。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其中該水不溶性萃取物系由包括下列步驟的方法所制得: 將煮飯花根或干燥的煮飯花根，經(jīng)水萃取得粗萃物；以醇類溶液自該粗萃物分離出ー醇類不溶性萃取物；再以水進(jìn)行兩次萃取并分離出一水不溶性萃取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的水不溶性萃取物，其系由包括下列步驟的方法所制得: (i)以水加熱煮飯花根或干燥之煮飯花根，并將其過濾而形成第一濾液； (ii)濃縮步驟(i)所述第一濾液以獲得ー濃縮濾液，并與醇類溶液混合形成一混合液； (iii)過濾步驟(ii)所述混合液以獲得第二濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根的醇類不溶性萃取物； (iv)以水溶解步驟(iii)所述不溶物并離心以收集其沉淀物； (v)再以水溶解步驟(iv)所述沉淀物并離心以獲得一上清液；及 (vi)過濾步驟(V)所述上 清液以獲得第三濾液及ー不溶物，并收集該不溶物為煮飯花根的水不溶性萃取物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的水不溶性萃取物，其中該濃縮濾液系與等體積之95%(v/v)以上醇類溶液混合。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的水不溶性萃取物，其中該醇類溶液系甲醇或こ醇。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的水不溶性萃取物，其中該醇類溶液系こ醇。
13.一種預(yù)防或治療糖尿病的醫(yī)藥組合物，其包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的醇類不溶性萃取物或權(quán)利要求7的水不溶性萃取物；以及ー醫(yī)藥上可接受的載劑。
14.一種權(quán)利要求1的醇類不溶性萃取物或權(quán)利要求7的水不溶性萃取物用于制備預(yù)防或治療糖尿病的藥物的用途。
【文檔編號】A61K125/00GK103585202SQ201210287012
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年8月13日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月13日
【發(fā)明者】葉集煥, 徐兆民 申請人:資元堂生物科技股份有限公司