專利名稱：竹節(jié)參皂苷Ⅳa在制備α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及竹節(jié)參皂苷IV a在制備α -糖苷酶抑制劑和/或α-淀粉酶抑制劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
糖尿病(Diabetes Mellitus)是一種以復(fù)雜病因為特征的代謝紊亂性疾病，常伴隨多種慢性并發(fā)癥，造成多器官、多系統(tǒng)損傷，具有較高的致殘率，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。主要是由于胰島素分泌缺陷或相對不足而引起的糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂為特征的疾病，表現(xiàn)為多食、多飲、多尿、消瘦的三多一少癥狀。隨著生活方式的改變和脂肪攝入量的增加，曾經(jīng)的富貴病目前已悄然平民化，2000年全球有I. 71億人患有糖尿病，到2030年， 這個數(shù)字將至少增加到3. 66億人，已成為繼心血管疾病和惡性腫瘤之后第三大嚴重威脅人類健康的非傳染性疾病。發(fā)病后若未得到及時有效治療，隨著病程的延長，可出現(xiàn)廣泛的微血管及大血管病變，出現(xiàn)神經(jīng)、泌尿、循環(huán)等多系統(tǒng)的病理改變。α -葡萄糖苷酶抑制劑是目前治療2型糖尿病口服降糖藥的一類。此類藥物有阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol)和伏格列波糖(voglibose)等。阿卡波糖是由拜耳公司推出的第I個α-糖苷酶抑制劑，1990年在德國上市。它們通過抑制小腸粘膜上皮細胞表面的α-葡萄糖苷酶抑制劑而延緩和減少碳水化合物的消耗和葡萄糖的吸收，并降低餐后血糖，從而達到控制血糖的目的。主要適應(yīng)于肥胖或超重的2型糖尿病飲食控制和運動治療，療效不佳者，可單用此類藥。大量的臨床研究表明，抑制α -糖苷酶和α _淀粉酶對降低空腹及餐后血糖有明顯療效，在改善糖尿病患者體質(zhì)，調(diào)節(jié)胰島素、膽固醇、甘油三脂和高密度脂蛋白(HDL)代謝等方面也有明顯作用。抑制α-糖苷酶從而降低糖化血紅蛋白(HbAlc)的作用提示可能有益于預(yù)防糖尿病并發(fā)癥。α-糖苷酶抑制劑已被第三次“亞太地區(qū)糖尿病治療藥物指南”推薦降低餐后血糖的一線藥物，醫(yī)學(xué)界也將其列為第三類口服降糖藥。阿卡波糖(Acarbose,拜糖平)、米格列醇(Miglitol,奧怡蘋)、伏格列波糖(Voglibose,倍欣)是目前已經(jīng)用于臨床的α-糖苷酶抑制劑藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供竹節(jié)參皂苷IV a作為α-糖苷酶抑制劑和/或α -淀粉酶抑制劑的用途。本發(fā)明的竹節(jié)參皂苷IV a是從太白惚木純中草藥中分離得到，其提取純化方法包括以下步驟
(1)將太白惚木用粉碎機粉碎，稱量約20g藥粉，加入10倍量80%乙醇(料液比為1:10，w/v)，在80 ° C下回流提取60 min，回流提取3次，過濾、合并，濃縮回收乙醇得粗浸膏；
(2)粗浸膏用蒸餾水分散，分別用氯仿1:3(v/v)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，用水飽和的正丁醇萃取3次(1:3，v/v)，合并3次萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60 ° C下減壓回收，在60° C水浴上蒸干得到正丁醇萃取物；
(3)正丁醇萃取物利用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、ODS反相柱色譜、Lobar柱色譜和反相HPLC制備等手段進行分離，從中得到13個化合物。太白惚木皂苷分子量較大，結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜。利用ID NMR (1H和13C NMR), 2D NMR(DQCOSY、TOCSY、HMQC、HMBC、NOESY 和 R0ESY)和 MS (ESI-MS)等波譜技術(shù)對分離得到的皂苷成分進行結(jié)構(gòu)解析，并結(jié)合化學(xué)手段(酸水解、堿水解、酶解、甲基化和乙?；?確定了其平面及立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。竹節(jié)參皂苷IV a單體對α -糖苷酶的抑制作用的操作方法包括以下步驟
I)藥品與試劑的配制
A 0. 2 M 磷酸氫二鉀，pH = 6. 8，T = 37。C
4.5644 g磷酸氫二鉀用去離子水溶解，IM氫氧化鈉調(diào)pH至6. 8,并定容至100 mL。B :1 mg/mL還原型谷胱甘肽
精密稱取2 mg的還原型谷胱甘肽，用2 mL去離子水溶解。C 5 mM對硝基苯基a -D-糖苷酶
精密稱取4. 5 mg的對硝基苯基a -D-糖苷酶，用3 mL去離子水溶解。D:200 mM 碳酸鈉
精密稱取I. 0599 g的碳酸鈉，用50 mL去離子水溶解。E 1 u/mL α -糖苷酶
用冷的去離子水配制成I u/mL α-糖苷酶。F:取50 mg阿卡波糖I片，用研缽研碎，精密稱取10 mg置于10 mL容量瓶中，力口甲醇適量，搖勻，并定容，即得I mg/mL陽性對照品溶液。2)實驗原理
權(quán)利要求
1.竹節(jié)參皂苷IV a在制備α -糖苷酶抑制劑和/或α -淀粉酶抑制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了從太白楤木純中草藥中分離得到的竹節(jié)參皂苷Ⅳa對α-糖苷酶和α-淀粉酶具有高的抑制活性，證明其可用于制備α-糖苷酶抑制劑和α-淀粉酶抑制劑。
文檔編號A61K31/704GK102824355SQ201210299319
公開日2012年12月19日 申請日期2012年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月22日
發(fā)明者文愛東, 竇芳, 湯海峰, 奚苗苗 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)