專利名稱：一種獸用鹽酸多西環(huán)素注射液及其制備方法
一種獸用鹽酸多西環(huán)素注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸藥技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種獸用高濃度長(zhǎng)效鹽酸多西環(huán)素注射液，還涉及所述注射液的制備方法。
背景技木鹽酸多西環(huán)素(Doxycycline Hydrochloride)為四環(huán)素類抗生素，別名鹽酸脫氧土霉素、鹽酸強(qiáng)カ霉素，其體內(nèi)體外抗菌活性強(qiáng)于同類藥物土霉素和四環(huán)素。該藥不僅對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌與陰性菌有效，而且對(duì)螺旋體、放線菌、霉形體、衣原體、立克次體和某些原蟲(chóng)(如阿米巴原蟲(chóng)、球蟲(chóng)等)均有抑制作用，對(duì)四環(huán)素、土霉素的耐藥菌也有效，用于治療畜禽慢性呼吸道疾病、支原體病、大腸桿菌病、沙門(mén)氏菌病、巴氏桿菌病、附紅細(xì)胞體病等。該藥脂溶性大，對(duì)組織滲透力強(qiáng)，體內(nèi)分布廣，生物利用度高，有效血液濃度維持時(shí)間長(zhǎng)，毒 性較低，在獸醫(yī)臨床上廣泛應(yīng)用。目前，鹽酸多西環(huán)素劑型単一，正式產(chǎn)品僅有ロ服粉劑和片劑，缺乏其作用迅速、劑量準(zhǔn)確、療效可靠的注射劑型，而普通的注射劑由于濃度低，藥效持續(xù)時(shí)間短，造成使用劑量大，給藥次數(shù)多，操作繁瑣，治療成本較高，直接影響了家畜等動(dòng)物感染性急癥的治療效果和效率。因此，研發(fā)高濃度、長(zhǎng)效鹽酸多西環(huán)素注射液成為本發(fā)明的目標(biāo)。鹽酸多西環(huán)素在水溶液中易氧化、降解，導(dǎo)致變色、析出，其不穩(wěn)定性制約了這種注射液的制備。利用多西環(huán)素與金屬離子絡(luò)合的特性使其形成絡(luò)合物是提高鹽酸多西環(huán)素溶解度和穩(wěn)定性的有效手段，這種方法已在制備土霉素注射液中使用過(guò)，上世紀(jì)六、七十年代曾借鑒其方法應(yīng)用于制備多西環(huán)素注射液。但是，金屬離子與多西環(huán)素形成絡(luò)合物的同時(shí)也會(huì)加速藥物的氧化變色，并且生成的絡(luò)合物還不溶于水，因此，能否有效形成及溶解絡(luò)合物是這種注射液制備的關(guān)鍵，其涉及因素與藥物和金屬離子的用量，采用的溶劑、反應(yīng)溫度、PH值的控制及含氧量有夫，故優(yōu)選絡(luò)合剤、抗氧劑及溶劑等并采用合理的制備エ藝均對(duì)注射液的安全、穩(wěn)定、高效和長(zhǎng)效起到至關(guān)重要的作用。而目前多西環(huán)素注射液，特別是高濃度的多西環(huán)素注射液在制備技術(shù)上有一定難度并存在諸多問(wèn)題，例如US3674859、US3957980涉及的是低濃度注射液，給藥劑量大；US 4086332抗氧劑甲醛合次硫酸氫鈉用量較大，易對(duì)注射液的安全造成影響。CN101062013A、CN101062014A與CN101822817A涉及低濃度注射液，未采用金屬離子絡(luò)合，使用EDTA-2Na作為抗氧化劑，沒(méi)有長(zhǎng)效作用，也缺少穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)。CN101703464A所述抗氧劑適用于弱酸性藥液,在pH7. 5、條件下抗氧效果較弱；CN 101416974A公開(kāi)其制劑的長(zhǎng)效作用不明顯；CN 101804062A、CN102144967A缺乏體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)支持其長(zhǎng)效作用。CN 101301268A等沒(méi)有說(shuō)明其產(chǎn)品具有長(zhǎng)效作用。為了提高和彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人通過(guò)對(duì)注射液的附加劑種類、用量以及制備エ藝的研究和優(yōu)化，獲得ー種高濃度、安全穩(wěn)定、長(zhǎng)效的鹽酸多西環(huán)素注射液及其制備方法。
發(fā)明內(nèi)容[要解決的技術(shù)問(wèn)題]本發(fā)明的目的是提供一種獸用高濃度長(zhǎng)效鹽酸多西環(huán)素注射液。本發(fā)明的另ー個(gè)目的是提供所述獸用高濃度長(zhǎng)效鹽酸多西環(huán)素注射液的制備方法。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液每IOOml含有
以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素15 25克；鎂離子化合物絡(luò)合劑，它與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 8 1 ；抗氧劑O. 25 1.0克；EDTA-2Na金屬離子螯合劑O. θΓθ. 05克；水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑I. (Γ5. O克；有機(jī)溶劑45 80克；pH 值3·0 5·0;殘氧量，以所述注射液總體積計(jì)く3% ；注射用水，它的量為使所述注射液總量達(dá)到IOOml的量。鹽酸多西環(huán)素是目前市場(chǎng)上銷售的抗生素，該藥在水溶液中易氧化、降解，從而導(dǎo)致其水溶液變色并析出。為此，讓鎂離子化合物與多西環(huán)素進(jìn)行絡(luò)合反應(yīng)生成絡(luò)合物，以提高多西環(huán)素在所述注射液中的穩(wěn)定性。所述的鎂離子化合物絡(luò)合劑是MgCL2 · 6H20、MgO或MgS04。優(yōu)選地，所述的鎂離子化合物絡(luò)合劑是MgCL2 · 6H20或MgO。以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，如果鎂離子化合物絡(luò)合劑與其多西環(huán)素的摩爾比小于1.0 :1，則會(huì)使多西環(huán)素絡(luò)合不完全；如果鎂離子化合物絡(luò)合劑與其多西環(huán)素的摩爾比高于I. 8 :1，則會(huì)使藥液堿性偏高，易氧化并影響其溶解。因此，鎂離子化合物絡(luò)合劑與其多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 8 1時(shí)較為適宜。優(yōu)選地，鎂離子化合物絡(luò)合劑與其多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 6:1。為了防止多西環(huán)素氧化，在本發(fā)明的每IOOml注射液中使用了 O. 25^1. O克抗氧齊 。所述的抗氧劑是一種或兩種選自甲醛合次硫酸氫鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或維生素C的抗氧劑。優(yōu)選地，所述的抗氧劑是一種或兩種選自甲醛合次硫酸氫鈉、亞硫酸氫鈉或焦亞硫酸鈉的抗氧劑。以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，如果抗氧劑的量小于O. 25克，則其抗氧效果不足；如果抗氧劑的量大于I. O克，則會(huì)對(duì)注射劑質(zhì)量產(chǎn)生影響，如影響其安全性；因此，以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，所述抗氧劑的量為O. 25 1. O克是比較合適的。優(yōu)選地，所述抗氧劑的量是O. 3、. 8克。為了獲得穩(wěn)定具有長(zhǎng)效作用的注射液，在本發(fā)明的注射液中使用了水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑。所述水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑選自聚こ烯吡咯烷酮PVPK17、聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl、泊洛沙姆188或泊洛沙姆4。7。聚こ烯吡咯烷酮為白色或淺黃色粉末，易溶于水及多種有機(jī)溶剤，具有良好的吸濕性、成膜性、絡(luò)合能力和生理相容性。這些水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑都是目前市場(chǎng)上銷售的并常用的藥用輔料，例如上海其福青材料科技有限公司生產(chǎn)的聚こ烯吡咯烷酮PVPK17與聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl。泊洛沙姆為聚氧こ烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，是ー類新型的高分子非離子表面活性劑，具有穩(wěn)定、增溶、促進(jìn)吸收等作用。它易溶于水或こ醇，水溶液在空氣中較穩(wěn)定，對(duì)酸堿水溶液和金屬離子穩(wěn)定。作為優(yōu)良的藥用新輔料-市售的泊洛沙姆已在制藥エ業(yè)中使用，例如上海源葉生物科技有限公司銷售的泊洛沙姆系列產(chǎn)品。以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，如果水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑的量小于I. O克，則會(huì)起不到應(yīng)有的作用；如果水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑的量高于5. O克，則會(huì)加大藥液的粘稠度，造成制備和應(yīng)用中的困難并增加成本。因此，所述水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑的量為I. (Γ5. O克是合適的。優(yōu)選地，所述水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑的量為2. (Γ4. O克。為了保證鹽酸多西環(huán)素絡(luò)合效果，往往使用過(guò)量的絡(luò)合剤，因此，反應(yīng)中多余的鎂離子以及其它試劑、溶媒或設(shè)備等帶入的各種微量金屬離子均會(huì)加速藥物的氧化變色，因 此，螯合掩蔽過(guò)量鎂離子與其它微量金屬離子極其必要。為此，在本發(fā)明的注射液中使用了 EDTA_2Na金屬離子螯合剤。它為白色結(jié)晶性粉末，能溶于水，是鈣、鎂及其他金屬離子的螯合劑和掩蔽劑。它是ー種目前市場(chǎng)上銷售的醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域里普遍使用的產(chǎn)品。EDTA2Na作為金屬離子螯合劑用于注射液的常用量為O. 005-0. 05% (克/100ml)。在本發(fā)明的產(chǎn)品中，以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，如果EDTA_2Na金屬離子螯合劑的量小于O. 01克，則抗氧化效果不夠好；采用O. 05克EDTA2Na己能達(dá)到預(yù)計(jì)要求，如果再高于O. 05克，則會(huì)增加成本；因此，所述EDTA-2Na金屬離子螯合劑的量為O. 01 O. 05克是合適的。優(yōu)選地，所述EDTA_2Na金屬離子螯合劑的量為O. 02 O. 05克。為了有效地制成溶解度小的絡(luò)合物或形成高分子親水凝膠減少溶出，采用丙ニ醇等有機(jī)溶劑來(lái)增加溶解度和粘滯度，降低擴(kuò)散系數(shù)，這在提高藥物穩(wěn)定性的同時(shí)延緩了藥物釋放，延長(zhǎng)了藥物作用時(shí)間，因此，在本發(fā)明的注射液中使用了有機(jī)溶劑作為制備介質(zhì)。所述的有機(jī)溶劑是ー種或兩種選自α -吡咯烷酮、丙ニ醇、ニ甲基こ酰胺或聚こニ醇■、聚こニ醇2Μ的有機(jī)溶剤。優(yōu)選地，所述的有機(jī)溶劑是ー種或兩種選自α -吡咯烷酮、丙ニ醇或ニ甲基こ酰胺的有機(jī)溶剤。以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素為15 25克時(shí)，如果有機(jī)溶劑的量小于45克，則導(dǎo)致注射液不穩(wěn)定，易析出；如果有機(jī)溶劑的量大于80克，則造成藥液粘稠度大，成本増加；因此，有機(jī)溶劑的量為45 80克較為適宜。優(yōu)選地，有機(jī)溶劑的量是5(Γ70克。就本發(fā)明而言，pH值是保證產(chǎn)品穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素之一，絡(luò)合物能否有效形成又是注射液制備的關(guān)鍵之一。因此，絡(luò)合反應(yīng)PH值和終產(chǎn)品pH值的控制是保證藥物順利絡(luò)合、延緩藥物氧化，提高穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素。在本發(fā)明中，使用PH調(diào)節(jié)劑將其反應(yīng)液的pH值控制在3. 0 6. O，優(yōu)選地3. 5 5. O ;終產(chǎn)品pH值控制在3. 0 5. O，優(yōu)選地3. 9 4. 5。所述的PH調(diào)節(jié)劑是鹽酸和/或こ醇胺。由于多西環(huán)素易氧化變色，氧對(duì)注射液的穩(wěn)定性影響很大，注射液中含氧量越高，穩(wěn)定性越差，藥液顏色越深，故本發(fā)明注射液中殘氧量是控制產(chǎn)品質(zhì)量的又一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)。在本發(fā)明注射液配制和灌裝過(guò)程中需要在氮?dú)獗Ｗo(hù)下實(shí)施，嚴(yán)格地將產(chǎn)品中氧的含量控制在以所述注射液總體積計(jì)3%以下，優(yōu)選地1%以下，這樣可以有效地防止其注射液在生產(chǎn)、滅菌和儲(chǔ)存過(guò)程中的氧化變色現(xiàn)象，從而有效地保證其注射液產(chǎn)品質(zhì)量。優(yōu)選地，所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液所述的注射液每IOOml含有 以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素18 22克；鎂離子化合物絡(luò)合劑，它與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 61；抗氧劑0. 3 0. 8克；EDTA-2Na金屬離子螯合劑0. 02 0. 05克；水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑2. (T4. 0克；有機(jī)溶劑50 70克；pH 值3. 9 4. 5 ；殘氧量，以所述注射液總體積計(jì)く 1% ;注射用水，它的量為使所述注射液總量達(dá)到IOOml的量。本發(fā)明還涉及所述獸用鹽酸多西環(huán)素注射液的制備方法。所述制備方法的步驟如下A、將0. 25^1. 0克抗氧劑和I. (T5. 0克水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，或者將0. 25^1. 0克抗氧劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)6(T75%所述水溶液，加到45 80克有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液。所述的抗氧劑和水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑如前面所述，在此不再贅述。B、往步驟A得到的混合液中依次加入鎂離子化合物絡(luò)合劑和15 25克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 8 :1 ;在溫度50-65°C下使用pH調(diào)節(jié)劑將其混合液的PH值調(diào)節(jié)至3. 0-6. 0，攪拌直至得到ー種黃色透明液體。C、然后，在溫度50 65 °C下保溫5-20分鐘；往步驟B得到的透明液體中加入
0.oro. 05克EDTA-2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)25 40%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用PH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至3. 0-5. 0，之后用注射用水補(bǔ)充其總量至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在以所述注射液體積計(jì)3%以下，然后用蒸汽滅菌，得到所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。在所述制備方法中，所使用的抗氧劑、水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑、鎂離子化合物絡(luò)合剤、EDTA-2Na金屬離子螯合劑、有機(jī)溶劑與pH調(diào)節(jié)劑等如前面所述，在此不再贅述。本發(fā)明使用的有機(jī)濾膜為聚四氟こ烯、聚偏氟こ烯或脂肪族尼龍材料，具有廣泛的化學(xué)相容性，耐適當(dāng)濃度的酸堿，均是目前醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域里普遍使用的市售產(chǎn)品。本發(fā)明滅菌使用的設(shè)備是目前市場(chǎng)上銷售的醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域里普遍使用的產(chǎn)品，例如山東中泰醫(yī)療器械股份有限公司銷售的產(chǎn)品。
本發(fā)明的注射液通常進(jìn)行蒸汽滅菌15 30分鐘。本發(fā)明還涉及所述獸用鹽酸多西環(huán)素注射液的另ー種制備方法。所述制備方法的步驟如下A、將0. 25 I. 0克抗氧劑的50 75%單獨(dú)或與I. 0 5. 0克水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑一起溶于總量5(T75%計(jì)量的注射用水中，得到ー種水溶液，再把所述的水溶液加到45 80克有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、然后，在溫度5(T65°C下往步驟A得到的混合液中依次加入鎂 離子化合物絡(luò)合劑和15 25克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 81 ；攪拌均勻；再用PH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至3. (T6. 0，待反應(yīng)體系呈黃色透明；C、將余下的抗氧劑與0. OrO. 05克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于余下一部分注射用水中，把其溶液再加到步驟B的反應(yīng)溶液體系里，混勻，使用pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至
3.(T5. 0，再用注射用水將其總量補(bǔ)充到100ml，接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用蒸汽滅菌，得到所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。采用本發(fā)明方法所得到獸用鹽酸多西環(huán)素注射液的pH值為3. (T5. O。本發(fā)明的技術(shù)特點(diǎn)如下(I)抗氧劑的組成及制備エ藝本發(fā)明采用多西環(huán)素與金屬離子絡(luò)合的方法防止其藥物氧化水解，還能夠延長(zhǎng)體內(nèi)藥物吸收，但鎂離子在與多西環(huán)素絡(luò)合的同時(shí)也能夠加速其藥物的氧化。本發(fā)明使用EDTA2Na作為金屬離子螯合劑，可螯合鎂等金屬離子，防止其對(duì)藥物的催化起到抗氧化作用，但同時(shí)它又參與多西環(huán)素的競(jìng)爭(zhēng)，在一定程度上影響多西環(huán)素的絡(luò)合，甚至?xí)淮罅挎V離子消耗而失去其絡(luò)合抗氧化作用。為此，本發(fā)明采用在絡(luò)合反應(yīng)完成，即形成透明溶液后，再加入EDTA-2Na絡(luò)合剩余的鎂離子和其他微量金屬離子，這樣既達(dá)到絡(luò)合反應(yīng)完全，也防止其注射液被微量金屬離子氧化，同時(shí)采用抗氧劑與EDTA-2Na組合二次加入抗氧劑的方法，有效地補(bǔ)充了絡(luò)合反應(yīng)中抗氧劑量的消耗，明顯增加了抗氧化效果，從而在保證療效的情況下提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性。這種技術(shù)方案在該類注射液的現(xiàn)有技術(shù)中無(wú)任何人報(bào)道。( 2 )反應(yīng)溫度及絡(luò)合pH值絡(luò)合物能否有效形成是注射液制備的關(guān)鍵之一。本發(fā)明絡(luò)合反應(yīng)溫度控制在50^650C (優(yōu)選地55 60°C)，絡(luò)合pH值控制在3. 0 6. 0 (優(yōu)選地3. 5 5. 0)，可保證多西環(huán)素順利絡(luò)合，防止因溫度和PH過(guò)高造成的顔色加深等氧化現(xiàn)象。本發(fā)明所提出的具體溫度和PH值范圍的絡(luò)合條件，在現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)具體相同報(bào)道。(3)殘氧量控制多西環(huán)素易氧化變色，氧對(duì)注射液的穩(wěn)定性影響很大，注射藥液中含氧量越高，穩(wěn)定性越差，藥液顏色越深，故產(chǎn)品中殘氧量的控制為關(guān)鍵指標(biāo)之一。在配制和灌裝過(guò)程中充入氮?dú)?，將產(chǎn)品中氧的含量控制在3%以下，可有效地降低注射液在生產(chǎn)、滅菌和儲(chǔ)存過(guò)程中的氧化變色現(xiàn)象。本發(fā)明提出的該項(xiàng)控制指標(biāo)在同類專利中未見(jiàn)報(bào)道。(4)采用的延效技術(shù)有效地制成溶解度小的絡(luò)合物或形成高分子親水凝膠減少溶出，采用丙ニ醇等有機(jī)溶劑增加粘滯度，降低擴(kuò)散系數(shù)，可在提高藥物穩(wěn)定性的同時(shí)延緩了藥物釋放，延長(zhǎng)了藥物作用時(shí)間。該制劑技術(shù)制備的產(chǎn)品吸收快，體內(nèi)消除半衰期長(zhǎng)(>30h)，其表明長(zhǎng)效作用的參數(shù)值明顯高于CN101416974公開(kāi)的作用數(shù)據(jù)。(5) pH 調(diào)節(jié)劑本發(fā)明采用的酸性pH調(diào)節(jié)劑為9M鹽酸，而現(xiàn)有技術(shù)使用的是濃鹽酸(CN101301268A)，不夠安全并且加入時(shí)因局部濃度高有析出，易影響穩(wěn)定性。本酸性pH調(diào)節(jié)劑的優(yōu)點(diǎn)為易于配制和調(diào)節(jié)并相對(duì)安全。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明制備的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液產(chǎn)品色澤較淺、穩(wěn)定性好、具有高效、速效和長(zhǎng)效作用。[有益效果]本發(fā)明的有益效果如下本發(fā)明制備的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液產(chǎn)品色澤較淺、穩(wěn)定性好、具有高效、速效和長(zhǎng)效作用。多西環(huán)素屬于長(zhǎng)效廣譜半合成抗生素，脂溶性大，本發(fā)明制備的多西環(huán)素注射液半衰期長(zhǎng)約25 39h，比現(xiàn)有技術(shù)提高約l(T25h，因此，延長(zhǎng)了藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間，以10mg/kg的劑量給藥，可Γ2天給藥一次，減少了給藥次數(shù)和使 用量，提高了治療效果和效率，在獸醫(yī)臨床上將有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施方式通過(guò)下述實(shí)施例將能夠更好地理解本發(fā)明。實(shí)施例I :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將O. 25克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑和5. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK17水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)60%所述水溶液，加到45克α -吡咯烷酮有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgCL2 ·6Η20絡(luò)合劑和15克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.3 :1 ;在溫度55°C下使用鹽酸或こ醇胺調(diào)節(jié)劑將PH值調(diào)節(jié)至3. 0，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在溫度55°C下保溫5分鐘；再往其中加入O. 01克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)40%步驟A的水溶液，溶解混勻后使用鹽酸與こ醇胺pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至3. O,之后用注射用水補(bǔ)充其總量至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在以所述注射液體積計(jì)3%以下，然后用流通蒸汽滅菌15分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其PH為3. O。實(shí)施例2 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將I. O克甲醛合次硫酸氫鈉和亞硫酸氫鈉(重量比3 :2)抗氧劑和I. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)68%所述水溶液，加到60克α -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(體積比2 :1)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgO絡(luò)合劑和25克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.8 :1 ;在溫度64°C下使用鹽酸與こ醇胺pH調(diào)節(jié)劑將PH值調(diào)節(jié)至6. 0，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在這個(gè)溫度下保溫20分鐘；再往其中加入O. 05克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)32%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用所述pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至5. O，接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌30分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其pH為5. O。實(shí)施例3 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將0. 50克甲醒合次硫酸氫鈉和焦亞硫酸鈉(重量比3:2)抗氧劑和3. 5克泊洛沙姆407水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)75%所述水溶液，加到50克a -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(體積比2 1)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；
B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgSO4絡(luò)合劑和20克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.2 :1 ;在溫度58°C下使用鹽酸與こ醇胺調(diào)節(jié)劑將PH值調(diào)節(jié)至3. 5，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在這個(gè)溫度下保溫14分鐘；再往其中加入0. 02克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)25%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用所述pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至3. 5，用注射用水將其總量補(bǔ)充至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌20分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其PH為3. 5。實(shí)施例4 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下Ajf 0. 80克亞硫酸氫鈉和維生素C (重量比I :I)抗氧劑溶于注射用水中，得到一種水溶液，移取以體積計(jì)70%所述水溶液，加到70克a -吡咯烷酮和聚こニ醇■(體積比4 3)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgO絡(luò)合劑和23克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.6 :1 ;在溫度60°C下使用鹽酸與こ醇胺調(diào)節(jié)劑將PH值調(diào)節(jié)至4. 0，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在這個(gè)溫度下保溫8分鐘；再往其中加入0. 03克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)30%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用所述pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至4. 2，用注射用水將其總量補(bǔ)充至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用蒸汽滅菌20分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其pH 為 4. 2。實(shí)施例5 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將0. 4克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑和2. 0克泊洛沙姆188水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)62%所述水溶液，加到65克a -吡咯烷酮有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgCL2 *6H20絡(luò)合劑和20克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.4:1 ;在溫度62°C下使用鹽酸或こ醇胺PH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至4. 6，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在這個(gè)溫度下保溫10分鐘；再往其中加入0. 01克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)38%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用所述pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至4. O，用注射用水補(bǔ)充其總量至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌30分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其pH為4. O。實(shí)施例6 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將O. 65克焦亞硫酸鈉和維生素C (重量比I :I)抗氧劑溶于注射用水中，得到一種水溶液，移取以體積計(jì)74%所述水溶液，加到80克聚こニ醇■和ニ甲基こ酰胺(體積比
53)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、往步驟A得到的混合液中依次加入MgSO4絡(luò)合劑和15克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.5 :1 ;在溫度65°C下使用鹽酸與こ醇胺pH調(diào) 節(jié)劑將PH值調(diào)節(jié)至5. 6，攪拌直至得到ー種黃色透明液體；C、然后，在這個(gè)溫度下保溫18分鐘；再往其中加入O. 04克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)26%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用所述pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至4. 5，用注射用水補(bǔ)充其總量至IOOmL,接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用蒸汽滅菌20分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其pH為 4. 5。實(shí)施例7 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將O. 45克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑和3. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK17水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于以體積計(jì)70%所述注射用水中，得到ー種水溶液，把所述水溶液加到50克α -吡咯烷酮和丙ニ醇(體積比4 1)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、在溫度50°C下往步驟A得到的混合液中依次加入MgO絡(luò)合劑和20克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.4:1 ;攪拌均勻；再使用鹽酸與こ醇胺PH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至3. 8，直至得到ー種黃色透明液體；C、另取O. 15克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑與O. 02克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于余量30%注射用水，把其溶液加到步驟B得到的透明液體中，混勻后，降至室溫，用所述pH調(diào)節(jié)劑將其PH值調(diào)節(jié)至4. 0，用注射用水將其總量補(bǔ)充到IOOmL,有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌15分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。實(shí)施例8 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A將O. 4克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑溶于以體積計(jì)65%所述注射用水，得到ー種水溶液，把所述水溶液加到60克α -吡咯烷酮和丙ニ醇(體積比I :1)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B在溫度55°C下往步驟A得到的混合液中依次加入MgO絡(luò)合劑和20克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. 5 1 ;攪拌均勻；再使用鹽酸與こ醇胺PH調(diào)節(jié)劑將其pH調(diào)節(jié)至4. 8，直至得到ー種黃色透明液體；C另取0. 3克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑與0. 02克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于以體積計(jì)35%所述注射用水，把其溶液再加到步驟B得到的透明液體中，混勻后，降至室溫，用所述pH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至4. O，再用注射用水將其總量補(bǔ)充到IOOmL,有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌15分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。實(shí)施例9 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A將0. 25克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑溶于以體積計(jì)60%所述注射用水，得到ー種水溶液，把所述水溶液加到75克a -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(體積比3. 5 :4)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B在溫度55°C下往步驟A得到的混合液中依次加入MgO絡(luò)合劑和20克以多西環(huán) 素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為1.0 :1 ;攪拌均勻；再使用鹽酸與こ醇胺PH調(diào)節(jié)劑將其pH調(diào)節(jié)至4. 5，直至得到ー種黃色透明液體；C另取0. 25克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑與0. 02克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于以體積計(jì)40%所述注射用水，把其溶液再加到步驟B得到的透明液體中，混勻后，降至室溫，用所述pH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至3. 9，再用注射用水將其總量補(bǔ)充到IOOmL,有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌15分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。實(shí)施例10 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下A、將0. 29克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑、4. 0克泊洛沙姆188水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于以體積計(jì)75%所述注射用水，得到ー種水溶液，再把所述的水溶液加到48克a -吡咯烷酮有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、然后，在溫度58°C下往步驟A得到的混合液中依次加入MgCL2 6H20絡(luò)合劑和15克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. 6 :1 ;攪拌均勻；再使用鹽酸與こ醇胺PH調(diào)節(jié)劑將其pH調(diào)節(jié)至3. 5，直至反應(yīng)體系呈黃色透明；C、另取0. 16克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑與0. 01克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于以體積計(jì)25%所述注射用水，把其溶液再加到步驟B得到的透明液體中，混勻后，再用所述的PH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至3. 8，用注射用水將其總量補(bǔ)充到100ml，接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用蒸汽滅菌20分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。實(shí)施例11 :制備獸用鹽酸多西環(huán)素注射液其實(shí)施步驟如下Ajf 0. 4克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑溶于以體積計(jì)50%所述注射用水，得到ー種水溶液，再把所述的水溶液加到76克聚こニ醇400和ニ甲基こ酰胺(體積比5 :2. 6)復(fù)合有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液；B、然后，在溫度62°C下往步驟A得到的混合液中依次加入MgSO4絡(luò)合劑和22克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. 2 1 ;攪拌均勻；再使用所述的PH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至5. 0，直至反應(yīng)體系呈黃色透明；C、另取0. 4克甲醛合次硫酸氫鈉抗氧劑和0. 05克EDTA_2Na金屬離子螯合劑溶于以體積計(jì)50%所述注射用水，把其溶液再加到在步驟B得到的透明液體中，混勻后再使用所述的PH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)至4. 5，用注射用水將其總量補(bǔ)充到100ml，接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽滅菌30分鐘，得到本發(fā)明的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。試驗(yàn)實(shí)施例試驗(yàn)實(shí)施例I :反應(yīng)溫度試驗(yàn)
權(quán)利要求
1.一種獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的注射液每IOOml含有以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素15 25克；鎂離子化合物絡(luò)合劑，它與多西環(huán)素的摩爾比為l.(Tl.8 :1 ；抗氧劑O. 25 I. O克；EDTA-2Na金屬離子螯合劑IO. θΓθ. 05克；水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑I. (Γ5. O克；有機(jī)溶劑45 80克；pH 值3. 0-5. O ；殘氧量，以所述注射液總體積計(jì)〈3% ；注射用水，它的量為使所述注射液總量達(dá)到IOOml的量。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的注射液每IOOml含有以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素If 22克；鎂離子化合物絡(luò)合劑，它與多西環(huán)素的摩爾比為l.(Tl.6 :1 ；抗氧劑O. 3^0. 8克；EDTA-2Na金屬離子螯合劑O. 02 O. 05克；水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑2. (Γ4. O克；有機(jī)溶劑5(Γ70克；pH 值3. 9-4. 5 ；殘氧量，以所述注射液總體積計(jì)く 1% ；注射用水，它的量為使所述注射液總量達(dá)到IOOml的量。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的抗氧劑是一種或兩種選自甲醛合次硫酸氫鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或維生素C的抗氧劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的鎂離子化合物絡(luò)合劑是MgCL2 · 6H20、MgO或MgSO4。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的有機(jī)溶劑是ー種或兩種選自α-吡咯烷酮、丙ニ醇、ニ甲基こ酰胺、聚こニ醇■和聚こニ醇2。。的有機(jī)溶剤。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑是聚こ烯吡咯烷酮PVPK17、聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl、泊洛沙姆188或泊洛沙姆 407。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液，其特征在于所述的pH調(diào)節(jié)劑是鹽酸和/或こ醇胺。
8.—種權(quán)利要求I或2所述獸用鹽酸多西環(huán)素注射液的制備方法，其特征在于所述制備方法的步驟如下A、將O.25^1. O克抗氧劑和I. (Γ5. O克水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑溶于注射用水中，或者將O. 25^1. O克抗氧劑溶于注射用水中，得到ー種水溶液，移取以體積計(jì)6(Γ75%所述水溶液，加到45 80克有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液； B、往步驟A得到的混合液中依次加入鎂離子化合物絡(luò)合劑和15 25克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 8 :1 ;然后在溫度5(T65°C下用pH調(diào)節(jié)劑將其混合液的PH值調(diào)節(jié)至3. 0-6. 0，接著攪拌直至得到ー種黃色透明液體； C、然后，在溫度50 65°C下保溫5 20分鐘；再往其中加入0. 01 0. 05克EDTA_2Na金屬離子螯合劑與以體積計(jì)25 40%步驟A的水溶液，溶解混勻后再使用pH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至3. (T5. 0 ;接著用注射用水加至總量IOOmL,進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在以所述注射液體積計(jì)3%以下，然后用流通流通蒸汽滅菌，得到所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。
9. 一種權(quán)利要求I或3所述獸用鹽酸多西環(huán)素注射液的制備方法，其特征在于所述制備方法的步驟如下 A、將0.25 I. 0克抗氧劑的50-75%單獨(dú)或與I. 0^5. 0克水溶性高分子化合物穩(wěn)定劑一起溶于以體積計(jì)5(T75%所述注射用水中，得到ー種水溶液，再把所述的水溶液加到45 80克有機(jī)溶劑中，混合均勻得到ー種混合液； B、然后，在溫度5(T65°C下往步驟A得到的混合液中依次加入鎂離子化合物絡(luò)合劑和15 25克以多西環(huán)素計(jì)的鹽酸多西環(huán)素，其絡(luò)合劑與多西環(huán)素的摩爾比為I. (Tl. 8 1 ;攪拌均勻；再用PH調(diào)節(jié)劑將其pH調(diào)節(jié)至3. (T6. 0，直至反應(yīng)體系呈黃色透明； C、另取余下的抗氧劑與0.oro. 05克EDTA-2Na金屬離子螯合劑溶于余下一部分注射用水中，把其溶液再加到步驟B的反應(yīng)體系里，混勻后，用pH調(diào)節(jié)劑將其pH值調(diào)節(jié)至.3. (T5. 0，再用注射用水將其總量補(bǔ)充到100ml，接著進(jìn)行有機(jī)濾膜過(guò)濾，收集濾液，充氮?dú)夥盅b，將其殘氧量控制在以所述注射液體積計(jì)3%以下，然后用蒸汽滅菌，得到所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種獸用高濃度長(zhǎng)效鹽酸多西環(huán)素注射液及其制備方法。該方法包括將適量抗氧劑和穩(wěn)定劑溶于注射用水中，然后把其水溶液加到有機(jī)溶劑中，再加入鹽酸多西環(huán)素和絡(luò)合劑，調(diào)節(jié)pH，保溫，接著加入金屬離子螯合劑和部分抗氧劑，然后過(guò)濾、充氮?dú)?、滅菌，得到所述的獸用鹽酸多西環(huán)素注射液。本發(fā)明制備的多西環(huán)素注射液安全、穩(wěn)定、半衰期長(zhǎng)約30~39h，延長(zhǎng)了藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間，減少了給藥次數(shù)和使用量，提高了治療效果和效率，在獸醫(yī)臨床上將有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61K31/65GK102772360SQ20121030097
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月22日
發(fā)明者孫雷, 張聰敏, 張?bào)P, 徐倩, 徐士新, 徐秉恩, 朱明文, 朱馨樂(lè), 畢言峰, 汪霞, 王亦琳, 胡海燕, 黃耀凌 申請(qǐng)人:中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所