專(zhuān)利名稱(chēng)：一種金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于納米醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種金針菇留醇提取物微乳制劑。
背景技術(shù)：
金針燕(Flammulina velutipes (ff. Curt. :Fr.) Singer)，又名金錢(qián)菌、樸蕈、冬燕、毛柄金錢(qián)菌，屬真菌門(mén)(Eumycota),擔(dān)子菌亞門(mén)(Basidiowyeotina),層菌綱(Hymenomycetes)，傘菌目(Agaricales), 口蘑科(Tricholomataceae),小火焰菌屬(Flammulina)、或金錢(qián)菌屬(Collybia),是古今中外著名的食用菌之一 i郭美英主編，《中國(guó)金針菇生產(chǎn)》，北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000.)。金針菇富含糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、膳食纖維和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。近些年來(lái)，學(xué)者們已從
金針菇中分離得到許多種蛋白質(zhì)和多糖類(lèi)活性物質(zhì)，這些物質(zhì)具有抗腫瘤，抗病毒，抗蟲(chóng)，抗真菌，抗人的免疫缺陷病毒(HIV)，降低血清膽固醇，降低血壓，提高機(jī)體免疫力，以及保護(hù)肝臟等廣泛藥理活性。已經(jīng)報(bào)道的蛋白質(zhì)類(lèi)成分主要包括真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白，金針菇毒素，火 素，火燕蛋白原，酶，凝集素，以及Flammulin、Velutin、Flammin和Velin等四種核糖體失活蛋白等。多糖類(lèi)成分包括PA3DE、PA5DE, EA3> EA5, EAf^P EA7, SFAl, FVP2，胞外多糖，盧-葡聚糖，木甘露聚糖以及甘露巖藻半乳聚糖等iYaqi Wang, Li Bao, XiaoliYang， e tc. Bioac ti ve sesqui terpenoids from the solid cul ture of the ediblemushroom flammulina velutipes growing on cooked rice[J]. Food Chemistry，2012，132(3): 1346-1353· Hui-Hsin Chang, Kuang-Yang Hsieh，Chen-Hao Yeh，etc·Oral administration of an enoki mushroom protein fve activates innate andadapt i ve immuni ty and induces anti-tumor activity against murine hepatocellularcarcinoma [J]· International Inmunopharmacology, 2010, 10: 239-246· ) 0除此之外，留醇、脂肪酸、黃酮、萜類(lèi)以及核苷等小分子物質(zhì)也被從中發(fā)現(xiàn)。目前關(guān)于這些小分子物質(zhì)的生物活性報(bào)道主要集中在抗菌、抗氧化方面{方玉梅，張春生，譚萍，etc·金針菇黃酮類(lèi)化合物的抗氧化性作用[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2012f 33(3):15-18. V. Μ. Tereshina, A Si Memorskaya. Adaptation of flammulina velutipes tohypothermia in natural environments the role of lipids and carbohydrates [J]·Microbiology，2005，74(3): 279-283. ) 0留醇(Sterol)是一類(lèi)重要的三職類(lèi)(Triterpenes)化合物,它們廣泛存在于植物，動(dòng)物和真菌當(dāng)中。根據(jù)來(lái)源不同，留醇可分為動(dòng)物留醇和植物留醇(Plant sterols,PS)。膽固醇是動(dòng)物體內(nèi)的主要甾醇，其中游離膽固醇有穩(wěn)定細(xì)胞膜的作用。植物甾醇是植物細(xì)胞膜的重要組成部分，與膽固醇類(lèi)似，自由植物留醇有助于穩(wěn)定植物細(xì)胞膜中的磷脂雙層，它們結(jié)構(gòu)與膽固醇相似，但在C-24位有一個(gè)甲基或乙基基團(tuán)。在高等植物中，最常見(jiàn)的PS是豆甾醇(Stigmasterol)、盧-谷甾醇{β -sitosterol)和菜油甾醇(Campesterol),它們有一個(gè)共同特點(diǎn)是在甾核的C_5, 6位有一個(gè)雙鍵，這種植物留醇稱(chēng)為Phytosterols。在十字花科植物中主要存在另外一種甾醇-菜籽甾醇(Brassicasterol)。飽和PS,也稱(chēng)為植物甾燒醇(Phytostanols),是在甾核中沒(méi)有雙鍵的。在過(guò)去的15年里，植物留醇(PS)已經(jīng)被證明具有降低血清總膽固醇和低密度脂蛋白(LDL)膽固醇濃度的功效，被納入功能性食品的范疇。許多臨床研究顯示，Γ3克/天PS的劑量能夠顯著降低血漿LDL膽固醇的濃度。植物留醇還可用于輔助治療，與他汀類(lèi)藥物聯(lián)合使用的效果超過(guò)他汀類(lèi)藥物加倍劑量的效果?，F(xiàn)在已經(jīng)有40多個(gè)關(guān)于PS產(chǎn)品的專(zhuān)利，超過(guò) 15 個(gè) PS 產(chǎn)品行銷(xiāo)全世界{G. Garcia-Llatas, Μ. T. Rodriguez-Estrada.Current and new insights on phytosterol oxides in plant sterol-enrichedfoodfjj. Chem Phys Lipids, 2011, 164(6): 607-624. ) 關(guān)于植物甾醇降低膽固醇作用的確切機(jī)制尚不清楚，目前認(rèn)為存在以下幾種可能(I)由于植物留醇比膽固醇具有更強(qiáng)的疏水性，因此植物留醇可以取代膽固醇進(jìn)入混合微粒(Mixed micelles)中。這種取代作用使微粒中的膽固醇含量下降,從而減少膽固醇的吸收。(2)植物留醇可以減緩膽固醇在腸上皮細(xì)胞中的酯化速度。由于酯化后的固醇易于進(jìn)入乳糜微粒中，而未酯化的固醇則較難進(jìn)入乳糜微粒，因此植物留醇可以減少乳糜
微粒中膽固醇的總量。(3)植物甾醇可能通過(guò)ATP結(jié)合盒(ATP-binding cassette, ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)體家族影響膽固醇的吸收。ABCG作為ABC的一個(gè)亞族，其中兩個(gè)基因ABCG5和ABCG8與人體對(duì)甾醇的選擇性吸收有關(guān)，也與膽汁中固醇的分泌有關(guān){周曉星，蘇宜香.植物&醇降膽固醇作用的研究現(xiàn)狀[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，2007，34(2): 101-105·)。目前已經(jīng)從金針菇的子實(shí)體以及菌絲體中得到17種包括麥角留類(lèi)和豆留類(lèi)的甾醇化合物(2覽，24/ )-ergosta-7, 22-diene_3盧，5 σ，6 σ，9 σ -tetrol (I)，(22Ε, 24/P)-ergosta-7, 22-diene_3β ,5 α ,ββ -triol (2), (245) -ergosta-7-ene-3β ,5a ,ββ -triol (3), 5 σ , 8 σ -epidioxy- (22/ , 2AR) -ergosta-6, 22-diene_3/ _ol (4) , 5 σ , 8 σ -epidioxy- (2451) -ergost-6-ene~3β _ol (5), (22/ , 24/P) -ergosta-5, 7, 9(11), 22-tetraene-3/ -oI (6), (2451) -ergosta-7-ene-3β ~o\ (7), ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -ol (8)，ergosterol (9), ergosta-5, 7-diene-3/ -oI (10)，ergosta-7, 22-diene_3/ _ol (11)，ergosta-30 -D-glucopyranoside (12), ergosta-7, 22-diene_5，6-epoxy-3_ol (13),5 a -stigmastan-3, 6-dione (14)，(24/P) -stigmast-4-ene-3_one (15)，ergosta-4, 6, 8 (I4), 22-tetraene-3-one (16), ergosta-8(14)-ene~3β -ol (17)。上述的化合物9 (ergosterol,麥角甾醇)是金針燕所含甾醇類(lèi)物質(zhì)的主要成分之一，在植物界也廣泛存在，其抗腫瘤活性已經(jīng)得到了多次實(shí)驗(yàn)的證實(shí)，作用機(jī)制亦部分被揭示。Takaku等從姬松鸞中分離出ergosterol,400和800 mg *kg_1的劑量連續(xù)20 d 口服給予肉瘤180小鼠，可以顯著抑制腫瘤的生長(zhǎng)，而且還沒(méi)有化療藥物通常所引起的如體重、附睪脂肪組織、胸腺、脾臟重量和白細(xì)胞數(shù)降低等副作用。進(jìn)一步研究表明，ergosterol能夠直接抑制基底膜誘導(dǎo)的新生血管形成，因此它是通過(guò)直接抑制實(shí)體瘤誘導(dǎo)的血管生成來(lái)發(fā)揮抑瘤活性的{Takeshi Takaku, Yoshiyuki Kimura, Hiromichi Okuda. Isolation of anan ti tumor compound from agari cus blazei muri 11 and its mechanism of action [J].Biochemical and Molecular Action of Nutrients, 2001，131 (5): 1409-1413·、。Yazawa等從Polyporus醇提物中分離出ergosterol,它對(duì)5%糖精鈉(SodiumSaccharin)、0. 01%N- 丁基-N- (4-羥基丁基)亞硝胺(BHBN)、3%DL-色氨酸(Trp)、2%丁基化羥基苯甲醚(BHA)等誘導(dǎo)的Wistar大鼠膀胱癌，有很好的治療作用iYasuharuYazawa, Masami Yoko ta, Kiyoshi Sugiyama. An ti tumor promo ting effect of an activecomponent of polyporus, ergosterol and re la ted compounds on rat urinary bladdercarcinogenesis in a short-term test with concana valin A[J], Bi ol. Pharm. Bull.,2000, 23(11): 1298-1302.)。P21是細(xì)胞周期素依賴(lài)性激酶抑制因子(Cyclin-dependent kinase inhibitor,CDKI )的一種，屬于細(xì)胞周期負(fù)性調(diào)節(jié)因子，它可通過(guò)抑制細(xì)胞周期素依賴(lài)性激酶(Cyclin-dependent kinase, CDK) CDK2、CDK4的活性，使細(xì)胞不能跨越G期檢查點(diǎn)，從而阻滯細(xì)胞周期的進(jìn)行，抑制細(xì)胞增殖，是腫瘤預(yù)防和治療一個(gè)靶點(diǎn)。張嫻等發(fā)現(xiàn)ergosterol在5(Γ200 μ gmr1可以抑制!fepG2細(xì)胞增殖，機(jī)制可能與增高Ρ21 mRNA和蛋白表達(dá)相關(guān)。在 ergosterol 作用 48 h 和 72 h 后，100、200 μ g *mL 1 組 P21 mRNA 的表達(dá)明顯增高。24h后P21蛋白已經(jīng)有升高趨勢(shì),48 h、72 h后明顯升高,提示P21可能是 ergosterol的作用靶點(diǎn)。{張嫻，黃羽’曾星·麥角留醇對(duì)肝癌細(xì)胞H印G2增殖及P21表達(dá)的影響[J].中藥藥理與臨床，2011，27(5): 26-29.)
高虹等人采用小鼠S180移植瘤實(shí)驗(yàn)研究了巴西燕子實(shí)體中ergosterol的體內(nèi)抗腫瘤活性。結(jié)果表明，巴西燕子實(shí)體中提取的ergosterol在劑量10、50和100 mg · kg—1 · cf1時(shí)的瘤重抑制率分別為62. 75%,76. 61%和79. 18%，說(shuō)明ergosterol有較強(qiáng)的抑瘤活性，并且認(rèn)為其抑瘤活性不是通過(guò)直接作用于腫瘤細(xì)胞發(fā)揮，而是通過(guò)抑制腫瘤血管增生來(lái)扼殺腫瘤{高虹，史德芳，楊德，etc.巴西菇麥角甾醇抗腫瘤活性及作用機(jī)理初探[J].中國(guó)食用菌，2011, 30(6): 35-39. ) 然而，室溫條件下游離的植物留醇在水和油中的溶解度均很小，在人體內(nèi)的吸收率亦很低，約為 2% 5% {I. Rudkowska. Plant sterols and stanols for heal thyageing [J]· Matur itas, 2010，66(2): 75 -似.)。為了擴(kuò)寬植物甾醇的應(yīng)用范圍，提高其溶解度是當(dāng)務(wù)之急。目前主要有兩種方法，其一是利用留核上重要的活性基團(tuán)——C-3位羥基，可與脂肪酸化合形成留醇酯，植物留醇酯比游離植物留醇在油中的溶解度增加約10倍；其二是利用乳化劑的乳化增溶作用和高壓均質(zhì)技術(shù)，使植物留醇在水相中分散成納米級(jí)的分散體，增加它的溶解度。微乳(Microemulsion)是由水相、油相、兩親性物質(zhì)混合形成的光學(xué)各向同性和熱力學(xué)穩(wěn)定的單一液體溶液。微乳作為一種新型藥物載體，其液滴一般介于10 100nm,具有增加難溶性藥物的溶解度，提高藥物生物利用度，保護(hù)易失活、易水解藥物的活性，控制藥物釋放等特點(diǎn)，同時(shí)還可以被運(yùn)用于口服、注射、透皮和眼部等多種給藥途徑，已經(jīng)在藥學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛的研究與應(yīng)用{Cai-Xia He, Zhong-Gui He, Jian-Qing Gao.Microemulsions as drug deli very systems to improve the so Iubi Ii ty and thebi oa vai Iabi Ii ty of poorly soluble drugs [J], Expert opinion on drug deli very20W， 7(4): 445-460. M· Jayne Lawrence, Gareth D. Rees. Mi croemulsi on -basedmedia as novel drug deli very systems [J]. Advanced Drug Deli very Reviews, 2000，45: 89-121. ) o微乳配方常見(jiàn)的輔料有油相包括中鏈的(比如椰子油和棕櫚油)或長(zhǎng)鏈的(比如大豆，芝麻，玉米，橄欖油，花生油，菜籽油，氫化植物油和大豆油)植物油；藥學(xué)上可接受的離子/非離子表面活性劑(Cremophore EL，RH40或RH60，D-α -生育酚聚乙二醇1000 玻拍酸酯，Tween 20 或 80, Span 20, poloxamer 407,各種 Labrasols , Labrafils 和Gelucires )和磷脂(氫化大豆磷脂，二硬脂酰磷脂酰甘油，L-α -十四?；字Ｄ憠A，L-α-十四酰基磷脂酰甘油)；有機(jī)溶劑(比如聚乙二醇300，丙二醇，乙醇，甘油)。金針菇留醇提取物是將金針菇子實(shí)體粉碎后用醇溶液提取，通過(guò)濃縮、萃取、皂化反應(yīng)、結(jié)晶等步驟得到的不皂化物。研究證明，該提取物具有體外抑制人肝癌細(xì)胞(HepG2)、人胃腺癌細(xì)胞(SGC)、人膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U251)和人肺腺癌細(xì)胞(A549)等腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的活性，可用于制備抗腫瘤藥物(參見(jiàn) .金針菇中具有抗腫瘤作用的不皂化提取物及其制法和用途[P],專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?-CN201110364098. 5、。它主要包含ergosterol,22, 23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene~3-ol 和 ergost-8 (14) -ene-3β -οI等四種成分。它易溶于乙醚、氯仿以及熱乙醇等有機(jī)溶劑，室溫下極難溶于水和油，具備植物甾醇的一般性質(zhì)。目前尚未有以金針菇留醇提取物為原料藥，制備成微乳制劑，以達(dá)到提高該提取物溶解度和生物利用度的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種金針菇留醇提取物的微乳制劑，將難溶于水的金針菇甾醇提取物制備成微乳制劑，提高它的溶解度，改善它在體內(nèi)的生物利用度極低的缺點(diǎn)。本發(fā)明的另一目的是提供這種金針菇留醇提取物微乳制劑的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，它是以金針菇不皂化提取物留醇作為原料藥，采用表面活性劑、助表面活性劑、油相和蒸餾水組成的混合物作為藥物載體，具體的是它包括以下組分0. 01°/Γ %的金針菇不皂化提取物留醇、10°/Γ40%的表面活性劑、3°/Γ20%的助表面活性劑、1°/Γ10%的油相、409Γ80%的分散介質(zhì)組成，所述的金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑的粒徑在10-50nm之間。所述的金針菇不皂化提取物甾醇是將金針菇子實(shí)體用醇溶液提取，通過(guò)濃縮、萃取、皂化反應(yīng)、結(jié)晶等步驟得到(參見(jiàn)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朇N 201110364098.5)。它主要包括 ergosterol,22，23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -οI 和ergost-8 (14)-ene-3盧-οI等四種成分,其中前面二種成分含量較高。所述的表面活性劑是脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物中任意一種或者它們的混合物。所述的脂肪酸山梨坦是司盤(pán)20、司盤(pán)40、司盤(pán)60、司盤(pán)65、司盤(pán)80、司盤(pán)85的任意一種或者它們的混合物。所述的聚山梨酯是吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫65、吐溫80或吐溫85的任意一種或者它們的混合物。所述的聚氧乙烯脂肪醇醚是芐澤30、芐澤35、芐澤72、芐澤92、西土馬哥、平平加
O、聚氧乙烯蓖麻油或聚氧乙烯氫化蓖麻油的任意一種或者它們的混合物；
所述的聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物是泊洛沙姆124、泊洛沙姆188、泊洛沙姆237、泊洛沙姆338或泊洛沙姆407的任意一種或者它們的混合物。所述的助表面活性劑是乙醇、異丙醇、1，2_丙二醇、甘油、聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400或聚乙二醇600中的任意一種或者它們的混合物。所述的油相為植物油或中等脂肪鏈長(zhǎng)度的肪酸酯中的任意一種。
所述的植物油是大豆油、菜籽油、麻籽油、玉米油、花生油、紅花油、橄欖油、棕櫚油或葵花籽油的任意一種或者它們的混合物。所述的中等脂肪鏈長(zhǎng)度的脂肪酸酯是油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、辛酸甘油單酯、辛酸甘油二酯、辛酸甘油三酯、葵酸甘油單酯、葵酸甘油二酯、葵酸甘油三酯或辛葵酸甘油酯中的任意一種或者它們的混合物。一種制備上述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑的方法，其特征是包括以下步驟
(1)按上述配方的組成和比例稱(chēng)取金針菇不皂化提取物留醇、表面活性劑和油相，在超聲條件下促使金針菇不皂化提取物留醇溶解；
(2)再加入所述量的助表面活性劑，磁力攪拌下混勻，并且使得金針菇不皂化提取物留醇進(jìn)一步溶解完全；
(3)最后緩慢加入所述量的蒸餾水，邊滴加邊攪拌，直至形成均勻、透明的溶液，即得所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑。本發(fā)明所述的一種含有金針菇甾醇的微乳制劑，可制成膠囊、軟膠囊、口服液等劑型，也可進(jìn)一步用任意比例的水分稀釋成穩(wěn)定的任意濃度的納米乳，并制成各種相應(yīng)的劑型。本發(fā)明所選用的表面活性劑、助表面活性劑、油相均為藥劑學(xué)上廣泛應(yīng)用的藥用輔料，具有無(wú)毒、無(wú)刺激性的特性。本發(fā)明選用的表面活性劑為非離子表面活性劑，具有毒性低、生物相容性好的優(yōu)點(diǎn)，是制備口服及注射用微乳的主要輔料。本發(fā)明采用的油相均可食用，無(wú)毒無(wú)刺激，因此采用這些藥用輔料和本發(fā)明制備方法得到的微乳制劑具有安全的特點(diǎn)。有益效果
本發(fā)明具有以下的有益效果
1、本發(fā)明解決了金針菇不皂化提取物留醇溶解度低的問(wèn)題，極大地增大藥物的溶解度，提高了藥物的生物利用度；
2、本發(fā)明采用的配方和方法簡(jiǎn)單可行，無(wú)需特殊設(shè)備，便于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。


圖I為實(shí)施例I制備的金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑的透射電鏡照片(X500k)。圖2為實(shí)施例I制備的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑的粒徑分布圖。圖3為實(shí)施例4制備的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑平均血藥濃度-時(shí)間曲線圖(n=5)。
具體實(shí)施例方式 以下所列實(shí)施例有助于本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例I金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑
(1)在燒杯中按下表稱(chēng)取金針燕不阜化提取物留醇，聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)，辛癸酸甘油酯，在超聲條件下促使金針菇不皂化提取物留醇溶解；
(2)再加入表中的乙醇，磁力攪拌下混勻，并且使得金針菇不皂化提取物留醇進(jìn)一步溶解完全；
(3)最后緩慢加入表中的蒸餾水，邊滴加邊攪拌，直至形成均勻、透明的溶液，即得金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑。體系最終體積為30 mL,藥物濃度為O. 68 mg經(jīng)測(cè)定，實(shí)施例I制備的金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑的平均粒徑為22. 9 nm。
權(quán)利要求
1.一種金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是它是以金針菇不皂化提取物甾醇作為原料藥，采用表面活性劑、助表面活性劑、油相和蒸餾水組成的混合物作為藥物載體，具體的是它包括以下組分0. 019Tl%的金針菇不皂化提取物留醇、109Γ40%的表面活性劑、3°/Γ20%的助表面活性劑、1°/Γ10%的油相、40°/Γ80%的分散介質(zhì)組成，所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑的粒徑在10-50nm之間，所述的金針菇不皂化提取物留醇是將金針菇子實(shí)體用醇溶液提取，通過(guò)濃縮、萃取、皂化反應(yīng)、提取和結(jié)晶步驟得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的表面活性劑是脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物中任意一種或者它們的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的脂肪酸山梨坦是司盤(pán)20、司盤(pán)40、司盤(pán)60、司盤(pán)65、司盤(pán)80、司盤(pán)85的任意一種或者它們的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的聚山梨酯是吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫65、吐溫80或吐溫85的任意一種或者它們的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的聚氧乙烯脂肪醇醚是芐澤30、芐澤35、芐澤72、芐澤92、西土馬哥、平平加O、聚氧乙烯蓖麻油或聚氧乙烯氫化蓖麻油的任意一種或者它們的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物是泊洛沙姆124、泊洛沙姆188、泊洛沙姆237、泊洛沙姆338或泊洛沙姆407的任意一種或者它們的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的助表面活性劑是乙醇、異丙醇、1，2-丙二醇、甘油、聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400或聚乙二醇600中的任意一種或者它們的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑，其特征是所述的油相為植物油或中等脂肪鏈長(zhǎng)度的脂肪酸酯中的任意一種。
9.所述的植物油是大豆油、菜籽油、麻籽油、玉米油、花生油、紅花油、橄欖油、棕櫚油或葵花籽油的任意一種或者它們的混合物；所述的中等脂肪鏈長(zhǎng)度的脂肪酸酯是油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、辛酸甘油單酯、辛酸甘油二酯、辛酸甘油三酯、葵酸甘油單酯、葵酸甘油二酯、葵酸甘油三酯或辛葵酸甘油酯中的任意一種或者它們的混合物。
10.一種制備權(quán)利要求I所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑的方法，其特征是包括以下步驟 (1)按權(quán)利要求I所述配方的組成和比例稱(chēng)取金針菇不皂化提取物留醇、表面活性劑和油相，在超聲條件下促使金針菇不皂化提取物留醇溶解； (2)再加入所述量的助表面活性劑，磁力攪拌下混勻，并且使得金針菇不皂化提取物甾醇進(jìn)一步溶解完全； (3)最后緩慢加入所述量的蒸餾水，邊滴加邊攪拌，直至形成均勻、透明的溶液，即得所述的金針菇不皂化提取物留醇的微乳制劑。
全文摘要
一種金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑，它是以金針菇不皂化提取物甾醇作為原料藥，采用表面活性劑、助表面活性劑、油相和蒸餾水組成的混合物作為藥物載體，具體的是它包括以下組分0.01%~1%的金針菇不皂化提取物甾醇、10%~40%的表面活性劑、3%~20%的助表面活性劑、1%~10%的油相、40%~80%的分散介質(zhì)組成，所述的金針菇不皂化提取物甾醇的微乳制劑的粒徑在10-50nm之間，所述的金針菇不皂化提取物甾醇是將金針菇子實(shí)體用醇溶液提取，通過(guò)濃縮、萃取、皂化反應(yīng)、提取和結(jié)晶步驟得到。本發(fā)明解決了金針菇不皂化提取物甾醇溶解度低的問(wèn)題，極大地增大藥物的溶解度，提高了藥物的生物利用度；本發(fā)明公開(kāi)了其制法。
文檔編號(hào)A61K36/07GK102872164SQ20121031496
公開(kāi)日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2012年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月30日
發(fā)明者徐希明, 易承學(xué), 余江南, 張輝云, 奚超群, 奉建芳 申請(qǐng)人:江蘇大學(xué)