專利名稱：枸杞葉總黃酮提取物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于枸杞葉的深度開發(fā)與應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種枸杞葉總黃酮提取物在制備具備降血壓、降血糖或降血脂功效的食品添加劑、保健品或藥品上的用途。二、技術(shù)背景枸杞)是爺科枸杞屬的多年生植物,分布于我國西北地區(qū)。枸杞葉俗稱天精草，在傳統(tǒng)中(藏)藥中主要具有補(bǔ)腎生精、養(yǎng)肝、明目安神等作用，《本草綱目》中稱枸杞葉“有除煩益志補(bǔ)五勞七傷，壯心氣，除熱毒，散瘡腫，除風(fēng)明目”之功效。據(jù)研究，枸杞葉的活性成分與枸杞果實(shí)基本一致，而且在某些營養(yǎng)元素上甚至超過枸杞果實(shí)。枸杞葉總黃酮提取物的藥理性質(zhì)的報(bào)道較少。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的枸杞葉總黃酮提取物的藥理活性僅僅停留在抗氧化活性的水平上。鄒耀洪等分離出了枸杞葉中的5種黃酮類化合物，分別為5，7，3’-三羥基-6，4’，5’-三甲氧基黃酮、金合歡素(4’-甲氧基-5，7-二羥基黃酮)、金合歡素-7-0-a-L-鼠李糖基(I— 6)-β-D-葡萄糖苷、木犀草素(5， 7，3’，4’ -四羥基黃酮)和蘆丁，這5種黃酮類化合物中木犀草素抗氧化的活性較強(qiáng)，優(yōu)于合成類抗氧化劑3，5-二叔丁基-4-羥基甲基苯(分析測試學(xué)報(bào)，2002，21 (I) : 76-78)。目前尚未發(fā)現(xiàn)枸杞葉總黃酮提取物具有降糖、降脂或者降壓作用的報(bào)道。高血脂癥(hyperlipidemia)是脂肪代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)異常使血衆(zhòng)一種或多種脂質(zhì)高于正常的病癥。高血脂癥是一種全身性疾病，指血中總膽固醇(TC)和/或甘油三酯(TG)過高或高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)過低，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為血脂異常。脂質(zhì)不溶或微溶于水，必須與蛋白質(zhì)結(jié)合以脂蛋白形式存在，因此，高血脂癥通常也稱為高脂蛋白血癥。高血脂是引起人類動脈粥樣硬化性疾病的主要危險(xiǎn)因素。像常見的動脈粥樣硬化性疾病有冠心病(包括心肌梗塞、心絞痛及猝死)、腦梗塞以及周圍血管血栓栓塞性疾病。這些心腦血管性疾病的發(fā)病率高，危害大，病情進(jìn)展兇險(xiǎn)，其死亡率約占人類總死亡率的半數(shù)左右。糖尿病(diabetes)是由遺傳因素、免疫功能紊亂、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各種致病因子作用于機(jī)體導(dǎo)致胰島功能減退、胰島素抵抗等而引發(fā)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，臨床上以高血糖為主要特點(diǎn)。糖尿病可導(dǎo)致感染、心臟病變、腦血管病變、腎功能衰竭、雙目失明、下肢壞疽等而成為致死致殘的主要原因。糖尿病高滲綜合癥是糖尿病的嚴(yán)重急性并發(fā)癥，初始階段可表現(xiàn)為多尿、多飲、倦怠乏力、反應(yīng)遲鈍等。隨著機(jī)體失水量的增加病情急劇發(fā)展，出現(xiàn)嗜睡、定向障礙、癲癇樣抽搐，偏癱等類似腦卒中的癥狀，甚至昏迷。高血壓(hypertensive disease)是一種以動脈血壓持續(xù)升高為主要表現(xiàn)的慢性疾病，常引起心、腦、腎等重要器官的病變并出現(xiàn)嚴(yán)重的后果。長期的高血壓可促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。冠狀動脈粥樣硬化會阻塞或使血管腔變狹窄，或因冠狀動脈功能性改變而導(dǎo)致心肌缺血缺氧、壞死而引起冠心病。高血壓患者的腦動脈如果硬化到一定程度時(shí)，會非常容易引起中風(fēng)。重癥高血壓患者的血壓超過了腦血流的自動調(diào)節(jié)范圍，腦組織因血流灌注過多而引起腦水腫。臨床上以腦病的癥狀和體征為特點(diǎn)，表現(xiàn)為彌漫性嚴(yán)重頭痛、嘔吐、意識障礙、精神錯(cuò)亂，嚴(yán)重的甚至?xí)杳院统榇?。在我國每年用于高血壓病治療的費(fèi)用高達(dá)366億元，高血壓病已經(jīng)為家庭和國家?guī)砹顺林氐呢?fù)擔(dān)。目前還沒有關(guān)于枸杞葉總黃酮提取物在治療/預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品添加劑、保健品和藥品制備過程中應(yīng)用的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供上述枸杞葉總黃酮提取物在治療/預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品添加劑、保健品和藥品制備過程中的用途，使枸杞葉這種低廉的物品為人類防病治病以及身體的保健方面提供強(qiáng)大的物質(zhì)和技術(shù)支撐，造福于人類社會，把枸杞葉高效充分利用，經(jīng)濟(jì)和社會效益十分顯著。本發(fā)明的申請人于本發(fā)明的申請日同日申請了另一件“枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法”，該發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來的，其制備方法是用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之 一種或幾種的混合物作提取溶劑，以枸杞葉或其粉末提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配t匕，把配比后的枸杞葉或其粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏進(jìn)行分離純化得枸杞葉總黃酮提取物。分離純化方法有三種，它們分別為①采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物采用吸附樹脂對浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物；③用無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。技術(shù)方案是在進(jìn)行“枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法”的深入研究中，特別針對‘枸杞葉總黃酮提取物’的應(yīng)用進(jìn)行了大量地研究工作，研究找到了枸杞葉總黃酮提取物在治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品制備過程中作為添加劑使用的新用途，添加劑枸杞葉總黃酮提取物在治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品中的重量含量為O. 5-100%,也就是說添加劑枸杞葉總黃酮提取物在治療高血壓病、高血脂病、高血糖病的藥品中可不加其它任何東西直接使用，也可再添加其它東西作為治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品使用。本發(fā)明所提供的枸杞葉總黃酮提取物是指采用任何方法從植物枸杞葉中提取得到的，以黃酮類化合物作為主要成分(或主要功效成分)的提取物，該提取物中，黃酮類化合物的總重量之和占提取物總重量的1%-100%。所述的黃酮類化合物是指化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、花色素類、黃烷醇類、雙苯吡酮類、異黃酮類、查爾酮類、二氫查爾酮類、橙酮類、高異黃酮類的化合物以及它們與單糖或寡糖形成的衍生物。提取物中各種黃酮類化合物之間的含量比例可以與天然植物中的含量比例一致，也可以與天然植物中的含量比例不盡相同。本發(fā)明提供的以枸杞葉總黃酮提取物為添加劑制得的治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品可以是本身和藥學(xué)上可利用的載體和/或稀釋劑和輔料，呈片劑、糖衣片劑、丸劑、膠囊、注射劑、栓劑、膏劑、可被吸入使用的粉末制齊U、懸浮液、霜劑和軟膏形式。枸杞葉總黃酮提取物降脂實(shí)驗(yàn)
受試藥物三組不同質(zhì)量濃度的枸杞葉總黃酮提取物水分散液(HZH)。陽性對照藥血脂康膠囊，北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)，市售成品。動物SD大鼠，SPF級，雌雄各半，體重180_220g，青海省疾控中心提供。高脂飼料豬油12% ;膽固醇2% ;丙硫氧嘧啶O. 2% ；3號膽鹽O. 5% ;普通飼料粉85%。按以上各種成分的質(zhì)量比將各成分充分混合，再用 機(jī)器攪拌，壓成圓條狀顆粒，用Co6q輻照消毒后，于陰涼干燥處密封保存。化學(xué)試劑及檢測儀器乙醇，天津百世化工生產(chǎn)。AU5421全自動生化分析儀，奧林巴斯公司生產(chǎn)。BECKMAN 30低溫高速離心機(jī)，美國BECKMAN公司生產(chǎn)。萬分之一天平，德國梅特勒-托利多公司生產(chǎn)。實(shí)驗(yàn)方法每組10只動物，雌雄各半。除正常組外，其他各組均用高脂飼料代替正常飼料投喂，每天每只20g左右。正常組和模型對照組灌胃已消毒的自來水，其他組如表I所示灌胃相應(yīng)的濃度的藥物水分散液，灌胃量為lmL/100g大鼠體重。以上動物自造模開始，連續(xù)灌胃三周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一天晚上給最后一次藥并禁食，不禁水，次日上午麻醉之后，腹部主動脈采血，進(jìn)行血脂五項(xiàng)的檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用Origin 8. 5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、各組實(shí)驗(yàn)組大鼠的體重的變化 表I各組實(shí)驗(yàn)組大鼠的體重的變化
Ia別I第I天I第8天I第15天I第21天I第22天空腹
HZHlOOmg/Kg_192±16 207±17217±21225±24207±15
HZH200mg/Kg_193±14 5石±18五1±18 6±21204±14"
HZH300mg/Kg_191±12 元 ±16元6±22 5±22204±11"
血脂康組_193±13 Τ0 ±17五1±24互15±23206±14"
模型對照組_193±12 五1±19石~1±15j~ll±21206±13"
正常對照組|l92±13 |242±22**|266±31**|286±34**|251±28**
注#與模型組比較p〈0. 01
2、飼料消耗量
表2各組大鼠的飼料消耗量(N=10，單位g)
ial'jj飼料消耗總量j飼料平均消耗f
HZHlOOmg/Kg3367_336. 7_
HZH200mg/Kg3282328.2
HZH300mg/Kg3212321.2
血脂康組3495349. 5
模型對照組5石4343.4
正常對照組丨5234丨523.4
3、血脂檢驗(yàn)結(jié)果
表3大鼠血脂檢驗(yàn)結(jié)果(N=10,單位mmol/L)
組別I甘油三酯 I總膽固醇I高密度脂蛋白I低密度脂蛋白I極低密度脂蛋白
HZHlOOmg/Kg_0. 76±0. 56 8. 21±3. 87I. 11±0. 216. 79±2. 750. 76±0. 14_
HZH200mg/Kg ^ 0. 64±0. 4]_ 7. 76±3. 39I. 13±0. 43 5±1.810. 65±0. 16
HZH300mg/Kg _ 0. 67±0. 4$_ 7. 91 ±2. 710. 91±0. 21石「91±1.090. 63±0. 19
血脂康組_0.95±0.4~^18.6±7.032.49±1.12T .2±7.871.42±1.03
模型對照組| ·46±0·59 |23·8±8·43|2·87±1·76| 8·6±4·61| ·22±0·89
權(quán)利要求
1.一種枸杞葉總黃酮提取物的用途，其特征是枸杞葉總黃酮提取物在治療高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品制備過程中作為添加劑使用的新用途，添加劑枸杞葉總黃酮提取物在治療高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品中的重量含量為 O. 5 —100%。
2.一種枸杞葉總黃酮提取物的用途，其特征是枸杞葉總黃酮提取物在預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品制備過程中作為添加劑使用的新用途，添加劑枸杞葉總黃酮提取物在預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品中的重量含量為 O. 5 —100%。
全文摘要
本發(fā)明屬于枸杞葉的深度開發(fā)與應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種枸杞葉總黃酮提取物在制備具備降血壓、降血糖或降血脂功效的食品添加劑、保健品或藥品上的新用途。即枸杞葉總黃酮提取物在治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品制備過程中作為添加劑使用的新用途，添加劑枸杞葉總黃酮提取物在治療或預(yù)防高血壓病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和藥品中的重量含量為0.5—100%。優(yōu)點(diǎn)是首次發(fā)現(xiàn)枸杞葉總黃酮提取物具有降血糖、降血脂和降血壓活性的新用途，可給有以上病癥的病人新的治療選擇，本發(fā)明枸杞葉總黃酮提取物在治療或預(yù)防糖尿病、高血脂和高血壓的產(chǎn)品中的有效應(yīng)用，使枸杞葉資源得到高效充分利用。
文檔編號A61K127/00GK102836282SQ201210341970
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月17日
發(fā)明者梅麗娟, 江磊, 于瑞濤, 陶燕鐸, 陶德喜 申請人:青海紅鼎生物工程有限公司