專利名稱：酸漿有效部位群的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制劑領(lǐng)域，涉及一種中藥材的有效部位群的制備方法及應(yīng)用，具體地說是涉及酸漿的有效部位群的制備方法及其在降血糖藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著世界人口的老齡化，糖尿病已經(jīng)成為一種常見病、多發(fā)病，在工業(yè)發(fā)達(dá)國家其發(fā)病率呈上升趨勢。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界約有I. 5億糖尿病患者，80%為非胰島素依賴型糖尿病(2型)，其中我國約有3000萬。由糖尿病并發(fā)癥引起的死亡人數(shù)在發(fā)達(dá)國家已是繼心腦血管疾病、癌癥之后列第三位，引起了世界各國的高度重視，紛紛對糖尿病的發(fā)病機(jī)制、藥物防治等進(jìn)行研究。由于I型糖尿病病因已基本明確，只需補(bǔ)充胰島素即可，而2型糖尿病則較復(fù)雜，目前我國醫(yī)學(xué)界對其采取的是包括飲食療法、藥物治療與其它輔助療法的綜合治療措施。西藥雖然層出不窮，但不能從根本上解決問題，而且西藥治療具有一定的副作用及“治療失效”。中醫(yī)藥治療糖尿病歷史悠久，臨床經(jīng)驗(yàn)豐富，療效顯著，已成為近年來國內(nèi)外·研究熱點(diǎn)。中醫(yī)學(xué)對糖尿病的認(rèn)識(shí)與西醫(yī)不同，中醫(yī)強(qiáng)調(diào)整體觀，以陰、陽二者的變化反映疾病的本質(zhì)。正常機(jī)體是“陰平陽秘”，陰陽平衡，即機(jī)體內(nèi)環(huán)境維持穩(wěn)態(tài)，糖代謝也維持穩(wěn)定；并且中藥的毒副作用相對較小，病人可長期服用，這是西藥所不能比擬的獨(dú)特的優(yōu)勢。酸衆(zhòng)為爺科植物酸衆(zhòng)Physalisalkekengi L. var. franchetii (Mast. ) Makino的干燥宿萼或帶果實(shí)的宿萼。主要藥理作用有1、抗菌作用酸漿煎劑及其宿萼提取物均有抗菌作用。酸漿煎劑對宋氏桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、淋球菌、分枝桿菌有抑制作用。酸漿宿萼提取物，對金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌有抑制作用。2、強(qiáng)心作用酸漿醚溶性和水溶性成分對蛙心均有加強(qiáng)收縮的作用，而以前者的作用尤強(qiáng)，用量大時(shí)其心臟就在收縮期中靜止。對于家兔的心臟，二者共呈搏動(dòng)旺盛作用，并能引起微弱的血管收縮及血壓亢進(jìn)。服用酸漿過量時(shí)，就會(huì)發(fā)生中樞性麻痹及全身痙攣，造成呼吸靜止及心臟的擴(kuò)張期靜止等嚴(yán)重后果。3、鎮(zhèn)痛作用對酸漿鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，酸漿對不同理化性質(zhì)刺激引起的體表痛、內(nèi)臟痛、炎癥性疼痛和神經(jīng)源性疼痛的急性期和慢性期都有一定的鎮(zhèn)痛作用。酸漿的鎮(zhèn)痛機(jī)制中有阿片受體參與，但并不完全決定于阿片受體。4、降血糖作用在一定的劑量下，酸漿果實(shí)的水提液、帶果實(shí)的宿萼水提液及醇提液，具有明顯的抑制血糖升高作用。降血糖作用與劑量有密切關(guān)系，當(dāng)超過一定劑量時(shí)，反而會(huì)使血糖升高。5、抗癌作用1986年，Dornberger等人對酸楽;中的抗腫瘤成分進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，酸漿中的留體成分酸漿苦素具有多種體內(nèi)體外的抗癌活性，并有抵抗Hela癌細(xì)胞的作用。酸漿水提物在小鼠體內(nèi)具有抗歐利西氏癌細(xì)胞的活性，其主要原理可能是水提物可以阻斷檸檬酸循環(huán)。另有報(bào)道，酸漿甲醇提取物對小鼠髓磷脂類白血病細(xì)胞(MLcells)有抑制作用。6、興奮子宮和催產(chǎn)作用酸漿根素(Hystonin)可使家兔及大鼠的離體子宮肌肉發(fā)生緊張性的收縮，作用比腦垂體后葉素快而短，可用于催產(chǎn)，但酸漿根素注射于動(dòng)物，可表現(xiàn)大腦抑制，若大劑量應(yīng)用，可使呼吸麻痹死亡，這是宮磷酸激酶同功酶的活性會(huì)受到時(shí)間依賴性的抑制，并可使植入的卵細(xì)胞發(fā)育成胚胎的數(shù)目降低。8、其他作用酸漿果實(shí)中甘醇酸有利尿作用，國外有用其同屬植物的葉、果作為利尿劑的報(bào)道。酸漿的果實(shí)及宿萼有解熱作用；酸漿根中含有的打碗花素可作為葡萄糖苷酶的競爭性抑制劑。酸漿在臨床上有治療小兒上呼吸道炎癥的報(bào)道用100%的錦燈籠注射液肌肉注射，臨床觀察120例，全部患兒均有中同程度發(fā)熱，80%以上病例有咽痛癥狀及不同程度的扁桃體腫大，且有膿性滲出物。治療結(jié)果，顯效(于兩天內(nèi)體溫降至正常，臨床癥狀與咽部膿性滲出物消失)93例(77. 5%)，有效(于3-5天內(nèi)體溫降至正常，臨床癥狀與咽部膿性滲出物消失)20例(16. 7%)，無效(體溫與咽部膿性滲出物5天以內(nèi)均未好轉(zhuǎn)，癥狀無明顯變化)7例(5. 8%)。單項(xiàng)統(tǒng)計(jì)，80%以上的患者體溫可以在2天內(nèi)降至正常，90%以上的病例扁桃體分泌物及咽痛癥狀在3天內(nèi)消失。但扁桃體腫大僅8例于治療4天后略見縮小，其余均無明顯改變。專利申請?zhí)枮镃N98119025. I的專利公開了一種酸漿保健酒，其具有清咽利喉、減少咽喉刺激的作用，專利申請?zhí)枮镃N200410030860. 6的專利申請公開了酸漿和黃芩組合用于治療急性咽炎，專利申請?zhí)枮镃N200510016677. 5的專利公開了一種酸漿注射液，用于 治療咽炎、扁桃體腫大、發(fā)燒等癥。專利申請?zhí)枮镃N200510016675. 6的專利公開了一種酸漿腸復(fù)康膠囊，它是由酸漿籽和蜜炙甘草制備而成，僅僅用于治療痢疾、腸炎、結(jié)腸炎等癥。專利申請?zhí)枮镃N200810300310. X的專利公開了一種酸漿在制備治療消化道潰瘍及胰腺炎的藥物中的應(yīng)用。上述文獻(xiàn)及專利等，尚未見公開從酸漿中提取分離有效部位群的制備方法及其在降血糖藥物中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種酸漿的有效部位群。本發(fā)明的另一目的在于提供從酸漿中提取分離有效部位群的提取制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供該酸漿有效部位群制備成各種口服劑型和注射劑的制備方法。酸漿有效部位群提取物可與藥學(xué)上可接受的載體或其他適宜賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成口服給藥的劑型或非口服給藥的注射劑或其他劑型。本發(fā)明的又一目的在于提供該酸漿有效部位群在制備降血糖藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所用酸衆(zhòng)為爺科植物酸衆(zhòng)Physalis alkekengi L. var. franchetii(Mast. ) Makino的根、莖、葉、果實(shí)、宿萼或種子。酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于按以下步驟制備
(1)將酸漿用水或10 95%乙醇作為溶劑進(jìn)行提取，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為I 4小時(shí)，每次溶劑用量為藥材重量的3-15倍；合并提取液，過濾，濃縮至相對密度為
I.O I. 12 (60°C)的藥液；
(2)將步驟(I)得到的藥液用有機(jī)溶劑萃取，合并萃取液，濃縮，通過聚酰胺柱，以5%-95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，即得到總留體類有效部位；
(3)將步驟(2)萃取后剩余的水溶液揮盡溶劑，通過大孔吸附樹脂柱，用水洗脫，再用5%-95%的乙醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集醇洗脫液，濃縮干燥，即得到總黃酮有效部位；
(4)將步驟(3)大孔吸附樹脂吸附后的水液及水洗液合并，通過陰離子交換樹脂，用氨性乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，即得總有機(jī)酸有效部位；(5)將上述一種或兩種或三種有效部位提取物合并混勻，即為酸漿的有效部位群。本發(fā)明所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述步驟(2)所采用的大孔吸附樹脂為Ls-300大孔樹脂、LSA-21大孔樹脂、AB-8大孔樹脂、NKA大孔樹脂、DlOl大孔樹脂、NKA-9大孔樹脂、ADS-17大孔樹脂。本發(fā)明所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述步驟(3)所采用的陰離子交換樹脂為201X7強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂；D201、D296型大孔強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂；D301、D382型大孔弱堿苯乙烯系陰離子交換樹脂。本發(fā)明所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總留體類有效部位在酸漿有效部位群中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%-60%。所述的總留體類有效部 位主要含有酸衆(zhòng)苦素A (Physailin A);酸衆(zhòng)苦素B (Physailin B);酸衆(zhòng)苦素C (Physailin C);酸衆(zhòng)苦素 K (Physailin K);酸衆(zhòng)苦素 D (Physailin D);酸衆(zhòng)苦素 L (Physailin L);酸衆(zhòng)苦素 Q (Physailin Q);酸衆(zhòng)苦素 G (Physailin G);酸衆(zhòng)苦素 P (Physailin P); 4, 7-二脫氫新酸漿苦素B ;4，7- 二去氫一 7 —脫氧新苦味素L ;25，27-氫-4，7-脫氫新酸漿苦素A ；4，7-二脫氫新酸漿苦素B;異酸漿苦素B ;2，3-氫-酸漿苦素D ;酸漿醇A (Physanol A)；酸衆(zhòng)醇B(Physanol B);豆甾醇；禾本甾醇(Gramisterol);鈍葉醇(Obtusifoliol);膽甾醇；24_乙基膽留醇；環(huán)木菠蘿燒醇(Cycloartanol);環(huán)木菠蘿烯醇(Cycloartenol);羊毛酯-8-烯-3β-醇(Lanost-8-en-3b_ol) ;14α-甲基-5β- (11)烯膽甾醇。其中酸衆(zhòng)苦素類成分及其衍生物在總留體類有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%-90%。本發(fā)明所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總有機(jī)酸有效部位在酸漿有效部位群中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%-25%。所述的總有機(jī)酸有效部位主要含有草酸、枸櫞酸、咖啡酸、桂皮酸、阿魏酸、甘醇酸、抗壞血酸，其中甘醇酸在總有機(jī)酸有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%-20%。本發(fā)明所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總黃酮有效部位在酸漿有效部位群中的含量為30%-60%。所述的總黃酮有效部位主要含有木犀草素-7-0-β-D-匍萄糖苷；木犀草素-4，-O-β-D-匍匍萄糖苷；懈皮素-3-0-β-D-匍匍萄糖苷；懈皮素_7，3- 二 -O- β -D-匍匍萄糖苷；木犀草素7，3，-二 -O- β -D-匍匍萄糖苷；木犀草素7，4-二-O-β -D-葡葡萄糖苷；木犀草素；商陸素。其中木犀草素類成分在總黃酮有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%-60%。本發(fā)明的酸漿有效部位群，可以通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料，制成藥劑學(xué)上的各種劑型。本發(fā)明的酸漿有效部位群可用于預(yù)防和治療糖尿病。本發(fā)明是以為爺科植物酸衆(zhòng)Physalis alkekengi L. var. franchetii (Mast.)Makino為原料提取制備有效部位群。本發(fā)明首次探索研究并分離得到了酸漿具有降糖活性的有效部位群，即總留體有效部位、總有機(jī)酸有效部位、總黃酮有效部位，制備工藝操作簡便，生產(chǎn)成本低，適于工業(yè)化大生產(chǎn)。本發(fā)明制備降血糖的中藥制劑，質(zhì)量可控，療效確切，安全性高。建議臨床患者使用本發(fā)明酸漿有效部位群的劑量為O. 3-1. Og/次，一日三次。本發(fā)明提供的酸漿有效部位群，通過觀察對腹腔注射鏈脲霉素致小鼠高血糖的降糖作用，結(jié)果表明，酸漿有效部位群有較明顯的降糖作用。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對酸漿有效部位群的制備方法及藥理活性作進(jìn)一步詳述。實(shí)施例I :酸漿有效部位群的制備
將酸漿果20kg置提取罐中，加80%乙醇15倍量，提取二次，每次I小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，過濾，濃縮至相對密度為I. 10 (60°C)的藥液；用二氯甲烷萃取三次，每次用量與藥液量相同，合并二氯甲烷萃取液，回收溶劑至干,上聚酰胺柱,用30%乙醇洗脫3BV，60%乙醇洗脫3BV，合并洗脫液，濃縮干燥，得總萜類有效部位O. 62kg ;將二氯甲烷萃取后剩余的水溶液揮盡溶劑，通過LSA-21大孔吸附樹脂柱，用水洗脫3倍量樹脂柱體積(3BV)，再用30%乙醇洗脫3BV，70%乙醇洗脫2BV，合并醇洗脫液，濃縮干燥，得到總黃酮有效部位O. 35kg ;上述流出液和水洗液合并，通過D301大孔弱堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂，用水洗脫2BV，再用10%氨水乙醇洗脫3BV，收集醇洗脫液，濃縮干燥，得到總有機(jī)酸有效部位O. 67kg。實(shí)施例2 :酸漿有效部位群的制備
將酸漿宿萼20kg置提取罐中，加30%乙醇20倍量，提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，過濾，濃縮至相對密度為I. O (60°C)的藥液；用乙酸乙酯萃取三次，每次用量與藥液量相同，合并乙酸乙酯萃取液，回收溶劑至干，上聚酰胺柱，用10%乙醇洗脫3BV，80%乙醇洗脫3BV，合并洗脫液，濃縮干燥，得總萜類有效部位O. 52kg ;將乙酸乙酯萃取后剩余的水溶液揮盡溶劑，通過NKA大孔吸附樹脂柱，用水洗脫3倍量樹脂柱體積(3BV),再用20%乙醇洗脫3BV，90%乙醇洗脫2BV，合并醇洗脫液，濃縮干燥,得到總黃酮有效部位O. 45kg ;上述流出液和水洗液合并，通過201X7強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂，用水洗脫2BV，再用20%氨水乙醇洗脫2BV，收集醇洗脫液，濃縮干燥，得到總有機(jī)酸有效部位O. 50kg。實(shí)施例3 :酸漿有效部位群的制備
將酸漿根、酸漿莖、酸漿葉混合物IOkg置提取罐中，加水10倍量，提取3次，每次I. 5小時(shí)，合并提取液，過濾，濃縮至相對密度為I. 20 (60°C)的藥液；用環(huán)己烷萃取三次，每次用量與藥液量相同，合并環(huán)己烷萃取液，回收溶劑至干，上聚酰胺柱，用20%乙醇洗脫3BV，90%乙醇洗脫3BV，合并洗脫液，濃縮干燥，得總萜類有效部位O. 24kg ;將環(huán)己烷萃取后剩余的水溶液揮盡溶劑，通過ADS-17大孔吸附樹脂柱，用水洗脫3倍量樹脂柱體積(3BV)，再用30%乙醇洗脫3BV，70%乙醇洗脫2BV，95%乙醇洗脫2BV，合并醇洗脫液，濃縮干燥，得到總黃酮有效部位O. 26kg ;上述流出液和水洗液合并，通過D201強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹月旨，用水洗脫2BV，再用20%氨水乙醇洗脫2BV，收集醇洗脫液，濃縮干燥，得到總有機(jī)酸有效部位 O. 21kg。實(shí)施例4 :有效部位群中總黃酮有效部位中總黃酮的含量測定 采用紫外分光光度法測定本發(fā)明總黃酮有效部位中總黃酮的含量
對照品溶液的制備精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品15mg，置5ml量瓶中，加無水乙醇超聲使溶解，加無水乙醇至刻度，搖勻，精密吸取2. 5ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得(每Iml含O. 3mg)；
供試品溶液的制備取本品總黃酮有效部位提取物O. 2g，精密稱定，置25ml量瓶中，力口無水乙醇10ml，超聲處理5分鐘，加水12ml，超聲處理20分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻，離心(3000轉(zhuǎn)/分)5分鐘，精密吸取上清液I. 5ml，置25ml量瓶中，加水至6ml，搖勻，即得；標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對照品溶液I. 0,2. 0,3. 0,4. 0,5. 0,6. Oml至25ml量瓶中，加水至6ml搖勻，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液1ml，，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液IOml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘。精密吸取水6ml，至25ml量瓶中，按上法操作制得空白對照溶液。照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V B)，在505nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；測定法供試品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“加5%亞硝酸鈉”起依法制備，在505nm處測定吸收度，按標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中總黃酮含量，即得。本品每Ig含總黃酮以蘆丁計(jì)為620mg。實(shí)施例5:酸漿有效部位群片劑的制備
取上述各實(shí)施例中任一酸漿有效部位群305g，加入60g淀粉，混勻，制粒，過篩，加15g微晶纖維素，O. 5g硬脂酸鎂，混勻，壓制成1000片，即為本發(fā)明的片劑。實(shí)施例6 :酸漿有效部位群顆粒劑的制備
取上述各實(shí)施例中任一酸漿有效部位群305g，加入乳糖150g，糊精150g，制粒，整粒，過篩，制成顆粒lOOOg，即成本發(fā)明的顆粒劑。實(shí)施例7 :酸漿有效部位群的降糖作用觀察?！?br> I、試驗(yàn)?zāi)康?br> 觀察降糖樣品對腹腔注射鏈脲霉素致小鼠高血糖的降糖作用。2、試驗(yàn)材料 2. I藥品
供試品實(shí)施例一酸漿有效部位群。藥物配制取粉末IOOmg溶于20ml蒸餾水中；陽性藥降糖靈(苯乙雙胍片)，250 mg/片。使用時(shí)取降糖靈I片(250mg)，研碎，加水至 30mlο 鏈脲霉素(STREPTOZOCIN, STZ)，規(guī)格lg/ 瓶，批號(hào)015K1279, SIGMA 公司；稱鏈脲霉素192mg，試驗(yàn)前加預(yù)冷的O. Imol pH4. 4檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液至40ml(4. 8mg/ml),在冰浴中配制。以上藥品均為現(xiàn)用現(xiàn)配；
血糖(GLU)試劑盒，批號(hào)240711，由北京中生北控生物科技有限公司提供。2. 2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
雄性昆明種小鼠60只，體重24±lg。由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)SCXK (魯)20050017。2. 3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室條件
動(dòng)物飼養(yǎng)于普通級(jí)環(huán)境，溫度20 24°C，濕度40 70%，合格證號(hào)魯動(dòng)環(huán)字H2002120672。籠具蘇州新區(qū)楓橋凈化設(shè)備廠，許可證號(hào)SCXK (蘇)2002-0034。塊狀鼠飼料山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。SCXK (魯)20040014。2. 4主要儀器設(shè)備
強(qiáng)生穩(wěn)豪型血糖儀。KNOE PRO型全自動(dòng)生化分析儀，芬蘭康藝儀器公司。3、實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果
昆明種雄性小鼠70只，禁食14 h，隨機(jī)選10只鼠為正常對照組，其余60只小鼠快速腹腔注射鏈脲霉素120mg/kg，制備糖尿病模型，注射給藥容積為O. 5ml/20g。正常對照組腹腔注射等體積的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液。造模48小時(shí)后，注射鏈脲霉素小鼠均出現(xiàn)多飲、多尿、多食等糖尿病癥狀。隨機(jī)抽取5只，尾靜脈取血用血糖儀檢測空腹血糖，血糖值均高于11. 2 mmol/L，說明模型成功，隨后將60只小鼠按體重隨機(jī)分為6組，各組動(dòng)物灌胃給予相應(yīng)的藥物，正常對照及模型對照組給予等體積的飲用水，灌胃體積O. 5ml/20g小鼠，每日灌胃I次，連續(xù)灌胃8天。于給藥第8天，小鼠禁食2小時(shí)灌胃給藥，藥后I小時(shí)，各組小鼠摘眼球取血，用全自動(dòng)生化儀測定小鼠空腹血糖。檢測結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型組小鼠血糖水平明顯增高(P < O. 001),說明小鼠腹腔注射鏈脲霉素致糖尿病模型造模成功。降糖4個(gè)樣品組血糖值與模型組血糖值相比，均有較明顯的降糖作用。結(jié)果詳見表I。表I降糖樣品對鏈脲霉素致小鼠糖尿病血糖水平的影響(X土SD)
權(quán)利要求
1.酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于按以下步驟制備 (1)將酸漿用水或10 95%乙醇作為溶劑進(jìn)行提取，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為I 4小時(shí)，每次溶劑用量為藥材重量的3-15倍；合并提取液，過濾，濃縮至相對密度為I.O I. 12 (60°C)的藥液； (2)將步驟(I)得到的藥液用有機(jī)溶劑萃取，合并萃取液，濃縮，通過聚酰胺柱，以5%-95%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，即得到總留體類有效部位； (3)將步驟(2)萃取后剩余的水溶液揮盡溶劑，通過大孔吸附樹脂柱，用水洗脫，再用5%-95%的乙醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集不同濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得到總黃酮有效部位； (4)將步驟(3)大孔吸附樹脂吸附后的水液及水洗液合并，通過陰離子交換樹脂，用氨性乙醇洗脫，收集氨性乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得總有機(jī)酸有效部位； (5)將上述一種或兩種或三種有效部位提取物合并混勻，即為酸漿的有效部位群。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿，是以酸漿根、酸漿莖、酸漿葉、酸漿果實(shí)、酸漿宿萼或酸漿種子為原料藥。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述步驟(2)所采用的有機(jī)溶劑為石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、環(huán)己烷。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述步驟(3)所采用的大孔吸附樹脂為Ls-300大孔樹脂、LSA-21大孔樹脂、AB-8大孔樹脂、NKA大孔樹脂、DlOl大孔樹脂、NKA-9大孔樹脂、ADS-17大孔樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述步驟(4)所采用的陰離子交換樹脂為201X7強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂；D201、D296型大孔強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂；D301、D382型大孔弱堿苯乙烯系陰離子交換樹脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總留體類有效部位在酸漿有效部位群中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%-60% ;所述的總留體有效部位主要含有酸衆(zhòng)苦素 A (Physailin A);酸衆(zhòng)苦素 B (Physailin B);酸衆(zhòng)苦素 C (Physailin C)；酸衆(zhòng)苦素K (Physailin K);酸衆(zhòng)苦素D (Physailin D);酸衆(zhòng)苦素L (Physailin L);酸衆(zhòng)苦素 Q (Physailin Q);酸衆(zhòng)苦素 G (Physailin G);酸衆(zhòng)苦素 P (Physailin P); 4, 7-二脫氫新酸漿苦素B ;4，7- 二去氫一 7 —脫氧新苦味素L ;25，27-氫-4，7-脫氫新酸漿苦素A ；4，7-二脫氫新酸漿苦素B;異酸漿苦素B ;2，3-氫-酸漿苦素D ;酸漿醇A (Physanol A)；酸衆(zhòng)醇B(Physanol B);豆甾醇；禾本甾醇(Gramisterol);鈍葉醇(Obtusifoliol);膽甾醇；24_乙基膽留醇；環(huán)木菠蘿燒醇(Cycloartanol);環(huán)木菠蘿烯醇(Cycloartenol);羊毛酯-8-烯-3β-醇(Lanost-8-en-3b_ol) ;14α-甲基-5β- (11)烯膽甾醇；其中酸衆(zhòng)苦素類成分及其衍生物在總留體類有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%-90%。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總有機(jī)酸有效部位在酸漿有效部位群中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%-25% ;所述的總有機(jī)酸有效部位主要含有草酸、枸櫞酸、咖啡酸、桂皮酸、阿魏酸、甘醇酸、抗壞血酸，其中甘醇酸在總有機(jī)酸有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%-20%。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酸漿有效部位群的制備方法，其特征在于所述的總黃酮有效部位在酸漿有效部位群中的含量為30%-60% ；所述的總黃酮有效部位主要含有木犀草素-7-0-β -D-葡萄糖苷；木犀草素-4，-O- β -D-葡葡萄糖苷；槲皮素-3-0- β -D-葡葡萄糖苷；槲皮素-7，3- 二 -O- β -D-葡匍萄糖苷；木犀草素7，3，-二 -O-β -D-匍匍萄糖苷；木犀草素7，4-二 -O-β -D-匍匍萄糖苷；木犀草素；商陸素；其中木犀草素類成分在總黃酮有效部位中的含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%-60%。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的中藥制劑，其特征在于是由該酸漿有效部位群，通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料，制成藥劑學(xué)上的各種劑型。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的酸漿有效部位群在制備預(yù)防和治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酸漿的有效部位群的制備方法及其應(yīng)用。其制備方法是將酸漿提取后，通過聚酰胺、大孔樹脂、離子交換樹脂等色譜純化技術(shù)，得到總甾體類有效部位、總黃酮有效部位及總有機(jī)酸有效部位。將上述三種有效部位提取物的一種或兩種或三種合并混勻，即為酸漿的有效部位群。該酸漿有效部位群提取物，可與藥學(xué)上可接受的載體或其他適宜賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成口服給藥的劑型或非口服給藥的注射劑或其他劑型，可用于制備預(yù)防和治療糖尿病的藥物。
文檔編號(hào)A61P3/10GK102885937SQ201210369908
公開日2013年1月23日 申請日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
發(fā)明者孔倩倩 申請人:濟(jì)南星懿醫(yī)藥技術(shù)有限公司